Revisar 1

Doi: 10.4274 / vhd.36036

Revista de hepatitis viral 2015; 21 (1): 1-7

Virus de la hepatitis B: biología y ciclo de vida

Hepatit B Virüsü: Biyolojisi ve Yaşam Siklusu

Neşe İNAN 1, Fehmi TABAk 2

1 Istanbul BilimUniversity Faculty of Medicine, Department of Microbiology, Estambul, Turquía

2 Universidad de Estambul Facultad de Medicina Cerrahpaşa, Departamento de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica, Estambul, Turquía

RESUMEN
El virus de la hepatitis B (VHB) sigue siendo una de las principales causas de la
enfermedad hepática y aumenta el riesgo de desarrollar hepatitis crónica, cirrosis y
carcinoma hepatocelular como complicaciones tardías. El VHB es un virus de ADN
parcialmente bicatenario que pertenece a la familia de virus Hepadnaviridae. El
genoma del VHB contiene un ADN circular covalentemente cerrado (cccDNA) pequeño
(3,2 kb) que se transcribe para generar cuatro transcripciones conocidas (3,5 kb, 2,4 kb,
2,1 kb y 0,7 kb de tamaño). Estas transcripciones están codificadas para producir
polimerasa, HBcAg, HBeAg, HBsAg (proteínas de superficie L, M, S) y HBx que tienen
funciones definidas en el ciclo de vida del VHB y la lesión hepática. Actualmente, los
tratamientos disponibles para la hepatitis B crónica son las monoterapias con
interferón (IFN) (IFN- α y Peg-IFN- α) o
análogos de nucleos (t) ide (lamivudina, adefovir, telbivudina, entecavir y tenofovir).
Ninguno de los medicamentos aprobados actualmente es curativo para la infección por
VHB, ya que rara vez logran la erradicación del virus. Se necesitan nuevos agentes
anti-VHB dirigidos a diferentes moléculas implicadas en la infección y la replicación del
VHB para lograr tratamientos curativos. Comprender la biología y el ciclo de vida del
VHB en detalle es de vital importancia para el desarrollo de nuevos agentes anti-VHB
para identificar posibles objetivos futuros para los medicamentos. El objetivo de esta
revisión fue destacar la replicación y el ciclo de vida del VHB.
ÖZET
Hepatit B virüsü (HBV) hala karaciğer hastalığının başlıca
nedenlerinden biridir ve uzun dönemde görülen komplikasyonlar
olan kronik hepatit, siroz ve hepatosellüler karsinomanın gelişme
riskini arttırır. HBV kısmi çift-sarmallı Hepadnaviridae ailesine ait bir
virüstür. HBV genomu bilinen 4 farklı transkripti oluşturan 3,2 kb'lık
süpersarmal yapısında kovalent bağlı kapalı sirküler DNA (cccDNA) 'yı
içerir. Bu transkriptler HBV yaşam siklusunda ve karaciğer hasarında
belirli rol oynayan polimeraz, HBcAg, HBeAg, HBsAg (L, M ve S yüzey
proteinleri) ve HBx proteinlerini sentezletirler. Günümüzde kronik
hepatit B tedavisi için interferon tedavisi (klasik IFN - α ve PegIFN- α) veya
nükleoz (t) id analogları (lamivudin, adefovir, telbivudin, entekavir ve
tenofovir) kullanılmaktadır. Bu onaylı ilaçların hiçbirisi, nadiren
virusun eradikasyonuna yol açtıklarından, HBV enfeksiyonu için
küratif değildirler. HBV enfeksiyonu ve replikasyonunda yer alan
farklı molekülleri hedefleyen yeni anti-viral ajanlara ihtiyaç vardır.
Gelecek ilaç hedeflerinin belirlenmesi, yeni sınıf anti-viral ilaçların
geliştirilmesi için HBV biyolojisi ve yaşam siklusunu anlamak kritik
önemtaşımaktadır. Bu derlemede amaçHBV replikasyonu ve yaşam
siklusunu vurgulamaktır.
Anahtar Kelimeler: Biyoloji, VHB, hepatitis B virüsü, yaşam-siklusu,

Palabras clave: Biología, VHB, virus de la hepatitis B, ciclo de vida, replicación

replikasyon

Conflicto de intereses: Los autores no informaron ningún conflicto de intereses relacionado Çıkar çatışması: Yazarlar bu makale ile ilgili olarak herhangi bir çıkar
con este artículo. çatışması bildirmemişlerdir.

