12/11/2021

Metabolizam masnih kiselina

• Masne kiseline imaju dugačak

ugljovodonični (alifatični)
lanac sa karboksilnom grupom
na jednom kraju

• Uloga masnih kiselina:

– rezerva energije u vidu
triacilglicerola
– konstituenti su membranskih
lipida
– modifikacija proteina (usidreni
membranski proteini)
– prekursori lokalnih medijatora
(npr. eikozanoidi)

1
 12/11/2021

• Triacilgliceroli (TAG) su koncentrovano skladište

energije
– Redukovani su i bezvodni
– Dobija se velika energija prilikom oksidacije 38 kJ g-1 (9
kcal g-1) u odnosu na UH i proteine 17 kJ g-1 (4 kcal g-1)
– Neutralni su i skladište se u gotovo bezvodnom obliku za
razliku od ugljenih hidrata (npr. 1g glikogena veže 2g vode)
• Zalihe glikogena i glukoze su dovoljne za 24h, dok
zalihe triacilglicerola obezbeđuju višenedeljno
preživljavanje

• Citoplazma adipocita glavno mesto

skladištenja TAG kod sisara
• Adipociti ćelije masnog tkiva
• Specijalizovano tkivo za sintezu i
skladištenje TAG
• Mobilizacijom masnih kiselina iz TAG
u adipocitimam, dalje se preko krvi
šalju do ostalih tkiva
• Kod mišiča zalihe TAG za sopstvene
potreba (mramorna struktura)
• Npr. ptice selice prelaze na rezervama
lipida prelaze velike udaljenosti bez
uzimanja hrane

2
 12/11/2021

Lipidi iz hrane (egzogeni put lipida)

• Većina lipida iz hrane su TAG
• Pankreasne lipaze hidrolizuju TAG do slobodnih masnih kiselina i diacil- i
mono-acil glicerola
• Žučne soli emugatori, sintetišu se u jetri, a u duodenum izbacuju sa žuči
• Najveći deo žučnih soli se reapsorbuje i vraća u jetru, gde se ponovo koristi
u emulgovanu lipida

• Monoacilgliceroli i slobodne masne kiseline se apsorbuju u enterocitima i

ponovo resintetizuju u triacilglicerole

• Lipidi iz hrane prenose se hilomikronima

• Hilomikroni su lipoproteinske čestice – kopleks protein (apolipoproteina) i
lipida i formiraju se u enterocitima
• Otpremaju se u limfu pa u krvotok
• Lipoprotein lipaza na endotelu kapilara hidrolizuje TAG iz hilomikrona do
slobodnih masni kiselina i monoacilglicerola, da bi se omogućio ulazak u
ćelije tkiva
• U adipocitima se ponovo resintetizuju TAG, a u mišićima služa kao
metaboličko gorivo
• Ostatke hilomikrona apsorbuje jetra

3
 12/11/2021

• Mobilizacija lipida iz adipocita preko hormon senzitivne lipaze

Endogeni put lipida

• U jetri je glavno lipid produkujućem organ u telu. U jetri se višak ugljenih
hidrata, proteina ili alkohol, koriste za sintezu lipida.
• TAG iz jetre se pakuju u VLDL (very low density lipoproteins). Takođe tu
ulazi i holesterol bilo sintetizovan, bilo iz hrane, koji je došao sa osatacima
hilomikrona.

4
 12/11/2021

• TAG iz VLDL usvajaju ostala tkiva uz pomoć LPL, pri čemu se povećava gustina ovih
lipoproteinskih čestica i one preko IDL (intermediate density lipoprtotein), prelaze
u LDL (low density lipoproteins). LDLs raznose holesterol po perifernom tkivu.

• Usvajanje ide endocitozom posredovanom LDL receptorima. Visok nivo LDL

holesterola je u vezi sa rizikom pojave kardiovaskularnih bolest. Višak LDLs se
vraća u jetru , takođe, preko LDL receptora.

• Reverzni transport holesterola se odvija preko HDLs (high density lipoproteins).

