‫‪25/07/41‬‬

‫تكنىنىجيا سراعيت‬
‫مقدمة عن علم زراعة االنسجة النباتية‬

‫أهذاف انًساق انعايت‬

‫‪ ‬التعرف علي أساسيات التكنولوجيا الزراعية التي تتضمن زراعة االنسجة و‬
‫االعضاء النباتية مخبريا‪,‬‬
‫‪ ‬التعرف علي تطبيقات و اهتمامات التكنولوجيا الزراعية‪,‬‬
‫‪ ‬التعرف علي التقنيات العملية و البحثية المستخدمة في التكنولوجيا‬
‫الزراعية‪,‬‬
‫‪ ‬يواكب تقدم البحث العلمي في مجال تكنولوجيا الزراعة عالميا بناء علي‬
‫المعارف االساسية التي تمت دراستها‪.‬‬
‫‪**‬ان يكون لدي الطالب قدرات علمية عملية يمكن من خاللها ان تخدم‬
‫المجتمع و ان يستطيع ان يشق بها طريقه منفردا أو يُسوق بها نفسه في سوق‬
‫العمل مثل الشركات التجارية للتكنولوجيا الحيوية‪.‬‬
‫‪2‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪1‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫انىصف انعاو نهًساق‬

‫‪‬ال شك بأن محور االرتكاز الجوهري لكل اتجاهات البحث في مجال‬
‫التكنولوجيا الحيوية الزراعية هو فن زراعة األنسجة النباتية خارج جسم‬
‫الكائن الحي التي تنوعت تقنياتها و بالتالي مجاالت اهتماماتها فهي االن‬
‫ليست مجرد وسيلة إلكثار النبات و لكنها تهتم ب‪:‬‬
‫‪ ‬إنتاج النباتات بكميات هائلة (اكثار دقيق) و تحسين ساللتها‪,‬‬
‫‪ ‬استنباط و انتخاب سالالت جديدة ذات مواصفات مرغوبة مثل مقاومة‬
‫االمراض (الفيروسية و الفطرية و الحشرية)‪,‬‬
‫‪ ‬التكيف ضد الجفاف أو ملوحة التربة أو ملوحة ماء الري‪,‬‬
‫‪3‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫تابع انىصف انعاو نهًساق‬

‫‪ ‬كما تهتم في انتاج نباتات احادية المجموعة الكروموسومية‪,‬‬
‫‪ ‬انتاج النباتات المذكرة و المؤنثة و هو امر في غاية االهمية حيث يكشف عن الصفات‬
‫المتنحية في النبات كما ان له تطبيقات عملية و مردود اقتصادي عظيم في نباتات متعددة‬
‫منها النخيل علي سبيل المثال‪.‬‬
‫‪ ‬كما تهتم مزارع االنسجة بإنتاج االدوية و المواد الكيمونباتية االيضية الثانوية ذات المردود‬
‫االقتصادي العالي كمضادات السرطان أو المضادات الميكروبية او انتاج الصبغات الطبيعية‬
‫بإجراء التخمرات النباتية في المفاعالت الحيوية‪.‬‬
‫‪ ‬ان المفاعالت الحيوية تلغي كل االفكار التقليدية عن طريق االستفادة من النباتات‪ ,‬فمع‬
‫المفاعالت الحيوية ال حاجة لزراعة النباتات في الحقل بعد أن اصبح من الممكن تربيتها في‬
‫صورة خاليا غير متمايزة في مزارع سائلة بالمختبر و استحالب المواد الفعالة منها بصورة‬
‫منتظمة سواء كانت عالجية أو صناعية في الوقت المطلوب و بالكميات المطلوبة و‬
‫‪4‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬
‫الصفات المرغوبة‪.‬‬

‫‪2‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫تابع انىصف انعاو نهًساق‬

