12178249001V13
Myoglobin
Myoglobin
REF 12178214 122 100 teszt
• Az(oka)t az analizátor(oka)t jelzi, amely(ek)en a készlet használható
MODULAR
Elecsys 2010 ANALYTICS cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602
E170
• • • • • Minden reagens és mintatípus (betegminták, kalibrátorok és kontrollok)
Magyar
Alkalmazás
Immunteszt a humán szérumban vagy plazmában lévő myoglobin
in vitro mennyiségi meghatározására.
Az elektrokemi-lumineneszcens immunteszt ("ECLIA" -
elektrochemilumineszcens immunoassay) Elecsys és cobas e
immunológiai analizátorokon alkalmazható.
Összegzés
A myoglobin egy citoplazma protein a harántcsíkolt szív- és vázizomzatban.
Részt vesz az izomsejteken belüli oxigén transzportban, illetve
oxigén raktárként működik. A myoglobin molekulasúlya 17,8 kDalton,
mely elég alacsony ahhoz, hogy az izomsejtek károsodása esetén
gyorsan bekerüljön a keringésbe.1
A szérum myoglobin szint meghatározása szerepet játszik az akut myocardialis
infarktus (AMI)2,3 a korai reinfarktus1,4,5 diagnózisának felállítása során, illetve
a lízis-terápiát követő sikeres reperfúzió ellenőrzésében.6,7,8 A myoglobin
koncentrációja - a tünetek megjelenését követően - már körülbelül 2 óra
múlva megemelkedik, ezért a myoglobint, a myocardialis infarktus igen
korai markerének tekintik. A reperfúzió mértékétől függően a myoglobin az
infarktus kialakulását követő 4-12 órában éri el a maximális koncentrációját a
keringésben, és kb. 24 óra múlva a kiindulási normálértékre esik vissza.9
Emelkedett myoglobin szintek mérhetők továbbá a vázizomzat sérülése,
illetve erősen beszűkült vesefunkció esetén.
Az Elecsys Myoglobin teszt a szendvics elven alapul, s két különböző
monoklonális, humán myoglobin elleni antitestet használ.
A módszer elve
Szendvics-elv. A vizsgálat teljes időtartama: 18 perc.
• 1. inkubáció: A mintában (15 µL) lévő antigén, a myoglobin-specifikus
biotinilált monoklonális antitest, és a ruténium komplexszela
jelölt, myoglobin-specifikus monoklonális antitest reakciója
során immunkomplex jön létre.
• 2. inkubáció: A sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék hozzáadása
után a biotin és a sztreptavidin között kialakuló kölcsönhatás
következtében a komplex a szilárd fázishoz kötődik.
• A berendezés a reakcióelegyet a mérőküvettába szívja, ahol a
(mágnesezhető) mikroszemcséket az elektróda a felszínén mágneses
úton befogja. A kötetlen anyagok ezután a ProCell-lel együtt távoznak
a rendszerből. Az elektródára kapcsolt feszültség kemilumineszcens
fénykibocsátást indukál, amit egy fotosokszorozó mér.
• Az eredményeket a készülék a kalibrációs görbe alapján határozza
meg, amelyet készülék-specifikusan, 2-pontos kalibrációval és a
reagens-vonalkódból leolvasott mester-görbe felhasználásával generál.
a) Tris(2,2’-bipiridil)ruténium(II)-komplex (Ru(bpy)2+
3 )
Reagensek - munkaoldatok
M Sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék (áttetsző kupak),
1 flakon, 6,5 mL:
Sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék 0,72 mg/mL; tartósítószer.
R1 Myoglobin elleni antitest~biotin (szürke kupak), 1 flakon, 10 mL:
Myoglobin elleni, biotinilált monoklonális antitest (egér) 1,75 mg/L;
foszfát puffer 85 mmol/L, pH 6,5; nátrium-azid < 0,1 %; tartósítószer.
R2 Myoglobin elleni antitest~Ru(bpy)2+
3 (fekete kupak), 1 flakon, 10 mL:
Myoglobin elleni, ruténium komplexszel jelölt monoklonális
antitest (egér) 1,75 mg/L; foszfát puffer 85 mmol/L, pH 6,5;
nátrium-azid < 0,1 %; tartósítószer.
