Data: 21/12/2022

INS La Romànica
- 11/01/2023
CFGS (QUD0T): Laboratori d’Anàlisi i de Control de Qualitat
Pàgina 1 de 3
MP07: Assajos biotecnològics
UF1: Biologia molecular
Nom: Miriam Navarro, Joel Chávez y Mathiu Taipe Nota:
Pràctica 6: Extracció d’ADN plasmídic. Extracció del plasmidi pGLO
de colònies d’E. Coli K 12 mitjançant un kit comercial

1. DIAGRAMA DE FLUX
 Data: 21/12/2022
MP07: Assajos biotecnològics
- 11/01/2023
UF1: Biologia molecular Pàgina 2 de 3
Pràctica 6: Extracció d’ADN plasmídic. Extracció del plasmidi pGLO de colònies d’E. Coli
K 12 mitjançant un kit comercial

2. OBJECTIU
- Extreure el plasmidi pGLO de les colònies d’E. Coli mitjançant el kit comercial, KIT
GeneJET Plasmid (Miniprep Kit) FERMENTAS LIFE SCIENCES.

3. DADES EXPERIMENTALS I INTERPRETACIÓ DEL GEL

4. OBSERVACIONS EXPERIMENTALS

En el gel es pot observar que no pogut fer tot el recorregut per falta de temps això implica que
les línies del marcador molecular estiguin molt aprop impedint fer una lectura correcta de
l’extracció de l’ADN plasmidic.

5. CONCLUSIONS

La nostra mostra esta situada al pouet 15 on no es veu una gran quantitat d’ADN plasmidic en
la mostra i en comparació amb les altres mostres d’ADN no s’observa cap contaminant a la
mostra ja que només hi ha una banda per a un pes molecular determinat, el qual després es
podria veure quin és, si afegíssim al gel un gradient de pesos moleculars.
 Data: 21/12/2022
MP07: Assajos biotecnològics
- 11/01/2023
UF1: Biologia molecular Pàgina 3 de 3
Pràctica 6: Extracció d’ADN plasmídic. Extracció del plasmidi pGLO de colònies d’E. Coli
K 12 mitjançant un kit comercial

6. QÜESTIONS

1. Qué creus que pot passar si quedessin agregats?

No es veuria només una banda al gel, i podriem veure com a diferents altures del gel es
aparexerien altres bandes, cosa que també podria determinar el pes molecular, ja que
depenen el tamany de la molécula que passa per el gel es quedarà a una part del gel més
alta o més baixa, i sabent el pes molar de la nostra proteína podem saber quina de les
bandes seria la nostra, en cas de que hagués agreats

2. Per què no es pot utilitzar el vòrtex?

Ja que la gran velocitat d'agitació del vortex podria desnaturalitzar la nostra proteína,
que després de passar per el Lysis Buffer, es trobaria a una estructura primaria, la qual
consta d’enllaços més febles

3. Quins residus pot tenir la solució de rentat?

El rentat pot emportar se contaminants. També sobrants de la paret cel·lular i alguns

components de la cèl·lula restant després de passar el Lysis buffer.

4. Què passaria si es toca la membrana de la columna amb la punta de la pipeta?

Es podria contaminar la propia membrana al fer això, o fins i tot la podriem trencar.