‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد ‪ 43‬العدد ‪ 20‬عام ‪ 2021‬أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬

‫تأثير البكتيريا ‪Bacillus thuringiensis‬‬

‫‪ Berliner‬الداللة ‪ Kurstaki‬بالطريقتين‬
‫العالجية والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق‬
‫النجيليات (دودة الزرع) ‪Syringopais‬‬
‫‪ temperatella Led.‬مختبرياً‬
‫(‪*)1‬‬
‫أسعد حسف(‪ ،)1‬مالؾ عمراف(‪ ،)1‬جماؿ األحمد(‪ ،)1‬صالح الصالح‬

‫(‪ )1‬قسـ وقاية النبات‪ ،‬كمية الزراعة‪ ،‬جامعة تشريف‪ ،‬الالذقية‪ ،‬سورية‪.‬‬

‫* البريد االلكتروني‪saleh.theab.alsaleh@gmail.com :‬‬

‫الملخص‬
‫نفذ البحث في مركز األعداء الحيوية‪ ،‬الالذقية خالل عام ‪ 0202‬لدراسة كفاءة‬
‫البكتيريا ‪ Bacillus thuringiensis‬ساللت ‪ Kurstaki‬في مكافحة العمر اليرقي الثالث‬
‫لحفار أوراؽ النجيميات (دودة الزرع) ‪ Syringopais temperatella Led.‬بالطريقتيف‬
‫‪7‬‬
‫‪ /‬مؿ مختبرياً‪ .‬أظيرت النتائج ارتفاع نسبة‬ ‫الوقائية والعالجية عند التركيز ‪10×1‬‬
‫الموت مع زيادة مدة التعرض‪ ،‬حيث وصمت ‪ 58‬و ‪ % 95‬لمطريقتيف العالجية والوقائية‬
‫عمى التوالي بعد ‪ 72‬ساعة مف المعاممة (اليوـ األخير لمتجربة)‪ ،‬مقارنة مع الشاىد‬
‫والشاىد القياسي (مبيد ‪ Paydor 70% WDG‬المادة الفعالة اميداكموبرايد ‪ )%70‬التي‬
‫بمغت ‪ 0.6‬و ‪ % 100‬عمى التوالي‪ .‬واحصائياً تبيف وجود فروؽ معنوية بيف المعامالت‬
‫الوقائية والعالجية والشاىد القياسي بالمقارنة مع الشاىد‪ ،‬بينما لـ تسجؿ فروؽ معنوية بيف‬
‫المعاممة الوقائية ومعاممة الشاىد القياسي‪ ،‬كما لوحظ وجود فروؽ معنوية بيف المعامالت‬
‫الثالث فيما بينيا‪ .‬تبيف ىذه النتائج أىمية البكتيريا ‪ Bacillus thuringiensis‬ساللت‬
‫‪ Kurstaki‬في مكافحت حشزة حفار أوراق النجيلياث وبالتالي كمبيد حيوي واعد للحد من‬
‫هذه اآلفت وأضزارها‪.‬‬
‫‪11‬‬
 ‫بالطريقتين العالجية ‪ Kurstaki‬الساللة ‪Bacillus thuringiensis Berliner‬تأثير البكتيريا‬
‫‪Syringopais temperatella‬والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع)‬
‫مختبريا‪Led.‬‬
‫كممات مفتاحية‪ ، Syringopais temperatella, Bacillus thuringiensis :‬فاعمية‪،‬‬
‫ممرضات الحشرات‬

‫‪12‬‬
 ‫ أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬2021 ‫ عام‬20 ‫ العدد‬43 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد‬

Laboratory effect of bacterial Bacillus

thuringiensis Berliner strain Kurstaki in
two methods curative and preventive on
the mortality of cereal leaf miner
Syringopais temperatella Led.

Asa’d Hasan(1), Malek Omran(1), Jamal Al-Ahmad(1), Saleh Al-

Saleh(1)*
(1) Department of Plant Protection, Faculty of Agriculture,
Tishreen University, Lattakia, Syria.
* Email: saleh.theab.alsaleh@gmail.com

Abstract
The study was carried out at the laboratories of Lattakia
Center for Rearing Natural Enemies to evaluate the potential of two
different methods (curative and preventive) of Bacillus
thuringiensis strain Kurstaki concentration 1 × 107 \ ml, on larvae of
the cereal leaf miner, Syringopais temperatella (Third instars).
Mortality rate increased over the time, and reached 58 and 95% for
the treatments of curative and preventive, respectively, 72 hours
after application, compared to 0.6 and 100% for the control and
standard control (Paydor 70% WDG pesticide) treatments,
respectively. Statistical analyses showed that there was significant
difference between the three treatments and the control treatment,
as well between the three treatments, while insignificant difference
was obtained between preventive treatment and the standard control
treatment. These results demonstrate the importance of Bacillus
thuringiensis Kurstaki in controlling Syringopais temperatella
larvae as a promising biocide to reduce the damage of this pest.

Keywords: Bacillus thuringiensis, Syringopais temperatella,

potential, entomopathogen.

