Professional Documents
Culture Documents
A/ CƠ SỞ LÝ THUYẾT
Tanin (tannin, taninoid) là những hợp chất polyphenol phức tạp, có nguồn gôc thực
vật, có vị chát và có tính thuộc da.
Dựa vào cấu trúc hóa học, người ta xếp tanin vào 2 nhóm chính:
- Tanin không thủy phân được (tanin ngưng tụ, tanin pyrocatechic)
Tanin dễ tan trong kiềm loãng, trong hỗn hợp cồn nước.
Tanin tan được trong cồn, glycerin, propylen glycol, aceton và ethyl acetat.
Tanin tạo tủa với dung dịch nước của protein. Đây là tính chất quan trọng để định
tính tanin.
Để phân biệt 2 loại tanin pyrogallic và pyrocatechic có thể dựa vào phản ứng thế
và phản ứng ngưng tụ trên nhân thơm của tanin pyrocatechic cũng như sự tạo màu
sắc khác nhau của cả hai loại tanin với các thuốc thử FeCl 3, thuốc thử Stiassny,
nước Brom…
Có nhiều phương pháp định lượng tanin, như phương pháp chuẩn độ thể tích,
phương pháp đo màu… DĐVN IV quy định dùng phương pháp bột da để định
lượng tanin trong dược liệu.
B/ TIẾN HÀNH
Kết luận:Phản ứng dương tính, trong dịch chiết có chứa tannin.
Giải thích: Tanin có nhiều nhóm –OH Phenol, tạo nhiều dây nối đôi hydro với các
mạch polypeptit của protein tạo kết tủa.
Ống 1: cho 2ml dịch chiết + 1 Ống 2:Cho vào ống nghiệm
giọt FeCl3 2ml dịch chiết+ 1ml thuốc thử
Stiassny + đun cách thủy 10
phút
*Kết luận:
ThCho 5ml dịch chiết hạt cau vào ống nghiệm lớn, thêm thuốc thử Stiassny, đun cách thủy 10
phút, lọc trong. Thêm tiếp 1ml thuốc thử mới, nếu còn xuất hiện kết tủa thì tiếp tục lọc trong và
tiến hành lặp lại đến khi hết tủa
Trung hòa dịch lọc bằng NaOH 10% đến pH 5-6 rồi tiếp tục thêm
CH3COONa cho tới pH trung tính hoặc kiềm nhẹ rồi chia vào 2
ống nghiệm, mỗi ống 2ml
1. Chiết xuất
Kết luận: có tủa đục nên trong ngũ bội tử có chứa tanin.
Nhận xét : khi cho dịch chiết tác dụng với thuốc thử FeCl3 1% thì dung dịch
có màu xanh đen; khi cho tác dụng với thuốc thử Stiassny thì dung dịch trong,
không có tủa.
1. Chiết xuất
Cho dược liệu vào erlen 50ml thêm 30ml nước sôi, đun trên bếp cách thủy sôi 10 phút, lắc
đều khi đun. Lọc nóng lấy dịch lọc.
Kết luận: Gelatin có bản chất là protein (vì được sản xuất chủ yếu từ da động vật).
Do tanin chứa nhiều nhóm phenol (-OH) → tạo nhiều dây nối hydro với các
mạchpolypeptid của protein
Kết luận: Tanin (hay acid tanic), là một hợp chất polyphenol khi gặp các muối kim
loại ( sắt,chì, nhôm, …) tạo ra các phức màu khó tan, càng nhiều nhóm –OH cho
màu càng đậm. Kết tủa tạo ra là Pb(OH)2
2.3 Phản ứng với 1ml thuốc thử chì acetat 1%:
Cho vào ông nghiệm 2ml dịch chiết và 1ml thuốc thử
chì acetat 1%, tạo kết tủa có màu trắng đục.
Kết luận: các nhóm phenol (-OH) của tanin tạo phức màu xanh với muối FeCl3
tạo ra Fe2+ và khi bị oxit sẽ cho màu xanh đen (khi có ánh sáng)
3. Xác định 2 loại tannin trong lá bàng:
Lấy 5ml dịch chiết lá bàng cho vào ống nghiệm lớn
Thêm TT Stiassny
Lọc trong
Lọc lấy dịch trong, dịch lọc tiếp tục thêm gelatin muối.
lọc đến khi dịch lọc không xuất hiện tủa với gelatin
muối. lọc lấy dịch trong
- mục đích giai đoạn đầu (cho tác dụng với gelatin lọc rồi tiếp tục như vậy cho
đến khi dịch lọc trong) là loại hết tanin trong dịch chiết nữa
- Sau khi đã không còn tanin nữa ta chia làm 2 ống nghiệm, dùng phản ứng
Stiassny và FeCl3, nếu có kết tủa đỏ gạch với Stiassny và xanh rêu với FeCl3
chứng tỏ có catechin, mà nó không dính với tanin nữa ( vì đã loại hết tanin
rồi) nên gọi là catechin tự do
1. Chiết xuất
Dược liệu
*Giải thích: Gelatin có bản chất là protein, do tanin có chứa nhiều nhóm
phenol (-OH) tạo nhiều dây nối hydro với các mạch polypeptid của protein.
1 giọt TT FeCl3 1%
*GiảiỐng 2: Dịch
thích: chiết
Tanin là một hợp chất polyphenol khi gặp các muối kim loại nặng
(sắt, chì, đồng,..) tạo ra các phức màu khó tan, màu sẽ thay đổi tùy theo ion kim
loại.
- Trong ống 1, các nhóm phenol (-OH) của tanin tạo phức màu xanh với
muối Fe3+ tạo Fe2+ và khi bị oxy hóa sẽ cho màu xanh đen (khi có ánh sáng)
- Trong ống 2, Tanin là một hợp chất polyphenol có chứa các nhóm (-OH)
khi gặp Pb2+ tạo ra kết tủa Pb(OH)2.
_ Trung hòa dịch lọc để loại hết acid còn lại trong dịch lọc
_ Ống nghiệm thứ nhất thấy xuất hiện kết tủa trắng đục vì trong dịch chiết có tanin
nên tạo tủa với gelatin
_ Ống nghiệm 2 thấy màu xanh đen là vì có pyrogallic tạo màu xanh đen với thuốc
thử FeCl3
Giải thích: _ Mục đích giai đoạn đầu (cho tác dụng với gelatin lọc rồi tiếp tục như
vậy cho đến khi dịch lọc trong) là loại hết tanin trong dịch
_ Sau khi đã không còn tanin nữa ta chia làm 2 ống nghiệm, dùng phản
ứng Stiassny và FeCl3, nếu có kết tủa đỏ gạch với Stiassny và xanh rêu với FeCl3
chứng tỏ có catechin tự do