２０１

６年 ４月　 中 成 药　 Ａｐｒ
ｉｌ　
２０１
６　

第３
８卷 第 ４期　 Ｃｈｉ
ｎｅｓｅ
　Ｔｒ
ａｄｉ
ｔｉｏｎａｌ
　Ｐａｔ
ｅｎｔ
　Ｍ ｅｄｉ
ｃｉｎｅ　 Ｖｏ１
．３８
　 Ｎｏ．４　

…　
（１）：１＿
５．　 ｈｙｐｅ
ｒｔｅ
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ｈｅｒ
ｏｓｃｌ
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ｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ　
Ｂｉｏｍｅｄ　Ｒｅ
ｓ，２０１
４，　
高丽娟 ，高 娟 ，胡耀 红 ，等．水蛭粉对 高脂血症 大 鼠动　 ２８（１）：２５－
３９．
　
脉粥样 硬化形 成过 程 的干预 机制 ［Ｊ］．中成药 ，２０１４，３６
　 Ｃｈｉ
ｓｔｉ
ａｋｏｖ　Ｄ　Ａ ． Ｓｏｂｅｎｉ
ｎ　Ｉ、
Ａ ． Ｏｒ
ｅｋｈｏｖ　Ａ　Ｎ． Ｖａｓｃｕｌａ
ｒ 　ｅｘｔ
ｒａ—
　

（９）：１
９６２—
１９６５．
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ｒ 　ｉ
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０１３，２１
　
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　 （６）：２７０－
２８８．
　
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ｏｌ，２０１
４，３
４（１
０）：２１
７５—
２１７９．
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Ｚｈａｎｇ　Ｊ， Ｃｈｅｎ　
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０１４， １
５（４）：
　
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ｈ　ｍｕｓｃｌ
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ｌ—　 ４４２－４５３．
　

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Ｐｈａｒ
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０１４，６３（３）：２３３－
２３９．
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ａｔｈｅ
ｒｏｓ
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ｓ［Ｊ］．ＢＭＢ　
Ｒｅｐ，２０１
４，４７（１）：
　 ２６８－２７５．
　

１－
７．　 盛晓赞 ，王树人 ．血管平滑肌 细胞移行及 表型转换 的分子　
Ｐｏｎｔｉ
ｃｏｓ　Ｍ ．Ｅｘｔ
ｒａｃｅｌｌ
ｕｌａｒ
　ｍａｔ
ｉｘ　ｓｙｎｔｈｅｓｉ
ｒ ｓ　ｉｎ　ｖａｓｃｕｌ
ａｒ　ｄｉ
ｓｅａｓｅ：
　 机制［Ｊ］．中国动脉硬化杂志 ，２００８，１６（１１）：９１
７－９２１．
　

肉豆蔻 八 昧胶 囊对 实 验动 物 心脏 的保 护作 用　
川　 吲　 …　
肖云 峰　 ，
　 李 文妍　，
　 王玉 华　
（１．天 津 中 医 药 大 学 ，天 津 ３００１
９３；２． 内蒙 古 医科 大 学新 药 安 全 评 价 研 究 中 心 ， 内 蒙 古 呼 和 浩 特　
０１０１１
０；３．内蒙古 自治 区人 民 医院药 学处 ， 内蒙 古 呼和 浩特 ０１
００１
７１；４． 内蒙古 医科 大 学 药 学院 ， 内蒙　
古 呼和 浩特 ０１
０１１０）
　

摘要 ：目的 探讨 肉豆蔻八 味胶囊 （肉豆蔻 、沉香 、木香 等 ）对 实验动 物心脏 的保护作 用 ，并与原 方散剂 比较药 效　
学差异 。方法 采 用常压缺氧模 型和盐酸异丙肾上腺素致心肌缺氧模型 ，记 录小 鼠缺氧死亡 时间 ，研究 受试药物对 小　
鼠耐缺氧 的作 用 ；测定 乳酸脱氢酶 （
ＬＤＨ）、肌酸激酶 （ＣＫ）、超氧化物歧化酶 （
ＳＯＤ）和丙二 醛 （ＭＤＡ） 等 内源性　
物质 的含有量 ，评价受试药 物对垂体后叶素引起大 鼠急性心肌缺血 的保护作用 ；采用 吸入氯仿并快速静 脉注射盐 酸肾　
上腺素复制家兔 急性 心律失常模型 ，观察受试药物对心律失常潜伏期和持续期 的影 响。结 果　 肉豆蔻八 味胶囊可 以显　
著提 高小 鼠耐 缺氧能力 ；改善 ＬＤＨ、ＣＫ、ＳＯＤ和 ＭＤＡ在体 内的水平 ，保护心肌受损 细胞 ；延 长心律失 常的潜伏 时间　
并缩短持续 时间。肉豆蔻八 味胶囊组与 肉豆蔻八 味散 对照 组 比较 ，没有显著 性差异 （
Ｐ＞０
．０５）。结论　 肉豆蔻八 味　
胶囊具有抗 缺氧 、保护心肌细胞及抗急性心律失常 的作用 ，且作用与原方散剂相 当。
　
关键 词 ：肉豆蔻八 味胶囊 ；肉豆蔻八味散 ；耐缺氧 ；急性心肌缺血 ；急性心律失常　
中 图 分 类 号 ：Ｒ２８
５．５
　 文 献 标 志 码 ：Ｂ　 文章 编 号 ：１
００１
—１５
２８（
２０１
６）０
４－０８
９８－
０５　
ｄｏｉ：１
０．３９６９／ｊ．ｉ
ｓｓｎ．１００１—
１５２８．２０１６．０４．０３９　 ・
　

