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览镗 研记
1
一
、 材 料 和仪器
1.材料-栽培与野生中药马兜铃经鉴定后,确认为马兜锋的成熟果实,均采自东海县
石榴乡。马兜铃酸A标准品由中国药科大学提供。硅胶G板和硅胶G高效板均由青岛海洋化
工厂生产 。
2.仪器;CS-
930
薄层扫描仪 (1
5本岛津所制作 )。
= ,方法 和结果
(一)原 植 物形态 比较
栽培 与野 生 中药 马 兜铃原植 物形态 来见明显 差别 。但栽 培品 由于 生 长 环 境 较野生 品优
越 ; 因而 其根 和茎比后者 粗壮 ,根 系也发达 。见 表 1。
(
- )药 材 性状 比较
栽 培 品除个体 稍大外 ,其余 性 状 与野 生 品 朱 见 咀显 差别 蒴果均呈 球形 或卵 圆形 ,长
2.5~5.O
cm,宽 2.
O~ 3.5cm。上 端 钝圆形 ,中央镦 凹 ,可见 花柱残 痕。基部 有细 长果柄 ,
长2.
0~4.
5cr
a。表面暗绿色、灰绿色或黄棕色,有平直纵棱 6条为腹缝线 ,
果实成熟 时由此
处开裂成 6果瓣,果柄与果瓣连接处亦分裂成 6条I每果瓣中央有一条波状弯曲的背缝线,
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由此处分 £
H多数 横 向平行的波状 细纹 脉。果实 分为 6室 ,果 皮质轻 而脆 ,易碎 ,内表面 平滑
而略有光 泽,有较 密 的横 向脉纹, 中膈 灰 自色 ,有 棕色横 向脉 纹 。每 室 内有多数平叠 排列 的
种 子 ,呈扁平钝三 角 形或梯形 ,长 5 ̄ ll
mm,宽 e ̄ 1
4mm ,四面延 伸成 翅,淡 棕 色 ,中
央 种仁呈心形 , 色稍深 ,果 瓣上 、中部种 子宽 略大 于长。气 特异 ,味淡 。
表T 栽 培 与 野 生 中 药 马 兜 斡 原 植 物 形 态 比 较
● ● - _ ● _- _ _ ● _ ● I _ _ _-_ u … ~ 一 一 ~ - 一 … … … 一 -- … _● …
} 栽 培 品 野 生 品
— — — — — —
— —— — — —— — L — J — — — — — — — — — — — — — — — — — —
圆柱 形 ,
较 粗壮 ,分叉多 ,
须 根发达 ,
外 圆柱 形,细长 ,直径 约0.5~1
cm,有分叉 ,
根 皮黄色或黄褐色,香气浓郁。三年生者 ’ 外皮黄褐色,有香气。
鞍二 年生者 明显 粗大 。
— — — 一 — — ● — — L — — — — — — — — — —
L — — — — — — — — — 一 … — — L — — 一 — 一 — —
— —
茎 较 野 生者 发达 ,粗而且 长大 ,有棱 ,
无毛 。I缠 绕草本 ,
茎部木 质 化 ,
有 棱,无毛 。
单 叶互 生 ,
三 角状卵 圆形至卵 状披 针形或
同栽 培 品。
卵 形,先端 短尖或 钝 ,
基 部两侧 有 圆形耳片
单 生于 叶腋 ,暗 紫色,花柄 细长 ,花被
花 嗽叭 状略弯斜 ,茎 部膨大 成球形 ,中部 同栽培 品 。
收缩成 管状,缘部卵 状披针 形 。
果 J蒴果 卵 圆形至球 形,
6瓣裂 种 子扁 薄,
同栽培 品
实 四边呈 翅状 ,全体略呈 钝三 角形或梯 形。
(三 )显 微特 征比较
栽培与野生 中药马兜铃的显微特征未见明显差别
1.果皮 横切 面t外 果皮 为一列 扁 平细 胞 ,每 隔 1~ 6个细 胞 有一较大 的含棕 色物质细
胞。中果皮由1 0
余列薄壁细胞组成,中部有断续排列的外韧型维管束,背缝线 处 维 管 束最
大 ,其韧皮部外方 有半月 形纤维束 ,术 化,束旁 常伴 有石细 胞。近腹缝 线处 有孔 纹细胞 5~
15
例 ,至 缝线处减 少至 1~ 2列 。内果 皮 由 2~ 5列纤 维组成 ,木 化。 见图 1。
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《镑瑶羔
崔三
爹三;
图 l 马 兜铃果皮 横切 面简图(×20)
