A szívizom akciós potenciálja, és az azt

meghatározó ioncsatornák

Dr. Jost Norbert

SZTE, ÁOK
Farmakológiai és Farmakoterápiai Intézet

http://phcol.szote.u-szeged.hu/jegyzet/Electrofiziologia%20jegyzet.pdf
http://phcol.szote.u-szeged.hu/jegyzet/Course_of_electrophysiology.pdf
 Az ingerület vezetése a szívben

Szinusz csomó
(Keith és Flack)

Vezetési sebesség
(m/s)

AV csomótól a jelzett pontig

történő eléréshez
szükséges idő (ms)
Bovine Purkinje fibres system marked with ink
 Az akciós potenciál
INGERELHETŐSÉG
Trigger stimulus „Tipus” válasz
 „Akciós potenciál”
Feszültség küszöb
Öngeneráló mechanizmus

DEPOLARIZÁL
Na+-csatorna / Na+-áram extracelluláris térből

Ca-csatorna / Ca2+-áram intracelluláris térbe

REPOLARIZÁL
K+-csatornák / K+-áramok intracelluláris térből
100 ms
extracelluláris térbe

A nyugalmi diasztólés membrán potenciál helyreállítása

Az EKG és az akciós potenciál I.
Az EKG és az akciós potenciál II.
 REFRAKTERITÁS
ERP = Effektív Refrakter Periodus
Az a legrövidebb időtartam, amely ahhoz szükséges, hogy a szívizom újra
ingerelhető legyen

Mitől függ?
1. A szívizomsejtek repolarizációjától (K+-csatornák)
2. A depolarizációért felelős áramok aktuális nagyságától (Na+- ill. Ca2+ -csatornák)
Multi-cellular Organization
Functionalis szinticium) =
A szívizomzat azon képessége, hogy egyként kontraháljon

= Rés-kapcsolatok
”Gap Junction Channel”
(alacsony ellenállás)
 INGERÜLETVEZETÉS
Ingerületvezetés iránya

1. Depolarizáció maximális sebessége (Vmax) Milyen gyorsan dől a dominó

- gyors nátriumáramtól függ

2. Az akciós potenciál amplitúdója Milyen magas a dominó

- gyors nátriumáramtól függ

3. Küszöbpotenciál értéke Mennyi energia kell a dominó eldöntéséhez

- nátriumcsatornák állapotától függ (pl. milyen éles a sarka)

4. A sejtek belső ellenállása illetve a sejtek Milyen a közeg ellenállása amelyben a

közötti ellenállása (ri) dominó dől
- főként az ún. „gap junction” -tól függ (pl. víz, levegő, vákuum)

Nátriumcsatornák (pitvar, kamra) vagy kalciumcsatornák (szinusz és AV-csomó)

működéstől függ
Akciós potenciál és ionáramok pitvarban és kamrában
Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
Akciós potenciál és ionáramok szinusz csomóban és Purkinje rostban

Diastolés
depolarizáció
Species eltérések akciós potenciál és ERP időtartamban
Akciós potenciál és ionáramok szinusz csomóban

Diastolés
depolarizáció
A pacemaker áram (If)
Akciós potenciál és Na ionáram pitvarban és kamrában
Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
 A gyors nátrium áram és csatorna (INa)
Wu et al, Heart Rhythm, 2008, 5(12):1726-34

50 mV
INa
100 ms
aktiváció
inaktiváció

Aktivációs kinetika  Inaktivációs kinetika 

Nyugalmi állapot Aktív állapot Inaktív állapot
Na + Na Na + Na + Na
+ +
outside outside outside
m

m
m

h
inside -
h inside -
Re-aktivációs kinetika
inside
Na
+
+
Na+-csatorna szerkezete
TTX kötőhelyek
Na+-csatorna térbeli szerkezete
Nátrium csatorna gátlás (INa)
 A késői nátrium csatorna (INaL)
INaL