肉豆蔻八 味胶囊 的处 方 由肉豆蔻 、沉 香 、木 香 、旋覆　 管疾病 。

　
花 、广枣 、丁香 、阿魏 、牦 牛心 ８味 药材组 成 。原 剂型 为　 肉豆蔻八 味胶囊是通 过改变散 剂制 备工艺 制成 的。在　
散剂 ，由蒙 医 大师 丹 必扎 拉 申最早 收 载 于 《金 色 柯 子 花　 散剂 中 ，肉豆蔻 等 ８味药材通过超微 粉碎 后 ，按 比例混合 ，
　
蕾》 中 ，后更名 为 《普济 方集》… ，目前 被 《内蒙古 蒙 药　 制成 散剂 ，每次服用 ６
　ｇ。在胶囊剂 中 ，牦牛心脏 以冻干粉　
制剂规范》第二 部收录。蒙医使用 该方 已有两 百多 年 的历　 入药 ，其 他 ７味药 材经提取 工艺得 到提 取物 。按 比例将 提　
史 ，临床主要用于治疗 心律失 常 、冠心 病和心 绞痛 等心 血　 取物与牦牛心脏冻干 粉混合 ，并加 入适 当辅料 ，制成 粒重　

收 稿 日期 ：２０１５－
０５　１
３　
基金项 目：国家 自然科学基金项 目　（８１
３６０６７８）；内蒙古 自治区科技计划项 目 （１
４０５１２５）；内蒙古 自治 区科技创新 引导奖励 资金项 目　
（２０１２１５
０２）
　
９８３一 ），男　 助理研究员 ，博士生 ，从 事中蒙药药 效物质基 础及药理 毒理 学研究 。Ｔｅ
作 者 简 介 ： 肖云 峰 （１ ｌ： （０４７１）６６５３１
５６，Ｅ－
　
ｍａｉ
ｌ： ｘｉ
ａｏｙｕｎｆ
ｅｎｇｔ
Ｍ ７２＠ １２６．ｃｏｍ　

￥通信作者 ：王玉华 （１
９５９一 ），女 （蒙 古 族 ），教 授 ，博 士 ，博 士生 导 师 ，从 事 中蒙 药药 效 物 质 基 础及 质 量 控 制 的研 究 。Ｔｅ
ｌ　
（
０４７１） ６６
５３１
５１，Ｅ－
ｍａｉ
ｌ：ｙｕｈｕ
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ｎｇ５９＠ １
６３．ｃ
ｏｒｎ　

