Professional Documents
Culture Documents
اساسيات معمل
اساسيات معمل
مبدئيا الفرق بين سحب العينه سيرم او بالزما هو انك لو سحبت العينه على انبوبه فاضيه ( )plain tubeو تركت الدم فى الحضانه لمده تقريبا من ثلث
الى نصف ساعه ثم فصلت العينه فى السنترفيوج تكون قد حصلت على السيرم (و هو خالى من الفيبرينوجين بالتاكيد النه استخدم فى تكوين الجلطه) اما
اذا سحبت العينه على اى مانع تجلط ثم فصلتها تحصل على البالزما (و لذلك فدائما كلمه بالزما ترتبط بنوع مانع التجلط المستخدم)
==============
و هى اختصار ل ((Ethylene diamine tetraacetic acid
من مميزات االيديتا انها تعمل على حفظ الخاليا بحاله جيده و تمنع تجمع الصفائح مما يسهل عدها فى صوره الدم
الحظ االتى ::::::::::تحاليل السيوله كالبروثرومبين ال يمكن اجرائها من عينه مسحوبه على مانع التجلط االيديتا و ذلك لعدم وجود الكالسيوم فى العينه
مما يمنع اتمام عمليه التجلط
كذلك تحاليل الصوديوم و البوتاسيوم الحتواء االيديتا على هذه االمالح و ايضا تحاليل العناضر مثل الكالسيوم و المغانسيوم النها تتفاعل مع االيديتا
مكونه متراكب
هذا باالضافه الى انه فى بعض انواع كيتس االنزيمات ال يفضل استخدام عينات االيديتا النها تقلل من نشاط االنزيم خيث انها تكون متراكب مع العناصر
التى تعمل كعامل مساعد لالنزيم فتمنعها من تنشيطه لذلك يجب التأكد من بامفلت الشغل اذا كانت العينه تصحل كبالزما ايديتا لتحليل ما ام ال
**** سترات الصوديوم ()Sodium citrate
==========================
يكون على شكل سائل جاهز بالمعمل و محضر بنسبه %3.8و يقوم ايضا بمنع التجلط عن طريق تكوين متراكب مع الكاسيوم لكن بشكل اضعف من
االيديتا
&&&&& و االستخدام الرئيسي لسترات الصوديوم فى المعمل هو تحليل سرعه الترسيب حيث تكون نسبه الدم الى مانع التجلط هى ( 1:4مثال 400
ميكرون سترات 1600+ميكرون دم)
سؤال؟؟؟ ليه النسبه دى بالذات ؟؟؟؟؟ .........الفكره هنا اننا عملنا تخفيف للدم بحيث ال HCTميعديش %35و ده الرقم المناسب لتسهيل تكوين
الروليكس ثم ترسيب كرات الدم فى االنابيب الضيقه زى انبوبه ال ()Westergren
سؤال؟؟؟ هل ممكن استخدام االيديتا فى تحليل سرعه الترسيب؟؟؟ ..........بالفعل يمكن استخدام االيديتا السائله فى تحليل سرعه الترسيب بنسبه الدم الى
مانع التجلط هى 1:4و تعطى نفس النتيجه
PT , PTTحيث تكون نسبه الدم الى مانع التجلط هى ( 1:9مثال 200ميكرون سترات &&&&& كذلك تستخدم فى اختبارات التجلط مثل تحليل ال
1800+ميكرون دم)
سؤال؟؟؟ طالما سترات الصوديوم بتمسك فى الكالسيوم و انا محتاج الكالسيوم فى اتمام تكوين الجلطه فازى بستخدمها فى اختبارات التجلط؟؟؟؟؟
***** زى ما قولنا ان تكوين المتراكب بين السترات و الكالسيوم بيكون ضعيف و كمان بيكون عكسي (اى يمكن عكس هذا التأثير باضافه كالسيوم
للعينه) و هذا ما يحدث فعال فى تحاليل ال PT , PTTحيث ان ريئجنت ال PTمحتوى على الكالسيوم و كذلك اثناء تحليل ال PTTنضيف الى
التفاعل ماده الكالسيوم كلوريد
هنا بقه حنتكلم على مشكله فنيه ناخد بالنا منها كويس
فى مرضي ال ( ) polycythemiaبيكون حجم كرات الدم كبير (يعنى الهيماتوكريت عالى) يعنى كميه البالزما اقل من الطبيعي و بالتالي كميه مانع
التجلط اللى انا وضعتها فى االنبوبه مش حتستخدم كلها و حيتبقي منها جزء .........فبالتالي لما ابدء التحليل بتاعى و اضع الرئيجنت (المحتوى على
كالسيوم) س يقوم مانع التجلط المتبقي بالتفاعل معه و منعه من دخول تفاعل تكون الجلطه و بالتالي احصل على زمن بروثرومبين اعلى (كخطأ معملى)
من االى مفروض يكون ()prolongation of the PT
باستخدام المعادله دى ال ( )Cحتطلع 130ميكروليتر و بكده يبقي حجهز انبوبه فيها 130ميكرو سترات و اكملها بالدم لحد 2مل عشان النتيجه تطلع
معايا مظبوطه
ملحوظه ممكن استخدام نفس المعادله فى حاالت االنيميا الشديده (هيماتوكريت اقل من )%20لحساب نسبه مانع التجلط المالئمه لتفادى ايضا خطأ
النتيجه
**** فلوريد الصوديوم ()Sodium fluoride
===========================
فلوريد الصوديوم مانع تجلط ضعيف يكون متراكب مع الكالسيوم لكن اهم مميزاته انه يمنع عمليه تكسير الجلوكوز بواسطه كرات الدم الحمراء
)(glycolysisذلك النه يمنع عمل انزيم االينوالز ) (enolaseالمستخدم فى تكسير الجلوكوز
لذلك فان االستخدام االساسى لفلوريد الصوديوم فى المعمل هو خفظ عينات السكر اذا كان شغلها سيتأخر و لم نستطيع فصل العينه عن كرات الدم
و النه مانع تجلط ضعيف فاعلب االنابيب الجاهزه تضيف ماده اوكساالت البوتاسيوم الى فلوريد الصوديم لزياده القدره على منع التجلط
الحظ ان فلوريد الصوديوم يذوب بصعوبه فالبد من تقليب العينه جيدا جدا كذلك يجب التعامل معه بحذر حيث انه ماده سامه جدااااا
====================
الهيبارين هو مانع تجلط طبيعى موجود فى الجسم و يعمل على الحفاظ على الدم فى صوره سائله و يمنع تجلطه بمنع عوامل التجلط و ذلك عن طريق
تنشيط ال )(anti-thrombin III
و يباع الهيبارين فى الصيدليات و استخدامه كعامل تجلط فى المعامل قليل و ربما التحليل الوحيد اللى الزم سحبه على هيبارين هو تحليل غازات الدم
حيث ان اى ملح من المستخدم كمانع تجلط سيؤدى الى تغير ال pHفى العينه و يعطى نتائج خاطئه
هناك استخدام اضافى للهيبارين و هو سحب عينه لتحليل البوتاسيوم فى مريض ( )thrombocytosisحيث ان العينه السيرم فى هذه الحاله و نتيجه
للجلطه اللى حتتكون حيخرج بوتاسيوم من الصفائح اللى اتنشطت بشكل سيؤدى الرتفاع خاطئ بالنتيجه لذلك يعاد السحب على هيبارين و اجراء التحليل
و الحظ انه ال يفضل استخدام العينه المسحوبه على هيبارين فى تحليل صوره الدم حيث انه يمكن ان يسبب ( platelets aggregation and
)leukocyte clumpingو كذلك يؤدى الى خلفيه زرقاء فى فيلم الدم
**** ( **** )3اى عينه تم تجميدها فى الفريزر البد من تركها تعود لدرجه حراره الغرفه و تقلب جيدا قبل الشغل
**** ( **** )4ال يجوز ابد حفظ عينات ال whole bloodزى عينات صوره الدم فى الفريزر (اى ال يجب تجميدها)
**** ( **** ) 5عينات البيليروبن يجب حفظها بعيدا عن مصادر الضوء حيث ان مستوى الصفراء ممكن يقل الكثر من %30عند العرض المباشر
للضوء
**** ( **** )6عينات البول :الزم تتفحص خالل ساعه من اخذ العينه ....طيب لو مش حتقدر يبقي فى خالل ساعه بالكتير الزم تحفظ العينه فى
الثالجه لمده ال تزيد عن 8ساعات للحصول على نتيجه موثوق فى دقتها مع مالحظه ان حيترسب amorphous uratesو الزم ترجع لدرجه حراره
الغرفه قبل ما تشتغلها بعد الحفظ (و ان كان البعض يطل مده الحفظ الى 24ساعه كما فى المزارع)
**** ( **** )7عينات البراز :البد من فحصها خالل ساعه من اخذ العينه (لضمان رؤيه االطوار النشطه trophozoitesاو ال larvaeان وجدت) و
اذا تعذر ذلك فالبد من تحضير العينه بمحلول الملح (طريقه ال )sedimentationو حفظها فى الثالجه لمده اقصاها 24ساعه و يمكن اضافه ( 10%
) formalinللحفاظ على شكل البويضات مع مالحظه انك كده غالبا فقدت فرصه انك تشوف االطوار النشطه فى العينه
**** ( **** )8الوضع المثالى هو ان تشتغل صوره الدم ( )CBCفى خالل 4ساعات من السحب لكن من الممكن االحتفاظ بالعينه فى الثالجه (ليس
الفريزر) لمده اقصاها 24ساعه بدون تغيير مؤثر على النتيجه (و يفضل فرد فيلم من البدايه قبل الحفظ لضمان افضل نتيجه ممكنه)
**** ( **** )9بالنسبه لعينات السيوله زى البروثرومبين ( )PTفالوضع المثالى هو انك تشتغلها فى خالل 4ساعات من السحب (بعد فصل البالزما
طبعا) لكن طبقا ل ( )Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelinesفالعينه تظل ثابته لمده 24ساعه من الحفظ فى درجه
حراره ( )18° C to 24° Cمع مراعاه تغطيه العينه جيدا .....و الحظ ان حفظ العينه فى الثالجه ( )at 1° C to 6° Cنفس المده ربما ادى الى نتيجه
غير صحيحه ( )shortened PT resultsالن التبريد يحدث تنشيط للعامل السابع
و طبعا يمكن اطاله مده الحفظ اكثر من كده (لالغراض البحثيه) حوالى اسبوعين اذا تم الحفظ عند درجه حراره ( )20-او لمده 6شهور اذا تم الحفظ
عند درجه حراره ()70-
**** ( **** )10بالنسبه لعينه ال ( )PTTفالوضع المثالى هو انك تشتغلها فى خالل ساعتين من السحب او خالل 4ساعات اذا حفظتها عند درجه
حراره ( )4°Cو لكن الحفظ لمده اطول يعطى نتائج خاطئه ( )falsely elevated PTT resultsلتأثر العوامل ()Factors VIII and V
**** ( **** ) 11عينات المزارع الوضع المثالي لها هو انك تشتغل خالل ساعتين فقط من اخذ العينات .............لكن اذا كان البد من تاخير الشغل
فيمكن حفظ العينات االتيه فقط ( )Urine, Wound swabs, Throat swabs, Eye discharge, Ear dischargeفى الثالجه ) (at 2-8 ° Cلمده
اقصاها 24ساعه
و البد من مراعاه االتى :عينات البراز ال يفضل حفظها فى الثالجه حيث ان السالمونيال و الشيجال تتاثر بتغير ال pHالمصاحب النخفاض الحراره و
اذا كان البد من انتظار مده قبل الشغل فالبد من حفظها فى ميديا خاصه ( )Cary-Blair transport mediumلمده ال تتجاوز 12ساعه
الحظ ايضا انه ال يجوز حفظ العينات االتيه ( )Sputum, Urethral & Vaginal samples, CSFفى الثالجه ابدا و البد من زراعتها مباشره
**** ( **** )12فى عينات مينفعش يتأجل شغلها زى عد الخاليا الشبكيه (خالل 6ساعات) زى سرعه الترسيب (خالل 4ساعات) زى السائل المنوى
(خالل ساعه واحده)
**** ( **** )13عينات ال :PCRتسحب العينه على ايديتا او تسحب سيرم (حسب نوع التحليل المطلوب) و البد من فصل البالزما او السيرم عن الدم
خالل مده ال تزيد عن 6ساعات ثم تحفظ فى الثالجه ( )4°Cو ال تتاثر العينات لمده 7ايام تقريبا من حفظها فى الثالجه و يمكن تجميد العينه اذا احتجت
فتره حفظ اطول
اما لو كنت حترسل التحليل الب تو الب يبقي بكل بساطه لو عندك عينه مش عارف تتصرف فى شروط حفظها الزم تتصل بالمعمل اللى حتدى له العينه
و تسأله مباشره علي ظروف الحفظ لحد ما تصله العينه النه حيقولهالك من واقع ال pamphletالخاص بالكيت بتاعتها عنده و بكده تاخد معلومه
صحيحه و دقيقه
د /خالد مجدي
-3التعامل مع شكه السرنجه فى المعمل ()Needle-stick injury
السالم عليكم و رحمه هللا و بركاته
اكثر من سؤال فى الفتره االخيره عن كيفيه التعامل مع شكه السرنجه فى المعمل ( )Needle-stick injuryو ده بوست مختصر عن كيفه التعامل العلمي
الصحيح مع هذه المشكله اعتمادا على كتيب منظمه الصحه العالميه
()WHO best practices for injections and related procedures toolkit
مبدئيا الزم نعرف ان المشكله دى انت المتسبب الرئيسي فيها لعدم اتباعك الطريقه العلمية الصحيحه العاده غطاء السرنجه او ما يعرف بال ( one
)hand technique recapping needlesو ده يرجعنا الهميه و ضروره التدريب المعملي الحقيقي و الجاد و المتخصص الي اخصائي فى المعمل
قبل ممارسه مهام عمله فعليا
طيب نتكلم فى المشكله نفسها
اول حاجه الزم نعرف ايه اللي ممكن يتنقل من شكه السرنجه و كمان احتماالت انتقاله كام فى المائه
منظمه الصحه حددت 3فيروسات هم االخطر فى الموضوع ده
*** فيروس ال ( )HBVو احتماليه انتقاله من شخص مريض الى اخصائي المعمل عن طريق الشكه تتراوح من %3الى %30و طبعا دى نسبه عاليه
الن عدد الفيروس فى دم المرضي بيبقي عالى جدا فى اغلب االحيان ()high level of viremia
*** فيروس ال ( )HCVو احتماليه انتقاله من شخص مريض الى اخصائي المعمل عن طريق الشكه تتراوح من %0.8الى %3
*** فيروس ال ( )HIVاو االيدز و احتماليه انتقاله من شخص مريض الى اخصائي المعمل عن طريق الشكه حوالى %0.3
ملحوظه :االحتماالت دى بناء على معرفتى بان الشخص فعليا مريض باحد الفيروسات المذكوره و لذلك فى حاله حدوث الشكه من شخص غير معروف
تاريخه المرضي فالبد من اجراء تلك التحاليل له لالطمئنان (بالطبع بدون تكليفه باي اعباء ماليه و بطرق مرجعيه زى االليزا مثال)
ملحوظه :بالطبع هناك امور ربما تزيد من فرصه العدوى مثل ان يكون عدد الفيروسات فى دم المريض عالي ( )high viral loadاو تكون كميه الدم اللى
انتقلت كبيره ( )Exposure to a larger quantity of bloodاو يكون الجرح اكثر عمقا ()A deep percutaneous injury
ملحوظه :سؤال بيتسأل كتير هل لمس دم مريض مصاب ينقل العدوى .....و االجابه علميا ال ينقل و ال ينطبق عليه فكره ال ()Needle-stick injury
طالما البشره سليمه ( )intact skinبدون جروح مفتوحه مثال
ثانيا :كيفيه التصرف فى حاله الشكه
---------------------------------
** اغسل مكان الشكه بالماء جيدا باسرع ما يمكنك (و ممكن الماء و الصابون) مع مالحظه ترك الدم ينزف ()Allow injury to bleed freely
** ال داعي الستخدام كحول لتطهير منطقه الجرح
ملحوظه :كثير من المصابين بيعمل حاجه اسمها ( )milk outبمعني يعصر الجرح الخراج كميه اكبر من الدم اعتقادا منه ان ده اصح و لكن الحقيقه ده
اجراء خاطئ و غير مرجح ابدا من المركز االمريكي لمكافحه العدوي
The practice to “milk out” more blood is controversial and not recommended by the Centers for Disease Control and Prevention
(CDC).
----------------------------------------------------------------
فى اغلب االحيان بيكون اخصائي التحاليل الطبيه عنده مناعه من االصابه بالفيروس نتيجه تطعيم سابق ( )vaccineمع العلم ان وزاره الصحه المصريه
بدءت التطعيم لحديثي الوالده بشكل غير اجباري منذ عام 1990ثم اصبح اجباري منذ عام 1992و بالتالي كل المواليد بعد هذه السنه اخدين للتطعيم
فعليا
طيب لنفرض ان االخصائي مش مطعم ضد الفيروس يبقي الخطوات اللى حيعملها كاالتي
فور التأكد من انه اتشك من مريض فيروس ( )Bفالبد و بسرعه (خالل مده ال تزيد عن 72ساعه غالبا) انه ياخد التطعيم ال ( )Passiveللفيروس و
المعروف ب ())hepatitis B immune globulin (HBIG
و يفضل انه ياخد اول جرعه من التطعيم ال ( )activeمعه ايضا و يكمل باقي الجرعات الثانيه بعد شهر ثم الثالثه بعد مده 6شهور
----------------------------------------------------------------
فيروس ليس له تطعيم حاليا و اذا تم التاكد من ان المريض كان مريض فيروس ( )Cفاتبع االتي
حتعمل تحلي ل لنفسك اجسام مضاده للتاكد من عدم االصابه بالفيروس نتيجه للشكه (و ده على افتراض انك غير مصاب فعليا بالفيروس الي سبب اخر) و
ده حيكون بعد فتره من 4الى 6شهور من الشكه حتى تكون النتيجه السلبيه معتمد عليها فى نفي االصابه فعال
لكن فى حاله انك تكون متعجل فممكن تعمل تحليل ال ( )HCV PCRبعد 4الى 6اسابيع من الشكه
اذا كانت النتيجه سلبيه فبشكل شبه مؤكد انه لم ينتقل اليك الفيروس
اما اذا كانت ايجابيه فالحل الطبيعي هو البدء المبكر فى العالج بال ( )HCV direct acting antiviralsمع المتابعه
ثانيا ال تنتظر نتائج التحاليل الخاصه بك خاصه اذا كان المريض مصدر الشكه حامل للمرض و ابدء فورا فى تلقي عالج ال ( antiretroviral drugs
)for post-exposure prophylaxisو تتوقف اذا كانت التحاليل سلبيه فيما بعد
فالفائده المتحققه من ال ( )PEPتفقد اذا تاخر العالج مده اطول من 24الى 36ساعه
و اخيرا الن الوقايه افضل من العالج فالتدريب الجيد و الجيد جداااااا امر ضرورى الي شخص قبل ممارسه المهنه فعليا و حمايه له و ايضا للمرضي من مشاكل كتير
ناتجه عن سوء التدريب و التعلم
***** الحظ ان سحب العينه من ال ( )Dorsal hand veinsتعتبر اكثر ايالما للمريض كما انها غير مناسبه لمريض عنده ضعف فى الدوره الدمويه
()poor circulation
***** دائما ابعد عن المنطقه اللى فيها حرق مثال او ايديما (مياه تحت الجلد) او كدمه و هكذا ..و برضه المراجع العلميه بتقول بالش تسحب من الذراع
المجاور لثدى تم استئصاله لسيده ()previous mastectomy
***** قبل البدء فى سحب العينه البد من اختبار السرنجه بشكل بسيط لضمان جودتها
***** استخدام التورنكيه بيساعد انه يعمل ( )distend the veinو يظهره كويس لكن راعى دائما اال تزيد فتره ربط التورنكيه عن 2دقيقه و اال
سيحدث ( ) hemoconcentrationيؤدى الى زياده فى نتائج االنزيمات و البروتين و العناصر المحموله على بروتينات زى الكالسيوم
***** عمليه ان المريض يضغط قبضه ايده و يفتحها بشكل مستمر و التورنكيه مربوط ( )make fistممكن فعال يساعد فى اظهار الوريد بشكل كويس
(لكن بالش تعمله لو مطلوب تحليل بوتاسيوم او فوسفور النه ممكن يزود النتيجه بشكل خاطئ)
***** بعد تطهير منطقه السحب ب % 70كحول ال تلمسها بيدك مره اخري بعد التعقيم و لو ضرورى تجس الوريد تانى قبل السحب ( palpate the
)siteيبقي الزم تطهر اصبعك ايضا بالكحول قبل لمس المريض
***** ال تسحب مباشره حتى ال يحدث ( )burning sensationللمريض بل انتظر حوالى نصف دقيقه قبل السحب
***** دائما خلى بالك ان الجزء المشطوف من ابره السرنجه يكون لالعلى و انت داخل الوريد ( )Bevel Upحتى تكون الشكه اقل ايالمه للمريض الن
كده مقاومه الجلد اقل ما يمكن
***** لما الدم يبدء يظهر فى راس السرنجه ثبت ايدك كويس و اسحب باعتدال (ال بسرعه جدا حتى ال تتسبب فى ( )vein collapseو ال ببطء جدا
حتى ال يتكسر الدم)
***** عند االنتهاء من عمليه السحب و قبل خروجك من يد المريض قك التورنكيه اوال (حتى ال تتسبب فى حدوث ( )hematomaللمريض اذا خرجت
و التورنكيه مربوط)
***** لما تيجى تغطى سن السرنجه بالغطاء بتاعها تذكر دائما انك تستخدم ال ( )single-handed techniqueيعنى غطى السن بايد واحده حتى ال
تتسبب فى حدوث ( )Needle sticks injuriesلنفسك
***** من االخطاء الشائعه انك تقول للمريض اثنى يدك بعد وضع القطنه اليقاف الدم و ده تصرف خاطئ النه يتسبب فى حدوث ( )hematomaو
االفضل هو ان المريض يضغط فقط على مكان السحب بقطنه و ذراعه مفروده عادى
***** و انت بتنقل الدم لالنابيب راعى دائما انك تبدء باالنبوبه اللى محتاجه كميه دم محدده زي البروثرومبين او سرعه الترسيب ثم بعدها انبوبه االيديتا
ثم اخيرا انبوبه السيرم
***** تذكر دائما ان تتاكد تماما من صحه عيناتك و ان ليس بها تكسير او تجلط فى العينات المسحوبه بالزما و تاكد ان كمياتها كافيه و مناسبه للتحاليل
(مع وضع احتماليه االعاده فى الحسبان) و كل ذلك قبل ان يغادر المريض المعمل حتى تطمأن انه ال مشاكل ستواجهك
د /خالد مجدى
-5احتياطات تحليل مجموعه الدهون ()lipid profile
السالم عليكم
فى البوست حنتكلم ان شاء هللا عن احتياطات تحليل مجموعه الدهون ()lipid profile
****ملحوظه :بعض الدراسات اشارت الى ان يفضل سحب عينه الكلوستيرول بعد ما يستريح المريض لمده ال تقل عن 5دقائق و ده يرجع الى ان ال
()volume responses to posture can affect cholesterol
متطلبات الصيام
========
االصل فى تحليل الدهون ان يصوم المريض (مع السماح بشرب الماء) لمده اقلها 9ساعات و المثالي 12ساعه (و و بعض االبحاث اشارت لحد
اقصي 15ساعه)
*** لكن التراي وجد انه يتاثر بشكل كبير باالكل نتيجه لظهور ال ( )chylomicronsفى الدم بعد االكل و اللى بتختفي من الدم فى غضون من 9الى
12ساعه .............لذلك البد من الصيام قبل تحليل التراي
(((( Plasma triglycerides, however, increase in postprandial plasma to an extent that is related to
the fasting triglyceride levels and the amount of fat intake. This is due to the appearance of
chylomicrons in the circulation after a fat-containing meal. Chylomicrons are normally
(((( cleared within 9-12 hr, and no chylomicrons should be present after a 12 hr period of fasting
(((( TG levels in the blood will vary after a meal, so the convention is to measure them after a 9 to 12 hour fast, by
which time the chylomicrons will have been cleared and only VLDL remain)))).
**** لكن انتشر الفتره االخيره انه ممكن عمل تحليل التراي بدون صيام؟؟؟؟؟؟
==============
بالفعل قبل عام 2009كان كل الجمعيات العلميه المتعلقه بالقلب و امراضه تشترط الصيام لتحليل التراي
لكن على مدار الفتره الماضيه و اعتمادا على فكره ان طوال اليوم الشخص الطبيعي ليس صائما و بالتالي مستوى التراي فى الدم معظم فترات اليوم هو
مستوى الغير صائم (مع مراعاه ان كل االبحاث معموله فى اوروبا و امريكا حيث طبيعه االكل مختلفه تماما عن المنطقه العربيه)
((((The theory is that for most of the day, levels are what they would be after meals, so a sample taken without
)))fasting could be as useful.
و بناء على الكالم ده بدأت الجمعيات العلميه تغير ال ( )guidelinesالخاص بتحاليل الدهون فمثال منذ 2014فى دول اوروبا اصبح الصيام ليس شرطا
فى تحاليل الدهون بما فيها التراي
و كذلك منذ 2016ال ( )American College of Cardiologyغيرت اشتراطتها و سمحت بالتحليل بدون صيام فى حاالت عمل التحليل لالطمئنان
بمعني انه شخص سليم و مفيش مشاكل فقط بيطمأن فهنا قالت ()Non-fasting acceptable
لكن لو فى عنده اي هيستورى عائلي المراض قلب فالزم صيام ..........و برضه لو الكلوستيرول عالي و بيتعالج فالزم ايضا يعمل التحليل بصيام
*** كمان فى كل االحوال لو طلع التراي اعلى من 200فالبد من االعاده صائما للتأكيد
(((It is recommended that people whose triglyceride levels are found to be abnormally high during a non-
)))fasting test have a fasting test to confirm the result
((((In these situations, the test report should indicate clearly that the patient has not fasted. If the testing returns
abnormal results, then it is recommended that the patient should be further assessed by collecting a fasting
))))specimen
و بالتالي لو اتكلمنا بالمنطق .........فعندنا فى المنطقه العربيه االفضل دائما اجراء التحليل بصيام و ذلك لطبيعه االكل عندنا المختلفه عن اوروبا و
كذلك لصعوبه اقناع المريض باعاده التحليل مره اخري فى الحاالت ال ()abnormal
اما اذا كانت االختالف بين النتيجتين اعلى من ( )30 mgفهنا تؤخذ عينه ثالثه خالل مده الشهرين و الطبيب يشتغل فى خطته العالجيه على متوسط
الثالث قراءات
(((( This variation can be up to 6% for TC, 7% for HDL-C, 8% for LDL-C and 21% for TG levels so it may be necessary
to perform more than one specimen collection in order to obtain valid results for the purpose of clinical
))))management
**** اذن نستنتج من كده انه من الصعب مقارنه النتيجه لنفس المريض بين معمل و االخر او حتي بين نتيجتين لنفس المعمل
=====================
][Total chol] = [VLDL-chol] + [LDL-chol] + [HDL-chol
دى المعادله الشهيره اللى عملها ( )William Friedewaldفى بحثه و كلنا بنستخدمها فى معاملنا الستنتاج ال LDL
السؤال االول :لماذا القسمه على 5بين
فى حاله الصيام بيكون كل التراي كله تقريبا محموال على ال ( )VLDLو النسبه ( )molar ratioبين التراي و الكلوستيرول فى ال ( )VLDLحوالى
5:1لذكلك اذا قسمنا ال ( )VLDLعلى 5نحصل علي ال ()VLDL cholesterol concentration
*** ملحوظه ..فى بحث اتعمل عام (DeLong, 1986) 1986وجد انه القسمه على 6.5بدال من 5تعطي نتائج اكثر دقه
السؤال الثاني :هل تصلح المعادله لكل الحاالت ......المعادله شغاله كويس فى ال ( )normolipidemic patientsلكن سيئه فى حاالت ال
( )hyperlipidemic patientsو ده االهم النهم المرضي اللى حيتعالجوا بالتاكيد
السؤال الثالث :هل فى حاله ارتفاع التراي اقسم علي 22بدال من 5للحصول على نتيجه اكثر دقه؟؟؟
كالم خاطئ و ال يوجد اساس علمي له بل اغلب الظن ان حصل خلط لالمور عند اصحاب هذا الرأي
اذ انه من الممكن قسمه التراي على 2.2او بالظبط ( )2.175للحصول على ال ( )VLDLبوحده ()mmol/L
Although the Friedwald's calculation performs reasonably well, it underestimates LDL-C compared to direct method.
It misses identifying a significant number of patients at risk of CHD by direct LDL-C. [Biswas S S NJIRM 2017; 8(4):27-
]31
و اما يكون المريض فعليا مريض دهون ( )hyperlipidemiaالي سبب سواء مكتسب او وراثي
ملحوظه :التاثير الناتج من وجود ال ( )chylomicronsفى السيرم اعلى كثيرا من باقي الدهون لكبره حجمه ()70–1000 nm
======================
و قوه االمتصاص تتناسب عكسيا مع الطول الموجي ......فكلما قل الطول الموجي زاد امتصاص الضوء لذلك اكثر التحاليل تاثرا هى ما
تستخدم ( )lower wavelengthsزى تحاليل انزيمات الكبد () AST-ALT
*** من التأثيرات الشهيره ايضا للدهون علي شغل الكيمياء هو ما يعرف بحدوث ( )Light scatteringو هو تشتيت الضوء الصادر من ال ( light
)sourceنتيجه لحجم جزيئات الدهون الكبير .......مما يتسبب فى وصول كميات ضوء اقل من المفروض لل ( )detectorفيسبب ذلك ( falsely
)increased absorbance readings
ملحوظه .......جهاز الكيمياء بيحسب ال ( )absorbanceبطرح الضوء الصادر من ال ( )light sourceمن الضوء الواصل لل ()detector
*** ايضا من التاثيرات اللي بتحصل ان النتائج تقل (خاصه لاللكتروليت) الن بعد تدوير العينه فى السنترفيوج بتتجمع جزيئات ال ( )chylomicronsو
ال ( )VLDLاعلي السيرم النها االخف وزنا و بالتالي ال ( )analytesالذائبه فى الماء زى الجزيئات الصغيره و االلكتروليت حتكون فى طبقه اسفل
الدهون الخفيفه و لذلك و الن معظم االجهزه مصممه على سحب العينه من اعلى جزء فى االنبوبه فنحصل على نتائج اقل من المفروض لعدم توزيع ال
( )analytesبتجانس فى العينه
ملحوظه ......ايضا هناك سبب اخر للنقص الخاطئ فى قياس االلكتروليت ناتج مما يعرف بال ( .............. )Volume displacementحيث ان
البالزما الطبيعيه حجم الماء فيها حوالي %92بينما فى العينه الدهنيه ممكن يصل الحجم ده لــ %75
*** ايضا تؤثر ال ( )Lipemiaعلى التحاليل المناعيه كال ( )agglutination assaysو على ال ( )ELISAالن جزيئات الدهون بتعمل ()blocking
لل ( )binding sites on antibodiesفتمنع تفاعله مه االنتيجين
======================
*** طبعا الحل االمثل هو التخلص من الدهون بترسيبها بال ( )ultracentrifugeذو السرعات العاليه ( )100,000–2.000,000 × gو لكن ده حل
غير عملي للمعامل العاديه لعدم توافر تلك االمكانيه
ملحوظه بعض االبحاث قالت ان السرعه () )(10,000×g for 15 minutesممكن تحل محل االلتراسنترفيوج بس برضه السرعه دى اعلي من
السنترفيوج العادي
*** فى حل مهم و هو انك تطلب عينه اخرى من المريض بعد قتره صيام من 8الى 10ساعات (بغض النظر هل التحليل يحتاج صيام ام ال) على
اعتبار ان ال ( )Lipemiaناتجه غالبا من سحب العينه بعد االكل
*** حل اخر و هو تخفيف العينه لتقليل تأثير الدهون بها على النتيجه لكن مع مراعاه اال يكون التخفيف اعلى من الالزم فتقل تركيز ال ( )analytesعن
ال ()analytical limits of the tested methods
*** حل اخر و هو استخدام ( )polar solventsالستخالص الدهون من العينه مثل ال ( )polyethylene glycolو ال ( )cyclodextrinو ده متواجد
فى كيتس جاهزه زى ال ( )Lipoclearو اللى بتعتمد فكرته على انه ( )non-ionic polymerيقدر يتحد مع ال ( )lipidsفتقدر ترسبها بسهوله بالتدوير
فى السنترفيوج العادي و تستخدم ال ( )supernatantالرائق فى الشغل .........و رغم سهوله الطريقه اال ان العديد من االبحاث بتقول انها
( )unreliableو ممكن تؤثر على نتائج التحاليل
*** اخيرا فى طريقه ممكن استخدامها فى المعمل انك تحفظ السيرم ال ( )lipemicطوال الليل فى الثالجه ( )overnight refrigeration at 4oCفتالقي
ان ال ( )chylomicronsكونت ( )creamy layerفى اعلي السيرم تاركه السيرم اسفلها رائق الى حد ما و يمكن تدويره و استخدامه بشكفل افضل و اقل
تأثيرا على الشغل
د /خالد مجدي
النهارده النتيجه دى مثال واضح لتأثير العينات ال ( )lipemicعلى نتيجه صوره الدم
النتيجه على الشمال واضح فيها تأثير الدهون على نتيجه الهيموجلوبين (بتعلي النتيجه لتأثير ال light scatteringالن قياس الهيموجلوبين فى الجهاز
بيتم )spectrophotometrically
و بالتالي بتتأثر ايضا القيم المحسوبه من الهيموجلوبين زي ال ( )MCHاللى هو ناتج من قسمه الهيموجلوبين على عدد كرات الدم الحمراء
**** ايضا فى بعض الحاالت ال ( )severe lipemiaبتزود عد الصفائح الن الجهاز بيعد ال ( )Large lipidsعلى انها صفائح
اما الصوره على اليمن فهي نتيجه نفس العينه بعد ما اتحلت المشكله بال ( )plasma replacementو ده معناه تدوير العينه تدوير خفيف فى
السنترفيوج بحيث ال يؤثر علي الصفائح و بعدها نسحب كميه البالزما و نستبدلها بكميه مماثله من محلول الملح و نقلب العينه جيدا و ندخلها تاني على
الجهاز للحصول على نتيجه مظبوطه بعد ازاله تأثير الدهون من العينه
د /خالد مجدي
-8تأثير ال ) (lipemiaو ال ( )Hemolysisعلى تحاليل السيوله زي ال ()PT
و ال ()PTT
السالم عليكم
سؤال عن تأثير ال ) (lipemiaو ال ( )Hemolysisعلى تحاليل السيوله زي ال ( )PTو ال ()PTT
==============================================
مبدئيا عندنا طريقتين لعمل ( )clot detectionاو بمعنى اخر لقياس لسيوله
االولي و هى االجهزه المعتمده على ال ( )Photo-Optical End-Point Detectionزى جهاز ( )Coatron M1: TECOو دى بتعتمد على مبدأ ال
( )turbidimetryحبث تقيس مقدار التغير فى ال ( ............. )plasma optical densityفبدء تكون خيوط ال fibrinتجعل الضوء يتشتت
( )causes light to scatterمما يغير ال ( )ODللبالزما فذلك يعني ان الجلطه تكونت
الثانيه و هى االجهزه المعتمده على ال ( )Mechanical End-Point Detectionزى جهاز ( )CoaDATAو دى بتعتمد على ان في البالزما
( )vibrating steel ballو مع تكون ال fibrinلزوجه البالزما تبدء تزيد و بالتالي تتوقف حركه ال ( )steel ballو يعطى الجهاز زمن تكون الجلطه
الطريقتين بحثيا و علميا متقاربي الدقه جدا و يعتمد عليهم ......مع مالحظه ان االجهزه ال ( )Photo-Opticalمحتاجه تيار كهربائي ثابت
======================
تاثير تكسير كرات الدم الحمراء و اللي بيكون احد االخطاء ال ( )pre-analyticalالشهيره سبب رئيسي لرفض عينات السيوله فى المعامل
Hemolysis is the most common reason why coagulation test samples are rejected
السبب فى ذلك تبعا لـــ ( )Clinical and Laboratory Standard Instituteان ال ( )hemolysisيتسبب فى تنشيط مبكر لعوامل التجلط
( )premature clotting factor activationو بالتالي تتكون الجلطه مبكرا مما يؤدي ال ( )falsely shortened resultsسواء اشتغلت بتقنيه ال
( )Photo-Opticalاو ال ( )Mechanical detectionو البد من اعاده سحب العينه
================
زي ما اتكلمنا سابقا .........ان ال ( )lipemiaبتسبب ( )Turbidityللبالزما و بالتالي الزم حيحصل ( )light scatteringنتيجه لوجود جزيئات
الدهون و بالتالي حيكون فى تأثير على االجهزه اللي بتعمل بمبدأ ال ()Photo-Optical
)(falsely increase results due to excess plasma turbidity
و لكن ال تأثير لها مع االجهزه اللى بتستخدم ( )Mechanical detectionو ينصح باستخدامها فى حاالت ال ()lipemia
اما تفسير النتائج المعمليه و التعليق عليها فهو دور اصيل من ادوار اخصائي التحاليل الطبيه فى المعمل طالما كان مقيدا باحد سجالت وزاره الصحه
و نرجع للماده االولي من قانون 367لسنه ( 1954و المنظم لما يعرف مجازا بمهن التحاليل الطبيه) فحتالقيها بتقول نصا االتي عن مهنه الكيمياء الطبيه
(و مثلها مهنه الميكروبيولوجي و مهنه الباثولوجي):
ال يجوز لغير األشخاص المقيدة أسماؤهم في السجل الخاص بوزارة الصحة العمومية القيام باألعمال األتية.
أ) األبحاث أو التحاليل أو االختيارات الكيميائية الطبية ((((((وإبداء أراء في مسائل أو تحاليل كيميائية طبية))))) ويوجه عام مزاولة مهنة الكيمياء
الطبية بأية صفة عامة كانت أو خاصة.
............
يعني ايه كأخصائي تبدي رايك في مساله تتعلق بالكيمياء الطبيه؟؟؟؟؟
يعني حضرتك كأخصائي مدير للمعمل مطلوب منك بالقانون و علميا الحكم علي دقه و منطقيه النتيجه قبل ما تطلع من معملك و ده يتطلب منك معرفه
بهيستورى الحاله و معرفه عميقه بالعلوم الطبيه المعمليه الالزمه للتفسير
كمان مطلوب منك قانونا تدي رأيك فيما يخص طلب تحاليل اضافيه اخري للحاله اذا تطلب االمر ذلك بناء علي التفسير العلمي اللى عملته للحاله
الكالم ده ال يعد تجاوز منك او تعدي علي دور االخرين
انما ده تطبيق مباشر للنص القانوني اللي بيحكم المهنه و ينظمها للجميع و ال يعتبر باي حال من االحوال ممارسه للتشخيص الطبي ........بل هو
استكمال لدورك المعملي في مساعده الطبيب المعالج علي القيام بالتشخيص الطبي السليم للحاله
فاالولي هي مهمه الطبيب المعالج فقط و ال يجوز ان يتدخل فيها احد غيره فهى مسؤوليته اوال و اخيرا
اما الثانيه فهى مهمه اخصائي التحاليل الطبيه – مدير المعمل
و يقصد بتفسير النتائج ايجاد سبب علمي منطقي للنتيجه الموجوده و اللي بناء عليه تقدر تاخد قرار بان النتيجه دي ممكنه و مقبوله علميا ...او قرار
باعاده الشغل مره اخري سواء من نفس العينه او بعينه اخري من المريض
و مما ال شك فيه ان خطوه ال ( )Result interpretationالبد ان يسبقها التأكد التام من دقه الشغل المعملي نفسه (مش منطقي اني اشتغل غلط و
بعدين احتار فى تفسير النتيجه !!!!!!!)
و نشوف مثالين لتوضيح الفرق بينهم بشكل عملي
المثال االول ...حاله مريض فشل كلوي ( )Chronic renal failureنتائجه كاالتي
)Urea >>> 242 (15 - 45
الحاله هنا بالفعل تم تشخيصها من قبل فموضوع التشخيص الطبي هنا منتهي .........لكن دور اخصائي المعمل الزال قائم و هو ايجاد تفسر علمي
للنتائج الموجوده ............فالحاله فشل كلوي و بالتالي منطقي جدا ان الكليه ال تقوم بدورها فى اخراج ال ( )wasteفارتفع اليوريا و الكرياتنين .....و
الن الكليه ايضا ال تقوم بدورها فعمليه تنشيط فيتامين ( )Dتوقفت مما ادي لسوء امتصاص الكالسيوم نتج عنه ( )hypocalcaemiaاللى بدورها الزم
تحفز الغده الجار درقيه على زياده افراز ال ( )PTHكنوع من ال ( )negative feedbackلمحاوله تصحيح مستوى الكالسيوم فى الدم
اذن رغم ان الحاله فعليا ال تحتاج لتشخيص اال ان دورك المعملي البد من ممارسته و ال عالقه له بالتشخيص النهائي ....و ده نوع من انواع ضبط
الجوده فمثال لو الحاله طلع لها ال ( ) PTHاقل من الطبيعي هنا النك عملت تفسير للحاله فانت حتشك اكيد فى النتيجه و حتعيد للتاكد قبل ما تسلمها .....
فيقل جدا جدا ان تطلع من عندك نتائج خطأ
==========================
المثال الثاني طفل 10سنوات تظهر عليه اعراض الصفراء و نتائجه كاالتي
فى الحاله دي واضح ان البليروبن االندايركت اعلي من الدايركت بشكل واضح و مع نقص الهيموجلوبين فى الحاله فتقدر تقول ان فى نوع من تكسير
كرات الدم الحمراء او ال ( )Hemolytic anemiaو بالتالي فانزيمات الكبد مقبول انها تطلع طبيعيه ..........و طبعا مبرر جدا فى الحاله دى االرتفاع
البسيط لل ( )GOTبمفرده نتيجه ال ( )RBCs hemolysisالنها تحتوي على االنزيم و بالتالي يخرج للسيرم فى حاله تكسيرها
اذن كده النتائج منطقيه علميا و متوافقه مع بعضها البعض و متوافقه ايضا مع اعراض المريض (الصفراء)
هنا انتهي دورك كأخصائي تحاليل طبيه
لكن السؤال ..هل شخصت تلك الحاله؟؟؟؟؟؟ بالتاكيد ال انت فقط فسرت النتيجه لكن ايه اللى سبب الكالم ده و ايه سبب التكسير فى كرات الدم .........
ده التشخيص الطبي و المسؤول عنه فقط الطبيب المعالج الن بناء عليه سيضع الخطه العالجيه
==========================
دى فقط مجرد امثله بسيطه جدا على ممارسه التفسير المعملي للنتائج .........و انها مختلفه عن فكره التشخيص الطبي للحاله .......و انها من المهام
االساسيه الخصائي التحاليل الطبيه
اخيرا ارجو فقط من الزمالء اخصائيي الباثولوجيا االكلينيكيه ان محدش يدخل يقول انه يقدر يشخص الحاله طبيا !!!!!!
بالتاكيد احنا عارفين انك تقدر تشخص حاالت كتير و تعالجها كمان النك فى النهايه طبيب قبل ما تترك مهنه الطب و تمارس مهنه التحاليل الطبيه
لكن طالما اصبحت اخصائي تحاليل و وقفت داخل معمل فانت ملتزم بدورك فقط و تنازلت بارداتك الحره عن دورك فى الطب فال داعي و ال معني
لممارسه الطب داخل المعامل
د/خالد مجدي
-11الفرق بين التشخيص الطبي و التشخيص المعملي
السالم عليكم
يا جماعه فى واحد عنده كذا و كذا و بيحس بكذا ده يبقي عنده ايه؟؟؟؟؟
يا جماعه واحد بيشتكى من كذا و بيحصل له اعراض كذا و كذا يبقي ايه تشخيص الحاله دى و تتعالج ازاي؟؟؟
يا جماعه فى واحد بيعانى من كذا و بيظهر عليه كذا ايه التحاليل اللى تبين هو عنده ايه؟؟؟؟
...................
اسئله قد تبدو طبيعيه من العامه الغير متخصصين فى ايا من مجاالت الطب او العلوم الطبيه
لكن
لما االقي االسئله دى و غيرها على جروبات التحاليل الطبيه و االقي اجابات كتير و متعدده على االسئله من الزمالء االخصائيين
يبقي فى حاجه غلط
يبقي فى خلط غير مبرر و غير مفهوم بين معنى التشخيص الطبي و التشخيص المعملي
..................
زميلي العزيز اخصائي التحاليل الطبيه
مهنه الطب (و هى التى تختص بتشخيص و عالج االمراض) حاجه و مهنه التحاليل الطبيه (التى تختص بتكنولوجيا التحاليل و تفسير نتائجها علميا)
حاجه تانيه خالص
الطبيب المعالج شغله االجابه على االسئله المطروحه دى .. .......و ال يوجد اى شخص اخر يستطيع اجابه تلك االسئله ده الن طبيعه دراسته تسمح له
بامتالك ادوات التشخيص الطبي السريري و من ثم وصف العالج المناسب
اما اخصائي التحاليل الطبيه فال شك ان لديه علم و خبره بالباثولوجى و فيسيولوجى الجسم و لكنه باى حال من االحوال غير مؤهل لعمليه التشخيص
الطبي السريري و ده مش عيب فيه لكل منا تخصصه فال عيب ابدا او ال يقلل منك كاخصائي تحاليل ان تنصح السائل بكل امانه ان يذهب للطبيب المعالج
اما دورك فى المعمل فيتعلق بالتفسير العلمى للنتائج (و ده طبعا يتطلب درايه كبيره بعلوم الهيستولوجى و الفيسيولوجى و الباثولوجى و البيوكمسترى و
غيرها من العلوم البيولوجيه االساسيه) و هدفك من تفسير النتائج هو تقييم دقه شغلك و مدى توافق نتائج الحاله مع بعضها و ترجيح تحاليل اضافيه ان
كان هناك حاجه لذلك و بالطبع هنا انت ال شخصت حاله المريض و ال رجحت وسيله عالج و انما التزمت بحدود دورك
فهو يلتزم كأى اخصائي تحاليل طبيه بتفسير النتائج و يترك التشخيص السريري لزميله الطبيب المعالج
(((((استثناء واحد من الكالم ده ان اخصائي التحاليل الطبيه المتخصص فى الهيماتولوجى ممكن يساعد برأيه فى التشخيص الطبي (و اغلب الحاالت دى
بتبقي حاالت صعبه التشخيص من االساس))))))
اخيرا
احترام التخصص هو نوع من الرقي االخالقي و المهنى فى اى دوله و نرجو ان يكون ده اسلوب التعامل على الجروبات فى االسئله اللى زى دى لخدمه
المريض بشكل حقيقي
-12اهميه الهيستوري (التاريخ المرضي للحاله) فى تفسير النتائج
السالم عليكم
GOT 15
GPT 25
PT 18 sec
اذن السؤال االصح هو <<<< ما هو التفسير العلمي للنتائج ....كده تمام ده يدخل فى نطاق شغل المعمل بل هو اساس شغل اخصائي التحاليل الطبيه
انه يفسر نتيجه التحليل للتيقن من صحتها و دقتها و اقتراح خطوات اضافيه تخدم الطبيب فى تشخيص الحاله
====
لكن ثواني ...هو فين الحاله اصال؟؟؟؟؟؟
دي المشكله الثانيه فى السؤال
حضرتك طالب تفسير النتائج المعموله لمين ؟؟؟؟؟
ليه بتتعامل مع مهنه التحاليل الطبيه كمهنه رياضيه شويه ارقام و معادالت عاوزه تفسير؟؟؟؟؟
كالم مش صح
احنا بنتعامل مع مريض و جسم بشري الزمنا عنه معلومات عشان نقدر من خاللها نفسر و نحكم علي النتيجه
الحاله المذكوره مثال لها العديد و العديد من االحتماالت الممكنه ده ان كان اصال شغلها المعملي صحيح
و عشان نحكم على ده بشكل موضوعي الزم هيستورى للحاله
غير كده يبقي شغل تنجيم مش علم !!!!!!!!!
