BÁO CÁO THÍ NGHIỆM HÓA SINH

BÀI 5: ĐỊNH LƯỢNG ĐƯỜNG KHỬ THEO

PHƯƠNG PHÁP 3,5 – DINITROSALISYLIC (DNS)

I. Hiện tượng và biện luận

Dung dịch đường sau khi chiết phải pha loãng để nồng độ đường nằm lọt trong
khoảng dãy màu của ống chuẩn từ 1 đến 5. Sau khi thực hiện cho dung dịch DNS vào các
ống nghiệm ta nhận thấy màu của các ống nghiệm vẫn là màu vàng của DNS. Tuy nhiên
sau khi được đun sôi cách thủy, màu của các ống nghiệm có sự thay đổi đậm nhạt khác
nhau. Nhiệt độ là tác nhân xúc tác cho phản ứng xảy ra với tốc độ nhanh.

*Tại sao phải trung hòa tới khi dung dịch trung tính hoặc hơi kiềm?

Trong môi trường acid thì phản ứng tạo màu giữa DNS và đường khử sẽ không xảy
ra, nên cần phải trung hòa hết lượng acid trong dung dịch mẫu trước khi thêm DNS.

II. Kết quả tính toán

Bảng 1: Kết quả độ hấp thu của các dung dịch chuẩn glucose

Ống nghiệm 1 2 3 4 5
Nồng độ Glucose (g/L) 0 0.5 1 1.5 2
Độ hấp thu Ab (tại 540nm) 0,027 0,234 0,439 0,765 1,051

Đồ thị chuẩn của hàm lượng Glucose tinh khiết và độ hấp thu
1
Ta có phương trình đường chuẩn: C = 0,5158xA – 0,0126
R2 = 0,9898

Bảng 2: Kết quả đo độ hấp thu của dung dịch mẫu

Độ hấp thu
Lần 1 0,725
Lần 2 0,726
Lần 3 0,730
Trung bình 0,727

Thế vào phương trình C = 0,5158xA – 0,0126

xA = 0,727 => y = 0,3624 (g/L)
Vì mẫu được pha loãng 100 lần
=> Hàm lượng đường có trong mẫu ban đầu là 0,3624 x 100 = 36,24 (g/L)