８９８　
２０１６年 ４月　 中 成 药　 Ａｐｒ
ｉｌ　
２０１６　

第 ３８卷 第 ４期　 Ｃｈｉ

ｎｅｓ
ｅ　Ｔｒ
ａｄｉ
ｔｉｏｎａｌ
　Ｐａｔ
ｅｎｔ
　Ｍｅｄｉ
ｅｉｎｅ
　 Ｖｏ１
．３８　 Ｎｏ．４　

０．
３　ｇ的胶 囊 。
　 家兔饲养于普通环境 中，每笼 １只。
　
心律失常是 由于窦 房结异 常激 动 ，使信 号传导 阻滞 或　 实验动物 喂以内蒙 古大学实 验动物 中心 提供 的标准维　
传导异常所致 。心绞痛 是 由于冠状 动脉供 血不 足 ，使心 肌　 持饲料 ， 自由摄水 。在室温 １
９—２５℃ ，湿度 ４０
％ 一６
０％ 的　
暂时缺血 、缺氧所致 。冠 心病是 由于冠 状动 脉 内膜 附着 斑　 环境 中适应性饲养 １周后 ，开始试验 。
　
块 ，使心脏血流受阻 ，心 肌缺 血 、梗死 所致 。以上 病症 均　 所有 受 试 药 物均 用 ０．
５％ ＣＭＣ－
Ｎａ配 制 成 所需 剂 量 ，
　
与 肉豆蔻八味胶囊祛 “巴达干 ”、镇 “赫依 ”，燥 “协 日乌　 使受试药物均匀混悬 。
　
素”＿
２
　的功能 主治相关 联 。本实 验采 用经 典 的常压 缺 氧模　 １
．４．
２ 常压耐缺氧实验　 取 ７
２只小 鼠 ，随机分 为空 白　
型 、盐酸异丙 肾上腺 素致心 肌缺氧 模型 、垂 体后 叶素致 急　 对照组 、阳性对照组 （复方丹参滴丸 ）、肉豆蔻八 味胶 囊 ３
　
性心肌缺血模 型和氯仿 －
盐 酸肾上腺素致急 性心律失 常模型　 个剂量组 （低 、 中、高 ） 和 肉 豆 蔻 八 味 散 对 照 组 ，共 ６
　
对 肉豆蔻八 味胶囊 的药效 学进行研 究 ，并 与原方 散剂 进行　 组 ，每 组 １
２ 只。空 白 对 照 组 灌 胃 给 予 ０．
５％ ＣＭＣ－
Ｎａ　
对 比，初步探讨该方胶囊对 实验动物心脏的保护作用 。
　 ２
０　ｍＬ／（
ｋｇ ・ｄ）；阳性 对 照 组 灌 胃给 予 复 方 丹 参 滴 丸　
１ 材 料及 方 法　 ０
．１０
　ｇ／（ｋ
ｇ・ｄ）（临床等效量 ）；肉豆蔻八 味胶囊 ３个剂 量　
１
．１ 动物 家兔 ，４
８只 ，雌 雄各 半 ，体质量 ２
．０—２
．４　
ｋｇ，
　 组 （
低 、中、高 ） 的给药剂量分别 为 ０．
２３、０
．４６、０．
９２　
ｇ／　
普通级 ，由北京维 通利华 实验动物 技术 有 限公 司提 供 ，实　 （ｋ
ｇ・ｄ）（临床等效量 的 １、２、４倍 ）；肉豆蔻八 味散对 照　
验动物生产许 可证 号 ：Ｓ
ＣＸＫ （京 ）２０１
０－００
０２。
　 组灌 胃给予肉豆蔻八味散 ０．
７５　
ｇ／（ｋ
ｇ・ｄ） （临床等 效量 ）。
　
昆 明 （ＫＭ） 种 小 鼠，１
５６只 ，雄 性 ，体 质 量 １
８～　 每天 １次 ，连续 给药 １
０　ｄ。第 １
０天给 药３
０　ｍｉ
ｎ后 ，将小 鼠　
２
２　ｇ，清洁级 ，由内蒙古 大 学实 验 动物 中心 提 供 ，实 验 动　 分别 置 于 含 有 等 量 钠 石 灰 （１
５　 瓶 ） 和 等 量 吸 水 纸　
物生产许 可证 号 ：Ｓ
ＣＸＫ （蒙 ）２０
０２－
０００１。
　 （
０．２
　ｇ／瓶） 的同批次 ２５
０　ｍＬ广 口瓶 中 ，用 凡 士林 涂抹 瓶　
Ｗｉ
ｓｔ
ａｒ大 鼠，７０只 ，雌 雄 各 半 ，体 质 量 １
８０～２０
０　ｇ，
　 口并 盖紧瓶盖 ，观察并记录小 鼠存活时间。
　
清 洁级 ，由内蒙古大学实 验动物 中心 提供 ，实 验动 物生 产　 １
．４．３ 心肌急 性耐 缺氧实验 取８
４只小 鼠，随机分 为空　
许可证 号 ：Ｓ
ＣＸＫ （蒙 ）２０
０２－
０００１
。　 白对 照组 、模 型 对 照组 、阳性 对 照组 （复 方丹 参 滴 丸 ）、
　
１
．２　 受试药物及试剂　 肉豆蔻八味胶囊 （内蒙古黄河制 药　 肉豆蔻八味胶囊 ３个剂量组 （低 、中、高 ） 和 肉豆蔻 八味　
厂 ，批 号 ２０１
３１１
１０）；肉豆 蔻八 味散 （内蒙古 医科 大 学 药　 散对照组 ，共 ７组 ，每组 １
２只。空 白对照组和模 型对照组　
学 院 ，批 号 ２０１
４０４１
６）；复 方丹 参滴 丸 （天 津天 士力 制 药　 灌 胃给予 ０．
５％ ＣＭＣ—
Ｎａ　
２０　
ｍＬ／（ｋ
ｇ・ｄ）；各给药组 给药剂　
集 团股份有 限公 司，批 号 １
３０７１
９）；氯化 钠 注射液 （吉 林　 量同 “１
．４．
２”项 。第 １
０天给药 ３
０　ａｉ
ｒ ｎ后 ，除空 白对照组　
省四平巨能药业有限公司 ，批号 Ａ１
４０２
０００２）；盐 酸 肾上 腺　 小 鼠皮下注射生理盐水 ２
０　ｍＬ／ｋ
ｇ外 ，其余 ６组小 鼠均皮下　
素 （
天津金耀 氨基酸有限公司 ，批号 １
４０１
３５２）；氯仿 （天　 注射盐酸异丙 。
肾上 腺素 １
０　ｍｇ
／ｋｇ，１
５　ｒ
ａｉｎ后 ，将小 鼠分别　
津市风船化 学试 剂科 技 有 限公 司，批 号 ２
０１３
０６２
７）；盐 酸　 置 于 含 有 等 量 钠 石 灰 （１
５　 瓶 ） 和 等 量 吸 水 纸　
异丙肾上腺 素 （上 海 禾 丰 制药 有 限公 司 ，批 号 １
３０８
０９）；
　 （０
．２　
ｇ／瓶 ）的同批 次 ２
５０　ｍＬ广 口瓶 中，用凡 士林涂 抹瓶　
钠 石 灰 （上 海 五 四化 学 试 剂 有 限 公 司 ，批 号 １
４０１
３０）；垂　 口并盖紧瓶盖 ，观察并记 录小 鼠存活时 间。
　
体后叶 素 注 射 液 （天 津 君 安 生 物 制 药 有 限公 司 ，批 号　 １
．４．
４ 急性心肌缺血损 伤实 验　 取 ７
０只大 鼠 ，雌雄各　
２
０１４１
１２５）；羧 甲基纤维 素钠 （ＣＭＣ—
Ｎａ） （天 津市 科密 欧　 半 ，随机分为空 白对 照组 、模 型对照组 、阳性对 照组 （复　
化学试剂 开发 中心 ，批 号 ２
０１２１
０３０）；乳酸 脱氢 酶试 剂 盒　 方丹参滴丸 ）、肉豆蔻八 味胶囊 ３个 剂量组 （低 、中 、高 ）
　
（南京建成生物 工程 研究所 ，批号 ２０１
３０３１
４）；超氧化 物歧　 和 肉豆蔻八味散对照组 ，共 ７组 ，每组 ｌ
０只。空 白对照组　
化酶试剂盒 （南京建成生 物工程研究 所 ，批号 ２
０１３
０９１
６）；
　 和模型对照组灌 胃给予 ０．
５％ ＣＭＣ－
Ｎａ　
２０　
ｍＬ／（
ｋｇ・ｄ）；阳　
丙二 醛 试 剂 盒 （南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 ，批 号　 性对照组灌 胃给予复方丹 参滴丸 ０．
０８　 （ｋ
ｇ・ｄ） （临床 等　
２０１３１
２２３）。
　 效量 ）；肉豆蔻 八味胶 囊 ３个 剂量 组 （低 、中、高 ）的 给　
１．３ 仪 器及 实验 机 构　 药剂量分别为 ０．１
６、０．
３２、０．
６４　ｇ
／（ｋ
ｇ・ｄ） （临床 等效 量　
１
．３．１ 仪器　 数字 式 多导 生理 信 号记 录 仪 （美 国 Ｂｉ
ｏｐａ
ｃ　 的 １、２、４倍 ）；肉豆蔻八味散对照组灌 胃给予 肉豆蔻八 味　
公司 ，型号 ＭＰ１
５０）；电子天 平 （北 京赛 多利 斯仪 器 系统　 散 ０．
５４　
ｇ／（ｋ
ｇ・ｄ）（临床 等效 量 ）。每 天 １次 ，连续 给 药　
有 限公 司，型号 ＢＳ
２２０
２Ｓ）；低 温冷 冻离 心机 （美 国 Ｓ
ｉｇｍａ
　 １
０　ｄ。第 １
０天给药 １
　ｈ后 ，除空 白组大 鼠腹腔注 射生理 盐　
公 司，型号 ３Ｋ１
５）；双光束 紫外可 见分 光光度 计 （北 京普　 水２
０　ｍＬ
／ｋｇ外 ，其 余 ６组 大 鼠 腹 腔 注 射 垂 体 后 叶 素　
析通用仪器有 限责任公 司 ，型号 ＴＵ一
１９０１）。
　 １
０　Ｉ
Ｕ／ｋｇ，１
　ｈ后 ，腹主动脉取血 １
０　ｍＬ，３
　００
０　ｒ
／ｒ
ａｉｎ离 心　
１
．３．
２ 实验机构　 内蒙 古 医科 大学 新 药安 全评 价 研究 中　 １
０　ａｉ
ｒ ｎ，分离血清 ，测定血清 中的 Ｌ
ＤＨ、ＣＫ、Ｓ
ＯＤ和 ＭＤＡ　
心 ，实验动物使用许可证号 ：ＳＹＸＫ （
蒙 ）２
０１４－
０００
３。　 含有量 。
　
１．４ 方法［
　］　 １
．４．
５ 急性心 律 失常 实验　 取 ４８只家兔 ，雌 雄各 半 ，
　
１
．４．１
　 实验动物环境适应与饲 喂 实验动物按级别 分环境　 随机分为模 型对 照组 、阳性 对照 组 （复方丹 参 滴 丸 ）、肉　
饲养 ，大 鼠 、小 鼠分 雌雄 饲养 于 屏 障环境 中 ，每 盒 ５只 ；
　 豆蔻八味胶囊 ３个剂量组 （低 、中、高 ） 和 肉豆蔻 八味散　
８９９　
２
０１６年 ４月　 中 成 药　 Ａｐｒ
ｉｌ　
２０１
６　

