Người thực hiện: NGÔ PHƯƠNG THANH - 618H0197 NGUYỄN VÕ THẢO UYÊN – 618H0267 PHAN THỊ TUYẾT NHI – 618H0175 Nhóm: S5_N6 Khoá: 22
THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021
BÀI 4: KIỂM NGHIỆM Staphylococcus aureus I. CƠ SỞ LÝ THUYẾT 1. Định nghĩa: S. aureus là vi khuẩn hiếu khí hoặc khị khí tùy ý, gram (+), hình cầu, có coagulase (+), DNase (+), phosphatase (+), lên men và sinh acid từ mannitol, trehalose và sucrose. Tất cả các dòng S. aureus đều mẫn cảm với Novobiocine, tăng trưởng trong môi trường có 15% NaCl, 1 số dòng làm tan máu trên môi trường thạch máu. Đường kính vòng tan máu phụ thuộc vào từng chủng nhưng đều nhỏ hơn đường kính khuẩn lạc. Hầu hết các dòng đều tạo sắc tố vàng sau 1-2 ngày nuôi cấy ở nhiệt độ phòng, tạo độc tố enterotoxin trong môi trường có nhiệt độ trên 15oC. S. aureus phân bố khắp nơi nhưng chủ yếu được phân lập trên da, màng nhày của người và động vật máu nóng. Chúng có thể nhiễm vào thực phẩm thông qua con đường tiếp xúc với người thao tác trong quá trình chế biến. 2. Nguyên tắc Staphylococcus aureus được xác định dựa trên đặc điểm tăng trưởng trên môi trường phân lập và phản ứng đông huyết của các dòng thuần từ các khuẩn lạc đặc trưng trên môi trường phân lập. II. NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT, DỤNG CỤ THÍ NGHIỆM 1. Rau muống 6. Máy dập mẫu 2. Mannitol Salt Broth 7. Huyết tương thỏ 3. Brain Heart Infusion 8. Petri 4. Nước muối sinh lý 9. Ông nghiệm 5. Baird Parker Agar (BPA) III. QUY TRÌNH THÍ NGHIỆM
Cấy 2mL dịch mẫu vào
8mL môi trường MSB, trộn đều
Ủ 37oC trong 24h
Giải thích quy trình: Hình 3.1: Mẫu rau muống trước và sau khi được đồng nhất bằng máy dập mẫu
Hình 3.2: Môi trường MSB (+)
Hình 3.3: Huyết tương thỏ
IV. KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN Kết quả cấy phân lập trên môi trường BPA sau 24 giờ.
Hình 4.1: S.aureus trên môi trường phân lập BPA
a) Nhận xét: Khuẩn lạc đặc trưng của S. aureus trên môi trường BPA có màu đen nhánh, sáng, tròn, lồi, đường kính khoảng 1mm. b) Biện luận kết quả: Trên môi trường BPA khuẩn lạc đặc trưng của S.aureus có màu đen nhánh (do tụ cầu sinh tổng hợp coagulase), bóng, lồi, đường kính 1mm. Nhưng kết quả thí nghiệm chỉ xuất hiện khuẩn lạc có màu đen nhánh, bóng, lồi ,không có sự xuất hiện của vòng sáng xung quanh khuẩn lạc có thể do vi khuẩn không sinh tổng hợp lecithinase và không tạo nên vòng sáng xung quanh các khuẩn lạc. Hình 4.2: Khuẩn lạc sau khi cấy vào huyết tương thỏ c) Kết luận: Có sự xuất hiện của S. aureus khi có phản ứng đông huyết.