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김 승 희⋅장 혜 진†
Abstract: This study attempted to investigate the possibility of the use of Morinda citrifolia (MC) as a cosmetic in-
gredient from its physiological activities such as antioxidant activity, cytotoxicity and anti-aging effect. MC is a tropical
plant that has been used as traditional polynesian foods and medicines for over two thousand years. It has been reported
that this shrub can improve antimicrobial, anti-cancer and anti-inflammatory effects and strengthen an immune system.
The in vitro antioxidant activity of MC was performed to see the DPPH scavenging activity by measuring total poly-
phenol content and total flavonoid content. As a result, a lack of any cytotoxicity was confirmed in human dermal fibro-
blasts (HDF) cell. When MC extract at a concentration of over 50 ∼ 100 µg/mL was added, MMP-1 expression consid-
erably diminished. In an in vivo test, in addition, cream containing MC extract was prepared and applied to a total
of 22 women in their 30 ∼ 50s in ages in the morning and in the evening for four weeks. Changes in keratin, melanin
index, pore, skin color and wrinkles under the naked eyes were then comparatively measured. Keratin levels slightly
increased in the control group but decreased in the experimental group. In addition, wrinkles diminished in the ex-
perimental group. This study found that MC extract controls many MMP-1 related mechanisms with great potential for
use as a natural ingredient of anti-aging cosmetics.
† 주 저자 (e-mail: vita3535@hanmail.net)
call: 02)954-1656
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184 김승희⋅장혜진
2.4.1. 세포독성 측정
2.3.1. 총 Polyphenol 함량 측정
Neutral red (NR) assay를 이용하여 사용된 시료의
노니 추출물의 총 폴리페놀 함량(total polyphenol
독성 실험을 수행하였다[10]. 세포 주는 HDF 세포를
content), TRC은 caffeic acid (Sigma, USA)를 표준물질
사용하였으며, 96-well plate에 3 × 104 cells/well의 농도
로 사용하여, Folin-Ciocalteau 방법을 변형하여 측정하
로 분주하고 노니 추출물을 각각 농도가 되도록 첨가
였다[8]. 시료를 0.5, 1, 1.5, 2 mg/mL가 되게 희석한 후
한 후 24 h 동안 37 ℃에서 CO2 배양기에서 배양하였
시료 400 µL에 Folin-Ciocalteau’s phenol reagent 시약
다. 세포부착 확인 후 시료를 농도별로 무혈청 배지에
400 µL을 혼합하여 실온에서 3 min간 방치한 후 10%
희석하여 처리한 후 48 h 배양하였다. 배양한 세포는
NaCO3 용액 400 µL를 혼합하고 다시 실온에서 차광된
배양액을 NR solution이 1% 포함된 무혈청 배지로 교
상태로 1 h 동안 반응시켰다. 반응 후 96-well plate에
환하여 3 h 배양한 다음 현미경 하에서 NR의 결정화
200 µL씩 분주한 후 microplate reader를 이용하여 800
유무를 확인하였다. 세포고정액으로 formaldehyde 용
nm에서 흡광도를 측정하였다.
액 10%가 첨가된 phosphate buffered saline (PBS)을 각
폴리페놀 함량 측정(%) = well에 100 µL로 20 min 처리하여 고정하였다. NR de-
100-{(무첨가군 흡광도/ 첨가군 흡광도) × 100} sorb solution (1% glacial acetic acid, 49% 에탄올, 50%
증류수)을 각 well에 100 µL씩 분주하여 세포 내의 NR Table 1. The Experimental Formulation of the Cosmetic
를 추출하여 microplate reader로 540 nm에서 흡광도를 Product Cream Samples (Composition (%))
Figure 1. Change of total polyphenol concentration of MC. Figure 2. Change of total flavonoid concentration of MC.