第３８卷 第 ４期　 Ｃｈｉ

ｎｅｓｅ
　Ｔｒ
ａｄｉ
ｔｉｏｎａｌ
　Ｐａｔ
ｅｎｔ
　Ｍｅｄｉ
ｃｉｎｅ　 Ｖ０１
．３８
　 Ｎｏ．４　

对照组 ，共 ６组 ，每组 ８只。模 型对 照组 灌 胃给予 ０．

５％　 对照组 比较 ，没有显著性 差异 （
Ｐ＞０．
０５）。其 中，高剂 量　
ＣＭＣ－
Ｎａ　
５　ｍＬ／（
　 ・ｄ）；阳性对 照组 灌 胃给 予复方 丹 参滴　 组 的作 用略差。与散 剂对照组 比较 ，没有显 著性差 异 （
Ｐ＞　
九 ０．
０４　
ｇ／（ｋ
ｇ・ｄ） （临床等效 量 ）；肉豆蔻八 味 胶囊 ３个　 ０
．０５）。其 中，低 剂量 组和 中剂 量组 与 散剂 对 照组 作用 相　
剂量 组 （低 、中 、高 ） 的 给 药 剂 量 分 别 为 ０
．８、０
．１６、
　 当；高剂量组作 用 略差 于散 剂对 照组 。结 果表 明 ，胶 囊 ３
　
０．
３２　ｇ
／（ｋｇ・ｄ） （临床等效量 的 １、２、４倍 ）；肉豆蔻八味　 个剂量组均 能够 改善急性 心肌缺血诱发的心肌缺氧 。其 中 ，
　
散对照组灌 胃给予 肉豆蔻八 味散 ０．
２８　
ｇ／（ｋｇ・ｄ） （临床等　 中 、低剂量 组在提高心肌缺 血缺 氧能力 方面作 用较 好 ，小　
效量 ）。每天 １次 ，连续 给药 １
０　ｄ。第 １
０天给药 １
　ｈ后 ，仰　 鼠存 活时间延长率均高于 １
６％ ，作用 与 阳性对 照组 和散剂　
卧位 固定 于 ３７℃恒温手术 台上 。将 针式 电极按对应部位分　 对 照组 相当 ；高剂量 组作用 相对较 差 ，存 活时 间延长 率只　
别插入 家兔 四肢末端皮 下 ，连接数 字式 多导生理 信号 记 录　 有 ５．
５６％ 。结果见表 ２。
　
仪 ，用 Ｂｉ
ｏｐａ
ｃ　Ａｃ
ｑＫｎ
ｏｗｌ
ｅｄｇ
ｅ软件 ４．
３版进行 试验 。用吸人　 表 ２ 受试药物对小鼠心肌耐缺氧能力的影响 （
　±ｓ，，
ｌ＝１
２）　
性麻 醉 口罩罩 住家 兔 口鼻 ，氯 仿慢 慢滴 入 口罩 使 其 吸人 。
　
观察 心电图至平稳后 ，记 录正 常心 电图。待角 膜反射 消失　
后 ，快 速经家兔 耳缘静 脉快速 注射 ０．
０２５％ 盐酸 肾 上腺素　
７
５　 。继续 观察家 兔心 电图 至心律 恢复 正 常 ，记 录各　
组发生心律失常时 间和心律失 常持续 时间。
　
１
．４．
６ 统计 方法 采用 Ｓ
ＰＳＳ
　１３．
０软件 进行 统计分 析 ，数　
据用均数 ±标准差 （
　±Ｓ
） 表示 ，组 间 比较 根据 数据 是否　
符合正态分布 ，采用单 因素方差分析 或秩 和检验 ，Ｐ＜０．
０５　
差异有统计学意义 。
　 注 ：与空 白对照组 比较 ，
　Ｐ＜０．０５，
　 ＜０．
Ｏ１；与模型对 照组　
比较 ，△Ｐ＜０．
０５，
△△Ｐ＜０．
０１　
２ 实验 结 果　
２．１
　 受试 药物对小鼠常压耐缺氧作用的影响 与 空 白对照　 ２．
３　 受 试 药 物 对 大 鼠 急 性 心 肌 缺 血 损 伤 的 保 护 作 用 的 影　

