CHAPTER 17

DETECTION OF HIGH—RISK INDIVIDUALS FOR

PERIODONTAL DISEASES
‫شناسایی افراد پرخطر برای بیماری های پریودنتال‬
It would be of immense value to be able to identify .1
those individuals who are susceptible to destructive
periodontitis and are thus likely to begin, or progress
with, disease in the future as well as to identify those
.who have active disease at the time of examination

‫ شناسایی افرادی که مستعد ابتال به پریودنتیت مخرب هستند و در نتیجه‬.۱

‫احتمال شروع یا پیشرفت بیماری در آینده در آنها وجود دارد و همچنین‬
‫ بسیار ارزشمند‬،‫شناسایی افرادی که در زمان معاینه بیماری فعال دارند‬
.‫خواهد بود‬
A laboratory screening method based on .2
whole saliva would have the advantages to
the subjects of being non-invasive, and of
being quick and simple to collect in a wide
.variety of environments

‫_ یک روش غربالگری آزمایشگاهی مبتنی بر بزاق کامل‬۲

‫می‌تواند مزایای غیرتهاجمی بودن و جمع‌آوری سریع و‬
.‫ساده در محیط‌های مختلف را برای آزمودنی‌ها داشته باشد‬
Individuals who proved positive for any .2
valid saliva-based marker of periodontal
disease susceptibility or activity could then
be called for a detailed clinical and
laboratory work up, including site-specific
examination of GCF and of subgingival
.plaque
‫_افرادی که برای هر یک از مارکرهای معتبر مبتنی‬۲
‫بر بزاق حساسیت یا فعالیت بیماری پریودنتال مثبت‬
‫ می‌توان آنها را برای انجام یک کار بالینی و‬،‫بودند‬
‫ و‬GCF ‫ از جمله معاینه محل خاص‬،‫آزمایشگاهی دقیق‬
.‫پالک زیر لثه فراخواند‬
The present article reviews the validity .2
of putative markers of periodontal risk
groups and individuals which may be
derived from laboratory investigations of
.saliva

‫_مقاله حاضر به بررسی اعتبار نشانگرهای‬۲

‫احتمالی گروه ها و افراد در معرض خطر‬
‫پریودنتال می پردازد که ممکن است از بررسی‬
.‫های آزمایشگاهی بزاق به دست آمده باشند‬
There is little information on the use of cell .3
counts or the types of cell found in saliva in
relation to periodontal disease.
Epithelial cells from all the oral surfaces are
found in saliva, but it is not know whether
crevicular or pocket epithelial cells are a
.significant proportion of the cells present
‫اطالعات کمی در مورد استفاده از تعداد سلول ها یا انواع سلول های‬
‫ سلول های‬.‫موجود در بزاق در رابطه با بیماری پریودنتال وجود دارد‬
‫ اما مشخص نیست‬،‫اپیتلیال از تمام سطوح دهان در بزاق یافت می شوند‬
‫که آیا سلول های شیار لثه یا بافت پوششی حفره ها بخش قابل توجهی از‬
.‫سلول های موجود را تشکیل می دهند‬
It should be possible if the right markers .3
can be found, such as specific cytokeratins or
cell surface antigens specific for junctional
epithelium, to identify these cells in saliva.
Cell counts could then be correlated with
existing disease markers and used to assess
.risk in prospective studies
‫ مانند سیتوکراتین های‬،‫ در صورت یافتن نشانگرهای مناسب‬.3
‫خاص یا آنتی ژن های سطح سلولی خاص برای اپیتلیوم‬
.‫ شناسایی این سلول ها در بزاق باید امکان پذیر باشد‬،‫جانکشنال‬
‫سپس تعداد سلول ها می تواند با نشانگرهای بیماری موجود مرتبط‬
‫باشد و برای ارزیابی خطر در مطالعات آینده نگر استفاده شود‬
‫‪As epithelial cells leaving the crevice or .3‬‬
‫‪pocket are likely to have adherent bacteria,‬‬
‫‪this type of study might be combined with‬‬
‫‪tests designed to identify specific‬‬
‫‪periodontopathic bacteria using‬‬
‫‪.immunocytochemistry techniques‬‬