‫‪ ‬كما تستخدم زراعة االنسجة كأساس في تكنولوجيا انتاج البذور الصناعية‪,‬‬
‫‪ ‬و الهندسة الوراثية النباتية بإدخال جينات ذات صفات مرغوبة للخاليا النباتية‪,‬‬
‫‪ ‬أو دمج خاليا مختلفة االصول الوراثية إلنتاج نباتات متنوعة وراثية و ذات‬
‫قيمة عالية اقتصاديا عن طريق مزارع البروتوبالست و التهجين الجسدي و من‬
‫ثم تنميتها بتقنية زراعة االنسجة‪.‬‬

‫‪5‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫خطت تذريس انًساق خالل انفصم انذراسي‬

‫الموضوعات‬ ‫األسبوع‬
‫مقدمة عن المفاهيم االساسية لعلم التكنولوجيا الزراعية‬ ‫األول‬
‫االوساط الغذائية المستخدمة في التكنولوجيا الزراعية و كيفية تحضيرها و طرق‬ ‫الثاني‬
‫التعقيم في مزارع االنسجة‬
‫مراحل االكثار بمزارع االنسجة و العوامل المؤثرة‬ ‫الثالث‬
‫طرق االكثار الدقيق ل (مزارع البذور‪ -‬مزارع االجنة –مزارع االندوسبيرم‪-‬مزارع‬ ‫الرابع و الخامس‬
‫القمم الميرستيمية‪ -‬مزارع القمم الخضرية و مزارع القطع الساقية العقدية‪.‬‬
‫كيفية الوصول إلنتاج نباتات كاملة بطريقة تكوين االعضاء أو تكوين االجنة الجسدية‬ ‫السادس و السابع‬
‫غير الزيجوتية من المنفصالت النباتية و العوامل المؤثرة‪.‬‬
‫تكوين الدرنات الدقيقة و المؤثرات في استخالف النباتات معمليا في انابيب االختبار‬ ‫الثامن‬
‫مزارع البروتوبالست و التهجين الخلوي‬ ‫التاسع‬
‫مزارع المتك و حبوب اللقاح إلنتاج النباتات االحادية‬ ‫العاشر‬
‫المزارع المستخدمة إلنتاج المواد الطبية الفعالة (مزارع الكالس‪ -‬مزارع المعلقات‬ ‫العاشر و الحادي‬
‫الخلوية‪ -‬مزارع الجذور و الشعيرات الجذرية)‪.‬‬ ‫عشر‬
‫‪6‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬
‫انتاج النباتات المهندسة وراثيا و استخالف النباتات من الخاليا المهندسة وراثيا‬ ‫الثاني و الثالث عشر‬

‫‪3‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫نبذة تاريخيت‬
‫‪ ‬بداية علم زراعة االنسجة النباتية تعود للسنوات االولي من القرن العشرين بغرض االكثار الدقيق‬
‫للنبات علي يد العالم االلماني هابرالنت ‪ .Haberlandt 1902‬و هو اول من صمم التجارب‬
‫لزراعة الخاليا النباتية المفردة علي وسط مُغذى‪ .‬و لكن لسوء الحظ لم تتمكن الخاليا من االنقسام و‬
‫النمو لعدم اضافته للهرمونات المنشطة للنمو‪.‬‬
‫‪ ‬تم استخدام مزارع الكالس و المعلقات الخلوية النباتية في نهاية الخمسينات‪,‬‬
‫‪ ‬في بداية الستينات تم انتاج المواد الفعالة النباتية من الخاليا المنزرعة علي االوساط الغذائية‬
‫السائلة و استخدم بعد ذلك كتقنية ال يمكن االستغناء عنها في النقل الوراثي النتاج الخاليا المهندسة‬
‫وراثيا‪,‬‬
‫‪ ‬تم استخالف النباتات الكاملة المهندسة وراثيا مع بداية ثمانينات القرن العشرين‪ .‬في التسعينات‬
‫بدات المحاوالت الجادة الدخال الجينات الغريبة غير النباتية االصل للخاليا النباتية و لتخليق‬
‫البروتينات الغريبة كاالنترفيرون و االجسام المضادة و الهيموجلوبين البشري‪.‬‬

‫‪7‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫يفهىو انقذرة انكاينت ‪Totipotency‬‬

