Tổng hợp và nghiên cứu quang phổ công thức phối tử hỗn hợp

mới "Artemisinin / Zn" và đánh giá tác dụng ức chế của nó

chống lại "SARS-CoV-2"
Fawziah A. Al-Salmi, Samy M. El-Megharbel, Reham Z. Hamza

Tóm lược

Thông tin cơ bản: Ở đây, hỗn hợp phối tử artemisinin/kẽm (Art/Zn) mới được tổng hợp mới được
tổng hợp về mặt hóa học được mô tả và kiểm tra chống lại SARS-CoV-2.

Phương pháp: Phức hợp tổng hợp được xác định đặc tính kỹ lưỡng bằng các phương pháp quang
phổ khác nhau (FT-IR, UV và XRD). Hình thái bề mặt và độ tinh khiết hóa học của nó đã được nghiên
cứu bằng kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM), kính hiển vi điện tử quét (SEM) và phân tích tia X
phân tán năng lượng (EDX). Phức hợp Art/Zn tổng hợp được đã được thử nghiệm khả năng ức chế
tác dụng chống lại SARS-CoV-2 bằng nồng độ ức chế 50 (IC50) và nồng độ độc tế bào 50 (CC50).

Kết quả: Kết quả cho thấy phức hợp Art/Zn thể hiện tác dụng ức chế vừa phải trong ống nghiệm
chống lại SARS-CoV-2 với chỉ số CC50 là 213,6 μg/ml và chỉ số IC50 là 66,79 μg/ml. Đáng chú ý là nó
có tác dụng ức chế (IC50 = 66,79 μg/ml) ở nồng độ rất thấp mà không gây bất kỳ tác dụng gây độc tế
bào nào có thể quan sát được trên tế bào chủ (CC50 = 213,6 μg/ml). Phương thức hoạt động của nó
chống lại SARS-CoV-2 liên quan đến việc ức chế sự nhân lên của virus. Các lớp mục tiêu được dự
đoán mà Art/Zn có thể ảnh hưởng bao gồm các kinase, có thể điều chỉnh và ức chế sự nhân lên của
virus và liên kết với thụ thể enzyme chuyển angiotensin-2 (ACE2) và chất ức chế protease chính
(MPro), từ đó ức chế hoạt động của SARS-CoV-2 và được chứng minh bằng mô phỏng động lực phân
tử.

Kết luận: Chúng tôi khuyên bạn nên sử dụng phức hợp Art/Zn do khả năng ức chế vừa phải và tác
dụng kháng vi-rút chống lại SARS-CoV-2 với tác dụng gây độc tế bào thấp trên tế bào chủ (Vero E6).
Chúng tôi đề nghị tiến hành các nghiên cứu tiền cứu sâu hơn để điều tra tác dụng sinh học của
Art/Zn trong mô hình động vật ở các nồng độ khác nhau để kiểm tra hiệu quả lâm sàng và độ an toàn
trong việc ức chế hoạt động của SARS-CoV-2.

1. Giới thiệu

Các bệnh như viêm phổi tắc nghẽn và thậm chí ung thư phổi có thể gây ra sức khỏe
nghiêm trọng và các tình trạng hô hấp mãn tính [1,2]. Viêm phổi có thể là cấp tính hoặc mãn tính
[3]; Đó là một phản ứng tế bào được kích hoạt bởi các tác nhân nước ngoài trong phổi. Hầu hết
các bệnh phổi chủ yếu liên quan đến viêm và liên quan đến nhiều tế bào viêm như đại thực bào
và tế bào lympho.
Các sản phẩm tự nhiên có thể cung cấp nhiều tiềm năng điều trị thay thế cho các bệnh về
đường hô hấp. Tuy nhiên, chúng cũng có thể có tác dụng phụ vì một số hợp chất có thể biểu
hiện hoạt động chống lại các bệnh về đường hô hấp như hen suyễn và COPD. Các sản phẩm tự
nhiên có nguồn gốc thực vật và cơ chế hoạt động của chúng để điều trị các biến chứng hô hấp
đã được nghiên cứu rộng rãi [4–7].

Các sản phẩm tự nhiên và các hợp chất hoạt động có một nguồn hiệu quả dược liệu
tuyệt vời và các loại thuốc hiện đại, nhất là các biện pháp tự nhiên có nguồn gốc thực vật hoặc
các biến thể của chúng [8].
 Artemisinin (Art) là một trioxane lactone với sự hiện diện của cầu peroxide [9]. Nó là một
hợp chất hoạt động có nguồn gốc từ Artemisia annua L.; Cây này đã được sử dụng để điều trị sốt
rét trong hàng ngàn năm [10]. Sự đề kháng ngày càng tăng của Plasmodium falciparum đối với
các loại thuốc chống sốt rét trong những năm 1950 đã khiến các nhà khoa học trên toàn thế giới
tìm kiếm phương pháp điều trị tốt hơn chống lại các triệu chứng nghiêm trọng của bệnh sốt rét.
A. annua L. được phát hiện trong y học cổ truyền Trung Quốc thể hiện tác dụng ức chế
đối với P. falciparum [11], và các hợp chất hoạt động của nó đã chứng minh đặc tính chống sốt
rét mạnh [12]. Youyou Tú, người nhận giải Nobel Y học năm 2015 vì những đóng góp to lớn
trong việc chứng minh hiệu quả điều trị của các hợp chất hoạt động của A. annua L. chống lại
bệnh sốt rét [13].