组 比较 ，肉豆蔻八 味胶囊 低 、中剂 量组 存活 时间增 加 ，有　 响　圳　 与空 白对 照组 比较 ，模 型组 ＬＤＨ、ｃＫ、ＭＤＡ含有　

显著性差异 （
Ｐ＜０．
０５）；高剂量组 没有 显著 性差异 （Ｐ＞　 量降低 ，有显著性 差 异 （Ｐ＜０．
０５，Ｐ＜０．
０１）；ＳＯＤ含 有　

０．
０５）。与 阳性对照组 比较 ，肉豆蔻八 味胶囊组存 活时间没　 量升高 ，有显著性差 异 （
Ｐ＜０．
０５）。与模 型 对 照组 比较 ：
　

有显著性差异 （Ｐ＞０．
０５）。与 肉豆蔻 八 味散对 照 组 比较 ，
　 低 、中、高剂量组 ＬＤＨ含 有量升 高 ，有显著性 差异 （Ｐ＜
　

肉豆蔻八 味胶囊组 没有显著性 差异 （Ｐ＞０．

０５）。其 中，中　 ０
．０５，Ｐ＜０
．０１
）；高剂 量组 ＣＫ含 有量 升高 ，有显 著性 差　
剂量组 的作用 略优 于散剂 对照组 ，高剂量组 的作 用 略差于　 异 （Ｐ＜０．
０５）；低剂量组 Ｓ
ＯＤ含有量降低 ，有显著性 差异　
散剂对照组 。结果表 明 ，胶囊 ３个剂 量组均 可 以延长 小 鼠　 （
Ｐ＜０
．０５）；低 、高剂量组 ＭＤＡ含有 量升高 ，有 显著性 差　

常压耐缺 氧的时间 。其 中 ，中剂 量组作 用最 为 明显 ，存活　 异 （

Ｐ＜０．
０５，Ｐ＜０
．０１）。与 阳性对 照组 比较 ：低 剂量 组　
时 间延长 率高 达 ２５
．１５
％ ；高剂 量组 作 用相 对 较差 ，存活　 ＬＤＨ含有量降低 ，有显著 性差 异 （Ｐ＜０
．０５）；ＣＫ含有 量　
时 间延长 率达 到 １
０．９６
％ 。在 临床 等效 量 的前 提下 ，胶囊　 的结果显示 ，高剂量组 有显著性差 异 （Ｐ＜０
．０５）；ＳＯＤ含　
与复方丹 参滴 丸作用相 当，胶囊 与其散 剂作 用相 当 。结果　 有量没有 显著性 差异 （Ｐ＞０．
０５）；高剂 量 组 ＭＤＡ含有 量　
见表 １。
　 升高 ，有显著性差 异 （
Ｐ＜０．
０５）。与散剂 对照组 比较 ：胶　
表 １ 受试 药 物对 小 鼠常压 耐缺 氧 能力 的影 响 （
　 ±　，ｎ＝１
２）　 囊 中剂量组 ＬＤＨ含有量升 高 ，有显 著性差 异 （Ｐ＜０．
０５）；
　
胶囊 高剂 量组 ＣＫ含有量 升高 ，有显著性差 异 （
Ｐ＜０．
０５）；
　
Ｓ
ＯＤ、ＭＤＡ含 有 量没 有 显著 性 差 异 （Ｐ＞０
．０５）。结 果表　
明 ，胶囊 ３个剂量组都 可 以清除体 内 自由基 而保 护急 性缺　
血损 伤 的 心 肌。其 中 ，胶 囊 高 剂量 组 作 用 最 好 ，给药 后　
Ｌ
ＤＨ、ＣＫ和 ＭＤＡ的含有量 均接 近正常水平 ，ＣＫ的含有量　
达 到 （１
　２０２
．６６ ± １
６２．８
３） Ｕ／Ｌ， ＭＤＡ 的 含 有 量 达 到　
（
７．９７±１
．１５） ｎ
ｍｏｌ
／ｇ；胶 囊低 剂 量组 ＳＯＤ 的含 有量 降 至　
注 ：与空 白对照组 比较 ，
　Ｐ＜０．０５
　 （
４６７．
４９±３
３．８
３）Ｕ／ｍＬ，接近正常水平 。结果见表 ３。
　
２．
２ 受试 药物对 小鼠心肌 耐缺 氧作 用的影响 与空 白对 照　 ２．
４　 受试 药物 对氯仿．
肾上腺 素诱发 家兔 急性 心律 失常 的　
组 比较 ，肉豆蔻八 味胶囊 中剂量组 存活 时问减 少 ，有显 著　 影响 各胶囊组 与模型对 照组 比较 ：中 、高 剂量 组 的心 律　
性差异 （Ｐ＜０．
０５）；高剂量组 和模 型组存 活时 间减 少 ，有　 失 常 潜 伏 时 间 明显 增 加 （
Ｐ ＜０．
０５）；低 、 中 、 高 剂 量 组 的　
极显著性差异 （
Ｐ＜０．
０１）。各胶 囊组 与模 型对 照 组 比较 ，
　 心律失常持续 时 间明显缩 短 （Ｐ＜０
．０１，Ｐ＜０．
０５）。与 阳　
低 、中剂量 组 存活 时 间增 加 ，有 显 著性 差 异 （Ｐ＜０．
Ｏ１，
　 性 对照组 比较 ：低 剂量组 心律失常潜 伏 时间和持 续 时问 明　
Ｐ＜０．
０５）；高剂量组没有显著性差 异 （Ｐ＞０．
０５）。与 阳性　 显缩 短 （
Ｐ＜０．
０５）。与散剂对 照组 比较 ：中、高剂 量组 的　
９００　
２０１
６年 ４月　 中 成 药　 Ａｐｒ
ｉｌ
　２０１
６　
第３
８卷 第 ４期　 Ｃｈｉ
ｎｅｓｅ
　Ｔｒ
ａｄｉ
ｔｉｏｎａ
ｌ　Ｐａｔ
ｅｎｔ
　Ｍｅｄｉ
ｃｉｎｅ
　 Ｖｏ１
．３８
　 Ｎｏ．４　

