Họ và tên : Đỗ Thị Thủy

MSSV:20180379
Mã lớp: 702214
BÁO CÁO THÍ NGHIỆM
Bài 4 : Định lượng nhóm vi khuẩn Coliform trong
mẫu nước tự nhiên bằng phương pháp MPN
I. Mục đích thí nghiệm :
Xác định sự có mặt của vi khuẩn Coliform trong mẫu nước tự nhiên cần
kiểm tra ( nước trong phòng thí nghiệm) và định lượng vi khuẩn
Coliform trong mẫu nước đó bằng phương pháp MPN
II. Vật liệu và phương pháp:
1. Vật liệu:
- Mẫu nước tự nhiên ( nước trong phòng thí nghiệm)
- Môi trường lỏng lactose nồng độ đơn
- Môi trường lỏng lactose nồng độ kép
- Các ống thủy tinh có sẵn ống Durham úp ngược
- Pipet, đầu côn, đèn cồn, cồn , cốc thủy tinh , bình thủy tinh
2. Thí nghiệm :
2.1. Chuẩn bị môi trường :
Thành phần môi trường lỏng lactose

Thành phần Nồng độ kép Nồng độ đơn

Peptone 10g 5g
Lactose 10g 5g
Cao thịt bò 6g 3g
Nước 1000ml 1000ml
- Cân đong chính xác các chất cho vào 2 cốc thủy tinh ( 1 cốc chứa
môi trường lỏng lactose nồng độ kép, 1 cốc chứa môi trường
lỏng lactose nồng độ đơn) , khuấy đều cho đến khi các chất tan
hết
2.2. Phân phối môi trường vào các ống nghiệm:
Dùng pipet hút môi trường lỏng lactose vào các ống thủy tinh đã
có sẵn ống Durham úp ngược:
 - Tổ hợp ống F1: môi trường nồng độ kép , 3 ống , mỗi ống 10 ml
- Tổ hợp ống F2 : môi trường nồng độ đơn, 3 ống , mỗi ống 10ml
- Tổ hợp ống F3: môi trường nồng độ đơn, 3 ống , mỗi ống 10 ml
2.3. Khử trùng :
Sau khi hút môi trường xong, ta xếp gọn các ống thủy tinh vào
giá đựng rồi dùng giấy báo gói phần trên có nút bông của ống thủy
tinh . Sau đó , đem đi khử trùng bằng nồi hấp áp lực ở áp suất dư
0,5atm, nhiệt độ 110-115°C trong 40 phút
2.4. Cấy mẫu:
- Sau khi khử trùng xong , các ống thủy tinh được làm nguội
- Vệ sinh tay và khu vực cấy bằng cồn
- Bật ngọn lửa đèn cồn
- Trước khi cấy, bình chứa mẫu nước được lắc đều
- Dùng pipet hút 10ml mẫu nước cần kiểm tra vào mỗi ống
chứa môi trường trong tổ hợp 3 ống F1
- Dùng pipet hút 1ml mẫu nước cần kiểm tra vào mỗi ống chứa
môi trường trong tổ hợp 3 ống F2
- Dùng pipet hút 0,1 ml mẫu nước cần kiểm tra vào mỗi ống
chứa môi trường trong tổ hợp 3 ống F3
2.5. Nuôi :
Sau khi cấy xong, dùng bút đánh dấu các ống nghiệm, sau đó
xếp vào giá đựng và dùng giấy báo gói kín phần trên của ống, ghi rõ
thông tin , thời gian
- Nuôi các ống đã cấy mẫu nước ở nhiệt độ 35°C trong 48 giờ, sau
đó bảo quản lạnh
III. Kết quả thí nghiệm :
- Số ống dương tính trong tổ hợp ống F1 là 0 ống
- Số ống dương tính trong tổ hợp ống F2 là 0 ống
- Số ống dương tính trong tổ hợp ống F3 là 0 ống
  Giá trị MPN/100ml là 0
IV. Nhận xét , thảo luận :
- Sau khi nuôi mẫu xong,quan sát thấy môi trường trong các
ống thủy tinh bị đục hơn so với môi trường ban đầu khi pha
=> Các vi sinh vật phát triển trong môi trường lỏng lactose
- Các ống Durham úp ngược trong các ống thủy tinh không nổi
=>không có khí trong ống Durham => không có ống nào
dương tính
=> Không có vi khuẩn Coliform trong nước trong phòng thí
nghiệm => Nước trong phòng thí nghiệm không bị ô nhiễm
phân , khá an toàn .