و عشان نكون متفقين و (ارجو من ادمن جروبات التحاليل تعميم الموضوع ده) ان المعلومات المطلوبه معمليا للتمكن من تفسير النتائج فعليا و الزم
كأخصائي معمل تاخدها الى حاله فى معملك هى كما يلي:
** بيانات الحاله (جنس و سن و تخصص الطبيب محول الحاله ان وجد)
** شكوى الحاله بشكل عام (و تقدر تاخد المعلومه دى من المريض اثناء سحب العينه و انت بتدردش معاه و طبعا ده عاوز اخصائي محترف يعرف
يتعامل مع مريضه صح)
** اعراض مرضيه ظاهره ان وجد (و ايضا ده بيعتمد على مالحظتك للحاله اثناء السحب زى وجود edemaاو صفراء او جلد خشن بشكل مش
طبيعي او غيره من االمور الظاهره اللي بتسجلها فى دفترك مع بيانات الحاله)
** التاريخ المرضي (يعنى الحاله اللي بنتكلم عليها هل مثال مريض سكر ..مريض ضغط ...و هكذا بشكل عام دون تفاصيل)
** التاريخ الدوائي (ايضا بدون تفاصيل كالم عام هل في ادويه بتتاخد ام ال ) ......ما عدا فى تحاليل السيوله و الغده الدرقيه الزم تعرف التاريخ الدوائي
بشكل اكثر تفصيال الهميته فى تفسير النتيجه
دى المتطلبات االوليه و االساسيه للهيستورى المطلوب
و كلما كان االخصائي اللي بيتعامل مع الحاله محترف و فاهم شغله كويس حيقدر يحصل على معلومات اكثر ممكن تكون ذات فائده فى بعض الحاالت
زى التاريخ المرضي العائلي و التاريخ االجتماعى مثل نوعيه شغل المريض مثال
و علي فكره الكالم ده منصوص عليه فى المواصفة القياسية المصرية الخاصة بترخيص وتشغيل معامل التحاليل الطبية و اللي حتصدر قريبا ان شاء
هللا و ده الهميتها الكبيره فى تفسير النتيجه
طبعا بعض الزمالء بيشتكى من ان المريض بيرفض يتكلم او يقول كل الهيستورى ده ؟؟؟؟ ظنا منه ان المعمل حيألف النتيجه بناء على كالمه ده؟؟؟
و ده علي فكره قصور من االخصائي مدير المعمل
ازاى تقدر تكلم المريض صح و امتي تطلب منه البيانات دى و ازاى يطمأن ليك و يتكلم ......ده علم و خبره و ده اللي بيفرق معمل ضعيف عن معمل
قوي
و عشان كده فى دوره مبسطه بتعملها المعامل الكبيره زى البرج و المختبر لالخصائيين او باالخص للي بيسحبوا العينات بيتعلموا فيها (خدمه عمالء)
ازاى يتعاملوا مع المريض و ازاى يردوا على المواقف اللي ممكن تحصل منه زى مثال مريض رافض يقول سنه او مريض بيشتكى من ارتفاع سعر او
مريض مطلوب له عينه اخري و ازاى تتصرف في موقف زى ده او مريض جاي يقولك النتيجه دى غلط و غيرها من المواقف المتكرره فى المعامل
د /خالد مجدي
القسم االول :هى المعلومات االساسيه الضروريه لبرمجه جهاز الكيمياء لشغل التحليل و دى تشمل االتى:
** طبعا طريقه القياس ()end point, fixed time, kinetic
///////بعض االجهزه بتطلب معلومات اضافيه زى كميات المواد الداخله فى التفاعل و ممكن النورمال رينج و كده
القسم الثانى :المعلومات الخاصه بالعينه و الرئيجنت و طريقه الشغل (و ال عالقه مباشره لها بالبرمجه) و تشمل
** طريقه تحضير الرئيجنت للشغل ()REAGENTS PREPARATION
** الظروف المثاليه لحفظ الرئيجنت زى حمايته مثال من الضوء و هل يحفظ فى الثالجه او درجه حراره الغرفه و غيرها من االشتراطات للحفاظ عليه
حتى تاريخ انتهاء الصالحيه ()STORAGE AND STABILITY
و فى نقطه مهمه فى العديد من البامفلت و هى انها بتديك رقم محدد المتصاص البالنك (اللى هى رئيجنت فقط) لو طلع االمتصاص على الجهاز اعلى
منه فده دليل على عدم صالحيه الرئيجنت ( )REAGENT DETERIORATIONو بالش تشتغل بيها
و عشان كده مهم جدا تشتغل البالنك من الرئيجنت نفسه (و بالش استخدام الماء المقطر كبديل له فى بعض المعامل للتوفير)
** العينه المطلوبه للتحليل و طريقه حفظها و كمان يقولك هى ثابته كام يوم ( )SAMPLESو ده مهم جدا و بيجاوب على اسئله عديده بيسألها زمالء على
جروبات التحاليل زى اسحب العينه على ايه او العينه عدى عليها كذا ساعه ينفع اشتغلها ؟؟؟ و غيرها من االسئله اللى بتجاوب عليها البامفلت بشكل
مبسط
** طريقه الشغل ( ) PROCEDUREو طبعا ده الجزء المهم عمليا عشان تعرف بتشتغل كام على كام من الرئيجنت و العينه و تعرف بتتحضن فى درجه
حراره ايه و مده التحضين و كمان حتعرف حاجه مهمه اوى هى ال ( )color stabilityاو لحد امتى يفضل اللون المتكون ثابت ...يعنى لو اشتغلت
سكر مثال تقدر تسيب العينه المعموله وقت اد ايه قبل ما تقيسها
** المتداخالت ( )INTERFERENCESبمعنى ايه يأثر على القياس زى ال ( )hemolysisاو ال ()lipemia
القسم الثالث :و دى معلومات عامه عن التحليل و كيمياء الشغل و دى و ان كان ملهاش عالقه بالشغل العملي لكنها مفيده و حتتعلم منها اسلوب مراجع
التحاليل و تشمل
** الفكره العلميه للتفاعل الكيميائي ()PRINCIPLE OF THE METHOD
** الدالله المرضيه للتحليل بشكل مختصر ()CLINICAL SIGNIFICANCE
** النسب الطبيعيه ( )REFERENCE VALUESو ان كان ال يعتمد عليها بشكل مؤكد
فى النهايه ارجو ان كل الزمالء المبتدئين يهتموا جداااا بالبامفلت و يتعود انه ميشتغلش كيمياء من اى شركه من غيره
د/خالد مجدى
-14طريقه حساب الفاكتور فى شغل الكينتك
السالم عليكم
كل عام و انتم جميعا بخير
كلنا بنشتغل انزيمات الكبد ال GOT , GPTبالطريقه الكينتك ()kinetic
و طبعا احنا فاهمين ان فى الطريقه الكينتك بنقيس التغيير الحادث لتركيز ماده من مواد التفاعل سواء كان هذا التغير بتزايد كميتها ( increasing
)absorbanceاذا كانت الماده تتكون نتيجه للتفاعل او كان هذا التغيير بتناقص كميتها ( )decreasing absorbanceاذا كانت الماده تستهلك نتيجه
للتفاعل
هنا فى حاله انزيمى الكبد احنا بنقيس التناقص الحادث فى تركيز ماده ال ( )NADHو اللى بدوره بيعبر عن مدى نشاط انزيمي الكبد
ملحوظه :فى االنزيمين بنقيس فعليا نفس ماده ال NADHلكن الحظ ان ال substrateلكل انزيم مختلف
و اللى بيحصل بالظبط داخل جهاز الكيمياء لما تدخله التيست (العينه +الرئيجنت) و طبقا للبرمجه اللى تمت للبرنامج فالجهاز ينتظر دقيقه كامله (تسمى
ال )lag timeياخد بعدها اول قراءه (ِ )A1ثم يأخذ قراءه اخري كل دقيقه لمده ثالث دقائق ( )time intervalفيبقي عندى ()A2,A3,A4
ثم يقوم الجهاز بحساب ال ( delta absorbance )A/minبطرح القراءه الثانيه من االولى و الثالثه من الثانيه و الرابعه من الثالثه فنحصل على
ثالث قيم يؤخذ متوسطهم ( )average A/min
ثم يقوم الجهاز بضرب الرقم الناتج فى ( )factorتم ادخاله للجهاز وقت اعداد برنامج ال GOT , GPT
اللى اشتغل على اكثر من كيت لالنزيمات يعرف ان فى اكثر من فاكتور يتم اختيار واحد منهم لبرمجه الجهاز اعتمادا على كميه المتفاعالت و درجه
حراره التفاعل و الطول الموجى الذي يتم عنده القياس (فى اول تعليق صوره لبامفلت شركه هيومان GPTللتوضيح)
ملحوظه :االطوال الموجيه المستخدمه فى القياس فى كيت انزيمات الكبد تقع فى نطاق ال ( )UVو لذلك ستالحظ ان المتفاعالت فى انبوبه التفاعل ال لون
لها (حيث ان ال NADHتمتص فى نطاق ال UVالغير مرئي)
==================
السؤال دلوقتى ازاى تم حساب الفاكتور الموجود فى بامفلت الشركه؟؟؟؟؟
(((انت كأخصائى تحاليل مش كفايه انك تطلع الفاكتور من البامفلت و تبرمج الجهاز انما انت الزم تبقي عارف المبدء العلمى اللى اتعمل بيه التفاعل نفسه
و الفاكتور ازاى اتحسب)))
الفاكتور ده جاء من المعادله االتيه:
ال ( )1000دى عشان نتيجتنا فى االخر تطلع بوحده ال ( )U/Lبدل ما تطلع ()U/mL
ال ( )NADHالناس اللى درست تحليل الي حتفهم معنى كلمه ال molar absorptivityو دى معناها مقدره مول من ماده ما على امتصاص الضوء
و دى خاصيه فزيائيه فى كل ماده تختلف باختالف تركيب كل ماده كما انها حتى فى الماده الواحده تختلف باختالف درجه حراره التفاعل و الطول
الموجى الساقط على الماده .و هنا احنا بنتكلم عن ال molar absorptivityالخاص بماده ال NADHالنها زى ما اتفقنا الماده اللى حتتقاس فى
التفاعل بتاعنا
ال ( )SVدى اختصار ال sample volumeاى حجم العينه المستخدم فى التفاعل بالملي
ال ( )bدى المسافه اللى حيعدى فيها الضوء على العينه (بمعنى اخر دى عمق ال flow cellاو الكوفته) و هو 1سم دائما فى كل االجهزه
طيب تعرف ان ال molar absorptivityالخاصه بال NADHفى درجه حراره 37و باستخدام طول موجى 340هى تقريبا ( )6.3و طبعا القيمه
دى جايه من االبحاث اللى اجريت على الماده
طيب تعالي نطبق فى المعادله
(1.1*1000)/(6.3*0.1*1) = 1100 / 0.63 = 1746.03
=======================================
طيب تعالى نشوف حاجه من االخطاء اللى بتحصل فى بعض المعامل
انه لما تطلع نتيجه االنزيم عاليه المفروض حيخفف العينه
تمام
طيب بدل ما يخفف بالطريقه العلميه المعروفه (مثال لو حنخفف 1:1حنستخدم حجم من محلول الملح الى حجم من العينه و ليكن 100ميكرو الى 100
ميكرو) و ناخد منهم 100على 1مل رئيجنت و نعيد الشغل و نضرب الناتج النهائي فى 2
الشكل العام بيقول ان ده صح ما انا استخدمت نص كميه السيرم كأنى خففت ؟؟؟؟؟؟
طبعا ده غلط الن لو اخدت بالك انا قولت ان رقم الفاكتور بتاعنا بيعتمد على كميه المتفاعالت
و هنا انت غيرتها باستخدامك 50ميكرو على 1مل
يعنى لو جيت تحسب الفاكتور كده باالحجام الجديده فى نفس ظروف الحراره و الطول الموجى
يطلع كده
(1.05*1000)/(6.3*0.05*1) = 1050 / 0.315 = 3333.33
=====================
اياك انك تطلع نتيجه تحل يل بدون ما يكون النسب الطبيعيه لها مكتوبه ...........ازاى اى حد يشوف الريبوت ده يقدر يقيم النتيجه (بغض النظر ان فى
نورم االت معروفه عالميا للكل) لكنه مبدأ مفيش نتائج بدون نورمال ..........و خلي بالك من نقطه مهمه مش الزم تلتزم تماما بنورمال البامفلت او
البرنامج فمثال لما نيجى لتحليل زى السكر ........اكتب ال ( )diagnostic criteriaبتاعه منظمه الصحه العالميه افضل و ادق و تخلي شكل الريبوت
محترم بــــ ( )referenceعلمي معروف .......مثال تاني مجموعه الدهون اكتب لها برضه نورماالت من مرجع زى ( Henry's Clinical
)Diagnosis and Managementاللي مقسمه االرقام حسب درجات الخطوره ....ده يدى الريبورت بتاعك شكل و قوه افضل .............خلي
دائما نورمال شغلك معتمد على مرجع علمي فى االساس قبل ان يعتمد علي البامفلت
*** طبعا مش محتاجه توضيح انك تاخد بالك من اختالف النورمال حسب السن و حسب الجنس
سابعا :التعليق على النتائج (:)Comment
======================
ده من االمور المهمه فى التقرير .........و ليس كما يظن بعض الزمالء انه تشخيص للحاله .......فكما اتفقنا ان المعمل ليس جهه تشخيص حاالت
مرضيه ابدا
لكن فائده و الهدف العلمى من الكومنت انك توجهه نظر الطبيب لنقطه محدده مثال تطلب للحاله تحليل انت شايف انه مكمل للتشخيص .....او تطلب
تحليل احدث نتائجه ادق ......او توضح نقطه تخص التحليل اللى اتعمل
و خلي بالك الكومنتات دى مش شئ ثابت بيتحفظ ده محتاج خبره و علم كبير عشان تقدر تكتب كومنت مناسب للحاله ..........و بالتاكيد ده بيدي
تقريرك قوه كبيره و بيكون تقرير احترافي بشكل كبير
بالمناسبه الماده ( )1من قانون المزاوله بتديك الحق القانون فى كتابه تعليق على شغلك (وإبداء آراء في مسائل أو تحاليل كيمائية طبية ,وبوجه عام
مزاولة مهنة الكيمياء الطبية بأية صفة عامة كانت أو خاصة)
ثامنا :التوقيع على التقرير:
==============
توقيعك على التقرير و ختم معملك شئ مهم النه معناه انك كمدير للمعمل راجعت النتائج ده بنفسك و موافق على اخراجها للمريض .........و ده يدي
نوع من الثقه (النفسيه) للمريض و ايضا للطبيب فى تقريرك و نتيجتك
لكن انت لو وقع فى ايدك تقرير مش مختوم او ممضي .....كمريض تفكيرك منطقيا حيبقي تساؤول مين اشتغل و مين طلع النتيجه؟؟؟؟
*** و خلي بالك فى ماده فى قانون المزاوله رقم 367بتلزمك بتوقيع التقرير باسمك (يعنى ده الزام قانوني كمان)
ماده ( :)27يجب أن تحرر التقارير الخاصة بنتائج الفحص الصادرة من المعمل من أصل وصورة موقعا عليها من المدير المسئول
** و عندك تركيز معلوم هو ( )standard concentrationو انت بتدخله بنفسك للجهاز اثناء البرمجه (بتقوله مثال ان تركيز استاندر الجلوكوز =
)100
اما الكنترول:
فحناخد التعريف اللى عمله االتحاد الدولي للكيمياء السريرية لل ( )controlو اللى بيقول انه محلول معلوم القيم و يستخدم فى ضبط الجوده فقط و ليس
فى معايره االجهزه
((((The International Federation of Clinical Chemistry defines a control solution or control material as a "specimen or solution
))))"which is analyzed solely for quality control purposes, not for calibration
و بالتالي واضح من الكالم ان الكنترول ماده مستقله عن االستاندر و بستخدمها لضبط الجوده و ال تستخدم فى المعايره
****** لو انا فى االول حضرت االستاندر ( 1مل رئيجنت على 20ميكرو استاندر مثال) و دخلته للجهاز كاستاندر و قولتله ان ده تركيزه 100ملجرام
.................بعد كده حضرت االستاندر كعينه بنفس الطريقه و دخلتها للجهاز ..............مش اكيد حتدينى قر اءه 100؟؟؟ (رغم انها فى الحقيقه
قراءتها )200لكن النك انك اللى مبرمج الجهاز بقيمه محدده سابقا فاحتفظت الذاكره ان هذا التركيز يساوى 100دائما (فهل ده معناه انك اشتغلت
صح؟؟؟)
****** طيب افترض ان جهازك فيه مشكله فالتر او لمبه بتخلي االمتصاص يطلع اقل من المفروض و انت ال تعرف و اشتغلت عادى جدا العينه اللى
فاتت و طلعت لك النتائج االتيه:
???= Test concentration
اذن ببساطه الجهاز يطلع لك تركيز العينه = ( 65طبعا نتيجه مختلفه عن النتيجه االولى الصحيحه)
روحت انت مدخل االستاندر كعينه (و طبعا حيطلع امتصاصها )0.20و تطلع النتيجه 100
طيب كده جهازك اخباره ايه ؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟ مظبوط و كيماوياتى تمااااام و ال حتعرف ان في حاجه غلط؟؟؟؟؟
******* طيب انت جهازك سليم و تمام بس الكيتس حصل فيها مشكله ما بقت تعلي النتائج و انت برضه متعرفش و اشتغلت عادى جدا العينه اللى فاتت
و طلعت لك النتائج االتيه:
???= Test concentration
اذن ببساطه الجهاز يطلع لك تركيز العينه = ( 89طبعا نتيجه مختلفه عن النتيجه االولى الصحيحه و متقولش انها قريبه الن فى التركيزات العاليه
حتفرق كتير اوى و جربها رقميا)
روحت انت مدخل االستاندر كعينه (و طبعا حيطلع امتصاصها )0.64و تطلع النتيجه 100
السؤال االن ؟؟ هل ما زلت مقتنع بدقه كيماوياتك؟؟؟؟؟ و دقه جهازك؟؟؟؟؟ و دقه تقييمك للكالم ده باستخدام االستاندر كعينه؟؟؟؟؟
و شغل ضبط الجوده الفعلي على مستوى عالي بيستخدم االتنين معا او الثالثه (عند استخدام قواعد ويستجارد) اما فى المعامل الصغيره بيستخدم واحد
فقط ........
و لو حنشتغل بواحد فقط ...فاختيار ال ( )Normalو ال ال ( )Pathologicalتقيم بناء علي طبيعه شغل المعمل نفسه و تختلف من معمل الخر
مشكلته ان فترات الحفظ غالبا بسيطه (لو حفظ فى الثالجه درجه )2 - 8°Cبيفضل حوالى اسبوع فقط و طبعا محفوظ ()protected from light
عشان تطول مده الحفظ .....افصل كل 1مل من الكنترول فى ابيندورف و احفظه فى الفريزر (و االصح يبقي ديب فريزر درجه حراره )-20°Cكده
يفضل شهر كامل سليم (و ممكن اكثر فى كنترول الهرمونات)
و طبعا احنا فصلنا فى ابندورفات النك لما تطلع تشتغل بيه مينفعش ترجعه تاني بعد ما يفك من التجميد خالص فحتشتغل و تتخلص من الباقي (الن
التجميد و اعاده الفك تؤثر عليه خاصه االنزيمات) ............و اكيد مش حتشتغل منه اال لما يوصل لدرجه حراره الغرفه بدون ما تضعه فى ( water
)bathاو ()incubator
ملحوظه :فى انواع من الكنترول Liquidجاهزه للشغل تحفظ فى الثالجه و لما تيجي تشتغل بيها فقط تفتحها و تقسمها فى epindorfsو تحفظها فى
الفريزر
ملحوظه :التقسيم فى epindorfsفى المعامل الكبيره بيكون فى االبيندورف ما يكفي لشغل يوم واحد بحيث يستخدم ابيندورف واحد فى اليوم
النتيجه اللى طلعت من جهازك مسموح لها انها تقع فى المجال ( )Rangeالمذكور فى بامفلت الكنترول ......مثال لو مجال كنترول السكر من 73الى
......... 103فاى نتيجه بينهم تعتبر صحيحه و شغلك صحيح
بس خلي بالك كلما اقتربت من ال ( ..... )Meanاللى هو متوسطهم ( ...هنا يعنى )88فتقدر تقول بثقه ان نتائجك اكثر دقه ()more accurate
........و يا سالم لو نتيجتك بقه طلعت تساوي ال ( )Meanيعنى طلعت ()Target
ملحوظه :طبعا لو عندك شغل (يعنى حتعمل )runيبقي منطقي انك تدخل الكنترول اول حاجه عشان تتأكد من جهازك و كيماوياتك قبل ما تدخل ال run
نفسه بعد التأكد من ان الكنترول كويس
طيب ايه الخطوات اللى تتعمل (لمعمل صغير) لو نتيجه الكنترول (خارج ال )Range
==================================================
اوال :تعمل ( )calibrationجديد للجهاز ببالنك و استاندر
ثانيا :تدخل الكنترول مره اخرى (يفضل من ابيندوف جديد لتفادي ان يكون الكنترول نفسه هو المشكله) و تشوف القراءه
****** اذا كانت النتيجه فى ال ( .........) Rangeابدء اشتغل عيناتك و يعتبر الخطأ اللى حصل و ادي الي النتيجه االولي الشاذه هو مجرد خطأ
عشوائي ()random error
****** اذا كانت النتيجه ما زالت خارج ال ( .........)Rangeيبقي بنتكلم عن خطأ فى النظام او ما يسمي ( )systematic errorبالتاكيد البد من
اجراءات تصحيحيه لحل المشكله قبل الشغل ..........بعد حل المشكله ال ( )systematicدخل كنترول للتأكد من انتهاء المشكله و ابدء شغل عيناتك
Systematic errorو يقصد به :ان ده خطأ ثابت يخلي كل النتائج بتاعتي غلط و و من اسبابه:
❑ اخطأ متعلقه باالجهزه :مشكله بمصدر الضوء او الفالتر او درجه الحراره (بالنسبه لالنزيمات) او خطأ ثابت في (السحب) يجعل الكميات
المسحوبه من العينات او الرئيجنت غير دقيقه
❑ اخطأ متعلقه بالكيماويات :كانتهاء الصالحيه او حدوث ( )deteriorationنتيجه ترسيبات او تغير لون الكواشف
المخطط ده بيدي ميزه انك تحكم على شغلك اليومي بطريقه اكثر دقه ...باالضافه الى انه يتيح لك ايضا الحكم على العمليه التحليليه كلها خالل مده زمنيه
اطول و ده بيوضح امور هامه جدا
ملحوظه :لكل تحليل بيتعمل هذا المخ طط و كمان لكل كنترول يعنى مثال لو بستخدم كنترول نورمال و اخر باثو ....يبقي عندى مخطط للنورمال و
مخطط اخر للباثو
السؤال هنا ....ازاى انشئ هذا المخطط؟؟؟؟
المعامل بتعتمد فى انشاء المخطط ده علي القيم الموجوده مع الكنترول و المعموله عن طريق الشركه المصنعه و هى قيمتي ال ( )meanو ال
( .......... )standard deviationبتدخل القيم دى لالجهزه ال ( )automatedو هو بيرسم المخطط.
*** ثم خط فى المنتصف يمثل ال ( )Meanو فوقه خطوط ال ( )+1S , +2S, +3Sو اسفله خطوط ال ( )-1S , -2S, -3Sاو ما يعرف بال ( decision
)limits
و دي تعرف كاالتي
The values of the mean, as well as the values of ±1 SD, ±2 SD and ±3 SD
مثال للتوضيح .....لو ان ال ( )Meanلقراءات كنترول السكر طلع 100و ال ( )standard deviationبتاع القراءات طلع 2مثال
====================
فى المعامل الكبيره .....كل يوم (و طبعا لكل اختبار) بيتم استخدام كنترول (و ممكن 2كنترول او ثالثه واحد نورمال و واحد باثوجينك highو اخر
باثوجينك lowو يطلق عليهم )level1, level2 and level3
ملحوظه :لضمان افضل دقه للنتائج المعامل الكبيره بتشتغل قبل ال ( )runنفسه كنترول و ليكن ( )level1اذا كان تمام يبدء يشتغل ال ( )runو فى
منتصف الشغل بيدخل كنترول اخر و ليكن ( )level2و فى اخر ال ( )runيدخل كنترول مره اخري عشان يضمن من خالل نتيجته السليمه ان العمليه
كلها ما زالت شغاله كويس من بدايه ال ( )runالخره
كل اللي بيتعمل انك تاخد قراءه الكنترول و تضعها على المخطط فى اليوم المحدد للشغل كما بالشكل رقم 2و كل يوم تعمل نفس الكالم و تضع قيمه
الكنترول فى مكانها على المخطط
و لو مستخدم 2كنترول لكل يوم او runتقدر تعملهم كل واحد فى مخطط او االتنين فى مخطط واحد زي ما هو واضح بالشكل رقم 3
الفكره هنا ان طالما العمليه التحليليه ثابته ( )stable testing processمن المتوقع طبيعيا ان كنترول النهارده يكون قريب فى القيمه من بتاع امس و هكذا
اليوم اللي بعده و اللي بعده
ملحوظه :الصح ان تبقي القيم متقاربه مش ثابته فى مكان واحد يعنى عامله زي كيرف طالع و نازل فى نطاق ال ( )decision limitsالمقبول زى
المخطط االتي
اما عدم ثبات العمليه و وجود متغيرات بها سيؤدي لظهور قيم كنترول تبدء تعدي حدود ال ( )±2Sو ال ( )±3Sو دى مشكله زي ما حنشوف
االستاذ بقسم الباثولوجيا و الطب المعملي ( )Pathology and Laboratory Medicineبكليه الطب جامعه ()University of Wisconsin
**** القواعد دى عباره عن مجموعه من االشتراطات او المؤشرات (اكثر صرامه و قوه من استخدامنا السابق لمخطط ليفي) اللى على اساسها تاخد
قرار ان ال ( )analytical runده يعتبر ( )in-controlاو ()out-of-control
**** طبعا ده بيدي قوه كبيره لضبط الجوده البعد حد ممكن
**** القواعد دي مش حتقدر تستخدمها صح بشكل قوي اال لو مستخدم 2كنترول فى ال ((.... )runلكن ممكن تستخدمها لو معاك كنترول واحد
برضه)....
و هنا خالص دي قاعده ( )rejection ruleالنك ( )out of controlمفيش كالم الشغل يقف و الزم يتم عمل ()corrective action
االجراء التصحيحي فى هذه الحاله:
فى الغالب هنا ده بيكون ) (random errorخاصه لو كل النقاط السابقه كانت مظبوطه و الحل ان اعمل االتي
اوال :تأكد من انك مستخدم الكنترول المناسب و من نفس ال ( ........ )Lot Noبمعني ممكن تحصل غلطه غير مقصوده انك مثال تطلع من الفريزر
كنترول ( )level1و تختار على الجهاز شغله كانه ( )L2 or L3و بالطبع ده يسبب نتيجه خطأ غير متوقعه
ثانيا :راجع على الرئيجنت للتاكد من الصالحيه و ان كميتها مناسبه او متبقي فيها تستات كافيه (بالنسبه لالجهزه ال )automated
ثالثا :ادخال نفس الكنترول مره اخري سواء من نفس االبيندرف او من ابيندوف جديد <<<<<<< اما ان نتيجته تبقي مظبوطه و بالتالي ما حدث كان فقط
( )random errorو اما ال تكون مظبوطه و بالتالي الجأ للخطوه التاليه
رابعا :ادخال كنترول جديد من ( )levelاخر <<<<<<< اما ان نتيجته تبقي مظبوطه و بالتالي الكنترول االول فيه مشكله و االمر اعتبره انه
( )random errorفى اول ليفل
هنا اشتغل بال levelاالول تاني يوم عادي لو طلع مظبوط اكمل عادي و لو مش مظبوط ايضا كده خالص الليفل ده حصله له
( )deteriorationو اتخلص منه مينفعش اشتغل منه تاني
و اما ال تكون مظبوطه و بالتالي اتعامل مع المشكله ك ( )systematic errorو افحص االجهزه
=============
و دي قاعده معناها ان نتيجه واحده الحد االتنين كنترول المستخدمين معدى حدود ال ( )outside ±2SDزي ما هو واضح فى الشكل رقم 1
اما اذا تحققت احدي القواعد االخرى كما سئأتي ...............فيتوقف الشغل و ال يقبل ال ( )Runو البد من اتخاذ ( )corrective actionلتعديل
الوضع قبل استكمال الشغل
قاعده ال ()22S rule
=============
و دي قاعده معناها ان نتيجه االتنين كنترول المستخدمين فى ال runمعدى حدود ال ( )outside ±2SDفى نفس االتجاه (يعنى االتنين معا معدين ال
+2SDاو االثنين معا معدين ال )-2SD
او ان كنترول امس على المخطط (من نفس ال levelاو من ال levelالثاني) ايضا كان معدي حدود ال ()outside ±2SD
و هنا خالص دي قاعده ( )rejection ruleمفيش كالم الشغل يقف و الزم يتم عمل ()corrective action
قاعده ال ()R4S rule
=============
و دي قاعده معناها ان نتيجه كنترول معديه ال ( )–2SDبينما االخري معديه ال ( )+2SDفى الجهه االخري بمعنى ان الفرق بينهم ( )4 SDو ده سبب
تسميه القاعده
و هنا خالص دي قاعده ( )rejection ruleمفيش كالم الشغل يقف و الزم يتم عمل ()corrective action
ملحوظه :المعامل تستتخدم تلك القاعده مع كنترول واحد ...........يعنى مثال لو كنترول اليوم طلع معدى ال ( )+2SDيقوم يرجع لكنترول االمس من
نفس ال ( )levelلو كان معدى ال ( )–2SDبيعتبر ان القاعده مطبقه و يوقف ال run
االجراء التصحيحي فى حاله تحقق ايا من قاعدتي 22Sاو :R4S
اوال :بعد توقف ال runالبد من عمل calibrationاوال الن غالبا حتتحل المشكله
ثانيا :ادخال ابيندوف كنترول جديد من نفس ال ( )levelالى هو ظهر فيه المشكله وطبق القاعده (للتاكد من انتهاء المشكله و صحه المعايره التى تمت)
<<<<<<< اما ان نتيجته تبقي مظبوطه و بالتالي ما حدث كان فقط ( )random errorو اما ال تكون مظبوطه و بالتالي الجأ للخطوه التاليه
ثالثا :ادخال كنترول جديد من ( )levelاخر <<<<<<< اما ان نتيجته تبقي مظبوطه و بالتالي الكنترول االول فيه مشكله و االمر اعتبره انه ( random
)errorفى اول ليفل و اما ال تكون مظبوطه و بالتالي اتعامل مع المشكله ك ( )systematic errorو افحص االجهزه
ده االجراء التصحيحي االخير بعد كل مشكله فى الكنترول (و يتم بعد حل اي مشكله )systematic
***** االجراء ده معناه انى ارجع اعيد عينه بشكل عشوائي من ال ( )runمن العينات اللى اتعملت قبل ما تظهر مشكله فى الكنترول
ملحوظه :لو مشكله الكنترول كانت صباحا فى بدايه ال ( )runقبل شغل العينات الزم ارجع الخر ( )runليال فى اليوم السابق العاده عينه بشكل
عشوائي
***** طلعت نفس النتيجه او فرقها كان ( )acceptableفخالص اعتمد الشغل و النتائج
***** طلعت النتيجه الجديده ( )unacceptableفالزم اعيد اكثر من عينه اخري و لو استمر االختالف غير المقبول فالبد من اعاده ال ()run
ملحوظه :من االفكار الجيده فى النقطه دى ........انك تاخد عينه عشوائيه من شغل اخر ساعه قبل الكنترول الثاني و تعيدها ...........لو مظبوطه
خالص الشغل كله مقبول ..............لو مختلفه يبقي حتعيد الشغل اللى خالل الساعه دى فقط و تاخد عينه عشوائيه من شغل الساعه اللي قبلها و تعمل
نفس الكالم ....ده ميزته انه حيخليك تعرف المشكله فى ال runبدأت من امتي تقريبا و مش حتكون مضطر العاده ال runكامال
ملحوظه :الحكم على هل الفرق بين العينه االولي و نتيجتها بعد االعاده مقبول ( )acceptableام ال بيعتمد فى االساس على خبره الشغل و مش بس
الخبره فى مجال الجوده انما االمر يتطلب ايضا خبره اكلينيكيه فى تقييم النتيجه و هل كانت النتيجه طبيعيه ثم اصبحت ( )abnormalاو العكس و بالطبع
سيختلف االمر فى تقييم تحليل نتائجه بارقام كبيره مثل ال ( )PRLعن تحليل نتائجه بقيم صغيره زى ال ( )FT4مثال
و هى تستخدم فقط ك ( )Warning ruleو ال يتم رفض ال ( )runعلي اساسها و لكن مع متابعه قيم الكنترول فى االيام التاليه
=============
و دي قاعده معناها ان 10نتائج كنترول فى run 10متتاليين واقعين فى نفس االتجاه مع بعض (حتي لو كلهم فى رينج مقبول) ,,,,,,,,,يعنى اما كلهم
فوق ال meanفى االتجاه الموجب او كلهم تحت ال meanفى االتجاه السالب
و هى كانت قاعده غير مرجحه ايضا لرفض ال ( )runفى المعامل الكبيره النها بتعلي احتماالت رفض ال runرغم ان االمور مظبوطه ( has an
)excessive false alert rateو لذلك هى تستخدم فقط ك ( )warning ruleلوجود ( )systematic errorمحتمل بس موصلش لدرجه ان الشغل
يترفض و هنا بيتم متابعه المخطط (ممكن االمر يظبط بدون اجراءات) انما استمراريه االمر كما هو يؤكد وجود خطأ و البد من التدخل باجراءات
تصحيحيه و التعامل المشكله ك ( )systematic errorو افحص االجهزه
ملحوظه :فى بعض الحاالت و رغم االجراءات التصحيحيه تظل المشكله قائمه و هنا يلجأ المعمل النشاء مخطط خاص به كما سيأتي
مصطلح ) )Shifts and Trendsفى مخطط ليفي
=============================
فكره مخطط ليفي مش فقط بتخليني اعمل ضبط جوده لشغل اليوم او ال run
بل يمتد االمر لمتابعه العمليه ككل على مدار زمنى اطول الني بسجل كل كنترول اشتغلته كل يوم على المخطط
فرغم ان نتيجه الكنترول دائما ممكن تكون ( )within limitsاال ان ممكن يبقي فى مشكله فى الشغل اكتشفها من متابعه المخطط ........ازاى الكالم
ده؟؟؟؟
حدوث ( )shiftلنتائج الكنترول :يعرف الشيفت فى النتائج على انه على االقل 7قيم للكنترول اسفل او اعلي ال (( ... )meanده مشابه لفكره
قاعده ال )10Xو ده رغم ان كل القيم بتكون فى النطاق المقبول اال انه مؤشر على حدوث (.)systematic error
و ممكن نالقيها بتحصل عند استخدام ( )new lotللكيماويات او لم تتم معايره للجهاز قبل استخدام كيماويات جديده (و او معايره غير دقيقه)
This is a run of 8 or more below the average and indicates that the accuracy of the lab test has shifted
حدوث ( )trendلنتائج الكنترول :يعرف على انه 7قيم للكنترول بشكل تصاعدى ( )upward directionاو تنازلي ( downward
)directionبغض النظر عن مكانهم بالنسبه لخط ال ( )meanو ايضا رغم ان القيم بتكون فى النطاق المقبول اال انه مؤشر على حدوث
( ) systematic errorلكنه يحدث بشكل اكثر بطأ ..........مثال كيماويات فى ثالجه مش بتحافظ على الحراره بشكل جيد فيحصل للكيماويات
( )deteriorationتدريجي ..او مثال ( )light sourceلجهاز كيمياء بدء يحصل له ()slowly deteriorating
انشاء مخطط ليفي خاص بالمعمل ()Establishment of in-house mean
===============================================
المفترض ان المخطط اللى انشأته بناء علي حسابات الشركه يشتغل معايا كويس و لكن فى بعض االحيان اذا حدث ( )errorمش قادر اتوصل لحله بكل
الطرق (مثال تحققت قاعده ال 10Xو لم تحل بالمعايره او فحص االجهزه) او فى ( )Shifts and Trendsدائم بالمخطط و اصبح بالتالي كده شارت
الشركه مش متوافق مع المعمل عندي او ان حساب الشركه نفسها للمتوسط و االنحراف مش بالدقه الكافيه فالحل اني اعمل مخطط خاص بمعملي اعتمادا
على قراءات الكنترول اليوميه عندى كاالتي:
*** محتاج اجمع على االقل من 20الى 40قراءه كنترول (هنا اما اخد القراءات من اول ما استخدمت كنترول و اشتغل بيها عشان المدي يبقي واسع .....او اخد
القراءات من بعد ما ظهرت المشكله (و ده االفضل) )
ملحوظه :كلما كانت القراءات اكثر كلما كان المخطط ادق خاصه فى التحاليل اللي نتائجها ذات ارقام صغيره زى البوتاسيوم مثال
ملحوظه :قراءات الكنترول اللي بجمعها ينفع تبقي شغالها بنفس الكيت او بكذا كيت بكذا ( )Lot Noينفع عادي
ملحوظه :مهم جدا ان القيم ال ( )outال تأخذها و انت بتجمع قراءات الكنترول لكي ال تؤثر علي شكل المخطط (بمعني النقاط المعديه 3Sاو حتي ال
2.8Sال تؤخذ فى تجميعه االرقام)
*** كده انت معاك ال 20او ال 40قراءه للكنترول ..........احسب متوسطهم ( )Meanاللى هو مجموعهم على عددهم
*** حتحسب االنحراف المعياري ( )standard deviationللعشرين قراءه و دى سهل جدا تعملها باالكسل
*** احسب ال ()decision limits
*** ارسم المخطط و ابدء شغل عليه
ملحوظه :المفروض لما اعمل الشارت الجديد و اعيد رسم ال 10نقاط عليها (اللى كان فيهم مشكله ال )10Xاالقيهم خالص اتحركوا فوق و تحت ال
meanبما يعنى ان شغلي كده صح
ملحوظه :لو المخطط طلع مش مظبوط او النتائج لم تمثل عليه بشكل افضل من السابق يبقي خد نقاط زياده و اعيد انشاء الكيرف و افضل كده لحد ما
اوصل 80قراءه كنترول ........كده المراجع بتقول ان ده كيرف مظبوط و تقدر تحتفظ بيه و تكمل شغل عليه
مثال عملي علي استخدام قواعد ()Westgard
============================
نشوف مثال عملي فى (مخطط ليفي لكنترول جلوكوز نورمال و مخطط لكنترول جلوكوز باثولوجك)
*** حنالقي ان االيام ال ( )21, 22, 24, 26, 27, 30, 31, 33, 34, 36-44كلها كانت ( )in controlو ال runفى االيام دى مقبول
*** االيام ( )23, 28محققه قاعده ال ( )12s ruleلكن الن مفيش قواعد اخرى محققه فال runمقبول
*** اليوم 29محقق قاعده ال ( ...)12s ruleلكن بالنظر الي اليوم اللى قبله 28حنالقي الكنترول ايضا كان معدي ال ( )±2SDيعنى فى تطبيق لقاعده ال
( )22s ruleو بالتالي ال runمرفوض
*** اليوم 32فى تحقيق مباشر من االتنين كنترول لقاعده ال ( )22s ruleو بالتالي ال runمرفوض
*** اليوم 35فى تحقيق مباشر من االتنين كنترول لقاعده ال ( )R4s ruleو بالتالي ال runمرفوض
-20كيفيه تقييم طريقه معمليه جديده و مصطلح ال ()Method validation
السالم عليكم
فى الثالث مواضيع اللى فاتوا غطينا بشكل ما موضوع الكنترول و كيفيه استخدامه (و ان شاء هللا جاري تجميعهم بترتيب افضل فى ملف واحد)
لكن فى نقطه مهمه الزم نتكلم عنها و هى ان الجوده المعمليه فعليا تبدء من قبل كده
تبدء من االول من اختيار الطريقه اللى حشتغل بيها او اختيار الكيت اللى حشتغل بيها
انتشر فى الفتره السابقه اجهزه ال ( )POCTو اللي اصبحت ظاهره ملفته و العديد بيشتغل عليها هرمونات حاليا
*** حتقيس كل واحد منهم 20مره على االقل ) (20 replicatesبالطريقه اللى بتختبرها (الحظ ان كلما زاد عدد القياسات كلما كانت نتيجتك النهائيه و
حكمك على الطريقه ادق)
*** حتحسب للقيم اللي نتجت معاك ال ( )Meanو ال ( )Standard deviationو احسب ال ( )+/-2SDزي ما عملنها في بوست مخطط ليفي
==== االول و يسمي ال ( ) Run to-run precisionو ده معناه انى حقيس العينه المعلومه عدد من المرات فى ايام مختلفه (على اعتبار اني بشتغل
runفى اليوم) و كده انا بقيس حاجه اسمها ال ( )reproducibilityو الميزه هنا ان قياسي للعينه بالشكل ده بيديني فكره جيده عن ثبات الطريقه و هل
بيحصل فيها ( )long term changesام ال
*** حتجيب 2كنترول واحد نورمال و واحد باثولوجيكال
*** حتقيس كل واحد منهم 4مرات كل يوم لمده 5ايام يعني فى االخر حيبقي معاك ()20 replicates of each
*** حتحسب للقيم اللي نتجت معاك ال ( )Meanو ال ( )Standard deviationو احسب ال ()+/-2SD
السؤال دلوقتي ....امتي اقدر اقول ان الطريقه الجديده بتاعتي ()has good precision؟؟؟؟؟؟؟؟
لو ان %95من القيم اللى طلعتلي تقع ( )withinال ( )+/-2SDيبقي اقدر اقول ان طريقتي ()precise
مثال ::::لو عندي طريقه جديده لقياس السكر مثال و عملت 30قراءه للكنترول و طلعوا بالشكل ده
110, 110, 111, 111, 111, 111, 111, 111, 111, 111, 111, 111, 111, 112, 112, 112, 112, 112, 112, 112, 112, 112, 112, 112,112,112,
113, 113, 113, and 113.
و ال ( )SDحيطلع 0.8
و حتالحظ ان كل القيم واقعه بين ال ( )+/-2SDو بالتالي اقدر اقول ان الطريقه ()precise
بس خلي بالك من حاجه مهمه ......مش معني ان الطريقه طلعت ( )preciseان النتيجه اللى طالعه منها حتبقي دقيقه و صحيحه فى كل االحوال
........و لذلك الزم بعد كده تعمل اختبار لل ()Accuracy
**** يعنى ايه مصطلح ( )Accuracy؟؟؟؟
======================
ال ( )Accuracyاو دقه النتائج تعني مدي قرب النتيجه بتاعتي اللى اشتغلتها بالطريقه الجديده من القيمه الحقيقه بالفعل
وبالتالي
ممكن الطريقه الجديده تطلعلي كل القيم قريبه جدا من بعضها يعنى الطريقه ( )preciseلكن القيم الناتجه كلها بعيده عن القيمه الحقيقيه يعني الطريقه
()inaccurate
طيب ازاى اقيس ال ( ) Accuracyبتاعه طريقه جديده؟؟؟؟؟ باني اقارنها بطريقه مرجعيه معروفه و معمول لها الدراسات المؤكده انها دقيقه
مثال لو عندى كيتس جديده للصوديوم او البوتاسيوم .....قارنها بطريقه ال ISEو هي الطريقه الثابت دقتها
مثال لو عندي طريقه جديده الحد الهرمونات او دالالت االورام ........اقارنها بال RIAاو ال ( ELFIAتقنيه جهاز الفيداس) او اي طريقه مرجعيه اعلي
و هكذا
طيب المقارنه تكون ازاي؟؟؟؟
===============
ال CLIAبتقول انى حقيس على االقل 40عينه من مرضي بالطريقه المرجعيه و بالطريقه محل االختبار فى نفس الوقت بمعدل خمس عينات كل يوم لمده 8ايام
مع مراعاه:
** ان تكون العينات كلها سليمه ( )not lipemic nor haemolysedعشان ميبقاش فى اى تداخل يديني مؤشر خاطئئ
** ان تكون العينات مغطيه ال ( ) clinical rangeيعني فيها عينات طبيعيه و فيها عينات قليله و فيها عينات مرتفعه النتائج
كده اصبح عندي بعد 8ايام 40نتيجه للطريقه الجديده و 40نتيجه للطريقه المرجعيه
لو كانت Tالمحسوبه اعلي من T-valueفى الجدول ....اذن الفرق فى النتائج بين الطريقتين ( )significantو الطريقه الجديده نتائجها مش تمام
** فى ال ( ) regression analysisبتدخل نتائج المجموعتين على برنامج زي االكسل مثال و تحسب معامل االرتباط بينهم ()correlation coefficient
قيمه معامل االرتباط ( )rدائما رقم بين ( )1+و ()1-
كلما اقتربت القيمه من ( )1+كان ذلك دليل على قوه العالقه بين مجموعتي االرقام ...بعني ان النتائج بين المجموعتين متطابقه تقريبا و بكده نقدر نقول
ان الطريقه الجديده ( )accurateبعد مقارنتها بالطريقه المرجعيه
السؤال االن .....هل يكفى انك تقارن الطريقه الجديده باي طريقه فى اى معمل و تستنتج خالص انها طريقه مظبوطه؟؟؟
هل ممكن تكتفي بمقارنه عينه او اتنين و حتي 10بدون نتائج احصائيه دقيقه للحكم علي الطريقه الجديده انها ممتازه؟؟؟
*** يعني ايه كفاءه االختبار فى التنبؤ بالحاله المرضيه او ال ()predictive values؟؟
==================
ال ( :)Analytical sensitivityو دى معناها مقدره االختبار على عمل ( )detectionلكميات قليله او تركيزات قليله من الماده اللي بيبحث عنها فى
عينه المريض
يعني لما نقول
The sensitivity of the Pregnancy Rapid Test device is 25mIU/mL of HCG.
ده معناه ان نظريا اقل كميه من هرمون الحمل يقدر يعمل لها الكارت ( )detectionعشان يظهر ايجابي هى ()25mIU/mL
*** فى الكيمياء بنالقي نفس المعنى لكن تحت مسمي ()limit of detection
*** و على العكس حنالقي مصطلح ال ( )Linearityمعناه اعلي قيمه او تركيز لل ( )analyteممكن قياسه بالطريقه المستخدمه
==================
اما ال ( :)diagnostic sensitivityاو يطلق عليها ال ( )clinical sensitivityفهي مقدره االختبار انه فعال يعمل ( )detectionللحاله المرضيه بشكل
صحيح ...........يعنى بمعني اخر الشخص اللى عنده المرض تكون نتيجته فعال ايجابيه باالختبار
( )True Positivesو طلع 2نتيجتهم
مثال للتوضيح<<< لو عندي 10سيدات حوامل بالفعل و عملت لهم اختبار الحمل بالكارت و طلع منهم 8ايجابي حنسميهم
سلبيه (رغم انهم فعال حاله حمل) و حنسميهم ( )False Negativesو طبعا لها اسباب متعدده زى مثال البول كان مخفف ............هنا نقدر نقول ان حساسيه االختبار ده
(....... %80 = )clinical sensitivity
===================
ال ( :)Analytical specificityو دى معناها مقدره االختبار على عمل ( )detectionللماده اللي بيبحث عنها فقط فى عينه المريض ..............يعني
ال يكون هناك تداخل من اى ماده اخري ( )interferenceاو ( )cross-reactivityيتسبب فى ايجابيه النتيجه بشكل خاطئ
يعني لما نقول مثال بالنسبه الختبار الحمل
No cross-reactivity was observed for urine samples up to the following concentrations: LH (300 mIU/mL), FSH (500
)mIU/mL) and TSH (200 mIU/mL
ده معناه ان الهرمونات ده لحد القيم المذكوره مش حتعمل اي تداخل مع الكارت و لن تعطي نتائج ايجابيه خاطئه
==================
اما ال ( :)diagnostic specificityفهي مقدره االختبار انه فعال يعمل ( )detectionللحاالت المرضيه فقط ...........يعنى بمعني اخر الشخص السليم
اللى مش عنده المرض تكون نتيجته فعال سلبيه باالختبار
( False مثال للتوضيح<<< لو عندي 10سيدات غير حوامل و عملت لهم اختبار الحمل بالكارت و طلع منهم 1ايجابي (رغم انها فعال مش حامل) و حنسميهم
)Positivesو طلع 9نتيجتهم سلبيه و حنسميهم ( ............ )True Negativesهنا نقدر نقول ان تخصصيه االختبار ده (....... %90 = )specificity
)))Number of true negatives / (number of true negatives + number of false positives
*** الفائده من الخاصيه دى ان كلما كانت تخصصيه االختبار عاليه .....كلما كانت النتيجه االيجابيه مؤكده و يمكن االعتماد عليها بثقه لتاكيد الحاله
المرضيه ()A very specific test rules in disease
===================
اخيرا ....المقصود بمصطلح ال ( )predictive valuesللتحليل هو ما مدي دقه التحليل فى انه يثبت او ينفي المرض فعليا
و بالتالي انا عندي حاجه اسمها ( )Positive predictive valueو دى بتجاوب على سؤال ...اذا كانت نتيجه التحليل ايجابيه فما هو احتمال ان يكون
الشخص فعال مصاب
و عندى ( )Negative predictive valueو دى بتجاوب علي سؤال ....اذا كانت نتيجه التحليل سلبيه فما هو احتمال ان يكون الشخص فعال غير
مصاب
لتوضيح االمر حناخد مثال لتحليل ال ( )fecal occult bloodو حاله سرطان القولون
و السؤال هنا ........هل كل الحاالت االيجابيه لل ( )FOBعندها سرطان قولون؟؟؟؟ و هل كل الحاالت السلبيه لل ( )FOBمش مصابه بالمرض
و لالجابه على السؤال ...في دراسه اجريت على 2030شخص اتعمل لهم تحليل ال ( )FOBطلع منهم 200واحد ايجابي ( )FOBو اتعمل لهم منظار
طلع فعال 20منهم مصاب بسرطان القولون ( )True Positivesو 180غير مصابين ()False Positives
و طلعت ()%10
و تبقي 1830شخص طلعت نتيجتهم سلبيه و تم ايضا عمل منظار فاتضح ان فعال 1820منهم غير مصاب ( )True Negativesبينما فى 10حاالت
طلعت مصابه بسرطان القولون ()False Negatives
و اتحسبت ال ( )Negative predictive valueكاالتي:
)Number of true negatives / (number of true negatives + number of false negatives
و طلعت ()%99
***** و ده معناه ان كفاءه التحليل ده فى انه يشخص الحاله المرضيه فعليا ضعيفه و الزم تتبع باجراءات تشخيصه ادق بينما كفائته فى نفي الحاله
المرضيه ممتازه و يمكن الوثوق فيها
د /خالد مجدي
-22كيفيه تفادي مشكله تداخل البليروبن العالي مع قياس الكرياتنين بطريقه ()Jaffe’s method
السالم عليكم
سؤال مهم عن كيفيه تفادي مشكله تداخل البليروبن العالي مع قياس الكرياتنين بطريقه ()Jaffe’s method
الكيتس غالبا بتكتب ارقام عاليه للبليروبن بيحصل عندها تداخل مع التفاعل لكن الحقيقه ان التداخل بيحصل بدايه من ارقام اقل من المذكور فى الكيتس
في ابحاث بتقول ان التداخل بيبدء يكون ذو تاثير عند بليروبن حوالى ) (3 mg/dlبس ده طبعا رقم قليل !!!!!!!!!