模 型 对 照 组　 一
　 ６０２．３
３±１
４９．５２
　 １
　０９
３．２３±１
９３．３
２　 ５２７．
４８－
Ｉ
－２１
．３４　 ６．９３±１．
４６　
肉豆蔻八味胶囊低剂量组 ０．１６　 ６４７．０１±１５１．４７　 １
　１５７．
２７－
Ｉ
－１８４．２
９　 ４６７．４９±３３．８３
　 ７．６５±１．
３７△　
肉豆 蔻 八 味 胶 囊 中剂 量 组 ０．３２　 ６９２．３７－
Ｉ
－１９０．１７△△　 １
　１６３．
０６±１６４．８
２　 ４９２．３４±２７．２５
　 ７．２８±１．
０３　
肉豆蔻八味胶囊高剂量组 ０．
６４　 ６６４．５
７±１
７３．２６
　 １
　２０
２．６６±１
６２．８３△　 ４９７．
６４±２５．６２
　 ７．９７±１．１
５△△
　
肉豆 蔻 八 味 散 对 照 组 ０．
５４　 ６４４．９８±１
０４．８３¨ 　 １
　１５
９．０３±１
８４．３
９　 ４６９．
２６±２８．０２
　ｚ
ｘ＃
　 ７．４３±１．
２９　
阳性 对 照 组 ０．
０８　 ７０５．７３
　４－１
２６．８３
　 １
　１３
６．５７±１
８２．２
６　 ４９２．
０４±３５．９３
　 ７．２６±１．
２８　

注 ：与空 白对照组 比较 ，
　Ｐ＜０．０
５，　 ＜０．
０１；与模 型对照组 比较 ，
　Ｐ＜０．
０５，
　 Ｐ＜０．
Ｏ１；与 阳性对 照组 比较 ，
　Ｐ＜０．０５；与肉豆蔻　
八 味 散 对 照 组 比较 ，
　Ｐ＜０．０
５　
心律失 常潜伏 时间明显增加 （
Ｐ＜０．
０５）；低 剂量组 心律 失　 达 （
２０．
０４±７．
３５） Ｓ
；胶囊低 剂量 组心 律失 常持续 期 缩短　
常持续 时间明显缩短 （
Ｐ＜０．
０１）。结果表 明 ，胶囊 ３个 剂　 至 （
９７．１
５±３
５．７１）Ｓ
。结合 心律 失常潜伏 期和持续 期的结　
量组都可 以显著延长心律 失常 潜伏 的时间 ，缩 短心 律失 常　 果 比较 ，临床等效量 的前提下 ，胶囊 与散剂 作用 相 当。结　
发作 的持续 时间。其 中，胶囊 高剂 量组 心律失 常潜 伏期 长　 果见表 ４。
　
表 ４ 受试药物对 肾上腺素所 致家兔心律失常的影响 （
　±　，，
ｌ＝８）
　

３ 讨论　 的药效作用与其散剂 的作用相 当，说 明胶囊保 留 了原有散　

３
．１　 肉豆蔻八味胶 囊处方 内涵与 药效 学实验 的关联性　 肉　 剂的药效 ；与复方丹参滴 丸 的作 用相 当 ，说 明 肉豆蔻 八味　
豆蔻八 味胶囊中君药 是 肉豆蔻 ，主治心脏 刺痛 、晕厥 、谵　 胶囊完全可替代其他 同类药物治疗这一类疾病 。
　
语 、心慌 等心血 管 疾 病　…。牦 牛 心　 、沉 香　。
　为 臣药 ，
　 杂粤　 赫　
二者 均可以缓解血管平 滑肌 痉挛 ，使 血液灌 注组 织 ，从 而　 ：
　