13
 ‫بالطريقتين العالجية ‪ Kurstaki‬الساللة ‪Bacillus thuringiensis Berliner‬تأثير البكتيريا‬
‫‪Syringopais temperatella‬والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع)‬
‫مختبريا‪Led.‬‬

‫مقدمة‬
‫تسبب بعض أنواع البكتيريا أمراضاً لمحشرات‪ ،‬وتمر بعض األنواع في جسـ الحشرة دوف‬
‫أف تؤثر عمى نشاطيا أو تميتيا‪ ،‬وقد أمكف استغالؿ األنواع الممرضة لمحشرات بالمكافحة‬
‫الحيوية وأطمؽ عمييا اصطالح المبيدات الحشرية الميكروبية أو البكتيرية‪ ،‬ومف المعروؼ‬
‫أف بكتريا )‪ Bacillus thuringiensis Berliner (B.t‬تحتوي عمى عدة بروتينات فعالة‬
‫ضد الحشرات وتستخدـ بكفاءة عالية وآمنة‪ ،‬وقد نجحت في السيطرة عمى مجموعة كبيرة‬
‫مف اآلفات الحشرية التي تصيب الخض اروات وأشجار الفاكية والحبوب‪ ،‬وتنتمي معظـ‬
‫ىذه اآلفات إلى رتبة حرشفية األجنحة وغمدية األجنحة وثنائية األجنحة ‪Al-Dababseh‬‬
‫)‪ .)et al., 2014‬تتميز ‪ B. thuringiensis‬بأنيا موجبة لصبغة غراـ‪ ،‬عصوية الشكؿ‪،‬‬
‫ىوائية اختيارية‪ ،‬متحركة‪ ،‬تكوف األجساـ البمورية البروتينية (الكريستاالت) أثناء عممية‬
‫تكويف األبواغ )‪.(Delucca et al., 1981‬‬

‫رتبة حرشفية األجنحة‬ ‫تتبع دودة الزرع ‪Syringopais temperatella Led.‬‬

‫(‪ )Lepidoptera‬وعائمة ‪ .)Jemsi et al., 2002( Scythrididae‬تنتشر الحشرة في‬
‫كؿ مف سورية ولبناف وتركيا والعراؽ واألردف وايراف وقبرص ( ‪Daamen et al.,‬‬
‫‪ .)1989‬وتعد دودة الزرع إحدى اآلفات الحشرية الميمة التي تصيب القمح والشعير في‬
‫محافظة الحسكة في السنوات األخيرة‪ ،‬ففي عاـ ‪ 2006‬حدث فوراف لحشرة دودة الزرع في‬
‫الجزء الشمالي الشرقي مف سورية مسببة ضر اًر شديداً لمقمح ( ‪ICARDA Annual‬‬
‫‪ .)Report, 2006‬الطور الضار لمحشرة ىو الطور اليرقي داخؿ أنسجة أوراؽ النبات‬
‫وتتغذى عمى الطبقة البرنشيمية إذ ال تبقى سوى البشرتيف العميا والسفمى التي يمكف‬
‫مالحظة اليرقة وفضالتيا مف خالليما (عثماف وآخروف‪ .)2007 ،‬تضع األنثى بيضيا‬
‫عمى األوراؽ أو في التربة‪ ،‬تخرج اليرقات وتتغذى لمدة أسبوع ثـ تقضي طور سكوف‬
‫صيفي خريفي إجباري‪ ،‬تخرج اليرقات مف السكوف اإلجباري وتخترؽ األوراؽ وتتغذى عمى‬
‫أنسجة األوراؽ الداخمية وتمر بستة أطوار بعد اكتماؿ نمو اليرقات‪ ،‬ثـ تدخؿ اليرقات إلى‬
‫‪14‬‬
 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد ‪ 43‬العدد ‪ 20‬عام ‪ 2021‬أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬

‫التربة لتتعذر داخؿ شرانؽ حريرية بيضاء لمدة أسبوعيف إلى ثالثة أسابيع حسب الظروؼ‬
‫الجوية‪ ،‬تخرج الحشرة الكاممة لتبدأ بالتزاوج ووضع البيض‪ ،‬وليا جيؿ واحد في العاـ‪.‬‬
‫تضع اإلناث البيض بواقع ‪ 100‬بيضة لؤلنثى الواحدة‪ ،‬ولمدة ‪ 18 - 10‬يوماً (‪Al-‬‬
‫‪ .)Zyoud, 2007‬توجد بكتيريا ‪ B.t‬بشكؿ طبيعي في التربة‪ ،‬وفي الحشرات الميتة‬
‫والمياه )‪ .(Schnepf et al., 1998‬وتعد مستحضرات ‪ B.t‬مف أنجح منتجات المكافحة‬
‫الحيوية عالمياً )‪ .(Kaur, 2002‬ىناؾ دراسات قميمة حوؿ تأثير ىذه البكتيريا عمى حشرة‬
‫دودة الزرع ‪ ،S. temperatella‬ففي دراسة أجريت في األردف حوؿ تقييـ فعالية عزالت‬
‫مف البكتيريا ‪ B.t‬تحت الظروؼ المختبرية‪ ،‬أشارت النتائج أف نسبة موت اليرقات تأثرت‬
‫بالتركيز المستخدـ وبمدة المعاممة‪ ،‬إذ بمغ متوسط نسبة الموت المصححة عند تركيز ‪× 1‬‬
‫‪ %73 :108‬و ‪ %78‬و ‪ %80‬بعد ‪ 3‬و ‪ 5‬و ‪ 7‬أياـ مف معاممة اليرقات عمى نبات‬
‫القمح عمى التوالي )‪.(Al-Zyoud et al., 2011‬‬

‫مبررات البحث‪ :‬تأتي أىمية البحث مف الضرر الذي تحدثو دودة الزرع‪ ،‬والتي تعد إحدى‬
‫اآلفات الحشرية الميمة عمى القمح والشعير في محافظة الحسكة في السنوات األخيرة‬
‫مسببة ضر اًر اقتصادياً لممحصوليف مع غياب طرائؽ المكافحة الفعالة في ضبط مجتمع‬
‫الحشرة وصعوبة مكافحتيا نظ اًر لطبيعة معيشتيا ضمف األنفاؽ‪ ،‬واحالؿ البدائؿ الحيوية‬
‫مكاف المبيدات الكيميائية‪.‬‬