Introducción desarrollo de vacunas y diagnósticos de virus modernos en los años

Después de que el premio Nobel Blumberg descubriera un nuevo antígeno
llamado antígeno de Australia (AuAg) en muestras de suero de aborígenes
australianos en 1963, AuAg se convirtió en el primer marcador específico de
hepatitis viral. La hepatitis B viral se convirtió en una fuerza impulsora de la
siguientes (1). El virus de la hepatitis B (VHB) es una de las principales causas
de la enfermedad hepática y puede provocar una inflamación aguda y
crónica del hígado (2). El VHB puede causar complicaciones tardías como
hepatitis crónica, cirrosis y carcinoma hepatocelular; por tanto, sigue siendo
uno de los importantes problemas de salud mundial (3). Se estima que

Dirección para la correspondencia: Neşe İnan MD, Facultad de Medicina de la Universidad de Estambul Bilim, Departamento de Microbiología, Estambul, Turquía

Teléfono: +90212336 55 73 Correo electrónico: neseurdogan@yahoo.com Recibió: 03.12.2014 Aceptado: 19.03.2015

Revista Viral Hepatitis, publicada por Galenos Publishing.
2 İnan y col.
Virus de la hepatitis B: biología y ciclo de vida

todavía hay 240 millones de portadores crónicos del VHB en todo el mundo y
cada año se producen más de 620.000 muertes por sus complicaciones,
como la cirrosis o el carcinoma hepatocelular (1). Aproximadamente la mitad
de la población mundial vive en áreas endémicas del VHB y la
seroprevalencia del antígeno de superficie de la hepatitis B (HBsAg) es
superior al 8% (4). Sin embargo, la prevalencia de la infección por VHB varía
entre las distintas regiones de Turquía (3,5-6,8%), que se encuentra en el
área endémica intermedia con una tasa de seropositividad total de HBsAg
del 4% (5).
Hoy en día, el interferón convencional α ( IFN), interferón pegilado α ( Peg-IFN) y
nucleos (t) ideanalogs son agentes aprobados para el tratamiento de la hepatitis B
crónica. Mientras que el IFN tiene efectos antivirales, antiproliferativos e
inmunomoduladores, análogos de nucleósidos (lamivudina, entecavir, telbivudina) y
análogos de nucleótidos (adefovir, tenofovir) inhiben la ADN polimerasa del VHB y
provocan la terminación de la cadena (6). Aunque suprimen la replicación del VHB,
reducen la inflamación del hígado e inducen la remisión de la enfermedad hepática,
ninguno de los fármacos aprobados actualmente es curativo para la infección por VHB,
ya que rara vez logran la erradicación del virus (6,7). Se necesitan nuevos agentes
anti-VHB dirigidos a diferentes moléculas involucradas en la infección y la replicación del
VHB para lograr tratamientos curativos (8).
Es esencialmente importante comprender la biología y el ciclo de vida del VHB
en detalle para desarrollar nuevas clases de agentes anti-VHB a fin de identificar
posibles objetivos futuros de fármacos. Genotipos del VHB.
El VHB pertenece a la familia Hepadnaviridae y con sus características excepcionales,
similares a los retrovirus; se replica a través de un intermedio de ARN y puede integrarse en el
genoma del hospedador. De esta manera, estas características únicas del ciclo de replicación del
VHB mantienen la persistencia de la infección por VHB en los hepatocitos (9). Hay 10 genotipos
diferentes de VHB (AJ), que se basan en más del 8% de diversidad genética y se dividen en
no son infecciosos (9,14). Por otro lado, la partícula Dane es
una esfera de 42 nm que es un virión del VHB infeccioso
completo. La región central de la partícula de Dane contiene
una pequeña molécula de ADN circular, parcialmente
bicatenaria, y una ADN polimerasa viral rodeada de
nucleocápside. Los antígenos del núcleo de la hepatitis B
ensamblados (HBcAg) forman la nucleocápside que está
cubierta con una envoltura lipídica que contiene HBsAg (9). La
composición rica en colesterol de la envoltura lipídica es
necesaria para la infectividad viral (15). Durante la gemación de
la nucleocápside desde el retículo endoplásmico, la
nucleocápside induce una disposición ordenada y condensada
de las tres diferentes glicoproteínas de superficie: L (grande),
M (medio) y S (pequeña) en la membrana de la envoltura
(15,16) (Figura 1). .
Organización del genoma del VHB
La estructura de la nucleocápside del VHB contiene el genoma del VHB con
una longitud de 3,2 kilobase (kb) y una molécula de ADN circular relajado
parcialmente bicatenario (ADNr) (15,16). La nucleocápside está formada por la
composición de 240 proteínas de la cápside viral con 27 nm de diámetro en una
estructura icosaédrica, y contiene una única copia del ADN del genoma viral y la
enzima polimerasa viral unida covalentemente al extremo 5 'de la cadena negativa
(9,16). Algunas proteínas celulares, incluidas las proteínas quinasas, también están
empaquetadas en la estructura de la nucleocápside (16). Una de las características
únicas del genoma del VHB es la estructura asimétrica de las dos cadenas. Aunque
la cadena negativa tiene la longitud del genoma, la cadena positiva
complementaria puede tener diferentes longitudes (14).