‫‪_3‬از آنجایی که سلول‌های اپیتلیال که از شکاف یا پاکت خارج‬

‫می‌شوند احتماًال دارای باکتری‌های چسبنده هستند‪ ،‬این نوع مطالعه‬
‫ممکن است با آزمایش‌هایی که برای شناسایی باکتری‌های‬
‫پریودنتوپاتیک خاص با استفاده از تکنیک‌های شیمی ایمنی‬
‫طراحی شده‌اند ترکیب شود‪.‬‬
Salivary polymorphonuclear leucocytes .4
(PMN) are known to be derived principally
from the gingival crevice with a small
contribution from the oral mucosa and the
tonsils. Contributions from these latter
surfaces will, of course, rise considerably if
stomatitis or tonsillitis is present, whatever
.the cause
)PMN( ‫_معلوم شده که لکوسیت ها با هسته ی چندشکلی‬۴
‫بزاقی اصوًال از شیار لثه‌ای همراه با ترشحات ناچیزی از‬
‫ اگر به هر علتی‬. ‫مخاط دهان و لوزه ها نشات می گیرند‬
‫ ترشحات این‬،‫التهاب مخاط یا التهاب لوزه وجود داشته باشد‬
.‫سطوح قطعا به طور قابل مالحظه ای افزایش خواهد یافت‬
In an otherwise healthy individual, it has .4
been demonstrated that there is a weak
correlation between the rate of salivary PMN
accumulation and gingival inflammation, the
highest numbers being found where gingivitis
is most severe. The count is both unreliable
and tedious, and other studies have not found
.such an association
‫ ثابت شده است که یک وابستگی‬،‫ در یک فرد سالم‬._۴
،‫ بزاق و التهاب لثه وجود دارد‬PMN ‫ضعیف بین میزان تجمع‬
‫بیشترین تعداد در جایی که التهاب لثه شدیدتر است یافت می‬
‫ این شمارش هم غیرقابل اعتماد و هم خسته کننده است و‬.‫شود‬
‫مطالعات دیگر چنین ارتباطی را پیدا نکرده اند‬
There are no published works which have .4
studied the relationship of salivary PMN counts
to destructive periodontitis, and because gingival
crevicular or pocket leucocytes can be counted
with precision on a site-specific basis, the latter
is likely in the short-term to be a more fruitful
approach.
There is no information on the numbers of
lymphocytes and macrophages in saliva or their
.relationship to periodontal
‫پریودنتیت‬ disease
‫ بزاق را با‬PMN ‫تعداد‬ ‫_ هیچ اثر منتشر شده ای وجود ندارد که رابطه‬۴
‫ و از آنجایی که لکوسیت های شیار یا پاکت لثه‬،‫مخرب مورد مطالعه قرار داده باشد‬
‫ احتماًال در کوتاه مدت‬،‫ای را می توان با دقت بر اساس نواحی خاص شمارش کرد‬
.‫مورد دوم رویکرد ثمربخش تری خواهخد بود‬
‫هیچ اطالعاتی در مورد تعداد لنفوسیت ها و ماکروفاژها در بزاق یا ارتباط آنها با‬
.‫بیماری پریودنتال وجود ندارد‬
The role of the various blood cells has been .5
reviewed by fine and mandel (1986).That review
also considered some of the substance which
may be found in saliva , but their emphasis was
on indicators of disease activity in the blood or
gingival exudate rather than predictors of
future disease. The review contained few
.references to saliva
‫) بررسی‬1986( ‫_نقش سلول های خونی مختلف توسط فاین و مندل‬۵
‫ این بررسی همچنین برخی از موادی را که ممکن است در‬.‫شده است‬
‫ اما تاکید آنها بیشتر بر شاخص های‬،‫بزاق یافت شود در نظر گرفت‬
‫فعالیت بیماری در خون یا ترشح لثه بود تا اینکه پیش بینی کننده آینده‬
‫ این بررسی حاوی ارجاعات کمی به بزاق بود‬.‫بیماری باشد‬
It is known that plaque is complex habitat in .6
its own right and to study these organisms in
saliva will not necessarily be informative at
least as regards their ecology or pathogenic
.potential in relation to the periodontium