COVID-19 là thành viên của gia đình Coronaries (CoV), loại virus này có tác động nguy
hiểm đến con người và nó đã được Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) chứng minh là đại dịch y tế toàn
cầu [14]. Virus corona nổi tiếng với khả năng gây ra các triệu chứng nghiêm trọng cao, chủ yếu là
hội chứng hô hấp cấp tính như (SARS-CoV). Mặc dù có những bệnh nhiễm coronavirus khác,
nhưng họ bị nhiễm trùng từ nhẹ đến trung bình như (hCoVsOC43 và 229E), nguyên nhân gây ra
cảm lạnh thông thường [15].

SARS-CoV-2 virus mainly combines (4) proteins: the most distinguished part is the spike, then
the membrane, followed by both the envelope and the nucleocapsid proteins [16]. Spike proteins of
SARS-CoV-2 have an essential and critical role in the cellular attachment of viruses and entry and act
as a main target for the antibodies and improvement of vaccines [17,18]. The spike (S1) domain of
SARS-CoV-2 binds directly to the cellular receptors (ACE2) [19,20]. SARS-CoV can enter the cells
quickly via “SARS-SRBD” main interactions with the cellular receptors (ACE2) and (MPro) [21,22].

Virus SARS-CoV-2 chủ yếu kết hợp (4) protein: phần nổi bật nhất là gai, sau đó là màng,
tiếp theo là cả vỏ bọc và protein nucleocapsid [16]. Protein gai của SARS-CoV-2 có vai trò thiết
yếu và quan trọng trong việc gắn vào tế bào của virus và xâm nhập , đóng vai trò là mục tiêu
chính cho các kháng thể và cải tiến vắc xin [17,18]. Miền gai (S1) của SARS-CoV-2 liên kết trực
tiếp với các thụ thể tế bào (ACE2) [19,20]. SARS-CoV có thể xâm nhập vào tế bào một cách nhanh
chóng thông qua các tương tác chính "SARS-SRBD" với các thụ thể tế bào (ACE2) và (MPro)
[21,22].

Việc ghép nối các phân tử được thực hiện để có được định hướng và sự phù hợp cho các
phối tử hỗn hợp khác nhau ở các liên kết tế bào khác nhau. Thử nghiệm này được thực hiện để
đánh giá sự tương tác giữa SARS-CoV-2 và các thụ thể tế bào với hoạt động đáng kể hợp chất
thực vật của Artemisinin annua L. Tất cả các tính toán cho các chương trình lắp ghép đều có cấu
hình và định hướng tốt nhất cho hợp chất của Artemisia annua L. để ức chế cao SARS-CoV-2
[23,24].

Kẽm (Zn) là một kim loại thiết yếu quan trọng đóng vai trò quan trọng trong khả năng
miễn dịch của con người. Nó rất quan trọng để bảo vệ tế bào và loại bỏ virus khỏi tế bào chủ. Zn
ảnh hưởng đến các chất điều chỉnh tế bào khác nhau và có thể biểu hiện tác dụng ức chế, bao
gồm tác dụng kháng khuẩn và chống ung thư, và có thể được sử dụng để chữa lành vết thương
[25].

Nghiên cứu hiện tại nhằm đánh giá tác dụng ức chế của phức hợp kim loại mới "Art/Zn",
chống lại virus SARS-CoV-2 bằng cách làm sáng tỏ cấu trúc hóa học và quang phổ của nó và
đánh giá độc tính tế bào của nó.
 2. Nguyên liệu và phương pháp
2.1. Phê duyệt đạo đức
Tác dụng ức chế và gây độc tế bào của phức hợp kim loại mới (Art/Zn) chống lại
SARS-CoV-2 được đánh giá tại Trung tâm Khoa học xuất sắc về virus cúm tại Trung tâm
Nghiên cứu Quốc gia, Giza, Ai Cập, với sự gia nhập, đạo đức và đăng ký các số lần lượt là
EPI-ISL-430820, hCoV-19/Egypt/NRC-03/2020 và SAMN14814607.
2.2. Phân tích hoá chất và dụng cụ

Artemisinin (Art) (Hình 1) và Kẽm Clorua (ZnCl2) được cung cấp bởi Sigma-Aldrich,
Hoa Kỳ và được sử dụng mà không cần tinh chế. Các công cụ phân tích được liệt kê trong
Bảng .1.

Hình 1. Cấu trúc hóa học của nghệ thuật.

Bả ng 1 . Công cụ và phân tích tổ ng hợ p.

Dụng cụ phân tích Mẫu
Phân tích nguyên tố Perkin Elmer
Độ dẫn điện Máy đo độ dẫn điện Jenway (4010)
Phổ FTIR Máy quang phổ FTIR (Bruker)
Quang phổ điện tử UV2 (Máy quang phổ)Unicam
TEM kính hiển vi JEOL (100s)
Đo từ tính Cân từ Sherwood sử dụng phương pháp Gouy
SEM Thiết bị Quanta FEG 250
Giản đồ nhiễu xạ tia X được ghi lại X'Pert PRO PANphân tích bột nhiễu xạ tia X, đồng mục tiêu có đơn sắc thứ
trên cấp.

2.3. Tổng hợp phức hợp Artemisinin/Kẽm

Phức hợp mới Art / Zn được điều chế bằng cách cho dung dịch methanol ZnCl2 (1
mmol, 0,137 g) với methanol Art 20 ml dung dịch (1 mmol, 0,283 g). Độ pH được điều
chỉnh từ 8-9 bằng cách sử dụng dung dịch NH 4OH 0,1M. Hỗn hợp được đun hồi lưu 3
giờ, được lọc, Sản phẩm rắn được rửa bằng hỗn hợp metanol và phân tử H2O, sau đó làm
khô bằng cách sử dụng chất hút ẩm tiệt trùng (Hình 2).
 Hình 2 . Tổ ng hợ p phứ c hợ p artemisinin/kẽm.

2.4. Xét nghiệm độc tính tế bào MTT (CC50)