subgenotipos si la diversidad genómica está entre el 4% y el 8%. Los genotipos y subgenotipos

del VHB tienen patrones de distribución geográfica específicos (10). Se ha demostrado que el

curso natural de la infección por VHB, el desarrollo de HCC, la seroconversión de HBeAg, el

pronóstico y los resultados clínicos de las enfermedades hepáticas, así como la respuesta al

tratamiento antivírico, difieren según los genotipos y subgenotipos del virus (10,11). Se ha

informado que existía una relación de genotipos con mutaciones del promotor del núcleo y del

promotor del núcleo basal (12). Hubo diferencias patogénicas muy importantes entre los

genotipos del VHB, por ejemplo; una infección aguda con los genotipos A y D progresó con más

frecuencia a una infección crónica que otros genotipos. Se ha detectado que la infección crónica

por los genotipos C y D tuvo mayores tasas de progresión a enfermedad hepática avanzada y

CHC que los genotipos A y B. Sin embargo, los genotipos C y D tuvieron tasas de respuesta más

bajas a la terapia basada en IFN que los genotipos A y B (12 ). Desafortunadamente, el genotipo D

es el genotipo predominante en pacientes con hepatitis B crónica en Turquía (13). por ejemplo; Figura 1. HBV (partícula Dane) y las partículas HBsAg filamentosas o
una infección aguda con los genotipos A y D progresó con más frecuencia a una infección crónica esféricas. Aunque el tamaño de partícula de Dane se define como 42 nm, el
que otros genotipos. Se ha detectado que la infección crónica por los genotipos C y D tuvo diámetro hidrodinámico de la partícula de Dane es de 52 nm, incluidos los
mayores tasas de progresión a enfermedad hepática avanzada y CHC que los genotipos A y B. Sin dominios externos preS1 y preS2 (1)

embargo, los genotipos C y D tuvieron tasas de respuesta más bajas a la terapia basada en IFN

que los genotipos A y B (12 ). Desafortunadamente, el genotipo D es el genotipo predominante

en pacientes con hepatitis B crónica en Turquía (13). por ejemplo; una infección aguda con los

genotipos A y D progresó con más frecuencia a una infección crónica que otros genotipos. Se ha detectado que la infección crónica por los genotipos C y D tuvo mayores tasas de progresión a enfermedad hepática avanza