ده نوع من التداخل بيسمي ( )negative interferenceبمعني كلما زاد البليروبن فى العينه بتقل نتيجه الكرياتنين
()As the bilirubin levels increased the creatinine was underestimated
==========================================
طريقه الترسيب بال TCAكنا بنستخدمها زمان قبل انتشار الطريقه ال ( )kineticالحاليه و كان القياس بيتم بعد ال ()end point
====================================
الفكره فى االستخدام هنا كاالتي:
انك تحضن السيرم ( 100ميكرو) مع 500ميكرو من ال ( )NaOH reagentالموجوده بالكيتس الخاصه بالكرياتنين لمده 5دقائق فى درجه حراره
الغرفه
ثم تضيف عليهم بعدها 500ميكرو من ال ( )picric acidالموجوده بالكيتس و تدخل على الجهاز و تقيس عادي جدا حتالقي النتيجه ظبطت معاك
الفكره علميا هنا انك بالماده القلويه اكسدت ال ( )bilirubinاللي بيتداخل فى التفاعل الى ماده ال ( )biliverdinاللى مش حتعمل تفاعل مع ال ()picric
*** الطريقتين ينفعوا لكن االبحاث ترجح الطريقه الثانيه اكثر الن نتائجها افضل و الن طريقه ال ( )TCAبتاخد وقت اطول و فيها تخفيف ممكن يعمل
غلطه فى الشغل
د /خالد مجدي
-23تقنيه الكروت فى المعمل ()flow immunochromatography
السالم عليكم
طبعا كلنا عارفين التحاليل اللى بنعملها بكروت او شرائط زى مثال تحليل الحمل
و بالتاكيد ده من ابسط التحاليل المعمليه و اى حد ممكن بسهوله يعرف يقرأ نتيجته (ايجابي ام سلبي) اعتمادا على ظهور خط واحد او خطين
لكن
قليل من اللى شغالين فى المعمل عارف المبدء العلمي للتقنيه دى
و عشان انت كأخصائي تحاليل طبيه مش كفايه انك تكون فقط بتعرف تشتغل
االهم انك تكون فاهم كويس جدا كل التفاصيل المتعلقه بطريقه الشغل
تقنيه الكروت بتعتمد على مبدأ ال ()flow immunochromatography
و دى ببساطه تقنيه تجمع بين خاصيه ال ( )antibody antigen interactionو خاصيه ال ( )lateral flowفى ورق الكروماتوجرافيا
================================================================
الكارت ده عليه 5مناطق رئيسيه
االولي )sample pad( :و ده الجزء من الكارت اللى بيكون فيه العينه
الثانيه )conjugate pad( :و ده عباره عن اجسام مضاده للماده اللى بندور عليها (فى المثال بتاعنا و هى هرمون الحمل )HCGبتكون مرتبطه بنوع
من الماركر اسمه ال ()gold colloid
الثالثه ) test line( :و دى محتويه على اجسام مضاده ايضا للماده اللى بندور عليها (لكن بالطبع مختلفه عن االولي بمعنى ان كل نوع بيمسك فى
epitopeمعين خاص به) ...االجسام المضاده دى مثبته على ال ()test line
الرابعه )control line( :و محتويه على اجسام مضاده اسمها ال ( )Anti-antibodyو هى متخصصه فى انها تمسك فى ال ()human antibodies
الخامسه ) absorbing pad( :و دى الجزء االخير من الشريط اللى بيسحب العينه و المكونات االخري على الشريط لضمان وصولهم لنهايه الشريط
طيب تعالي نفترض ان العينه (سواء بول او سيرم) فيها هرمون الحمل ال ()HCG
اللي بيحصل هنا ان الهرمون فى العينه سيرتبط باالجسام المضاده االولي مكونه ما يسمي ( )antibody conjugate/HCG complexو اللى حيتحرك
فى الشريط باتجاه ال ( )test lineو هنا يحصل ان االجسام المضاده الثانيه المثبته على هذا الخط تمسك فى ال ( )complexده فتترسب ال ( gold
)colloidبجوار بعضها و يظهر خط احمر واضح مكان ال ()test
و يستمر سريان ال ( )complexالذي لم يرتبط بال ( )testو كذلك باقي ال ( )antibody conjugateالى اخر الشريط فيقابل ال ()Anti-antibody
فيترسب االجسام المضاده المرتبطه بالماركر على خط الكنترول فيظهر خط احمر
و بالتالي فى كل االحوال سواء العينه محتويه على الهرمون او ال البد ان يظهر خط الكنترول (الناتج من ارتباط ال monoclonal antibody -gold
colloidمع ال )Anti-antibody
و اذا لم يظهر هذا الخط فده معناه انه لم يحدث ( )flowمن االساس و الكارت البد ان يستبدل
بمعنى ان ظهور خط واحد يعنى النتيجه ايجابيه و ظهور خطيين يعنى النتيجه سلبيه
ازاى الكالم ده؟؟
بكل بساطه الن التقنيه المره دى بتتعامل مع انتيجين حجمه صغير ( )Drugصعب تعمل له 2انتيبودى مختلفين فبتلجأ لفكره اسمها:
الثانيه )conjugate pad( :و ده عباره عن اجسام مضاده للماده اللى بندور عليها (و لنفترض اننا بندور مثال عن الترامادول) بتكون مرتبطه بنوع من
الماركر اسمه ال ()gold colloid
الثالثه )test line( :و دى محتويه على االنتيجين ( )Drugاللى بنبحث عنه مثبته على ال ()test line
الرابعه )control line( :و محتويه على اجسام مضاده اسمها ال ( )Anti-antibodyو هى متخصصه فى انها تمسك فى ال ()human antibodies
يتحرك هذا ال ( )complexحتى يصل ال ال ( )test lineالمثبت عليه الترامادول بنفسه و الن خالص ترامادول العينه شغل كل اماكن االنتيبودى
فمفيش حاجه حتتمسك على ال ( )test lineو لن يظهر اى خط
و يستمر سريان ال ( )complexالذي لم يرتبط بال ( )testالى اخر الشريط فيقابل ال ( )Anti-antibodyفيترسب االجسام المضاده المرتبطه
بالماركر على خط الكنترول فيظهر خط احمر
اذن ظهر خط واحد فقط الن فى ترامادول فى العينه (بمعنى ان ظهور خط واحد يقول ان النتيجه ايجابيه)
بينما لو افترضنا عدم وجود الترامادول كان ال ( )Tramadol-antibody- gold conjugateلم يجد شيئا فى العينه يتحد بيه و لما يصل الى خط ال
( )testكان حيتحد مع الترامادول المثبت عليه و يدى خط احمر و يستمر سريان المتبقي منه الى اخر الشريط ايضا مكونا خط احمر عند الكنترول
و بذلك فان ظهور خطين عند ال ( )testو ال ( )controlيقول ان النتيجه سلبيه و مفيش ترامادول فى العينه
ارجو ان اكون وضحت التقنيه دى الى حد ما و هى محتاجه نوع من التخيل حتى تتمكن من فهمها بشكل جيد ان شاء هللا
د /خالد مجدى
و كلما كان الخط خفيف كلما كان االصح هو التأكد بوسيله اكثر دقه
مثال خط ضعيف فى اختبار الحمل ...........النتيجه ايجابيه ..........و يجب التأكد بعمل اختبار حمل رقمي ()HCG
مثال الخط ضعيف فى اختبار فيروس سي ..........النتيجه ايجابيه ..........و يجب التأكد بشغل العينه ()ELISA
ملحوظه -:مفيش حاجه اسمها اكتب النتيجه ( )weak positiveفالنتيجه عند الطبيب اما ايجابيه و اما سلبيه
ملحوظه -:مفيش قراءه تؤخذ من الكروت بكل انواعها بعد 10الى 15دقيقه على االكثر .......اي خط يظهر مكان ال ( )testبعد الوقت ده ال يعتد به
............ده بيسمى ( )evaporation lineنتيجه ال ( )dryingاللى بيحصل للكارت
================
على النقيض تماما فى شغل ال ( )competitive immuno-chromatographic assaysزي كارت المخدرات ()toxicology screen
اي خط خفيف مكان ال ( )testتفسر النتيجه كنتيجه سلبيه مهما كان الخط ضعيف
السالم عليكم
الصوره المرفقه بتوضح بشكل بسيط المبدأ العلمي اللي بتعتمد عليه اجهزه ال ( )point of care testingالمنتشره فى المعامل
**** االولي هى ال ( )Colloidal gold-based immunochromatographic assayو دى نفس فكره معظم الكروت العاديه اللى بنستخدمها
فى المعمل
بالــ ) (coating antibodyو هو متخصص للماده اللى بنبحث عنها (انتيجين لبكتيريا او فيروس او غيره من البروتينات و الهرمونات) و بيبقي مرتبط
بالــ ( )colloidal gold nanoparticlesو اللى هي بتتسبب فى ظهور اللون عندما تتجمع معا
اما الثاني فهو الــ ) (capture antibodyو برضه متخصص لنفس الماده لكنه مثبت على ال ( )test lineو طبعا غير مرتبط بالنانوجولد
المهم بعد حودث التفاعل و ظهور خط فى ال ( )test lineليدل على ايجابيه النتيجه (زى اى كارت معملي) و الن شده اللون على الخط ( line
)intensityبتتناسب بشكل ما مع تركيز االنتيجين فى العينه
فتم استخدام الفكره فى قراءه اللون اللى على الكارت بواسطه ال ( )reflectance photometryاي تسليط ضوء على الخط ثم قراءه االنعكاس الحادث
بعد االمتصاص (ده مشابه جدا لفكره االسبكترو العادي فى المعمل)
و ده مناسب لمعامل الطوارئ و وحدات العنايه المركزه ............اللى محتاجه نتائج وقتيه سريعه يقيم عليها المريض بشكل عاجل التخاذ قرار
...............لكن ما داعي وجودها داخل معمل تحاليل يفترض انه المنوط به تقديم ادق نتيجه بادق الطرق المعمليه؟؟؟؟؟؟
و للحق هى مناسبه بشكل جيد كبديل لشغل الكروت العاديه فى المعامل زي مثال ال () h pylori antigen in stoolو ال ()fecal occult blood
المنتشر مؤخرا بالطريقه دى
لكن هل من المنطقي استخدامها ((((كبديل دائم)))) للتقنيات المعتمده فى الهرمونات و دالالت االورام ......خاصه ان اغلبها شغل مش ( )urgentو ال
يتطلب سرعه فى اعطاء نتيجه بغض النظر عن الدقه
و هل فعال دقه تلك التقنيات مقبوله بالنسبه للتقنيات المعتمده؟؟؟ هل فى ابحاث علميه بكده اجازت استخدام تلك االجهزه كبديل لالليزا او الفيداس او
غيره
سؤال للمناقشه
===================================
مبدئيا الطريقتين متشابهين فى اعتمادهم على خاصيه ال ( )Light scatteringاو تشتت الضوء
هنا فى هذه التقنيه يتم تعريض المحلول لضوء ذو طول موجي محدد فتقوم الجسيمات كبيره الحجم بتشتيت ذلك الضوء فى عده اتجاهات و يعتمد مقدار
هذا التشتيت على كميه تلك االجسام او تركيزها فى المحلول (تناسب طردي)
فاذا قمنا بقياس الضوء المتبقي بعد التشتت ( )transmitted lightو عليه يمكننا حساب تركيز الجسيمات فى المحلول (و معني ذلك ان يكون ال
detectorفى الجهه المقابله لمصدر الضوء) ....هنا احنا بنتكلم عن تقنيه ال ()turbidimetry
اما اذا قمنا بقياس كميه الضوء اللى تم تشتيته فعليا ( )scattered lightالى احد الزوايا (غالبا عند زاويه ٩٠درجه) ( ...بمعني ان ال detectorمش
فى الجهه المقابله لمصدر الضوء) ....هنا احنا بنتكلم عن تقنيه ال ()nephelometry
======================
الهدف منه:
اوال لو عندك كميه السيرم قليله ..........مثال لو بتشتغل تحليل زى البليروبن و محتاج مثال 400ميكرو سيرم و مش معاك غير ..............200كده
حتخفف العينه دى بغرض ان يبقي معاك كميه السيرم الكافيه للشغل (و ال تنسي بالطبع انك تضرب فى نسبه التخفيف زى ما حنشوف)
ثانيا و االهم اننا بنستخدم التخفيف للعينات اللى نتيجتها عاليه (بمعنى انها عدت حد ال linearityالخاص بالكيت)
اى رئيجنت من اي شركه بيبقي مجهز بكميه محدده من المتفاعالت تقدر تتفاعل مع كميه محده ايضا من ال sampleو اذا زادت تلك الكميه فلن تدخل
الكميات الزائده فى التفاعل
مثال ال linearityلتحليل الجلوكوز شركه ( )spinreactهو mg/dl 500
بمعنى ان اقصي كميه سكر فى العينه تقدر تتفاعل معاها الرئيجنت هى 500
برضه نتيجته على الجهاز حتطلع 500؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟ الن الكيت لن تتفاعل مع اى كميه زياده من السكر
اذن مصطلح ال linearityمتعلق بالكيت و الرئيجنت بتاعها و بيكوم الزم مذكور فى بامفلت الشغل
ناخد بالنا من نقطه كمان .......الجهاز هو االخر له دور فى موضوع ال linearityالن زى ما احنا عارفين فى قانون ( )Beer lowان التركيز
يتناسب مع االمتصاص
لكن عند التركيزات العاليه لن تستمر العالقهه الطرديه و لن يتناسب االمتصاص مع التركيز و بالتالي الزم اخفف وقتها العينه
طيب انا حعرف من فين ان ده التركيز العالي اللى القانون مش يطبق فيه و الجهاز مش يقرأ ؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟ ما هى دى ال linearityاللى محددها الكيت
بمعنى ان لما التركيز يوصل لكده .......خالص ال الجهاز حيقدر يقرأ صح و ال كل السكر اصال دخل التفاعل
و الحل ؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟ انك تخفف العينه
طريقه الخفيف ::::كل التخفيفات فى الكيمياء تتم بمحلول الملح
مثال لو انا احضرت انبوبه وضعت فيها 100ميكرو سيرم و عليهم 100ميكرو سالين (كده اقدر اقول انى نصصت المواد اللى فى السيرم) يعنى عملت
تخفيف بنسبه 1:1
طيب مثال لو قالك خفف بنسبه ( )1:5هنا المتعارف عليه معمليا انك بتحضر انبوبه فيها 100سيرم مثال و عليهم 400سالين (خلى بالك 400مش
)500بحيث يبقي مجموع االجزاء 5اى معامل التخفيف اللى حتضرب فيه هو 5
و طبعا ينفع اى كميات تدى نفس التخفيف (زى 10ميكرو و 40سالين او 20ميكرو و 80سالين و هكذا)
مثال اخر لو قالك ( )1:10يبقي حتشتغل 100سيرم و 900سالين
طيب سؤال اخفف ( )1:1و ال ( )1:5و ال ( )1:10و ال غيرهم؟؟؟؟؟؟ طبعا ده بيعتمد على خبرتك و يعتمد على االختبار اللى بتخففه
يعنى مثال فى السكر غالبا الشغل بيكون ( )1:1و بالكتير اوى ( )1:5فى حاالت نادره الن رنج السكر مش حيعدى الف فى اغلب الحاالت العاليه
انما لما نيجى نخفف انزيمات الكبد لحاله مريض ( )HAVال هنا بنخفف ( )1:10و ربما اعلى الن االنزيمات فى الحاالت دى بتوصل ل 1000و 2000
و اعلي
اخيرا :::::::::::الزم نعرف نقطه مهمه اوى و هى انه كلما زاد معامل التخفيف زادت نسبه الخطأ .............بمعنى ان النتيجه بعد التخفيف حتكون
اعلى الى حد ما من النتيجه الفعليه (و لكن بشكل غير مؤثر اكلينيكيا)
طيب امتى يبقي مؤثر؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟ لو النتيجه اصال مش عاليه و انت خففت
مثال حاله ليها GPTو طلع من غير تخفيف نتيجته 40بس انت شكيت لسبب ما فخففت ( )1:10فطلعت النتيجه بعد التخفيف 7فضربت فى 10طلعت
نتيجتك 70
هنا بقه نقول ان غالبا 70دى غلط و االصح انك تعتمد نتيجتك االولى ال 40النك لما عليت تخفيفك بشكل مبالغ فيه كده مع عينه طبيعيه زادت نسبه
الخطأ (يعنى ببساطه لو انت واخد مثال ميكرون بس زياده فانت بتخفيفك خليتهم 10ميكرون غلط و لو مثال جهازك بيقرأ 1او 2زياده انت بتخفيفك
خليتهم 10او 20زياده) و بالتالي نتيجتك االولى هى االدق
======================
ال هدف منه :تخفيف العينه لشغل السيرولوجى بشكل عام ....فمثال اذا كنا نبحث فى العينه عن اجسام مضاده (و ليكن مثال التيفود او البروسيال) فانت
تقوم بتخفيف العينه االيجابيه (بمعنى اخر تقوم بتقليل عدد االجسام المضاده فى العينه) و تعيد االختبار مره اخري فاذا كان ايجابي تخفف مره اخري و
تعيد و هكذا حتى يعطيك نتيجه سلبيه ..................و اخر نتيجه ايجابيه حصلت عليها بنسميها ( )Titerو بالطبع تتناسب طرديا مع كميه او عدد
االجسام المضاده فى العينه
اول انبوبه تضيف ليها 100ميكرو من السيرم (كده انت نصصت كميه االجسام المضاده فى العينه) نقدر نقول خففت يعنى للنص بنسبه ()1:2
اعمل ميكس كويس فى اول انبوبه و خد منها 100ميكرو انقلهم لالنبوبه الثانيه (اللى فيها 100سالين) و بكده نقدر نقول انك نصصت النص بمعنى انك
خففت بنسبه ()1:4
اعمل برضه ميكس فى االنبوبه الثانيه و خد منها 100ميكرو لالنبوبه الثالثه ليصبح تخفيفك نص الربع او ()1:8
اذن راعي ان كل شركه ليها طريقتها فى كتابه التتر و الزم تلتزم بالبامفلت مع ضروره كتابه ال ( )reference rangeالخاص بالبامفلت
السالم عليكم
كل عام و انتم بخير
كلنا اكيد اشتغلنا تحاليل الالتكس زى ال ( )CRPمثال و طبعا عارفين ان التحاليل دى بتعتمد علي مبدأ ال ( )agglutinationاللي بيحصل نتيجه تفاعل
االنتيجين مع االنتيبوبدي
من الطبيعي انك بتبدء شغلك ب ( )volume to volumeو لو طلعت النتيجه ايجابيه بتخفف و تعيد و هكذا لحد ما توصل العلي تخفيف بيدي نتيجه
اجابيه و هو ما يعرف بال ()Titre
طيب ايه اللي يحصل لو ان كميه االنتيجين اللى هو ال ( )CRPفى السيرم كبيره اوى ؟؟؟؟؟
حيحصل ان فى اول خطوه يتحد االنتيجينات الكثيره دى مع موقعي االنتيبودى فيمنع الخطوه الثانيه من الحدوث (خطوه تكوين ال )latticeو بالتالي لن
يظهر اى ( )agglutinationللعين و نعتبر ان التحليل سلبي
و طالما اتكلمنا عن ال ( )prozoneالزم نتكلم عن ظاهره مماثله بتحصل فى الكروت ( )immunochromatographic assayو بتجاوب لنا على
السؤال ده
هل ممكن تكون السيده حامل و لكن تحليل الحمل يطلع سلبي؟؟؟
هل ممكن يكون تحليل الحمل بالكارت سلبي و السيده تعمل حمل رقمي و يطلع رقم عالي ؟؟؟؟؟؟
الظاهره دى اسمها ()hook effect
و عشان نفهمها الزم نفهم سريعا ازاى الكارت بيشتغل فى الظروف العاديه
=============
الكارت ده عليه 5مناطق رئيسيه
االولي )sample pad( :و ده الجزء من الكارت اللى بيكون فيه العينه
الثانيه )conjugate pad( :و ده عباره عن اجسام مضاده للماده اللى بندور عليها (فى المثال بتاعنا و هى هرمون الحمل )HCGبتكون مرتبطه بنوع
من الماركر اسمه ال ()gold colloid
الثالثه )test line( :و دى محتويه على اجسام مضاده ايضا للماده اللى بندور عليها (لكن بالطبع مختلفه عن االولي بمعنى ان كل نوع بيمسك فى
epitopeمعين خاص به) ...االجسام المضاده دى مثبته على ال ()test line
الرابعه )control line( :و محتويه على اجسام مضاده اسمها ال ( )Anti-antibodyو هى متخصصه فى انها تمسك فى ال ()human antibodies
الخامسه )absorbing pad( :و دى الجزء االخير من الشريط اللى بيسحب العينه و المكونات االخري على الشريط لضمان وصولهم لنهايه الشريط
طيب تعالي نفترض ان العينه (سواء بول او سيرم) فيها هرمون الحمل ال ()HCG
اللي بيحصل هنا ان الهرمون فى العينه سيرتبط باالجسام المضاده االولي مكونه ما يسمي ( )antibody conjugate/HCG complexو اللى حيتحرك
فى الشريط باتجاه ال ( )test lineو هنا يحصل ان االجسام المضاده الثانيه المثبته على هذا الخط تمسك فى ال ( )complexده فتترسب ال ( gold
)colloidبجوار بعضها و يظهر خط احمر واضح مكان ال ()test
و يستمر سريان ال ( )complexالذي لم يرتبط بال ( )testو كذلك باقي ال ( )antibody conjugateالى اخر الشريط فيقابل ال ()Anti-antibody
فيترسب االجسام المضاده المرتبطه بالماركر على خط الكنترول فيظهر خط احمر
و بالتالي فى كل االحوال سواء العينه محتويه على الهرمون او ال البد ان يظهر خط الكنترول (الناتج من ارتباط ال monoclonal antibody -gold
colloidمع ال )Anti-antibody
و اذا لم يظهر هذا الخط فده معناه انه لم يحدث ( )flowمن االساس و الكارت البد ان يستبدل
=========================
طيب تعالي نفترض ان كميه الهرمون ال ( )HCGكبيره جدا فى العينه
اللي حيحصل ان كميه من الهرمون حتمسك فى ال ( )antibody conjugateعادي جدا و يحصل سريان ال ( )complexو باقي الهرمون الغير
مرتبط بشئ
و عند ال ( )test lineالكميه الكبيره المتبقيه من الهرمون حترتبط بال ( )anti HCG abالموجود علي الخط و بالتالي عملت ( )blockلموافع
االنتيبودي كلها تقريبا فمنعت ال ( )complexانه يتحد بيها و بالتالي اما ال يظهر خط عند ال ( )test lineاو يظهر خط ضعيف جدا
مع ان الهرمون موجود و كثير و لما يتعمل حمل رقمي تطلع نتيجه واضحه و عاليه
و ده ناتج عن تاثير ( )hookاللى اتكلمنا عنه
طبعا الشرح بالكتابه فى موضوع زى ده صعب اوي و ارجو ان الصور توضح االمر بشكل افضل
و كل عام و انتم بخير
د/خالد مجدي
-29مصطلح الـــ ) )Heterophile Antibodyفى شغل السيرولوجي
السالم عليكم ....سؤال عن ال Heterophile Antibodyو عالقتها بHook effect
مبدئيا ال ( )Heterophile Antibodyحتعمل تأثير عكس ال ( )Hook effectيعني حتسبب ( )false positive resultو ده فى اغلب الحاالت
ال ( )Heterophile antibodiesدى اجسام مضاده اتكونت فى جسم بعض االشخاص ضد ) )animal antigensنتيجه التعامل مع حيوانات او
منتجات حيوانيه او اصابه بكتيريه او فيروسيه و فى بعض االحيان نتيجه االصابه ببعض حاالت امراض المناعه الذاتيه
و امثله على ذلك ال ( )human anti-mouse antibodyو اللى عنده المقدره انه يتفاعل مع ال ()immunoglobins found in mice
و االكثر عرضه لتكوين تلك االجسام المضاده االشخاص اللى بيشتغلوا فى مزارع او وحدات بيطريه او معامل بتتعامل مع الفئران
بالمناسبه ال ( )miceمن اكثر الحيوانات المستخدمه النتاج ال ( )monoclonal antibodiesاللى بتستخدم فى التحاليل المناعيه زي الكروت و غيرها
و بالتالي متوقع ان الناس اللى عندها النوعيه دى من ال ( )Heterophile antibodiesتعمل تداخل مع بعض التحاليل المناعيه و تدى نتائج غير
متوقعه (بس ده مش بالضروره لكل الناس دى الن االمر معتمد علي كميه تلك االجسام المضاده فى دمهم و معتمد ايضا على نوع االختبار المناعي الللي
بيتعمل)
الكارت فى منطقه ال ( )conjugate padفيها ( )Labeled anti HCGمن مصدر حيواني و بالتالي ال ( )Heterophile antibodiesحتتفاعل معاه
و تمشي لحد ال ( )test lineاللى مثبت عليه ( )anti HCGمن مصدر حيواني ايضا و بالتالي تتفاعل معاه ال ( Heterophile antibodies
)complex with Labeled anti HCGو يظهر خط يوحى بايجابيه النتيجه رغم عدم وجود ال ( )HCGنفسه فى العينه
فى تصرف اولي و هو عمل التحليل فى البول و فى الدم .........سلبيه البول مع ايجابيه الدم بيوحى بالفعل بوجود ال ()Heterophile antibodies
النها موجوده فى الدم و غير موجوده فى البول
ايضا ممكن تخفيف السيرم عده تخفيفات متتاليه و عمل التحليل و الن ال ( )Heterophile antibodiesموجهه ضد الرئيجنت نفسه و ال دخل لل
( )HCGفى الحاله دى فنجد ان ال ( )curveالناتج ()non linear
فى الحاالت دي فى حاجه فى االبحاث اسمها ( )heterophilic blocking reagentتضاف للسيرم قبل عمل التحليل لكي تحصل علي نتائج
صحيحه للحاله
د /خالد مجدي
-30تقييم جهاز كيمياء جديد
السالم عليكم
ايه افضل جهاز كيمياء ممكن اشتريه ؟؟؟؟؟
سؤال بيتسأل كتير لما يجي زميل يجهز معمله ........و هنا في عده نقاط
النقطه االولي :احنا بنتكلم فى اغلب الحاالت على اجهزه كيمياء ( )semi-automatedبمعني ان كل الشغل مانيوال يعنى معتمد عليك فى االساس و
الجهاز دوره قراءه النتيجه فقط
و بالتالي فالزم تبقي عارف ان دقه اى نتيجه من معملك معتمده بنسبه ال تقل عن %50على كفائتك الشخصيه فى الشغل و بعد كده كفائه الجهاز نفسه
***** اذن افضل جهاز كيمياء فى الدنيا مع اخصائي ضعيف = نتائج غير جيده ******
النقطه الثانيه :الزم تحدد رنج السعر اللى تقدر تدفعه الن االسعار متفاوته جدا و فى كل فئه سعريه في اجهزه قويه و اخري ضعيفه
النقطه الثالثه :جهاز الكيمياء يقيم بناء على االتي
** تنوع برامج الجهاز و سهوله البرمجه و تعدد الفالتر المناسبه للشغل (و دى بتتعرف بسهوله من الشركه المسوقه للجهاز)
** دقه قراءات الجهاز فى بدايه تشغيله و دى بتعرفها بسابقه اعماله (بسؤال زمالء عندهم الجهاز و بتعرفهم عن طريق الشركه المسوقه للجهاز) و
ايضا بتعرفها بنفسك بالتجريب المباشر للجهاز فى معملك
** تحمل الجهاز لضغط الشغل (بمعنى ان الجهاز فى معمل بيشتغل مثال 10عينات يوميا و نتائج ممتازه ......هل نفس الجهاز لو فى معمل بيشتغل
100عينه يوميا بيدي نفس جوده النتائج طوال وقت التشغيل الخر عينه) و دي مش حتقدر تعرفها اال بسابقه اعمال للجهاز من معمل في شغل كتير
** كفاءه الجهاز مع الوقت (بمعني هل تقل كفاءه مكونات الجهاز زى مصدر الضوء او الفالتر مثال بشكل سريع) و دى برضه مش حتقدر تعرفها اال
بسابقه اعمال للجهاز من معمل عنده الجهاز من فتره
** خدمه ما بعد البيع (و دى نقطه مهمه جدا و تعني الصيانه و اصالح االعطال و توافر قطع الغيار) و اللي بيفرق فى النقطه دى الشركه المسوقه
للجهاز ..مش نوع الجهاز نفسه..
النقطه الرابعه :فى موضوع سابقه االعمال ....الزم تاخد المعلومه من اخصائي فاهم الشغل فعال و عارف قواعد التعامل الصحيح مع اجهزه الكيمياء
...........النك ممكن تاخد المعلومه من شخص مش بيتعامل باحترافيه مع الجهاز و ده بيسبب له مشاكل معاه فيديك انطباع سئ عن الجهاز نفسه رغم
ان المشكله مش فى الجهاز
النقطه الخامسه :فى موضوع التجريب الشخصي للجهاز عندك فى معملك لما فعال تشتريه من الشركه (بناء على ترجيح الزمالء الخبره له) ...........
هنا انت المفروض بتجرب الجهاز فقط ....اذن مينفعش تستخدم كيماويات ضعيفه او جديده (الن كده انت بتجرب متغيرين فى نفس الوقت و ده صعب)
.....يبقي تكون مجهز كيماوياتك الموثوق في دقتها و اللى انت فعليا حتشتغل بيها فى معملك و تجرب باستخدام كنترول كعينه معلومه القيمه عشان يبقي
الحكم منصف على الجهاز و ده االفضل او عينات موثوق فى نتائجها (معموله على جهاز كيمياء بيتشيك عليه بكنترول) ( ...و تجرب تيستات تغطي كل
الفالتر تقريبا)
-31كيف اكون متميز فى مجال التحاليل الطبيه فى مصر
هو انا لو عاوزه ابقي بيرفكت فى التحاليل يفضل يبقي مستشفي و ال معمل؟؟؟؟؟؟
========================================
سؤال ممتاز على احد الجروبات
و االجابه عليه صعبه او مش بالسهوله المتوقعه ابدا
تعالو نحاول نناقش الموضوع بشكل عملي واقعى
االول ايه معنى كلمه ((((بيرفكت))))
ببساطه المقصود انى ابقي فاهم كل حاجه (تقريبا) فى شغل المعامل
يبقي السؤال التانى ...ايه هو شغل المعامل بالظبط؟؟
نقدر نقسم الشغل فى المعمل ال 3محاور رئيسيه
المحور االول << الشغل العملي (ال ( manualمعناها ان بتش تغل بايدك معظم الشغل من تحضيرات و تجهيز تفاعل و فقط خطوه القياس يقوم بيها
الجهاز) ....و ال automatedو معناها ان فى جهاز بيقوم بكل الخطوات كامله من التحضيرات حتى القياس و انت مجرد مشغل له فقط)
ملحوظه اخرى :::مفيش حاجه اسمها حاخد دوره تحاليل و هى تعلمنى الكالم ده كله ....مفيش كده العملى مجتاج وقت و ممارسه مش دورات
طيب .........هل ممكن اكتفى بكده فى مجال التحاليل الطبيه؟؟؟؟؟
اه ممكن و حتبقي شاطر فى شغلك جدا و حيبقي عندك مهاره يدويه مميزه فى المجال
بس خلى بالك انت كده تقنى تحاليل شاطر ( )technologistمش اخصائي تحاليل ( )specialistالن االخصائي دوره ابعد كتير من مجرد الشغل
العملى
و ده المحور التانى من شغل المعمل
ده الدور االساسي و الرئيسي لالخصائي المدير الفنى للمعمل ......انه يقيم دقه النتائج علميا و مدى مطابقتها للحاله المرضيه بتاريخها المرضي و
العالجى و هل تحتاج العينات لالعاده ام ال بحيث انه يقدر يطلع نتائج صحيحه من المعمل
القيام بالدو ر ده ال يستلزم بالضروره انك تكون (بيرفكت) فى العملي الن ده دور يمارس بالعقل و العلم (لكن طبعا مفيش اى مانع توصل لدرجه بيرفكت
فى المحورين)
دى العلوم االساسيه اللى الزم تتكون على معرفه بيها قبل ما تتعمق فى علوم التحاليل الطبيه
فاما تكون درستها بالفعل فى الكليه
و اما تتعب نفسك و تذاكر الكتب الدراسيه للكورسات دى سواء من كليه علوم (اقسام بيولوجى) او كليه طب او كليه صيدله او بيطري و بالمناسبه
الكورسات دى زى بعضها بالظبط بالظبط فى الكليات االربعه
لما يبقي عندك الحد االدنى من العلوم االساسيه دى تقدر ببساطه تنتقل للمرحله التاليه و هى دراسه علوم التحاليل الطبيه بشككل متعمق و بفهم حقيقي
يمكنك من تفسير النتائج بشكل احترافي
و تشمل هذه العلوم االتى
( )clinical biochemistry, medical microbiology & parasitology, clinical hematology, body fluids
و عشان متتعبش كتير فى البحث عن مراجع تفيدك فى الجزئيه دى فهنا اسماء مجموعه من اهم كتب التحاليل الطبيه اللى حتخليك فعال
((((((بيرفكت)))))) فى جزئيه تفسير النتائج بشكل احترافي
ملحوظه :::::مفيش وقت زمنى محدد هنا النها تعتمد على مدى رغبتك فى التعلم و كمان تعتمد على الوقت المتاح فعليا ليك
ملحوظه :::::ممكن اختصار الوقت كثيرا اذا لقيت اخصائي شاطر يرضي يشرح لك تلك العلوم الطبيه النظريه
كده فعال تقدر تقول انك بقيت (((بيرفكت))) كأخصائي تحاليل طبيه فى الجانب العملي و النظري
بس ثوانى.................
ده مش معناه انك حتبقي مدير معمل تحاليل طبيه ناجح و ده المحور الثالث
==========================
المعادله اسمها Friedewald formulaنسبه للعالم الىل عملها و بتحسب ال LDLى
كاالت:
***** المعادله الثانيه :هى معادله تصحيح نتيجه الكالسيوم فى حاله نقص االلبيومين
=========================================
من المعروف ان الكالسيوم بيكون فى الدم فى صوره متأينه (حوالى )%45و الباقي يكون محمول على بروتين (االلبيومين)
فى المعمل احنا بنقيس التوتال كالسيوم (الجزء المحمول و المتأين) و بالتالي اذا كان فى نقص فى مستوى االبيومين الى سبب (زى امراض الكبد او ال
)nephrosisحيتاثر نسبه مستوى الكالسيرم اللى بنقيسه
مثال لو مريض الكالسيوم طالع ( 10.3فى الرنج الطبيعى) بس االلبيوين عنده 3.0
فى الحاله دى الزم نعمل تصحيح للكالسيوم و باستخدام المعادله يطلع الكالسيوم 11.1و ده اعلى من الطبيعي
من اكبر المشاكل ان فى بعض المعامل بتستخدم المعادله دى لحساب الكالسيوم المتأين و طبعا ده خطأ فادح الن الكالسيوم المتأين ()ionized calcium
البد من عمله بتقنيه ال ion selective electrode
=========================================
ال GFR
يعنى ايه؟؟؟؟
مصطلح ال ( )GFRاو معدل الفلتره الكلويه او مقدار ما يتم فلترته فى الكليتين خالل دقيقه واحده
ده ادق تحليل نقدر نقيم بيه وظيفه الكليه (و طبعا اكثر دقه من تحليل اليوريا و الكرياتنين اللى بيحتاجوا sever damageللكليه عشان يبدأو يعلو)
المهم احد اشهر طرق قياس ال GFRهو انى اقيس معدل فلتره ماده تتمتع بالصفات االتيه:
اكتر ماده بنطبق عليها المواصفات دى هى ماده الكرياتنين عشان كده بنعمل تحليل ال ( )Creatinine clearanceو اللى بيتم كاالتى:
بيتم تجميع بول من المريض لمده 24ساعه و فى خالل فتره التجميع بنسحب عينه سيرم (فى اول التجميع او وسطه او اخره)
يتم قياس الكرياتنين فى البول (مع مراعاه التخفيف بنسبه 1:50الن نسبه الكراتنين فى البول اعلى كثيرا من الدم) و فى الدم بنفس الكيتس المعمليه
طبعا من عيوب التحليل ده ان لو التجميع مش مظبوط النتيجه بتطلع غلط و مضلله للطبيب
كمان من عيوب التحليل ده انه فى حاالت ال ( )severe renal dysfunctionالنتيجه بتكون اعلى من اللى المفروض يكون و ده راجع الن لما وظيفه
الكليه بتتاثر جامد و بتقل عمليه الفلتره اوى جزء من الكرياتنين بينزل البول عن طريق ال ( )secretionو ده بيعمل ( )overestimationلل GFR
***** المعادله الرابعه :هى معادله حساب معدل الفلتره الكلويه ()eGFR
===================================
الن تحليل ال ( ) Creatinine clearanceبياخد وقت طويل على ما النتيجه ترجع للطبيب المعالج فالعديد من االبحاث حاولت تعمل معادالت تتمكن من
خاللها باستنتاج ال GFRبشكل تقريبي و سريع كأنى عملت تحليل تصفيه الكرياتنين
و من اشهر تلك المعادالت هى معادله ( )Cockcroft and Gaultاللى عملوها سنه 1973و اللى بتستنتج معدل الفلتره اعتمادا على مستوى الكرياتنين
فى الدم
])eGFR = [(140-age) x mass (Kg) x (0.85 if female] / [72 x serum creatinine (mg/dl
حتاخدو بالكم ان المعادله وضعت فى اعتبارها السن و تأثر الكليه بعامل الزمن فمثال من خالل المعادله دى حنالحظ ان لو شاب عنده 20سنه و وزنه
70كيلو و الكرياتنين عنده 1.1حنالقى معدل الفلتره عنده يساوى ( )106فى حين ان لو شيخ كبير عنده 80سنه و وزنه برضه 70كيلو بنفس نسبه
الكرياتنين 1.1حنالقي ان معدله فلترته يساوى ( )53يعنى تقريبا النص
كمان المعادله هنا افترضت ان معدل الفلتره فى النساء حيبقي اقل بحوالى %15من الرجال (طبعا بفرض ان االتنين نفس الكرياتنين)
من عيوب استخدام المعادالت المعتمده على الكرياتنين (رغم انها ممتازه فى تقييم حاالت ال )severe renal failureاال انها تفتقد الحساسيه الالزمه
لتقييم حاله الكليه فى المراحل االوليه ( )stage 2 and 3من مراحل ال chronic renal disease
***** المعادله الخامسه :هى معادله حساب متوسط الجلوكوز فى مده ثالث اشهر ماضيه ()eAG
=================================================
احنا عارفين تحليل الهيموجلوبين السكرى ( ) HbA1cو انه بيستخدم فى متابعه مريض السكر كل ثالثه شهور تقريبا ...طيب هل اقدر بشكل تقريبي
اعرف متوسط الجلوكوز عند المريض ده طوال فتره الثالثه شهور الماضيه؟؟؟
بمعنى انى لو قسيت السكر للمريض كل يوم خالل الثالث شهور اقدر اجيب متوسطهم بسهوله (لكن طبعا ده مش بيحصل)
اللى بيحصل انى بقيس الهيموجلوبين السكرى كدالله على تنظبم مستوى السكر فى الدم خالل الثالث شهور فهل اقدر منه احسب متوسط سكر المريض
خالل فتره القياس
اه ممكن باستخدام المعادله
eAG (mg/dl) = 28.7 × A1C − 46.7
و فى كيتس كتير بتطبق المعادله و تعملك جدول تقدر منه مباشره معرفه متوسط السكر من خالل قيمه الهيموجلوبين السكرى
***** ***** المعادله السادسه :معادله تقييم نسبه التليف الكبدى ()FIB-4 index
===================================
نظرا لصعوبه العينه الكبديه ( )liver biopsyو تكلفتها فقد رجحت االبحاث اللجوء الى بعض المعادالت التى يمكن من خاللها استنتاج درجه التليف
الكبدى
و منها تلك المعادله الشهيره
)FIB-4 = (Age X AST) / (Platelets count x √ALT
المسماه فى مصر معادله السوفالدى النها كانت تطبق على المرضى الستيضاح مدى مالئمته للعالج الجديد وقتها
و لما كانت النتيجه تطلع اقل من 1.5فده معناه ان نسبه التليف بسيطه الى متوسطه (و غالبا مكنش ياخد عالج)
و لو طلعت بين الرقمين فكان الزم اللجوء الى العينه الكبديه او اشعه ال()fibro scan
***** المعادله السابعه :هى معادالت تقييم كفاءه البنكرياس ( )HOMA IR, HOMA beta
===========================================
هل نقدر نقول لشخص ما انك ممكن تبقي مريض سكر من النوع الثانى قريب؟؟؟؟ (قبل ما سكره يرتفع فعليا)
هل اقدر اعرف مدى مقاومه الخاليا لفعل االنسولين ( )insulin resistance؟؟؟
هل اقدر اقيم كفائه خاليا البيتا فى البنكرياس و المسؤوله عن افراز االنسولين؟؟؟
كلنا عارفين ان دول اهم عاملين بيسببوا مرض السكر من النوع الثانى
حاليا باستخدام معادالت ال ( )Homeostatic model assessmentاقدر اعرف الكالم ده
طبعا كلما قلت النتيجه عن %100فمعنى ذلك نقص كفائه خليه بيتا
ثانيا :ال ( )Luteinizing hormoneايضا يفرز من الغده النخاميه و مستواه فى فى بدايه الدوره حوالى (mIU/ml )12.6-2.4
دوره الرئيسي بيبقي فى اخر ال ( )follicular phaseالن افرازه بيرتفع بشكل كبير فيما يعرف بال ( )LH surgeو ده اللى بيسبب التبويض
( )ovulationثم تكوين ما يسمى الجسم االصفر ( )corpus luteumالمسؤول عن افراز البروجيستيرون الالزم اتجهيز بطانه الرحم
زى ما احنا مالحظين ان النسبه الطبيعيه للهرمونين تقريبا متقاربين جدا فى النصف االول من الدوره
Most women have about equal amounts of LH and FSH during the early part of their cycle
ثالثا :كلنا نسمع عن مرض تكيس المبايض او ال ( )polycystic ovary syndromeو اللى سببه االساسي غير معروف بشكل واضح الى االن و بيتميز
باعراض شهيره زى
ظهور شعر بشكل غير طبيعي فى السيدات ()hirsutism
اضطرابات فى الدوره الشهريه ()oligomenorrhea or amenorrhea
و واحد من اشهر تاثيرات تكيس المبايض هو حدوث ( )insulin resistanceو الن البنكرياس سليم مفيش مشكله فبيبدا يعوض الموضوع ده بزياده افراز
االنسولين ()hyperinsulinemia
ايه مشكله زياده االنسولين ؟؟؟؟؟؟
ده بيزود افراز ال ( )GnRHالمحفز الفرازات ال ()LH
اللى بدوره بيزود انتاج ال ( )testosterone and androstenedioneفى السيدات و طبعا ده مسؤول عن بعض االعراض زى حب الشباب و الشعر فى
الجسم
و الن ال ( )testosteroneزياده فبيروح بكميات اكبر لل ( )adipocytesو يتحول هناك الى ( )Estrogensعن طريق انزيم ال ( )aromataseو نتيجه
لزياده االستروجين فى الدم بيحصل نقص فى افراز ال ()FSH
Estrogens inhibits FSH via negative feedback
اذن كده واضح ان مرضي تكيس المبايض بيكون عندهم ال ( )LHاعلى من المعتاد فى السيدات الطبيعيين (لكن مش شرط يبقي اعلى من الطبيعي ممكن
فقط يكون فى اعلى الطبيعي)
و كذلك ال ( )FSHبيكون اقل من المعتاد فى السيدات الطبيعيين (لكن ايضا مش الزم يبقي اقل من الطبيعي)
لذلك فقياس ال LHو ال FSHفى الحاله دى ممكن يبقي ملوش دالله فى التشخيص
يعنى مثال يطلع ال ( 11 = )LHو ال ( 4 = )FSHفرغم ان االرقام هنا فى نطاق الطبيعي اال ان النسبه بينهم اعلى من المعتاد فى الحاالت الطبيعيه
----------------
مبدئيا ال ( )Uric acidده ماده ناتجه عن ميتابولزم البيورين و ال ( )purineدى احدى القواعد النيتروجينيه المكونه لل ( )DNA and RNAو ده بيتم
عن طريق انزيم ال ()xanthine oxidase
ال ( )Uric acidكماده ( )wasteبتتخلص منها الكلي و بالتالي تظل نسبته فى الدم دائما ثابته
اذن ال ( )Uric acidيكون فى الدم اوال ثم تتم عمليه الفلتره و اعاده االمتصاص و ينزل المتبقي فى البول
لكن السؤال المهم ...هل انت بتقيس ال ( )Uric acidالذائب فى البول عشان تعمل بينهم الربط ده؟؟؟؟؟؟؟؟
االجابه ال
انما انت بشكل خاطئ بتربط بين مستوى ال ( )Uric acidفى الدم و وجود ( )Uric acid crystalsفى البول
**** لكن برضه ال ( )super-saturationممكن يحصل حتى لو الحمض مش عالى فى الدم نتيجه لل ( )Urinary stasisبمعنى ان الشخص مش
بيدخل الحمام لفتره طويله تسمح بان البول يتشبع بالملح اللى بيتم فلترته حتى لو مستواه طبيعى
و على الرغم من حدوث ال ( )super-saturationما زال هناك ايضا عوامل اخرى تلزم لتتكون الكريستال زى:
**** ال ( )pHللبول عامل مؤثر جدا فى تكوين الكريستال حيث ان ال ( )solubilityللملح فى البول تختلف كثيرا باختالف ال ( )pHو بالتالي لكي
تتكون الكريستال محتاجه ( )pHمعينه ال يكون عندها الملح ذائب بدرجه كبيره لكي يترسب مكونا الكريستال
at a pH of 7.0, the solubility of uric acid in urine is 158 mg/dl, reducing the pH to 5.0 decreases the solubility of uric
acid to less than 8 mg/dl
**** كمان فى بعض المواد وجودها فى البول بيمنع تكوين الكرستال ( )inhibit the nucleation, and growth of crystalsزى السترات (و دى
الماده المستخدمه فى فوار ال Urosolvineالشهير)
و بالتالي بناء على الحقائق دى فمش شرط يكون ال ( )Uric acidعالى فى الدم عشان تتكون كريستال فى البول و ايضا البول المليئ بكرستال اليورك
حتالقيه فى ناس ال ( )Uric acidفى دمهم طبيعي جدا لكن عندهم قابليه لتكوين تلك الحصوات (و اللى بيزودها العوامل اللى قولناها)
ملحوظه اخيره :كرستال اليورك لها اشكال محدده و مميزه جدااااا ( )rhombic, hexagonal plates, or rosettesفمش اى شكل امامك فى البول
تقدر تكتبه يورك الزم تلتزم تماما باالشكال المحدده له
ارجو كده يكون الفرق وضح بين الحالتين
ملحوظه اخيره :الصوره على الشمال ده شكل ال uricاما اللي على اليمين دى كرستال ال ( )Cystineو موجوده فى مرضي ال ( )cystinuriaالناتج
من عدم اعاده امتصاص السيستين ()reabsorption of cystine
فى تشابه بينهم الى حد كبير خاصه لو اليورك كان ( )colorlessو دي بعض االمور السريعه اللى تقدر من خاللها تفرق بينهم
اوال :ال ( )Cystineمش حتالقيه اال في بول ( )freshالنه بيذوب فى االمونيا اللي بتتكون كلما ترك البول بدون فحص
ثالثا :ضع بعض نقاط ال ( )dilute hydrochloric acidعلى الشريحه اذا كانت الكريستال ( )Cystineستذوب اما اليورك لن يذوب فى حمض
الهيدروكلوريك
د/خالد مجدى
-35استخدام تحاليل انزيمات القلب
مشهد ( )1فى استقبال المعمل
السالم عليكم
عليكم السالم و رحمه هللا و بركاته
لو سمحت انا كنت عاوز اعمل شويه تحاليل عشان اطمن على قلبي
طيب اتفضل استريح
===================
مشهد( )2داخل المعمل على جروبات الفيس
** لو سمحتوا بسرعه ياااا جماعه واحد عاوز يطمن على القلب اعمله ايه غير مجموعه الدهون
واحد من الناس :اعمله طبعا انزيمات القلب عشان تضمن ان القلب سليم
واحد تانى :ال اعمل كمان التروبونين ده ادق كتير و يبين اى مشكله
** طيب هو الزم يكون صائم عشان اعمله تحاليل الدهون
واحد من الناس :انا سامع ان بيقولو موضوع الصيام ده مش بقه اساسي دلوقتى يعن ممكن نعمل دهون فى اى وقت
واحد تانى :مش عارف بس انا برضه كنت سمعت كده
=============================
مشهد ( )3فى غرفه سحب العينات
السالم عليكم
لالسف سيناريو متكرر فى العديد من المعامل اللى ماسكها شخص معندوش العلم او الخبره المطلوبه الداره المعمل
تعالى نتكلم على االخطاء اللى حصلت فى السيناريو اللى فات
اوال و قبل كل شئ حضرتك تجاوزت حدود مهنتك (مهنه اجراء و تفسير نتيجه التحاليل) الى مهنه تشخيص و تقييم حاله مرضيه و ده مش دورك (مهما
كانت خبرتك و حتى ان كنت اخصائي خريج كليه الطب) الن ده علميا و ادبيا دور زميلك الطبيب المعالج (فكما ننتقد الدخالء على مهنه التحاليل الطبيه)
فيجب ايضا اال نتعدى نحن على مهنه الغير
ثانيا التصرف الصحيح علميا و ادبيا فى الموقف ده انك توجه المريض لطبيب امراض قلب (ترشيح طبيب مشهود له بالكفاءه او اكثر من طبيب) الن هو
الوحيد القادر على تقييم الحاله بشكل صحيح و تحديد مدى احتياجها فعليا لفحوصات
ثالثا حضرتك فكرتك عن امراض و مشاكل القلب خاطئه جدااااااا و بكل بساطه (و بدون علم) حضرتك اختصرت كل مشاكل القلب المتعدده و المتنوعه
الى مشكله واحده و هى امراض الشريان التاجى ( )coronary artery diseaseو بالتالي فانت اقنعت المريض خطأ ان نتيجه التحاليل الطبيعيه تعنى
ان القلب سليم و ال يوجد به مشاكل اخرى (مين قالك ان مفيش ضغط دم عالى مأثر على القلب مين قالك ان مفيش مشكله فى الصمامات مين قالك مين
قالك )...