HDLs se sintetišu u jetri, a preuzimaju holesterol od drugih lipoproteina i tkiva.
Privremena su rezerva lipida. Neka količina holesterola se vraća u jetru, a jedan
deo odlazi do tkiva koja imaju veću potrebu za holesterolom. Veći nivo HDLs je u
vezi sa manjim rizikom od oboljenja od kardiovaskularnih bolesti.

• Pre oksidacije masne kiseline se aktiviraju vezivanjem za CoA-SH

• Ova reakcija se odvija na citosolnoj stani spoljašnje membrane
mitohondrija
• Enzim: aceti-CoA sintetaza

• Ova reakcija je favorizovana jer je hidroliza ATP do AMP

ekvivalnetna hidrolizi 2ATP
• Ovo je jedan od primera da su mnoge biohemijske reakcije
ireverzibilne zbog hidrolize neorganskog pirofosfata (PPi -> 2Pi)

10

5
 12/11/2021

• Masne kiseline se aktiviraju na spoljašnjoj membrani

mitohondrija, a njihova oksidacija se odigrava u matriksu
mitohondrija
• Masne kiseline dugih lanaca (veći od 10 C atoma) koriste
specijalni transportni sistem preko karnitina

11

• U mitohondrijalnom
matriksju oksidacija masnih
kiselina se odbija u četiri
koraka u spiralnom
metaboličkom putu
• Oksidacija je na ß C-atomu
pa se ceo metabolički put
naziva ß oksidacija masnih
kiselina
• Posle svakog ciklusa lanac
masne kiseline je 2 C atoma
kraći, a kao proizvod
oksidacije izlazi acetil
ostatak konjugovan sa CoA-
SH, tj. acetil-CoA, kao i
redukovani kofaktori
NADH+H+ i FADH2

12

6
 12/11/2021

Mitohondrijski matriks O
CH3 CH2 CH2 CH2 C SCoA Acil-CoA

β-oksidacija
C=n
acil-CoA
FAD
dehidrogenaza
masnih kiselina O
FADH2 Elektron transportni lanac

CH3 CH2 CH CH C SCoA trans 2 enoil-CoA

H2 O
-Oksidacija enoil-CoA hidrataza

Spiralni put OH O
CH3 CH2 CH CH2 C SCoA L-Hidroksi acil-CoA

NAD
-hidrokis acil-CoA
dehidrogenaza NADH + H+ Elektron transportni lanac

O O
CH3 CH2 CH CH2 C SCoA -Keto acil-CoA
CoASH
-keto tiolaza

O O
CH3 CH2 C SCoA + CH3 C SCoA
C=n-2 Acil-CoA Acetil-CoA
'
(2C atoma kraci)

13

Izračunajmo koliko ATP se dobija potpnom oksidacijom palmitata (16:0)

Ako svaki ciklus daje:

a potpuna oksidacija kroz ciklus β oksidacije masnih kiselina (ukupno 7 ciklusa):

Što je ukupno:
7 FADH2 = 7 x 2 ATP = 14 ATP
7 NADH+7H+ = 7 x 3 ATP = 21 ATP
8 acil-CoA = 8 x 12 ATP = 96 ATP
aktivacija masne kiseline = -2 ATP
----------------------------------------------
Σ 129 ATP

14

7
 12/11/2021

Ketogeneza

15

• Ketonska tela se sintetišu iz acetil-CoA pri intezivnoj oksidaciji masnih

kiselina
• Acetil-CoA se uključuje u CTK samo kada je oksidacija masnih kiselina
i ugljenih hidrata adekvatno izbalansirana:
– potrebno je da se acetil-CoA kondezuje sa oksalacetatom da bi ušao u CTK
– raspoloživost oksalacetata zavisi od snabdevenosti ugljenim hidratima
– oksalacetat može da se sintetiše i dopuni CTK iz piruvata (! Podseti se
anaplerotske reakcije CTK)
• Ako nema UH opada koncentracija oksalacetata (delom i zbog toga što
ide i u glukoneogenezu)
• Zato se i kaže da masne kiseline sagorevaju u plamenu ugljenih hidrata
(eng. fats burn in the flame of carbohydrate)
• Gladovanje, dijabetes, ishrana siromašna ugljenim hidrtima (ketonske
dijete)

16

8
 12/11/2021

Tri ketonska tela: acetoacetat, β-hidroksibutirat i aceton,

koji nastaje spontano(neenzimatski).