‫ مشخص است که پالک به خودی خود زیستگاه پیچیده ای‬.6

‫است و مطالعه این ارگانیسم ها در بزاق حداقل از نظر بوم‬
‫شناسی یا پتانسیل بیماری زایی آنها در رابطه با پریودنشیوم‬
.‫لزوما حاوی اطالعات مفیدی نخواهد بود‬
This is especially true of the obligate .6
anaerobes which are currently considered to
be pathogens of these diseases. Thus
quantification of the subgingival flora in saliva
might be misleading because the same
species may exist in other areas of the mouth
as independent communities , unrelated to
their presence in plaque
‫ این امر به ویژه در مورد بی هوازی های اجباری که در حال حاضر‬.6
.‫به عنوان پاتوژن این بیماری ها در نظر گرفته می شوند صادق است‬
‫بنابراین تعیین کمیت فلور زیر لثه در بزاق ممکن است گمراه کننده باشد‬
‫زیرا همان گونه ممکن است در سایر نواحی دهان به عنوان جوامع‬
.‫مستقل وجود داشته باشد که به حضور آنها در پالک ارتباطی ندارد‬
Assessment of the value of salivary culture .7
to detect periodontopathic bacteria as
possible risk factors would require
comprehensive prospective studies in
adolescents and adults . Even so it is unlikely
that this approach would provide the
.information needed
‫ ارزیابی ارزش کشت بزاق برای شناسایی باکتری های‬.7
‫ به‬،‫بیماری زای پریودنتال به عنوان ریسک فاکتور های ممکن‬
.‫مطالعات وسیع آینده نگر در نوجوانان و بزرگساالن نیاز دارد‬
‫ بعید است که این رویکرد اطالعات مورد نیاز را‬،‫با این حال‬
‫فراهم کند‬
Because disease is most usually .7
site_restricated, many plaque samples would
have to be studied at the same time to
understand the extent to which organisms in the
saliva reflected those present in plaque at
healthy(pre_disease) sites or sites with a history
of disease, deepened pockets and hence
conditions favourable to the maintenance of gram
.negative anaerobes
‫ بسیاری از نمونه‌های‬،‫_از آنجایی که بیماری معموًال در محدود به ناحیه است‬۷
‫پالک باید به طور همزمان مورد مطالعه قرار گیرند تا میزان انعکاس ارگانیسم‌های‬
،‫موجود در بزاق در محل‌های سالم (پیش از بیماری) یا مکان‌هایی با سابقه بیماری‬
‫ و از این رو شرایط مساعد برای نگهداری بی‬.‫ بررسی شوند‬،‫پاکت‌های عمیق‌تر‬
.‫هوازی های گرم منفی را متجه می شویم‬
Aids for detection
Bacterial of bacterial
antigens can antigens
be detected with
either direct or indirect immunofluoresence
techniques.
Direct immunofluoresence uses a single
antibody with a chemically attached
fluorescent dye, whereas the indirect
technique uses two serodiagnostic reagents ,
the second of which carries the fluorescent
. dye ‫وسایلی برای شناسایی آنتی ژن های باکتریایی‬
.‫آنتی ژن های باکتریایی را می توان با تکنیک های ایمونوفلورسانس مستقیم یا غیرمستقیم شناسایی کرد‬
‫ در‬،‫ایمونوفلورسانس مستقیم از یک آنتی بادی مجزا با اتصال شیمیایی به رنگ فلورسنت استفاده می کند‬
‫حالی که تکنیک غیر مستقیم از دو معرف تشخیص سرمی استفاده می کند که دومی حامل رنگ‬
.‫فلورسنت است‬
Because indirect immunofluorescence requires
two steps, it is more time consuming than
direct, which has only one step, but the result
is a test with greater sensitivity.
The discussion here will be limited to indirect
immunofluorescence microscopy, since it is
commonly utilized to detect periodontal
bacteria such as A.actinomycetemcomitans