رابعا هو ينفع تاخد معلومه علميه من االنترنت بالسمع ...طيب تعالى نشوف العلم بيقول ايه فى موضوع الدهون ...فعال التوصيات الجديده بتقول ان
مش ضرورى الصيام لعمل تحاليل الدهون .........لكن نفس التوصيات بتقول ان اى نتيجه طالعه ( )abnormalالزم تعيد تانى بصيام من 12الى 14
ساعه ...اذن واقعيا و مع حاله اول مره تعمل (يعنى مش ماشي مع طبيب و بيتابع نتيجه عالج او غيره) يبقى االفضل كثيرا تقييم الحاله بصيام
كمان خلى بالك من حاجه مهمه اغلب المعامل مش بتشتغل ال ( )LDLو بتحسبه بمعادله فريدوولد باستخدام التراجلسرايد و ده بيتاثر جدا لو التحليل بعد
االكل مباشره
اذن يبقي رغم التوصيات اللى بتقول مش الزم الصيام اال انه افضل الصيام كما تعودنا فى مصر
خامسا هنا سؤال مهم ليه عملت انزيمات القلب او التروبونين؟؟؟؟
ايه فايدتهم هنا فى الموقف ده؟؟
الزم نفهم ان استخدام ال ( )cardiac markersدى بيبقي فى حاالت الشك فى حدوث ( )myocardial infarctionلوجود اعراض الم الصدر و غيره
او فى حاله حدوث الجلطه فعليا و محتاج نتيجه االنزيمات للتعرف على حجم الجلطه و مدى تأثر القلب بها و متابعه الحاله بعد اذابه الجلطه
الن الفكره كلها ان تلك االنزيمات و التروبونين بتطلع من الخاليا العضليه للقلب فى حاله حدوث موت لها
اذن الزم التحليل يطلع طبيعى فى اى شخص طالما مفيش ()infarction
اذن هل النتيجه الطبيعيه دى تنفي وجود اى مشكله وظيفيه اخرى فى القلب ؟؟؟؟؟؟؟
اخيرا االلتزام بدورك كاخصائي تحاليل طبيه شئ اساسي يزيد من احترام المريض و الطبيب لك ........و لكى تكون فعال اخصائي تحاليل طبيه بجد
الزم تكون قد المسؤوليه دى و عندك العلم النظرى الكافى للقيام بدورك و خدمه مريضك
د خالد مجدى
-36فيسيولوجي الكليه
السالم عليكم
فى بدايه السلسله دى الزم نعرف حاجه مهمه جدااااااا و هى ان عشان اكون اخصائي تحاليل فاهم كويس كيمياء اكلينيكيه الزم الزم الزم قبل كده اكون
عندى خلفيه كويسه عن تركيب العضو اللى بتكلم عنه ( )histologyو طريقه اداء وظيفته ( )physiologyو االمراض اللى تصيبه و تأثيرها على اداءه
( )pathologyو بكده اكون خالص مؤهل لفهم و استيعاب شغل الكيمياء االكلينيكيه (او التحاليل الطبيه الخاصه بهذا العضو)
النفرون
====
احنا يهمنا نعرف عن النفرون مكونه من ال Renal corpuscleو دى عباره عن شبكه من االوعيه الدمويه (متفرعه من الشريان الكلوى الرئيسي و
اسمها ال )glomerulusو محاطه بكبسوله مزدوجه الجدار (اسمها )Bowman's capsule
حنالحظ هنا مالحظه مهمه جدا و هى ان قطر الوعاء الدموى اللى داخل لل glomerulusاكبر من قطر الوعاء الدموى الخارج منها
و ده مهم جدا لرفع الضغط داخل ال glomerulusو ده العامل االهم فى عمليه الفلتره الكلويه زى ما حيتضح بعد كده
تتصل كبسوله Bowman'sبانبوبه ملتفه مكونه من عده اجزاء ( )renal tubuleو كل مجموعه من النفرونات تصب فى انبوبه تجميع اكبر حجما ثم
فى النهايه تصب كل تلك االنابيب فى حوض الكليه ثم الحالب و المثانه
نيجى للوظيفه االساسيه اللى حتقوم بيها الكليه و هى (عمليه تكوين البول)
===========================================
و دى عمليه تتم على ثالث خطوات
اوال :ال filtration
هنا المقصود بالعمليه دى ان المياه و المواد الموجوده بالبالزما (و حجمها صغير يسمح بالفلتره) تخرج من االوعيه الدمويه الدقيقه ( )glomerulusالى
ال ( )Bowman's spaceمكونه ما يعرف بالرشيح ال ()filtrate
******** معنى كده ان البروتينات كبيره الحجم و بالطبع الخاليا ال يمكن فلترتها و ال تنزل فى البول ف االحوال الطبيعيه ********
عشان نفهم العمليه دى تمت ازاى الزم نعرف ان فى 4قوى بتتحكم فى الموضوع
االولى هى قوه اندفاع السوائل من داخل االوعيه الدمويه الى الكبسوله ( )Glomerular Hydrostatic Pressureو دى اللى زادت نتيجه دخول الدم
من وعاء كبير و خروجه من وعاء اصغر اتساعا و تصل الى 60 mm Hg
الثانيه هى القوه المانعه لخروج السوائل من الوعاء الدموى ( )Glomerular Oncotic Pressureو هى عكس االولى و القوه دى المسبب االساسي
فيها هو بروتينات الدم خاصه االلبيومين و بتصل الى 29 mm Hg
الثالثه هى ما يعرف بال ( )capsule Hydrostatic Pressureو المقصود بيها قوه اندفاع السوائل عكسيا من الكبسوله لالوعيه الدمويه و توصل الى
15 mm Hg
و بما ان البروتينات ال يتم فلترتها اذن ال وجود لبروتينات بشكل مؤثر فى الكبسوله و بالتالي فان القوه الرابعه ( )capsule Oncotic Pressureيمكن
اعتبارها 0 mm Hg
اذن محصله االربع قوى هى ( 16 mm Hgلصالح اندفاع السوائل من االوعيه الى الكبسوله)
(Glomerular Hydrostatic Pressure - Glomerular Oncotic Pressure) – (capsule Hydrostatic Pressure - capsule Oncotic
)Pressure
هنا نالحظ حاجه مهمه اوى ان الزم يكون ضغط الدم فى المعدل الطبيعى 80/120الن ده اللى حيوصل الضغط داخل ال glomerulusالى ال 60
mm Hgالالزمه التمام عمليه الفلتره و بالطبع انخفاض ضغط الدم سيكون له تاثير مباشر على عمل الكليه كما سياتى شرحه فيما بعد
بالطبع ال يمكن ان يتخلص الجسم من كل الماء و المركبات و العناصر اللى اتفلترت و كونت ال filtrateالنه محتاج الجزء االكبر من تلك المواد و
لذلك البد ان تتم عمليه اعاده امتصاص المياه و تلك المواد مره اخري من االنابيب ( )renal tubuleالى االوعيه الدمويه الموجوده حول االنابيب
()peritubular capillaries
العمليه دى تتم اما عن طريق ال ( )Passive transportاى انتقال المواد من االنابيب حيث تركيزها العالي الى الدم حيث تركيزها االقل زى ما
بيحصل مع اليوريا
او عن طريق ال ( )active transportاللى تحتاج طاقه التمام عمليه النقل زى اعاده امتصاص الجلوكوز
و المقصود بيه الكميه القصوى من ماده ما و التى تستطيع ميكانيكيه اعاده االمتصاص ارجاعها بالكامل الى الدم (و بالتالي اذا كميه الماده كانت اكبر من
الرقم ده فلن تستطيع الكليه ارجاع كل الكميه الى الدم فينزل جزء منها مع البول)
المثال االشهر هو ال
Glucose renal threshold
و ده معناه ان لو كميه الجلوكوز فى الدم اقل من الرقم ده حيتم فلترتها كامله فى الكليه ثم اعادتها مره اخرى للدم بالكامل اما اذا كانت كميه السكر اكبر
من ذلك فى الدم فلن تستطيع الكليه اعاده كل الكميه بعد الفلتره و يظهر فى البول سكر
******ملحوظه :فى حاالت بيكون فى سكر فى البول رغم ان المستوى فى الدم اقل من الرقم 180زى فى النساء الحوامل مثال و طبعا ده له اسباب
اخري خارج موضوعنا حاليا
العمليه ده معناها ان فى مواد ممكن تفرز مباشره من ال ( )peritubular capillariesالى انابيب الكليه ( )renal tubuleبدون عمليه الفلتره اساسا زى
االدويه و زى الهيدروجين (و ده مهم اوى النه عن طريق كده الكليه بتقدر تنظم ال acid base balanceفى الدم)
و العمليه دى بتتم بمعدل ثابت كل دقيقه فيما يعرف بمعدل الفلتره الكلويه Glomerular filtration rate
To Be Continued,,,,,,,,,,
-37مصطلح ال ()Glomerular filtration rate
السالم عليكم
وقفنا عند مصطلح ال ( )GFRاو معدل الفلتره الكلويه او مقدار ما يتم فلترته فى الكليتين خالل دقيقه واحده
طيب عشان نعرف معدل الفلتره الطبيعى كام الزم نشوف القصه من بدايتها.......
الكليتين بيدخلهم كل دقيقه (فى االشخاص الطبيعين) حوالى لتر دم ( 1000مل)
طيب لو اعتبرنا ان كميه البالزما فى اللتر ده تساوى 600مل (اعتمادا على ان الهيماتوكريت الطبيعى حوالى )%40
يبقي نقدر نقول ان كميه البالزما الموجوده فى الكليتين فى الدقيقه الواحده حوالى 600مل
طيب هل معنى كده ان لو المعدل اقل من كده يبقي الكليه فيها مشاكل ؟؟؟؟؟
ال طبعا الموضوع مش كده
اللى بيحصل انه بيتم تقسم معدالت الفلتره الى اقسام و كل قسم يعبر عن ضعف فى مستوى اداء الكليه
فمثال معدل الفلتره االعلى من 60يعتبر معدل طبيعي و ال يمثل مشكله
طيب لو قولنا فعال ان معدل الفلتره 120مل /دقيقه يبقي كده احنا بنتكلم فى اليوم كله على حوالى كميه 172لتر من ال filtrate
اذن المتبقي طوال اليوم هو حوالى فقط 1.7لتر من الرشيح اللى هو حيبقي البول (و ده فعال متوسط الكميه الطبيعيه للبول فى الشخص العادى يوميا)
===============
كده يبقي خروج الدم من ال glomerulusحيبقي ابطء و بالتالى يرتفع الضغط اكتر داخل ال glomerulusو بالتاكيد ده يؤدى لزياده معدل ال GFR
اللى بدورها بتتحول الى ( )angiotensin IIبواسطه انزيم مهم اسمه ()angiotensin-converting enzyme
ثانيا بيشتغل على الغده النخاميه فتفرز هرمون ال ADHاو الهرمون المانع الدرار البول و بالتالي يقل خروج البول و يحتفظ الدم بكميه مياه اكبر فيزيد
حجم الدم
ثالثا بتسشتغل على الغده الكظريه فتفرز هرمون ال ( )Aldosteroneاللى بيزود اعاده امتصاص الصوديم و بالتالي يعمل ( )Water retentionفيزيد
حجم الدم
واضح ان الهرمون له دور كده مهم فى رفع ضغط الدم عشان يساعد الكليه انها تشتغل
عشان كده فى نوع من االدويه زى ال ( )captoprilبتشتغل على النظام ده و تكسره عن طريق منع شغل انزيم ال ( )ACEفتساعد على تقليل ضغط الدم
المرتفع
================
*****طيب تعالى نفكر بالعكس لو ال ( )vasoconstrictionده حصل للوعاء الداخل ال ( )afferentده حسيبب نقص كميه الدم الواصله للنفرون و
بالتالي نقص الضغط داخل ال glomerulusو يؤدى لنقص ال GFR
To Be Continued,,,,,,,,,,
-38وظائف الكلي ()urea and Creatinine
نبدء كالمنا عن وظائف الكلي بعد ما عرفنا تركيبها ببساطه و دورها الفسيولوجى ومعنى مصطلح ال GFR
=============
============
الجسم بينتج ماده النشادر NH3كناتج لميتابولزم البروتينات (االحماض االمينيه) فى عمليه تعرف بال Deamination
و هو ما يحدث فى الكبد مكونا ماده اليوريا) (urea cycleاالقل سميه من االمونيا و تفرز فى الدم تمهيدا للتخلص منها عن طريق الكليه (اذن هى
wasteيمكن استخدامه لقياس كفاءه الكليه)
فى الكليه تتم فلتره اليوريا كامله (فى عمليه ال ) filtrationلكن بيرجع تانى للدم (عن طريق ال ) reabsorptionحوالى %60-40منها و ده اللي
بيخلى ان مستوى اليوريا الطبيعى فى الدم يتراوح بين 15و 45ملجرام
اذن لو لقيت نتيجه اليوريا اعلى من المعدل الطبيعى ....كده افهم ان فى مشكله فى الكليه ( ...تمام الى حد ما الن فى حاجه تانيه ممكن ترفع اليوريا غير
مشاكل الكليه سيأتى ذكرها الحقا)
طيب تعالى نستبدل كلمه فى مشاكل فى الكليه بمصطلح علمى صحيح و هو Decreased GFR
و بالمناسبه :::::معدل اعاده امتصاص اليوريا بيزيد اذا ارتفع مستوى هرمون ال ( ADHالهرمون المانع الدرار البول)
بمعنى ان فى حاالت الجفاف (اللى بيصاحبها ارتفاع مستوى ال ) ADHاكيد حيزيد معدل اعاده امتصاص اليوريا (خلى بالك دى نقطه حتستخدم بعد كده
!!!!)
******طيب تعالي نتكلم على مصطلح اسمه ال (BUN) blood urea nitrogen
ده مسمى قديم لتحليل اليوريا وقتما كان التفاعل المعملى يعتمد على قياس نسبه النيتروجين
طيب هل اقدر احسب ال BUNمن اليوريا
اه ممكن بانك تقسم اليوريا على ( 2.14ده اعتماده على ان الوزن الجزيئي لليوريا 60و الوزن الجزيئي لذرتى النيتروجين )28
ملحوظه معمليه ::::::::متقدرش تشتغل يوريا من عينه مسحوبه على سترات او فلوريد النهم بيعملوا تثبيط النزيم ال ( )ureaseالمستخدم فى التفاعل
===============================
الكبد بينتج ماده مهمه جدا اسمها الكرياتين ((((( )Creatineخلى بالك دى مش الكرياتنين)
الماده دى بتروح من الكبد الى العضالت و تتحول فيها الى ماده الكرياتين فوسفات عن طريق انزيم ال ()creatine kinase
الكرياتين فوسفات يعتبر مخزن طاقه بتستخدمها العضالت فى حاله نقص مصدر الطاقه الرئيسي ( ATPاثناء شغل العضله و بذل مجهود)
كل يوم بيتحول كميه من الكرياتين و الكرياتين فوسفات الى ماده wasteاللى هى الكرياتنين ( )creatinineتفرز فى الدم تمهيدا للتخلص منها عن
طريق الكليه
الحظ مالحظه مهمه :::::::::مصدر الكرياتنين هو العضالت ,,,,,تمام ,,,,,اذن بدون شك حجم الكتله العضليه هنا له دخل بمعنى ان كلما كانت الكتله
العضليه لشخص ما كبيره كل ما كان من الطبيى ان انتاج الكرياتنين عنده اكثر الى حد ما ............كمان من المنطقى ان يكون مستوى الكرياتنين
الطبيعى عند الرجال اعلى منه فى السيدات لنفس السبب (فرق الكتله العضليه)
عموما فى الرجال يتراوح الكرياتنين من 0.7الى 1.3و السيدات من 0.6الى 1.1
****** طيب دلوقتى الكرياتنين فى الدم يروح للكليه يتفلتر بالكامل و ال يرجع منه شئ فى عمليه ال ( )reabsorptionده باالضافه الى ان كميه
بسيطه منه بتخرج برضه من خالل عمليه ال ()secretion
اذن ,,,,واضح كده ان الكرياتنين افضل من اليوريا فى تقييم ال GFRاوال النه ال يتأثر باالكل ثانيا النه بيتفلتر بالكامل و مش بيرجع منه حاجه بعمليه
اعاده االمتصاص
طيب اخيرا ايه عيوب استخدام اليوريا و الكرياتنين لتقييم وظيفه الكلي؟؟؟؟؟؟؟؟
اوال :من مشاكل استخدام اليوريا كوظيفه للكليه انها بتتأثر باالكل (وجبه غنيه بالبروتين) النها ناتجه من ايض البروتين واليفضل استخدامها كوظيفه
للكليه بمفردها و كذلك يفضل الصيام قبلها من 6الى 8ساعات (و ان كان الوجبات العاديه ليست بالتألثير الكبير على مستوى اليوريا)
ثانيا :رغم ان الكرياتنين افضل فى تقييم وظيفه الكليه زى ما قولنا اال ان نتيجته عشان تفسرها بشكل جيد الزم االخذ فى االعتبار الكتله العضليه للمريض
فمثال كرياتنين 1.5ممكن يكون طبيعى فى شخص رياضي انما يكون معبر عن مشكله فى الكليه فى شخص عادى ذو كتله عضليه عاديه
ثالثا :من اكبر مشاكل التحليلين اليوريا و الكرياتنين انهم مش حيزيدوا فى الدم اال اذا كان فى ( )sever renal damageبمعنى ان فى بدايه تأثر الكلي
(يعنى فى المشاكل ال ( mild and moderateالتحليلين حيكونوا طبيعى و بالتالي مش معنى ان النتيجه طبيعيه يبقي مؤكد ان الكلي سليمه %100و
عشان كده اكيد حنحتاج حاجه تانيه نقدر نقيم بيها مشاكل الكلي اللى فى اولها نتكلم عنها بعدين
To Be Continued,,,,,,,,,,
-39مصطلح الـــــ ()Azotemia
حنكمل كالمنا النهارده عن مصطلح مهم اوى و هو ال ()Azotemia
الكلمه دى علميا تعنى ::::زياده المركبات النيتروجينيه (اى المحتويه على ذره النيتروجين) فى الدم (و باالخص اليوريا و الكرياتنين و حمض البوليك)
و المسؤول عن اخراجها خارج الجسم هو الكليه بما ان المواد دى تعتبر ()waste
اذن نقدر نقول ان زياده مستوى المركبات دى فى الدم راجع الى نقص فى معدل ال GFR
اوال :ان تكون الكليه نفسها فيها مشكله او ما يعرف بال ()renal azotemia
===========================================
وهنا فى مشكله اثرت تركيبيا على النفرون و بالتالي مش قادر يقوم بوظيفته كويس فى االخراج فترتفع مستوى المركبات النيتروجينيه فى الدم
هنا عاوزين نعرف الفرق بين مشكلتين مشهورين اوى فى الكليه
nephritis and nephrosis
=============================
المصطلح يشير الى نوع من التهاب النفرون (و باالخص التهاب ال )glomerulusو الذى يتميز بالعالمات االتيه الناتجه عن الالتهاب
اوال ...Azotemia ...و دى ناتجه عن االلتهاب الحادث فى ال ( )glomerular vesselsو الذى يحد من مقدرتها على القيام بعمليه ال ()filtration
فتتراكم المركبات النيتروجينيه فى الدم
ثانيا .... Hypertension....و الناتجه عن ال ( )water retentionنتيجه عدم مقدره النفرون على القيام بعمليه ال ( )filtrationفيزيد حجم الدم
مسببا ارتفع للضغط
ثالثا .... Nephritic edema....و دى نتيجه طبيعيه لزياده حجم الدم نتيجه ال ( )water retentionو بالتالي يزيد ال ()hydrostatic pressure
المسؤول عن دفع المياه من داخل الوعاء الدموى لخارجه
رابعا .... Hematuria ....اي ظهور كرات دم حمراء فى البول ناتجه عن االلتهاب و ال ( )damageالحادث فى االوعيه الدمويه الدقيقه فى ال
()glomerulus
خامسا.......Pyurea ...اى ظهور صديد فى البول و هو ايضا ناتج عن ال ( )leukocytic infiltrateفى حاالت االتهابات
سادسا .....Mild proteinuria ...نزول البروتين فى البول بكميات بسيطه نتيجه ال ()glomerular damage
واحد من اشهر اسباب االلتهاب ده هو ما يحدث ك ( )complicationلالصابه ببكتيريا ال group A streptococciو المسببه اللتهاب اللوز حيث
تتكون ما يعرف بال ( )immune complexesبين االجسام المضاده و انتيجينات البكتيريا و التى تترسب على ال ()glomerular membrane
مسببه التهاب يعرف ب ()Post-streptococcal glomerulonephritis
=============================
المصطلح يقصد به زياده نفاذيه ال ( )capillary walls of the glomerulusبما يسمح بنزول كميات كبيره من البروتين فى البول و لكن ال يسمح
بنزول خاليا دم حمراء او صديد
و السبب غير معلوم بشكل مؤكد للحاله و ان كان يعتبر ذو اصل مناعى و من الممكن ان يحدث فى مرضي الذئبه الحمراء و ايضا فى بعض مرضي
السكر كما انه قد يحدث فى مرضي طبيعين بدون امراض مسبقه
و تتميز هذه الحاله باالتى:
اوال ...Massive proteinuria .....و دى اهم عالمات المرض و تصل كميه البروتين فى البول الكثر من 3.5جرام فى اليوم
ثانيا .....Hypoalbuminemia ......و ده طبيعى جدا نتيجه نزول كميات كبيره من االلبيومين فى البول و بالتالي كمان تحصل حاله ()edema
نتيجه لنقص ال ()osmotic pressure
ثالثا .... Hypovolemia......خروج المياه من االوعيه الدمويه ممكن يوصل لحاله من نقص حجم الدم اللى بدورها ممكن تؤدى الى ال
()hypotension
رابعا ..... Hypogammaglobinemia......مع الوقت تبدء البروتينات كبيره الحجم كالجلوبيولين (مثل الجلوبيولينات المناعيه او االجسام المضاده)
تتسرب ايضا من الكليه مما يعرض المريض لزياده احتماليه العدوى المختلفه
خامسا ...... Hypercoagulability......كذلك و نتيجه لنزول بروتينات المسؤوله عن منع التجلط بالدم زى ال ( )anti-thrombin IIIفده يخلى
المريض اكثر عرضه لحدوث جلطات
سادسا ........ Hyperlipidemia ......نتيجه لفقد البروتينات بالشكل الكبير ده و بالتالي نقص الضغط االسموزى داخل االوعيه الدمويه فيقوم الكبد
بزياده تصنيع البروتينات لمحاوله لتعويض الفاقد ( )compensatory protein synthesisبما فى ذلك زياده انتاج ال ( )lipoproteinsو ده يخلينا
نفهم ليه الكوليستيرول دائما مرتفع فى دم مرضى ال ()nephrosis
ثانيا :ان تكون الكليه نفسها سليمه و لكن فى انسداد في الحالب او قناه مجرى البول او ما يعرف بال ()Post-renal azotemia
===========================================
هنا الكليه سليمه و بتقوم بكامل وظيفتها لكن البول مش بينزل للخارج بشكل طبيعى نتيجه وجود انسداد فى مجرى البول
االنسداد ده ربما يرجع الى وجود
حصوه فى الحالبين او تضخم البروستاتا سزاء الحميد او الخبيث مما يسد قناه مجرى البول او ممكن مع سرطان المثانه
المهم ايا كان السبب البول المتكون ده و المتراكم فى حوض الكليه و انابيب النفرون بيسبب نوع من الضغط على الكليه ( )hydronephrosisاللى
يؤدى بدوره ان الكليه الزم تقلل من ال ( )glomerular filtration rateعشان متتكونش كميات بول اضافيه تسوء الموقف اكتر و بالتالي تتراكم
المركبات النيتروجينيه فى الدم و تعلى نسبتها
ثالثا :ان تكون الكليه نفسها سليمه و ال يوجد اى انسداد في الحالب او قناه مجرى البول و لكن كميه الدم الواصله للكليه قليله او ما يعرف بال (Pre-
)renal azotemia
===========================================
فاكرين لما اتكلمنا فى محاضره سابقه على ان الزم الدم يكون داخل للكليه بمعدل طبيعي و ضغط الدم يكون سليم عشان ده اللى حيسبب ان ال
( )filtrationيتم بشكل صحيح !!!!!
جلطه فى الوريد الكلوى (و دى بتحصل قى مرضي ال nephrotic syndromeنتيجه زياده ال hypercoagulabilityزى ما شرحنا فوق)
المهم برضه ايا كان السبب فنقص وصول الدم للكليه بالتبعيه معناه ان الضغط داخل ال ( )glomerulusمش حيرتفع للدرجه اللى تعمل ال
( )filtrationو بالتالي يقل ال GFRو تتراكم المركبات النيتروجينيه فى الدم
طبعا اذا رجع حجم الدم او ضغط الدم لوضعه الطبيعي خالص الموضوع انتهى و يرجع تانى ال GFRو مفيش مشاكل الن اصال الكليه سليمه
ملحوظه مهمه :::::::::ال ( )Acute tubular necrosisممكن يحصل السباب اخرى زى الجرعات الزائده من ادويه ال( )Gentamicinو ال
( )Cisplatinو كذلك فى الحوادث نتيجه لل ( )myoglobinuriaعشان كده اى حادث بيتعمل للحاله وظائف كلي و كمان لو فى تحلل للدم نتيجه انيميا
تكسيريه مثال ال بيحصل فيها ( )hemoglobinuriaتؤثر على انابيب الكلي
السؤال ::::هل فى وسيله معمليه تعرفنى او تقرب شويه تشخيص الحاله هلى هى ( )pre-renalام اصبحت ( )renal؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
To Be Continued,,,,,,,,,,
-40تحليل الـــــ ()BUN-to-creatinine ratio
السالم عليكم
ان شاء هللا نتكلم النهارده عن نسبه من النسب المهمه فى الكيمياء االكلينيكيه و هى ال ()BUN-to-creatinine ratio
اوال ال BUNهو مسمى قديم لتحليل اليوريا حيث كانت الكيماويات المستخدمه انذاك تعتمد على التفاعل مع النيتروجين لتقدير نسبه اليوريا
**** الحظ ......ان الرقم ده ( )2.14معتمد على ان الوزن الجزيئي لليوريا 60و الوزن الجزيئي لذرتى النيتروجين 28
**** ملحوظه معمليه ......متقدرش تشتغل يوريا من عينه مسحوبه على سترات او فلوريد النهم بيعملوا تثبيط النزيم ال ( )ureaseالمستخدم فى
التفاعل
) و هو تفاعل البكريك مع الكرياتنين فى وسط و طبعا كلنا عارفين الكرياتنين اللى بنقسيه معمليا اعتمادا على ما يعرف بال (
قاعدى
==================
عشان نفهم اهميه ال ()BUN-to-creatinine ratio
الزم نتكلم بسرعه عن ال acute renal failureاو ما يسمى حاليا ال Acute kidney injuryالنه ليس بالضروره ان يؤدى الى فشل كلوى دائم
طيب يعنى ايه فشل كلوى؟ ده ببساطه عدم قدره الكليه على القيام بوظيفتها االخراجيه مما يؤدى الى تراكم ال wasteفى الدم و علميا يطلق على الحاله
( )failureاذا وصل ال GFRالقل من 15مل/دقيقه
اوال :ال ( ) Pre-renal causesو ده معناه ببساطه ان الكليه سليمه و لكن فى مشكله فى وصول الدم ليها و بالتالي فال تقوم بالفلتره و يقل معدل ال
GFRو ده تقريبا السبب فى اكثر من %50من الحاالت
و من اهم االسباب اللى ممكن تسبب كده ال ( )Hypovolemiaاى نقص حجم الدم و بالتالي الضغط يقل فميوصلش الدم للكليه بشكل طبيعى زى ما
بيحدث فى النزيف نتيجه حادث مثال او زى ما بيحصل فى حاالت ال ()severe dehydration
ثانيا :ال ( )renal causesو ده معناه ان الكليه نفسها فيها مشكله ادت الى نقص معدل ال GFR
حوالى %90من الحاالت دى بيرجع الى ما يعرف بال ( )Acute tubular necrosis
**** و اللى بيرجع فى اغلب االحيان الى حدوث ( )nephrotoxicityبادويه زى المضاد الحيوى ( )Gentamicinاو حدوث انيميا تكسيريه تؤدى الى
تسريب هيموجلوبين ( )hemoglobinuriaاو حادثه ادت الى تكسير عضلي ()myoglobinuria
**** الحظ ايضا ان عدم وصول الدم للكليه زى ما فى حاله ال ( )Hypovolemiaلو استمر اطول من الالزم ممكن يؤدى الى Ischemic ATN
نتيجه لعدم وصول االكسجين بشكل كافي للخاليا فى الكليه
============
الحظ بقي االتى المريض االول بتاع ال ( )Pre-renalمشكلته تتحل لو رجع حجم الدم تانى زى ما كان (ممكن مثال بتعليق محلول) و المريض التانى
( )renalلو اتعلق له مح لول الوضع يسوء اكثر الن الكليه فعليا فيها مشكله ال تستطيع الفلتره و بالتالي تتركم كميه كبيره من السوائل فى الدم مؤديه الى
حدوث ( )edemaو ارتفاع فى ضغط الدم
==============
مبدئيا كده فى كام معلومه مهمه اوى عن اليوريا و الكرياتنين
^^^^ فى الكليه تتم فلتره اليوريا كامله (فى عمليه ال ) filtrationلكن بيرجع تانى للدم (عن طريق ال ) reabsorptionحوالى %60-40منها و ده
اللي بيخلى ان مستوى اليوريا الطبيعى فى الدم يتراوح بين 15و 45ملجرام
^^^^ معدل اعاده امتصاص اليوريا بيزيد اذا ارتفع مستوى هرمون ال ( ADHالهرمون المانع الدرار البول) فى الدم
^^^^ الكرياتنين فى الدم يروح للكليه يتفلتر بالكامل و ال يرجع منه شئ فى عمليه ال ( )reabsorptionده باالضافه الى ان كميه بسيطه منه بتخرج
برضه من خالل عمليه ال ()secretion
و بالتالي النسبه بينهم ( )BUN-to-creatinine ratioتصبح مرتفعه الن اليوريا اعلى من الكرياتنين فى الدم فى الحاله دى
علميا بياخدو النسبه ) )BUN:Cr ratio > 20كحد للتفريق بين الحالتين بمعنى ان النسبه االعلى من 20ترجح فى الغالب حاله ال ()Pre-renal
طيب سؤال مهم ...الكالم ده مفيش حاجه احدث و اكثر دقه للتفريق بين الحالتين؟؟؟؟؟؟؟؟
اه في
تسمع عن تحليل ال ()Fractional sodium excretion؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
احنا عارفين ان الصوديوم تتم فلترته ثم يحدث لجزء منه اعاده امتصاص ( )reabsorptionو يخرج الجزء المتبقي مع البول
ال ( )FENaمعناها كميه الصوديوم اللى تم اخراجها فى البول بالنسبه الى الكميه اللى تم فلترتها فعليا من الدم
هنا انا مقدرش اعرف الكالم ده بمجرد قياس كميه الصوديوم فى البول النه حيكون متغير تبعا لعمليه اعاده امتصاص المياه اللى بتم فى النفرون (اعاده
امتصاص المياه و الصوديوم مرتبطين معا فسيولوجيا)
فالزم اقيس الصوديوم فى الدم كام و فى البول كام عشان اقدر اعمل نسبه بينهم
الن زى ما قولنا ببساطه ال ( ) FEالى ماده هو عباره عن النسبه المئويه بين كميه الماده التى تم اخراجها فى البول و كميه الماده التى تم فلترتها فى
الكليه
طيب ركز بقه كويس جداااااااااااا عشان نفهم الحسبه دى تتعمل ازاى
**** كميه الصوديوم اللى بتتفلتر من الكليه = معدل الفلتره الكلويه ( X )GFRتركيز الصوديوم فى الدم
طيب اذا كان معدل الفلتره الكلويه = (الكرياتنين فى البول Xمعدل سريان البول) /الكرياتنين فى الدم
الحظ ان دى معادله ال ( )creatinine clearanceو الحظ ان معدل سريان البول مقصود بيه الحجم فى 24ساعه 1440 /
**** كميه الصوديم اللى بيتم اخراجها فى البول = معدل سريان البول ( X )urine flow rateتركيز الصوديوم فى البول
**** ال (( = )Fractional sodium excretionكميه الصوديم اللى بيتم اخراجها فى البول /كميه الصوديوم اللى بتتفلتر من الكليه) 100 X
بعد ما فهمنا ازاى المعادله بتاعه ال ( )FENaاتعملت نشوف بقه طيب هو فايدته ايه بالظبط؟؟؟؟؟؟؟
تعالى نشوف الحاله ال ( )pre-renalحاله ال ( ) kidney tubulesسليمه و بالتالي اعاده امتصاص الصوديم تتم بشكل طبيعى بل تزيد نتيجه افراز
هرمون االلدوستيرون نتيجه لل ()Hypovolemia
اما فى حاله ال ( )ATNفال ( )kidney tubulesغير سليمه و بالتالي ال تتم عمليه اعاده امتصاص الصوديم بشكل طبيعى
اذن
تركيز الصوديوم فى بول مريض ال ( )ATNاعلى بكتير من تركيزه فى حاله ال ()pre-renal
و بالتالي نسبه ال ( )FENaفى مرضي ال ( )ATNاعلى من ( %1خلى بالك ان ال urinary sodiumفى المقام فلما يزيد ناتج المعادله يزيد) فى حين
انها فى مرضي ال ( )pre-renalبتكون اقل من %1
اذن اقدر استخدم التحليل ده باالضافه للتحليل السابق الخاص ب ال ( )BUN-to-creatinine ratioللتفريق بين الحالتين ال ( )ATNو ال (pre-
)renalالن التفرقه مهمه جدا قبل بدايه العالج كما ان ال ()ATN
و دى عمليه بيتم فيها نقل مجموعه االمين ( )NH2الى حمض كيتو ( )C=Oفيتحول لحمض امينى او العكس
انزيم ال ALTمسئول عن تحويل الحمض االمينى الالنين الى حمض كيتونى بيروفاك و من هنا جاء المسمى ()Alanine transaminase
االنزيم ده موجود فى سيتوبالزم الخليه لكن الكميه االكبر موجوده داخل الميتوكوندريا و رغم وجود االنزيم فى الكبد اال انه يوجد ايضا فى اماكن اخرى
مثل كرات الدم الحمراء و العضالت الهيكليه و عضله القلب
طيب ازاى بيتم استخدام االنزيمين دول كدالله على وظيفه الكبد
=================================
المقصود هنا بوظيفه الكبد هى حاله خاليا الكبد
هل بها تكسير ()liver cell destruction
السؤال ..........هل يمكن باستخدام تحليل انزيمات الكبد انى افرق بين االلتهاب الكبدى الحاد ( )acute hepatitis acute hepatitisو االلتهاب
الكبدى المزمن ()chronic hepatitis؟؟؟؟؟؟؟؟
لكن اذا لم يتخلص الجسم من الفيروس و استمر التكسير و استمر موت عدد كبير من خاليا الكبد و نتج عن ذلك حدوث التليف ( )fibrosisثم ال
( )cirrhosisنجد ان مستوى انزيمات الكبد رجع مره اخرى للطبيعى او اعلى الطبيعى نتيجه التليف الشديد الحادث بالكبد فيما يعرف بال ( end stage
)liver disease
و طبعا اللى يفرق هنا بين حاله الكبد دى (حيث االنزيمات طبيعيه) و بين الكبد الطبيعى هو الوظائف التصنيعيه للكبد زى االلبيومين زى ما حنشوف مع
بعض
ده معناه ان انزيم ال ASTارتفع اكثر من ال ALTفى الدم و بالتالى اقدر استنتج ان مش فقط الخليه حصل لها تكسير انما كمان عضيات الخليه زى
الميتوكوندريا اللى طلع منها ال ASTبكميه كبيره فى الدم فيما يعرف بال ( )mitochondrial affectionسبب ان النسبه تبقي بالشكل ده
و ده معناه ان التكسير ( )More severeو ان االلتهاب حاصل من فتره اطول من الحاله االولي
طيب ركز بقه الكتب بتقول انه فى حاله ال ( )acute hepatitisلو النسبه وصلت الى 2او اكثر يبقي فى احتمال ان الحاله داخله على ( Acute
)liver failureو طبعا دى حاله الزم التأكد منها بتحاليل اخرى لخطورتها
كده نقدر نفسر النتيجه و نقول ان ده التهاب كبدى مزمن و كل ما المريض يعمل التحليل فى المتابعه حيطلع بنفس الشكل دائما
خلي بالك بقه من نقطه مهمه فى المتابعه الطبيب بيهتم اكثر فى الحاالت المزمنه بالنسبه بين االنزيمين الن االبحاث بتقول ان كلما زاد التليف الكبدى
( )as fibrosis progressesكلما كانت النسبه بين االنزيمين اعلى من 1
بمعنى اخر يمكن اعتبار ان هذه النسبه ماركر للتليف الكبدى و لها دالله تشخيصيه فى الحاالت المزمنه اعلى من قيم االنزيمات مفرده
In chronic hepatitis the raised AST/ALT ratio correlates with fibrosis so the best routine marker of hepatic fibrosis
is the De Ritis ratio
كده فهما اهميه النسبه بين االنزيمين فى استنتاج معلومات مهمه عن الحاله تضيف للتشخيص و تساعد الطبيب فى الحصول على صوره اوضح للحاله
-44الوظائف التصنيعيه للكبد (االلبيومين و البروثرومبين)
االلبيومين كوظيفه للكبد
==================
االلبيومين هو احد ال plasma proteinsبل هو البروتين االكبر كميه بيمثل حوالى %50من بروتينات البالزما
=================
معمليا و اكلينيكيا ال دور فعال لقياس االلبيومين فى الحاالت الحاده حيث ان فتره نصف العمر لاللبيومين طويله حوالى 21يوم و بالتالي فعند قياس
االلبيومين فانا فعليا بقيس البروتين اللى تم تكوينه من اسبوعين او اكثر
و لذك ال تكون قيمته معبره عن حاله الكبد فعليا فى وقت القياس
=================
فى الحاالت المزمنه زى مرضي فيروس سي بيستخد االلبيومين لمتابعه الحاله مع انزيمات الكبد و طالما كان االلبيومين فى النورمال فده معناه ان وظيفه
الكبد (اى المهام الطبيعيه التى يقوم بها ) لم تتاثر رغم تكسير الخاليا المزمن و لكن مع الوقت و بدون عالج تقل خاليا الكبد السليمه فال يقوم الكبد بدوره
على الوجه الصحيح و يبدء االلبيومين فى النقصان
اذن االلبيومين القيل فى مرضي الكبد المزمن مؤشر على ان حاله الكبد ليست جيده
و يتبع نقص االلبيومين ظهور ال ( )edemaعلى المريض فى االطراف غالبا
و مع تقدم الحاله و النقص الكبير فى مستوى االلبيومين فى الدم باالضافه الى زياده ضغط الدم فى الوريد البابي ( )portal hypertensionتتجمع
السوائل فى الغشاء البريتونى مسببه ما يعرف باالستسقاء ( )Peritoneal ascites
ملحوظه هامه :ليس كل نقص فى االلبيومين يكون سببه الكبد و لكن هناك اسباب اخرى اشهرها فقد االلبيومين عن طريق الكليه فى مرضي ال
( )nephrotic syndromeو كذلك نقص االلبيومين المصاحب لحاالت الحروق و نقص االلبيومين المصاحب لاللتهابات المزمنه و نقص االلبيومين
نتيجه تسريبه من الجهاز الهضمى فى مرضي التهاب الجهاز الهضمى ()protein-losing enteropathy
*** العوامل دى بيتم تصنيعها داخل الكبد (المصنع الرئيسي لعوامل التجلط)
*** العوامل 2و 7و 10بيتصنعوا فى شكل اولى ( )precursor formو الزم يتعمل عليهم تعديل ( )Post-translational modificationعشان
يقوموا بدورهم بشكل صحيح
*** التعديل ده عباره عن ايه:::
العوامل دى داخل فى تركيبها الحمض االمينى ( )glutamic acidو طبعا كلنا عارفين انه يحمل فى السلسله الجانبيه بتاعته مجموعه واحده كاربوكسي
()COOH
التعديل بقه عباره عن اضافه مجموعه كمان على الكربونه الثالثه فى الجلوتامك بحيث يبقي فيه مجموعتين كاربوكسي و ده ضرورى عشان يشتغل بشكل
صحيح
العمليه دى بتتم بمساعده انزيم اسمه ( )gamma-glutamyl carboxylaseو البد من وجود فيتامين Kكعامل مساعد
ملحوظه مهمه :::ادويه الماريفان (من مجموعه اسمها ال )warfarinبتشتغل ك ( )vitamin K antagonistو بالتالي لما يقف شغل الفيتامين التحويله
دى تتوقف و بالتالي العوامل مش حتشتغل بنفس الكفاءه و مش حتتكون الجلطه بسهوله و ده المطلوب فى مريض الجلطات
*** معلومه كمان العامل رقم 7فتره نصف العمر له قصيره (حوالى 6ساعات) و بالتالي البد من استمراريه تصنيعه بشكل دائم من الكبد
========================================
هنا يمكن استخدام تحليل البروثرومبين كما نستخدم تحليل االلبيومين فى متابعه الوظيفه التصنيعيه للكبد (حيث ان الكبد هو المصدر الرئيسي النتاج
االلبيومين و البروثرومبين و بالتالى فانتاجهم و مستواهم فى الدم بيتأثر بحاله الكبد و درجه التليف اللى وصلها)
و طبعا مستواهم مش حيقل فى الدم اال فى مراحل متقدمه ()cirrhotic liver
========================================
هنا من الطبيعى فى الحاالت الحاده االهتمام بيبقي منصب اكثر على انزيمات الكبد اللى بتدى دالله على مدى حدوث ال liver cell destruction
و من المتوقع ان الوظائف التصنيعيه تكون فى مستوى طبيعى الن فتره تأثر الكبد قليله مش زى الحاالت المزمنه
لكن ماذ لو ان التكسير كان ( )more severلدرجه فعال اثرت على الوظائف التصنيعيه و فعال المريض داخل على acute liver failureاو ما
يعرف ب ال ()fulminant hepatitis
هنا االنزيمات مرتفعه و الصفراء كمان مرتفعه (بس متقدرش من خاللهم تفرق بين حاله ال acuteو ال )fulminant
كمان هنا االلبيومين ملوش فائده فى تقييم الحاله الن فتره نصف العمر بتاعته كبيره حوالى 21يوم و بالتالي حتى لو اتأثر تصنيعه برضه حيظهر طبيعي
فى التحليل (النك بتقيس االلبيومين اللى فى الدم المصنع من فتره سابق)
طيب ايه الحل؟؟؟
المراجع بتقول لو الحاله فيها شك ان التكسير ( )severالزم يتعمل للحاله بروثرومبين و لو طلع اعلى من الطبيعى ب 6 – 4ثوانى يبقي احتمال الفشل
الكبدى الحاد قائم بقوه
هنا الفكره من استخدام البروثرومبين ايه؟؟
ان فتره نصف العمر للعامل السابع صغيره ( 6ساعات) و بالتالى لو الكبد حصل فيه تكسير شديد مش حيتصنع او حيقل تصنيعه بسرعه و بالتالي
حيحصل ( )prolongationلزمن البروثرومبين
If the prothrombin time is prolonged by ≈ 4–6 seconds or more the diagnosis of ALF should be strongly suspected.