NADH + H+ NAD+
CH3 Neenzimska O CH3
reakcija
C O CH3 C HC OH
-hidroksibutirat
CH3 CH2 dehidrogenaza CH2
CO2
COO- COO-
Aceton Acetoacetat -Hidroksibutirat

17

Ketogeneza – sinteza ketonskih tela

O O
CH3 C SCoA + CH3 C SCoA 2 Acetil-CoA

* Odvija se u matriksu mitohondrija hepatocita tiolaza

CoA-SH
O
CH3 C
CH2 Acetoacetil-CoA
C O
O
SCoA
CH3 C SCoA
HMG-CoA sintaza
Co-ASH
OH O
CH3 C CH2 C O-
CH2
-Hidroksi--metilglutaril-CoA
C O (HMG-CoA)
SCoA

HMG-CoA liaza
Acetil-CoA
O O
CH3 CH CH2 C O- Acetoacetat
D--hidroksibutirat
dehidrogenaza NADH + H+ Spontano

NAD+ CO2
OH O O
CH3 CH CH2 C CH3 C CH3
O-
D--Hidroksibutirat Aceton

18

9
 12/11/2021

Korišćenje ketonskih tela

Ketonska tela se sintetišu u jetri, ali ih koriste kao gorivo druga
ekstrahepatična tkiva, uključujući ih u Krebsov ciklus

19

NAD+ NADH + H+
CH3 O
HC OH CH3 C
-hidroksibutirat
CH2 dehidrogenaza CH2
-
COO COO-
-Hidroksibutirat Acetoacetat
Sukcinil-Co-A
-ketoacil-Co-A
transferaza

Sukcinat
Acetoacetil-Co-A

Acetil-Co-A Acetil-Co-A

Krebsov ciklus

20

10
 12/11/2021

• Visoka koncentracija ketonskih tela može biti opasna po život

• Ketoza kod dijabetesa je jedno takvo stanje
• Nedostatak insulina onemogućava efikasno korišćenje glukoze kao
metaboličko gorivo
• Pokreće se lipoliza i intezivna oksidacija masnih kiselina
• Kako nema dovoljno piruvata opada nivo oksalacetata
• Višak acetil-CoA u jetri ide u sintezu ketonskih tela
• Zbog nemogućnosti ekstrahepatičnog tkiva da izmetaboliše sitetizovana
ketonska tela povećava se koncetntracija ketonski tela u krvi
(ketonemija), što dovodi do pojave ketonskih tela u urinu (ketonurija) i
pada pH krvi (ketoacidoza), jer su ketonska tela slabe kiseline
• Ovo stanje može dase završi sa komom

21

Sinteza masnih kiselina

22

11
 12/11/2021

• Iako je sinteza masnih kiselina u hemijskom smislu obrnuta od razgranje,

putevi sinteze i razgradnje masnih kiselina se razlikuju u tome što:
– sinteza masnih kiselina se odvija u citosolu, a razgradnja u matriksu
mitohondrija
– acil ostaci masih kiselina vezani su za sulhidrilnu grupu proteina nosača
acila, ACP (eng. acil carrier protein), a kod razgradnje to je sulfihidrilna
grupa CoA-SH
– kod eukariota sve enzimske aktivnosti vezane za sintezu masnih
kiselina su na jednom polipeptidnom lancu (multifunkcionalni enzimi),
dok za razgradnju su odvojeni enzimi
– rastući lanac masnih kiselina se produžava dodatkom jedinice od 2 C-
atoma koje potiču od acetil-CoA. Acetil-CoA se predhodno aktivira
karboksilacijom u malonil-CoA, čija kasnija dekarboksilacija pokreće
elongaciju lanca masne kiseline
– donor elektrona u sintezi masnih kiselina je NADPH, dok razgradnjom
nastaju NADH i FADH2
– elongacija sa sintazom masnih kiselina ide do 16 C-atoma (palmitat),
dalje se elongazama produžava lanac, a desaturazama uvode dvostruke
veze

23

• Sinteza masnih kiselina se odvija u citosolu iz prekursora acetil-CoA.