2010-08, V 13 Magyar
Óvintézkedések és figyelmeztetések
In vitro diagnosztikai felhasználásra.
A normál laboratóriumi reagensekkel szemben alkalmazandó
általános óvintézkedések szükségesek.
A keletkező hulladékok kezelésénél figyelembe kell venni a helyi előírásokat.
A biztonsági adatlapot szakmai felhasználóknak kérésre megküldjük.
kezelésekor kerüljék a habképződést.
A reagensek kezelése
A készletben lévő reagenseket egy használatra kész egységbe
szerelték össze, amelyet nem lehet szétszedni.
A pontos működéséhez szükséges osszes információt a készülék
a reagens-vonalkódokról olvassa be.
Tárolás és eltarthatóság
2-8 °C-on kell tárolni!
Az Elecsys Myoglobin reagens készletet tetejével felfelé, függőlegesen
kell tárolni, hogy a felhasználás előtti automatikus keverés során biztosítva
legyen a mikroszemcsék teljes elérhetősége.
Eltarthatóság:
felnyitatlanul 2-8 °C-on a feltüntetett lejárati dátumig
felnyitás után 2-8 °C-on 12 hét
az analizátorokon 8 hét
Mintagyűjtés és -előkészítés
Csak az alább felsorolt mintatípusokat vizsgáltuk és találtuk megfelelőnek.
Standard mintavételi csövekbe vagy elválasztógélt tartalmazó
csövekbe gyűjtött szérum.
Li-, Na-, NH+4-heparinos, K3-EDTA-s, és natrium-citrátos plazma.
Kritérium: Reprodukálhatóság a szérumérték 90-110 %-án belül, vagy
a meredekség 0,9-1,1 és a metszék < ± 2 x az analitikai szenzitivitás
(LDL) és a korrelációs együttható > 0,95.
2-8 °C-on 1 hétig, -20 °C-on 3 hónapig tartható el.10
A felsorolt mintatípusokat a vizsgálat idején kereskedelmi forgalomban
lévő csövek egy kiválasztott csoportjával vizsgáltuk, vagyis nem az
összes gyártó összes beszerezhető csövét teszteltük. A különböző
gyártók mintavételi rendszerei eltérő anyagokat tartalmazhatnak, amelyek
néhány esetben hatással lehetnek a teszteredményekre. A minták
primer csövekből történő feldolgozása során (mintavételi rendszerek)
a cső gyártójának az előírásai szerint kell eljárni.
A kicsapódásokat tartalmazó mintákat a mérés elvégzése előtt centrifugálni
kell. Ne használjanak aziddal stabilizált mintákat és kontrollokat.
Felhasználás előtt ellenőrizzék, hogy a betegminták, a kalibrátorok és
a kontrollok szobahőmérsékletűek-e (20-25 °C).
A lehetséges párolgás miatt a minták, kalibrátorok és kontrollok mérését
a készülékre felkerülésüket követő 2 órán belül el kell végezni.
A gyártó által biztosított anyagok
A reagenseket lásd a "Reagensek - munkaoldatok" c. részben.
További szükséges anyagok (a csomag nem tartalmazza)
• REF 12178222122, Myoglobin CalSet kalibrátor, 4 x 1 mL
• REF 04917049190, PreciControl Cardiac II, 2 x 2 mL-hez a PreciControl
Cardiac II 1 és 2 kontrollok mindegyikéből vagy
• REF 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL mintahígító vagy
REF 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL mintahígító
• Általános laboratóriumi felszerelés
• Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 vagy cobas e analizátor
Tartozékok Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátorokhoz:
• REF 11662988122, ProCell, 6 x 380 mL rendszerpuffer
• REF 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL mérőküvetta-tisztító oldat
• REF 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL mosóvíz adalék
• REF 11933159001, Adapter for SysClean (adapter a SysClean
rendszertisztító oldathoz)
• REF 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakcióedény
• REF 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipettahegy
1/3 Elecsys és cobas e analizátorok
Myoglobin
Myoglobin
Tartozékok MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és
cobas e 602 analizátorokhoz:
• REF 04880340190, ProCell M, 2 x 2 L rendszer-puffer
• REF 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L mérőküvetta-tisztító oldat
• REF 03023141001, PC/CC-Cups, 12 cup a ProCell M és a
CleanCell M használat előtti előmelegítéséhez
• REF 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL tisztítóoldat a mérés
lezárásához és a reagensváltás során történő öblítéshez
• REF 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M,
48 tárolótálca x 84 reakcióedény vagy pipettahegy, hulladékgyűjtő zsákok
• REF 03023150001, WasteLiner hulladékgyűjtő zsákok
• REF 03027651001, SysClean Adapter M
Tartozékok minden készülékhez:
• REF 11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL rendszertisztító oldat
A vizsgálat elvégzése
A vizsgálat optimális elvégzéséhez a jelen dokumentumnak
az adott analizátorra vonatkozó útmutatásait kell követni. A
vizsgálatokra vonatkozó analizátor-specifikus előírások a megfelelő
felhasználói kézikönyvben találhatók.