Estructura del VHB

Las partículas de Dane (42 nm), esféricas (20 nm) y filamentosas (22 nm) son tres
estructuras virales diferentes que se observaron en el suero de pacientes infectados por
el VHB mediante microscopía electrónica (9). Las tres partículas tienen un HBsAg común
en su superficie (14). Las partículas esféricas y filamentosas están compuestas de HBsAg
y lípidos derivados del hospedador sin genoma del VHB; así, ellos Figura 2. A. Organización del genoma del VHB y elementos reguladores
clave B. Transcripciones y sus proteínas relacionadas del VHB (9)
 İnan y col.
Virus de la hepatitis B: biología y ciclo de vida
El genoma viral contiene marcos de lectura (ORF) superpuestos y abiertos para la
codificación S, C, P y X de cuatro proteínas diferentes (9). La estructura
superpuesta de las regiones codificantes facilita el uso del genoma del VHB con
una eficiencia del 150% (10) (Figura 2).
El resumen de 4 regiones ORF y proteínas codificadas se proporciona a
continuación:
• Gen PreS1 / PreS2 y S (códigos para 3 proteínas de la envoltura, a
saber, L-, M- y S)
• Gen precore / core (códigos para la proteína de la nucleocápside; HBcAg y
proteína no secretada estructuralmente; HBeAg)
• Gen de la polimerasa (transcriptasa inversa, ARNasa H y dominios
de proteína terminal)
• Gen X (códigos para la proteína X reguladora pequeña)
Aunque los genes S y C tienen un único ORF, pueden
sintetizar productos génicos funcionalmente diferentes,
porque tienen diferentes codones de inicio (9,14). Los ORF de S
y C se extienden a las regiones preS (preS1 y preS2) y preC en
el extremo 5 ', respectivamente. En las regiones superpuestas,
hay reguladores que son 4 promotores (preC / C, preS1 / S y X)
y 2 potenciadores, y permiten la expresión de 7 proteínas
diferentes transcritas en diferentes codones por al menos 5
ARNm diferentes con extremos no unidos (17) . Dos regiones
repetidas con 11 bps, llamadas repetición directa 1 (DR1) y
DR2, están ubicadas en los extremos 5 'de las cadenas
positivas y negativas, y desempeñan un papel fundamental en
la replicación del ADN viral. Son necesarios para la síntesis de
ADN de cadena específica (9,18). Dos potenciadores, indicados
como Enh1 y Enh2, proporcionan expresiones específicas del
hígado de productos génicos virales (9).
La región S ORF, que codifica proteínas de superficie viral (HBsAg), se
divide estructural y funcionalmente en regiones preS1, preS2 y S con 3
codones de inicio AUG diferentes (2). Mientras que el L HBsAg, que tiene el
papel principal en la unión del receptor, se sintetiza como resultado de la
traducción del ARNm preS1 que contiene los dominios preS1, preS2 y S; Las
proteínas M y S HBsAg se sintetizan como resultado de traducciones de
ARNm de preS2 / S y ARNm de S (14, 17, 18, 19).
HBsAg es la proteína de la envoltura glicolizada del virión del VHB. Al
igual que la presencia de HBsAg en viriones maduros, los portadores de HBV
contienen una cantidad excesiva de HBsAg esférico y tubular particular no
infeccioso en su suero. Estas partículas subvirales se secretan en exceso
(100-100.000 pliegues) en comparación con los viriones maduros (19). Se ha
informado que la razón de la síntesis de partículas esféricas y tubulares, que
son miles de pliegues más que las partículas danesas, podría ser una trampa
para el sistema inmunológico, por lo que se desarrollaría una infección
crónica (1,14).
El HBsAg también se sintetiza a partir de secuencias virales integradas
coincidentemente en el genoma de la célula huésped. La cantidad de ADN del VHB
no solo indica la replicación viral, sino que también proporciona información
complementaria diferente del nivel de ADN del VHB. El HBsAg no solo se produce
por traducción de ARNm de cccDNA, sino también a partir de ADN integrado. Esta
condición puede ayudarnos a comprender el estado infeccioso del paciente de
manera más completa (19).
Las proteínas de la envoltura S, M y L son diferentes transmembrana
claves que comparten el mismo dominio C-terminal, pero diferentes dominios
N-terminales que son pertinentes para la proteína S (20). Sobre de HBV
3
Las proteínas son proteínas de membrana integrales, que anclan la membrana
celular mediante el dominio S, que existe en las 3 proteínas de superficie, y se
encuentra en la región de N-glicosilación de Asn-146. En el dominio preS2, hay una
región de glicosilación de Asn-4 que se usa en MHB, pero no en L HB (2). La región
S codifica la proteína S, que es fundamental para la unión y la infectividad del
virus. El ácido mirístico se une a la glicina en el extremo terminal N preS1 de la
proteína L (18) (Figura 3).
La región C ORF tiene regiones prenúcleo y central que codifican
HBcAg (proteína central estructural de la nucleocápside) y HBeAg
(proteína nucleocápsida soluble) según el inicio de la traducción en las
regiones prenúcleo o central. La proteína central tiene una
característica intrínseca de autounión y forma una estructura similar a
una cápside, y C-terminal con actividad de unión al ARN es rica en
arginina y también tiene grupos de aminoácidos bastante básicos
(9,18). Mientras que el ORF pre-núcleo codifica la proteína pre-núcleo