‫هدف البحث‪ :‬ىدؼ ىذا البحث إلى تقييـ فاعمية الساللة البكتيرية ‪ B.t‬ساللة ‪kurstaki‬‬
‫في مكافحة يرقات ىذه الحشرة مختبرياً بالطريقتيف الوقائية والعالجية‪.‬‬

‫مواد البحث وطرائقه‬

‫‪ -1‬تحضير المستعمرة األم لدودة الزرع‪ :‬أجريت التجارب في مركز تربية واكثار األعداء‬
‫الحيوية في الالذقية خالؿ عاـ ‪ .2020‬نفذت عممية الزراعة بشير تشريف الثاني مف عاـ‬
‫‪ ،2019‬استخدمت أكياس البولي اثيمف السوداء بقطر ‪ 25‬سـ وعمؽ ‪ 30‬سـ‪ ،‬تمت تعبئة‬
‫‪ 20‬كيس ًا بنسبة خمط (‪ )25 :25 :50‬تربة حمراء ورمؿ وتورب عمى التوالي‪ ،‬زرع في‬
‫كؿ كيس ‪ 20‬حبة مف صنؼ الشعير (عربي أسود) ضمف بيت شبكي‪ ،‬بعد ‪ 15‬يوـ مف‬

‫‪15‬‬
 ‫بالطريقتين العالجية ‪ Kurstaki‬الساللة ‪Bacillus thuringiensis Berliner‬تأثير البكتيريا‬
‫‪Syringopais temperatella‬والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع)‬
‫مختبريا‪Led.‬‬
‫الزراعة أجريت عممية خؼ لمنباتات وتـ اعتماد ‪ 10‬نباتات لكؿ كيس لتربية يرقات دودة‬
‫الزرع عمييا وتكويف مجتمع أـ لميرقات‪ .‬تـ جمع يرقات الحشرة مع عائميا النباتي بشير‬
‫شباط مف مدينة قامشمي – قرية حطيف مف حقؿ مزروع بصنؼ الشعير (عربي أسود)‬
‫وكانت اليرقات بالعمر اليرقي األوؿ‪ ،‬ووضعت ‪ 100‬مف النباتات المصابة بالحشرة مع‬
‫تربتيا في أصص بالستيكية ونقمت إلى دائرة المكافحة الحيوية في الالذقية إلجراء العدوى‬
‫بيا وتكويف مجتمع أـ ليا‪ .‬عزلت اليرقات مف النباتات المصابة في المختبر ونقمت بمطؼ‬
‫بواسطة فرشاة ناعمة إلى أطباؽ بتري‪ ،‬وتـ إعداء النباتات المزروعة مف الصنؼ (عربي‬
‫أسود) الموجودة داخؿ البيت الشبكي عند وصوليا لمرحمة السنبمة بيذه اليرقات‪ ،‬لتكويف‬
‫مجتمع أـ لدودة الزرع وذلؾ بيدؼ الحصوؿ عمى العمر اليرقي المناسب إلجراء التجارب‬
‫المختبرية‪.‬‬

‫‪ -2‬تحضير المعمق البكتيري‪:‬‬

‫تـ الحصوؿ عمى المستعمرة األـ لبكتيريا ‪ B.t‬ساللة ‪ kurstaki‬بعمر يوميف مف مركز‬
‫البحوث العممية الزراعية في محافظة حمب مزروعة عمى بيئة اآلغار المغذي ‪Nutrient‬‬
‫‪ agar‬ومحفوظت عند درجت حزارة ‪ 4‬م‪ ،°‬نميت البكتيريا عمى بيئة مرؽ المحـ ‪Nutrient‬‬
‫‪broth‬وحضنت لمدة يوميف عمى درجة ح اررة ‪ 1±37‬ـ‪ °‬ورطوبة ‪ .%65‬استخدمت‬
‫طريقة التخفيؼ المتسمسؿ لتحضير المعمؽ البكتيري )‪ ،(Kell et al., 1998‬حيث‬
‫أضيؼ ‪ 1‬مؿ مف المستعمرة البكتيرية السائمة إلى ‪ 9‬مؿ ماء مقطر معقـ حيث اعتبر‬
‫الناتج ىو المحموؿ األـ‪ ،‬وحضر منو خمسة تخفيفات متتالية لتسييؿ عممية عد‬
‫المستعمرات‪ .‬اعتمد كؿ مف التخفيؼ األوؿ والثالث والخامس حيث أخذ مف كؿ تخفيؼ‬
‫‪ 10 µL‬بواسطة ماصة ميكرونية وزرعت عمى بيئة ‪ Nutrient agar‬ضمف طبؽ بتري‬
‫وحضف عمى نفس الشروط السابقة لمدة يوميف‪ ،‬لوحظ أف الطبؽ المزروع مف المحموؿ‬
‫المخفؼ خمس مرات ىو األنسب لمعد (‪ 100‬مستعمرة تقريباً)‪ ،‬حيث أف عدد المستعمرات‬
‫في الطبؽ يمثؿ عدد الخاليا البكتيرية الحية في ‪ 10 µL‬مف المحموؿ‪ ،‬ويكوف‪:‬‬

‫‪16‬‬
 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد ‪ 43‬العدد ‪ 20‬عام ‪ 2021‬أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬

‫تركيز المعمؽ البكتيري األـ = عدد المستعمرات الطبؽ × ‪( 100‬لمتحويؿ مف ‪ 10µL‬إلى‬