ثالثا :تحليل البروثرومبين فى حاالت ال ( obstructive jaundiceكمرضي الحصوات المراريه)
====================================================
فى الحاالت دى الكبد سليم بمعنى ان مفيش تكسير مؤثر فى خاليا الكبد
و بالتالي التصنيع فى الكبد طبيعى
يعنى االلبيومين بيتصنع عادى
و كذلك البروثورمبين بيتصنع عادى
لكن فى المعمل لما نعمل بروثومبين للحاله دى بيطلع اعلى من الطبيعى !!!!! ()prolonged
السبب فى كده ان االنسداد المرارى الحاصل بيمنع نزول احماض الصفراء لالمعاء و بالتالي ال يتم امتصاص الدهون (و الفيتامينات الذائبه فى الدهون
زى فيتامين (K
اذن رغم ان عوامل التجلط 2و 7و 10بيتصنعوا بشكل طبيعى اال ان عمليه التعديل مش بتتم و بالتالي مش حيشتغلو بشكل طبيعى و يحصل
( )prolongationلزمن البروثرومبين
طبعا ده حاله موقته لوجود االنسداد فقط و بعد كده يرجع البروثرومبين لطبيعته
==============================================
فى الحقيقه البروثرومبين نفسه ملوش دور فى تشخيص او تقييم سرطان الكبد
لكن
االبحاث وجدت ان حاالت سرطان الكبد و من بدايه السرطان بيحصل نقص فى انزيم اسمه ( vitamin K dependent gamma-glutamyl
)carboxylase
فاكرينه ؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
ايوه المسؤول عن التحويله النتاج عوامل تجلط قادره على العمل
و بالتالي فى حاالت سرطان الكبد من المتوقع ان فى زياده فى البروثرومبين الغير مكتمل و اللى بيسمى ()Des-gamma carboxy prothrombin
الن الحمض االمينى الجلوتامك بتاعه فيه مجموعه كاربوكسي واحده و مفيهوش التانيه نتيجه لنقص االنزيم
و فى اسم تانى كمان له و هو
)Protein induced by vitamin K absence (PIVKA
طبعا احنا فاهمين ان التسميه دى راجعه الى ان برضه الشكل ده من البروثرومبين الغير مكتمل ممكن يبقي موجود لو نقص فيتامين ( Kزى حاله
االنسداد المرارى او حاله الناس اللى بتاخد ماريفان)
و ده احدث تحليل الورام الكبد و ممكن استخدامه مع ال ( )Alpha-fetoproteinو ال ( )abdominal ultrasonographyللمزيد من دقه التشخيص
-45تحليل النحاس و عالقته بأمراض الكبد --مرض ()Wilson's disease
حنتكلم على تحليل ممكن تشوفه بيطلب من اخصائي الكبد و الجهاز الهضمى لمريض
و هو تحليل النحاس فى البول ()urine copper
فى الكبد يتم تصنيع البروتين الناقل للنحاس و المسمى ( )ceruloplasminو اللى بيفرز فى الدم حامال النحاس لباقي االنسجه اللى محتاجاه
كده النحاس اللي بيوصل للكبد مش حيتحمل على ال ( )ceruloplasminو الزياده منه مش حتفرز فى الصفراء
مش بس كده ده النحاس بيخرج من الكبد لعدم قدرته على استيعاب كل النحاس المتراكم و يبدء يروح اماكن اخرى و انسجه اخرى
و فى صوره شهيره حاول تبحث عنهاعلى النت لدائه من ترسبات النحاس فى العين يطلق عليها ()Kayser–Fleischer rings
التخيل ده حقيقي و موجود فى مرض اسمه ( )Wilson's diseaseو هو مرض جينى ناتج عن خلل فى جين بروتين ويلسون
و االخير ده التحليل االساسي للتشخيص و اذا كانت نتيجته اعلى من 100ميكروجرام فى ال 24ساعه بول يعتبر التشخيص مؤكد
ملحوظه :بيتم تجميع بول ال 24ساعه فى التحليل ده على 10مل حمض هيدروكلوريك
كده فهمنا لما نشوف requestمطلوب فيه التحاليل دى ايه هدفها و بتطلب ليه
مبدئيا الزم نعرف ان تشخيص سرطان الثدى ال يعتمد على التحاليل المعمليه و انما يعتمد على وجود اعراض تشير الى احتماليه وجوده مثل:
*** وجود كتله فى الثدى ()lump or mass in the breast
و لذلك تنصح السيدات باجراء ما يسمى ال ( )Breast self-examinationبشكل دورى للكشف المبكر عن ايا من هذه االعراض
كذلك يعتبر ( )not sensitiveالن مش بيوصل لالرتفاع اللى ممكن قياسه معمليا اال مع تقدم الحاله و ربما حدوث ()metastasis
و الحظ ايضا ان حوالى %20من مرضي سرطان الثدى عندهم مستوى ال ( )CA 15-3طبيعى رغم تقدم المرض
من الحاجات المهمه جدا فى حاالت سرطان الثدى ان النسيج اللى تمت ازالته جراحيا من المريض البد من فحصه فى معمل الباثولوجى للكشف عن
وجود المستقبالت االتيه على سطح الخليه:
*** )Estrogen receptor (ER
و دى مستقبالت هرمون االستروجين و وجودها يعنى ان الورم يعتمد على االستروجين فى نموه
*** )Progesterone receptor (PR
و دى مستقبالت هرمون البروجستيرون و وجودها يعنى ان الورم يعتمد على البروجستيرون فى نموه
*** HER2/neu receptor
ده المستقبل الخاص بعامل النمو ( )human epidermal growth factorو مقطع ( )neuجايه من ال ()neural cells
و معروف ال عوامل النمو بتساهم فى انقسام الخاليا و نموها لذلك لو فى ( )overexpressionفى هذا ال ( )receptorفده معناه ان النوع ده من
السرطان ( )aggressiveو بينمو بشكل اسرع
طيب ايه عالقه وجود هذه ال ( )receptorبعالج سرطان الثدى؟؟؟
فى نوع من العالج بعد الجراحه اسمه ( )Hormonal adjuvant therapyو بيهدف العالج ده الى الى تقليل مستويات الهرمونات اللى بيعتمد عليها
الورم فى النمو او يعمل لها ( )blockبحيث ميديش فرصه الى خاليا سرطانيه متبقيه انها تنمو و تعمل ورم من جديد
طبعا نسبه االستجابه لهذا النوع من العالج بيعتمد على وجود ال ( )receptorعلى خاليا الورم كاالتى
طبعا كده االستجابه للعالج الهرمونى ضعيفه لكن حديثا فى ما يعرف بال ( )Target adjuvant therapyو ده معناه دواء مخصص بيعمل ()block
للمستقبل الخاص بهرمون النمو ( )HERو بالتالي مش حيشتغل على الخليه و ميديش فرصه للخليه السرطانيه المتبقيه انها تنمو من جديد
و بالمناسبه فى نوع ( )very aggressiveمن سرطانات الثدى بيسمى ال ( )triple negative breast cancerو زى ما هو واضح ان كل
المستقبالت الثالثه غير موجودين و بالتالي االنواع السابقه من العالجات ال تصلح معه
طيب سؤال مهم ............هل ممكن التنبؤ باحتماليه حدوث سرطان الثدى قبل ان يحدث ؟؟؟؟؟؟؟؟؟
د /خالد مجدي
-47تحليل الـــــــ ( )breast cancer gene1 & 2و التنبؤ بسرطان الثدي
السالم عليكم
نستكمل حديثنا عن سرطان الثدى و امكانيه التنبؤ بحدوثه
قبل ما ندخل فى الموضوع ده ضرورى نراجع معلومه اساسيه عن بيولوجيا السرطان
زى ما احنا عارفين ان اللى بيخلى الخليه العاديه تتحول تبقي خليه سرطانيه هو حدوث طفرات فيها تؤدى الى انقسام الخليه بشكل ()uncontrolled
فتحدث الورم
) و دى ممكن تكون مواد كيميائيه زى ال ( Polycyclic aromatic العوامل اللى بتؤدى لحدوث هذه الطفرات بيسموها المسرطنات (
) hydrocarbonsفى السجائر و ممكن تكون ناتجه عن تاثير فزيائي زى االشعاع النووى و ممكن تكون مسرطن بيولوجى زى فيروس بي
المهم ان ايا من تلك العوامل سيؤدى الى حدوث طفره فى جينات محدده تسبب الورم فيما بعد
يمكن تقسيم مجموعات الجينات التى اذا حدث بها خلل تؤدى الى ورم كاالتى:
اوال :ال ( )proto-oncogeneو دى فى الخليه الطبيعيه هى المسؤوله عن اوامر انقسام الخليه
و يحدث بها نوع من الطفرات يسمى ( )Gain -of-function mutationsاى ان الطفره تؤدى الى زياده انتاجيه هذا الجين و بالتالي زياده انقسام
الخليه
لكن لن يؤدى ذلك الى حدوث الورم الن هناك مجموعه اخرى من الجينات مسؤوله عن اوامر وقف االنقسام و بالتالي مازالت الخليه تحت السيطره
ثانيا :ال ( )Tumor suppressor genesو هى الجينات المسؤوله عن اوامر وقف االنقسام
و اذا حدث بها نوع من الطفرات يسمى ( )Loss-of-function mutationsمما يجعلها تفقد وظيفتها فى ضبط انقسام الخليه مسببا خروج الخليه عن
السيطره و حدوث الورم
) هى عمليه مركبه ال تكفى فيها مجرد طفره واحده الحداثه انما يلزم عده طفرات متراكمه اذن البد ان نعلم ان عمليه حدوث الورم (
للتسبب فى خروج الخليه عن السيطره
كذلك يوجد على الكروموسوم 13جين اخر يقوم بنفس الدور و يسمى ال ()BRCA2 ( ....... )breast cancer gene 2
و وجدت ان هناك احتماليه %80ان يحدث سرطان الثدى لتلك السيده اذا كانت الطفره فى ال ( )BRCA1و احتماليه %40لحدوثه اذا كانت الطفره فى
ال ( )BRCA2
اذن بعمل ( )detectionلطفرات هذه الجينات يمكن التنبؤ بحدوث سرطان الثدى فى المستقبل لهذه السيده
و لكن ال يمكن استخدام ذلك التحليل ك ( )screening testفى كل السيدات بشكل عام
و يقتصر استخدامه فقط على السيدات المنطبق عليهم احد الشروط االتيه
*** واحد من اقاربها من الدرجه االولى او الثانيه كان عنده طفره فى احد الجينات ( )BRCA1او ( )BRCA2
*** واحد من اقاربها من الدرجه االولى او الثانيه كان عنده ()Triple-negative breast cancer
*** اثنين او اكثر من اقاربها من الدرجه االولى او الثانيه كان عنده سرطان ثدى خصوصا فى سن مبكر
طيب لو طلع التحليل ايجابي و السيده فعال عندها طفره فى احد الجينين
كده زى ما قولنا احتماليه حدوث سرطان الثدى عندها عاليه و بالتالي الزم بعض االحتياطات زى مثال انها تعمل متابعه دوريه بال ( mammography
)and tumor markersالكتشاف اي بدايه ورم فى االول و فى الحاالت اللى منتشر فيها سرطان الثدى فى اسره ما (مما يعنى ان احتماليه حدوثه فى
هذه السيده عالى جداا) ممكن يتعمل ما يعرف بال ( )Prophylactic mastectomyكاجراء وقائي
او ال
بمعنى ان
)[H+] = (10^−pH
*** ثانيا :مستوى االكسجين فى الدم او ما يعرف بال ( )pO2( )Partial pressure of oxygenو اللى بيوضح هل فى نقص اكسجين فى الدم
( )hypoxemiaام ال و الرنج الطبيعي بتاعه بيكون ()80 – 100 mmHg
*** ثالثا :مستوى ثانى اكسيد الكربون فى الدم او ما يعرف بال ( )pCO2( )Partial pressure of carbon dioxideو اللى بيوضح مقدره الجسم
على التخلص من ثانى اكسيد الكربون و الرنج الطبيعى بتاعه بيكون ()35 – 45 mmHg
*** رابعا :مستوى البيكربونات فى الدم ( )HCO−3و دى الماده القاعديه اللى بتعادل مستوى الهيدروجين فى الدم فتحافظ على ال pHو نسبتها الطبيعيه
بتكون ()22–26 mEq/L
****** اما البيكربونات ( )HCO−3فال تقاس انما يتم حسابها اعتمادا على معادله ()Henderson–Hasselbalch equation
الن المريض يتأثر اذا حدث ( )Acidosisو تبدء تظهر االعراض االتيه:
** اعراض ارتفاع بوتاسيوم (البوتاسيوم المرتفع كثرا ربما يؤدى الى توقف عضله الفلب)
** اعراض جهاز هضمى زى الغثيات و الترجيع
** فقدان التركيز و الغيبوبه
*** التحليل بيطلب لالطفال حديثى الوالده لمعرفه كفاءه عمليه التنفس خاصه فى ال ()extremely premature infant
*** التحليل بيطلب لبعض مرضي الجهاز التنفسي لو فى صعوبه فى التنفس و كذلك لمتابعه عالجهم اذا حصل فشل تنفسي و استخدموا ال
()mechanical ventilation
*** بيطلب فى العمليات اللى بتحتاج تخدير لفترات طويله لمتابعه حاله غازات الدم عند المريض
*** برضه التحليل ممكن يطلب فى الحوادث اللى بتصيب الراس خوفا من تاثير ذلك على مركز التنفس
مالحظات هامه:
** بالش تستخدم هيبارين كتير ( )Avoid excess heparinالنه بيقلل نتيجه ال pCO2و ال HCO−3
** طبعا ممنوع تماما يبقي فى اى ( )air bubblesفى العينه و اال حتتغير النتيجه (تعلى االكسجين و تعلى ال )pH
** العينه تحفظ فى درجه حراره الغرفه و يتم ادخالها على الجهاز مباشره (بحد اقصى نصف ساعه) و من الممكن حفظها فى الثلج لمده ساعه قبل الشغل
مع مالحظه ان تكون االنبوبه او السرنجه زجاج حيث انه غير منفذ للغازات
** تاخير شغل عينه غازات الدم يعطى نتائج خاطئه تماما ال يمكن االعتماد عليها (يقلل االكسجين و يزود ثانى اكسيد الكربون و بالتالي تقل ال )pH
اوال الجهاز طلعلي ال pHو اقدر احسب منها تركيز الهيدروجين زى ما قولنا قبل كده
=================================================================================
=================================================================================
==============================
تعالي بقه نفسر نتيجه تحليل غازات الدم ده واحده واحده كده
============================
قبل ما نفسر خلى بالك من الثالثه جمل دول
( )1اول حاجه حتشوفها فى الحاله هى ال فى الحاله هى ال pHاذا كانت اقل من ( )7.35تبقي الحاله فيها ( )acidosisاما اذا كانت اعلى من ()7.45
تبقي الحاله فيها ()alkalosis
( )2تانى حاجه حشوف ال ( pCO2خلى بالك ان ال CO2ماده حامضيه) فلو لقيتها اقل من ( )35فده معناه ان قلويه الدم عاليه ( patient is
)alkaloticو لو لقيتها اعلى من ( )45فده معناه ان حامضيه الدم عاليه ()patient is acidotic
( )3ثم تشوف مستوى ال ( HCO3-الماده القلويه فى الدم) فلو لقيتها اقل من ( )22فده معناه ان حامضيه الدم اعلي ( )patient is acidoticو لو لقيتها
اعلى من ( )26فده معناه ان قلويه الدم اعلي ()patient is alkalotic
بالتأكيد مشكله تنفسيه ( )hypoventilationحيث ان الرئه ال تستطيع اخراج ثانى اكسيد الكربون بكفاءه فيتراكم فى الدم
================================================================
الحاله الثانيه:
pH >> slightly decreased or normal
الحاله برضه فيها ( )acidosisوبرضه حنالحظ ان مستوى ال pCO2مرتفع فى الدم و بالتالي هو المسبب للحاله كما فى الحاله االولي
================================================================
الحاله الثالثه:
pH >> increased
بالتأكيد مشكله تنفسيه ( )hyperventilationحيث ان الرئه تقوم باخراج ثانى اكسيد الكربون بشكل اكثر من الطبيعي فيقل فى الدم و بالتالي يقل انتاج
الهيدروجين من الكاربونك فيصبح الدم قاعدي
و بالتالي نقدر نسمي الحاله دى ()respiratory alkalosis
و حنالقيها فى شخص حصل عنده استثاره للجهاز العصبي ( )CNS stimulationزى فى الخوف و االلم و االصابات
كما اننا ايضا حنالقيها فى بدايه حاله التسمم باالسبرين ()Salicylate poisoning
================================================================
الحاله الرابعه:
pH >> slightly increased or normal
نفس الكالم
الحاله دى فيها ( )alkalosisو مستوى ال pCO2قليل فى الدم و ده سبب زياده قلويه الدم
الن الكليه استجابت لحاله ال alkalosisبزياده افراز البيكربونات فيقل مستواها فى الدم و بالتالي يبدء ال pHيرجع للطبيعى
================================================================
الحاله الخامسه:
pH >> decreased
pCO2 >> normal
الحاله دى فيها ( )acidosisده واضح من انخفاض ال pHو حنالحظ ان مستوى ال pCO2طبيعى و بالتالي فهنا مفيش عالقه للجهاز التنفسي
بحموضه الدم اللى حاصله
فى الواقع بيبقي سبب الحموضه هنا فى الحاالت دى هو زياده المركبات الحامضيه فى الدم او نقص اخراجها من الكليه و الن كل االسباب المؤديه لذلك
تتعلق بااليض ال ( )metabolismفان الحاله تسمى ()metabolic acidosis
** طيب سؤال هنا ::هو ايه اللى نقص مستوى ال ( )HCO3-فى الدم (و ده بدوره يؤدى الى زياده ال )acidosis
ده ال ( )buffer systemالرئيسي فى الدم و المعادله دى فى حاله اتزان دائم طبقا لقاعده ( )Le Châtelier's principleو بالتالي فى الحاله اللى معانا
لما يزيد الشق الحامضى (بمعنى زياده الهيدروجين) فده يخلى المعادله تشتغل فى اتجاه تكوين حمض الكاربونك و بالتالي ينقص ال HCO3فى الدم
الستخدامه فى محاوله تقليل الهيدروجين الزياده
================================================================
الحاله السادسه:
pH >> slightly decreased or normal
و ده يفسر لنا ليه بيحصل فى غيبوبه السكر الناتجه عن ال )deep rapid pattern of respiration( ketoacidosisو اللى هو محاوله من الجسم
لتقليل حامضيه الدم و الرجوع للطبيعى
و بالتالي نقدر نسمى الحاله دى ()compensated metabolic acidosis
================================================================
الحاله السابعه:
pH >> increased
الحاله فيها ( )alkalosisالن ال pHعاليه و ال ( )pCO2طبيعى و بالتالي ال عالقه للجهاز التنفسي بالمشكله
واضح كمان هنا ان سبب ال alkalosisهو ارتفاع ال ( )HCO3فى الدم حيث انه ماده قلويه
================================================================
الحاله الثامنه:
pH >> slightly increased or normal
هى نفس الحاله السابقه لكن هنا الجسم اخذ رد فعل لتعديل حاله القلويه
و ده عن طريق الجهاز التنفسي بتقليل معدل التنفس ( )physiological hypoventilationو بالتالي يزيد مستوى ال ( )pCO2فى الدم مما يساعد فى
زياده تكوين الكاربونك ( )H2CO3و بالتالي يغير االتزان ناحيه انتاج هيدروجين فيتم تعديل ال pHو نسمى الحاله ( compensated metabolic
)alkalosis
================================================================
اذن اختصارا للموضوع
*** لو لقينا ال pHحامضي و السبب هو زياده ال ( )pCO2فبنقول الحاله ( )respiratory acidosisو تشتغل الكليه على تعديل الوضع بزياده ال
()HCO3
*** لو لقينا ال pHقلوى و السبب هو نقص ال ( )pCO2فبنقول الحاله ( )respiratory alkalosisو تشتغل الكليه على تعديل الوضع بتقليل ال
()HCO3
*** اما اذا لقينا ان ال pHحامضيه و ال دخل للجهاز التنفسي فى السبب فان الحاله تسمى ( )metabolic acidosisو يقوم الجهاز التنفسي بتعديل
الوضع عن طريق تقليل ال ()pCO2
*** و اذا كانت ال pHقلويه و ال دخل للجهاز التنفسي فى السبب فان الحاله تسمى ( )metabolic alkalosisو يقوم الجهاز التنفسي بتعديل الوضع عن
طريق زياده ال ()pCO2
============================================
سؤال مهم اوى
مريض طلع له ال ( )pO2يساوى ()90 mmHg
=================================
سؤال مهم اوى
مريض طلع له ال ( )pO2يساوى ()90 mmHg
طيب دى تفرق؟؟؟
طبعا تفرق كتير الن لو المريض يبتنفس هواء طبيعي و التحليل مطلع له ان تركيز االكسجين ( )90 mmHgيبقي الحاله فعال كويسه
لكن لو بيتنفس من ماسك اكسجين و التحليل مطلع له ان تركيز االكسجين ( )90 mmHgفده مش معناه ان الحاله كويسه النى مديله من االول اكسجين
بتركيز عالي
طيب انا احل المشكله دى ازاى؟؟؟
الحل انك تستخدم ( )Carrico indexاو ()PO2/FiO2 ratio
و دى نسبه تركيز االكسجين اللى طلع للمريض على الجهاز الى نسبه االكسجين فى الهواء اللى بيتنفسه المريض
فلنفرض ان المريض االول اول ما دخل المستشفى استخدم ماسك اكسجين تركيز ال ( )O2فيه %60و جهاز غازات الدم بعد كده ادانا نتيجه ال ()PO2
%90و بالتالي ال indexحيساوى ....... 60/90يعنى حوالى 1.5
اما المريض الثانى فدخل المستشفى بس بيتنفس هواء طبيعى و جهاز غازات الدم بعد كده ادانا نتيجه ال ( %70 )PO2و بالتالي ال indexحيساوى
....... 21/70يعنى حوالى 3.3
و بالتالي فده معناه ان المريض الثاني فى حاله افضل من االول رغم نتيجه ال ( )PO2االقل
و المقصود بيها هو كميه الهيدروجين المطلوبه العاده ال pHمره اخرى للرقم الطبيعى 7.4عند درجه حراره 37و تركيز ثانى اكسيد كربون
40 mmHg
و ده معناه انى لما االقي ال BEعاليه فكده انا محتاج كميه هيدروجين كبيره للعوده للطبيعي (اذن انا الحاله عندى كده )metabolic alkalosis
:الحاله االولي
======
A 24-year-old graduate student was brought to the emergency department in a comatose state after being found in
his room unconscious. A bottle of secobarbital (a barbiturate derivative drug) was on his bed stand. He did not respond
to painful stimuli, his respiration was barely perceptible, and his pulse was weak. Blood gases were drawn, and yielded
the following results:
pH >>>>>>> 7.10
pO2 >>>>>>> 58
pCO2 >>>>>>> 70
:الحاله الثانيه
======
A 58-year-old man was admitted with a history of chronic obstructive airways disease for many years. On examination
he was cyanosed, breathless and there was marked systemic oedema. A blood sample gave the following results:
pH >>>>>>> 7.35
pO2 >>>>>>> 76
pCO2 >>>>>>> 61
:الحاله الثالثه
======
A 28-year-old man is admitted to hospital with a week-long history of severe vomiting. He confessed to self-medication
of his chronic dyspepsia. He was clinically severely dehydrated and had shallow respiration. Initial biochemical results
were:
pH >>>>>>> 7.48
pO2 >>>>>>> 89
pCO2 >>>>>>> 48
من اكثر المشاكل فى التحليل هو ان عينه البول تكون مخففه جداااا بحيث ياثر ده على النتيجه (المريض بيشرب كميات كبيره من المياه او بيستخدم
مدرات للبول) و عشان كده فى بعض الحاجات اللى ممكن تترفض العينه على اساسها زى
*** لون البول فاتح جدااا ( )very clearو ان كان بعض المرضي بيستخدمو B-complex multivitaminsكوسيله للتحايل و ده بيخلى البول لونه
اصفر عادى رغم انه مخفف جدا
*** ال pHاكثر من 8
===============================
**** المنشطات ( )Amphetaminesو اختصارها على الكارت ()AMP
------------------------------------------------------------------------
المنشطات هى مركبات كيميائيه تعمل على ال الجهاز العصبي ( )CNSلزياده افراز الموصل العصبي ( )dopamineمما يزيد من القوه البدنيه و القدره
على التحمل و لذلك يشيع استخدامه فى بعض الرياضيين
و تتراوح فتره بقاءه فى البول بعد التعاطى من يوم واحد الى اربعه ايام (فى المتعاطى المزمن)
------------------------------------------------------------------------
او اسمها العلمى ( )benzoyl methyl ecgonineو دى مركبات طبيعيه بتستخلص من نبات ال ( )Erythroxylum cocaاللى بيتزرع فى دول
امريكا الجنوبيه زى االرجنتين و بوليفيا و كولومبيا و بيرو و االكوادور
يعمل الكوكايين على الجهاز العصبي بشكل مماثل للمنشطات بمنعه عمليه ال ( )reuptake of dopamineفيتراكم فى نهايات الخليه العصبيه
( )synaptic cleftمسببا احساس بالنشوه و السعاده او ما يسمى ()Euphoria
و تتراوح فتره بقاءه فى البول بعد التعاطى من ثالثه ايام الى 20يوم (فى المتعاطى المزمن)
------------------------------------------------------------------------
زى ال ()Phenobarbital and secobarbital
تستخدم كمنوم لعالج االرق و عالج بعض نوبات الصرع و تعمل من خالل زياده تأثير الموصل العصبي ()GABA
ملحوظه :ماده ال ( )Sodium amytalهى احد الباربتيورات اللى استخدم تحت مسمى مصل الحقيقه فى الحرب العالميه
------------------------------------------------------------------------
زى ال )diazepam (Valium
------------------------------------------------------------------------
هى مركبات تستخلص بشكل طبيعى من نبات الخشخاش ( )opium poppy plantو اهم مركب فيه هو المورفين ()Morphine
رى
المورفي و علميا هو ()diacetylmorphine ^^^ الهروين ( )Heroinهو ماده مشتقه من
يعمل المورفين على الجهاز العصبي من خالل تنشيط مستقبالت ( )μ-opioid receptorsمما يسبب شعور بالتخدير و لذلك يستخدم المورفين طبيا ك
()pain medication
الهروين يتحول فى الجسم الى مورفين و يعمل بنفس الميكانيكيه و الن له ( )euphoric effectsفهو يستخدم كعقار مخدر للتعاطى و هو من اسرع
العقاقير المسببه لالدمان
و تتراوح فتره بقاءه فى البول حوالى 4ايام بعد التعاطى
الحظ ان بعض االدويه مثل ال Verapamilالمستخدم لعالج الضغط و Quinineالمستخدم لعالج المالريا و ال Codeineالمستخدم فى بعض
ادويه السعال يمكن ان يعطى ايجابي كاذب فى خانه ال Opiates
------------------------------------------------------------------------
هو ماده مصنعه معمليا و يدخل ضمن مجموعه ال ( )opioidحيث ان تركيبه قريب من ماده ال codeine
يستخدم الترامادول طبيا ك ( )pain medicationفى عالج االالم المزمنه كحاالت السرطان و يعمل اما من خالل تنشيط ال ()μ-opioid receptor
او منع ال ()reuptake of serotonin
و النه من المواد األفيونية التى تمنح المستخدمين شعورا بالمتعة فهو من اكثر العقاقير انتشارا بين الشباب و من اهم اعراض تعاطى الترامادول هو
الخمول وتبلد المشاعر فالمتعاطى وال يمكنه اتخاذ قرار لشعوره بالالمباالة كما انه فى احيان كثيره يصاب بعصبيه شديده
و تتراوح فتره بقاءه فى البول حوالى 4ايام بعد التعاطى
------------------------------------------------------------------------
هى مواد طبيعيه مستخلصه من نبات القنب الهندى ( )Cannabis sativa plantو يعتبر مركب ال ( )Tetrahydrocannabinolهو المركب
الرئيسي فى هذه المواد
و يمكن استخدام االوراق و السيقان و الزهور المجففه لنبات القنب الهندى تحت مسمى البانجو او الماريجوانا ()Marijuana
او استخالص اجزاء معينه من النبات ( )stalked resin glandsو ضغطها لصناعه الحشيش ( )Hashishو المحتوى على كميه اكبر من الماده الفعاله
()Tetrahydrocannabinol
فى الثمانينيات تم اكتشاف المستقبالت التى يعمل عليها مركب ال )cannabinoid receptors( THCمسببه الشعور بالنشوى ( )Euphoria
و تتراوح فتره بقاءه فى البول بعد التعاطى من ثالثه ايام الى 30يوم (فى المتعاطى المزمن) حيث ان ماده ال THCتمتص جيدا بواسطه النسيج الدهنى
فى الجسم و لذلك يكون الميتابولزم لها بطئ و يتخلص منها الجسم ببطء شديد
الحظ ان بعض االدويه مثل )proton pump inhibitor( Pantoprazoleالمستخدم فى عالج ارتجاع المرئ يمكن ان يعطى ايجابي كاذب فى
خانه ال THC
ملحوظه:
هناك مجموعه من العقاقير تعرف بعقاقير الهلوسه ( )Hallucinogensغير موجوده على الكارت السباعى للمخدرات و المتعارف عليه فى المعامل فى
مصر و تشمل عقار الهلوسه )Lysergic acid diethylamide (LSD
و عقار ال Phencyclidineاو ما يعرف بتراب المالئكه و عقار ال Dimethyltryptamineاو ما يعرف بأقراص الفيل األزرق
كذلك ظهر حديثا نوع من المخدرات المصنعه بالكامل معمليا ( )synthetic drugsلتشابه تأثر ال ( )Cannabinoidsو لكن بالطبع تختلف عنها فى
التركيب و لذلك ال تظهر على الشريط السباعى للمخدرات
و اشهرها عقاري الفودو ( )Voodooو االستروكس ( )Stroxو لهم اخبار معملى مستقل عن الكارت السباعي
الكوكايين ()Cocaine
الترامادول ( )Tramadolبمتجاته المختلفه (كونترمال و تامول و ترامال و غيرها)
جدير بالذكر ان بعض انواع العقاقير المخدره الموجوده فى مصر زى ال ( )Lyricaو االستروكس ( )Stroxو حبوب الفيل االزرق
( )Dimethyltryptamineو عقار تراب المالئكه ( )Phencyclidineال تدخل ضمن كروت التحليل التقليديه و ال اعلم هل سيتم اجراء تحليل لها حاليا
ام ال
ثالثا :بالنسبه للمتعاطي ايه طول المده اللي بيفضل فيها المخدر فى الجسم؟؟
=====================================
طبعا مفيش مده محدده الي مخدر من المذكور تناسب الكل
الن الموضوع معتمد علي عده امور
** الجرعه المأخوذه
** فتره االستخدام (هل يتعاطى من فتره قريبه ام منذ زمن طويل)
** كميه الدهون فى الجسم
** حاله الكبد و الكلي (حيث يعتمد ايض الماده عليهما)
فمثال لو اتكلمنا عن الحشيش المخدر االشهر في مصر تتراوح فتره بقاءه فى البول بعد التعاطى من ثالثه ايام (فى حاالت التعاطي الخفيف) الى 30يوم
(فى المتعاطى المزمن) حيث ان ماده ال THCتمتص جيدا بواسطه النسيج الدهنى فى الجسم و لذلك يكون الميتابولزم لها بطئ و يتخلص منها الجسم
ببطء شديد
رابعا :ما هو تأثير التدخين السلبي علي التحليل (بمعنى تواجد الشخص فى مكان يتم تدخين مخدرات فيه كبعض االفراح مثال)؟؟
==============================================================
بالطبع التأثير ال يذكر لو ان االمر كان مصادفه او التعرض للدخان كان فتره بسيطه
لكن لو التعرض مستمر للدخان (و ان كان من غير المنطقي انك تبقي متواجد فى وسط زى ده و انت غير متعاطي او غير مدخن) فاالمر يختلف و ربما
تظهر نتيجه ايجابيه فى التحليل فبالطبع الصح ان اى حد يتجنب التواجد فى اماكن زي كده
خامسا :هل في تاثير لالدويه على التحليل (هل بيحصل تداخل يدى نتيجه ايجابيه خاطئه)؟؟
==============================================
دى نقطه مهمه فعال و من الحاجات اللى الزم تبلغ بيها قبل اجراء التحليل هو اي ادويه بتتناولها سواء كان ليها تاثير على التحليل ام ليس لها
و طبعا بعض العقاقير المخدره زى ال ( )Benzodiazepinesو ال ( )Barbituratesو ال ( )Tramadolبتستخدم بشكل عالجي بس طبعا الزم
يكون فى روشته طبيه لكده
و فى ايضا ادويه اخري ال تتعلق بالمخدرات لكن من الممكن انها تعمل تداخل مع النتائج و اشهرها االتي:
*** ال Verapamilالمستخدم لعالج الضغط و Quinineالمستخدم لعالج المالريا و ال Codeineالمستخدم فى بعض ادويه السعال و كذلك
مضادات حيويه ()Levofloxacin, ofloxacinيمكن ان يعطى ايجابي كاذب فى اختبار ال Opiates
*** ال Libraxو المحتوي على ماده ال ( )chlordiazepoxide HClو المستخدم فى بعض حاالت قرح المعده و التهابات القولون فهو يعطي نتيجه
ايجابيه فى اختبار ال Benzodiazepines
*** ال )proton pump inhibitor( Pantoprazoleالمستخدم فى عالج ارتجاع المرئ يمكن ان يعطى ايجابي كاذب فى اختبار ال THC
*** ال ) Zantac (ranitidineالمستخدم لحاالت القرح او الحموضه فى بعض الحاالت بيعطي نتيجه ايجابيه فى اختبار ال Amphetamines
اذن دى نقطه خطيره فعال و مش عارف ايه التصرف القانوني فى حاله ان الموظف فعال بياخد احد تلك االدويه خاصه انها غالبا حتكون بدون روشته
طبيه
و علي فكره يعتبر االمتناع عن إجراء التحليل أو تعمد التهرب منه بغير عذر ،سببا ً إلنهاء الخدمة فى القانون الجديد و بالتالي الموضوع اجباري مش
اختياري
السالم عليكم
كنا اتكلمنا قبل كده عن طريقه شغل كروت ال ( )Toxicologyو اعتمادها على فكره ال ()competitive immunochromatographic assay
بحيث ان فى منطقه ال ( )conjugateبيكون موجود ( )gold colloid labelled antibodyلل ( )drugاللى بندور عليه ....اما على التيست ( test
)lineبيكون موجود ال ( )drugنفسه
اللى حيحصل ان ال ( )drugفى العينه حيتحرك فى الشريط و يتحد مع ال ( )drug -antibody- gold conjugateمكونا ()complex
يتحرك هذا ال ( )complexحتى يصل ال ال ( )test lineالمثبت عليه ال ( )drugبنفسه و الن خالص ال ( )drugاللى في العينه شغل كل اماكن
االنتيبودى فمفيش حاجه حتتمسك على ال ( )test lineو لن يظهر اى خط و نقول النتيجه ايجابيه لعدم ظهور خطين
ال ( )Benzodiazepinesدي المهدئات اللى بتشتغل على مستقبالت ال ( )gamma-aminobutyric acid-Aفى المخ و تخلي ال ( nerves less
)sensitive to stimulationو ده بيسبب ال ()calming effect
***** ملحوظه مهمه جدا هنا ان لو المريض بياخد دواء ال ( )Libraxفى فتره اجراء التحليل و ده واحد من اشهر ادويه القولون فى مصر و يحتوى
علي ماده ال ( )Chlordiazepoxideو اللي حتدي نفس التفاعل و يظهر النتيجه ايجابيه للمهدئات
فمن االمور المهمه اننا نراعي ده فى المعمل و يتسأل المريض عن االدويه اللى بياخدها
و المفروض ان بشكل عام المهدئات بتفضل حوالي 10ايام كفتره ( )Detection timeعشان كده لو فعال المريض بياخد الدواء المفروض يعيد التحليل
بعد الفتره دى من التوقف (بشرط طبعا استشاره الطبيب المعالج له) لو ان االمر يستدعي ذلك
د /خالد مجدي
-52تحليل الميكروالبيومين
السالم عليكم
كل عام و انتم بخير و عيد سعيد عليكم جميعا
ان شاء هللا نتكلم النهارده عن تحليل الميكروالبيومين و ده من التحاليل المهه فى المعمل اللى الزم تبقي عارف عنها معلومات حتى لو مش بتشتغلها
بنفسك
من الطبيعى ان االلبيومين بروتين كبير الحجم ال يعبر ال ( )glomerular basement membraneفى النفرون و بالتالي يظل فى الدم و ال يوجد فى البول اال
بكميات قليله جدا ال تتعدى 30مليجرام فى اليوم
و ال تبدء هذه الكميه فى الزياده اال عند حدوث تلف ( )Damageلل ()GBM
لذلك فانه من المفضل ان يقوم مرضي السكر و مرضي الضغط باجراء هذا التحليل مره واحده سنويا لرصد اى تسريب لاللبيومين فى البول و حل
المشكله و تنظيم العالج قبل الدخول فى مضاعفات اخطر
يخزن البول اثناء التجميع فى درجه حراه من 2الى 8حتي تذهب به الى المعمل
ملحوظات مهمه:
** بالش تشتغل التحليل من عينه مريض عنده التهاب مجرى البول ( )UTIاو دم فى البول ()hematuria
** بالش تجمع البول فى حاويه زجاج الن االلبيومين بيلتصق بالزجاج
بمعنى ان الرئيجنت فى الكيتس الخاصه بالتحليل عباره عن اجسام مضاده متخصصه لاللبيومين (antibody specific
)for human serum albuminو لما يحصل التفاعل بينها و بين االلبيومين فى العينه يتكون (ِ )Ag-Ab complexيتسبب فى حدوث تشتت للضوء
( )light scatteringعند الطول الموجى الذى يتم القياس عنده و بالتالي فان االمتصاص الناتج يتناسب طرديا مع تركيز االلبيومين فى العينه
)(The absorbance of the resulting turbid solution is proportional to the concentration of albumin in the sample
**** طبعا بالنسبه لقياس الميكروالبيومين فى تجميعه ال 24ساعه فدى مفيهاش مشكله و بنقيس مباشره باستخدام الكيت و تطلع النتيجه بوحده ( mg/24
)h
ثانيا :حتحول نتيجه الميكروالبيومين من وحده ( )mg/lالى وحده ( )mg/dlبالقسمه على 10
ثالثا :نشتغل الكرياتنين فى البول بنفس كيت الكرياتنين فى الدم مع مراعاه ضروره تخفيف البول بنسبه ( )1:50الن كميته فى البول اكبر طبعا من الدم
(و ال تنسي ضرب الناتج فى نسبه التخفيف) للحصول على نتيجه بوحده ()mg/dl
رابعا :حتحول نتيجه الكرياتنين من وحده ( )mg/dlالى وحده ( )g/dlبالقسمه على 1000
خامسا :اقسم نتيجه الميكروالبيومين على الكرياتنين لتحصل على ال ( )ratioبوحده ( )mg Albumin / gram creatinineاو وحده ( )mcg/mgو
هى نفس الوحده اال انك فقط قسمت الطرفين على1000
تفسير النتائج
-------------
**** وجود البيومين فى البول بمعدل ( )< 30 mg/dayاو ( ) < 30 mg/gيعتبر طبيعى و الكليه فى حالتها الطبيعيه و لم تتأثر بالضغط او بالسكر
**** وجود البيومين فى البول بمعدل ( )30 – 300 mg/dayاو ( )30 – 300 mg/gيعتبر ( )Microalbuminuriaو يعتبر دليل على ان الكليه
تأثرت بالضغط او بالسكر لكن االمر فى البدايه و ما زال التأثير بسيط و الحظ هنا ان بول المريض لن يظهر فيه البيومين بالطرق التقليديه (شريط البول
او التسخين او بطريقه حامض ال )SSA
**** وجود البيومين فى البول بمعدل ( )> 300 mg/dayاو ( )> 300 mg/gيعتبر ( )Proteinuria or macroalbuminuriaو يعتبر دليل على
تأثر الكليه بشكل اكبر و هنا حيظهر االلبيومين فى بول المريض بالطرق التقليديه و مع الوقت المريض ده حيحصل له ( progressive decline in
)glomerular filtration rateو يدخل فى نطاق ال ()chronic kidney disease
الحظ::::::::
لو انت مش بتشتغل التحليل بنفسك و بتعمله فى معمل تانى
لو النتيجه جائت لك ان ال ( )Microalbuminuriaايجابي و انت كنت عامل شريط للبول او مسخن و كان سلبي فده طبيعى يحصل الن الطرق
التقليديه اقل حساسيه اما اذا حدث العكس بان تكون نتيجه ال ( )Microalbuminuriaسلبيه و بالتسخين او بالشريط كانت نتيجتك ايجابيه يبقي فى هنا
حاجه مش مظبوطه و الزم تراجع الشغل ده
ده انزيم يتفرزه غده البروستاتا و دوره ان يعمل للسائل المنوى ()liquefaction
معظم كميه ال PSAالمنتجه بتنزل مع السائل المنوى و لكن جزء بسيط منها بيدخل الدم
فى الدم اما يرتبط ببروتينات زى ( )alpha-1-antichymotrypsin and alpha-2-macroglobulinو ده يخليه انزيم غير نشط و يطلق عليه ال
()complexed PSA
و اما يحصله ( )inactivationو يفضل فى صوره حره فى الدم او ما يعرف بال ()free PSA
**************************
طيب نيجي لشخص بيعاني من تضخم فى البروستاتا باعراضها الشهيره زى صعوبه التبول او الم اثناء التبول مثال .........الطبيعي ان المريض يكشف
عند طبيب اوال
اللي بيعمل فحص للبروستاتا ( )digital rectal examinationو يطلب تحليل ال ( )total PSAكبدايه لل ()prostate cancer screening
**** لو تحليل ال ( )total PSAفى الطبيعي ( )up to 4 ng/mlفالمتبع هو اعادته التحليل بصفه دوريه (مع مالحظه ان حوالي %20من حاالت ال
localized prostate cancerنتيجه التحليل بتكون فيها طبيعيه)
*** لو نتيجه ال ( )total PSAاعلي من .......... 10فهنا احتماليه سرطان البروستاتا قائمه (خاصه اذا كان فحص ال DREغير طبيعى)
و البد هنا من عمل سونار ( )Trans-rectal ultrasonographyاوال لقياس حجم البروستاتا و كذلك لسحب عينه نسيجيه من البروستاتا ( prostate
)biopsy samplingالرسالها لمعمل الباثولوجى لتاكيد وجود سرطان من عدمه (و ده االختبار الرئيسي لتأكيد او نفي التشخيص)
باالضافه لذلك من خالل قيمه ال ( ) total PSAاقدر احصل علي معلومات زياده ......يعنى مثال كلما كانت النتيجه مرتفعه كلما كان احتماليه وجود
سرطان بروستاتا اعلي
.....النتيجه االعلي من 50بترجح انتقال الورم الحد ال ( )lymph nodesالمجاوره
*** طيب فى حاله النتيجه لو بين ( .......... )4-10 ng/mlدى بيسموها ال gray zoneاللى متقدرش تاخد منها تشخيص او اجراء تعمله
و فى الحاله دى بيجى دور قياس ال ( )free PSAو تتحسب النسبه بتاعته كاالتى
&& هنا بقه لو النسبه دى طلعت اقل من ( %25بمعنى ان ال complexedعالي فى الدم) فاالبحاث بتقول ان كده احتماليه سرطان البروستاتا عاليه
و الزم تعمل ()prostate biopsy sampling
**** و االبحاث بتقول انه كلما كانت النسبه اقل كلما ده كان مرجح ل ()suggest more aggressive cancer
&& اما اذاا طلعت النسبه اعلى من %25فاحتماليه انه يكون سرطان اقل و مش الزم يتعمل ( )biopsyو تتابع الحاله بالتحليل فقط كل فتره
و بكده يبقي ال ( )free PSAاستخدم لتقليل الحاالت اللى حيتعملها ( )biopsyبحيث ان الخطوه الصعبه دى متتعملش لمرضي كتير بدون داعي
دى عباره عن خارج قسمه ال ( )total PSAعلى حجم البروستاتا (تم تعينه مسبقا بالسونار)
االبحاث لقت ان ال ( )PSA densityاعلى فى مرضي سرطان البروستاتا عن مرضي تضخم البروستاتا الحميد ( benign prostatic
)hypertrophy
حيث ان سرطان البروستاتا يمكنه انتاج كميه كبيره من ال ( PSAعلى الرغم من ان حجم البروستاتا مش كبير للدرجه)
بمعنى اخر
لو عندى مريض ال PSAبتاعه مرتفع الى حد ما مع حجم بروستاتا صغير (و بالتالي ال PSA densityعالى) فاحتماليه سرطان البروستاتا هنا عاليه
فى حين ان نفس االرتفاع لل PSAفى مريض اخر مع حجم بروستاتا كبير (و بالتالي PSA densityاقل) فاحتماليه تضخم البروستاتا هنا اعلي
و بالتالي فلو مريض فى ال gray zoneو عنده ال ( )PSA densityعالي فهنا احتماليه سرطان البروستاتا اكثر ارتفاعا
) مباشره كبديل عن استخدام ال ( )free PSAمما يعطى دقه اكبر فى ***** ايضا من الحاجات الحديثه انه ممكن حاليا قياس ال (
التشخيص
بحيث ان فى مرضي ال gray zoneلو طلع عندهم ال ( ) c-PSAاعلى من الطبيعي يبقى احتماليه سرطان البروستاتا قائمه و الزم يتفحص عينه من
البروستاتا
و اخيرا نتكلم عن دور ال total PSAفى متابعه ما بعد عمليه ازاله الورم ()total prostatectomy
---------------------------------------------------------------------
الن فتره نصف العمر لل PSAحوالى 3ايام فتقريبا الزم ينتظر المريض شهر كامل بعد العمليه ليقل مستوى ال PSAالمرتفع فى الدم الى اقل حد
ممكن )undetectable PSA level (< 0.1
***** طيب لو لم يقل لكده او على االقل لحدود النورمال ؟؟؟ ده معناه ان في ( )residual prostatic tissueاو حصل ()metastases
و فى خالل اول عام من العمليه بيعاد التحليل مره كل 3شهور ثم بعد ذلك يعاد مره كل 6شهور و اى ارتفلع فى مستوى ال PSAيعنى وجود
( )recurrenceيلزم العالج
======================================================
ده طبعا الوضع الطبيعي و طالما ان الجلوكوز في شخص طبيعي لم يرتفع عن حد العتبه الكلويه ( )renal thresholdو المتفق عليه فى اغلب المراجع
انها تتراوح من 180الى 200ملجرام ............فلن يظهر سكر فى البول
و كلنا عارفين ان الشخص الطبيعي بعد االكل بيبدء يرتفع مستوى الجلوكوز فى الدم حتي يصل اقصي ارتفاع له بعد ساعه تقريبا (دائما في الشخص
الطبيعي بيكون اقل من حد العتبه الكلويه) و بعض المراجع بتقول انه بيكون في حدود ()usually 1.5 - 2 times the fasting level
المهم ان عند النقطه دى بيحصل ( )stimulationلخاليا بيتا في البنكرياس الفراز انسولين اللى ايضا طالما الشخص طبيعي حيرتفع فى الدم و يساعد
على دخول الجلوكوز للخاليا فيقل مستواه فى الدم و نصل بعد ساعتين من بدايه االكل اقل من 140مليجرام و المراجع ايضا بتقول انه بيكون فى حدود
()usually +/- 10% times the fasting level
الحاله الثانيه :السكر العالي فى الدم و عالي فى البول ()Hyperglycemia with Glycosuria
===================================================
و ايضا هنا االمر طبيعي الن السكر المرتفع فى الدم (الي سبب) طالما ارتفع عن 180مليجرام اللى هى حد العتبه الكلويه .......حيظهر فى بول
المريض
ملحوظه بسيطه هنا .......مش فقط مرضي السكر هما اللى بيرتفع عندهم الجلوكوز فى الدم لدرجه انه ممكن ينزل فى البول ............لكن عندى
حاالت اخرى معروفه بيحصل فيها ( )Hyperglycemiaو طالما عدينا 180يبقي حيظهر فى البول
امثله للحاالت دى .....مرضي ال ( )Cushing's Syndromeنتيجه زياده هرمون ال ( )cortisolو مرضي ال ( )Hyperthyroidismنتيجه زياده
هرمون ال ( )T4,T3و مرضي ال ( )Acromegalyنتيجه زياده هرمون ال ( )growth hormoneو كذلك الحاالت اللي عندها ( )Stressالي سبب
نتيجه زياده هرمون ال ()epinephrine
ملحوظه الهرمونات دى كلها ( )catabolic hormonesيعني بتساعد على زياده الجلوكوز في الدم
الحاله الثالثه :السكر طبيعي فى الدم و عالي فى البول ()Normoglycemia with glycosuria
====================================================
دي حاله فيها ( )discrepancyواضح
هنا اول حاجه بعملها انى اتأكد ان الحاله ليست ( )false positiveفى البول ..........اختبار البول التقليدي المعتمد على شرائط البول عباره عن تفاعل
بين الجلوكوز اللى فى العينه مع انزيم ال ( )glucose oxidaseاللي بينتج عنه ( )hydrogen peroxideيتفاعل مع انزيم ال ( )peroxidaseعلى الشريط
النتاج لون يتراوح بين االخضر الى البني
و بالتالي وجود اى مصدر لل ( ) peroxidaseفى العينه ممكن يعطى ايجابي خاطئ و ده بيحصل فى حاالت االلتهابات فى القناه البوليه نتيجه وجود
( ......... )bacterial peroxidasesو طبعا من المتوقع لو فحصت البول انك تالقي ( )pusفى الحاله دى
طيب اتاكد ازاى؟؟؟ بأني اعمل ( ....... )Benedict testجزء من البول مع جزء من محلول بندكت ( )cupric sulfideو سخن و راقب تغير اللون من
االزرق الي االخضر او البني او البرتقالي
طيب اتأدت ان فعال البول فيه سكر و اتأكدت ان الدم طبيعي (المفروض انت عامل كنترول لشغلك طبعا) نيجي هنا بقه للتفسيرات االكلينيكيه:
اوال هل المريض اللى معايا مريض سكر و ال مش مريض سكر
**** نفترض انه مريض سكر ( :)diabetic patientsهنا الزم نعرف قاعده مهمه
A urine glucose test does not reflect your blood glucose level at the time of testing
بمعني ان نفترض ان مريض سكر صائم و اخدت عينه الدم و عينه البول اللي كانت مجمعه طوال الليل .........فمن المنطقي هنا انك تالقي السكر
طبيعي رغم وجود سكر فى البول (الحظ البول مجمع فى المثانه من مده)
و بنفس المنطق اي مريض سكر ممكن يطلع سكره طبيعي او اقل من ال 180و رغم ذلك تالقي سكر فى البول (المجمع فى المثانه من مده قبل اخذ
تحليل الدم)
=======================
**** طيب اذا كان المريض اللي عندنا مش مريض سكر ( )non-diabetic patients؟؟؟
** فى شخص طبيعي تماما و دائما تتكرر معه ان البول في سكر و الدم طبيعي <<< الناس دى بيكون عندها حاله اسمها ()Familial renal glycosuria
و دى طفره فى ال ( )glucose transporter geneاللي بيكود لل ( )glucose transporter SGLT2تؤدي الى نقص ال ( )renal thresholdو الطفره
دى ال تسبب اي مشكله لهم و ال تاثير لها
** عندنا ايضا حاله بيحصل فيها ( )inadequate reabsorption in the proximal renal tubulesيعنى مش بيحصل اعاده امتصاص بشكل طبيعي فى
النفرون للعديد من المواد و منها الجلوكوز و ده يبعرف ب ( )Fanconi syndromeو هو اما ينتج عن حاالت وراثيه زى ال ( )Cystinosisاو
( )Wilson's diseaseاو حاالت مكتسبه زى التسمم بالرصاص مثال او كنتيجه لتفاعل دوائي فى الجسم ()adverse drug reactions
** ايضا فى بعض االشخاص نتيجه اكل محتوى على كميه ضخمه من الجلوكوز او ال starchممكن يحصل ( )glycosuriaمؤقته نتيجه لسرعه
امتصاص الجلوكوز و ده ممكن نالقيه فى الناس اللى عامله جراحه للتخسيس ( )a part of the stomach is surgically removedو دى حاجه
بيسموها ( .......... ) Alimentary glycosuriaلم اجد اي مرجع بيقول ان اى شخص طبيعى تماما لو تناول وجبه غنيه جدااااا بالجلوكوز مهما كانت
ممكن يظهر نتيجه ذلك سكر فى البول)
الحاله الرابعه :السكر عالي فى الدم و طبيعي فى البول ()Hyperglycemia without glycosuria
======================================================
طبعا هنا ايضا فى ( )discrepancyواضح ......و ايضا الحاله ممكن تكون ( )false negativeو اشهر اسبابه هنا هو وجود فيتامين سي بكميه كبيره
فى البول (يعتبر vit Cماده )strong reducing agentsو بالتالي تمنع تفاعل ال ( )hydrogen peroxideمع االنزيم
** الحظ هنا فى الحاله دى مقدرش استخدم اختبار بندكت للتأكد من النتيجه الن االختبار بيدى ايجابي مع ( )vit Cالنه ماده مختزله ...............و
الحظ ايضا ان الشرائط بيضاف لها ماده ال ( )iodateاللي بتاكسد الفيتامين و بالتالي تقلل تداخله جداا مع اختبار الجلوكوز علي الشريط لذلك نقدر نقول
انه نادرا ما يكون البول فيه كميه ضخمه من الفيتامين ) (>25 mg/dlلدرجه حدوث هذا ال ( )Interference
** الحظ ايضا اننا استبعدنا ان يكون عينه البول متروكه فتره طويله فى درجه حراره الغرفه قبل الفحص ( unpreserved at room temperature for
)extended periodsالن طبعا ده بيسبب ( )rapid glycolysis of glucoseو طبعا نتيجه الشريط حتكون سلبيه خاطئه خاصه لو بالعينه بكتيريا و صديد
............بس دى بالتأكيد غلطه معمل
طيب هل في سبب طبي لحدوث حاله زي دى؟؟؟؟؟
اه فعال في بعض مرضي السكر من النوع الثاني خاصه ال ( )uncontrolledوجدت االبحاث ان بيرتفع عندهم ال ( renal threshold for glucose
)reabsorptionلحوالي ( )200 - 250 mg/dLو ده معناه ان السكر ممكن يوصل فى الدم للحد ده و ال يظهر فى البول .............و احد التفسيرات
المتاحه للحاله دى هو زياده انتاج الناقل ( )SGLT2فى هؤالء المرضي و طبعا هو المسؤول عن ال ()reabsorption of glucose
ثانيا :ال يمكن ابدا فى شغل التحاليل الطبيه االعتماد على التجربه او الخبره الشخصيه فى المعمل الننا بنعمل كده تجربه عشوائيه غير منضبطه و بالتالي
مقدرش اعمم نتائجها بشكل علمى (البحث العلمى نظام منضبط تماما بيراعى كل المتغيرات للوصول لنتائج دقيقه)
ثالثا :المرجع اللى معانا دلوقت (و هو من اهم مراجع الكيمياء االكلينيكيه) بيقول االتى:
** عينه السكر الصائم تسحب ((((((((((صباحا))))))))) بعد 8الى 10ساعات صيام
** بعد كده المرجع بيقول السكر عند اى شخص بيكون صباحا بيكون اعلى منه مساء و ده طبيعى نتيجه اوال زياده الهرمونات ال( )catabolicاللى
بتزود السكر فى الصباح و كمان نتيجه للمجهود اللى بيبذل من الشخص طوال اليوم فيقل السكر عن معدل الصبح و ده بيسمى ال ( diurnal
)variation
طيب حنخليها بس لو صايم اكثر من 10ساعات (الن زى ما المرجع قال مفيش فرق مؤثر)
اللى بيحصل فعال ان لما مستوى السكر يبدء يقل يفرز البنكرياس هرمون الجلوكاجون
و ده حيحفز عمليتين مهمين اوى (بيبدءو فى حدود اربع ساعات بعد اخر وجبه)
العمليه االولى هى ال ( )glycolgenolysisاى تكسير الجليكوجين للحصول على سكر فيخلى مستواه فى الدم طبيعى (يعنى ميقلش فتدخل فى
هيبوجليسمسا و بالتاكيد مش حيزيد)
العمليه التانيه هى ( )gluconeogensisو دى معناها الحصول على جلوكوز من مواد متنوعه زى البيروفك مثال و برضه هدفها ان السكر يفضل
طبيعى
خلى بالك الشخص ده م ستمر فى صيامه ......فطول ما هو صائم الجلوكاجون بيظبط له مستوى السكر يبقي فى الرنج الطبيعى و ميقلش لدرجه تدخله فى
هيبوجليسميا
مره تانيه خلى بالك الكالم ده طوال الصيام اللى هو كام ساعه؟؟؟
فى الصيام لمده من 8الى 10ساعات اللى قالت عليها المرجع سيظل مستوى السكر فى الدم متحافظ عليه
و عشان كده لما تالقى حد بيعمل سكر بعد فتره الصيام الطويله دى (و على عكس المتوقع بان السكر المفروض يقل اوى ) بتالقي ان السكر اعلى من
اللى انت متوقعه
خلى بالك مش اعلى من الطبيعى بل اعلى من المتوقع
يعنى لو نفس المريض كان عمل التحليل بعد 8ساعات بس كان طلع مثال 80
لكن بعد 15او 16ساعه (انت متوقع يبقي 50مثال) لكن الن عمليه ال ( )gluconeogensisشغاله بكفاءه اوووى فبتالقي السكر طلع مثال 110؟؟؟؟
عشان كده المرجع بيقول اوعى تزود الصيام عن 16ساعه و اال حتاخد نتيجه غير منطقيه
طيب تعالى كده نقول هو ده الزم %100يحصل يعنى مش ممكن يطلع السكر قليل بعد فتره الصيام الطويله دى
االجابه
ما هو ده اللي بنقوله من الصبح ال يمكن انك تاخد نتيجه واحده او اتنين و تعممهم على الكل
بص حضرتك الحاله اللى شرحناها دى الحاله ال ( )typicalاللى عندها كل حاجه مظبوطه تماما فتطلع بالشكل ده
لكن تعالى افرض حاله خزينها من الجليكوجين قليل؟؟؟ حتالقيه يخلص بسرعه و ال () تشتغل اسرع و توصل البيك بتاعها اسرع و على ما توصل ل
16ساعه يكون الجسم فعال مش قادر يحافظ على السكر فيطلع قليل فى التحليل
المرجع الل معانا بيقول لحد قبل 16ساعه مش حيبقي فى تاثير كبير
ملحوظه (الحد االقصي للصيام مفيش عليه كالم محدد و ان كان مرجع ال ( )Clinical Chemistry Principlesبيقول اال يزيد الصيام عن 16ساعه
باى حال من االحوال)
******* زياده فتره الصيام بشكل مبالغ فيه ( ) prolonged starvationربما تؤدى الى نتائج خاطئه يصعب تفسيرها او االعتماد عليها حيث يبدء نتيجه
ذلك الصيام انتاج كميات اضافيه من الجلوكوز عن طريق عمليه ال ( )gluconeogenesisنتيجه لزياه افراز هرمونى ()glucagon and epinephrine
ملحوظه (الصيام فى خالل اليوم و عمل تحليل الصائم بعده يعتبر اجراء غير دقيق و ال يجب االعتماد عليه مثال صيام من 10صباحا الى السابعه مساء
ثم عمل التحليل)
Plasma glucose values have a diurnal variation with the mean FBG higher in the morning than in the afternoon. Diabetes in
patients tested in the afternoon may be missed because of this variation
اما السكر الفاطر :فالبد ان يسبقه صيام ايضا من 8الى 10ساعات ثم يأكل المريض (االكل اليومي الطبيعي له مع العالج ان وجد) فى مده اقصاها
10الى 15دقيقه ثم يكمل باقي الساعتين بدون اكل او شرب مع مراعاه ان يتواجد فى المعمل قبل موعد سحب العينه ب 10دقائق
ملحوظه (اذا استمر المريض فى االكل فتره طويله يعتبر التحليل هنا غير دقيق النك واقعيا كده انت بتقيس السكر بعد فتره اقل من ساعتين)
ملحوظه (اذا تاخر المريض بحيث الفتره اصبحت اكثر من ساعتين فالتحليل فى هذه الحاله غير دقيق و البد من اعادته)
ثانيا :النقطه المهمه جدا قبل الدخول فى تفسير النتيجه هى التاكد التام اوال من دقه اجراء االختبار معمليا
بمعنى اكون متاكد من كيماوياتى و جهازى و عامل الكنترول الالزم و فصلت العينات مباشره بعد السحب او اشتغلت مباشره حتى ال يقل الجلوكوز
بتركه على الدم
و طبعا البد البد البد انك تاخد عينه بول مع عينتى الصائم و الفاطر (ده كنترول مهم جدا جدا لشغلك)
ثالثا :لو كل االمور المعمليه تمام و تاكدت منها فاول حاجه حتعملها هى سؤال المريض عن طبيعه االفطار ....هل اكل فعال؟؟؟
الن بعض المرضي بياكل شئ بسيط جدا او يشرب فقط او حتى يدخن سجاره اعتقادا منه انه كده فطر خالص و طبعا كده واقعيا كانه مكمل صيام و فعال
الفاطر ممكن يظهر اقل من الصائم
*** اما انه شخص مش مريض سكر و هنا عندى عده احتماالت
-1فى حاجه اسمها ال ( )Dawn effectاو تاثير الفجر و هنا الجسم ما بين الساعه 4و 5فجرا بيبدء يفرز بشكل كبير هرمونات ال ( growth
)hormones, cortisol, glucagon and epinephrineو دى كلها ( )catabolic hormonesتخلى الكبد يصنع و يفرز كميه كبيره من
الجلوكوز فى الدم (طبعا الهدف تجهيز الشخص لالستيقاظ) و كمان الجلوكاجون بيوقف مؤقتا تاثير االنسولين فده ممكن يوصل بعض الحاالت
الرتفاع سكر الصائم بشكل ملحوظ ...............ثم مع الفطار تقل الهرمونات دى و يطلع االنسولين بشكل طبيعي فيقل السكر و يظهر اقل
من مستوى الصائم فى الحاله دى
-2فى بعض االشخاص عندهم حاله اسمها ( )Reactive hypoglycemiaو دى بتحصل لما االكل يتحرك من المعده الى االمعاء بشكل سريع
اسرع من المعدل الطبيعي ( )rapid gastric emptyingو طبعا لن يكون مهضوم بشكل جيد و دخوله لالمعاء بالسرعه دى يسبب ( release
)excessive amounts of insulin into the bloodstreamو ده يقلل السكر بعد الفطار فى الدم و يخليه يظهر بالشكل ده .و الحاله دى
بنالقيها فى الناس اللى عامله جراحات فى المعده للسمنه او الناس اللى عندها قرح معديه (حوالى %15من الحاالت)
-3الموضوع ده برضه وجدوا انه بيحصل فى بعض مرضي ال ( )hypothyroidismخاصه لما يكون مستوى هرمونات الغده الدرقيه قليل
كتير الن ده بيأثر على امتصاص الجلوكوز من االمعاء بعد االكل فتطلع نتيجه الفاطر قريبه جدا من الصائم او اقل ( حتى انه لما بيتعمل
منحنى السكر للحاالت دى بتطلع كل النتائج تقريبا من اول عينه الخر عينه زى بعض و بالتالي الكيرف بيكون مستقيم و يسمى ال
( ))Flattened OGTT curve
السالم عليكم
تعليق سريع على موضوع نزول سكر فى بول الحوامل رغم انه طبيعي فى الدم
كلنا عارفين ان مصطلح ال ( )glomerular filtration rateمعناه كميه السائل (البالزما) التي يتم فلترتها فعليا فى الكليه خالل الدقيقه
و هى تساوي حوالى 120مل لكل دقيقه ................و طبعا اغلب الكميه دى كلها (حوالى )%99منها بيرجع تاني للدم عن طريق عمليه ال
( )reabsorptionو الباقي هو البول
عمليه اعاده امتصاص الجلوكوز تتم عن طريق ال ( )Sodium-glucose cotransporterفى ال ( )proximal tubuleفى النفرون
الناقل يقدر يرجع كل كميه الجلوكوز اللى فى ال ( )glomerular ultrafiltrateبشرط ان كميه الجلوكوز اللى بتوصله تكون فى حدود ال ()capacity
الخاصه بيه و كمان يكون معدل وصول ال ( )ultrafiltrateالنابيب الكلي فى المعدل الطبيعي
*** لذلك اذا ارتفع مستوى الجلوكوز فى الدم (عن 180تقريبا) ........مش حيقدر الناقل يرجع كل كميه الجلوكوز و بالتالي سيظهر سكر فى البول
*** كذلك اذا ارتفع معدل وصول ال ( )ultrafiltrateالنابيب الكلي (بمعنى ارتفع ال GFRعن 120مل فى الدقيقه) ........ايضا لن يستطيع الناقل
ارجاع كل الجلوكوز اللى وصل النابيب النفرون و بالتالي يظهر سكر فى البول (رغم ان مستواه فى الدم لم يتجاوز ال)180
فى الحمل بيرتفع مستوى هرمون البروجيستيرون (مهم جدا فى بدايات الحمل للحفاظ على ثبات الجنين لذلك هرمون الحمل ال HCGدوره فى الحمل هو
الحفاظ على الجسم االصفر لضمان استمراريه افراز البروجيستيرون)
احد االمور الهامه اللى بيعملها البروجيستيرون انه بيحفز افراز هرمون االلدوستيرون اللي بدوره بيزود ال ( sodium absorption and water
)retentionفيزيد حجم بالزما الدم بمعدل يصل ل ()40-50 %
و ده تغير فيسولوجي طبيعي فى الحمل هدفه اوال ان حجم البالزما الكبير بيسهل نقل ال ( )nutrientsو ال ( )respiratory gasesبين االم و الجنين ...