que causa la secreción de HBeAg por modificación postraduccional,
también causa la secreción de ARNm pregenómico, núcleo y
polimerasa (14,18). Aunque no es necesario para la replicación viral, el
HBeAg puede actuar como inmunotolerante para el desarrollo de una
infección persistente. Si el nivel de HBeAg disminuye de forma natural
por sí solo o durante el tratamiento,
La región PORF codifica la polimerasa, que es una proteína grande, y se divide
en cuatro dominios funcionales (9). Al mismo tiempo, el ARNm pregenómico actúa
como molde para el genoma del ADN viral de la progenie sintetizado para la
replicación del virus mediante transcriptasa inversa. La polimerasa del VHB es una
enzima multifuncional que actúa en la encapsidación, al inicio de la síntesis de la
cadena de ADN negativa, en la transcripción inversa y en la destrucción del ARN
pregenómico. La proteína polimerasa del VHB está constituida por el dominio de
la proteína terminal (responsable del inicio de la replicación), el dominio
espaciador (se desconoce su función), el dominio de la transcriptasa inversa (ADN
polimerasa dependiente de ARN) (es responsable de la transcripción y replicación
del ARN viral) y la ARNasa. Dominio H (rompe el ARN pregenómico) (18).
La región XORF codifica la proteína HBxAg como resultado de la traducción de
XmRNA. La proteína HBx tiene un papel en la replicación del VHB, incluida la
señalización, la activación transcripcional, la reparación del ADN y la inhibición de
la degradación de la proteína (9,18). Además, se ha informado que el HBxAg era
necesario para la infección por VHB productiva in vivo, además de que contribuye
al potencial oncogénico del VHB (9).
Figura 3. Estructura esquemática de las proteínas de superficie del VHB (modificado de la
referencia 2)
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Virus de la hepatitis B: biología y ciclo de vida
Replicación del VHB / ciclo de vida del VHB
1- Encuadernación reversible (adjunto): La entrada viral juega un
papel importante en el tropismo hepatocelular y la especificidad de especie,
y es el primer paso en la interacción con el huésped. La entrada viral es el
objetivo clave de los anticuerpos neutralizantes del huésped para la
respuesta inmunitaria protectora y el desarrollo de vacunas (15). El primer
paso para iniciar la infección productiva se inicia mediante la unión
reversible de baja afinidad entre los receptores preS1 específicos de
hepatocitos en la membrana externa de la partícula madura de Dane y los
proteoglicanos de heparán sulfato en los hepatocitos (8,14).
2- Unión irreversible con receptor NTCP específico: Dominio PreS1
de la proteína de la envoltura L es el factor clave en la unión al receptor (20).
Este receptor recién definido llamado NTCP (polipéptido cotransportador de
taurocolato de sodio) es el receptor de entrada (15). Yan y col. mostró que el
NTCP, que tenía un papel en el transporte de sales biliares en el cuerpo, se
expresaba principalmente en el hígado, y transportador transmembrana
múltiple, como un receptor de entrada funcional del VHB. La infección por
VHB se inhibió en células hepáticas de humanos y arbustos (Tupaia
belangeri chinensis) silenciando NTCP, las células de hepatocarcinoma no
susceptibles se volvieron susceptibles a infecciones por VHB después de la
expresión exógena de NTCP. También podrían infectar las células HepG2,
que no eran susceptibles a la infección por VHB, pero que se usan
comúnmente en estudios hepáticos, mediante el uso de NTCP obtenido de
humanos y de los árboles (20). NTCP también se conoce como SLC10A1
(familia de portadores de solutos 10A1), que es el miembro de la familia de
transportadores sólidos (SLC10). La familia SLC10 tiene 7 miembros como
SLC10A1-7 (8). El NTCP se encuentra principalmente en la membrana del
hepatocito baseolateral y tiene un papel importante en el flujo de sales
biliares conjugadas que forman la circulación portal hacia el hígado (8). El
L-HBsAg del virus se une de manera específica e irreversible al receptor
preS1 específico del virus y este paso requiere la activación del virus, lo que
da como resultado la exposición del N-terminal miristoilado de la proteína L
(21). Se sabe que la región de 2-48 aa de preS1 de la proteína L-HBs tiene el
papel principal en el desarrollo de la infección por VHB (8,20). Se ha
demostrado que los anticuerpos monoclonales anti-preS1 podrían
neutralizar la infección por VHB in vivo al bloquear la unión del VHB a la
célula (22). De manera similar, también se ha demostrado que la infección
por VHB puede prevenirse mediante péptidos sintéticos, tales como
Myrcludeks de anticuerpos anti-preS1 que pueden imitar esta región (8,23).
Aunque el papel exacto de la miristoilación aún no está claro, podría
aumentar el reconocimiento del receptor mediante la inserción de la cadena
de acilo en las membranas del complejo del receptor (23). Recientemente, la
cadena ligera de ferritina (FTL) y el antígeno 1 del carcinoma de células
escamosas (SCCA1) se han definido como correceptores en la unión celular
del VHB y la entrada a los hepatocitos (18).