‫‪ 1‬مؿ) × مقموب التخفيؼ‬

‫= ‪ 109 = 105 × 100 × 100‬خمية‪ /‬مؿ‬

‫ومف ثـ تـ تخفيؼ المعمؽ األـ لمحصوؿ عمى التركيز المطموب (وىو ‪ 107‬خمية‪ /‬مؿ)‬
‫وفؽ المعادلة )‪(Lacey, 2012‬‬
‫نسبة التخفيؼ= التخفيؼ المحسوب ‪ /‬التخفيؼ المطموب = ‪ 100 = 107 / 109‬مرة‪،‬‬
‫حيث أضيؼ ‪ 1‬مؿ مف المحموؿ األـ تركيز ‪ 109‬خمية‪ /‬مؿ إلى ‪ 99‬مؿ ماء مقطر معقـ‬
‫لمحصوؿ عمى تركيز ‪ 107‬خمية‪ /‬مؿ‪.‬‬
‫‪ -3‬تصميم وتنفيذ التجارب‪:‬‬

‫التجربة العالجية‪ :‬شممت ثالث معامالت (‪ ،B.t‬شاىد وشاىد قياسي) لكؿ معاممة ‪5‬‬
‫مكررات (المكرر= طبؽ بتري قطر ‪ 9‬سـ)‪ ،‬حيث أخذت أوراؽ مصابة بيرقات العمر‬
‫الثالث لدودة الزرع مف المستعمرة األـ‪ ،‬تـ قص األوراؽ المصابة إلى أجزاء‪ ،‬إذ كؿ جزء‬
‫بطوؿ ‪ 5‬سـ يحتوي عمى يرقة واحدة فقط‪ ،‬ووزعت بمعدؿ ‪ 5‬أجزاء لكؿ طبؽ بتري‪ ،‬تـ‬
‫تحضير ‪ 15‬طبؽ وكؿ طبؽ مجيز بقطف بسماكة ‪ 0.5‬سـ وورقة ترشيح عمى القطف‪،‬‬
‫رطبت األطباؽ بماء مقطر وفتح لكؿ طبؽ باستخداـ مشرط تشريح فتحة تيوية مف‬
‫األعمى مغطاة بقطعة قماش مف الموسيميف الناعـ لتأميف التيوية الجيدة ومنع خروج‬
‫اليرقات مف الطبؽ‪ .‬بعد ذلؾ تـ رش المكررات بالمعمؽ البكتيري ‪ B.t‬باستخداـ مرش‬
‫صغير ‪ 15‬مؿ وبمعدؿ ‪ 2‬مؿ لكؿ طبؽ‪ .‬بنفس الطريقة عوممت مكررات الشاىد القياسي‬
‫باستخداـ مبيد ‪ Paydor 70% WDG‬المادة الفعالة اميداكموبرايد ‪ ،%70‬بالتركيز‬
‫المنصوح بو ‪ 0.2‬غ‪/‬ؿ‪ .‬بينما عوممت مكررات الشاىد بالماء المقطر‪.‬‬

‫التجربة الوقائية‪ :‬نفذت بنفس خطوات التجربة السابقة‪ ،‬ولكف بأخذ أوراؽ سميمة مف صنؼ‬
‫الشعير (عربي أسود) وتوزيعيا ضمف األطباؽ‪ ،‬ورشيا كما سبؽ لكؿ معاممة‪ ،‬ثـ نقمت‬
‫اليرقات إلى األطباؽ مف المستعمرة األـ لدودة الزرع‪ .‬بعد إتماـ عممية الرش وضعت‬

‫‪17‬‬
 ‫بالطريقتين العالجية ‪ Kurstaki‬الساللة ‪Bacillus thuringiensis Berliner‬تأثير البكتيريا‬
‫‪Syringopais temperatella‬والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع)‬
‫مختبريا‪Led.‬‬
‫المعامالت ضمف شروط المختبر (ح اررة ‪ 2 ± 25‬س‪ °‬ورطوبة ‪ ،)%65‬تمت المراقبة‬
‫لمتجربة وسجؿ عدد اليرقات الميتة‪.‬‬

‫حساب نسبة الموت‪:‬‬

‫تـ أخذ عدد اليرقات الحية والميتة لكؿ مكرر بكؿ معاممة بعد ‪72 – 48 – 24 – 12‬‬
‫ساعة مف بدأ التجربة‪ ،‬ثـ حسبت نسبة الموت التي سببيا التركيز المستخدـ مف‬
‫بكتيريا ‪ B.t‬ساللة ‪ ،kurstaki‬وصححت ىذه النسبة وفقاً لمعادلة )‪:Abbott (1925‬‬
‫نسبة الموت المصححة= (النسبة المئوية لمموت في المعاممة – النسبة المئوية في‬
‫الشاىد‪ – 100/‬النسبة المئوية لمموت في الشاىد) × ‪.100‬‬

‫تصميم التجارب والتحميل اإلحصائي‪:‬‬

‫‪Randomized‬‬ ‫صممت تجارب البحث باستخداـ التصميـ العشوائي الكامؿ‪،‬‬
‫‪ ،)RCD( Complete Design‬وحممت النتائج إحصائياً باستخداـ تحميؿ التبايف‬
‫‪ ANOVA‬عند أقؿ فرؽ معنوي (‪ ،)LSD‬وعند مستوى معنوية ‪ .%1‬باستخداـ حزمة‬
‫برنامج اإلحصائي ‪.(SPSS, 1979) SPSS V.20‬‬
‫النتائج والمناقشة‬
‫‪ -1‬تقدير نسب الموت بين المعامالت المختمفة‪ :‬يبيف الجدوؿ (‪ ،)1‬تفاوتاً في متوسط‬
‫نسب الموت المصححة بيف المعاممتيف المختبرتيف (عالجية ووقائية) ومعاممة الشاىد‬
‫القياسي خالؿ فترات زمنية مختمفة‪ ،‬إذ بمغ متوسط نسبة الموت المصححة في اليوـ‬
‫األخير لمتجربة (بعد ‪ 72‬ساعة) في الشاىد القياسي ‪ ،%100‬في حيف لـ يتجاوز متوسط‬
‫نسبة الموت المصححة ليرقات دودة الزرع المعاممة بالطريقة العالجية ‪ ،%58‬أما متوسط‬
‫نسبة الموت المصححة لميرقات المعاممة بالطريقة الوقائية فقد بمغ ‪ .%95‬وأظيرت نتائج‬
‫التحميؿ اإلحصائي عدـ وجود فروؽ معنوية بيف معاممة الشاىد القياسي والمعاممة‬
‫بالطريقة الوقائية )‪ (p = 0.825‬مما يدؿ عمى تساوي فعالية الرش الوقائي بالبكتيريا ‪B.t‬‬
‫ساللت ‪ Kurstaki‬مع فعالية الرش بالمبيد الكيميائي ‪ ،Paydor 70%‬بينما وجد فرؽ‬