50 mV
100 ms

Wu et al, Heart Rhythm, 2008, 5(12):1726-34

Akciós potenciál és az L tipusú Ca ionáram (ICaL) pitvarban és kamrában
Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
 L tipusú kalcium áram (ICa)
ICaL

50 mV
Varro et al, Br. J. Pharmacol, (2001) 133, 625 – 634. 100 ms
Aktivációs kinetika  Inaktivációs kinetika 
Nyugalmi állapot Aktív állapot Inaktív állapot
Ca + Ca Ca + Ca + Ca
+ +
outside outside outside
m

m
h
inside -
h inside -
Re-aktivációs kinetika
inside
Ca
+
+
 Ca2+-csatorna szerkezete

S4 – feszültség szensor Loop S5-S6 – ion konductancia és szelektivitás

a2d alegység komplex

Intracelluláris b-alegység
Akciós potenciál és ionáramok pitvarban és kamrában
Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
Tranziens kifelé haladó „outward” káliumáram (Ito)

Virag et al, unpublished

„Notch”

50 mV
100 ms
Ito szelektív gátlásának hatása az akciós potenciálra

Repolarizáció megnyúlik
A „notch” eltűnik

Virag et al, Br J Pharmacol, 2011

Akciós potenciál és a késői egyenirányító káliumáram gyors
és lassú komponense pitvarban és kamrában
Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
 A késői egyenirányító káliumáram gyors és lassú komponense (IKr és IKs)
IKs
30 mV
1000 ms
IKr 30 mV
5000 ms

-80 mV -80 mV

Gyors inaktiváció is jelen van

50 pA

100 pA
2500 ms 2500ms

25 pA
500 ms
 A késői egyenirányító káliumáram gyors és lassú komponense (IKr és IKs)
Kontroll
+30 mV
1 µM E-4031

-40 mV
250 ms
-80 mV

Különbség áram

E-4031 szenzitív(IKr)
50 pA

Kontroll
100 nM L-735,821

0 pA

L-735,821 szenzitív (IKs)

200 ms

50 mV 200 ms
Varro et al, J.Physiol. 2000; 523.1: 67-81
Akciós potenciál és a befelé egyenirányító káliumáram pitvarban és kamrában

Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
 A befelé egyenirányító káliumáram (IK1)
Az ” inward” rectifikációt intracelluláris kationok (Mg2+, Ca2+, polyaminok) szabályozzák (gátolják) a depolarizáció
időtartama alatt

Kontroll 10 M BaCl2

0 mV
Control
0 pA
10 M BaCl2
1000 pA
-

50 mV
60 mV
-
-90 mV
36 s -
-120 mV
cycle length = 1000 ms
-120 -80 -40 0 40 (mV) 200 ms

Biliczki et al, Br. J. Pharmacol, 2002,137(3):361-368.

A négy repolarizáló káliumáram az akciós potenciál alatt - összefoglalás

-40 mV
Pitvaszelektív áramok – az ultragyors késői egyenirányító káliumáram (IKur)

Pitvar Kamra

Ionáram Csatorna fehérje Ionáram

Nem expresszálódik

Nem expresszálódik
Pitvaszelektív áramok – az ultragyors késői egyenirányító káliumáram (IKur)

Gao et al, Br. J. Pharmacol, 2005; 144, 595-604

 IKur szelektív gátlásának hatása az akciós potenciálra

Wang et al. Circ. Res. 1993, 73: 1061 Wettwer et al. Circulation 2004;110:2299-2306
Pitvaszelektív áramok – az acetilkolin függő káliumáram (IK,Ach

Dobrev et al. Circulation 2005;112:3697-3706

Az IK,ACh gátlása lehetséges kezelési mód

a krónikus PF esetében ?!?
 Egyéb ligandfüggő áram az ATP szenzitív káliumáram (IKATP)

Jost N, et al, J Cardiovasc Pharmacol Ther, 8, 31-41, 2003

Németh M, J Cardiovasc Pharm Ther. 2 (4), 273-284. 1997

Szarkolemmális klorid csatornák
PKA és PKC aktiválta Cl- csatornák (ICl.PKA és ICl.PKC)
Sejt térfogat szabályozta Cl - csatornák (ICl.vol)
Egyéb Cl - csatornák (Ca2+ aktiválta, Ito2), purinerg receptorok
(ICl,ATP), stb.)