Felhasználás előtt a készülék a mikroszemcséket automatikusan
elkeveri. A vizsgálat-specifikus paramétereket reagens-vonalkódról kell
beolvasni. Ha azonban a készülék nem tudja a vonalkódot beolvasni,
akkor a 15-jegyű számsort manuálisan kell beírni.
A hűtött reagenseket hagyják kb. 20 °C-ra felmelegedni, és tegyék
az analizátor (20 °C-os) reagenstárcsájára. Kerüljék a habképződést.
A reagensek hőmérsékletét és a flakonok nyitását/zárását a
készülék automatikusan szabályozza.
Kalibráció
Visszavezethetőség: Az Elecsys Myoglobin tesztet az Elecsys Myoglobin
STAT módszerrel szemben standardizálták.
Minden Elecsys Myoglobin reagens készlet tartalmaz egy vonalkódot, ami az
adott reagens sorozat kalibrációjához szükséges specifikus információkat
tartalmazza. Az előre meghatározott mester-görbe az Elecsys Myoglobin
CalSet használatával illeszthető az analizátorra.
Kalibráció gyakorisága: Kalibráció végrehajtására reagens-lotonként
egyszer van szükség, friss reagenssel (a reagenskészlet analizátoron
történt regisztrálását követő max. 24 órán belül).
Újrakalibrálás az alábbi esetekben ajánlott:
• 1 hónap (28 nap) elteltével, ha ugyanazt a reagens lot-ot használják
• 7 nap elteltével (ha az analizátoron ugyanazt a reagens
készletet használják)
• szükség esetén: pl. ha a kontrolleredmények a megadott
tartományon kívülre esnek.
Minőség-ellenőrzés
Minőség-ellenőrzéshez használjon Elecsys PreciControl
Cardiac II 1 és 2 kontrollt,
Ezek kiegészíteseként más megfelelő kontroll anyagok is használhatók.
A különböző koncentráció-tartományokhoz tartozó kontrollokat a
teszt folyamatos használata esetén legalább 24 óránként egyszer,
valamint új reagens készlet esetén és minden kalibrálás után
meg kell mérni. A kontrollidőközöket és -határértékeket az adott
laboratórium egyedi igényeihez kell igazítani. A kapott értékeknek a
meghatározott határértékeken belülre kell esniük.
Minden laboratóriumnak meg kell határoznia azokat a korrekciós
lépéseket, amelyeket akkor kell elvégezni, ha a mért értékek a
megadott határértékeken kívülre esnek.
A minőségellenőrzésre vonatkozó helyi és kormányzati
előírásokat kell alkalmazni.
Számítás
Az analizátor automatikusan számolja minden egyes minta koncentrációját
(ng/mL vagy µg/L mértékegységben).
Elecsys és cobas e analizátorok
Korlátozások-interferencia
A vizsgálatot nem zavarja az ikterusz (bilirubin < 65 mg/dL ill. < 1112 µmol/L),
a hemolízis (Hb < 1,4 g/dL ill. < 0,869 mmol/L), a lipémia (Intralipid
< 2200 mg/dL) és a biotin < 205 nmol/L ill. < 50 ng/mL.
Kritérium: Reprodukálhatóság az eredeti érték ± 10 %-on belül.