‫‪ ‬العالم هنري لويس (‪ )1756‬اول من الحظ النمو المتسارع لالنسجة المقطوعة‬
‫في دراساته علي تضميد الجروح النباتية‪,‬‬
‫‪ ‬هذه المالحظة شجعت العالم شاليدن(‪ )1838‬علي ارساء دعائم النظرية الخلوية‬
‫و خصوصا مفهوم القدرة الكامنة علي التفكير العميق في تحقيق النظرية و‬
‫الحصول علي كائن كامل من خلية واحدة باعتبارها الوحدة التركيبية و الوظيفية‬
‫التي يبني منها الجسم‪.‬‬
‫‪ ‬انتبه الباحثون ان المغذيات المعدنية الالزمة لنمو النبات انما توجد في التربة و‬
‫تمكن الباحثون من تركيب محلول يمكن استخدامه بنجاح لتغذية النبات‪ .‬و قد‬
‫مثل ذلك المحلول المغذي االساس في صناعة االوساط الغذائية الحديثة‬
‫المستخدمة في مجال زراعة االنسجة‪.‬‬
‫‪8‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪4‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫يعًم سراعت االنسجت اننباتيت‬

‫‪ ‬لماذا تعتبر زراعة االنسجة من المجاالت العلمية الحديثة التي تتطلب من الباحث‬
‫خلفية علمية نظرية واسعة و قدرات عملية تطبيقية متميزة و غير تقليدية؟‬
‫‪ ‬الن التعامل مع النباتات يمر بمراحل متعددة من بداية استقبال العينات حتي خروجها من المعمل في‬
‫صور متعددة كالشتالت او البادرات او في صورة مركبات عضوية فعالة ‪ ...‬فكل مرحلة من مراحل‬
‫التعامل مع المادة النباتية لها متطلباتها الخاصة‪.‬‬
‫‪‬لماذا تحتاج االنسجة المنزرعة لدرجة كبيرة من الرعاية و العناية؟‬
‫‪ ‬النها منزرعة خارج جسم النبات ‪ in vitro‬و تعاني من صعوبات اكثر من الخاليا او اعضاء النبات‬
‫عندما تنمو في داخل جسم النبات ‪ in vivo‬النعدام التعاضد و التواصل الوظيفي و التنسيق الهرموني‬
‫‪ ‬كما ان االجزاء المفصولة من النبات و الكالس تكون اكثر في حساسيتها للمواد المضافة للوسط الغذائي‬
‫(كاألمالح مثال) اكثر من النبات النامي في التربة الن النبات النامي في التربة له مجموع جذري يمده‬
‫بما يحتاجه و في نفس الوقت يحجب عنه الكثير من المواد التي تضر به‪.‬‬
‫‪ ‬كل تلك الحقائق دفعت العلماء في التفنن في تصميم و تجهيز مختبرات االنسجة لتذليل تلك المصاعب‪.‬‬

‫‪9‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫تابع يعًم سراعت االنسجت اننباتيت‬

‫‪‬من الخطوات االولي المحورية التي يكون لها عظيم االثر في تجنب المشاكل‬
‫المستقبلية في مختبر زراعة االنسجة‪:‬‬
‫‪ ‬اختيار المكان المناسب إلنشاء معمل زراعة االنسجة‪ ,‬فيجب ان يكون بعيدا عن المصادر‬
‫الدائمة للتلوث كاألماكن التي تعاني من تيارات هوائية شديدة‪ ,‬او القريبة من الطرق الترابية‪ ,‬او‬
‫بالقرب من االماكن غير النظيفة (كمكب نفايات) التي تتكاثر فيها الحشرات و القوارض الن كل‬
‫تلك العوامل ستمثل مصادر دائمة للتلوث يجب مجابهتها باستمرار‪.‬‬
‫‪ ‬يجب اال يكون معمل زراعة االنسجة مفتوحا علي الوسط الخارجي او البيئة المحيطة بشكل‬
‫مباشر بل محكم الغلق و مزود بأجهزة التكييف للمحافظة علي درجة الحرارة بشكل مناسب‬
‫للتجهيزات المعملية و في نفس الوقت للسماح فقط للهواء المرشح بالدخول للمختبر الن ذلك‬
‫يقلل من فرص تسرب االتربة‪.‬‬
‫‪ ‬يجب ان تكون مساحة المختبر مناسبة لعدد الباحثين و العاملين به الن التكدس و كثرة الحركة‬
‫‪10‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬
‫قد تسبب الكثير من المشاكل‪.‬‬