3- Entrada (penetración): Se ha propuesto que las vías de entrada de los virus
tienen diferentes mecanismos tanto por endocitosis (3a) como por fusión en la
membrana plasmática de la envoltura del virus (3b) (21). Después de unirse a
receptores específicos, el virión ingresa al hepatocito a través de factores del
huésped por endocitosis (18). Se ha demostrado que la endocitosis mediada por
caveolina, clatrina o macropinocitosis puede ocurrir según el sistema
experimental y los tipos de células utilizados durante la internalización viral (8,18).
La cápside viral ingresa al citoplasma cuando la envoltura viral se fusiona con la
membrana plasmática o la membrana del endosoma después de la endocitosis
(16,21). El desarrollo de la infección por VHB depende de la expresión de factores
del huésped como Rab5 y Rab7 (GTPasas) que actúan en la biogénesis del
endosoma (18).
4- Liberación de nucleocápside viral: La nucleocápside viral que contiene
rcDNA bicatenario parcial, que está unido covalentemente a la polimerasa,
se libera en el citoplasma antes de llegar al núcleo del hepatocito a través de
la endocitosis del VHB (21) (Figura 4).
5- Transporte de nucleocápsidas: El transporte de la cápside es
facilitado por su interacción con los microtúbulos celulares en el citoplasma
(16). La cápside lleva su ADNrc al núcleo a través del complejo de poros
nucleares (NPC) (18). Este transporte se produce a través de la relación entre
la señalización de localización nuclear (NLS) en el terminal C de la proteína
de la cápside y los receptores de importación nuclear (importin- α y β) ( 18). La
acumulación de nucleocápside transportada a lo largo de los microtúbulos
en la membrana nuclear aumenta la interacción entre la NCP y las proteínas
adaptadoras (21). Además, la localización nuclear parece depender del ciclo
celular. Se cree que la exposición al NLS, que induce cambios estructurales
en la cápside, depende y está regulada por la maduración del genoma (16).
6- Liberación del genoma: Después de que la nucleocápside queda atrapada
en la canasta de NPC, se completa el desmontaje de la cápside y se libera ADNrc
en el nucleoplasma (16,21).
7- reparación de ADNrc: La polimerasa viral completa la cadena positiva
de rcDNA. La polimerasa presente en el extremo 5 'de la cadena negativa se
usa para la síntesis de la cadena positiva. El cebador de ARN corto se utiliza
para la síntesis de la hebra positiva de ADN. Tanto la polimerasa como el
cebador de ARN corto se eliminan a través de enzimas celulares del huésped
como las proteinasas (21). Una vez que se completa la cadena positiva, se
acopla con la cadena negativa y se unen covalentemente en ambos
extremos formando una molécula superenrollada circular (3).
8- Formación de cccDNA (ADN circular covalentemente cerrado): Ambos ADN
las cadenas se unen covalentemente (ligadura de ADN). La molécula de
cccDNA contiene proteínas similares a histonas y no histonas, y está
organizada en una estructura similar a la cromatina, como cuentas
alineadas en una cuerda. Se denominan minicromosomas que sirven como
plantilla para la transcripción de todos los ARNm virales (14,21).
9- Transcripción: cccDNA utiliza todos los mecanismos de transcripción
celular para la producción de proteínas para realizar toda la síntesis de ARN
viral y la replicación viral. El evento de transcripción está regulado por
factores de transcripción del huésped (CREB, STAT1, STAT2, etc.), enzimas
modificadoras de cromatina (PCAF, HDAC1, etc.), factores nucleares de
hepatocitos y factores virales como el núcleo, la proteína X reguladora (3,21)
. Regula la expresión génica viral al interactuar con los promotores virales de
las 4 principales regiones ORF (21). Se ha informado que la transcripción
está regulada por mecanismos epigenéticos como la metilación del ADN del
ADNccc, la acetilación de histonas, etc. (3).
Figura 4. Entrada del VHB (modificado de la ref 21)
 İnan y col.
Virus de la hepatitis B: biología y ciclo de vida
10- Exportación del ARN nuclear: Todos los 4 ARNm principales utilizan un
señal de poliadenilación única. La estabilización, el procesamiento y el transporte
nuclear de los ARNm virales se producen a través de factores del huésped (21). Se
ha demostrado que la proteína relacionada con el tipo celular / factor de
exportación nuclear-1 (TAP / NFX1) y HBcAg desempeñan un papel en el
transporte del ARN pregenómico del VHB al citoplasma (18) (Figura 5).
11- Traducción: Mientras que la proteína central y la polimerasa viral se
sintetizan como resultado de la traducción del ARN progenómico; Las proteínas
reguladoras X y las proteínas de la envoltura L, M y S se forman mediante la
traducción del ARN subgenómico (18).
12- Montaje de nucleocápside: Formación de proteínas HBcAg
nucleocápside se conservan en diferentes genotipos. El HBcAg contiene 183
o 185 aa según el genotipo y tiene dos partes. Según el genotipo, la primera
parte contiene un N-terminal con 149 aa o 151 aa, suficiente para la
autounión de la cápside. La segunda parte se conoce como dominio de
protamina C-terminal con 34 aa, y es rica en arginina, por lo que
proporciona carga positiva para el dominio. El dominio de protamina es