‫‪18‬‬
 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد ‪ 43‬العدد ‪ 20‬عام ‪ 2021‬أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬

‫معنوي بيف كؿ مف معاممة الشاىد القياسي والمعاممة بالطريقة العالجية (‪،)p = 0.003‬‬
‫كما وجد فروؽ معنوية بيف المعاممتيف المختبرتيف نفسيا عالجية ووقائية (‪.)p = 0.006‬‬

‫‪S.‬‬ ‫نسبة الموت المصححة حسب معادلة ‪ Abbott‬ليرقات دودة الزرع‬ ‫الجدول (‪)1‬‬
‫‪ Bacillus thuringiensis‬الساللة ‪kurstaki‬‬ ‫‪ temperatella‬بعد رشيا بالمعمؽ البكتيري‬
‫خالؿ فترات زمنية مختمفة‪.‬‬

‫نسبة الموت الطبيعي‬ ‫متوسط نسبة الموت المصححة ‪%‬‬ ‫المعاممة‬

‫بالشاىد ‪%‬‬ ‫شاىد قياسي‬ ‫رش وقائي‬ ‫رش عالجي‬ ‫(ساعات بعد‬
‫المعاممة)‬
‫‪0‬‬ ‫‪16 D,b‬‬ ‫‪0 D,c‬‬ ‫‪0 C,c‬‬ ‫‪12‬‬
‫‪0‬‬ ‫‪44 C,b‬‬ ‫‪48 C,b‬‬ ‫‪12 C,c‬‬ ‫‪24‬‬
‫‪0.4‬‬ ‫‪65 B,b‬‬ ‫‪73 B,b‬‬ ‫‪30 B,c‬‬ ‫‪48‬‬
‫‪0.6‬‬ ‫‪100 A,a‬‬ ‫‪95 A,a‬‬ ‫‪58 A,b‬‬ ‫‪72‬‬
‫المتوسط ‪±‬‬
‫‪0.25±0.44‬‬ ‫‪32.47±56.25‬‬ ‫‪37±54‬‬ ‫‪24.12±25‬‬ ‫االنحراؼ‬
‫المعياري‬
‫المتوسطات التي يتبعيا أحرؼ صغيرة متشابية ضمف السطر الواحد وأحرؼ كبيرة متشابية‬
‫ضمف العمود الواحد تدؿ عمى عدـ وجود فروؽ معنوية بيف المعامالت عند مستوى معنوية ‪%1‬‬

‫كما بينت نتائج التحميؿ اإلحصائي عدـ وجود فروؽ معنوية بيف متوسط نسبة الموت‬
‫المصححة لممعاممتيف العالجية والوقائية خالؿ القراءة األولى (‪ 12‬ساعة) )‪،(p= 1.000‬‬
‫بينما وجد فروؽ معنوية بيف المعاممتيف ومعاممة الشاىد القياسي )‪ .(p= 0.000‬وتغيرت‬
‫نتائج التحميؿ اإلحصائي عند القراءة الثانية (‪ 24‬ساعة) والثالثة (‪ 48‬ساعة) لتظير وجود‬
‫فروؽ معنوية بيف المعاممة العالجية والمعاممتيف الوقائية والشاىد القياسي (‪p= 0.000‬‬
‫و‪ )p= 0.002‬لمقراءتيف الثانية والثالثة عمى التوالي‪ ،‬وعدـ وجود فروؽ معنوية بيف‬
‫المعاممة العالجية ومعاممة الشاىد القياسي (‪ p= 0.552‬و ‪ )p= 0.392‬لمقراءتيف الثانية‬
‫‪19‬‬
 ‫بالطريقتين العالجية ‪ Kurstaki‬الساللة ‪Bacillus thuringiensis Berliner‬تأثير البكتيريا‬
‫‪Syringopais temperatella‬والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع)‬
‫مختبريا‪Led.‬‬
‫والثالثة عمى التوالي‪ ،‬مما يعني تساوي المعاممة بالطريقة العالجية مع معاممة المبيد‬
‫الكيميائي بالفاعمية عمى يرقات العمر الثالث لدودة الزرع‪ ،‬حيث بمغ متوسط نسبة الموت‬
‫المصححة لميرقات ‪ % 44 ،48‬في القراءة الثانية لممعاممة الوقائية ومعاممة المبيد و ‪،73‬‬
‫‪ %65‬في القراءة الثالثة عمى التوالي‪ .‬كما أظيرت نتائج التحميؿ خالؿ القراءة الرابعة‬
‫(‪ 72‬ساعة) وجود فروؽ معنوية بيف المعاممة العالجية والمعاممتيف الوقائية والشاىد‬
‫القياسي )‪ ،(p= 0.000‬وعدـ وجود فروؽ معنوية بيف المعاممة الوقائية ومعاممة الشاىد‬
‫القياسي )‪ (p= 0.441‬حيث بمغ متوسط نسبة الموت المصححة لميرقات ‪%100 ،95‬‬
‫لممعاممة الوقائية ومعاممة الشاىد القياسي عمى التوالي‪.‬‬
‫‪ -2‬اختالف نسبة الموت مع الزمن‪ :‬يبيف (الشكؿ ‪ )1‬ارتفاعاً في متوسط نسب الموت‬
‫المصححة لكؿ معاممة مع الزمف (زيادة مدة المعاممة)‪ ،‬إذ بمغ متوسط نسبة الموت‬
‫المصححة في اليوـ األخير لمتجربة (بعد ‪ 72‬ساعة) أعمى قيمة لو في جميع المعامالت‬
‫المختبرة‪ ،‬في حيف كاف متوسط نسبة الموت المصححة ليرقات دودة الزرع المعاممة‬
‫بالقراءة األولى ‪ %0‬بالمعاممة العالجية ‪ A‬والمعاممة الوقائية ‪ B‬ولـ يتجاوز ‪ %16‬في‬
‫معاممة الشاىد القياسي ‪ .D‬وأظيرت نتائج التحميؿ اإلحصائي لنسبة الموت المصححة‬
‫عدـ وجود فرؽ معنوية بيف قراءة ‪ 12‬ساعة وقراءة ‪ 24‬ساعة لممعاممة بالرش العالجي ‪A‬‬
‫حيث )‪ ،(p= 0.069‬في حيف وجدت فروؽ معنوية بيف باقي القراءات لممعاممة بالرش‬
‫العالجي ‪ .A‬أما باقي المعامالت (الرش الوقائي ‪ B‬والشاىد القياسي ‪ )D‬وجدت فروقات‬
‫معنوية بيف األربع قراءات لكؿ معاممة مع الزمف حيث )‪.(p≤ 0.069‬‬