1.外果 皮 卫.半月形纤维束 3.韧皮 部 4.术质 部
5.纵向导管 9.孔纹细胞 7.内果皮
2.种子表面观一种子呈扁平钝三角形。外种皮向外伸展成种翅,海绵样。种脊面外侧
2
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有一层种 隔膜 ,膜 内有油 室。
3.种 子横切面: 种 隔膜 (种脊而 缗侧 )为 2~ 6列细长形 薄壁细 胞 壁稍弯曲 。外 种
皮 为 5~ l
O列 网纹细 胞J微木 化。至 种脊维管 柬 上方渐减少至 无。 色素层 为由 1列 类方形细
胞 组成,壁 稍厚 ,棕 黄 色油滴沉积 在细胞 内侧,形 成一 色素 带’内 种皮 为 1列小型棕 色木 化
细胞,内含方晶;子叶表皮细胞一列,扁平状方形,子叶细胞壁薄。内含糊粉和脂肪油滴。
见 图 2。
图 3 果实 粉末显微 特征(×290)
1.外果应碎 片 2.中果应纤维 善3.导瞥 4.孔坟 细胞 5.两纹 细胞 6.内果皮纤维
. 内种皮石细胞 (
古方 晶) 8.子 叶细胞 9.种 厢膜 碎片 10
.子 口
f表皮 细胞
1I.色 索 细 胞 (a.表 皮 观 .侧 面观 )
(四)马兜 铃酸A 比较
1.薄层层 析;(1)样品 制备 t取栽 培 与野生 马兜铃粗 粉 约1
g,分别加 入丙 酮10
ml冷
浸过夜 ,过 滤。滤 液水浴蒸干岳 ,残 涟 以 1mI
丙酮溶解 ,供点样用 。 (2)薄 层 扳 硅胶
G薄层板 。 (3)展开 剂l苯~ 甲醇~ 冰醋 酸 (5Ol0.
8lOo
2) ,上行法展开 l
¥cm。 (4)
显 色剂: 马兜 铃酸A 在 1
9光 下显 黄色斑 点’ 在紫外灯 (365nm)下显 黄棕 色斑 点,Rf值 约
为0./
i6。见 图 4。
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黄 舌拣
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圈 4 马兜 铃薄层 层析图谱
左 目光 下观 察 右 : 紫 外 灯 (365mm) 下 观 察
S.马兜铃 A 1,拽培品 (二年生 ) 2,稿培品 (三年生 ) 8.野生品
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2. 含量测定t
(1)仪 器: 岛津CS一930薄层扫描仪 。薄层板 硅 胶 G高效板 。定 量 方 法 t 外标 两点
法。扫 描方 法: 样 品波长325nm ,
反射 锯 齿扫描。峰检 出方式: 面积 法。狭 缝l 1.2×1.2mm。
散射系数t SX=3 背景校 正 “ON”。光源: 氘灯 (
D2)。
(2)线性试验:精密称取马兜铃酸A标准品,以丙酮制成一定浓度,将备浓度的标准
品溶液定 量点 在同一块 硅胶 G高效板 上,以苯~ 甲醇~ 冰醋 酸 (50:o.8 0.2)上行展 开,
待 溶剂挥 散后按 上述 条件对 马兜铃 酸A斑 点进行扫 描。用 最小二 乘法 对点 样量 g)及吸 收
峰面积进行 回归 分析 得直 线方程 为 :Y=42382X+11
95 (
r=0.
9998)。
(3) 回收率 试验 ;取栽 培与野生 马兜 铃样 品液 (
制 各见后 ) 各 5gl, 点 样 于 薄 层板
上’再于每一点上点标准品溶液备一定量,按上述方法进行展开和扫描。二点外标法计算回
收率 ,其平均 值为97.
5 。
(4)测定结果t取栽培与野生马兜铃备0.
5g,粉碎过40目筛,于6
0~8
O℃下干燥至 恒
重,精 密称定。置索 氏提 取器 中,用丙酮 回流 提取 至 无色 (约 6小 列) ,冷却后 ,蒋提取 液
移至 25ml
容量 瓶中,加丙 酮至刻 度 ,静置 24小 时后 , 作为 样 品液 量取 样品液 8 1
点 于薄层
板 上,按 上述 线性 试验方 法进 行展开 、扫 描测定 。见 表 2。
马兜铃酸A含量 ( )
名 称 来 源
l X(
%) DS CV ( )
兜 j 栽培 (
三 年生 ) J 0.182 0.0028 1.54
I
三、结论 与讨 论
参 考 文 献