.and p.gingivalis in subgingival plaque
‫ نسبت به مستقیم که تنها یک‬،‫از آنجایی که ایمونوفلورسانس غیرمستقیم به دو مرحله نیاز دارد‬
‫ بحث در اینجا به‬.‫ اما نتیجه آزمایشی با حساسیت بیشتر است‬،‫مرحله دارد زمان برتر است‬
‫ زیرا معموًال برای شناسایی باکتری‬،‫ایمونوفلورسانس غیرمستقیم میکروسکوپی محدود می شود‬
‫ در پالک زیر لثه‬p.gingivalis ‫ و‬A.actinomycetemcomitans ‫های پریودنتال مانند‬
.‫استفاده می شود‬
In indirect immunofluorescence microscopy, a
primary antibody targeted to a surface
antigen on a specific bacterium is added to a
dispersed plaque sample fixed on a
microscope slide. The antibody combines with
the antigen if the bacterium is present and
.stable antigen/antibody complex is formed
‫ یک آنتی بادی اولیه که روی‬،‫در ایمونوفلورسانس غیرمستقیم میکروسکوپی‬
‫ به یک نمونه پالک پراکنده‬،‫سطح آنتی ژن یک باکتری خاص هدف گرفته شده‬
‫ در صورت‬.‫ اضافه می‌شود‬،‫که روی یک اسالید میکروسکوپ ثابت شده است‬
‫آنتی‬/‫ آنتی بادی با آنتی ژن ترکیب می شود و کمپلکس آنتی ژن‬،‫وجود باکتری‬
.‫بادی پایدار تشکیل می شود‬
Secondary antibody with chemically attached
fluorescent dye is added. This antibody_ dye combines
with the antigen/antibody complex.
When viewed with a fluorescent microscope, the bound
antigen/antibody/antibody _dye complex is fluorescent
and the target organism can be detected easily in the
plaque sample.
If the targeted antigen is not present in the sample,
unbound primary antibody and antibody-dye will be
washed away during processing and no fluorescence will
.be‫آنتی‬seen
/‫ این رنگ آنتی بادی با کمپلکس آنتی ژن‬.‫آنتی بادی ثانویه با اتصال شیمیایی به رنگ فلورسانت اضافه می شود‬
‫آنتی‬/‫آنتی بادی‬/‫ کمپلکس آنتی ژن‬،‫ هنگامی که با میکروسکوپ فلورسنت مشاهده می شود‬.‫بادی ترکیب می شود‬
‫ اگر آنتی‬.‫بادی _ رنگ متصل شده فلورسنت است و ارگانیسم هدف را می توان به راحتی در نمونه پالک تشخیص داد‬
‫ آنتی بادی اولیه و رنگ آنتی بادی بدون اتصال در طول پردازش شسته‬،‫ژن مورد نظر در نمونه وجود نداشته باشد‬
.‫می شوند و فلورسانس مشاهده نمی شود‬
Immunofluorescence microscopy
may be performed in the dental
office, but, currently , the need for
technical expertise, specific
reagents , and a fluorescent
microscope may require the use of a
.laboratory
‫ اما در حال‬،‫ایمونوفلورسانس میکردسکوپی ممکن است در مطب دندانپزشکی انجام شود‬
‫ معرف‌های خاص و میکروسکوپ فلورسنت ممکن است نیاز‬،‫ نیاز به تخصص فنی‬،‫حاضر‬
.‫به استفاده از آزمایشگاه داشته باشد‬
The test may be performed within a few hours,
although semiquantitative tests (determining the
percentage of a specific organism present) are more
time-consuming than qualitative tests (determining
the presence of an organism.)
An advantage of immunofluorescence microscopy is
that the specificity of the reaction can be verified by
checking for appropriate cell morphology of
.fluorescent cells
‫ اگرچه آزمایش‌های نیمه کمی (تعیین درصد‬،‫آزمایش ممکن است در عرض چند ساعت انجام شود‬
‫ مزیت‬.‫ارگانیسم خاص موجود) نسبت به آزمایش‌های کیفی (تعیین حضور ارگانیسم) زمان‌برتر است‬
‫میکروسکوپ ایمونوفلورسانس این است که ویژگی واکنش را می توان با بررسی مورفولوژی سلولی‬
‫مناسب سلول های فلورسنت تأیید کرد‬
ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