esencial para el empaquetamiento del complejo pol pregenoma / VHB (2). El
PgRNA es la plantilla para la generación de nuevos genomas de ADN
mediante transcripción inversa (24). La replicación requiere la encapsidación
de pgRNA por la proteína del núcleo. Este procedimiento se inicia mediante
la unión coordinada de la estructura secundaria de tallo-bucle, llamada
polimerasa viral épsilon ( ε), y la encapsidación se desencadena para la
formación de nucleocápside viral (14). La formación de la nucleocápside del
VHB comienza tan pronto como el pgRNA forma complejos con la
polimerasa del VHB y los dímeros del HBcAg. El paquete eficaz de pgRNA
requiere la fosforilación del C-terminal de la proteína central. Mientras que
el ADN maduro que contiene la nucleocápside se forma a partir de la
nucleocápside que contiene ARN inmaduro, se producen desfosforilación y
cambios conformacionales (2).
13- Transcriptasa inversa: Como la polimerasa del VHB se une a la región
épsilon del pgRNA, actúa como cebador proteico para la síntesis de la cadena de
ADN negativa a la polimerasa. A medida que el pgRNA actúa como molde para la
síntesis de la cadena de ADN negativa, la nueva cadena se alarga. Una vez
completada la síntesis de la cadena de ADN negativa, la plantilla de pgRNA se
descompone mediante el dominio H de la polimerasa ribonucleasa (RNAsa). La
cadena negativa completa se usa como plantilla para la síntesis de cadena
positiva. La síntesis de cadena positiva rara vez se completa y se encuentra en
diferentes longitudes en el virión de HBV. El paso de maduración se completa en el
citoplasma cambiando de ARN a ADN dentro de la nucleocápside. Aunque el VHB
se replica con el paso intermedio de ARN, la integración del genoma del
hospedador no es necesaria para el ADN del VHB para
Figura 5. VHB en el núcleo (modificado de la ref 21)
5
replicación viral (2,14,21). Sin embargo, el ADN del VHB integrado al genoma
humano se determina en todos los casos de CHC relacionado con el VHB (23).
14- Vuelva a importar el ADN que contiene la nucleocápside madura al núcleo para
formar una molécula de ADNc adicional (14A) o secreción después de ganar
su sobre (14B): La envoltura de la nucleocápside madura depende de la
presencia de proteínas de superficie viral en el medio. Especialmente la
proteína L es necesaria para que la nucleocápside gane su envoltura. Se ha
demostrado que la nucleocápside se envía al núcleo para aumentar la
amplificación del genoma viral si la proteína L está ausente (2). Por ejemplo,
como el nivel de antígeno de superficie es bajo en la fase inicial de la
infección, las nucleocápsidas recién sintetizadas se transportan
directamente al núcleo y mantienen la reserva de cccDNA (17). Se ha
propuesto que la proteína L juega un papel en el mecanismo de
retroalimentación negativa para suprimir la amplificación del cccDNA (21).
Las proteínas de la envoltura se agregan a la membrana del retículo
endoplásmico después de la traducción y brotan en la luz del retículo
endoplásmico. Se liberan como partículas de envoltura filamentosas y
esféricas subvirales no infecciosas o partículas danesas infecciosas si la
célula ha ganado una envoltura de ADN que contiene nucleocápside (21). La
gemación y la salida del VHB dependen de las funciones de la vía del cuerpo
multivesicular (MVB) que tiene la capacidad única de generar vesículas
intraluminales. Luego, los MVB se fusionan con el lisosoma o la membrana
plasmática para la liberación de vesículas intraluminales. La función de MVB
depende del complejo de clasificación endosómico requerido para el
sistema de transporte (ESCRT), Vps4 ATPasa y proteínas asociadas (25).
Durante la síntesis de proteína L, los dominios preS1 están en contacto con
el citoplasma y están miristoilados. En algunos pasos, la translocación puede
ocurrir a lo largo de la membrana después de envolver la nucleocápside
mediada por preS (11,21) (Figura 6).
15- amplificación de cccDNA: El cccDNA, que es la forma circular unida
covalentemente del cromosoma viral, es necesario para el ciclo de vida y la
persistencia de la infección. Muchas funciones celulares del virus y del hospedador
participan en la síntesis de cccDNA a partir del DNA viral (16). El cccDNA está
presente en forma de minicromosomas y se une a las proteínas histonas en el
núcleo del hepatocito infectado. El ADN episomal es persistente y no está
integrado en el genoma de la célula huésped (14,17). La mayoría de cccDNA en el
núcleo de los hepatocitos se origina a partir de nucleocápsidas recién sintetizadas.
Aunque la formación de cccDNA y el tamaño de la reserva de cccDNA están
controlados por algunos factores del huésped terminal viral que aún no están
completamente identificados, se ha informado que factores inmunológicos,
virológicos, transcripcionales y epigenéticos regulan el cccDNA (3,17,21). cccDNA,
que está presente como un ADN episomal intacto que no está integrado en el ADN
del huésped en el núcleo de los hepatocitos infectados, codifica 4 regiones ORF
superpuestas y actúa como molde para todas las transcripciones de ARNm viral en