كذلك بيعتبر حمايه للحامل من هبوط الضغط لو حصل نزيف فى الوالده
***** ارتفاع حجم البالزما بالشكل ده بيزود ال ( )glomerular capillary hydrostatic pressureو بالتالي بتزيد فلتره المواد فى النفرون
...............يعني بيزيد معدل ال GFR
عشان كده الحوامل دائما عندهم ( )Frequent urinationيعنى بتدخل الحمام كثيرا
و كذلك ناقل الجلوكوز ال يستطيع انه يرجع كل كميه الجلوكوز فينزل جزء منها فى الدم
و الحظ ان ظهور الموضوع ده بيكون بعد فتره ..........ممكن من الشهر الثالث مثال عندما يكون حجم البالزما وصل لدرجه مؤثره على ال GFR
ملحوظه اخيره :ظهور الجلوكوز فى بول الحامل بالشكل ده ال يعنى اطالقا انها مريضه ( )gestational diabetesفاالمر طبيعي فى الحمل طالما
الجلوكوز في الدم طبيعي .............اما ارتفاع الجلوكوز فى الدم اثناء الحمل فهو حاله ال ()GDM
د/خالد مجدي
-58االستخدام الفعلي لتحليل ال ()HbA1c
السالم عليكم
الموضوع ده باختصار كاالتي
السؤال االساسي هنا هو ما االستخدام الفعلي لتحليل ال ()HbA1c
االجابه ان التحليل ده فى االساس بيستخدم لقياس ما يسمي بال ( )Glycemic goalsبمعني مدى انتظام مستوى السكر فى شخص ما طوال فتره زمنيه
محدده ( .........فى التحليل ده المده حوالى 3شهور)
اذن التحليل يستخدم فى االساس لمرضي السكر (اى تم تشخيصه بالمرض و يعالج و يتابع حالته بالتحليل)
طيب السؤال الثاني ايه القيمه اللي عندها اقدر اقول ان المريض ده ( )have stable glycemic controlاو اللى بنقول عليه ()controlled
)Americanقالت ان القيم االقل من %7لمريض السكر يعتبر كويسه و يعتير المريض ()controlled Diabetes (Association هنا عندى ال
و بالتالي اي قيم اعلي من كده (بغض النظر عن تسميتها fairو ال poorو ال ) uncontrolledفهي تعبر عن سكر غير منضبط و وجب علي
الطبيب محاوله النزول بالرقم ده الي الرقم المثالي %7
و بالتالي اختصارا للكالم لو عندى الحاله مش مريض من االساس و بيطمأن فقط ........يبقي لو اعلي من %6.5حيعتبر مريض سكر و الزم يكمل باقي الفحوصات
التشخيصيه.
اما لو المريض مريض سكر فعال و بيتابع ....يبقي اي رقم اعلى من %7محتاج تعديل فى العالج لمحاوله الوصول لل ()Optimal glycemic control
-59العالقه بين الكالسيوم الكلي و الكالسيوم المتأين
السالم عليكم
ان شاء هللا نتكلم النهارده عن العالقه بين الكالسيوم الكلي و الكالسيوم المتأين
و نناقش السؤال االشهر غلى جروبات التحاليل بطلب معادله حساب الكالسيوم المتأين !!!!!!!!!!!!!!
فى مراجع بتقول استخدم انابيب بالستك لتجميع العينه (الن انابيب زحاج كتير بتبقي مبطنه بطبقه فيها كالسيوم)
الز م تغطى االنبوبه بسرعه بعد وضع الدم و الزم تفصل السيرم عن كرات الدم بسرعه (فى خالل نصف ساعه بالكتير) حتى ال يحدث تغيير فى ال pH
و ده حيأثر على نتيجه الكالسيوم المتأين زى ما حنفهم فى اخر الكالم
زى ما قولنا قبل كده ان فى المعمل احنا بنقيس التوتال كالسيوم (الجزء المحمول و المتأين) و بالتالي اذا كان فى نقص فى مستوى االبيومين الى سبب
(زى امراض الكبد او ال )nephrosisحيتاثر نسبه مستوى الكالسيرم اللى بنقيسه
فى الحاالت اللى االلبيومين فيها طبيعى احنا بنقيس التوتال كالسيوم عادى بالكيت و كل كميه الكالسيوم بتتفاعل مع الرئيجنت مفيش اى مشكله و النتيجه
بتطلع معبره عن مستوى الكالسيوم الكلي فى الدم
المشكله لو االلبيومين قليل
هنا انت برضه بتقيس التوتال كالسيوم و فعال كل الكميه بتتفاعل عادى مع الرئيجنت (كل الكميه الحره و الكميه المحمله على االلبيومين القليل) و النتيجه
برضه بتطلع معبره عن مستوى الكالسيوم الفعلي اللى اتقاس (مفيش حاجه كالسيوم زياده و ال حاجه)
لكن ظهرت المشكله االتيه
ان النتيجه دى مش متماشيه مع الحاله فعليا بمعنى انهم لقوها تطلع قليله و المريض مش عنده اعراض ) (hypoاو تطلع طبيعيه و المريض عنده
اعراض)(hyper
فجائت فكره انه يتعمل تعديل رياضي( خلى بالك هو مجرد adjustmentللنتيجه لتقريبها للواقع )لالن االبحاث وجدت ان كل 1جرام نقص فى
االلبيومين عن 4جرام يقابله نقص فى الكالسيوم حوالى 0.8
بمعنى اخر المعادله دى بتفترض هو لو االلبيومين طبيعى فى المريض ده يبقي المفروض الكالسيوم بتاعه يكون كام ( مره اخرى هو مجرد تعديل
رياضي فقط للنتيجه و ليس نقص واقعي للكالسيوم بدليل عدم تأثر ال ionized calciumبمستوى االلبيومين اطالقا)
رابعا غلطه بعض المعامل فى استخدام تلك المعادله لحساب ال ionized calcium
-----------------------------------------------------------------------------
طبعا انا مش فاهم و ال عارف ازاى اى معمل يستخدم معادله التصحيح فى حساب الكالسيوم المتأين
جابه ازاى
حسبها ازاى
طيب طلع النتيجه بال mgو ال بال mmol
حاجه غريبه جدا االصرار على ان المعادله تنفع لحساب الكالسيوم المتأين
طيب طالما تنفع و زى الفل كده
بيخترعوا ليه تقنيه ال ISEو يكلفوا نفسهم و يكلفوا المعامل عشان يشتغلوا الكالسيوم المتأين ؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
-----------------------------------------------------------
الطريقه االفضل و االدق حاليا هى استخدام جهاز االلكتروليت للقياس
الجهاز بيستخدم تكنولوجيا ال ()Ion selective electrode
) طبعا اللى درس كيمياء كهربيه عارفها بالتفصيل و عارف المعادله بتاعتها ()Nernst equation المعتمده على فكره ال (
المهم هى ببساطه طرقه لقياس فرق الجهد بين اتنين الكترود فى خليه كهروكيميائيه الكترود منهم ( )referenceو االلكترود التانى هو ال ( )ISEبمعنى
انه الكترود بغشاء غير منفذ اال لنوع واحد من االيونات (ممكن للكالسيوم و ممكن للصوديوم و ممكن للبوتاسيوم و هكذا) و بالتالي فرق الجهد الناتج
حيكون معبر عن كميه االيونات اللى دخلت االلكترود
( )respiratory alkalosisزى حاالت ال ( )Hyperventilationنتيجه امراض القلب المزمنه او ( )CNS stimulationنتيجه للخوف او االلم و
القلق
او ( )metabolic alkalosisزى حاالت ال ()vomiting
اللي بيحصل هنا ان الهيدروجين بينافس الكالسيوم المتأين على االرتباط بااللبيومين ففى حاله ال Alkalosisحيث يقل مستوى الهيدروجين فى الدم تقل
المنافسه و يرتبط كالسيوم اكثر بااللبيومين مما يخفض مستواه فى الدم
او نالقى ان الكالسيوم التوتال طبيعى و لكن المتاين مرتفع و ده بيحصل فى حاله ال ( )acidosisحيث ان مستوى الهيدروجين مرتفع فى الدم و بالتالي
يقل ارتباط الكالسيوم بااللبيومين
زى حاالت ال ( : )respiratory acidosisزى مدمنى الكحول و مدمنى االفيون و مرضي chronic obstructive pulmonary diseaseنتيجه
ال Hypoventilation
و الن المعادله اثبتت فى ابحاث كتير و اصبح متعارف عليها بشكل مؤكد فذكرت فى المراجع العلميه القويه زى مرجع
Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry
و طبعا ده واحد من اهم مراجع الكيمياء االكلينيكيه
.....................................................................................
طيب نيجي بقه للمعادله دى
Ionized Calcium (mg/dl) = (total calcium + 4 - patient albumin) / 2
ثانيا :نرجو من المؤيدين تفسير المنطق العلمي للمعادله (زى ما فسرنا معادله التصحيح)
** بمعنى ليه جمعت 4على نتيجه الكالسيوم قبل الطرح من البيومين المريض؟؟؟؟ ليه الرقم ده بالذات؟؟؟؟
** ليه استخدمت االلبيومين فى المعادله و اهملت ان في جزء مرتبط بالجلوبيولين و ان كان بسيط و جزء اخر بيكون متراكبات مع البيكربونات و
السترات و الفوسفات و غيرها؟؟؟؟؟؟؟؟ و حتى لو استخدمت معادله فيها توتال بروتين حتعمل فى باقي االمالح دى ايه؟؟؟
** كمان ليه قسمت على 2؟؟؟؟؟ هل ممكن يكون قصدك ان المتأين تقريبا نصف التوتال (كما هو واضح من النورماالت) ؟؟؟؟ اذا كان كده طيب ما تقسم
الكالسيوم التوتال علطول ايه لزمه اللفه دى كلها؟؟؟
ثالثا:
طبعا انت عارف ان المتأين هو جزء من التوتال فاذا زاد المتأين زياده فعليه الزم يزيد التوتال و اذا قل فعليا الزم التوتال يقل
طيب تعالي نفترض ان الكالسيوم التوتال 8.5و ده طبيعي
رابعا و اخيرا لو ان المعادله يمكن الوثوق فيها بشكل علمي و لو انها معترف بيها من الجمعيات العلميه المتخصصه فى الكيمياء؟؟؟؟؟؟؟ فما هى الحاجه
لجهاز االلكتروليت و ما الداعي لتكنولوجيا ال ISEبكل احتياطتها و مشاكلها ما كان العالم كله ريح نفسه و اشتغل بالمعادله و خالص
االمر مطر وح للمناقشه العلميه (مره اخري العلميه) يعنى بمرجع و كالم و تفسيرات علميه عشان نحسم امر تلك المعادالت
د /خالد مجدي
-61عالقه الكالسيوم و الفوسفور و فيتامين د و هرمون الباراثرمون PTHو انزيم ال ALP
السالم عليكم
ان شاء هللا النهارده بناء على طلب بعض الزمالء نتكلم عن عالقه الكالسيوم و الفوسفور و فيتامين د و هرمون الباراثرمون PTHو انزيم ال ALP
-------------------------------------------------------------------
زى ما احنا عارفين ان فيتامين Dبناخده فى االكل او بيتصنع من ماده ال ( )7-dehydrocholesterolعن طريق تعرض الجلد الشعه ال UV
فيتامين Dالناتج يسمى ( cholecalciferolاو )vit D3و هو غير نشط و يحتاج الى خطوتين لتنشيطه
الخطوه االولى تتم فى الكبد عن طريق اضافه مجموعه هيدروكسيل الى ذره الكربون رقم 25النتاج ما يعرف بال ( 25-hydroxycholecalciferol
))(calcidiol
ثم الخطوه الثانيه تتم فى الكليه عن طريق اضافه مجموعه هيدروكسيل الى ذره الكربون رقم 1النتاج ما يعرف بال (calcitriol (1, 25-
) )dihydroxycholecalciferolو هو الشكل النشط لفيتامين D
يعمل فيتامين Dالنشط على مضاعفه امتصاص الكالسيوم من االمعاء ()from about 30% to 60%–70% of ingested calcium
الحظ ان االطعمه او المشروبات المحتويه على الفوسفات (زى الكوكاكوال) بتحد او بتقلل من امتصاص الكالسيوم حيث انه يتكون ماده ال calcium
phosphateفى االمعاء الغير ذائبه و بالتالي ال يمتص الكالسيوم و ال الفوسفات
كذلك يعتبر فيتامين Dاساسيا للحفاظ على المستوى الطبيعى للكالسيوم و الفوسفور معا فى الدم
-------------------------------------------------------------------
هرمون ال parathormoneيتم افرازه من الغدد الجاردرقيه ( )Parathyroidنتيجه الحد المؤثرات االتيه
-------------------------------------------------------------------
فى عمليه تكوين العظام ( )Ossificationيتم ترسيب ماده ال calcium-phosphate-hydroxide saltاو ال ()hydroxyapatite
الماده دى ببتكون داخل العظام حيث يتم نقل الكالسيوم لخاليا ال ( )osteoblastsبطريقه ال تحتاج طاقه اما الفوسفات فيتم نقله ( )activelyبمساعده
انزيم ال ALPثم يتكون ال hydroxyapatiteمن الكالسيوم و الفوسفور و المياه ())(Ca10(PO4)6(OH)2
--------------------------------------------------------------------------------
) فى االطفال او حاله ال ( )Osteomalaciaلين العظام فى البالغين نتيجه لنقص ممكن و ده بنالقيه فى حاله اسمها ال (
فيتامين Dفى الحالتين و بالتالي يقل مستوى الكالسيوم و الفوسفور فى الدم ثم كرد فعل طبيعى لنقص الكالسيوم الزم يرتفع هرمون ال PTH
****** هل ممكن نتيجه كالسيوم lowو الفوسفور lowو الباراثورمون ( highرغم ان مفيش نقص فيتامين Dفى االكل او بياخد دواء فيتامين و
مش عامل تاثير)
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------
) و ده مرض وراثي ناتج عن مشكله فى انزيم (25- اه ممكن و ده بنالقيه فى حاله اسمها (
)hydroxyvitamin D3 1-alpha-hydroxylaseو بالتالي رغم ان المريض بياخد فيتامين Dلكن ال يتم تنشيطه بشكل طبيعى فتظهر اعراض
المرض عليه
***** هل ممكن نتيجه كالسيوم normalو الفوسفور lowو الباراثورمون normal
------------------------------------------------------------------ -------------
) و ناتجه عن خلل اه ممكن و بنالقي كده فى حاله من الكساح اسمها ( )Hypophosphatemic ricketsاو ال (
جينى فى الكليه يجعلها ال تستطيع التحكم فى كميات الفوسفور المفلتره فى البول و بالتالي المريض يمتص الفوسفور عادى و لكن يفقده فى البول بسهوله
و اعراض المرض بتظهر بدرى اول سنه والده
) بنالقي ان انزيم ال ( )alkaline phosphataseعالى نتيجه لنشاط العظام ( increase in ملحوظه :فى الثالث حاالت اللى فاتو (حاالت ال
)bone turnover
----------------------------------------------------------------- --------------
اه ممكن فى حاله ال ( )Hypoparathyroidismزى ما بيحصل نتيجه لجراحه فى الغده الدرقيه او ( )Autoimmune destructionلغده
الباراثيرويد و بالتالي نقص هرمون ال PTHهو المتسبب فى نقص الكالسيوم و ارتفاع الفوسفور
-------------------------------------------------------------------------------
اه ممكن فى حاله ال ( )Secondary hyperparathyroidismاللى بيحصل فيها زياده فى هرمون ال PTHنتيجه لنقص الكالسيوم فى الدم زى ما
بيحصل فى حاالت الفشل الكلوى ()chronic kidney failure
-------------------------------------------------------------------------------
اه ممكن فى حاله اسمها ( )Osteitis fibrosisو تتسبب فى نقص كتله العظام و ضعفها و تنتج عن ال ( )primary hyperparathyroidismحيث
ان زياده انتاج الهرمون PTHبتحفز خروج الكالسيوم من العظام و تزود اعاده امتصاصه
فى الحاله دى بنالقى ان مستوى انزيم ال ( )alkaline phosphataseعالى ايضا نتيجه برضه لزياده نشاط العظام الن مستوى هرمون ال PTHعالى
بيسحب كالسيوم من العظام
****** هل ممكن نتيجه كالسيوم highو الفوسفور lowو الباراثورمون low
-------------------------------------------------------------------------------
اه ممكن نالقي النتيجه دى فى مرضي السرطان خاصه سرطان الثدى و الرئه و اللوكيميا و اللمفوما و هو ما يعرف بال ( Humoral
)hypercalcemia of malignancyو بيحصل ان الورم بيفرز ماده شبيهه بالباراثرمون ( )Parathyroid hormone-related proteinفتدى
نفس تاثيره من ارتفاع الكالسيوم و نقص الفوسفور و لكن ارتفاع الكالسيوم بيعمل تثبيط لخروج الهرمون الفعلي PTHفيقل فى الدم
****** هل ممكن نتيجه كالسيوم و الفوسفور و الباراثورمون طبيعيين و رغم ذلك نالقي انزيم ال ( )ALPمرتفع
------------------------------------------------------------------------------------------------------- --
اه ممكن و نالقي النتائج دى فى حالتين
االولى و االكثر شهره هى حاله هشاشه العظام او ال ( )Osteoporosisالناتج عن نقص كثافه العظام و بيحصل مع تقدم العمر خصوصا فى النساء بعد
سن اليأس لنقص االستروجين
اما الحاله الثانيه فهى ( )Osteitis deformansاو ال ( )Paget's disease of boneو هو زياده غير طبيعيه و غير معلومه السبب فى عمليه ال
( )bone remodelingاى تكوين و تكسير العظام
اخيرا نتكلم عن الفرق بين تحليل vitamin Dو تحليل ()1,25-vitamin D
------------------------------------------------------
بالفعل فى تحليلين مختلفين لفيتامين د فى المعامل
التحليل االول و هو ) (Vitamin D, 25-Hydroxyو يعتبر غير نشط و هو التحليل االساسي و اللى بيطلب بشكل روتينى لتقييم وجود نقص فى فيتامين د ام ال فى
حاالت الم العظام او نقص الكالسيوم مثال او تاخر المشي او التسنين عند االطفال .........حيث ان تركيزه فى الدم عالى و فتره نص العمر طويله فهو المفضل للقياس
فى حاالت النقص
لكن التحليل الثانى و هو ) (Vitamin D, 1, 25-dihydroxyو يعتبر النشط و هو تحليل مخصوص ال يطلب اال فى ظروف محدده و ال يطلب لمعرفه هل فى نقص
فيتامين د او ال
لكن يطلب فى الحاالت االتيه
الفشل الكلوى المزمن حيث يكون قليل
و فى حاالت امراض الغده الباراثيرويد حيث يكون قليل فى حاالت ال ) (Hypoparathyroidismالنه هرمون ال PTHبيحفز االنزيم( -alpha-hydroxylase) 1
المسؤول عن تحويل الغير نشط للنشط فى الكليه و على العكس حيكون عالى فى حاالت ال)(primary hyperparathyroidism
و برضه بيطلب فى نوع مخصوص من الكساح و يسمى ال ) (Vitamin D-dependent ricketsاللى اتكلمنا عنه
كمان لقوا ان الشكل النشط ده بيزيد فى حاالت اللمفوما و حاالت التهاب القولون ) (inflammatory bowel diseaseالن انزيم ال(-alpha-hydroxylase) 1موجود
فى ال macrophagesاللى بتكون زياده فى الحاالت دى
و طبعا كلنا عارفين تأثيره علي القلب و انه مع االرتفاع سيؤدى الي ( )cardiac arrestقبل حتي ما يوصل للرقم اللي فى النتيجه دى بكتير
و بالتأكيد التصرف االم ثل فى حاله زى دى هو االعاده بعينه جديده من المريض مع التأكد من دقه الجهاز و التاكد من سحب العينه صح بدون مانع تجلط
فيه بوتاسيوم و التاكد من انها مش مسحوبه من كانيوال متعلق فيها محاليل
في البوست ده سريعا حتكلم عن االمور اللي بتسبب ( )Pseudohyperkalemiaاو ارتفاع خاطئ فى مستوى البوتاسيوم
اوال :بالتأكيد ال ( ) hemolysisحتى لو كان بنسبه بسيطه سيؤثر كثيره علي النتيجه حيث ان كميه البوتاسيوم داخل الخليه اعلي كثيرا من كميته فى
السيرم
ثانيا :انك تربط ال ( )tourniquetفتره طويله علي يد المريض ده بيسبب ( )Hemoconcentrationو يؤدي الرتفاع خاطئ فى بعض التحاليل و منها
البوتاسيوم (بشكل عام مينفعش يتربط التورنكيه مده اكثر من دقيقتين)
ثالثا :سواء رابط التورنكيه او مش رابط في حركه بيعملها المريض بتسبب مشكله فى التحليل ده (و في بعض االحيان انت بنفسك اللي بتطلب من
المريض يعملها) ....و هي ال ( ) Repeated fist clenchingاو طلبك من المريض يقفل و يفتح قبضه يده بشكل متتالي .......طبعا الحركه دي
بتساعد و تسهل خروج البوتاسيوم من العضالت فتزيد نتيجته معاك في الدم ( leads to efflux of potassium from the muscle cells into the
)bloodstream
رابعا :ال ( )thrombocytosisخاصه االرقام العاليه (>1000000/mm³),و نتيجه لتجلط العينه بحصل ( )releaseللبوتاسيوم من الصفائح فيرفع مستوها
بالخطأ اثناء القياس .....و الحل االمثل في الظروف دى هو اعاده سحب العينه علي هيبارين
ثالثا :هيماتولوجي
==========
===============================================================
فكره ال ( ) PRPبدأت فى السبعينات فى ايطاليا و لكن اكتسبت شهره كبيره فى منتصف التسعينات و بدء استخدامها فى العديد من الحاالت مثل:
=====================
من المعروف ان الصفائح ( )Plateletsغنيه جدا بال ( )growth factors and cytokinesالهامه الصالح االنسجه ()healing of soft tissue
حتى ان اول استجابه للجسم فى حاله ال ( )tissue injuryهو ارسال الصفائح لمنطقه الجرح حتى تساعد فى عمليه ال ()repair
و من اجل االستفاده العظمى من هذه الخاصيه يجب تركيز الصفائح فى حجم صغير من البالزما و فصلها عن كرات الدم الحمراء
كذلك البد من تنشيط الصفائح باستخدام ال ( )calcium chlorideاو ال ( )calcium gluconateلحثها على افراز هذه العوامل من ال ( alpha
)granules
الحظ ::::ان التنشيط بيكون بنسبه 1الى 9بمعنى حيستخدم الطبيب 0.1مل كالسيوم لكل 0.9مل ()PRP
ملحوظه :من المفترض ان المريض خالل اسبوعين قبل اخذ الصفائح منه انه يكون ممتنع عن ال ( )anti-platelet drugsزى االسبرين
=============================
دى الطريقه المرجحه من قبل ال ()American Association of Blood Banks
و الخطوه دى بتم بتدوير العينه عند سرعه من 1000الى RPM 2000لمده من 3الى 5دقائق
الثانيه تدوير سريع يسمى ال ( )heavy-spin centrifugationاو ال ( )hard spinو تهدف الى ترسيب الصفائح من البالزما المفصوله من الخطوه
االولى لتركيزها
و الخطوه دى بتتم بتدوير البالزما المفصوله عند سرعه من 3000الى RPM 4000لمده من 5الى 10دقائق
((((((الحظ ::::::::ان سرعه التدوير و مدته مختلفه فى ابحاث كتير لدرجه ان فى ابحاث معموله لمقارنه تاثير السرعات و مدتها على الصفائح
المفصوله))))))
بمعنى لو انت حتسحب مثال 10مل دم على انابيب السترات اللى فى المعمل (الخاصه بال )PTيبقي حتستخدم 5انابيب (فى كل انبوبه 2مل)
او ممكن تستخدم انابيب ال ( )PRPالجاهزه ( 8.5مل) المحتويه على جل لفصل كرات الدم الحمراء عن البالزما و كذلك ماده ال ( acid citrate
)dextroseكمانع تجلط
((((((الحظ ::::ان ال 10مل دم تقدر تفصل منهم حوالى من 1الى 1.5مل ( )PRPاعتمادا على عدد الصفائح فى المريض من البدايه)))))
(((((( الحظ ممنوع حفظ العينه فى الثالجه او تبريدها و البد من انك تشتغل مباشره))))))
ثالثا باستخدام ( )droppersمعقم او سرنجه معقمه تقوم بسحب ال ( )supernatant plasma and buffy coat layerالمحتوى على الصفائح و
تنقلها النبوبه اخرى معقمه (بدون مانع تجلط)
رابعا حتقوم بتدوير انبوبه البالزما المفصوله التدوير ال ()hard spin
بعد التدويره دى المفروض ان الثلث االسفل فى االنبوبه ده حيبقي البالزما الغنيه بالصفائح فى حين ان الجزى العلوى عباره عن ( platelet-poor
)plasma
خامسا تخلص من الجزء العلوى ثم رج االنبوبه بشكل بسيط حتى تعيد تعليق الصفائح فى الكميه المتبقيه و انقلها لسرنجه انسولين حتى تكون جاهزه
للحقن عند الطبيب
و ال تنسي التعقيم فى كل خطوات شغلك
د /خالد مجدي
-64تحليل عد الخاليا الشبكيه ( )Reticulocyte count
السالم عليكم
حنتكلم النهارده ان شاء هللا عن تحليل عد الخاليا الشبكيه ( )Reticulocyte countواحد من التحاليل المهمه فى تشخيص حاالت االنيميا
خالل مراحل التصنيع تفقد تلك الخاليا النواه و باقي عضيات الخليه حتى نصل الى كره الدم الحمراء ال ( )matureو التى ال تحتوى على نواه او
عضيات بل يشغل مساحتها بالكامل جزيئات الهيموجلوبين
*** الخليه التى تسبق ال ( )erythrocyteمباشره فى التصنيع هى خليه ايضا ال تحتوى على نواه و لكن بها بقايا من ال ( endoplasmic
)reticulumبما عليها من الربيوسومات و لهذا تسمى الخليه الشبكيه او ال ()Reticulocyte
*** تخرج بعض الخاليا الشبكيه الى الدم بشكل طبيعى مع ال ( )erythrocyteو تمثل تقريبا نسبه من 0.5الى %2.5من عدد كرات الدم الحمراء
الكلي و فى خالل يوم من خروجها للدم تفقد بقايا الشبكه االندوبالزميه و تتحول الى ()mature erythrocyte
******** الح ظ انه ال يمكن التفريق بين كره الدم و الخليه الشبكيه فى فيلم الدم العادى المصبوغ بصبغه ليشمان********
**** فى الحالتين كرات الدم الحمراء قليله و بالتالي مقدرش افرق من خاللها بين الموقفين (فى تصنيع ام ال)
**** انما لو عرفت اعد الخاليا الشبكيه و عرفت نسبتها فى الدم اقدر احكم على شغل ال ()bone marrow
بمعنى لو لقيت نسبه الخاليا الشبكيه عالى فى وجود انيميا .............اذن النخاع بيشتغل كويس و بيصنع و بيستجيب لالنيميا بزياده التصنيع و لكن
الخاليا اللى بتصنع بتتكسر الى سبب كان و بالتالى فى الحاله دى يبقي االرجح ان المريض عنده ()hemolytic anemia
على العكس لو لقيت ان ن سبه الخاليا الشبكيه طبيعي فى وجود انيميا ...........اذن ده مؤشر الى ان سبب االنيميا نفسه ربما يكون مشكله فى النخاع زى
مثال ال ( )aplastic anemiaو ال ()megaloplastic anemia
==== هناك استخدام اضافى للتحليل و هو تقييم كفاءه عالج انيميا نقص الحديد و انيميا نقص فيتامين ب 12او حمض الفوليك ...............حيث ان
ارتفاع نسبه الخاليا الشبكيه بعد العالج يعد مؤشر مهم على االستجابه للعالج و زياده انتاج ال ()bone marrow
*** من االخطاء الكارثيه انك تسيب العينه لتاني يوم لو مش عندك و حترسلها الب تو الب
الصبغه المستخدمه
===========
الصبغه المستخدمه هنا تقوم بصباغه ال ( ) ribosomal RNAبلون ازرق و بالتالي يسهل تمييز الخاليا المحتويه على بقايا الشبكه االندوبالزميه
من اشهر الصبغات المستخدمه صبغتى ال ( )New methylene blueو ال ()brilliant cresyl blue
(((((((((( طبعا مفيش عدد معين للنقاط الزرقاء اللى حتظهر داخل الخليه لكن بشكل عام بقايا الشبكه االندوبالزميه بيقل كل ما كانت الخليه more
) mature
طريقه الشغل
===========
** اول حاجه تعملها انك تشتغل هيموجلوبين للعينه
** ضيف حجم من الدم (و ليكن 100ميكرو) لنفس الحجم من الصبغه ( 100ميكرو) فى انبوب زجاج
الحظ :لو الهيموجلوبين اقل من ...... 10استخدم 200ميكرو دم الى 100ميكرو صبغه
** حضن االنبوبه فى الحضانه عند 37درجه لمده ربع ساعه (حاول متزودش التحضين عن كده عشان تتفادى اى ترسيب للصبغه على الخاليا فتدى
نتيجه اعلى بالخطأ)
** افرد فيلم على شريحه من الدم المصبوغ (نفس طريقه فرد فيلم صوره الدم)
** افحص باستخدام العدسه 100كاالتى
^^ فى ( )fieldمن الفيلم عد كل كرات الدم الحمراء (بما فيها الخاليا الشبكيه) و بعدها عد الخاليا الشبكيه لوحدها و سجل العدين
^^ كرر نفس الكالم فى ( )fieldتانى و ثالث و هكذا لحد ما يبقي مجموع كرات الدم الحمراء معاك 1000
((((((((((((( فى بعض المعامل بتعد لحد ما يوصل العدد 500فى اقل كمان لكن فى العموم كل ما تعد كتير كل ما النسبه االحصائيه تبقي اكثر
دقه))))))))))))))))
تصحيح النتيجه
===========
الحظت ان النتيجه عباره عن نسبه مئويه ؟؟؟؟
طيب تعالي نفترض ان نسبه الخاليا الشبكيه فى مريضه انيميا (هيموجلوبين 6و هيماتوكريت )19طالعه %8
طبعا كده نقدر نقول ان النخاع مستجيب بشكل كبير بدليل نسبه الخاليا الشبكيه العاليه
لكن فى الحقيقه الموقف مش كده
الن فى مشكله كبيره فى طريقه حساب النتيجه للخاليا الشبكيه
و هى ان النتيجه عباره عن نسبه الخاليا الشبكيه الى خاليا الدم الحمراء كلها
فلو ( )RBCsقليله حتزيد النتيجه و حتطلع النسبه عاليه بشكل خاطئ ()reticulocyte count is misleading
او
لو عملنا التصحيح باستخدام الهيموجلوبين حتطلع النتيجه %4و بالتالي مش االرتفاع الكبير اللى كان بيوحى بيه النتيجه قبل تصحيحها
اذن يجب تصحيح نتيجه تحليل ال ( )reticulocyteدائما فى حاالت االنيميا خاصه ال moderateو ال severe
ايه السبب؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
=====================
(((((((((((( الجزئيه دى عاوزه تخيل و فهم و ححاول ابسطها بقدر االمكان))))))))))))))))))
احنا اتفقنا ان الخاليا الشبكيه بيحصل لها maturationو تصل لمرحله ال erythrocyteفى خالل يوم من خروجها للدم
لكن كل ما كانت االنيميا more severكلما طلع النخاع خاليا شبكيه less matureو بالتالي تحتاج اكثر من يوم واحد الكتمال التحول الى
erythrocyteو بيسموها ال ()shift reticulocytes
اذن فى الحاله دى و انا بعد الخاليا الشبكيه على الفيلم ...........فانا فعليا بعد الخاليا المنتجه النهارده ....و كذلك الخاليا ال less matureاللى تم
انتاجها امس او اول امس
اذن النتيجه اللى معايا دى مش معبره عن نشاط النخاع النهارده فقط .......و لكن معبره عن نشاط اكثر من يوم
اذن النتيجه دى اعلى من الحقيقه )(erroneously overestimation of production
الحل انى احسب حاجه اسمها ال reticulocyte production indexو ده يعتبر افضل حاجه معبره عن نشاط النخاع فعليا او بمعنى اخر ده بيدي
افضل انطباع عن ال ()rate of RBC production
ال factorده االبحاث حسبته و هو عباره عن عدد االيام المطلوبه من الخليه الشبكيه لكى تصل الى مرحله ال erythrocyteاعتمادا على نسبه ال
HCT
لو الهيماتوكريت ( )15 and belowتبقي الخليه محتاجه ( )2.5يوم الكتمال النمو
لو طبقنا الكالم ده على المثال عندنا يبقي حنقسم الخاليا الشبكيه المصححه على 2فتطلع ال RPIبيساوى %2
------------------------------
طبعا القيمه االولى (زمن البروثرومبين بالثوانى) تأتي بالقياس المباشر لوقت تكون الجلطه فى بالزما المريض بعد اضافه ال ( thromboplastin
)reagentسواء مانيوال او بجهاز ال ()Coagulometer
------------------------------
القيمه الثانيه (الكنترول) بيتعمل (نظريا) باستخدام 20عينه الشخاص ال يعانون من امراض (اشخاص طبيعيه) و متوسط قراءات ال 20عينه هو ال
MNPT
لكن ده صعب و عمليا بنشتغل ب 3الى 5عينات الشخاص طبيعيه و ناخد متوسط القراءات (نتيجه)1
و ناخد متوسط القراءتين (نتيجه 1و )2و ده الكنترول اللى نشتغل عليه
------------------------------
القيمه الثالثه و هى التركيز او ()PT % activity
و دى قيمه مق صود بيها النسبه المئويه لنشاط عوامل التجلط عند المريض مقارنه باالشخاص الطبيعين (على اعتبار ان ال activityالطبيعيه لعوامل
التجلط اللى هى انزيمات طبعا يساوى تقريبا )%100
الشركات لما بتصنع الكاشف فى الغالب بتعمل معاه جدول محتوى على زمن البروثرومبين بالثوانى و مقابله النسبه المئويه لل activity
و بيحسبوها كاالتي:
بيعمل كنترول من اشخاص طبيعيين زى ما عملنا و المفترض ان ده تركيزه %100
و يعمل لها تخفيفات 1:2و 1:3و 1:4و 1:8اللى هى مقابله لتركيزات %50و %25و %12.5و %6.25
و يشتغل لهم زمن بروثرومبين باستخدام الكاشف بتاعه و يرسم رسم بيانى
المحور االفقى التركيزات و الرأسي الزمن بالثوانى
و من خالل ال curveالناتج يقدر يستنتج التركيز الى زمن بروثرومبين و بيعملك جدول يبقي ضمن بامفلت الكاشف
لكن الزم تعرف ان اهم قيمه في نتيجه البروثرومبين هى القيمه االخيره ال INR
------------------------------
اخيرا ال INR
عشان نفهم الهدف من القيمه دى الزم نعرف االول المشكله اللى ادت الى استحداثها (الموضوع ده صعب الى حد ما و ححاول ابسطه بقدر االمكان)
الكاشف المستخدم فى التحليل عباره عن ماده ال ( )tissue factor or thromboplastinو دى بتستخلص من انسجه بعض الحيوانات
المشكله ان استخالص الماده دى مش بيبقي %100نقي بمعنى انه الزم يكون فى ( )Contaminationببعض السيرم المحتوى طبعا على عوامل تجلط
اذن الكاشف فى الحاله دى مش حيكون حساس بدرجه كافيه اثناء اجراء االختبار (بمعنى ان نقص نشاط عوامل التجلط فى العينه اللى بشتغلها مش
حيتالحظ اذا كان نقص بسيط فى بدايه العالج(و السبب شوائب عوامل التجلط الموجوده فى الكاشف نفسه)) و طبعا ده معتمد على ال ( )purityللكاشف
اذن ما الحل؟؟؟؟
الحل اقترحته منظمه الصحه العالميه بفكره استخدام ما يسمى ال INR
هنا المنظمه جهزت كاشف قياسي ( )internationally standardized thromboplastinاللى هو حساسيته و نقائه اعلى ما يمكن
و قالت لكل الشركات المنتجه للكواشف ( )thromboplastinانهم الزم يعملو عندهم مقارنه بين الكاشف القياسي و الكاشف بتاعهم و بطريقه احصائيه
معينه يكتبوا على الكاشف بتاعهم رقم ( )International Sensitivity Indexبيحدد مدى حساسيه الكاشف ده او بمعنى اخر مدى دقه و نقاء تصنيعه
بالمقارنه للكاشف القياسي
*********** و طبعا كلما قل رقم ال ISIكلما كان ذلك دليل على نقاء و دقه تصنيع الكاشف ************
و الرقم ISIده هو اللى حنستخدمه لحساب ال INRكاالتى:
مثال لو بستخدم كنترول 12و نتيجه المريض طالعه 15و ال ISIالخاص بالكاشف 1.3حتبقي ال 1.33 INR
و بالتالي بالشكل ده تقدر تقارن بين كذا INRمختلفه لنفس المريض بغض النظر عن نوعيه و حساسيه الكاشف الى اشتغلت بيه
============
فى كذا نقطه سريعه باختصار عشان توضح فكره نتيجه البروثرومبين بتكتب ازاى
اوال :ما هو ال ( )ISIاو ال ( :)International Sensitivity Indexده رقم على الرئيجنت بيحدد مدى حساسيه الكاشف ده او بمعنى اخر مدى دقه و
نقاء تصنيعه بالمقارنه للكاشف القياسي من منظمه الصحه العالميه ويتراوح هذا الرقم من 2.5 – 1.0
*********** و طبعا كلما قل رقم ال ISIكلما كان ذلك دليل على نقاء و حساسيه و دقه تصنيع الكاشف ************
ثانيا :الكنترول :ده القيمه الطبيعيه لزمن البروثرومبين في معملك و اللى على اساسها بتقارن نتائج المرضي
طيب بيتعمل ازاى:
بيتعمل (نظريا) باستخدام 20عينه الشخاص ال يعانون من امراض (اشخاص طبيعيه) و متوسط قراءات ال 20عينه هو ال MNPT
لكن ده صعب و عمليا بنشتغل ب 3الى 5عينات الشخاص طبيعيه و ناخد متوسط القراءات (نتيجه)1
و ناخد متوسط القراءتين (نتيجه 1و )2و ده الكنترول اللى نشتغل عليه
و دى قيمه اقترحتها منظمه الصحه العالميه لحل مشكله اختالف حساسيه الرئيجنت بين الشركات المختلفه و بالتالي بيكون في صعوبه كبيره فى مقارنه
النتائج بين المعامل
القيمه دى بتتحسب كاالتي:
(زمن البروثرومبين للمريض /زمن الكنترول المستخدم) مرفوع الس ال ISI
مثال لو بستخدم كنترول 12و نتيجه المريض طالعه 15و ال ISIالخاص بالكاشف 1.5حتبقي ال 1.4 INR
و بالتالي بالشكل ده تقدر تقارن بين كذا INRمختلفه لنفس المريض بغض النظر عن نوعيه و حساسيه الكاشف الى اشتغلت بيه
و دى قيمه مقصود بيها النسبه المئويه لنشاط عوامل التجلط عند المريض مقارنه باالشخاص الطبيعين (على اعتبار ان ال activityالطبيعيه لعوامل
التجلط اللى هى انزيمات طبعا يساوى تقريبا )%100
الشركات لما بتصنع ا لكاشف فى الغالب بتعمل معاه جدول محتوى على زمن البروثرومبين بالثوانى و مقابله النسبه المئويه لل activity
و بيحسبوها كاالتي:
بيعمل كنترول من اشخاص طبيعيين زى ما عملنا و المفترض ان ده تركيزه %100
و يعمل لها تخفيفات 1:2و 1:3و 1:4و 1:8اللى هى مقابله لتركيزات %50و %25و %12.5و %6.25
و يشتغل لهم زمن بروثرومبين باستخدام الكاشف بتاعه و يرسم رسم بيانى
المحور االفقى التركيزات و الرأسي الزمن بالثوانى
و من خالل ال curveالناتج يقدر يستنتج التركيز الى زمن بروثرومبين و بيعملك جدول يبقي ضمن بامفلت الكاشف
***************
فى معادله بتدى نتائج قريبه جدا من نتائج الجدول الفعليه و تقدر تستخدمها لو مش عندك جدول
الفكره انك معاك كنترول بنفس الطريقه السابقه و االى مفترض ان تركيزه يعتبر %100تخففه 1:2اللى هو حيبقي تركيز %50و تعمل لالتنين زمن
بروثرومبين
و باستخدام زمن ال %100و زمن ال % 50تقدر من خالل المعادله فى الصوره تستنتج بدقه قريبه من دقه الجدول اى تركيز انت عاوزه الى زمن
السالم عليكم
الهدف من الحاله المعروضه هو توضيح الفرق بين التشخيص الطبي و تفسير النتائج معمليا
فاالولي مهمه الطبيب المعالج فقط
و الثانيه مهمه اخصائي التحاليل الطبيه
(و خلى بالك ان فى احيان كثيره تفسير النتيجه ممكن يوصل لتشخيص مبدئي للحاله لكن التشخيص النهائي و عالج الحاله هو مهمه الطبيب المعالج)
نتكلم عن الحاله اللى معانا
مبدئيا كده من اساسيات معمل التحاليل الطبيه الناجح انك الزم تعرف ( )historyللحاله بقدر االمكان شامال التاريخ المرضي و الدوائي للحاله الن ده من
الحاجات الرئيسيه المساعده على تفسير النتيجه
من االمور الواضحه فى الحاله اللى عندنا هو ظهور الصفراء على المريض و انه اخذ دواء االسبرين و البول اللى لونه غامق.