改善 心肌缺氧的状态 ，辅 助 肉豆蔻加 强改 善心 肌缺 血、缺　 ［１］

　 阿克旺 ‘罗布桑 ’丹必扎拉申．普济方集：蒙文版 ［
Ｍ］．
　
氧的作用 。佐药 为木 香 、丁 香 、阿魏 、旋覆 花　 ］
。木香 、
　 内蒙古：内蒙古科学技术出版社 ，１
９８６
・　
丁香 理气 通经 ，阿魏 、旋覆 花 清热凉 血 ，四药 同用 共佐 肉　 ［
　］　 伊希巴拉吉尔・甘露四部［
Ｍ］・内蒙古：内蒙古人民出版　

孚
为
　方
本 使药
　需
　、
　八味药材相伍
。
．
　，可以治疗 三
。
、
、
　神、 、　
冠心病 、心律 失　
［
　］蓉
　。　如
濂，陈修
．药理学
实验方
法学［
Ｍ］
．第。
　 。
　 … … … 　

： 出　 社　 ．
常等 心血管疾病 。
　 ［４］
　 张均田 杜冠华．现代药理实验方 法［Ｍ］．第 ２版 ．北京 ：
， 　
本研 究采用耐缺氧模 型 实验 、心 肌缺 血模 型实 验、心　 中国协和医科大学出版社 ２０１４．
　 ，

律失 常模 型实验来考察 肉豆蔻 八味胶 囊 的药效 ，以此来 评　 ［５］

　 栾 洁，陈雅琳 储 智勇 ，等．冬虫夏草 子实体 对小 鼠抗　
，

价其 对冠心病 、心律失 常等心 血管疾 病 的治疗作 用 。药 效　 疲劳及耐缺氧能力的影响Ｉ －Ｊ］

．时珍国医国药，２ ０１
３，２４
　
学实 验与处方内涵相吻合 。
　 （
１）：
４７－
４８．
　
３．
２　 实验 结 果 的综 合 评 价 研 究 中发 现 ，肉 豆 蔻 八 味胶 囊　 ［６］
　 尹 博 ，马　 丁 ，陈 鹩 ，等．红 景天 对 异丙 肾上 腺 素　
可以显著提高小 鼠耐 缺氧能力 ，改善心 肌缺血 大 鼠血清 内　 （
ＩＳＯ）致大鼠急性心肌缺血的保［
Ｊ］．复旦学报 ：医学版，
　
源性 物质的含有量 ，延 长心律 失常潜 伏 的时 间 ，缩 短心 律　 ２
０１５，４
　（　）：
　 ・
　
失 常 持续 的 时 间 。
　 ［
　］　 蒋 鑫 ，周 平 ，杨小 利 ，等・ＭＧ５
３预处 理改 善离体 大　
凰
本研 究通过耐缺氧模 型 实验 、心 肌缺 血模 型实验 、心　
２０１
　５　 血
、再
　心律失常¨
　第三军医大学学报’
　
律失 常模 型实验等经典药 效学 实验模 型以考量 肉豆 蔻八 味　 ［８］
　 张金　
，
　 爱．丹皮酚对大 鼠缺血性 心律失常及其 心肌　
散对 实验 动物心脏缺 血、缺氧 的保护作 用 。药 效学 实验 结　 细胞　ｉ ＲＮＡ１表达 的影 响 ［Ｊ］． 中国实 验方 剂学 ，
一

　２０１
５，　
果表 明 ，各 给药组都能够不同程度 的缓解疾病模 型的症状 。
　 ２１
（５）：１２９—
１３２ ．　

其 中 ，胶囊 中剂量组的作用 要优 于胶囊低 剂量 组和 胶囊 高　 Ｅ

　９］
　 卢志强，张艳军 崔广智 ，等．心肌缺血模 型的制作方法　，

剂量组 ；本研究 的药效学 实验结果 表 明 ，肉豆 蔻八 味胶 囊　 研究 进 展 ［Ｊ］

． 中 国 药 理 学 通 报 ，２
０１２，８（１
６）：
　
２
０１６年 ４月　 中 成 药　 Ａｐｒ
ｉｌ　
２０１６　

第 ３８卷 第 ４期　 Ｃｈｉ

ｎｅｓ
ｅ　Ｔｒ
ａｄｉ
ｔｉｏｎａｌ
　Ｐａｔ
ｅｎｔ
　Ｍｅ
ｄｉｃｉ
ｎｅ　 Ｖ０Ｉ
． ３８　 Ｎｏ． ４　

１０５３，
１０５７．
　 临床 应 用 研 究 进 展 ［Ｊ］． 中 国 药 房 ，２０１１， １
２（３
５）：
　
［１０］
　 韩 蕾 ，马颖芳 ，袁子民．肉豆蔻挥 发油的药理毒 理研 究　 ３３４９．
３３５１．
　

［Ｊ］． 中华中医药学刊 ，２００７，７（

５）：９００００２．
　 ［１
３］　 国家药典委员 会． 中华人 民共和 国药 典 ：２０１
０年 版一 部　
［１１］
　 《中华本草》 编委会 ．中华本草 ：蒙药卷 ［Ｍ］．上海 ：上　 ［ｓ］．北京 ：中国医药科技 出版社 ，２
０１０．
　
海 科 技 出版 社 ，２
００４．
　 ［１
４］　 王 晓琴 ，王力伟 ，赵 岩 ，等．广枣 的化 学成分和药理 活　
［１
２］　 李红念 ，梅全喜 ，林焕泽．沉香 的化学成分 、药理作 用和　 性研究进展 ［Ｊ］．食品科 学 ，２０１４，６（１
３）：２８１
－２８
５．　

