Giới thiệu về nuôi cấy tế

bào động vật

Phạm văn Phúc
PTN Nghiên cứu và Ứng dụng Tế bào gốc
Bộ môn Động vật-Sinh lí Động vật
 Mục tiêu

• Sau khi học bài này, sinh viên có thể:

– Thế nào là nuôi cấy mô và các kiểu nuôi cấy mô
– Ứng dụng của nuôi cấy mô
– Thuận lợi và bất lợi của mỗi kiểu nuôi cấy mô
– Một số khái niệm cơ bản

Experimental Methods 2006 2

 Nuôi cấy mô là gì?

• Nuôi cấy In vitro (duy trì và/hay tăng sinh)

các tế bào, mô và các cơ quan
• Các kiểu nuôi cấy mô
– Nuôi cấy cơ quan
– Nuôi cấy mô
– Nuôi cấy tế bào

Experimental Methods 2006 3

 Nuôi cấy cơ quan

• Nuôi cấy phôi hay cơ quan tách khỏi cơ thể

• Thuận lợi
– Chức năng sinh lí bình thường được duy trì
– Tế bào giữ trạng thái biệt hóa hoàn toàn
• Bất lợi
– Không thể nuôi cấy quy mô lớn
– Phát triển chậm
– Fresh explantation is required for every
experiment.
Experimental Methods 2006 4
 Nuôi cấy mô

• Các mảnh của mô được phát triển trong môi

trường nuôi cấy
• Thuận lợi
– Một số chức năng bình thường được duy trì
– Có thể nuôi cấy quy mô lớn (nhưng khó tiến hành)
• Bất lợi
– Tổ chức ban đầu của mô mất

Experimental Methods 2006 5

 Nuôi cấy tế bào

• Mô được tách thành tế bào đơn, hầu hết

là bằng enzyme, thành huyền phù tế bào
được nuôi cấy in vitro như monolayer hay
nuôi cấy huyền phù
• Thuận lợi
– Phát triển một dòng tế bào qua nhiều thế hệ
– Có thể nuôi cấy quy mô lớn
• Bất lợi
– Tế bào mất một số đặc tính đã biệt hóa trong
mô Experimental Methods 2006 6
EMP04 7
 Tại sao cần nuôi cấy mô?

• Nghiên cứu
– Vượt qua các vấn đề trong nghiên cứu như:
• Các tác động của các mô xung quanh
• Các biến đổi mà do các điều kiện của động vật
– Giảm các động vật sử dụng
• Sản xuất các sản phẩm thương mại
– vaccine, antibody, hormone
– Tế bào sử dụng cho cấy ghép

Experimental Methods 2006 8

Advantages of Cell culture
• Advantages:
– Absolute control of physical environment
– Homogeneity of sample
– Less compound needed than in animal models
• Disadvantages:
– Hard to maintain
– Only grow small amount of tissue at high cost
– Dedifferentiation
– Instability, aneuploidy
Experimental Methods 2006 9
Các kiểu nuôi cấy tế bào
1. Nuôi cấy sơ cấp (Primary Culture)
– Thu nhận trực tiếp từ các mô và nuôi cấy theo kiểu
như
• Sự phát triển ra của các mô trong nuôi cấy
• Tách thành tế bào đơn (bằng enzyme hay cơ học)
– Thuận lợi:
• Thường giữ được nhiều các đặc tính đã được biệt hóa
của tế bào in vivo.
– Bất lợi:
• Ban đầu hỗn tạp nhưng sau đó trở nên nổi trội ở các
fibroblast
• Các nuôi cấy sơ cấp thường tốn công sức
• Có thể duy trì in vitro trong thời gian giới hạn 10