Professional Documents
Culture Documents
HDSD Mupid Exu
HDSD Mupid Exu
Thanh an
Lỗ thông hơi
toàn
Gờ mở nắp
Điện cực
Platinium
Bồn điện di
Màn hình hiển thị hẹn giờ
Đèn LED
Bộ cấp nguồn
Bộ nguồn
Lược
Thanh phân
tách
b. Đổ gel
- Đặt khuôn gel lên bề mặt bằng phẳng. Tháo thanh phân tách khi sử dụng khay gel lớn.
Thanh phân
tách
- Đặt khay gel vào khuôn. Có thể đổ 2 gel đồng thời với khay 6cm.
Khay gel
.
- Cân lượng bột agarose cần thiết trong bình erlen và bổ sung dung dịch đệm (TBE hoặc
TAE 0.5X). Đun nóng dung dịch đã chuẩn bị cho đến khi agarose tan hoàn toàn.
- Để dung dịch gel agarose nguội xuống ít nhất 70oC trước khi đổ vào khuôn gel. Dung
dịch không đủ nguội có thể làm biến dạng thanh phân tách và khay gel.
- Chọn một trong hai loại lược (13 hoặc 26 răng) rồi lắp vào khuôn gel. Khoảng cách điện
di và số lượng mẫu phụ thuộc vào số lượng lược đã đặt.
Lược
Chấm tròn
Lưu ý: Khi cần lắp cùng lúc 4 lược, quan sát vị trí các chấm tròn để xác định khoảng
cách bằng nhau giữa các thang phân tách. Đặt lược vào khuôn sau khi đổ dung dịch gel
agarose để loại bỏ bong bóng.
- Đổ dung dịch gel agarose đã chuẩn bị vào khay gel.
Lưu ý: Cần khoảng 30 ml dung dịch để cho gel dày 4 mm trong khay có kích thước
nhỏ. Cần khoảng 60 ml dung dịch trong khay có kích thước lớn.
- Đẩy đáy khay gel bằng que thủy tinh để loại bỏ không khí bị kẹt bên dưới khay. Ngoài
ra kiểm tra xem có bọt khí trên bề mặt hoặc bên trong dung dịch gel không. Nếu có, hãy
loại bỏ chúng bằng pipet.
- Để dung dịch gel đông cứng trong khoảng 15 đến 20 phút ở nhiệt độ phòng. Có thể mất
nhiều thời gian hơn khi nồng độ gel thấp hơn.
- Tháo lược bằng cả hai tay bằng cách kéo nhẹ lược lên trên. Kiểm tra xem gel có được
đông đặc hoàn toàn trong giếng hình chữ nhật không và có bong bóng không.
- Giữ khay gel ở cả hai bên tại các rãnh của khuôn gel. Kéo khay lên trên.
Lưu ý: Để bảo quản gel, đặt gel trong khay có bổ sung dung dịch đệm và phủ toàn bộ gel
và khay bằng màng bảo vệ thực phẩm hoặc vật liệu tương tự khác tránh khô gel hoặc
nhiễm bẩn.
c. Vận hành
- Kết nối bộ nguồn với bộ điện di.
- Thêm khoảng 300 đến 350 ml dung dịch điện di (TAE hoặc TBE 0.5X) vào bồn điện di
đến khi gel ngập hoàn toàn trong dung dịch (khoảng vài mm trên bề mặt của gel).
Lưu ý: Cần khoảng 300-320 ml dung dịch đệm cho gel dày 4 mm trong khay 6cm hoặc
270 đến 290 ml cho gel dày 4mm trong khay 12cm.
- Dùng pipet hút một lượng mẫu mong muốn vào giếng. Có thể nạp tối đa 12 μl mẫu vào
mỗi giếng rộng 6 mm và 4 μl vào mỗi giếng rộng 2 mm.
- Đặt nắp bồn điện di vào bồn sao cho các thanh an toàn vừa khít vào khe hở của bộ
nguồn.
- Nhấn nút bật/tắt điện áp. Đèn LED màu đỏ sẽ sáng cho biết nguồn điện của hệ thống
đang bật. Ngoài ra, kiểm tra xem bong bóng khí có xuất hiện từ các điện cực hay không.
- Bồn điện di Mupid®-exU và khay gel được làm bằng nhựa cho phép truyền tia cực tím.
Do đó, các vạch điện di có thể được quan sát bằng cách chiếu trực tiếp các tia cực tím tới
mẫu đã được nhuộm màu huỳnh quang trước đó.
- Nếu gel hoặc mẫu chưa được nhuộm màu trước, tháo khay gel ra khỏi bồn điên di.
- Chuẩn bị dung dịch nhuộm trong bình chứa thích hợp. Đặt gel vào bình chứa sao cho nó
được ngâm hoàn toàn trong dung dịch đã chuẩn bị. Để gel ngâm trong dung dịch cho đến
khi dải được nhuộm đầy đủ để quan sát.
- Sau khi nhuộm xong, cẩn thận lấy gel ra khỏi bình chứa. Quan sát gel bằng cách sử
dụng thiết bị phát quang hoặc thiết bị nguồn ánh sáng thích hợp khác. Chọn bước sóng tối
ưu cho tác nhân nhuộm đang sử dụng.