‫‪20‬‬
 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد ‪ 43‬العدد ‪ 20‬عام ‪ 2021‬أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬

‫‪100‬‬
‫متوسط نسبة الموت المصححة (‪)%‬‬ ‫‪80‬‬

‫‪60‬‬

‫‪40‬‬

‫‪20‬‬

‫‪0‬‬
‫‪12‬‬ ‫‪24‬‬ ‫‪48‬‬ ‫‪72‬‬
‫الزمن (ساعة)‬

‫‪A‬‬ ‫‪B‬‬ ‫‪D‬‬ ‫‪C‬‬

‫‪S.‬‬ ‫نسبة الموت المصححة حسب معادلة ‪ Abbott‬ليرقات دودة الزرع‬ ‫الشكل (‪)1‬‬
‫‪ temperatella‬لممعامالت ‪ B.t‬عالجي )‪ B.t ،(A‬وقائي )‪ ،(B‬شاىد قياسي )‪ (D‬وشاىد عادي‬
‫)‪ (C‬مع زيادة مدة المعاممة‪.‬‬

‫تختمؼ نتائج ىذا البحث مع (‪ )Al-Zyoud et al., 2011‬بالمعاممة العالجية ببكتريا‬

‫‪7‬‬
‫إذ بمغ متوسط نسبة الموت المصححة ليرقات العمر الثالث لدودة‬ ‫‪ B.t‬تركيز ‪10 × 1‬‬
‫الزرع ‪ %56.7‬في اليوـ الثالث (‪ 72‬ساعة) بينما كاف متوسط نسبة الموت المصححة‬
‫ليرقات العمر الثالث لدودة الزرع في اليوـ الثالث في ىذا البحث ‪ ،%58‬وال يعد ىذا‬
‫االختالؼ ذو قيمة معنوية نظ اًر لصغره وتقارب الرقميف‪ ،‬وتتفؽ نتائج ىذا البحث مع نتائج‬
‫)‪ (Al-Zyoud et al., 2011‬مف ناحية أخرى بارتفاع متوسط نسبة الموت المصححة‬
‫لميرقات مع زيادة مدة المعاممة إذ كانت ‪ 54.4 ،46.7 ،28.8‬و ‪ %63.8‬عند ‪،3 ،1‬‬
‫‪ 5‬و ‪ 7‬أياـ مف المعاممة‪ ،‬وذلؾ ألف االعراض المرضية تبدأ بالظيور في اليوـ التالي مف‬
‫المعاممة (بعد ‪ 24‬ساعة)‪ ،‬حيث يالحظ خموؿ عمى الحشرات المعاممة وتتوقؼ عف األكؿ‬
‫ويقؿ نشاطيا وتموت الحشرات المصابة‪ ،‬حيث ذكر الزبيدي (‪ )1992‬إف ابتالع الحشرة‬
‫ال لمقناة اليضمية الوسطى بعد ‪ 20‬دقيقة وبعد ‪7‬‬
‫لمبكتريا ‪ B.thuringiensis‬ي ْحدث شم ً‬
‫ساعات ي ْحدث شمالً عاماً لمحشرة يرافؽ ذلؾ زيادة في ‪ pH‬الدـ مما يسبب انسياباً‬
‫لمحتويات المعدة الى الدـ‪.‬‬