Ha egy beteg nagydózisú (> 5 mg/nap) biotin terápiában részesül, akkor a
biotin beadását követően legalább 8 órán belül nem szabad tőle mintát levenni.
1500 IU/mL koncentrációig nem találtunk interferenciát a reuma faktorral.
30000 ng/mL myoglobin koncentrációkon nem észlelhető
magas dózisú hook effektus.
In vitro vizsgálatot végeztek 50 gyakran alkalmazott gyógyszerrel. A
vizsgálatok során nem észleltünk interferenciát.
Néha analit specifikus antitestek, sztreptavidin vagy ruténium elleni,
különlegesen magas antitest titerek miatt interferencia fordulhat
elő. A teszt megfelelő kialakítása ezeknek a jelenségeknek az
előfordulását minimálisra csökkenti.
A diagnózis felállításakor az eredményeket mindig a beteg anamnézisével,
klinikai vizsgálataival és egyéb leleteivel együtt kell értelmezni.
Határértékek és tartományok
Mérési tartomány
21-3000 ng/mL (az alsó észlelási határ és a mester-görbe maximuma
határozza meg). Az alsó észlelési határ alatti eredményeket < 21 ng/mL
formában kell kiadni. A mérési tartomány fölötti értékeket > 3000 ng/mL
formában (vagy - 10-szeresen hígított, ≤ 30000 ng/mL koncentrációjú
minta esetén - a tényleges értékkel) kell leletezni.
A mérés alsó határértékei
Alsó észlelési határ
Alsó észlelési határ: ≤ 21 ng/mL
Az alsó észlelési határ az a legalacsonyabb mérhető analit szint, amely
még megkülönböztethető a nullától. Kiszámítása: a legalacsonyabb
standardnál 2 tapasztalati szórásnyival (SD) magasabb érték (mester
kalibrátor, standard 1 + 2 SD, ismételhetőségi vizsgálat, n = 21).
Hígítás
A mérési tartomány feletti myoglobin koncentrációjú mintákat
Elecsys Diluent Universal-lal lehet hígítani. A (manuáliasan vagy a
MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 ill. cobas e analizátorokon
automatikusan végrehajtott) hígítás ajánlott mértéke 1:10. A hígított
mintában a koncentrációnak > 50 ng/mL-nek kell lennie. A manuális hígítást
követően a kapott eredményt szorozza meg a hígítási faktorral. A minta
koncentrációjának meghatározása során a MODULAR ANALYTICS E170,
az Elecsys 2010 és a cobas e analizátorok szoftverje automatikusan
figyelembe veszi az analizátor által végrehajtott hígítás mértékét.
Várható értékek
Az Elecsys Myoglobin teszttel 2162 egészséges egyénen végzett
tanulmányok során a következő eredményeket kapták:
Mintaszám 2,5. - 97,5. percentil
Férfiak 1030 28-72 ng/mL
Nők 1132 25-58 ng/mL
Az adatok (1999 júliusi állapot) az alábbi tanulmányok összesítései: Elecsys
Myoglobin STAT teszt több központra kiterjedő vizsgálata, 1999 április és
Nemzetközi Elecsys 1010 tanulmány, Kardiális markerek, 1999 március
Minden laboratóriumnak meg kell vizsgálnia a megadott várható normál
értékek adaptálhatóságát a saját betegcsoportjában, és ha szükséges,
meg kell határoznia a laboratórium saját referencia értékeit.
Tipikus mérési adatok
Az analizátorra jellemző tipikus mérési adatok alább találhatók. A különböző
laboratóriumokban mért eredmények eltérőek lehetnek.
2/3 2010-08, V 13 Magyar
12178249001V13

Myoglobin
Myoglobin
Precizitás Irodalomjegyzék
A precizitást Elecsys reagensek, gyűjtött humán szérumminták és kontrollok 1. Mair J, Puschendorf B. Current aspects in the laboratory diagnosis of
segítségével határoztuk meg a CLSI (Clinical and Laboratory Standards acute myocardial infarction. Lab Med 1995;19:304-318.