ECl normál fiziológiás körülmények között -65 és -45 mV

között van

Ennél fogva a transzmembrán Cl- csatornáknak megvan az

az egyedi tulajdonságuk, hogy inward és outward
áramként is hozzájáruljanak a szív AP kialakításához.
 PK aktiválta Cl- csatornák (ICl.PK)

! A pitvari sejtek kb. 21 % -ában van

James et al, Circ Res, 79, 201-207, 1996
PK aktiválta Cl- csatornák (ICl.PK)

Levesque et al, Pflug Archiv, 424, 54-62, 1993

 Molekuláris háttér, szövet és species sajátosságok (ICl.PK)

Kódoló gén: (CFTR)

(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator)

Hume et al, Physiol Rev, 80, 31-81, 2000

Jelen van:
-Felnőtt kamrai de nem pitvari (?) és szinuszcsomó sejtekben (tengerimalac, nyúl, macska és humán (?)
 Sejt térfogat szabályozta Cl - csatornák (ICl.vol)

A térfogat által vezérelt anion csatornák minden szívrégióban jelen vannak, és

fontos szerepet játszanak a sejt térfogat szabályozásban.

A sejt térfogatban történő megnövekedés egy kifelé rektifikáló klorid csatornát

aktivál, amely a pozitív membrán potenciál értékeknél inaktiválódik

A klorid csatorna kísérletes méréséhez hipotóniás oldatok segítségével

indukálunk sejttérfogat növekedést

Az áram SIDS és 9-AC szenzitív

Aktív háttéráramként működik

 Sejt térfogat szabályozta Cl - csatornák (ICl.vol)

Sorota, Circ res, 70, 679-687, 1992

Főbb anion csatornák és transzporterek

Hume et al, Physiol Rev, 80, 31-81, 2000

 b-Receptors and KV Channels
 K+ permeabilitás 

b agonist Adenylate cyclase K+

Out

b
Gas PKA
+ In
+

ATP cAMP IKS Channel

(KCNQ1+KCNE1)
 b-Receptors and Ca2+ Channels

b agonist Adenylate cyclase

Out

b
Gas
+ + In

+ PKA Ca2+
L-type Ca2+
ATP cAMP
Channel
 b-Receptors and Pacemaker Channels

b agonist Adenylate cyclase

Out

b
Gas
+ cAMP In
b-Receptor Na Pacemaker Channel
ATP cAMP (HCN4)
Muscarinic Receptors and Pacemaker
Channels

Adenylate cyclase
ACh
Out
M2 b
-
Gai
cAMP In
Na

ATP cAMP Pacemaker Channel

(HCN4)
A szív ionáramainak molekuláris szerkezete
 A szív ionáramainak számítógépes modellezése

Endo
50 epi
epi 80% Ito1 block
endo
endo 80% Ito1 block

0
V (mV)

-50

Epi
-100
0 100 200 300 400
Time (ms)
 Kontroll humán és kutya kamrai akciós potenciálok
(eredeti felvételek és számítógépes szimulációk

humán
kutya

0 mV
BCL = 1000 ms

Human model is based on the dog model by scaling:

factor_IK1 = 0.3779; %0.65 pA/pF vs 1.72pA/pF
factor_Ito = 0.9*0.77; % dog: 0.9 x normal HR model
factor_ICaL = 1.3;
factor_IKr = 1;
factor_IKs = 0.22; % dog = 4.5 x human
humán IK1 block (0.3xgK1) kutya
 IKr block (0.25xgKr)
humán kutya
humán IKs block (0.5 x gKs) kutya
humán kutya
IKr + IKs
humán IKr + IK1 kutya
KÖSZÖNÖM A FIGYELMET !