‫‪21‬‬
 ‫بالطريقتين العالجية ‪ Kurstaki‬الساللة ‪Bacillus thuringiensis Berliner‬تأثير البكتيريا‬
‫‪Syringopais temperatella‬والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع)‬
‫مختبريا‪Led.‬‬
‫كما ذكر ‪ )1998( Burges‬أف اليرقات إذا تناولت الغذاء المعامؿ بالبكتريا‬
‫‪ B.thuringiensis‬فإنيا تتوقؼ عف التغذية بعد ‪ 20‬دقيقة وتتوقؼ حركتيا بعد ساعتيف‬
‫وأف اليرقات تموت بعد ‪ 2-1‬يوـ‪ .‬كما فسر آلية إحداث التأثير داخؿ جسـ اليرقة عف‬
‫طريؽ أخذ مقاطع ألجساـ اليرقات بأوقات مختمفة أظيرت تسمسالً نموذجياً لوجود الخاليا‬
‫البكتيرية في األجزاء المقطوعة بمحاذاة ظيارة الخمية إذ أعطت شكوكاً بأف الخمية بدأت‬
‫بالتضخـ وفي النياية تتحمؿ وتنتشر البكتريا خالؿ الجدار القاعدي وبعدىا تمؤل التجويؼ‬
‫الحشوي خارج الجدار مع التحطيـ المستمر وعند قرب موت اليرقات تمؤل البكتريا أحشاء‬
‫اليرقة متضمنة بمورات البكتريا البروتينية ‪ Cry proteins‬الممموءة بالسموـ الداخمية‬
‫‪ Endotoxins‬وتغزو باقي أحشاء الجسـ وتتضاعؼ‪.‬‬

‫في حيف ذكر توفيؽ (‪ )1997‬أف األطوار اليرقية المبكرة غالباً ما تكوف أكثر حساسية‬
‫لممرض مف األطوار المتقدمة والتي تبدي نمطاً مف المناعة يطمؽ عميو مناعة البموغ‬
‫(‪ )Maturation immunity‬ويعزى مرض األطوار األخيرة عادةً لخمؿ تركيبي أو‬
‫فسيولوجي نجـ عف إصابة األطوار المبكرة بالمرض‪.‬‬

‫وقد أشارت النتائج الحالية الى أف نسبة الموت تكوف منخفضة بعد المعاممة مباشرة‬
‫وتزداد نسبة الموت بزيادة زمف التعرض‪ ،‬فقد كانت نسب الموت في المدة ‪ 72‬ساعة‬
‫أعمى مف بقية المدد الزمنية المستخدمة في البحث وقد يعود السبب الى احتياج البكتريا‬
‫‪ B.thuringiensis‬الى الوقت الالزـ والكافي الى الوصوؿ الى معدة الحشرة وتحمؿ‬
‫البكتريا ومف ثـ تحمؿ البمورة وانطالؽ السموـ الداخمية ‪ ،Endotoxins‬كما أف البكتريا‬
‫تبدأ بالتكاثر داخؿ أحشاء الحشرة لحيف قتميا وىذا يستغرؽ وقتاً لموصوؿ الى األعداد‬
‫المناسبة إلحداث القتؿ‪ ،‬كما بينت النتائج أيضاً أف الطريقة العالجية أبطئ وأقؿ في‬
‫التأثير مف الطريقة الوقائية وقد يرجع ىذا التأخير في التأثير إلى احتياج أبواغ البكتيريا‬
‫مدة زمنية إضافية لدخوؿ النبات عف طريؽ الثغور الطبيعية أو الجروح الميكانيكية أو‬
‫ثقوب دخوؿ وخروج اليرقات في نصؿ الورقة النباتية ومف ثـ الوصوؿ إلى اليرقات‪،‬‬
‫األمر الذي يقمص أعداد البكتريا الناجحة بالوصوؿ إلى مكاف تواجد اليرقات وبالتالي‬

‫‪22‬‬
 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد ‪ 43‬العدد ‪ 20‬عام ‪ 2021‬أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬

‫انخفاض نسب الموت ليرقات دودة الزرع‪ ،‬إذ ذكر ‪ Martin‬و ‪ )2005( Wajih‬أف‬
‫اليرقة المصابة بػ ‪ B.thuringiensis‬تتوقؼ عف التغذية عندما يبدأ السـ بتحميؿ خاليا‬
‫أمعائيا ويحدث الموت الحقاً بعد عدة أياـ وذلؾ بحسب العمر اليرقي‪ .‬إف دخوؿ أبواغ‬
‫البكتريا إ لى القناة اليضمية لمحشرة يؤدي الى نموىا وتضعفيا داخؿ القناة اليضمية‬
‫الوسطى مؤث اًر عمى بطانة القناة اليضمية ومؤدياً الى موت اليرقة (الزبيدي‪1992 ،‬؛‬
‫العادؿ‪ .)2006 ،‬بيف ‪ Lonc‬وآخروف (‪ )2007‬اف معاممة يرقات ديداف ‪Tenebrio‬‬
‫‪ molitor‬سببت نسبة قتؿ لميرقات بمغت ‪ % 13.3‬وع از سبب انخفاض النسبة الى أف‬
‫السـ الداخمي ‪ Endotoxin‬يتحمؿ في معدة اليرقات نتيجة انخفاض األس الييدروجيني‬
‫‪ pH‬في المعدة وأف التأثير ناتج عف تكاثر األبواغ البكتيرية داخؿ أغشية القناة اليضمية‬
‫الوسطى‪.‬‬

‫االستنتاجات‪:‬‬

‫تفوؽ استخداـ الطريقة الوقائية في السيطرة عمى دودة الزرع ‪ ،S. temperatella‬حيث‬
‫ارتفعت نسبة اليرقات الميتة وانخفض الوقت الالزـ لموتيا بالمقارنة مع استخداـ الطريقة‬
‫العالجية‪ ،‬وأعطت الطريقة الوقائية نتائج توازي فعالية المبيدات الكيميائية‪.‬‬