• Kako acetil-CoA nastaj u matriksu mitohondrija (oksidativna dekarboksilacija
piruvata, katabolizam aminokiselina) mora da se transportuje u citosol.
• U citosol iz mitohondrija izlazi kao citrat koji podleže cepanju pod dejstvom enzima
citrat lijaza uz utrošak ATP kada nastaje acetil-CoA i oksalacetat.

Citrat lijaza:

24

12
 12/11/2021

• Povratak oksalacetata je u tri enzimski katalizovane reakcije malat

dehidrogenazom i maličnim enzimom kada dolazi do oksidacije NADH u
NAD+ i redukcije NADP+ u NADPH, a zatim karboksilacija piruvata uz
utrošak ATP.

Malat dehidrogenaza:

Malični enzim:

Piruvat karboksilaza:

___________________________________________________________________________________

NADH + H+ + NADP+ +ATP -> NAD+ + NADPH+H+ ADP + Pi

25

Sinteza masnih kiselina počinje karboksilacijom acetil-CoA u malonil-CoA koju katalizuje

enzim acetil-CoA karboksilaza:

Faza elongacije masnih kiselina počinje najpre formiranje acetil-ACP i malonil-ACP koje
katalizuju enzimi acetil transacilaza i malonl transacilaza:

ACP (eng. acyl carrier protein) je protein nosač acil grupa koji ima prostetičku grupu sličnu CoA

26

13
 12/11/2021

• Dalje elongacija uključuje reakcije

kondezacije, redukcije, dehidratacije i još
jedne redukcije.
• Donor elektrona je NADPH.
• Elongacije ide do formitanja acil ostatka sa
16 C-atoma, koji se odvaja od ACP
aktivnošću tioesteraze.

27

28

14
 12/11/2021

• Reakcije sinteze masnih kiselina katališe kod prokariota multienzimski sistem

sastavljen od subjednica od kojih svaka katalizuje zasebnu reakciju.

• Kod eukariota je u pitanju jedan enzim masnokiselinska sintaza, a svi katalitički

centri su na jednom polipeptidnom lancu sa domenskom stukturom-
multifunkcionalni enzim. Sam enzim je dimer od dve identične subjedinice.

29

Sinteza masnih kiselina zahteva kooperaciju više metaboličkih

procesa

30

15
 12/11/2021

31

• U kontroli metabolizma masnih kiselina ključnu ulogu ima acetil-

CoA karbokislaza
• Kontrola je u skladu sa energetskim potrebama organizma
• Acetil-CoA karboksilaza se inaktivira fosforilacijom sa AMP-
zavisnom protein kinazom, AMPK (eng. AMP-dependent protein
kinase)
• AMPK aktvira AMP, a inhibira ATP, tako da je acetil-CoA
karboksilaza inhibirana kada je energeski naboj u ćeliji nizak
• Karboksilaza je alosterno stimulisana citratom (molekul koji
prenosi Acetil-CoA iz mitohondrija u citosol)
• Citrat indukuje polimerizaciju inaktivnih dimera karboksilaze i
delimično vraća aktivnost fosforilovanoj karboksilazi
• Palmitoil-CoA indukuje rasturanje filamenata u inaktivne
subjedinice
• Palmitil-CoA takođe inhibira i transport citrata iz mitohondrija u
citosol
• Sa druge strane malonil-CoA inhibira karnitin-acetiltransferazu i
ulazak aktiviranih masnih kiselina u mitohondrije, signalizirajući
visok energetski naboj u ćeliji, ovo je posebno u srcu i mišićima
gde je kapacitet za sintezu masnih kiselina mali

32

16