***** نتيجه الكيمياء بتقول ان الصفراء فى الحاله من نوع ال ( )pre-hepatic jaundiceاو بتسمى ال ( )hemolytic jaundiceالن البليروبن
الغير مباشر بيزيد فى الحاله دى نتيجه لزياده تكسير كرات الدم الحمراء و ده ادى لظهور الصفراء على المريض
***** اذن مبدئيا النتيجتين ماشيين مع بعض فى انيميا تكسيريه بدليل ارتفاع الصفراء و نقص شديد فى كرات الدم الحمراء و الهيموجلوبين
***** ايضا حاله ال ( )hemolytic anemiaتقسر لنا ارتفاع انزيم ال ( )GOTحيث انه موجود داخل كرات الدم الحمراء و كذلك انزيم ال ()LDH
لوجود ال االيزوانزيم 1داخلها و بالتالي عند تكسير كرات الدم الحمراء تخرج تلك االنزيمات للخارج فيرتفع مستواها فى الدم
***** خلى بالك البول الغامق فى الحاله دى مش الن فى صفراء (طبعا انت عارف ان الصفراء الغير مباشره ال تنزل فى البول) و لكن نتيجه حدوث ال
( )hemoglobinuriaالن الهيموجلوبين الفري اللى اصبح فى الدم بيتفلتر و ينزل فى البول
***** لكن من المعروف ان حاالت االنيميا التكسيريه بتبقي ( .................. )normocytic normochromicلكن الحاله معانا هنا ( macrocytic
)normochromicو بكده انت مطالب بتفسير التعارض ده
***** لو اخدت بالك من نتيجه فيلم الدم حتالقي بيقول ان فى ( )polychromasiaو ده معناه ان بعض كرات الدم الحمراء بتصبغ بلون ازرق باهت فى
الفيلم و ده دليل على عدم اكتمال نضج الخليه و وجود كميه من ال ( )RNAداخلها .....و من هنا نستنتج ان فى استجابه من ال ()bone marrow
لالنيميا بانتاجه عدد كبير من الخاليا الغير كامله النضج زى ال ( )reticulocytesو دى حجمها اكبر من الخليه الناضجه و بالتالي ادت الى ان ال
( )MCVيظهر بالشكل ده
***** التفكير االولى فى الحاله بيقول ان طالما ان حاله االنيميا التكسيريه دى حصلت بعد تناول دواء االسبرين فربما يكون الشخص ده مصاب بانيميا
الفول حيث ان االسبرين من االدويه الممنوعه فى الحاله دى و لكن حاليا متقدرش تقيس مستوى انزيم ال ( )G6PDعشان فى ( )reticulocytosisفى
الحاله و كمان عشان الحاله حتنقل دم فالزم تنتظر حوالى شهر قبل ما تقيس االنزيم ده
بكده نكون فسرنا النتائج اللى طلعت معانا فى المعمل و تاكدنا من مطابقتها للحاله المرضيه و لم نتطرق للتشخيص النهائي للحاله و تركنا االمر للطبيب
المعالج لتحديد سبب االنيميا فعليا و عالجها
د /خالد مجدى
السالم عليكم
شكرا للزمالء اللي شاركوا فى المناقشات
و نحاول نجمع االجابات فى فقره واحده مختصره
هنا عندنا الحاله بتشتكي من شحوب و اجهاد بشكل عام مع ظهور ( )bruisingعلى جسمها (نزف تحت سطح الجلد يؤدي لتلون البشرة) فهنا من الطبيعي
ان الطبيب يطلب صوره دم كامله و كذلك طلب ال ( )PTو ال ( )PTTالستبعاد ان يكون ال ( )bruisingناتج عن ()genetic bleeding disorders
marked leukocytosis
severe thrombocytopenia
و االهم ان فحص فيلم الدم اثبت وجود خاليا ال ( )blast cellsبنسبه %83
****** كده النتائج دي بتقول اننا بنتكلم غالبا بنتكلم عن حاله ()acute leukemia
acute leukaemia is defined as the presence of > 20% blast cells in the bone marrow or peripheral blood
حاالت اللوكيميا الحاده تتميز بحدوث ( )maturational arrest of bone marrow cells in the earliest stages of developmentبمعني ان الخاليا
االوليه لكرات الدم يتوقف نموها و تطورها للخاليا االكثر نضوجا
و لذلك رغم العدد الهائل من كرات الدم البيضاء التي نتجت عن انقسام الخاليا االوليه اال ان المريض يعاني دائما من حدوث ( )neutropeniaمما
يجعله عرضه لالصابات و العدوي و ده ممكن يكون سبب ال ( )feverفى البنت
و يسبب العدد الضخم من الخاليا البيضاء الغير ناضجه الى حدوث ( )Crowding by such cells in bone marrowو ده يؤثر على تصنيع الخاليا
الطبيعيه االخري ككرات الدم الحمراء و الصفائح
لذلك تحدث ال ( )anemiaو ال ( )thrombocytopeniaفى تلك الحاالت
In the hemolytic conditions, LDH (mainly isoenzymes 1 and 2) is often increased
*** و رغم ذلك حنالقي ان ال ( )Reticulocytesطبيعيه (فى اقل الطبيعي) الن مفيش استجابه من ال ( )Bone marrowلتكسير كرات الدم .......
النه من االساس و نتيجه لخاليا اللوكيميا التصنيع الخاص بباقي الخاليا فيه مشكله
*** اذا اخذنا السن فى االعتبار ( 6سنوات) و وجود تضخم فى الغدد اللمفاويه ( )lymphadenopathyفهنا الشك االكبر ان الحاله تكون ( Acute
))lymphocytic leukemia (ALL
باالضافه لعمل ال ( )Immunophenotypingلتحديد نوع الخاليا بشكل محدد من خالل ال ( )CD markersالخاصه بها لتحديد نوع اللوكيميا فى الحاله
بالظبط
د /خالد مجدى
اللي بالفعل اتعمل و وضح ان ال ( )Serum ironاقل من الطبيعي و ال ( )ferritinكذلك قليل و ال ( )TIBCفى اعلي الطبيعي
و ده خالص بيشخص ان الحاله ( )IDAالن فى الحاالت دى بيبدأ الفرتين كمخزون حديد يقل الن الجسم بيسحب منه لالستهالك اليومي ......بعدها بيبدء
امتصاص الحديد يزيد و ده يستتبعه بالضروره زياده مستوى ال ( )transferrinالنه البروتين الناقل للحديد (اللى بنقيسه معمليا فى شكل ال .... )TIBC
ثم بعد ذلك يقل الحديد نفسه فى السيرم و تبدء تظهر كرات دم حمراء اصغر حجما ()microcytic
ملحوظه :::::الن فى فى الدم كرات حمراء طبيعيه الحجم مصنعه وقت ما كان الحديد موجود و االن اصبح فى كرات صغيره الحجم نتجت الن الحديد
ناقص .........فتظهر هنا حاله من اختالف االحجام فى العينه او ما يعرف بال ( )anisocytosisاو ( )anisopoikilocytosisلو في اختالف احجام و
اشكال كما هو مذكور فى فيلم الدم من وجود ال ( )pencil cellsاو بيسموها ال ( )Cigar cellsو اللي يتظهر فى حاالت نقص تصنيع كرات الدم زي
حاله ال ) )IDAو لو كان التقرير موضح لنا ال ( )RDWكنا حنالقيها مرتفعه
ملحوظه :::::من الكالم ده نفهم ان اول تحليل ممكن يطلب لتشخيص انيميا نقص الحديد هو الفرتيين النه اول ماركر بيقل حتي قبل ظهور حاله االنيميا
نفسها و لكن فى بعض الحاالت مش بيكون التحليل ده مناسب (فى وجود التهابات) النه ( )acute phase proteinيعنى بيرتفع فى االلتهابات و بالتالي
يعطى مؤشر خاطئ فى الحاله دى ............و لذلك يلجأ االطباء الستخدام ال ( )transferrin saturationاللى هو خارج قسمه الحديد على ال
( )transferrinو النتيجه القليله (كما هو موجود فى الحاله محل الدراسه) بتؤكد انيميا ال ( )IDAاعتمادا على ان نقص الحديد مع زياده البروتين الناقل
ستؤدي الى نقص النسبه المئويه بينهما
ملحوظه :::::البارمتير الموجوده فى صوره الدم بتظهر ايضا فى حاالت ال ( ......... )Beta thalassemia minorلكن طبعا الحاله المرضيه هنا و
السن مش يرجح ابدا الكالم ده
انما لو نفس الصوره فى طفل فالزم فعال استبعاد الحاله بتحليل ال ( )hemoglobin electrophoresisللبحث عن مستوى ال (............ )HbA2
بعض االطباء يستخدم ( )Mentzer indexو هو خارج قسمه ال ( )MCVعلي ال ( )red blood cellليأخذ انطباع عن الحاله (فقط انطباع فهو ليس
بالدقه الكافيه للتشخيص) حيث ان لو الناتج اعلى من 13فده يرجح ال ( )IDAبشكل اكبر
***** نيجي لنقطه ملفته فى التقرير ...ما سبب ارتفاع الصفائح ( )plateletفى هذه الحاله؟؟؟
بالفعل ده من االمور اللي بتظهر كثيرا فى حاالت ال ( )IDAو لذلك سببين
االول :ان الحديد بيعمل ( )inhibitionلهرمون ال ( )thrombopoietinو بالتالي ينظم انتاج الصفائح ......لذلك نقص الحديد يؤدي لزياده انتاج
الهرمون فتزيد الصفائح ........و بمجرد البدء فى العالج بالحديد بنالقي الصفائح رجعت للطبيعي خالل اسبوع الى 10ايام
الثاني :ان حاله االنيميا الناتجه بتزود بالضروره من انتاج هرمون ال ( )erythropoietinللحث على انتاج كرات دم حمراء ...و لكن فى المستوى
المرتفع من هذا الهرمون فوجد انه مش بيشتغل على كرت الدم الحمراء فقط و لكن ايضا بينشط ال ( )thrombopoietin receptorsفى الخاليا المنتجه
للصفائح مما يزيد ايضا انتاجها
***** نقطه اخري فى التحليل و هو ليه الطبيب طلب ( )TSHايه عالقته هنا بالحاله دى؟؟؟
فكره الطبيب هنا انه عاوز يستبعد وجود ( )hypothyroidismالن نقص هرمونات الغده الدرقيه يؤثر كثيرا على عمليه االمتصاص (بينصح دائما
باجراء تحليل ال TSHالي حاله انيميا خاصه لو مش واضح سببها)
كذلك لو نتج عنها ( )malabsorption of vitamin B12 or folic acidحنالقي ( )Macrocytic anemiaفى الحاله
*****السؤال الثاني فى الحاله بيقول ايه ال ( )Further investigationsاللى ممكن تتعمل للحاله
طبعا هنا خالص الحاله مشخصه نفسها و مفيش احتياج الجراء تحاليل اضافيه و اتجاه التفكير يكون ايه السبب فى الحاله
و اى طبيب بالنتيجه دى مع الهيستورى بيكون اول تفكير في المنظار ( )endoscopyلتشخيص وجود القرح او اورام نتج عنها النزيف
في بعض االحيان ممكن يتعمل ( )occult blood in stoolو ( )h pylori antigenالن النتيجه االيجابيه ترجح بشكل قاطع ضروره اجراء
المنظار .........و ان كان االغلب بيشتغل منظار مباشره
) (7 - 8 g/dLاو اقل لنقل الدم و بالتالي ال داعي فى الحاله المذكوره و يكتفي بحديد ( )Oralاو ( )intravenousو لكن فى النهايه القرار العالجي
مسؤوليه و رؤيه الطبيب المعالج فقط ال غير
د /خالد مجدى
دى اندر فصيله دم فى العالم وتتراوح نسبتها من 4الى 5شخص لكل مليون نسمة ،اكتشفت في مدينة بومباي بالهند و ده سبب التسميه
الجين ( )Hو ده بينتج ال ( )H antigenو دى الماده االوليه اللى بينتج منها االنتيجين Aاو B
الجين ( )Aو ده بينتج انزيم اسمه ( )glycosyltransferases enzymeو ده بيضيف ال ( )N-acetylgalactosamineلالنتيجين Hمكونا االنتيجين
A
الجين ( )Bو ده بينتج انزيم اسمه ( )glycosyltransferases enzymeو ده بيضيف ال ( )galactoseلالنتيجين Hمكونا االنتيجين B
اذن الشخص اللى عنده الجين <<< Aيبقي فصيلته ( Aو حيتكون عنده اجسام مضاده )b
الشخص اللى عنده الجين <<< Bيبقي فصيلته ( Bو حيتكون عنده اجسام مضاده )a
الشخص اللى عنده الجين Aو الجين <<< Bيبقي فصيلته ( ABو لن يتكون عنده اى اجسام مضاده)
الشخص اللى معندوش الجين Aاو الجين <<< Bيبقي فصيلته ( Oبمعنى ان خاليا الدم الحمراء عنده تحمل االنتيجين Hبدون تغيير) ( ,,,,,,,و
حيتكون عنده اجسام مضاده )a,b
.................................
فى بعض االشخاص بيبقي عندهم الجين ( )Hمش بينتج ال ( )H antigenالن ال ( )genotypeعندهم متنحى ()hh
الناس دى حتى لو عندها الجين ( )Aاو الجين ( )Bالمنتج االنزيمى بتاعهم مش حيالقي ال ( )H antigenاللى بيشتغل عليه و بالتالي مش حيتكون
عندهم االنتيجين Aاو B
اما الفصيله ( )Bombayبيتكون عندها اجسام مضاده a,bباالضافه الى الجسم المضاد ( )hالن معندهمش ال ()H antigen
و لذلك مشكله الفصيله دى انها مش ممكن يتنقل لها دم من اى فصيله اخرى (و اال حدث (transfusion reactionنتيجه وجود ال ( )anti-Hعندهم
====================
من اسمه كده واضح ان دى طفره جينيه بتسبب مشكله
اوال قبل ما نبدء الكالم فيها عاوزين نعرف مصطلح ال ()Thrombophilia
الكلمه دى باختصار معناها ال ( )hypercoagulabilityبمعنى زياده احتماليه تجلط الدم داخل االوعيه الدمويه مسببا حدوث جلطه ()thrombosis
و دى اما ان بيكون سببها ( )congenitalيعنى فى طفره جينيه سببت المشكله او بسبب ( )Acquiredزى مرضي الذئبه الحمراء و مرضي ال DIC
ثانيا نتكلم بسرعه على عمليه التجلط الطبيعيه اللى بتحصل فى الدم
عمليه تكوين الجلطه تعتمد على مجموعه من عوامل التجلط الموجوده فى الدم بشكل غير نشط
اللى بيحصل ان العوامل دى بتتنشط عشان تكون الجلطه
التفاعل الرئيس هو تنشيط العامل العاشر ...و اللى بدوره يحول البروثرومبين الى ثرومبين (بمساعده العامل الخامس النشط .... )Vaو اللى بدوره
بيحول الفيبرينوجين الى فيبرن
تنشيط العامل العاشر نفسه بيتم بطريقه من اتنين اما ال ( )Intrinsic pathwaysاو ال ()Extrinsic pathway
و ده بروتين بيتصنع فى الكبد و دوره الرئيسي انه يعمل ( )inactivatingللعامل الخامس النشط ( )Factor Vaو بالتالي يتوقف انتاج الثرومبين فتتوقف
ميكانيكيه التجلط عند هذا الحد
اللى بيحصل هنا ان العامل الخامس (و ده بروتين ينتج عن ترجمه جين محدد فى ال )DNAبتحصل فيه طفره فال يستطيع البروتين Cانه يمسك فيه
عشان يوقف نشاطه و بالتالي يوقف عمليه تكون الثرومبين
و بالتالي يزيد تكوين الجلطات نتيجه لزياده تكون الثرومبين
و الناس اللى عندها الطفره دى عندهم زياده فى احتماليه تكوين الجلطات ( )deep vein thrombosisمن 5الى 10مرات اكثر من الشخص الطبيعي
النها اكتشفت الول مره عام 1994فى مدينه من مدن هولندا اسمها مدينه اليدن
د/خالد مجدى
حنناقش الموضوع من خالل مراحل تطور حاله انيميا نقص الحديد عشان يبقي الربط اسهل و فهم دور كل تحليل فى الحاله
انيميا نقص الحديد من بدايتها و حتي ظهورها الفعلي كحاله انيميا تمر بثالثه مراحل
*** االولي مرحله ()Iron Stores Depletion
==========================
فى المرحله دي بيكون فعليا بدأ الحديد ينقص فى الجسم الي سبب من االسباب المعروفه زى
نقص الحديد فى االكل خاصه فى حاالت ال ()plant-based diets
حاالت سوء االمتصاص زى حاالت التهابات االمعاء ,,,,حاالت المرضي اللي بتاخد ادويه حموضه باستمرار ( )proton pump inhibitorالن ده بيقلل
افراز حامض المعده اللي له دور فى امتصاص الحديد
حاالت ال ( )Chronic bleedingزى نزيف الدوره الشهريه و زى نزيف القناه الهضميه
المهم ان المرحله دي الهيموجلوبين طبيعي و كرات الدم الحمراء طبيعيه
فقط معمليا خالل تلك المرحله حنالقي ال ( )serum ferritinاقل من الطبيعي نتيجه ان الجسم بدء يسحب من المخزون من غير ما يعوض المسحوب
()A negative iron balance develops
لذلك بيعتبر تحليل الفرتيين هو اول تحليل ذو دالله علي حاله نقص الحديد
و ان كان في عيب للتحليل ده ان الفرتيين يعتبر احد ال ( )positive acute-phase proteinsو بالتالي بيزيد فى الجسم فى حاالت االلتهاب فممكن
تبقي نتيجته مضلله الي حد ما
*** الثانيه مرحله ()Iron deficient erythropoiesis
==========================
فى المرحله دي و مع استمرار نقص امداد الجسم بالحديد و استمراريه تناقص المخزون (الفرتيين) يبدأ تصنيع كرات الدم الحمراء ()erythropoiesis
يتأثر بالنقص
و لكن الن غالبيه كرات الدم الحمراء اتكونت سابقا فى وجود وجود الحديد بشكل طبيعي فمش حيظهر نفص الهيموجلوبين عن الطبيعي فى المرحله دى
ايضا
لكن الكبد خالل المرحله دى بيزود تصنيع البروتين الناقل للحديد ال ( )transferrinكنوع من المساعده فى نقل كميات حديد اكبر لمواقع االستخدام
<<<<< معمليا احنا ممكن نقيس ال ( )transferrinبشكل مباشر لكن فى اختبار معملي اكثر شهره و اقدم كدالله غير مباشره علي مستوى ال
transferrin
و من المنطقي انه كلما كان تصنيع هذا البروتين كتير ..........حيبقي الحديد المطلوب لتشبعه كتير
و بالتالي معمليا يمكن بشكل مؤكد اتخاذ نتيجه ال ( )TIBCكدالله على كميه ال ()Transferrin
و بالتالي الن نسبه الحديد قليله و مستوى ال Transferrinعالي فالزم منطقيا حيطلع نسبه ال ( )Transferrin saturationقليله
و تتميز صوره الدم فى تلك المرحله باالتي:
**** انيميا تتميز فيها كرات الدم الحمراء بانها ( )microcytic, hypochromicو ده راجع لل ( )deficient erythropoiesisاللى حصل فى المرحله
الثانيه
**** زياده واضحه فى ال ) (RDWو ده معناه وجود marked anisocytosisالن كرات الدم الموجوده ذات احجام مختلفه فيها الطبيعي اللي اتكون
وقت ما كان الحديد كويس و فيها الصغير اللى اتكون خالل فتره نقص الحديد
===================================================
ال ( ) transferrin receptorدى موجوده علي سطح الخاليا اللي بتستخدم الحديد (زى الخاليا اللى بتتصنع منها كرات الدم الحمراء) او ال
()erythroid precursors
كلما كان هناك نقص فى مستوى الحديد فى الدم ..........كلما زادت تلك المستقبالت علي الخليه
جزء من هذه المستقبالت بيحصل له ( )proteolysisو يروح للدم و نسميه ( )soluble transferrin receptorو اللى كميته اكيد حتبقي متناسبه مع ال
( )cellular transferrin receptorاللى على الخاليا و بالتالي قياسه معمليا يدينا معلومه عن كميه ال ( )receptorعلى الخليه
يتميز قياس ال ) (sTfRبانه ال يتأثر بااللتهابات زي ال ( )ferritinو بالتالي ممكن يستخدم بشكل افضل كدالله علي حاله نقص الحديد (بتزيد ال sTfR
فى الحاله دى)
لكن ما زال الفرتيين هو االكثر شهره و اكثر استخداما
و فقط بيتم اللجوء لل ( )sTfRفى حاله نتيجه الفرتيين الغير مشخصه للحاله يعنى مثال لو نتيجه طبيعيه مع اعراض نقص حديد واضحه
د /خالد مجدي
-73عالقه تحليل الحديد و الفرتيين بمرضي الفشل الكلوي
السالم عليكم
ما هى عالقه تحليل الحديد و الفرتيين بمرضي الفشل الكلوي؟؟؟
فى البدايه كلنا عارفين ان مرضي الفشل الكلوى المزمن ( )chronic renal failureبيكون عندهم انيميا ممكن تلخيص اسبابها فى االتى:
اوال :نقص انتاج هرمون ال ( )EPOو اللى بيفرز من الكليه لتحفيز انتاج كرات الدم الحمراء فى ال ( )bone marrowو ينتج عن هذا النقص انيميا
()normocytic normochromic
ثانيا :حدوث ما يعرف بال ( )Uremic bleedingو تعرف على انها ال ( )prolonged bleedingمن جروح او االنف او القناه الهضميه او الجهاز
البولي ناتجه عن نقص كفاءه الصفائح الدمويه ()platelet dysfunction due to uremia
اخيرا :و مع الغسيل الكلوى بيحصل فقد لفيتامين B12و ال ( )Folic acidو بالتالي ده يعتبر كعامل اضافي الحداث انيميا خاصه فى المرضي قليلي
االستجابه للعالج باالرثروبيوتين ()hyporesponsiveness to erythropoietin treatment
-------------------------------------------------------
نتكلم دلوقتى على نقطه مهمه و هى ال ( )Pathogenesis of IDAيعنى مراحلها بتحصل ازاى
*** اول حاجه لما الحديد يبدء ينقص الجسم بيتجه للمخزون عشان يعوض النقص ...المخزون ده اللى هو الفرتيين ( )ferritinو فى المرحله دى بتتميز
بنقص الفرتيين رغم ان الهيموجلوبين ما زال طبيعى و كمان الحديد لم يظهر نقصه معمليا (و لذلك يستخدم تحليل ال ferritinكاول تحليل لتقييم انيميا
نقص الحديد)
*** بعد كده و مع استمرار نقص الحديد يبدء الكبد فى زياده تصنيع البروتين الناقل للحديد ( )transferrinلمحاوله نقل اكبر كميه ممكنه من الحديد
للخاليا اللى محتجاه
و احنا معمليا بنقيس ال ( )transferrinعن طريق تحليل ال ( )Total iron-binding capacityو اللى بيزيد فى المرحله دى (الحظ ان الهيموجلوبين
ما زال طبيعي حتى االن)
*** بعد كده و مع استمرار نقص الحديد يظهر اعراض االنيميا على المريض و يصبح الحديد قليل فى الدم و يقل الهيموجلوبين و تتميز الحاله بالنتائج
االتيه
Low hemoglobin, Low serum iron, Low serum ferritin and high TIBC
-------------------------------------------------------
طيب نتكلم عن التحاليل المعمليه الخاصه بتقييم حاله نقص الحديد فى مرضي الفشل الكلوى
حاليا فى تحليلين بيستخدموا لتقييم الحاله
االول و هو تحليل ال ( )serum ferritinو بيتعمل تقريبا كل 3شهور للمرضي و هدفه تقييم هل حاله نقص الحديد مستمره فيحتاج المريض الدويه حديد
( )iron supplementationام ال
اذا النتيجه كانت اقل من ( )100 g/lده بيعنى وجود انيميا نقص حديد
لكن مشكله التحليل ده ان ال ( )ferritinيعتبر ( )acute phase proteinيعنى بيزيد فى حاالت االلتهابات (و هى شائعه فى مرضي الفشل الكلوى)
و بالتالي التحليل الثانى ( )transferrin saturation%بيكون له دور هنا
الن لو قيمته كانت اقل من ( )20%حتى لو الفرتيين اعلى من ( )100فيعتبر المريض عنده نقص حديد ( )functional iron deficiencyو يحتاج الى ال
()iron supplementation
و ده بيتحسب بالمعادله دى ...............................
Transferrin saturation (%) = (Serum iron /TIBC) x100
------------------------------------------
)Soluble transferrin receptor (sTfR
------------------------------------------
التحليل ده حديثا اصبح يستخدم كبديل لتقييم حاله نقص الحديد فى مرضي الفشل الكلوي
و يتميز انه ال يعانى من تداخل االلتهابات مع نتيجته كما هو الحال مع الفرتيين
**** عدد ال ( )transferrin receptorعلى سطح خاليا ال ( )erythroblastsيتناسب طرديا مع احتياج الخليه للحديد (فكلما كان الحديد قليل كانت
الخاليا فى احتياج له و بالتالي يزيد عدد ال TfRعلى سطحها)
**** ال ( )sTfRده جزء من هذا ال ( )receptorموجود فى السيرم و يمكن قياسه و طبعا يعد مؤشر لعدد ال ( )TfRعلى الخليه
فى حاله بنالقي فيها سرعه الترسيب اعلى من 100و مع ذلك ال CRPطبيعى و دى
زى حاله سرطان النخاع multiple myelomaالن هنا زياده ال paraproteins
هى المسببه لزياده سرعه الترسيب و ايضا تتسبب فى ظهور ال rouleaux
formationعلى فيلم الدم فى الحاالت دى
decreased normal الحاله مفيهاش التهابات و نقص سرعه الترسيب بنالقيه فى حاالت زى زياده كرات
الدم الحمراء ال polycythemiaو حاالت انيميا الخاليا المنجليه وال
Spherocytosisلتغير شكل كره الدم الحمراء (و ان كان تلك الحاالت ال تشخص
ابدا بمجرد نقص سرعه الترسيب)
حاله غير منطقيه اوال وجود التهاب كما يدل عليه ارتفاع ال CRPو بالتالي ستكون decreased increased
سرعه الترسيب فى الطبيعى لو فى بدايه االلتهاب ثم ترتفع بعد ذلك ....و حتى لو
تصادف وجود شخص بحاله من الحاالت اللى بتقلل سرعه الترسيب فوجود التهاب فى
الجسم سيؤدى بالتاكيد لتاثير يرفع سرعه الترسيب و حتى الى اعلى النورمال و هللا
اعلم
-75موضوع سرعه الترسيب (الساعه الثانيه)
السالم عليكم
تعليق بسيط بس على موضوع سرعه الترسيب الساعه الثانيه
االول الزم نفهم الهدف او معنى تحليل سرعه الترسيب ()erythrocyte sedimentation rate
التحليل ده ببساطه هو قياس للسرعه اللى حتتجمع فيها كرات الدم الحمراء مع بعضها فتترسب فى قاع انبوبه ال ESR
من الطبيعي ان كرات الدم الحمراء تحمل على سطحها شحنات سالبه (تسمى )Zeta potentialو دى تخلي كرات الدم تتنافر و تظل بعيده
عن بعضها البعض
لكن اذا وجد فى الدم مجموعه البروتينات المسماه ( )Positive acute-phase proteinsو خصوصا ال ( )fibrinogenو اللى بتزيد فى
الجسم نتيجه االلتهابات و بترتبط بسطح كرات الدم الحمراء و بالتالي تقلل ال ( )Zeta potentialفتخلي كرات الدم تقرب من بعضها اكثر
و تكون ما يعرف بال ( )Rouleauxو ده يساعد على سرعه ترسيب كرات الدم فى قاع االنبوبه
و من هنا جائت فكره ان زياده سرعه الترسيب تعنى بشكل غير مباشر زياده تلك البروتينات و بالتالي وجود حاله التهاب لكن طبعا بشكل
عام بدون تحديد لموضع او سبب
ارجو لو اى زميل عنده مرجع علمى فى كالم عن اهميه الساعه الثانيه او الدالله المرضيه لها ينزلنا المرجع للمناقشه
د/خالد مجدي
الحظ انه عامل النورمال الول ساعه فقط و ال يوجد ذكر لما يسمى الساعه الثانيه
من نفس المرجع طريقه الشغل باستخدام ال ( )Westergren methodو بيقول لك اقرأ
بعد ساعه بالظبط فقط و ال وجود لما يدعى الساعه الثانيه
Essentials of Clinical Pathology 2010
HENRY’S Clinical Diagnosis and
Management by Laboratory
Methods 2011
-76امكانيه استخدام عينه مسحوبه على ( )EDTAلشغل سرعه الترسيب
السالم عليكم
فى سؤال عن امكانيه استخدام عينه مسحوبه على ( )EDTAلشغل سرعه الترسيب
========
الجابه السؤال حنرجع لمرجع
((HENRY’S Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods
) بنسبه )3.8% sodium citrateمعتمد على عينه دم مسحوبه على ( )Westergrenالتقليدي بطريقه (ESRالمرجع بيقول ان شغل ال (
تخفيف 1:4
زي مثال 2مل دم 0.5 +مل سترات
او 1.6دم 0.4 +مل سترات
او 0.8دم 0.2 +سترات
ثم يتم وضع الدم فى انبوبه ( )Westergren tubeاللى طولها ( )30 cmو قطرها ( )2.55 mmو مدرجه من 0الى 200
ثم قراءه النتيجه بعد ساعه واحده
السؤال؟؟؟ ما سبب التخفيف 1:4فى شغل سرعه الترسيب ......و االجابه من المرجع بتقول
The ICSH states that the patient’s Hct should not exceed 35% because reproducibility of sedimentation may
be poorer in narrow tubes.
التخفيف هدفه ان دائما اكون ضامن ان ال ( )HCTالي مريض رقم اقل من %35الن لو اعلي من كده الترسيب حيدي نتائج متفاوته ال
يمكن المقارنه بينها بشكل عملي
(لذلك لو تاخد بالك االنيميا واحده من اهم المشاكل اللى بتواجه التحليل ده و تخلي النتائج غير متوافقه مع وجود او عدم وجود التهابات و
رغم ان في بعض المعادالت لتصحيح االنيميا لكنها ليست بالدقه الكافيه)
و فى النهايه تذكر انك جايب جهاز يشتغل كمساعد ليك .........مش جهاز يطلع نتيجه انت مش عارف هي صح و ال غلط!!!
د /خالد مجدي
ثالثا :ميكروبيولوجي
==========
)^^^ The whole sample must be collected (majority of sperms is in the first portion of ejaculate 70% of sperms
*** ال يفضل ان العينه تيجى فى المنزل ثم تنقل الى المعمل و لكن ان كان ضرورى و متعذر احضارها فى المعمل يبقي البد من تنبيه المريض
لضروره احضار العينه فى خالل نصف ساعه بالكتير و التنبيه عليه باحضار العينه بدون استخدام الجماع (interrupts is not a reliable Coitus
)means of semen collection
مع ضروره كتابه التعليق االتى الى عينه اخذت من خارج المعمل
This sample is provided to the laboratory with uncertainty of sample identity and time interval
after voiding
*** دائما حضن شريحه زجاجيه عاديه مع عينه السائل المنوى قبل الشغل الجراء الفحص عليها (حتى ال تنقل حيوانات منويه من درجه 37الى درجه
قليله بشكل مفاجئ)
*** في طريقه جيده لقياس حجم العينه و ذلك بوزن كوب فارغ (مشابه لكوب العينه) و وزن كوب العينه و طرحهما و الفرق بالجرام يساوى الحجم
بالملى ) (assuming the density of semen to be 1 g/mlو طبعا فائده الحجم انك تحسب منه ال total count/ejaculate
*** فى حاله لو كان الحجم اقل من الطبيعى (اقل من 1مل) مع التاكد التام من صحه تجميع العينه و ان مفيش اى جزء منها وقع ( incomplete
)collectionاكتب الكومنت االتى فى التقرير
*** تقريبا فى كل المعامل محدش بيعمل للسيمن ال pHو بيكتبها alkalineلكن الزم تعملها فى حاله ان العدد قليل جدا او الحجم قليل جدا الن ربما
يبقي فى ( )obstructionو فى حاله لو طلعت acidicاكتب الكومنت ده
*** ال motilityهى حركه الحيوانات المنويه و البد ان تفحص فى خالل ساعه بالكثير من اخذ العينه و تقدر كنسبه مئويه (المتحرك ككل) و فى
التقارير الحديثه بناء على مانيوال منظمه الصحه تقسم الحركه الى progressiveو ال Non-progressiveو ال داعى لفحص الحركه بعد ساعه و
اتنين و ثالثه (يكتفى بالحركه فى اوالفحص فقط )min after emission 20و اذا كانت الحركه اقل من %40اكتب الكومنت االتى
*** الحظ فى التقارير اللى بتكتب وصف للحركه انك لو لقيت الكل غير متحرك فال تكتب ( )deadلكن اكتب ( )immotileالن ممكن يكون فى تشوه
يخلى الحركه ضعيفه جدا لكن الحيوان المنوى حى
*** فى حاله وجود تجمعات من الحيونات المنويه (التصاق حيوان او اكثر باالخر ( )Agglutinationراس براس او راس بذيل او ذيل بذيل) و الحظ
اال يكون ما تراه هو مجرد تجمع ( )non-specific adherence of immobile spermatozoaعلى mucusو ليس التصاق فعلي ...فى هذا
الحاله اكتب الكونت ده
Some sperm agglutination is detected in the sample. Anti-Spermatozoa antibody test is
recommended
*** طبعا ال يمكن فحص ال morphologyباستخدام العدسه ال ( )40مفيش اى مرجع بيقول الكالم ده و اى مورفولوجى بيتم بالطريقه دى فهو غير
صحيح و لو حتشتغل مورفولوجى صح الزم تفرد فيلم و تستخدم ال ( )rapid stainو تفحص بالعدسه ()100
*** مبدئيا احنا نقدر بشكل تقريبي نقدر العدد الكلي للحيوانات المنويه فى الملى من خالل فحصنا للشريحه العاديه على العدسه 40حيث ان ربع عدد
الحيونات على ( ) fieldمن الشريحه يساوى تقريبا العدد الكلي بالمليون فى الملى (طبعا انت بتاخد كذا فيلد و تاخد متوسط فى االخر)
For example If there are 100 spermatozoa per high-power field (HPF) in the initial wet preparation, there are
.theoretically 25 000 000 per ml
*** برضه بناء على كالم منظمه الصحه العالميه لو العدد فى ال ( )fieldعلى الشريحه العاديه اقل من 4حيوانات منويه يبقي وقتها ال داعى الستخدام
شريحه العد و يمكن كتابه العدد مباشره هكذ ( )less than two millionو فى بعض الحيان بنكتب ( )less than one millionو هى نفس الدالله
لحاله ال ()cryptozoospermia
*** طيب لو مفيش و ال حيوان منوى على الشريحه ......هنا الزم تاخد السائل المنوى فى انبوبه و تعمل centrifugationو تعيد فحص الراسب جيد
جدااااااااااااا و لو لقيت و لو حيوان واحد (بس مكتمل راس و ذيل) يبقي تكتب زى الحاله السابقه اما لو مفيش برضه خالص يبقي تكتب فى العد
( )azospermiaمع الكومنت ده
No sperms could be detected in the whole sediment material after Centrifugation of this sample.
Examination of 3 successive Semen Samples are recommended
*** طيب لو فى عدد عادى كلنا عارفين ان نسبه التخفيف المتعارف عليها فى المعامل لتحليل السائل المنوى هى ( 1:20و طبعا ممكن تتغير حسب
االحوال مع مراعه تغير الفاكتور اللى حتضرب فيه) ........المهم كتاب المنظمه بيقول الن السيمن سائل لزج فان اقل كميه تاخدها عشان تخفف هى 50
ميكرو الى 950محلول تخفيف
اذن 10ميكرو سيمن و 190محلول او 20سيمن و 380محلول رياضيا صحيحه لكن معمليا نسبه الخطأ فيها عاليه و بالش تستخدمها
*** محلول العد اللى بنخفف بيه طبقا للمنظمه مكون من
50 g of sodium bicarbonate + 10 ml of 35% (v/v) formalin in 1000 ml of purified water then add 5 ml gentian violet to
highlight the sperm heads
و لكن واقعيا كل المعامل بتستخدم اما محلول الملح بمفرده او ال distilled waterمع تفضيل الماء المقطر حيث انه يقلل كثيرا حركه الحيوانات
المنويه فيسهل عمليه العد
*** انت تقدر تعد السيمن على مربعات العد االبيض (مجموع االربع مربعات و تضرب ف )50000او فى مربعات العد االحمر (مجموع اى خمس
مربعات و تضرب فى مليون)
االتنين صح علميا لكن يفضل استخدام مربعات العد االحمر الن عدد الحيوانات فى المربع الواحد حتبقي قليله ممكن عدها بدقه اكبر
*** اخيرا لو العينه بتاعتك ( )highly viscousده بيصعب العد و بيخلى اى كميه حتاخدها عشان تخفف بيها مش مظبوطه و بالتالي العد مش حيكون
بالدقه الكافيه عشان كده فى الحاله دى و بعد ما تعد بقدر االمكان الزم تضيف الكومنت ده
Sperm count isn’t susceptible to accurate measurement due to incomplete liquefaction of semen
sample
دى كانت بعض المالحظات على التحليل
ارجو انها تكون مفيده
د/خالد مجدى
-79طريقه عد السائل المنوى و التخفيفات
السالم عليكم
البوست النهارده عن طريقه عد السائل المنوى و التخفيفات (و الكالم طبقا لمانيوال منظمه الصحه العالميه الخاص بفحص السائل المنوي الصادر فى
)2010
==========
تقرير السائل المنوى فيه حاجتين يخصوا عدد الحيونات المنويه
االول :هو ( )sperm concentrationو ده معناه عدد الحيونات المنويه فى المل الواحد و دى النورمال بتاعه المفروض يبقي اعلى من 15مليون
الثانى هو ( )sperm countو ده معناه عدد الحيوانات المنويه فى العينه ككل و دى عباره عن حاصل ضرب عدد الحيونات المنويه فى المل فى حجم
السائل كله و النورمال بتاعه المفروض يبقي اعلى من 39مليون
***** طيب اذا لم اجد اى حيوان منوى ظاهر على الشريحه بعد الفحص جيدا بالعدسه 40
التصرف المعملى هنا ان اعمل للسائل المنوى ( )centrifugationو افحص الراسب جيدا
<<< فاما انى ال اجد اى حيوان منوى فى الراسب بعد التدوير و هنا الحاله تسمى ( )azospermiaو يكتب هذا الكومنت
No sperms could be detected in the whole sediment material after Centrifugation of this sample. Examination of 3
successive Semen Samples are recommended
<<< و اما انى اجد عدد قليل جدا من الحيوانات المنويه (حاله )cryptozoospermiaو تكتب كما سبق
=======
مع مراعاه ان اقل كميه سائل منوى تشتغل بيها هى 50ميكرو (النه سائل لزج) يعنى اشتغل 50ميكرو على 950مثال
** طيب فى مرجع منظمه الصحه بتقول انك ممكن تختار التخفيف بناء على عدد الحيوانات المنويه فى الشريحه االولى بالعدسه 40كاالتى:
لو عدد الحيوانات المنويه فى ال ( )fieldبالتقريب اكثر من 15و اقل من 100يبقي خفف 1:5
================
ممكن تستخدم االربع مربعات عد ابيض او ممكن تستخدم اى خمس مربعات من مربع العد االحمر (فى منتصف الشريحه)
ملحوظه م همه (حجم المربع االبيض ....الطول فى العرض فى االرتفاع )1 mm x 1 mm x 0.1 mm = 0.1 ....
ملحوظه مهمه (حجم مربع احمر واحد من ال 25مربع ....الطول فى العرض فى االرتفاع )0.2 mm x 0.2 mm x 0.1 mm = 0.004 ....
=================================
العدد = (عدد الحيوانات اللى عدتها xمعامل التخفيف) ( /عدد المربعات المستخدمه فى العد xحجم المربع الواحد)
مثال لو خففنا 1:20و عدينا فى االربع مربعات بتاعه العد االبيض اللى حجم الواحد منهم 0.1
مثال اخر .......لو خففنا 1:20و عدينا فى خمس مربعات من العد االحمر اللى حجم الواحد منهم 0.004
======================
متوسطهم = 82.5
القاعده بتقول ان الفرق ده لو عدى %20يبقي فى حاجه غلط و يفضل اعاده الشغل لضمان دقه النتائج
==================
كل اللى اتكلمنا عليه ده شغل قديم و استبدلته منظمه الصحه العالميه بطريقه جديده اسمها (طريقع العد بالصفوف) و لذلك حديث اخر ان شاء هللا
د/خالد مجدي
السالم عليكم
نستكمل بسرعه البوست الخاص بعد الحيوانات المنويه مع شرح مبسط لطريقه العد بالصفوف (رغم عدم انتشارها فى مصر)
اوال عشان نفهم الطريقه الزم نراجع بسرعه شريحه العد الهيموسيتوميتر زى ما هى فى الصوره المرفقه كده
الشريحه دى زى ما هو واضح فى الرسم انها مقسمه الى 9مربعات كل واحد فيهم مساحته 1مم * 1مم
و بالتالي فكل مربع (او بمعنى اصح كل مكعب او نقول حفره) بتقدر تاخد حجم من السائل يقدر ب 100نانولتر ()100 nl
المربع رقم ( )5اللى هو مربع العد االحمر ....حتالقي فيها 5صفوف ....كل صف فيه 5مربعات ....و كل مربع ياخذ حجم 4نانولتر من السوائل
(يعنى الصف الواحد حجم السائل فيه 20نانولتر)
المربعات رقم ( 4و )6و دى غير مستخدمه فى العد التقليدي ....حتالقي فيها 5صفوف ....كل صف فيه 4مربعات ....و كل مربع ياخذ حجم 5
نانولتر من السوائل (يعنى الصف الواحد حجم السائل فيه 20نانولتر)
المربعات رقم ( 2و )8و دى غير مستخدمه فى العد التقليدي ....حتالقي فيها 4صفوف ....كل صف فيه 5مربعات ....و كل مربع ياخذ حجم 5
نانولتر من السوائل (يعنى الصف الواحد حجم السائل فيه 25نانولتر)
===================================
نيجى لطريقه العد
حضر تخفيف عينه السائل المنوى باى تخفيف مناسب زى الطريقه التقليديه
اعمل ( )Loadingلشريحه العد
مثال اذهب للمربع رقم ( )5اللى هو مربع العد االحمر و عد الحيوانات المنويه اللى فى اول صف (الصف المكون من خمس مربعات)
طيب انا على ما وصلت لل 200عديت اربع صفوف ......خالص انتهى و احسب
طيب انا ال 200كملوا معايا فى 4صفوف و مربعين من الصف الخامس ؟؟؟؟ (مفيش كده كمل الصف الخامس لحد ما يخلص حتى لو العد زاد عن
)200
**** مفيش مشاكل كمل بعد الحيوانات فى اول صف من المربع (( )4الحظ ان حجم السوائل فى صفوف هذا المربع متماثله مع حجم السوائل فى
صفوف المربع )5
**** مفيش مشكله كمل عددك من صفوف المربع ( )6لحد ما توصل لل 200
***** معلش طيب لو معرفتش برضه اكمل ال 200حتى بعد ما خلصت صفوف المربع 6
ال كده حضرتك معناه ان العد قليل كثيرا و نسبه التخفيف اللى انت عملتها مش مناسبه و خفف تانى بنسبه اقل مناسبه للعدد و عيد العد
ال مينفعش الن حجم السوائل فى صفوف المربعات دى مش زى الحجم فى صفوف مربعات 5و 4و 6و بالتالي مينفعش تكمل عد منهم
==========================================
اخيرا احسب ازاى عدد الحيوانات المنويه ؟؟؟؟؟
استخدم القانون االتى
عدد الحيوانات المنويه (بالمليون فى المل سيمن) =
عدد الحيوانات المنويه اللى انت عدتها مقسوم على حجم الصفوف المعدوده مضروبا فى معامل التخفيف
مثال معاك عينه مخففه 1:20عديت منها 210حيوان منوى فى 7صفوف (خمس صفوف من مربع 5و صفين من مربع )4
يبقي عدد الحيوانات المنويه (بالمليون فى المل سيمن) = ( 30 = 20 * )140/210مليون حيوان منوي
فيروس Aمن الفيروسات اللى بتتنقل عن طريق االكل او الشراب الملوث بالفيروس ( )fecal-oral routeو عن طريق الوريد البابي يذهب الفيروس
الى الكبد و يبدء التكاثر داخل ال ( )hepatocytesمحدثا لها ( )damageفيخرج منها الفيروسات الصابه خاليا كبديه اخرى و يفرز جزء منها مع
الصفراء ثم لالمعاء مره اخرى ثم تنزل مع ال ( )stoolو تستمر دوره االصابه
ملحوظه :مريض فيروس Aمن الممكن ان يكون معدى لغيره قبل ظهور ايه اعراض عليه باسبوع كامل
تختلف شده االصابه و ظهور االعراض من مريض الخر و تشمل بعض هذه االعراض ..........الم فى الجانب االيمن نتيجه لل ( liver
)enlargementو القيئ و االسهال و ظهور الصفراء على المريض (بتظهر فى حوالى %70من المرضي)
ملحوظه :الصفراء فى مرضي االلتهاب الكبدى الفيروسي من نوع ال ( )Hepatic jaundiceاو (Mixed Hyper-conjugated and Hyper-
)unconjugated
هنا ال ( )hepatocyte damageبتقلل من كفاءه الكبد فى استقبال ال ( )indirect bilirubinفيعلى فى الدم و فى نفس الوقت انسداد القنوات المراريه
( )canaliculiنتيجه لاللتهاب و تكسير الخاليا يتسبب فى صعوبه نزول الصفراء ( )direct bilirubinالى المراره ثم الى االمعاء و بالتالي تجد
الصفراء طريقها الى الدم فترتفع نسبتها ()intra-hepatic cholestasis
التشخيص الطبي لفيروس Aيعتمد فى االساس على االعراض و شكوى المريض مع ال history
اما معمليا فاغلب االطباء يميلون لتأكيد تشخيصهم بتحليل انزيمات الكبد و تحليل البول
اما بالنسبه النزيمات الكبد فمن المعروف ان فيروس Aمن الفيروسات المسببه لل ( )Acute hepatitisو بالتالي ترتفع مستوى االنزيمات فى الكبد
بشكل كبير مميز لحاالت فيروس A
اما هدف تحليل البول هو الكشف عن وجود الصفراء اللى ظهورها فى البول يعنى بالضروره ارتفاع نسبه ال ( )direct bilirubinفى الدم
و بكده مع االعراض على المريض يتم تاكيد التشخيص و ال حاجه الجراء فحوصات اخرى
ملحوظه :كنا اتكلمنا قبل كده عن دور البروثرومبين فى الحاالت ال ( )Acute hepatitisو قولنا ممكن يطلب فى حاله الشك ان الحاله very severe
اى ان ممكن يحصل ( )Acute liver failureو لو النتيجه prolongedاعلى من الطبيعى ب 6-5ثوانى فاحتماليه الفشل الكبدى الحاد قائمه بشده
....................
