Prof.

dr Katarina
Karljikovi-Raji
SPE Solid Phase Extraction
Ekstrakcija vrstom fazom
Ekstrakcija u vrstoj fazi
vrsto-tena ekstrakcija
Ekstrakcija tenost-vrsta faza
Sorbent ekstrakcija
2fa
2fb
2fc
VRSTA FAZA - SORBENT
20 23.04.2009
SPE
Separaciona metoda
u pripremi uzorka (Sample preparation)
ta je potrebno?
Izolovati ispitivano jedinjenje (jon) ANALIT
=
za R Kvalitativna posle Kvantitativna
analizu (AH I ) ( AH II )
PRIMENA SPE
priprema uzorka
u sintezama
za razliite postupke
preiavanja (clean-up)
DEFINISANJE REALNOG UZORKA
MATRIKS
Matriks
Interferencije
Analit
Matriks (Matrix)
iz ega se izvodi
ekstrakcija
Interferencije
ta ne treba da se
ekstrahuje uz analit(e)
Analit(i) Analyte(s)
ta se ekstrahuje
ispitivana jedinjenja
(joni)
TERMINI U SPE
ANALIT se zadrava na VRSTOJ
sorbuje FAZI
ima retenciju (SORBENT)
VRSTA ELUENTOM spira ANALIT
FAZA RASTVARAEM eluira ..
se ZA desorbuje U
ispira ELUIRANJE ELUATU
( ELUENS )
TA POSLE ?
IZOLOVANJE CILJANOG ANALITA
DVA OSNOVNA POSTUPKA
a) Bez retencije ciljanog analita
Ciljani analit se
direktno eluira
kroz kolonu
Retencija
interferencija
na sorbentu
b) Uz retenciju ciljanog analita
Uzorak Ispiranje Eluiranje

Interferencije
bez retencije
odbacivanje
tenosti od
nanoenja
uzorka i od
ispiranja

Selektivni
rastvara
za
eluiranje
ciljanog
Analita
Rastvor
za
analizu
a) Bez retencije
ciljanog analita

U uzorku Analit
u dovoljnoj
koncentraciji
za odreivanje
Preiavanje
uzorka
Retencija
interferencija

b) Uz retenciju
ciljanog analita
(catch and release)
"uhvati i oslobodi"

U uzorku Analit
u niskim koncent.
Retencija Analita
1
Koncentrisanje
Analita
Preiavanje
?
DA PONOVIMO I
ODGOVORIMO NA PITANJA

DEFINISATI 3 OSNOVNE KOMPONENTE
REALNOG UZORKA

KOJA SU 2 OSNOVNA POSTUPKA ZA
IZDVAJANJE ANALITA PRIMENOM SPE

TA SE U OVIM POSTUPCIMA
ZADRAVA (SORBUJE)
NA
VRSTOJ FAZI (SORBENTU) ?
Kondicioniranje
Sorbenta
odbacivanje
Nanoenje
uzorka
Eluirane
Interferencije
odbacivanje
Ispiranje
interferencija
Eluiranje
Analita
FAZE SPE u postupku retencije ciljanog analita
Selektivan
rastvara
Pitanje
Navesti redosled
za 4 osnovne faze
LLE
liquid-liquid
extraction
SPE
solid phase
extraction
P
O
R
E

E
NJ
E
Dugotrajana i
komplikovana procedura
Vee zapremine organskih
rastvaraa (upotreba i
odlaganje) toksini ;zapaljivi
Ekstrakti vlani
tragovi vodene faze
faktori koncentrisanja ogranieni
Stroga kontrola uslova
( pH; t
0
C ; (I) )
Krae vreme za
izvoenje
Smanjena upotreba
organskih rastvaraa
Poveanje faktora
koncentrisanja
1 - 1000

LLE
SPE
Mukanje /kontinuiran Filtriranje
proces
Graenje emulzija Bez emulzija
Niska selektivnost Visoka selektivnost/
veliki izbor Sorbenata
2h / uzorku 20min /uzorku J.T.Baker
SPE disk
IZVOENJE SPE
SPE tehnika uz pric
manji broj uzoraka
Cr
3+

Cr
2
O
7
2-


Cr
2
O
7
2-

(sorbent)

Cr
3+


ANALIT
MATRIKS
SORBENT
INTERAKCIJE matriks-analit
analit-sorbent
analit-eluent
IZBOR USLOVA
najslabija interakcija
najjaa interakcija