‫‪5‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫أهى قىاعذ انعًم بانًختبز‬

‫‪ ‬معرفة العاملين بأماكن مفاتيح الكهرباء و محابس الغاز و طفايات الحريق للوصول اليها‬
‫بسرعة عند الحاجة اليها في االوقات الحرجة‪.‬‬
‫‪ ‬غسل االيدي بالصابون قبل دخول المختبر و االلتزام برداء المختبر و غطاء الراس و قناع‬
‫الفم و غطاء الحذاء‪.‬‬
‫‪ ‬عدم استخدام الفم لشفط المحاليل بالماصة لما في ذلك من ضرر علي الجهاز التنفسي‬
‫فالخطر ال يتوقف علي وصول تلك المحاليل الي الفم بل يكفي وصول ابخرتهما‪ .‬وتالفي‬
‫ذلك باستخدام مالئ الماصة ‪.pipette filler‬‬
‫‪ ‬تفادي امرار زجاجات الكحول بالقرب من اللهب في كابينة الزراعة فيتسبب بأضرار كثيرة‪.‬‬
‫‪ ‬عند التعقيم باالوتوكالف يجب عدم فتح الجهاز اال بعد ان يصل الضغط الي الصفر و درجة‬
‫الحرارة الي اقل من مائة درجة مئوية‪.‬‬
‫‪ ‬يجب حفظ الكيماويات السامة في الهود الكيميائي جيد التهوية حتي ال تتسرب ابخرتها الي‬
‫المختبر‪.‬‬

‫‪11‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪12‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪6‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫تابع أهم قواعد العمل بالمختبر‬

‫‪ ‬يجب االحتراس من محاليل التعقيم كهيبوكلورات الصوديوم (الكلوركس) و هيبوكلورات‬
‫الكالسيوم ألنها تسبب التهابات للجلد و تطلق غاز الكلورين السام عند تعرضها لألشعة‬
‫الفوق بنفسجية التي تستخدم في معامل زراعة االنسجة‪.‬‬
‫‪ ‬كلوريد الزئبق المستخدم في التطهير السطحي للمنفصالت النباتية سام للغاية فهو يمتص عن‬
‫طريق الجلد و قابل للتطاير علي درجة حرارة الغرفة و يسبب اضرار عند استنشاقه و‬
‫يجب التخلص منه بالطرق االمنة ألنه مضر بالبيئة‪.‬‬
‫‪ ‬االشعة الفوق بنفسجية المستخدمة لتعقيم غرفة الزراعة تؤثر علي شبكية العين و تسبب‬
‫الحروق للجلد و تؤثر علي الخاليا الجسدية و الجنسية و تؤدي الي توليد غاز االوزون الذي‬
‫يؤثر سلبا علي العين و الجهاز التنفسي اضافة ألنه قابل إلحداث انفجار‪.‬‬
‫‪ ‬غاز االيثيلين المستخدم لتعقيم االدوات البالستيكية يؤثر علي العين و االغشية المخاطية‬
‫كما انه قابل لالشتعال‪.‬‬

‫‪13‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪14‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪7‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫تابع أهم قواعد العمل بالمختبر‬