la replicación del VHB (14,18). El ARN pregenómico también es un derivado del
ADNcc, y el ADN del VHB se sintetiza a partir del ARN pregenómico mediante
transcriptasa inversa (18). Se observa que se acumulan de 1 a 50 moléculas de
cccDNA para una célula (21). El cccDNA intranuclear está regulado por el equilibrio
entre eventos como el transporte intracelular, la formación de la envoltura y la
liberación de nucleocápside al exterior (17). El factor básico en el fracaso del
tratamiento de la hepatitis crónica con antivirales es que el cccDNA es bastante
estable (14,17). Como el cccDNA permanece estable en el hepatocito, actúa como
plantilla para todos los mRNA virales transcritos por la RNA polimerasa II celular,
por lo que se convierte en una fuente estable para las nuevas generaciones de
virus (14,23). Por lo tanto, el cccDNA tiene un papel importante en la interrupción
del tratamiento antiviral, la reactivación de la enfermedad después de la
inmunosupresión, el trasplante y la resistencia a los medicamentos (14). Sin
embargo, ninguno de los tratamientos actuales aprobados
6 İnan y col.
Virus de la hepatitis B: biología y ciclo de vida
proporcionan la eliminación del cccDNA existente dentro del núcleo del hepatocito
infectado (11). Si los mutantes resistentes evolucionaron mediante el uso de
nucleos (t) ide análogos orales, se archivan en cccDNA, entonces pueden aparecer
múltiples virus resistentes a los medicamentos. Aunque se sabe que el VHB no es
citopático en sí mismo, tanto los mecanismos citosólicos como los no citosólicos
son importantes en la eliminación del cccDNA (11,14). Mientras que en los
mecanismos citosólicos, los hepatocitos infectados mueren y se cambian por
nuevos hepatocitos no infectados; en los mecanismos no citosólicos, las citocinas
antivirales regulan negativamente la expresión del gen del VHB y el VHB se
elimina de los hepatocitos sin muerte celular (14). Aunque los inhibidores de la
polimerasa del VHB no tienen efectos directos sobre el cccDNA, la aparición de
menos nucleocápsidas en el grupo debido a la inhibición de la síntesis de ADN
viral en el citoplasma puede explicar la disminución en el nivel de cccDNA (21).
16- Secreción de ADN que contiene nucleocápsidas maduras y subviral.
partículas: La nucleocápside madura que contiene ADN se libera del
hepatocito como una partícula de Dane infecciosa después de ganar
membrana lipídica con proteínas HbsAg del retículo endoplásmico
(14,21). Las partículas de la envoltura subviral tubular y esféricas no
infecciosas se sintetizan en sangre 10 3- 10 6 pliegues más altos que en
virión, y no contienen nucleocápside (14,21) (Figura 7).
La investigación de la relación compleja entre las estructuras celulares virales
y del huésped es el tema más interesante de la biología del VHB, y tiene puntos
clave adicionales en el desarrollo de modalidades de tratamiento nuevas y más
efectivas para la hepatitis B crónica (24).
El VHB utiliza la transcriptasa inversa, que no tiene función de corrección de
pruebas, durante la síntesis de su copia de ADN. Por lo tanto, es naturalmente
propenso a errores, que pueden terminar con la evolución de genes rápidamente
mutantes. Las causas endógenas, como la eliminación inmunitaria del huésped, y
las causas exógenas, como la vacunación, la HBIg y los fármacos antivirales,
pueden provocar la aparición de mutantes de escape al provocar una presión de
selección en los virus que se replican rápidamente con una tasa de 10 11 virión /
día. La mezcla heterogénea de la población de VHB en las células huésped se
denomina "cuasiespecie" (26). La mutación del VHB pone en peligro tanto el
tratamiento como las tasas de éxito de la vacunación. Cada paso de la replicación
del VHB todavía se está investigando molecularmente para definir nuevos
objetivos de tratamiento, debido a problemas persistentes como la resistencia en
los tratamientos con análogos de nucleótidos, la determinación de virus mutantes
que escapan de la vacunación, la alta tasa de efectos secundarios en los
tratamientos basados en interferón y el bajo tratamiento. tasas de respuesta, etc.
Figura 7. Secreción de viriones del VHB (modificado de la ref 21)
Se han investigado las interacciones entre el VHB y las estructuras celulares
del huésped en todos los pasos de la replicación, incluida especialmente la
maduración, la unión y la gemación (25). Aunque nuestro conocimiento sobre los
factores celulares del huésped y su participación en la replicación del VHB, cuya
vacuna hemos tenido durante los últimos 30 años, sigue aumentando; Está claro
que estamos muy por detrás de la comprensión completa de la replicación del
VHB y la biología celular. Una mejor comprensión de cada paso de la replicación a
partir de la entrada del VHB en el hepatocito para su liberación, no solo fascinará a
las personas interesadas, sino que también proporcionará información invaluable
para definir futuras estrategias de tratamiento antivírico, nuevos indicadores
diagnósticos y predictivos.
Reconocimiento
Muchas gracias a la Dra. Süreyya Altunay por volver a dibujar las figuras (4-7).
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