Institute) módosított protokolljának (EP5-A) megfelelően: 10 napon keresztül 2. Lee HS, et al. Comparison of the value of novel rapid measurement
napi 6 alkalommal (n = 60); ismételhetőség MODULAR ANALYTICS E170 of myoglobin, creatine kinase, and creatine kinase MB with
analizátoron, n = 21. Az alábbi eredményeket kaptuk: the electrocardiogram for the diagnosis of acute myocardial
infarction. Br Heart J 1994;71:311-315.
Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátorok
3. Bakker AJ, et al. Troponin T and myoglobin at admission: value of early
Ismételhetőségb Köztes precizitás
diagnosis of acute myocardial infarction. Eur Heart J 1994;15:45-53.
Minta Átlag SD CV SD CV 4. Honda Y, Katayama T. Detection of myocardial infarction
ng/mL ng/mL % ng/mL % extension or reattack by serum myoglobin radioimmunoassay.
Humán szérum 1 36,6 0,31 0,8 0,65 1,8 Int J Cardiol 1984;6:325-335.
Humán szérum 2 81,1 1,50 1,8 4,37 5,4 5. Roberts R, Kleinman NS. Earlier diagnosis and treatment of acute
Humán szérum 3 1558 52,9 3,4 76,0 4,9 myocardial infarction necessitates the need for a “new diagnostic
PreciControl Card 1 91,0 1,21 1,3 3,96 4,3 mind-set”. Circulation 1994;89:872-881.
PreciControl Card 2 739 14,0 1,9 31,7 4,3 6. Katus HA, et al. Non-invasive assessment of infarct reperfusion:
b) Ismételhetőség = sorozaton belüli precizitás
the predictive power of the time to peak value of myoglobin, CKMB,
and CK in serum. Eur Heart J 1988;9:619-624.
MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátorok 7. Lavin F, et al. Comparison of five cardiac markers in the
Ismételhetőség Köztes precizitás detection of reperfusion after thrombolysis in acute myocardial
Minta Átlag SD CV Átlag SD CV infarction. Br Heart J 1995;73:422-427.
ng/mL ng/mL ng/mL ng/mL 8. Miyata M, et al. Rapid diagnosis of coronary reperfusion by
% %
measurement of myoglobin level every 15 min in acute myocardial
Humán szérum 1 36,4 0,50 1,4 35,6 0,83 2,3
infarction. J Am Coll Cardiol 1994;23:1009-1015.
Humán szérum 2 314 5,81 1,8 317 16,5 5,2 9. Ohman EM, Casey C, Bengtson JR, et al. Early detection of
Humán szérum 3 2389 62,1 2,6 2390 169 7,1 acute myocardial infarction: additional diagnostic information
PreciControl Card 1 91,5 1,56 1,7 92,8 3,61 3,9 from serum concentrations of myoglobin in patients without ST
PreciControl Card 2 1212 19,3 1,6 1266 55,2 4,4 elevation. Br Heart J 1990;63:335-338.
10. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes;
Módszerek összehasonlítása
Preanalytical Variables. Brochure in: Samples: From the Patient to the
Az Elecsys Myoglobin mérést (y) klinikai mintákat használva
Laboratory. GIT-Verlag, Darmstadt 1996:18-19. ISBN 3-928865-22-6.
összehasonlították az Elecsys Myoglobin STAT mérési eljárással
11. Passing H, Bablok W, et al. A General Regression Procedure for Method
(x) és az alábbi korrelációkat kapták:
Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.
Párosított értékek száma: 57
Passing/Bablok11 Lineáris regresszió További információ található még az érintett analizátor felhasználói
y = 1,0x - 1,38 y = 0,99x + 3,55 kézikönyvében, az egyes alkalmazás-leírásokban, a termékismertetőben
valamint a szükséges anyagok tesztleírásában.
τ = 0,986 r = 0,999
A mintákban mért koncentrációk kb. 32 és 2400 ng/mL közé estek.

A jelentősebb bővítéseket ill. változtatásokat a lap szélén található függőleges vonalak jelölik. A reagens-vonalkód
változása esetén a már beolvasott tesztparamétereket manuálisan korrigálni kell.
© 2010, Roche Diagnostics

Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim

www.roche.com

2010-08, V 13 Magyar 3/3 Elecsys és cobas e analizátorok