فى بعض االحيان يلجأ الطبيب لطلب تحاليل تكشف بشكل مباشر عن وجود الفيروس ()HAV serology
و هى التحاليل المعتمده على الكشف عن وجود االجسام المضاده التى يكونها الجسم ضد فيروس A
و بشكل عام هناك نوعان من االجسام المضاده يتم انتاجهم من ال ( )B cellكرد فعل ضد ال infection
االول هو من نوع ال )immunoglobulin M( IgMو هو جسم مضاد كبير الحجم يتم انتاجه فى بدايه االصابه (اول جسم مضاد يظهر فى الدم) و
يساهم فى التخلص السريع من مسبب االصابه ثم ينتهى دوره و يتوقف انتاجه
الثانى هو من نوع ال )immunoglobulin G( IgGو هو جسم مضاد صغير الحجم يبدء انتاجه بعد فتره من ظهور ال IgMو يستمر فى الدم
فترات طويله للحمايه
و بناء على ذلك يتم معمليا استخدام تحليل ال IgMللكشف عن االصابات الحديثه وال IgGللكشف عن االصابات القديمه
*** الثانيه هى ان يكون ال HAV IgMايجابي و ال HAV IgGسلبي <<<< و ده معناه ان الحاله early infectionبدليل ظهور ال IgMفقط فى
الحاله
*** الثالثه هى ان يكون ال HAV IgMايجابي و ال HAV IgGايجابي <<<< و ده معناه ان الحاله acute infectionبدليل وجود ال IgMالمميز
لالصابات الحديثه و بدايه ظهور ال IgG
*** الرابعه هى ان يكون ال HAV IgMسلبي و ال HAV IgGايجابي <<<< و ده معناه ان الحاله old infectionبدليل اختفاء ال IgMو استمراريه
وجود ال IgGالذى سيعطى مناعه للمريض ضد االصابه بالفيروس مره اخري
ملحوظه :فى كل االحوال يشفى المريض بعد مده فى حدود ثالث اسابيع الى شهر من االصابه و تعود انزيمات الكبد و الصفراء لطبيعتها و لم تسجل اى
حاله chronicلفيروس A
مبدئيا االصابه بفيروس ( )Aتؤدي الي التهاب كبدي حاد ( )acute hepatitisو اللي بيتميز:
** بارتفاع انزيمات الكبد ( )AST, ALTبشكل كبير (تصل فى بعض االحيان الي 50ضعف الطبيعي و ربما اكثر)
** ال ( )liver cell destructionالناتج عن االصابه بالفيروس يؤدي الي ضعف قدره الكبد على استقبال ال ( )indirect bilirubinفيرتفع فى الدم و
كذلك حدوث ( )blockage of bile canaliculiيؤدي الى ارتفاع ال ( )direct bilirubinابضا لذلك تسمي الصفراء فى هذه الحاالت (Mixed Hyper-
)conjugated and Hyper-unconjugated jaundice
** لكن مستوي االلبيومين فى الحاالت ال ( )acuteبيكون طبيعي الن فتره نصف العمر الخاصه به طويله (حوالى 21يوم) بمعنى ان قياسه فى الدم
غير معبر عن الحاله الحاليه للكبد لذلك مش حتالقي طبيب يطلبه في الحاالت دى
***** السؤال هنا ..........هل ممكن ال ( )destructionاللي بيسببه فيروس ( )Aيكون كثير لدرجه انه يوصل الكبد لما يسمى بال ( acute liver
)failure
نعم ممكن ده يحصل فعال كـــ ( )uncommon complicationلالصابه بالفيروس و بتحصل فى نسبه ( )0.1%-0.4%من االطفال
**** معمليا صعب جدا التفريق بين هل الحاله مجرد ( )acute hepatitisام ( )Acute liver failureمن خالل انزيمات الكبد او الصفراء
----------------------------------------------
مبدئيا حنتعرف على المعلومات المهمه االتيه:
*** تحليل زمن البروثرومبين بيقيس كفاءه ال ( )extrinsic and common pathwayفى تكوين الجلطه و اهم عوامل التجلط الداخله فى هذه السلسه
هم العامل ( 2البروثرومبين) و العامل 7و العامل 10و العامل ( 1الفيبرينوجين)
*** العوامل دى بيتم تصنيعها داخل الكبد (المصنع الرئيسي لعوامل التجلط)
*** العوامل 2و 7و 10بيتصنعوا فى شكل اولى ( )precursor formو الزم يتعمل عليهم تعديل ( )Post-translational modificationعشان
يقوموا بدورهم بشكل صحيح و ده ايضا يتم فى الكبد
*** معلومه كمان العامل رقم 7فتره نصف العمر له قصيره (حوالى 6ساعات) و بالتالي البد من استمراريه تصنيعه بشكل دائم من الكبد
----------------------------------------------
فى الحاالت ال ( ) acuteمن المتوقع ان الوظائف التصنيعيه تكون فى مستوى طبيعى الن فتره تأثر الكبد قليله مش زى الحاالت المزمنه
لكن ماذ لو ان التكسير كان ( )more severلدرجه فعال اثرت على الوظائف التصنيعيه و فعال المريض داخل على acute liver failureاو ما
يعرف ب ال ()fulminant hepatitis
هنا االنزيمات مرتفعه و الصفراء كمان مرتفعه (بس متقدرش من خاللهم تفرق بين حاله ال acuteو ال )fulminant
If the prothrombin time is prolonged by ≈ 4–6 seconds or more the diagnosis of ALF should be strongly suspected.
اذن كاجابه للسؤال المطروح ال ( )INRاو زمن البروثرومبين ممكن يبقي طبيعي و ممكن ( )prolongedفى مرضي فيروس ( )Aاعتمادا علي شده
االصابه
د /خالد مجدي
-83التشخيص المعملي لفيروس B
السالم عليكم
ان شاء هللا نكمل الفكره اللي بدأناها في فهم و معرفه الهدف من التحليل و ازاى يستخدم طبيا
و نتكلم النهارده عن كيفيه تشخيص فيروس بي ( )HBVمعمليا او ال ()HBV serology
و ده مش بينتج فى كل الحاالت انما فقط بيبقي موجود فى حاالت تضاعف الفيروس ( high viral *** ( )HBeAgاو ال envelope protein
)replication
و طالما فى ثالث انتيجينات فى الجسم يبقي اكيد جهاز المناعه حيكون ضدهم ثالث اجسام مضاده مختلفه:
ال ( <<<<< )HBsAgده اسرع حاجه حتظهر فى دم المريض بعد االصابه بحوالى 4اسابيع و طبعا قبل ما اى اعراض تظهر
ال ( <<<<< )HBcAb-IgMده تاني ماركر بيظهر في دم المريض (حوالى شهرين بعد االصابه) و بيستمر حوالى 6شهور ثم يختفى ليظهر ال
HBcAb-IgGو يستمر فى الدم فتره طويله و ان كان ال يعطى مناعه للمريض و ال يعني شفاءه من الفيروس
ال ( <<<<< )HBeAgده مش موجود فى كل المرضي ...بمعني في بعض المرضي حيظهر عندهم البروتين ده في الدم (و يعد دليل علي تضاعف
الفيروس) و حيبقي مصاحب له بالتاكيد ارتفاع كبير فى ال ( )level of viremiaفى تحليل ال HBV PCR
ال ( <<<<< )HBsAbظهور هذا الجسم المضاد معناه اختفاء البروتين HBsAgو بكده نجح جهاز المناعه في التغلب علي الفيروس و اصبح لدي
المريض مناعه ضد الفيروس
ال ( <<<<< )HBeAbظهور هذا الجسم المضاد ال يعنى حدوث ( )recoveryانما يعنى ان جهاز المناعه استطاع تحجيم الفيروس الي حد كبير
و بناء علي هذه القواعد و بفرض ان المريض اجرى ال 6تحاليل معا تصبح لدينا الحاالت االتيه:
الحاله االولي
<<<<<<<<<< HBsAgسلبي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGسلبي
هنا الشخص مش مريض فيروس Bانما بالطبع عرضه لالصابه فالفيروس فى اى وقت الن مفيش مناعه ( )Susceptible patientو بالتالي ينصح
اذا كان من المتعرضين لخطر العدوى انه ياخد التطعيم ضد الفيروس
=================================
الحاله الثانيه
<<<<<<<<<< HBsAgسلبي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbايجابي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGسلبي
=================================
الحاله الثالثه
<<<<<<<<<< HBsAgايجابي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGسلبي
و ده حاله مريض فى بدايه االصابه ( )very early infectionحيث ان اسرع ماركر ظهورا هو ال HBsAg
=================================
الحاله الرابعه
<<<<<<<<<< HBsAgايجابي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMايجابي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGسلبي
و دى حاله ( )Recent infectionو هى نفس الحاله الثالثه لكن بعد مده زمنيه اطول الن هنا الجسم استجاب للعدوى بخروج الجسم المضاد HBcAb-
IgM
=================================
الحاله الخامسه
<<<<<<<<<< HBsAgسلبي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMايجابي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGسلبي
هنا لو تاخد بالك ان الماركر الوحيد االيجابي هو ال HBcAb-IgMو ده مبدئيا معناه االصابه بالفيروس فعليا
لكن فين ال HBsAgازاى مش موجود ؟؟؟؟؟؟
االبحاث بتقول ان خالل الفتره دى من االصابه الجسم فعليا بدء مرحله التغلب و التخلص من الفيروس و ذلك يتصنيع ال HBsAbو الذى ارتبط بال
HBsAgمكونا immune complexتمهيدا للتخلص منه و بالتالي فمعمليا ال استطيع خالل تلك الفتره عمل detectionاليا منهما و يكون الماركر
الوحيد االيجابي هو ال HBcAb-IgM
و هذا ما دفع منظمه الصحه الهالميه انها تعمل recommendationبيقول انه لتشخيص فيروس Bيجب اجراء تحليل ( )HBsAgو تحليل
( )HBcAb-IgMمعا
=================================
الحاله السادسه
<<<<<<<<<< HBsAgسلبي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbايجابي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGايجابي
دى الحاله اللى بعد ال core windowو ده ال ( )Recoveryهنا خالص الجسم تغلب على الفيروس و تخلص منه و اصبح ال HBsAbايجابي و
الشخص عنده مناعه دائمه و كذلك اختفي ال HBcAb-IgMو حل محله ال ( IgGو ده اللى يفرق ال old infectionعن ال )vaccinated patient
=================================
الحاله السابعه
<<<<<<<<<< HBsAgايجابي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGايجابي
و ده مريض ( )Persistent chronic infectionهنا الجسم فشل فى التخلص من الفيروس و اصبحت االصابه مزمنه
=================================
الحاله الثامنه
<<<<<<<<<< HBsAgايجابي
<<<<<<<<<< HBeAgايجابي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGايجابي
و ده مريض ( )Active chronic infectionهنا الجسم فشل فى التخلص من الفيروس و اصبحت االصابه مزمنه و لو اتعمل ال HBV DNA By
) )PCRحيطلع ايجابي و ( )high viremiaالن ال HBeAgالماركر الخاص بتضاعف الفيروس ايجابي
=================================
الحاله التاسعه
<<<<<<<<<< HBsAgايجابي
<<<<<<<<<< HBeAgسلبي
<<<<<<<<<< HBsAbسلبي
<<<<<<<<<< HBeAbايجابي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgMسلبي
<<<<<<<<<< HBcAb-IgGايجابي
و ده مريض ( )Chronic HBV carrierو طبعا هنا هو مريض مزمن لكن تاثر الكبد يكاد يكون منعدم لوجود ال HBeAb
=================================
اخيرا من الطبيعي ان ظهور ال ( ) HBsAgاللى بيعني ان الشخص مصاب بالفيروس حيبقي مصاحب له طبعا نتيجه ايجابيه لتحليل ( HBV DNA By
)PCRالن الفيروس نفسه موجود
ثانيا :عندي حااالت سلبيه ال ( )HBsAgو لكن ايجابيه ال ( )HBV DNA By PCRو هنا فى احتماالن:
اما انك عملت التحليل للمريض اثناء مرحله ال ( )core windowاللى مش حيظهر فيها ال HBsAgمعمليا لكن الفيروس ما زال موجود لم يتخلص
منه الجسم بالكامل فتظهر نتيجه ال PCRايجابيه لكن حتكون ()low viremia
و موجوده فى دول اسيا (معرفش موجوده فى مصر و ال ايه) و بيبقي فى طفرات فى و اما ان الحاله
بروتين ال surfaceتمنع ظهوره مع التحليل التقليدى و لكن ال ( )PCRبيطلع ايجابي عادى
اوال طرق انتقال الفيروس Cمشابهه تماما لطرق انتقال فيروس Bو لكن رغم انها نفس طرق النقل اال اننا نالحظ ان فرصه انتقال فيروس Bاعلى
كثيرا من فرصه انتقال فيروس ........... Cهنا االمر يعتمد على ما يعرف بال level of viremiaاو عدد الفيروسات فى الدم
ال ( )level of viremiaلفيروس Bكبيره جدا عن فيروس Cلذلك فرصه انتقاله اعلى كثيرا
فمثال احتماليه انتقال فيروس Bمن شكه سرنجه من مريض مصاب تصل الى ( )up to 30%طبقا لمنظمه الصحه العالميه بينما ال تتجاوز فرصه انتقال
فيروس )0.8–3%( C
*** ايضا ينبغى ان نعلم ان التعامالت العاديه ال تنقل ايا منهما مثل االكل و الشرب مع المريض او مصافحته او حتى التعرض لرزاز من سعال المريض
و ايضا لم يثبت علميا االنتقال من خالل الرضاعه
*** %80من مرضى فيروس Cال تظهر عليهم ايه اعراض بينما النسبه الباقيه تعانى من اعراض بسيطه ( )that are flu-likeزى االرهاق و فقدان
الشهيه و الصداع فقط فى بدايه العدوي
من المالحظات الهامه فى فيروس Cانه يمتلك القدره على التضاعف ليس فى خاليا الكبد فقط و انما ايضا فى كرات الدم البيضاء من نوع
( )peripheral blood mononuclear cellsو لذلك من الشائع ان يعانى المريض المزمن من بعض المشاكل المناعيه خاصه ال ( skin
)abnormalitiesلذلك نجد ان اطباء الجلديه فى كثير من االحيان يطلبوا فيروس Cلمرضاهم
*** علميا حوالى %20من مرضي ال Cبيحصل لهم ( )auto-recoveryو يتخلص الجسم من الفيروس (لكن ال يكتسب مناعه ضده و ال يحميه من
اى عدوى مستقبليه) اما ال %80المتبقيين بتتحول لحاله chronicو حوالى %20منهم بيحصل لهم ()cirrhosis and liver failure
============
التشخيص الطبي لفيروس ال Cال يتم اال بعد اجراء التحاليل المعمليه الالزمه
ملحوظه :من المالحظات الهامه فى فيروس Cهو ال ( )fluctuating patternالنزيمات الكبد اي انها تكون مرتفعه فتره و طبيعيه او مرتفعه ارتفاع
بسيط فتره اخرى و يستمر هذا ال patternمع المريض المزمن حتى المراحل االخيره (اذا كان بدون عالج)
االختبار المعملي االولى لفيروس ال Cيعتمد فى االساس على الكشف عن وجود اجسام مضاده ضد الفيروس فى الجسم
و نصيحه متشتغلش بيها و ان كان ضرورى الزم تعيد اليزا مباشره فى وجود اى شك فى النتيجه
ملحوظه :فى خطأ منتشر و هو ان المصاب بالبلهارسيا قديما يعطى ايجابي خاطئ مع تحليل فيروس Cو ده كالم غير علمى لم اجده فى اى كيتس او
مرجع
ملحوظه :قديما كان في تقنيه جيده مستخدمه للكشف عن االجسام المضاده تسمى ال () )Recombinant ImmunoBlot Assay (RIBAكانت تستخدم
كاختبار تأكيدى للحاالت االيجابيه فى االختبار االولى من الكروت او االليزا و لكن حاليا انتشار ال PCRجعل استخدام هذه التقنيه قليل جداااا
سؤال :يتردد من المبتدئين فى المجال ليه لما بنشخص فيروس ال Cبنكشف عن وجود اجسام مضاده فى حين لما نشخص فيروس ال Bبنكشف عن
االنتيجين ()HBsAg
االجابه اوال عدد فيروسات ال Cفى الدم قليله جدا (بالمقارنه بال Bزى ما وضحنا) و بالتالي صعب اعمل لها detectionبسهوله
و لكن حديثا فى تقنيه اسمها ( )two-step chemiluminescent microparticle immunoassayتستطيع من خاللها الكشف عن الفيروس C
نفسه كانتيجين و ليس اجسامه المضاده و هى موجوده فى مصر فى معمل المختبر و لكنها طبعا تقنيه غاليه و عمليا ال فائده كبيره منها
طيب تعالي دلوقتى نشوف االحتماالت اللى عندى فى نتيجه اختبار ال C
==============================================
يعنى متقدرش تحدد ان كانت ايجابي و ال سلبي (ممكن يكون مستوى االجسام المضاده اقل من انه يدى قراءه واضحه)
و هنا الصح ان التحليل يتعاد تانى بعد شهر الستيضاح النتيجه (او اعمل )PCR
*** الثالث :ان تكون االجسام المضاده فعال موجوده و لكن الجسم تخلص من الفيروس من مده ()auto-recovery
عشان كده فى الحاالت االيجابيه لالجسام المضاده الزم تكتب الكومنت ده
تحليل ال PCRبيقيس ال viral loadاو عدد الفيروسات فى كل مل دم و ده مهم جدا اوال لتأكيد او نفي االصابه فعليا و ثانيا لتحديد ال ( patient's
)baseline viral loadقبل بدء العالج
ما معنى ان تكون ال PCRسلبيه و االجسام المضاده ايجابيه ..............,معناه ان الشخص ربما حامل لالجسام المضاده و لكن ال وجود للفيروس فى
الدم و بالتالي ال يحتاج للعالج (او ان التحليل االليزا ايجابي خاطئ)
طيب تعالي نشوف متابعه العالج فى المريض اللى طلع ايجابي اجسام مضاده و ايجابي PCR
================
مش حنتكلم عن االنترفيرون النه خالص اصبح غير مستخدم و لكن حنتكلم عن متابعه االدويه الجديده ( )Direct-acting antiviralsزى السوفالدى و
الهارفونى و دكالنزا و غيرها و االى بتشتغل ك ( )inhibitorsللبروتينات الداخله فى تركيب الفيروس زى ال ( NS5A, NS5B, polymerase,
)NS3/4Aمما يؤدى الى توقف تضاعف الفيروس
هنا المريض عمل تحليل ال PCRقبل بدايه العالج و بعد انتهاء كورس العالج بيعمل مره اخرى PCRفاذا كانت النتيجه سلبيه فان ذلك يعنى تغلب
الجسم على الفيروس
ملحوظه هامه :من االخطاء ايضا االعتقاد بان النتيجه السلبيه تعنى تخلص الجسم تماما من الفيروس و ال وجود له االن فى الجسم و ده خطأ فاللى
بيحصل ان االدويه بتوقف التضاعف فيقل مستوى الفيروسات فى الدم القل ما يمكن (اقل من ال detection limitلى كيت ) PCRو ده يعتبر شفاء
للمريض الن عدد الفيروسات اصبح اقل كثيرا من ان يتسبب فى مشكله للمريض (و لكن يظل المريض معدى و ممنوع من التبرع بالدم)
ملحوظه هامه :مع دواء السوفالدى لوحظ العديد من الحاالت اللى حصل لها انتكاس برجوع الفيروس مره اخرى
و فى ابحاث ارجعت الكالم ده لالتى
ان الفيروس فى فتره تلقي العالج بيختفى داخل كرات الدم البيضاء ( )mononuclear cellsزى ما قولنا سابقا انه عنده القدره على التكاثر داخلها و
بالتالي لما يتعمل تحليل ال PCRفى السيرم يطلع سلبي و بالتالي يتوقف العالج
و بالتالي اذا كانت النتيجه ايجابيه فى احدهم فان ذلك يعنى امكانيه تجدد االصابه و ينبغى استمرار العالج و المتابعه
د /خالد مجدى
-85التعارض فى النتائج بين تحاليل السيرولوجي لفيروس ( )Bو ( )Cو تحاليل ال PCR
السالم عليكم
سؤال عن التعارض فى النتائج بين تحاليل السيرولوجي لفيروس ( )Bو ( )Cو تحاليل ال PCR
===========================================================
بمعني هل ممكن تحليل االجسام المضاده لل ( )HCVتكون ايجابيه بينما ال PCRسلبيه او العكس؟؟؟
حنتكلم عن تفسير النتيجه بالشكل ده (بفرض دقه الشغل المعملي نفسه للتحليل سواء سيرولوجي او (PCR
ده علميا ممكن فى بدايه االصابه ( )Very early HCV infectionالنك ممكن تعمل ( )detectionلـــ ( )HCV ribonucleic acidبعد االصابه
باربع اسابيع تقريبا بينما يحتاج ظهور االجسام المضاده حوالي 8اسابيع تقريبا
== بس عمليا ده نادرا ما يتصادف انك تالقي حاله زي دي بين المرضي الن غالبا االصابه بفيروس سي بتبقي من مده و تكتشف بالصدفه
الن الحاله دى منتشره و معروفه فاصبح من المتعارف عليه ان اي نتيجه ايجابيه (سواء كانت بكارت او باالليزا) يكتب معها كومنت:
To confirm HCV diagnosis HCV-PCR is recommended
و معناه انك بتقول للطبيب ان رغم ان في اجسام مضاده اال ان االصابه بالفيروس غير مؤكده و يلزم تأكيدها بتقنيه ال PCR
== اما ان تحليل االجسام المضاده ( )false positiveنتيجه لل ( )cross-reactivityو ده موجود فى الكروت بشكل اكبر من االليزا
و في ابحاث كتير معموله في الجزئيه دي لمعرفه العوامل المسببه لل ( )cross-reactivityو يمكن السبب االشهر ليها هو ال ( patients with
)autoimmune hepatitis
== االحتمال الثاني انه كان مريض فعال بال ( )HCVثم حصل ) (spontaneous resolutionو ده بيحصل فى حوالي 20الي %30من
المرضي المصابين بالفيروس .......يعني يصاب و يخف بدون عالج و بالتالي تخلص من الفيروس نفسه فال PCRيطلع سلبي و لكن تظل االجسام
المضاده ايجابيه
== االحتمال الثالث انه مريض و تخلص من الفيروس بالعالج و بالتالي تصبح عدد الفيروسات ( )below detection limitاي ان ال PCRسلبي لكن
تظل االجسام المضاده موجوده فى الدم (مع مالحظه طبعا انها ال تعطي اي مناعه للمريض ضد اصابه جديده)
===============
===============
) ايجابيه بينما ال ( )HBV DNA by PCRسلبي ؟؟ *** هل ممكن تكون نتيجه ال (
فعال ده ممكن و بيحصل فى حاالت ال ( )Chronic HBV carrierو ده شخص مصاب فعال بالفيروس لكن ال ( )Viral replicationمتوقف او ضعيف
جدا جدا و بالتالي ال ( )HBV DNAبيكون ( ) undetectableغالبا و تأثير الفيروس على الكبد بيكون منعدم او ضعيف مع انزيمات كبد طبيعيه و فى اغلب
الحاالت بيكون ال ( )anti-HBeايجابي فى الحاله (الحظ انه رغم انه مفيش تاثير على المريض نفسه اال انه يظل معدي للغير)
) سلبي بينما ال ( )HBV DNA by PCRايجابي ؟؟ *** طيب هل العكس ممكن ..يعني ال (
ظهور ال ( ) surface antigenفى الدم بيكون مبكر جدا بعد االصابه بحوالي اسبوعين الى ثالثه و في نفس التوقيت تقريبا او بفرق بسيط بيظهر ال
( )HBV DNAو بالتالي اي مصاب بالفيروس منطقيا يكون عنده التحليلين ايجابي
لكن فى حاله اسمها ال ( )Occult hepatitis B virus infectionو دى حاالت مصابه بنوع من فيروس بي فيها ( mutations in the surface
)antigen geneو ده يمنع ظهوره فى التحليل و تطلع النتيجه سلبيه رغم االصابه
النوع ده انتشاره االساسي فى مناطق الصين و كوريا
لكن فى ابحاث بتقول انه موجود فى مصر بنسبه حوالى %4
) و ال () HBcAb IgMمعا بالمناسبه فى توصيات بحثيه لتشخيص فيروس بي خاصه فى مجال نقل الدم ...........ان يتم عمل تحليلين ال (
للمريض
===============
===============
اما الثاني
فهو نتيجه رقميه لل ( )HBsAgو بيتعمل للمرضي المصابين فعال بالفيروس لو حيتعالجوا باالنترفيرون ( )peginterferon alfa-2a therapyو بيتقاس بيه ال
( )responseللعالج بعد 12اسبوع و 24اسبوع و ده بيساعد على سرعه البدء فى العالج بال ( )oral anti-viral medicationsللمريض الغير مستجيب
--------------------------------------------------------
ده التحليل التقليدي فى معظم المعامل االن (تحليل كروت فيروس سي) اللي بتستخدم للكشف عن االجسام المضاده للفيروس في دم المريض و بالطبع ده
اقل التحاليل دقه الرتفاع احتماليه ال ( )cross reactivityلكنه سريع فى نتائجه
----------------------------------
ده تطوير لكروت فيروس سي التقليديه تمت باضافه مجموعات اخرى من االنتيجينات للكارت لرفع كفائته و رفع فرصه ايجاد االجسام المضاده فى دم
المريض و هو بالفعل اكثر دقه من الكروت العاديه و لكن اغلي سعرا
)HCV ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay
----------------------------------------------------------------
ده نقدر نقول عليه االختبار الرسمي او االساسي للكشف عن وجود اجسام مضاده في دم المريض و بالطبع هو اكثر دقه من تقنيات ال
( )immunochromatographyو مشكلته انه بياخد وقت في شغله و محتاج خبره شغل اعلي
---------------------------
ده اختبار ممتاز جدا كان موجود فى مصر من مده طويله و بنسميه ال ( )solid-phase ELISAو نتائجه بنفس دقه اختبار االليزا التقليدي الكتشاف
االجسام المضاده للفيروس و يتميز بسهوله الشغل تماما و يقرأ بالعين فقط دون الحاجه الجهزه لكن حاليا هو غير موجود
)HCV ELFA (enzyme-linked fluorescence assay
--------------------------------------------------------
و دى التقنيه المستخدمه في االجهزه ال ( )fully automatedزى ال ( )VIDASو هو يماثل تماما و بنفس الخطوات تقنيه االليزا الكتشاف االجسام
المضاده للفيروس و لكنه اكثر دقه كثيرا العتماده على الفلورسنس فى ال ()detection
)HCV recombinant immunoblot assay (RIBA
--------------------------------------------------------
ده التحليل االساسي اللي كان مستخدم قديما ك ( )confirmatory testللحاالت االليزا االيجابيه و فكرته ايضا الكشف عن االجسام المضاده للفيروس
لكن بشكل اكثر دقه من االليزا و لكن حاليا لم يعد مستخدم و استبدل بتحاليل احدث
)HCV-PCR (qualitative or quantitative
--------------------------------------------------
طبعا ده التحليل االساسي المستخدم حاليا ك ( )confirmatory testالى نتيجه اجسام مضاده ايجابيه و ده تحليل بيستخدم لعمل ( )detectionللماده
الوراثيه للفيروس نفسه ( )HCV RNAو حاليا اللي بيتعمل هو الشكل ال ( )quantitativeبتقنيه ال ()Real-time PCR
Interleukin-28 B gene
-----------------------------
ده جين موجود علي الكروموسوم 19في االنسان و كان بيتعمل له ( )sequencingايام العالج باالنترفيرون الن شكل التتابعات الناتجه كانت بتحدد
بشكل كبير مدي استجابه الشخص ده للعالج باالنترفيرون و طبعا حاليا خالص مفيش الكالم ده النتهاء العالج باالنترفيرون
Automated Hepatitis C Virus core antigen assay
--------------------------------------------------------------
ده اول تحليل حديث للكشف عن االنتيجين لفيروس السي (و ليس االجسام المضاده) و بالطبع التحليل دقيق جدا و بيعمل ( )detectionلالصابه قبل
ظهور االجسام المضاده و نتائجه الي حد كبير مماثله لنتائج ال PCR
و التقنيه المستخدمه حديثه و تعرف ب ()fully automated two-step chemiluminescent microparticle immunoassay
----------------------
ظهر التحليل ده مع ظهور حاالت انتكاسات بعد عالج السوفالدي حيث كانت نتائج ال PCRالتقليدي في السيرم سلبيه بعد انتهاء العالج ثم تعود ايجابيه
مره اخري بعد فتره و من هنا كانت فكره ال ( )triple -PCRاو بمعنى اوضح البحث عن جينوم الفيروس في السيرم و في داخل كرات الدم البيضاء
احاديه النواه لضمان اختفاء الفيروس تماما من المريض
)Resistance Associated Variants assay (RAVs
-----------------------------------------------------------
اال اذا كان هناك طفره ما في احد تلك البروتينات و بالتالي ال يعمل الدواء بالشكل المتوقع
و هنا كانت فكره تحليل ال ( )RAVsاللي من خالله بيتعمل ( )detectionالي طفرات في بروتينات الفيروس اللي بتشتغل عليها االدويه و من خالل
النتائج نقدر نرجح دواء عن اخر في هذه الحاله
د /خالد مجدى
-87التشخيص المعملي لبكتيريا ال ( )Helicobacter pylori
السالم عليكم
كل عام و حضراتكم بخير
نتكلم النهارده عن التشخيص المعملي لبكتيريا ال ( )Helicobacter pyloriكاحد اهم مسببات ال ()Duodenal and gastric ulcers
و نبدء بـــــــــ
Endoscopic gastric biopsy samples
=========================
ده يعتبر الطريقه االكثر دقه للتشخيص المباشر للحاله و المنظار دائما ينصح بيه فى الحاالت اللى فيها اعراض واضحه ( )alarm symptomsزي
()persistent vomiting, gastrointestinal bleeding, or iron-deficient anemia
المميزات :باالضافه لدقه الطريقه و ان بيتعرف بشكل مباشر وجود البكتيريا من االفالم المصبوغه ( )hematoxylin and eosinكمان بيتحدد
( )degree of inflammationو ممكن يتعمل من العينه مزرعه و ده مفيد لتحديد المضاد الحيوي المناسب خاصه فى حاالت ( antibiotic
)resistant strains of H. pylori
العيوب:
طبعا المشكله االساسيه انها ( )invasive methodsو الننا بنعمل ( )detectionلوجود البكتيريا نفسها فاحتماالت ال ( )false negativeقائمه فى
المرضي اللي بتاخد مضادات حيويه و ادويه حموضه زي ما حنشوف فى الفقره التاليه.
=================
)))(((The rapid urease test (RUT) is a gold standard method for the detection of H. pylori
فكره التحليل :ان بكتيريا ال ( )H. pyloriعندها انزيم ال ( )enzyme ureaseاللي بيشتغل على اليوريا و يحولها الى امونيا و ثاني اكسيد الكربون
المريض قبل التحليل بيمتنع عن االكل و الشرب لمده ساعه ......بعدها بياخد ( ...... )13C-labelled urea tabletالمفروض لو البكتيريا موجوده في
المعده ..االنزيم حيشتغل على اليوريا و ينتج امونيا و ()labelled carbon dioxide
لذلك ينصح للحصول علي نتيجه موثوق فى دقتها ان التحليل يتعمل و المريض ممتنع عن المضادات الحيويه لمده شهر و ممتنع عن ادويه الحموضه لمده
اسبوعين
=================
التحليل ده يعتبر تحليل ( )non invasiveلتشخيص بكتيريا ال ( )H. pyloriو الطرق االشهر فى المعامل اما االليزا و هى االكثر دقه و اما الكروت
( )lateral flow chromatographic immunoassayو هى االقل دقه
التحليل بيعمل detectionلل ()H. pylori antigens in stool samples
مميزات التحليل:
*** نتيجه التحليل (خاصه بطريقه االليزا) دقيقه ( )specificity and sensitivity of at least 95%و يمكن مقارنتها بنتائج المنظار
*** التحليل سهل و رخيص و بيفرق بين ال ( )active infectionو ال ()latent infection
*** تقدر تتابع بيه عالج الحاله (ايضا بعد شهر من العالج يتم اجراء التحليل للتأكد من سلبيه النتيجه او علي االقل تناقص التتر فى حاله االليزا)
عيوب التحليل:
ايضا تتأثر النتيجه كثيرا و تصل ال حدوث ( )false negativeنتيجه استخدام مضادات حيويه او ادويه حموضه قبل التحليل
بعض االبحاث تشير الي حدوث حاالت ال ( )false positiveنتيجه وجود ( )other Helicobacter speciesخاصه مع طريقه الكروت
====================
التحليل يستخدم لعمل ( )detectionلالجسام المضاده اللي انتجها الجسم ضد بكتيريا ال ( )H. pyloriفي السيرم
لكن اغلب الطرق المعمليه مخصصه لعمل detectionلل ( )H. pylori IgGسواء اليزا او كروت
مميزات التحليل :سرعه و رخص التحليل و كذلك من اهم مميزاته هو عدم تاثره باستخدام المضات الحيويه او ادويه الحموضه كما فى التحاليل السابقه
(لذلك هو التحليل المفضل فى حاله مثل ذلك)
عيوب التحليل :انه مش بيفرق بين ال ( )active infectionو ال ( )latent infectionو كذلك ال يمكن استخدامه لمتابعه العالج حيث ان االجسام
المضاده تستمر في الدمه لمده قد تصل الي عامين تقريبا بعد انتهاء العالج و القضاء علي البكتيريا
كذلك بعض االبحاث وجدت ان في cross reactivityمع ال ()pseudomonas spp
اخيرا لو اتعمل تحليل االنتيجبن و تحليل االجسام المضاده في نفس الوقت فالمتوقع هو الحصول على احدى تلك النتائج
*** االنتيجين فى البراز ايجابي و االجسام المضاده فى السيرم ايجابيه <<<< دليل علي وجود اصابه حديثه
*** االنتيجين فى البراز سلبي و االجسام المضاده فى السيرم سلبيه <<<< دليل على عدم وجود اصابه
*** االنتيجين فى البراز ايجابي و االجسام المضاده فى السيرم سلبيه <<<< ده لو استبعدنا ان تحليل البراز ( )false positiveفربما تكون االصابه دي
Early infection
*** االنتيجين فى البراز سلبي و االجسام المضاده فى السيرم ايجابيه <<<< ده بيحدث كثيرا فى الحاالت بعد العالج الناجح حيث تستمر االجسام
المضاده فتره طويله ......و ربما يحدث فى مريض نتيجه تاثير المضادات الحيويه و مضادات الحموضه على تحليل االنتيجين
د/خالد مجدي
-88طريقه عمل تحليل ال ))widal
السالم عل يكم
ان شاء هللا نتناقش النهارده فى طريقه عمل تحليل ال ) )widalالن فى بعض االختالفات بين المعامل و فى الطريقه و كتابه التترات
يعنى كميه محدده من ( )antibodyعلى كميه محدده من ال ( )antigenو اذا حدث تلزن ( )agglutinationفالنتيجه ايجابيه
=======================================================
ثانيا :::::::فى طريقه تعتبر تطوير لطريقه التنصيص بتتم بالتخفيف كاالتى
اول حاجه بنشتغل عادى ب 20ميكرو سيرم +نقطه رئيجنت اللى هو تتر 80/1
المهم حتاخد 20ميكرو من اول انبوبه على نقطه رئيجنت و بكده انت بتشتغل تتر 160/1
ثم 20ميكرو من تانى انبوبه على نقطه رئيجنت و بكده انت بتشتغل تتر 320/1
ثم 20ميكرو من ثالث انبوبه على نقطه رئيجنت و بكده انت بتشتغل تتر 640/1
ثم 20ميكرو من رابع انبوبه على نقطه رئيجنت و بكده انت بتشتغل تتر 1280/1
الطريقه مقار به جدا لطريقه التنصيص لكن افضل منها .............و ممكن تعملها على الشريحه نفسها بدون استخدام االنابيب بس راعي ان ميحصلش لخبطه
ملحوظه:
ثم استخدمت 20ميكرو من االنبوبه الثانيه و تخفيفها ( )1:4بمعني انها تحتوي فعليا على 5ميكرو سيرم و ده لتتر 320
ثم استخدمت 20ميكرو من االنبوبه الثالثه و تخفيفها ( )1:8بمعني انها تحتوي فعليا على 2.5ميكرو سيرم و ده لتتر 640
و هكذا
اذن الموضوع ريضيا متطابق و هى نفس الطريقه بدون اى اختالف لكنها تسمح لك بالشغل لتترات اعلي صعب تتعمل بالتنصيص
================================================================
*** ارجع لالنبوبه رقم واحد و ضيف على السالين 100ميكرو سيرم (ده تخفيف )1:20
*** اعمل الول انبوبه mixو اسحب منها 1مل ضيفها على ملى السالين فى تانى انبوبه
*** اعمل لتانى انبوبه mixو اسحب منها 1مل ضيفها على االنبوبه الثالثه و هكذا الخر انبوبه
*** لما توصل لالنبوبه السابعه حيبقي كده فيها 2مل اعمل mixو اسحب 1مل تخلص منه
الثانيه)40/1(...................
الثالثه)80/1(...................
الرابعه)160/1(...................
الخامسه)320/1(...................
السادسه)640/1(...................
السابعه)1280/1(...................
*** طبعا مش حنشتغل من اول و تانى انبوبه زى ما اتفقنا و حنبدء شغل من ثالث انبوبه مباشره
حتضيف على كل انبوبه ( 50ميكرو رئيجنت سالمونيال)
طبعا حتعمل نفس مجموعه االنابيب اربع مرات (مره الستخدامها مع ال Oو مره مع ال Hو مره مع ال AHو مره مع ال )BH
افحص بعد كده االنابيب (راعي عدم تحريك االنبوبه بقوه حتي تستطيع قراءه النتيجه بشكل صحيح)
اذا كان فى ترسيب واضح فى اسفل االنبوبه (او ترسيب منتشر مسبب لعكاره) فالنتيجه ايجابيه
ملحوظه :فى طرق لتسريع الحصول على نتيجه من طريقه االنابيب ..............بانك تحضن االنابيب فى درجه حراره ( )50لمده 4ساعات لالنتيجين
( )Oو لمده 2ساعه لالنتيجين ()H
د/خالد مجدى
=======================
مبدئيا قبل ما نتكلم .......الزم نقول ان شغل ال ( )turbidimetryعلى جهاز الكيمياء و ان كان اغلي فهو اكثر دقه و افضل لمتابعه الحاله .......اما
فى البوست فحنتكلم عن شغل الالتكس االكثر انتشارا فى المعامل
============
كيتس الالتكس الخاصه بالتحليل بتحتوي دائما على ثالثه كواشف
االولي ( :)Latex Reagentو ده عباره عن معلق من الــ ( )polystyrene latex particlesمغطي بالــ ( .......... )streptolysin Oانت بتبحث
فى التحليل عن االجسام المضاده المكونه ضد ال ASO
الثانيه ( :)Positive Controlده سيرم محتوي علي ( )streptolysin Oاعلي من 200 IU/ml
ملحوظه :البد دائما من حفظ كواشف السيرولوجي فى الثالجه ( ) 8-2درجه و ممنوع تجميدها او تعريضها لدرجه حراره عاليه او ضوء الشمس المباشر
ملحوظه :البد من اعطاء فرصه لتكون الجلطه بترك العينه فى الحضانه مده 20دقيقه على االقل ( )allow a clot to form and retractللحصول علي ( clear
)serumلتفادي ال ()False positive
====================
** البد من تصل الكواشف لدرجه حراره الغرفه قبل الشغل و البد من عمل خلط للرئيجنت ) )mixed gentlyالعاده توزيع جزيئات الالتكس ( re-suspend
)latex
ملحوظه :وجود اى تجمعات او ترسيبات فى الرئيجنت يعتبر دالله على الــ ( (deteriorationو بالتالي ال يمكن استخدامه
** من المستحسن تنظيف الـ ) )test slideبقطعه قماش ( ) non-abrasive materialثم غمرها بماء مقطر و تركها تجف ثم رشها ) )sprayبـ ( 70%
)alcohol solutionو تركها تجف قبل الشغل
** بنشتغل بكميات متساويه تقريبا (اغلب الشغل بيكون 50 µlسيرم +نقطه رئيجنت اللي بتكون حوالي ) )(45 µlو الحظ االتي:
◼ استخدم شريحه سمراء لكي يكون التفاعل واضح (و لو استخدمت شريحه ميكروسكوب ممكن قرائتها على خلفيه سوداء)
◼ ضع نقطه السيرم بعيدا عن نقطه الرئيجنت (مش فوق بعضهم)
◼ ممكن تشتغل بكميات اقل ...لكن راعي انها مش تكون اقل من الالزم يعنى مثال بالش 10ميكرو و اال سيتعذر عليك رؤيه التفاعل
** اخلط النقطتين جيدا على الشريحه ثم حرك الشريحه ( )tilt the slide gentlyلمده دقيقتين
** اقرأ النتيجه بالعين المجرده تحت اضاءه قويه لفحص وجود تجمعات ( )agglutinationمن عدمه مع مالحظه ان مبدأ التحليل هو حدوث تجمعات
واضحه مرئيه بالعين (يمكنك مقارنتها بتجمعات الكنترول االيجابي)
غير كده لو لم تظهر تجمعات مرئيه بالعين فالنتيجه سلبيه و تسجل ( )less than 200 IU/mlو ال داعي ابدا ابدا لفحص الشريحه ميكروسكوبيا فال
منطق علمي فى ذلك و ان كنت تبحث عن الدقه فاشتغل من البدايه ()turbidimetry
ملحوظه :التزم تماما بالوقت المحدد لقراءه النتيجه (خالل دقيقتين) لتفادي ال ( )False positiveالناتج عن ال ()Drying
**** طريقه الشغل ال ((Semi Quantitativeاو ال ()Titres
==================================
العينات االيجابيه فى الشغل ال ( )qualitativeمعناها انها محتويه على االجسام المضاده ضد ال ( )ASOاللى بتنتجه بكتيريا ال ( group A
)Streptococcus bacteriaلكن ما هي كميه االجسام المضاده فى الدم؟؟؟
يمكن معرفه ذلك بشكل تقريبي من خالل تخفيف عينه السيرم ثم اعاده الشغل بنفس الطريقه حتي نصل الى نتيجه سلبيه ()no agglutination
فتصبح اخر تخفيف ايجابي هو التتر و هو مجرد تعبير بقيمه رقميه تدل على كميه االجسام المضاده بشكل تقريبي و ليس رقمي محدد
الطريقه كاالتي:
جهز 5انابيب و ضع فى كل واحده 100ميكرو سالين
ضع فى اول انبوبه 100ميكرو سيرم (يصبح تخفيف 1:1بمعامل تخفيف )2اخلط جيدا
ثم انقل 100ميكرو لالنبوبه الخامسه (يصبح تخفيف )32:1اخلط جيدا ثم تخلص من اخر 100ميكرو
** اشتغل التحليل من اول انبوبه بكميات متساويه ............لو ايجابي (ده تتر )400و اشغل االنبوبه الثانيه
.....لو ايجابي (ده تتر )800و اشغل االنبوبه الثالثه ......لو ايجابي (ده تتر )1600و اشتغل االنبوبه الرابعه و هكذا لحين الوصول الى نتيجه سلبيه
ملحوظه :فى حاجه لقيت البعض بيعملها و هى ان لو كان التحليل ال ( )qualitativeايجابي يقوم عامل اول تخفيف اللي هو تتر 400و لو طلع سلبي
يكتب النتيجه 300و معرفش على اساس علمي عمل الكالم ده
او انك تعمل تخفيفات تديك تترات متقاربه مثال تتر 500او 600او 1000و هكذا
اوال احذف منهم ( 200اللى هو اول تتر فى الحاالت االيجابيه) فيتبقي 300
ثالثا اشتغل من االنبوبه دى ( )volume to volumeو لو طلعت ايجابي يبقي التتر هنا 500
اشتغل من االنبوبه دى ( )volume to volumeو لو طلعت ايجابي يبقي التتر هنا 1000
السالم عليكم
ال ( )boiling testده االختبار التاكيدي لوجود بروتين في البول و اللي بتعمله للحاالت االيجابيه بالشريط (او بتعمله لكل العينات كروتين شغل)
المبدأ العلمي لالختبار ان البروتينات بيحصل لها ( )denaturationو تترسب نتيجه التسخين فى وسط حامضي
**** العينه :عينه البول الزم تكون ( )clearلذلك يفضل دائما استخدام ال ( )supernatantالناتج من تدوير العينه .....فى حاله العينات القلويه
المراجع بتقول انك تضيف على العينه ( )glacial acetic acidلجعل العينه حامضيه مما يسهل ترسيب البروتينات و ظهورها (خاصه لو كميتها قليله)
.....و ان كان معظم المعامل بتعدي الخطوه دي....
**** الطريقه :انك بتملي حولي 3/2من االنبوبه بالبول و تسخن االنبوبه مائله على اللهب ..........و تسخن الجزء العلوي فقط ......و ده مهم عشان
ميحصلش ( )disruptionللراسب و يتجمع فى الجزء العلوي فيسهل رؤيته و ايضا يبقي فى الجزء السفلي من االنبوبه البول ال ( )clearفتسهل مقارنته
بال ( )turbidityالناتجه عن تسخين الجزء العلوي
----
و طبعا كلنا عارفين موضوع ان ال ( )turbidityالناتجه من التسخين ربما تعود الي وجود امالح الفوسفات اللي بتترسب بالتسحين .........و لذلك بعد
ظهور التعكير بيتم وضع ( )glacial acetic acidفاذا حدث ذوبان للراسب فهو فوسفات و ليس بروتين ..........و ممكن تسخن مره اخرى بعدها
للتأكد
د /خالد مجدي
-91احتياطات تحليل الــــ ()Fecal occult blood
السالم عليكم
من المتبع فى المعامل تجهيز المريض قبل اجراء تحليل ال ( )Fecal occult bloodو ذلك كاالتي
*** االمتناع لمده ثالث ايام قبل التحليل عن تناول اللحوم الحمراء و الكبده
*** االمتناع لمده ثالث ايام قبل التحليل عن تناول الفواكه الحامضيه كالبرتقال و الليمون
*** االمتناع قبل التحليل عن تناول ادويه محتويه على الحديد او فيتامين C
اخيرا .......قبل التحليل ب 7ايام وقف االدويه المضاده لاللتهابات كـــ االسبرين و ال ()ibuprofen
السبب فى ذلك ان الطريقه المتبعه للشغل كانت تعتمد قديما على ان الهيموجلوبين يمكنه التفاعل كـــ ( )peroxidase enzymesاي يمكنه نقل االكسجين
من ماده كالـــ ( )hydrogen peroxideالى ماده كالــــ ( ) Benzidineمغيرا لونها فنعتبر التفاعل ايجابي و لذلك كنات تسمي بالطريقه الكيميائيه
و بالتالي اي اكل محتوي على هيموجلوبين او ميوجلوبين او حديد او ( )peroxidase-containing foodsزي الفجل كان يدي مع التفاعل نتيجه ايجابيه
خاطئه
و على النقيض ارتفاع مستوى فيتامين Cفى االكل و النه ( )antioxidantفكان يعطي نتيجه سلبيه خاطئه
اما عله ايقاف ادويه االلتهابات فهو تاثيرها المعروف على المعده مسببا نزيف مما يعطي ايضا نتيجه ايجابيه يصعب تفسيرها هل هى نتيجه تاثير الدواء
او شئ اخر
ملحوظه :لذلك ال يمكن عمل التحليل لمريض عاني مؤخرا من نزيف فى االنف او اللثه مثال
============
حاليا ال حاجه لتجهيز المريض بتلك االحتياطات
الننا استبدلنا الطريقه الكيميائيه بالطريقه المناعيه (الكروت الخاصه بال )FOBTو التى تعتمد على عمل Detectionلبروتين ال ( )globinو بالتالي
فالطريقه متخصصه جدا للــ ( )human haemoglobinو ال تتأثر بالتداخالت المذكوره نتيجه الوجبات الغذائيه
لذلك يمكن عمل التحليل اي وقت دون احتياطات محدده لالكل
مع مالحظه ايضا انه ال يمكن عمل التحليل لمريض عاني مؤخرا من نزيف فى االنف او اللثه و اال سيصعب تفسير النتيجه
ملحوظه :الن التحليل المناعي متخصص للجلوبين فهو جيد جدا فى ال( ) Detectionلمشاكل نزيف القولون باالخص
و اول حاجه بتهم الطبيب هنا هى التفريق بين اذا كان هذا السائل
transudate or exudate
ال ( )transudateينتج دائما نتيجه لخلل التوازن بين فلتره و اعاده امتصاص السوائل فى الوعاء الدموى مثال نتيجه لزياده ال ()hydrostatic pressure
كما فى مرضي فشل القلب ( )congestive heart failureو كذلك نتيجه لنقص حاد فى بروتينات البالزما كما فى مرضي ال ()nephrotic syndrome
اما ال ( )exudateفينتج عن مشكله تتعلق مباشره بالغشاء المبطن للتجويف و غالبا بتكون ( )infectionsاو ()malignancies
اذا كانت النتيجه اعلى من ( )0.6فالسائل ( )exudateاما اذا كانت اقل من ( )0.6فالسائل ()transudate
بالنسبه للسائل البلورى ( )Pleural fluidفى ثالثه تحاليل اخرى ممكن استخدامها للتفريق بين نوعى البذل
****^^^^^***** كذلك حديثا يمكن استخدام الفرق بين نتيجه االلبيومين فى السيرم و فى السائل البلوري لتقييم نوع البذل ()Serum – pleural albumin
فاذا كانت النتيجه اعلى من ( )1.2 g/dlفده يرجح ان السائل ( )transudateاما اذا كانت النتيجه اقل من ( )1.2 g/dlفالسائل غالبا (( )exudateبنسبه تزيد عن
%87طبقا لالبحاث)
اخيرا فى حاالت ال ( )exudateفى تحليلين مهمين بيطلبوا
االول هو تحليل ال ( )glucoseفى البذل
-------------------------------------
من الطبيعى ان مستوى الجلوكوز فى السيرم و فى البذل بيكون واحد تقريبا (زى اى )ultrafiltrateو يعتبر النتيجه اللى اقل من ( )60 mg/dlنقص فى
الجلوكوز فى البذل و دى مؤشر على وجود ()infections
النتيجه االعلى من ( )40 U/Lتعد مؤشر قوى على االصابه بال ( )tuberculosisو كذلك يكون مرتفع فى حاالت ال ()malignancy
د/خالد مجدى