ELISA is essentially the same as an

immunofluorescence assay except that an enzyme
replaces the fluorescent dye as the label on the
.secondary antibody

)‫ (تجزیه ی سطح نامحلول مصونیت انزیمی‬ELISA

‫ اساسًا مشابه روش ایمونوفلورسانس است با این تفاوت که یک آنزیم جایگزین رنگ‬ELISA
.‫فلورسنت به عنوان نشانه روی آنتی بادی ثانویه می شود‬
First, the primary antibody is added
to a dispersed plaque sample which
is bound to a plastic or paper support.
The antibody combines with the
antigen on the bacterial pathogen
and a stable antigen/antibody
complex is formed

‫ابتدا آنتی بادی اولیه به یک نمونه پالک پراکنده که به یک تکیه گاه پالستیکی یا‬
‫ آنتی بادی با آنتی ژن موجود در پاتوژن‬.‫ اضافه می شود‬،‫کاغذی متصل است‬
‫آنتی بادی پایدار تشکیل می‬/‫باکتریایی ترکیب می شود و یک کمپلکس آنتی ژن‬
.‫شود‬
Next, the secondary antibody labelled
with an enzyme is added. The
secondary antibody-enzyme binds to
the antigen/ antibody complex to form
an antigen/antibody/antibody- enzyme
.complex

‫ آنتی‬.‫ آنتی بادی ثانویه که با آنزیم نشان دار شده است اضافه می شود‬،‫سپس‬
‫آنتی بادی متصل می شود تا یک‬/‫آنزیم ثانویه به کمپلکس آنتی ژن‬-‫بادی‬
.‫آنزیم تشکیل دهد‬-‫آنتی بادی‬/‫آنتی بادی‬/‫کمپلکس آنتی ژن‬
The binding of the secondary
antibody is detected by a colour
reaction in which a colourless
substrate is converted into a coloured
product by the enzyme. The colour
may be graded visually or measured
.with a spectrophotometer

‫اتصال آنتی بادی ثانویه توسط یک واکنش رنگی تشخیص داده می شود که در‬
‫ رنگ‬.‫آن یک بستر بی رنگ توسط آنزیم به یک محصول رنگی تبدیل می شود‬
‫ممکن است به صورت بصری درجه بندی شود یا با اسپکتروفتومتر اندازه‬
‫گیری شود‬
The intensity of the colour change is
proportional to the amount of bacteria
present in the sample.
If the targeted bacterium is not present
in the sample, the primary and
secondary antibodies are washed away
during the processing, and the colour
.reaction does not occur
‫ اگر باکتری‬.‫شدت تغییر رنگ متناسب با میزان باکتری موجود در نمونه است‬
‫ آنتی بادی های اولیه و ثانویه در طول‬،‫مورد نظر در نمونه وجود نداشته باشد‬
.‫پردازش شسته می شوند و واکنش رنگی رخ نمی دهد‬
ELISA is a highly sensitive test, and
relatively inexpensive to perform.
Expensive equipment to measure and
interpret the colour reaction of the results
is available although not necessary,
since visual inspection of the colour change
is possible. In contrast,
immunofluorescence assays require a
.fluorescent microscope to interpret results
‫ تجهیزات گران‬.‫االیزا یک آزمایش با حساسیت باال است و انجام آن نسبتًا ارزان است‬
‫ اگرچه ضروری‬،‫قیمت برای اندازه گیری و تفسیر واکنش رنگ نتایج در دسترس است‬
‫ سنجش‬،‫ در مقابل‬.‫ زیرا بازرسی بصری تغییر رنگ ممکن است‬،‫نیست‬
‫ایمونوفلورسانس برای تفسیر نتایج به یک میکروسکوپ فلورسنت نیاز دارد‬
At present, ELISA for periodontal bacteria
must be performed in a laboratory, but
because of the relative simplicity of the
procedure, chairside diagnostic kits
probably will be available soon. Rapid
diagnosis kits have been developed by
several manufacturers for use in medical
.offices for other infectious diseases

‫ اما به دلیل‬،‫ االیزا برای باکتری های پریودنتال باید در آزمایشگاه انجام شود‬،‫در حال حاضر‬
‫ احتماًال به زودی کیت های تشخیصی روی صندلی در دسترس خواهند‬،‫سادگی نسبی این روش‬
‫ کیت های تشخیص سریع توسط چندین تولید کننده برای استفاده در مطب های پزشکی‬.‫بود‬
‫برای سایر بیماری های عفونی ساخته شده است‬