‫‪ ‬االوساط الغذائية المستخدمة لزراعة االنسجة مناسبة لنمو الميكروبات و من الممكن ان تنمو‬
‫عليها ميكروبات مجهولة قد تتسبب في احداث عدوي خطيرة او تسمم و يجب اعدام تلك‬
‫الميكروبات بالطريقة السليمة قبل التخلص من االوساط المستهلكة المحتوية عليها حتي ال‬
‫تتكاثر تلك الميكروبات بعد التخلص من الوسط الغذائي‪.‬‬
‫‪ ‬يجب تغطية االنابيب و اطباق بتري بطبقة من الغشاء الرقيق ‪ Parafilm‬قبل تحضينها فهو‬
‫يسمح بالتبادل الغازي و يمنع دخول الميكروبات‪.‬‬
‫‪ ‬يجب عدم المبالغة في تعقيم فوهات انابيب الزراعة و خصوصا عند استخدام لهب الميثانول‬
‫الن ذلك يولد غاز االيثيلين لذي يتراكم في انابيب الزراعة و يؤثر سلبا علي االنسجة‬
‫المنزرعة (غاز االيثيلين هو هرمون نباتي يعرف بهرمون النضج)‪.‬‬

‫‪15‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫أقساو يعًم سراعت االنسجت و اهى تجهيشاث كم قسى‬

‫‪‬ان تقسيم المختبر الي اقسام يجب ان يكون مصمما بشكل دقيق مسبق بالشكل الذي يخدم‬
‫العمل و ال ُيعيقه‪ .‬لذا ينقسم معمل زراعة االنسجة الي االقسام االتية‪:‬‬
‫‪‬أوال‪ :‬االقسام االساسية‬
‫‪ ‬غرفة الغسيل‬
‫‪ ‬غرفة اعداد الوسط الغذائي‬
‫‪ ‬غرفة الزراعة و النقل‬
‫‪ ‬غرفة النمو او الحضانة‬
‫‪ ‬حجرة المالحظة وتدوين النتائج‬
‫‪‬ثانيا‪ :‬ملحقات المعمل‬
‫‪ -1 ‬حجرة األقلمة و ‪ -2‬الصوب و ‪ -3‬الحقل‪.‬‬
‫‪16‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪8‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫معمل زراعة االنسجة النباتية‬

‫‪17‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫غزفت انغسيم‬
‫‪‬يجري في هذا الجزء من المختبر العمليات التالية‪:‬‬
‫‪ ‬استقبال العينات النباتية القادمة من الحقل لتنظيفها المبدئي من االتربة و تخليصها من كتل الطين‬
‫العالقة بالجذور و يجب عدم دخول تلك العينات الي االماكن األخرى بالمختبر حتي ال تلوثها و‬
‫خصوصا كابينة الزراعة‪.‬‬
‫‪ ‬غسل االدوات المستخدمة بعد االنتهاء التجارب كالماصات و القوارير و انابيب الزراعة الستخدامها‬
‫في التجارب التالية‪.‬‬
‫‪ ‬تجفيف و تعقيم االدوات المعملية المغسولة‪.‬‬
‫‪‬اما فيما يتعلق بالتجهيزات فيجب ان تحتوي علي‪:‬‬
‫‪ ‬مصدر للماء البارد و اخر ساخن و اخر للماء المقطر‪,‬‬
‫‪ ‬احواض غسيل مقاومة لالحماض (كالرصاص)‬
‫‪ ‬طاوالت تجفيف من الحديد غير قابل للصدأ و دواليب لحفظ الزجاجيات النظيفة‪.‬‬
‫‪ ‬كل ما يلزم للتنظيف كالصابون و المنظفات المختلفة و االحماض المستخدمة في التنظيف كحامض‬
‫الكبريتيك و الكروميك و المذيبات كالكحول و الكلوروفورم و بعض المطهرات‪.‬‬
‫‪‬مالحظة‪ :‬عدم ترك االدوات متسخة و خصوصا بقايا االوساط الغذائية حتي تجف الن ذلك سيزيد من‬
‫صعوبة تنظيفها‪.‬‬
‫‪18‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪9‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫غزفت اعذاد انىسط انغذائي‬