3.1.2. 총 Flavonoid 함량
플라보노이드는 방향족 폴리페놀로서 크게 iso-
flavones, chalcones, flavanones, flavones, flavonols, flava-
non-3-ols, anthocyanidins, flavan-3-ols, proanthocyanidins, Figure 3. MC of DPPH radical residual activity.
flavans, flavan-3,4-diols 및 dihydrochalcones의 13가지로
분류되며[21] 생체 내 산화작용을 억제한다고 알려져 색되며[24], 식물 또는 식품에서 추출물 또는 특정 혼
있는 성분으로서 항산화력을 나타내는 지표라고 할 수 합물의 free radical 소거능을 평가하기 위해서 DPPH
있으며, 면역조절제로 사용되어 왔고, 최근 항균작용, 시험이 널리 이용되고 있다[25]. 본 실험에서 노니 추
항진균 바이러스작용, 혈관계 조절작용, 강장작용, 항 출물은 ascorbic acid에 비해 낮은 DPPH 자유 라디컬
염증작용, 항암작용 등의 다양한 생리활성이 밝혀지고 소거능을 보였으나 오미자 추출물의 경우 1 µg/mL 농
있다[22,23]. 본 연구에서는 항산화력이 뛰어나다고 보 도에서 24%와 비교 시 노니 추출물은 1 µg/mL 농도
고된 quercetin과 비교하여 총 플라보노이드 함량을 측 에서 55%로 2배 이상의 radical 소거능이 있는 것으
정하였다. 그 결과 Figure 2와 같이 총 플라보노이드 함 로 나타났다. 노니 에탄올 추출물은 합성 항산화제
량이 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 대 중에 가장 널리 사용하고 있는 0.1% BHT와 비슷한
조군인 quercetin에 상응하여 비교하였을 때 플라보노 활성을 나타내었고 에탄올 추출물의 활성이 물 추출
이드 함량이 노니 추출물이 0.5%일 때 74.5 mg의 높은 물의 활성보다 높게 나타난 것으로 보고 되었다[18].
플라보노이드 함량이 관찰되었다. 또한 Gwak 등의 선행 연구에서는 노니 과실 50% 에
탄올 추출물 5 mg/mL의 농도에서 DPPH 소거능이
3.1.3. DPPH Radical 소거능 71% 활성을 갖는다고 하였다[28]. 따라서, 앞으로 노
DPPH는 화학적으로 안정된 free radical을 가지고 있 니 추출물은 기능에 맞게 효과적인 방법으로 사용된
는 수용성 물질로 ascorbic acid, tocopherol, polyhydroxy 다면 항노화 기능성 화장품에의 응용이 가능하리라
방향족 화합물 등에 의해 환원되어 짙은 자색으로 탈 사료된다.
Figure 4. The effect of treated with MC on the cell viability Figure 5. Inhibition of MMP-1 production in HDF cell
in HDF cellls. treated with MC.
Table 3. Comparison of Skin Keratin, Melannin, Wrinkle under Eyes and Color Values in Control Group before and after
Experiment (**p < 0.01)
Before After
t p
Mean S.D. Mean S.D.
Keratin 266.81 31.34 267.0 29.55 -0.043 0.966
Wrinkles under the eyes 2.68 1.01 2.36 0.70 1.884 0.088
Melanin 161.73 33.70 169.18 37.96 -0.235 0.249
Appreciable pores 1106.27 67.11 938.10 65.05 1.241 0.059
Wide open pores 20.46 44.58 16 14.98 1.048 0.052
Blackhead pores 434.27 19.31 424.81 17.70 -1.842 0.110
L 57.84 19.02 62.41 4.36 -4.577** 0.001
a 11.91 2.34 11.98 2.29 -0.104 0.920
b 23.29 3.67 21.47 3.61 1.571 0.147
Table 4. Comparison of Skin Keratin, Melannin, Wrinkle under Eyes and Color Values in Experimental Group before and after
Experiment (*p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001)
Before After
t p
Mean S.D. Mean S.D.
Keratin 266.81 31.34 267.0 29.55 -0.043 0.966
Wrinkles under the eyes 2.68 1.01 2.36 0.70 1.884 0.088
Melanin 161.73 33.70 169.18 37.96 -0.235 0.249
Appreciable pores 1106.27 67.11 938.10 65.05 1.241 0.059
Wide open pores 20.46 44.58 16 14.98 1.048 0.052
Blackhead pores 434.27 19.31 424.81 17.70 -1.842 0.110
L 57.84 19.02 62.41 4.36 -4.577** 0.001
a 11.91 2.34 11.98 2.29 -0.104 0.920
b 23.29 3.67 21.47 3.61 1.571 0.147
Table 5. Comparison of Skin Keratin, Melannin, Wrinkle under Eyes and Color Values between Test Groups after Experiment
(**p < 0.01)
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