‫التوصيات‪:‬‬

‫أىمية اختيار الوقت األنسب لبدء عممية المكافحة‪ ،‬وضرورة وضع برامج مكافحة استباقية‬
‫دقيقة باستخداـ البكتيريا ‪ B.t‬ساللة ‪ kurstaki‬الستيداؼ وقت ظيور الطور الحساس‬
‫مف اآلفة (األعمار اليرقية المبكرة) وقبؿ تفشي اإلصابة في الحقؿ لضماف تحقيؽ‬
‫االستفادة القصوى مف عممية المكافحة‪.‬‬

‫‪23‬‬
 ‫تأثير البكتيريا‬Bacillus thuringiensis Berliner ‫ الساللة‬Kurstaki ‫بالطريقتين العالجية‬
)‫والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع‬Syringopais temperatella
Led.‫مختبريا‬
‫المراجع‬
References

‫ و ازرة التعميـ العالي‬.‫ المقاومة الحيوية لآلفات‬.1992 .‫ حمزة كاظم‬،‫الزبيدي‬ .1

.‫ صفحة‬440 .‫جامعة الموصؿ‬/‫والبحث العممي‬
.‫جامعة بغداد‬/‫ كمية الزراعة‬.‫ مبيدات اآلفات‬.2006 .‫ خالد محمد‬،‫العادل‬ .2
.‫ صفحة‬422
‫ المكتبة‬.‫ المكافحة البيولوجية لآلفات الزراعية‬.1997 .‫ محمد فؤاد‬،‫توفيق‬ .3
.‫ صفحة‬757 .‫ القاىرة‬.‫ الدقي‬.‫األكاديمية‬
‫ دليؿ زراعة‬.)2007( ‫ خميل الشيخ وعز الدين السيد‬،‫ صالح‬،‫عثمان‬ .4
.‫ صفحة‬13 ،‫ سوريا‬،‫ منشورات جامعة حمب‬،‫محصوؿ القمح‬
5. Abbott, W.S., 1925. A method of computing the
effectiveness of an insecticide. J. Econ. Entomol., 18: 265–267.
6. Al-Dababseh, B., Meihiar, M., Al-Zyoud, F. and
Ghabeish, I. (2014), Pathogenicity of Syrian isolates of Bacillus
thuringiensis (Berliner) against the cereal leafminer Syringopais
temperatella Led. (Lep., Scythrididae) under laboratory
conditions. Jor. J. Biol. Sci, 7, 155-160.
7. Al-Zyoud, F. (2007), Investigations on certain biological and
ecological parameters of the cereal leafminer Syringopias
temperatella Led. (Lep., Scythrididae). Bull. Fac. Agric., Cairo
Univ., 58, 164-172.
8. Al-Zyoud, F., Al-Emiri, N. and Al-Omari, A. (2011),
Efficacy of the insecticidal bacterium Bacillus thuringiensis
(Berliner) against the cereal leafminer Syringopais temperatella
Led. (Lep., Scythrididae) under laboratory conditions. Jor. J.
Agric. Sci, 7, 83-92.

24
 ‫ أسعد حسن مالك عمران جمال األحمد صالح الصالح‬2021 ‫ عام‬20 ‫ العدد‬43 ‫مجلة جامعة البعث ــ المجلد‬

9. Burges, H.D. 1998. Formulation of microbial Biopsticides.

Kluwer Academic Publisers. London, U.K. 412 pags.
10. Daamen, R.A., Wijnands, F.G. and Vliet, G. (1989),
Epidemic of diseases and pests of winter wheat at different levels
of agrochemical input. J. Phytopath., 125, 305-319.
11. DELUCCA, A.J., J.G. SIMONSON and A.D. LARSON.
1981. Bacillus thuringiensis distribution in soils of the United
States. Can. J. Microbiol., Vol. 27, 865- 870.
12. Jemsi, G., Shojai, M., Radjabi, G. and Ostovan, H. 2002.
Study on economic population dynamic, biology, host range and
economic threshold of cereal leafminer in Khuzestan. J. Agri. Sci.,
8: 1-21.
13. ICARDA Annual Report, 2006. Corporate annual report,
Aleppo, Syria.
14. Kaur S. 2002. Potential for developing novel Bacillus
thuringiensisstrains and transgenic crops and their implications for
Indian agriculture. Ag Biotech Net, 4: 1-10.
15. Kell DB, Kaprelyants AS, Weichart DH, Harwood CR,
Barer MR. Viability and activity in readily culturable bacteria: a
review and discussion of the practical issues. Antonie van
Leeuwenhoek. 1998 Feb 1;73(2):169-87.
16. Lacey, L.A. 2012. Manual of techniques in invertebrate
pathology. Second edition. Elsevier Ltd, USA. 513 pp.
17. Lonc, E.; Forkt, A. and Anderzejck, S. 2007.
Histopathological effects of entomopathogenic Bacillus
thuringiensis isolates on the midgut of the yellowmealwarm larvae.
medycyna 63(9): 1049- 1051.
18. Martin, J.C. and Wajih, K. 2005. Thaumetopoea
pityocampa biology complex parasitize of protection in fortes.
INRA. France. 63 pp.
19. Schnepf E,Crickmore N, Van Rie J,Lereclus D, Baum
J,Feitelson J, Ziegler DR and Dean DH.1998. Bacillus
25
 ‫تأثير البكتيريا‬Bacillus thuringiensis Berliner ‫ الساللة‬Kurstaki ‫بالطريقتين العالجية‬
)‫والوقائية في مكافحة يرقات حفار أوراق النجيليات (دودة الزرع‬Syringopais temperatella
Led.‫مختبريا‬
thuringiensisand its pesticidal proteins. Microbiol Molec Biol Rev.,
62: 775-806.
20. SPSS, Statistical Product and Service Solutions INC,
1997. SIGMASTAT 2.03: SigmaStat Statistica software user's
manual, Chicago, United States.

26