EFIKASNOST
SPE
Pitanje
Navesti 3
vrste
interakcija
Koja je
Najslabija ?
Najjaa ?
SELEKTIVNOST i KAPACITET SORBENTA
neselektivna
selektivna
FAZE U RAZVOJU
SPE METODE
1. Izbor selektivnog
sorbenta za
realan uzorak
ciljani analit
2. Optimizacija radnih parametara
utiu na efikasnost SPE
r Preliminarno na vetakim-laboratoriskim uzorcima
optereeni analitom (spiked samples)
r Ispitivanje na Realnim uzorcima
optereeni analitom (spiked real samples)
retencija
REALAN UZORAK
direktno utie
zbog prisustva interferencija
T
na fazu retencije na fazu eluiranja
1 1
1 pravilan i selektivan 1
izbor
SORBENTA RASTVARAA ZA
ELUIRANJE
RAZLIITE VRSTE UZORAKA
SPE
UZORCI Voda (Voda za pie; Povrinske; Otpadne)
Ciljani Analiti - Joni tekih metala u tragovima
koncentrisanje na Sorbentu
"Glavni joni" ( Ca
2+
i Mg
2+
) konkurentni joni
visoke koncentracije zasite Sorbent* (KAPACITET)
1
2
S i
O
S i
O
S i
O
S i
O
S i
O
S i
S i
O
S i
O
S i
O H
S i
O H
O H
O H
Modifikovani silika sorbenti
C18
C8

MeOH
Kondicioniranje
S O R B E N T
M
n+
( u formi helata)
Eluent uz
dodatak drugog
helatnog reagensa
Eluent uz
dodatak kiseline
Modifikovana Silika helatne grupe
M
n+
(razoren
helat)
ELUAT
Graenje
stabilnijeg
kompleksa
(M
n+
/drugi helat)
ELUAT
Pitanje
M
n+
sorbovan
na vrstoj
fazi u formi
Helata
Kako se
eluira sa
sorbenta ?
Organski
rastvara
Helat u
ELUATU
HIDROFOBNI POLIMERI
Jako hidrofoban
Manje selektivan
PS-DVB
male estice
velika povrina
Vei kapacitet
ANALIT
aromatine
strukture

SO
3
H
SO
3
H
HO
3
S
JAK KATJONSKI IZMENJIVA
ANALIT funkcionalna grupa pozitivno naelektrisana
SORBENT funkcionalnu grupu
negativno naelektrisanu SO
3

H
+

JONI METALA U TRAGOVIMA ANALITI
SORBENT (JKI) Nedovoljna Selektivnost
Visoka retencija "glavnih jona"
Pitanje
selektivnost
sorbenta
za M
n+

u tragovima
a kakva za
"glavne jone"
CH
2
N
+
R3
CH
2
N
+
R
3

CH
2
N
+
R
3

R
3
+
NCH
2

JAK ANJONSKI IZMENJIVA
ANALIT negativno naelektrisanje
izmena sa Anjonom Sorbenta
FAKTOR KONCENTRISANJA
Ukupna V polaznog uzorka
V eluenta za kvantitativnu
desorpciju
V
HCl

100mL polaznog uzorka
vode
2mL eluenta
Faktor
koncentrisanja
50
%
Pitanje
Definisati
faktor
koncentris.
Izraunati
Faktor 1000
kako ?
PREDNOSTI SPE
1.Mogunost direktnog povezivanja - kuplovanja
sa analitikom metodom odreivanja
2. Retencija ciljanih jona u stabilnoj
hemijskoj formi na sorbentu
Priprema uzorka na terenu
3. Vei broj aplikacija
vei izbor razliitih sorbenata
OSNOVNI PRINCIPI SPE

IZOLOVATI i KONCENTRISATI ciljani ANALIT

UKLONITI INTERFERENCIJE
Vodena
Faza
Organska
Faza
CHCl
3

LLE (liquid-liquid)
M
n+
graenje kompleksa ML
n

SPE

M
n+


Retencija
na
Sorbentu
uz
graenje
Helata

PRIMERI
U NASTAVKU
THE I MPORTANT THI NG I S
NOT TO STOP QUESTI ONI NG

Albert Einstein
HVALA NA PANJI

KONSULTACIJE
PROF. KAA