Uji Biokimiawi

Ailani Sabrina 021611133029 Anindita D. 021611133034

Jesica Ceren K. P. 021611133030 Nadya Innasa K. 021611133035
Ayulfa Putri A. 021611133031 Tiffany J. H. 021611133036
Beliana Ayu P. P. 021611133032 Nia Nurhaliza 021611133037
Ayu Vania A. 021611133033
Alat dan Bahan

Alat Bahan
• Gelas Durham • Glukose
• Tabung reaksi • Laktose
• Sukrose
• Oese
• Maltosa
• Media TSIA
• Media VPMR
• Sitrat
• MIU
• Indol
Cara Kerja

A. Uji Fermentasi B. TSIA

• Siapkan media gula yang terdiri dari air pepton dan • Inokulasi bakteri pada media TSIA
gula/karbohidrat . Beberapa gula adalah Glukose, laktose,
sukrose, maltosa , indikator phenol red (merah) atau Broom • Inkubasi
Thymol Blue /BTB (biru) • Hasil :
• Pada media gula-gula ini terdapat gelas durham dalam posisi - Alkalin : warna media merah
terbalik
- Asam : kuning
• Masukkan kultur bakteri yang akan diuji, inkubasi selama 2X24
jam. - Gas : media terangkat
• Setelah diinkubasi dilihat hasilnya. - Gas H2S : warna kehitaman
• Apabila warna medium berubah menjadi kuning, artinya bakterin
tersebut membentuk asam dari hasil fermentasi terhadap
karbohidrat tersebut.
• Apabila warna medium tetap (merah atau biru) maka bakteri
tersebut tidak mengadakan reaksi fermentasi.
Cara Kerja

C. VPMR D. Sitrat
• Medium VP ditetesi kultur bakteri • Kultur bakteri pada media sitrat (agar miring).
• Inkubasi selama 2 X 24 jam • Inkubasi 1X 24 jam
• Tetesi reagen A (5% neftol dalam alkohol) dan reagen B (40% • Sitrat
KOH)
• Hasil :
• Hasil :
+ : warna berubah menjadi biru
+ : berwarna merah
- : warna tidak berubah
Cara Kerja

E. MIU F. Indol
• Bakteri ditanam/diinokulasi pada media semi solid secara tegak • Masukkan kultur bakteri dalam media Indol inkubasi 1X 24 jam
lurus dari permukaan atas tabung ke dasar tabung atau lebih
• Inkubasi • Setelah inkubasi tetesi reagen Ehrlich atau Kovacs
• HASIL : • Hasil : Indol
- Ada pergerakan : pertumbuhan bakteri seperti awan + : ada perubahan warna menjadi merah (bentukan cincin warna
merah)
- Tidak bergerak : arah pertumbuhan lurus seperti arah
penanaman
Hasil Praktikum
Hasil Praktikum Uji Biokimia dengan Indikator Gula-gula

Jenis Gula A2.1 A2.2 A2.3

Gas Fermentasi Gas Fermentasi Gas Fermentasi

Maltosa - + + + - -

Sukrosa - + + + - +

Laktosa - - - - - -

Glukosa + + + + - +
 Jenis Uji Perubahan

A2.1 A2.2 A2.3

KIA Tidak ada perubahan Tidak ada perubahan Tidak ada perubahan

VPMR Tidak ada perubahan Terjadi perubahan Tidak ada perubahan

warna menjadi merah

Asam Sitrat Tidak ada perubahan Tidak ada perubahan Tidak ada perubahan

MIU Tidak ada perubahan Wana berubah Tidak ada perubahan

menjadi merah muda
Indol Tidak ada perubahan Tidak ada perubahan Tidak ada perubahan
Media setelah Sesaat dilakukan Penanaman Bakteri
Hasil Praktikum Kelompok A2.2
 Uji Voges-Proskauer (VP)

• Uji ini digunakan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang dapat

memfermentasikan karbohidrat menjadi 2,3-butanadiol
• Adanya kandungan asetoin yang diproduksi menyebabkan perubahan
warna larutan dari kuning menjadi merah muda hingga merah.
• (+) jika kaldu berwarna merah
• (-)  jika kaldu tidak mengalami perubahan warna setelah
penambahan reagen
 Uji Methyl Red (MR)

• Dilakukan untuk mengetahui apakah bakteri dapat membentuk asam

campuran sehingga dapat mengubah indikator metil merah menjadi
merah.
• (+)  jika kaldu berwarna merah
• (-)  jika kaldu berwarna kuning.
Pada hasil uji VP/MR
• Kelompok A2.1 dan A2.3 tidak ada perubahan
• Kelompok A2.2 terjadi perubahan warna menjadi
merah, sehingga terbukti bahwa bakteri dari sampel
dapat memfermentasikan karbohidrat dalam jumlah
yang besar serta bakteri dapat membentuk asam
campuran.
Uji Indol
• untuk menentukan kemampuan bakteri dalam memecah asam amino
triptofan
• Hasil uji indol yang diperoleh negatif apabila tidak terbentuk lapisan (cincin)
berwarna merah muda pada permukaan biakan, artinya bakteri tidak dapat
membentuk indol dari asam amino triptofan sebagai sumber energi
• pada uji positif bakteri memiliki enzim triptofanase yang dapat menghidrolisis
asam amino jenis triptofan yang memiliki gugus samping indol sehingga indol
akan bereaksi dengan reagen uji dan membentuk rosindol yang berwarna
merah.
• Pada ketiga percobaan tidak nampak adanya perubahan.
Uji Sitrat
untuk melihat kemampuan bakteri menggunakan sitrat
sebagai satu-satunya sumber karbon dan energi.
Bila mikroorganisme mampu menggunakan sitrat, maka
asam akan dihilangkan dari medium biakan, sehingga
menyebabkan peningkatan pH dan mengubah warna
medium dari hijau menjadi biru.
Pada ketiga percobaan tidak tampak adanya perubahan.