‫‪‬الغرض االساسي هو تحضير وتعقيم االوساط الغذائية‪ ,‬فالتحضير الجيد للوسط الغذائي يُعد الخطوة االولي‬
‫نحو النجاح في زراعة االنسجة فاذا كان الوسط فاسدا او غير مناسب فكل الخطوات التالية ستفشل و بالتالي‬
‫يجب توفير كل ما هو ممكن إلنجاح العملية و هذا يشير الي مدي جهوزية و اهمية هذا القسم‪.‬‬
‫‪ ‬يجب ان تحتوي الغرفة علي بنش واسع و مناسب حتي ال تتكدس المحاليل مما يؤدي الي انسكابها خاصة ان‬
‫تلك الموا ما هو حارق او سام‪.‬‬
‫‪‬يجب ان تتوفر في غرفة التحضير ثالث مكونات رئيسية‪:‬‬
‫‪ .1‬الكيماويات المستخدمة في صناعة االوساط او االوساط سابقة التجهيز‪:‬‬
‫‪‬يجب ان تكون عالية النقاوة‪ ,‬و ان يتوفر الماء المقطر مرتين و الماء منزوع االيونات الضروري في حالة‬
‫مزارع البروتكوالت‪.‬‬
‫‪ .2‬الزجاجيات‪:‬‬
‫‪ ‬كالدوارق المخروطية و العيارية و المخابير و الكؤوس و الماصات و مجفف زجاجي يحتوي كلوريد‬
‫الكالسيوم و زجاجات غامقة لحفظ المحاليل من الضوء و اوعية الزراعة كأطباق بتري و برطامانات ماجنتا‬
‫و انابيب الزراعة‪.‬‬
‫‪ .3‬االجهزة المعملية الالزمة لعملية التحضير‪:‬‬
‫‪ ‬كجهاز التقطير الزجاجي و نازع االيونات و ثالجات لحفظ االوساط الغذائية و المحاليل و مجمدات لحفظ‬
‫الهرمونات و االنزيمات و سخان بالمقلب المغناطيسي و موقد بنزن و جهاز قياس رقم ‪ PH‬و جهاز‬
‫االوتوكالف و فرن ميكروويف و ميزانين احدهما عادي و االخر حساس و ميكروبيبيت(الماصة الدقيقة) و‬
‫جهاز تعقيم بالترشيح به مرشح بكتيري لتعقيم المواد التي تفسد بالحرارة كاالنزيمات و بعض الهرمونات و‬
‫‪19‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬ ‫السكريات‪.‬‬

‫‪20‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪10‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫غزفت انشراعت و اننقم‬

‫‪ ‬مكان يجب ان تصل فيه درجة الحذر من التلوث الميكروبي الي الدرجة القصوى ألنه المكان الذي يتم فيه‬
‫التطهير السطحي للمنفصالت النباتية و تقطيع العينات المُعقمة التي تم الحصول عليها في االنابيب ككتل‬
‫البراعم أو الكالس و يتم فيها نقل العينات من وسط لوسط و بالتالي فهي مرحلة من العمل يتم فيها اخراج‬
‫المنفصالت النباتية او االشكال المورفوجينية التي تم الحصول عليها لتصبح بشكل ما معرضة للجو العام‬
‫للغرفة خارج انابيب الزراعة و لو للحظات بسيطة و لو لم تؤخذ االحتياطات الالزمة فستكون تلك‬
‫اللحظات كفيلة بتلوث العينة و من ثم ضياع كل ما بذل من مجهودات سابقة و بناء علي ذلك‪:‬‬
‫‪ ‬يجب ان تتمتع بالنظافة الفائقة و ال تكون عرضة لدخول العامة او غير المتخصصين‪,‬‬
‫‪ ‬دخول العاملون بأغطية الرأس و الفم و االنف و بلبس بالطو معمل نظيف ومعقم‪,‬‬
‫‪ ‬ان ُترش بالمطهرات من وقت آلخر و مبيدات الحشرات (خوفا من تسلل الحشرات و البيوض لألطباق)‪,‬‬
‫‪ ‬ان تكون محكمة الغلق و بعيدة عن التيارات الهوائية المحملة باألتربة و الجراثيم‪,‬‬
‫‪ ‬أن تزود الغرفة بلمبات أشعة فوق بنفسجية لتعقيم جو الغرفة‪,‬‬
‫‪ ‬ان تكون جيدة االضاءة و ان تكون االضاءة باردة موجهه نحو مسطح العمل فكثير ما يتعامل الباحث مع‬
‫عينات دقيقة من الكتل البرعمية و يحتاج إلضاءة جيدة حتي يستطيع فصل تلك البراعم عن بعضها‪,‬‬
‫‪21‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪22‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪11‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫تابع غزفت انشراعت و اننقم‬

‫‪ ‬ان تزود الغرفة بكابينة الدفق الهوائي المعقم ‪ Laminar air flow cabinet‬اشبه بصندوق‬
‫محكم تحوي مسطح مناسب للعمل و تضخ باتجاه الباحث هواء تم تعقيمه بالترشيح بحيث‬
‫يكون اتجاه الهواء المعقم من داخل الكابينة الي خارجها ليطرد أي هواء او جراثيم و كذلك‬
‫هواء و زفير الباحث للخارج فيقلل من فرص تلوث العينات الموجودة بمسطح العمل اثناء‬
‫العمل ‪ ,‬و هي مزودة بلمبة فلورسنت لإلضاءة و لمبة اشعة فوق بنفسجية للتعقيم و مصدر‬
‫للغاز‪.‬‬
‫‪‬االدوات الضرورية الالزمة للعمل في غرفة الزراعة بشكل روتيني‪:‬‬
‫‪‬المالقط و المشارط و ابر التشريح بأشكالها و احجامها‪,‬‬
‫‪ ‬المرشحات البكتيرية للهرمونات و ماصات و اطباق بتري و انابيب زراعة معقمة و الماء‬
‫المقطر المعقم و أوراق الترشيح المعقمة‪,‬‬
‫‪ ‬مواد التعقيم و التطهير كالكحول وهيبوكلورات الصوديوم و هيبوكلورات الكالسيوم و‬
‫حوامل االنابيب‬
‫‪23‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫غزفت اننًى او انحضانت‬

‫‪‬المكان الذي تحضن او توضع فيه المنقصالت النباتية المنزرعة في االنابيب حتي تنمو و تظهر االستجابة‬
‫المطلوبة‪.‬‬
‫‪‬يجب ان تحتوي علي الكثير من األرفف و حوامل االنابيب و ان توفر الحجرة كل الظروف المزرعية‬
‫المطلوبة و ان يكون من الممكن التحكم في تلك الظروف بحسب طبيعة التجربة او العمل المطلوب‪.‬‬
‫‪‬التحكم في درجة الحرارة في مدي يقع بين ‪ 2-40C°‬درجة مئوية و ان يمكن التحكم فيها علي مدار اليوم و‬
‫ان يتم التحكم في الكثافة الضوئية من الصفر(االظالم) حتي ‪ 10.000‬وحدة ضوئية‪ ,‬و ان يتم التحكم في‬
‫التواقت الضوئي (أي عدد ساعات االضاءة و االظالم في اليوم الكامل)‪,‬‬
‫‪‬و ان يتم التحكم في الرطوبة النسبية من ‪.20-98%‬‬
‫‪ ‬كم يجب ان تكون حجرة النمو مزودة بمروحة لتوزيع الهواء بها‪.‬‬
‫‪‬يتم تزويد مختبرات جيدة التمويل بعدد من غرف النمو ‪ Growth chambers‬التي يمكن التحكم بها‬
‫الكترونيا‪ ,‬بينما يلجأ البعض الي تصميم الحضانات بأنفسهم يدويا بوسائل اقل تكلفة‪.‬‬
‫‪ ‬في حالة استخدام االوساط في صورة سائلة تستبدل غرفة النمو بالحضانات الهززة او المفاعالت الحيوية‬
‫بانواعها المختلفة سواء في الحجم او الية العمل و هي ضرورة النتاج المواد الفعالة بواسطة مزارع‬
‫المعلقات الخلوية و مزارع الشعيرات الجذرية و كذلك في انتاج االجنة الجسدية باستخدام االوساط السائلة‪.‬‬

‫‪24‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪12‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫حجزة انًالحظت وتذوين اننتائج‬

‫‪ ‬هي الحجرة التي تؤخذ االنابيب المنزرعة او المحضنة لفحص و مالحظة ما يحل‬
‫علي االنسجة المنزرعة او المنفصالت النباتية من تغيرات و تدوين ما تم الحصول‬
‫عليه من نتائج‪.‬‬
‫‪‬يجب ان تحتوي علي مكان عمل واسع و ان تكون جيدة االضاءة و بها بعض‬
‫الوسائل المستخدمة للفحص السريع البسيط كالعدسات المكبرة و الميكروسكوبات و‬
‫ادوات القياس كالموازين الحساسة ألخذ بعض االوزان و مسطرة مدرجة لقياس‬
‫االطوال (الجذور و المجاميع الخضرية) و كاميرا تصوير رقمية و جهاز كمبيوتر‪.‬‬
‫‪‬يجب ان تراعي فيها النظافة التامة الن العينات المأخوذة اليها يتم في كثير من‬
‫االحيان اعادتها لمواصلة التحضين‪.‬‬
‫‪25‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪26‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪13‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫يهحقاث انًعًم‪ :‬حجزة األقهًت‬

‫‪ ‬هي نقطة الوصل بين مختبر زراعة االنسجة و التربة المستديمة او الصوبة الزجاجية‪.‬‬
‫‪‬يتم اخراج النبيتات المتحصل عليها و ُتغسل جذورها حتي تخلو تماما من أي بقايا للوسط الغذائي و االجار و‬
‫تنقل الي اصيص صغير او اكياس بالستيك تحتوي علي تربة أو ( بيت موس‪.)Beet moss‬‬
‫‪‬بقايا االجار بالجذور ستنشط الميكروبات عند نقل البادرات للتربة و تزيد من قدرتها علي مهاجمة البادرات‪.‬‬
‫‪‬بعد النقل الي االصيص يتم اقلمة النباتات استعدادا لنقلها للتربة المستدامة‪.‬‬
‫‪‬يجب ان تحتوي غرفة االقلمة علي التالي‪:‬‬
‫‪‬التربة الصناعية‪,‬‬
‫‪‬اصص او اكياس الزراعة‪,‬‬
‫‪‬مناضد توضع عليها االصص‪,‬‬
‫‪‬مصدر للماء للغسل و الري‪,‬‬
‫‪‬رشاشات ماء‪,‬‬
‫‪ ‬اضاءة صناعية باستخدام لمبات فلورسنت او طبيعية كالشمس غي المباشرة‪.‬‬
‫‪27‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪28‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪14‬‬
‫‪25/07/41‬‬

‫يهحقاث انًعًم‪ :‬انصىب‬

‫‪ ‬تستخدم بأنواعها البالستيكية رخيصة الثمن و الزجاجية لحماية النباتات من‬
‫البرودة و توفير الحرارة و و الرطوبة المناسبة لنمو النباتات و تقليل و تفادي‬
‫االصابات المرضية و حفظ النباتات المتحصل عليها لحين تسويقها‬

‫‪29‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫يهحقاث انًعًم‪ :‬انحقم‬

‫‪‬يعتبر من الملحقات الهامة حتي تستطيع النباتات المتكونة بالمزارع النسيجية‬
‫مواصلة نموها بشكل طبيعي‪.‬‬
‫‪‬يجب تتخذ االحتياطات الالزمة حتي ال تحتوي تربة الحقل علي مسببات‬
‫االمراض النباتية سواء الفيروسية أو البكتيرية او الفطرية أو النيماتودا او‬
‫الحشرات المرضية ‪.‬‬
‫‪‬يجب ان تكون تربته صفراء خفيفة غنية بالمادة العضوية و قليلة األمالح و ان‬
‫تروي بالماء العذب بالوسائل الحديثة‪.‬‬

‫‪30‬‬ ‫تكنولوجيا زراعية ‪ -‬عماد يوسف‬

‫‪15‬‬