刺 五 加 多 糖 下 调 Ｓｕｒ
ｖｉｖｉ
ｎ蛋 白 表 达 诱 导 Ｈｅ
Ｌａ细 胞 凋 亡　

靳　 神　，
　 肖　 锋　，
　 武均 宜　，
　 胡 亚 南　，
　 范林 林　，
　 王 恩军 ｈ　
（１．河北 大 学基础 医学院 ，河北 保 定 ０７１
０００；２．中南大 学湘 雅 医学院 ，湖 南 长 沙 ４１
００００；３．保定 市儿童　
医院 ，河北 保定 ０７１
０００）
　

摘要 ：目的 观察刺五加多糖对人宫颈癌细胞株 Ｈｅ
Ｌａ的增殖 、凋亡作用 ，探 索其诱导 细胞凋亡 的可能机 制。方法　
四甲基偶 氮唑盐 （ＭＴｒ）法检测刺五加 多糖对 Ｈｅ
Ｌａ细胞增殖 活力 的影 响 ，Ａｎ
ｎｅｘ
ｉｎ　
Ｖ—ＦＩ
ＴＣ／ＰＩ双染 法检测刺 五加多糖　
对细胞凋 亡的诱 导作用 ，免疫组化 ｓＰ法检测凋亡细胞 中存活素 （
Ｓｕｒ
ｖｉｖ
ｉｎ）蛋 白表达 的变化 。结 果 刺五加 多糖 以剂　
量和 时间依赖 的方式抑制 Ｈｅ
Ｌａ细胞增 殖 ；诱 导细胞凋亡 ；并且 Ｓ
ｕｒｖ
ｉｖｉ
ｎ蛋 白在凋 亡的 Ｈｅ
Ｌａ细胞 中表达量 降低。结论　
刺 五加 多糖通过下调 Ｓｕ
ｒｖｉ
ｖｉｎ蛋 白表 达 ，诱 导 Ｈｅ
Ｌａ细胞凋亡 。
　
关键 词 ：刺五加 ；多糖 ；Ｈｅ
Ｌａ；宫颈癌 ；凋亡 ；Ｓ
ｕｒｖ
ｉｖｉ
ｎ　
中 图 分 类 号 ：Ｒ２８
５．５
　 文 献 标 志 码 ：Ｂ　 文 章 编 号 ：１
００１－
１５２
８（２
０１６）
０４－
０９０２
－０３
　
ｄｏｉ：
１０．３９６９／ｊ．ｉ
ｓｓｎ．１
００１．
１５２８．２０１
６．０４．０４０　

刺 五加 多 糖 （
Ａｃａｎ
ｔｈｏ
ｐａｎ
ａｘ　ｓ
ｅｎｔ
ｉ
ｃｏｓ
ｕｓ　ｐ
ｏｌｙ
ｓａｃ
ｃｈａ
ｒｉｄ
ｅｓ）
　 硫酸法　 检测 ，其 多 糖含 有量 约为 ７５．
１２％ ，用 生理 盐水　
是从 五加科植物刺五加 的根及 根茎 中提取 出 的一 种植物 多　 配制成 ５
００　ｍｇ
／ｍＬ的贮备 液 ，高压 灭菌后 ４℃ 冰箱保 存 。
　
糖 ，是刺五加 的主要药效活性成分之一 ¨
　 。近年来 ，很 多　 细胞株 ，Ｈｅ
Ｌａ细胞 由河北农业 大学 生命科学 学院惠赠。
　
学者报道 了关于五加科 植物 及刺五加 多糖抗 肿瘤作 用 的研　 １
．２　 主 要 仪 器 与 试 剂　 ＣＯ　培 养 箱 （ＭＣＯ－
５ＡＣ， 日本　
究　 。我们在前期实验研究 中发 现刺 五加多糖对 ＨｅＬ
ａ细　 Ｓ
ａｎｙ
ｏ公司 ）；净化工作 台 （
ＳＷ—
ＣＪ一
１Ｂ，上海精密 科学仪 器　
胞的增殖有一定抑 制作用 ，表明刺 五加多糖 作为 抗肿瘤 的　 有 限公 司）；酶标仪 （
ＥＬｘ
８０８，美 国 Ｂｉ
ｏＴｅ
ｋ公 司）；倒 置显　
天然 中草药具有较 好 的开发潜能　 。为 了进一 步揭示 刺五　 微镜 （ＣＸ３１， 日本 Ｏｌ
ｙｍｐｕ
ｓ公 司 ）；６孔 及 ９
６孔 培 养 板　
加多糖诱导 Ｈｅ
Ｌａ细胞 的凋亡 作用 及机制 ，本研究拟检测刺　 （
美 国 Ｃｏ
ｓｔａ
ｒ公 司）；胎牛 血清 、ＲＰＭＩ
一１６
４０培养 基 （美 国　
五加多糖诱 导 Ｈｅ
Ｌａ细胞 的凋 亡作 用 及存 活 素 （Ｓ
ｕｒｖ
ｉｖｉ
ｎ）　 Ｇｉ
ｂｃｏ公司 ）；胰蛋 白酶、ＭＴＦ、二 甲基亚 砜 （ＤＭＳ
Ｏ） （美　
的表 达 ，为 刺 五加 多糖 的应 用 提 供 参 考 依 据 。
　 国Ｓ
ｉｇｍａ公 司 ）；Ａｎ
ｎｅｘ
ｉｎ　
Ｖ—ＦＩ
ＴＣ／Ｐ
Ｉ双 染 试 剂 盒 （上 海 美　
１ 材 料 和 方 法　 吉 生 物 医 药科 技有 限 公 司 ）；一 抗 Ｓ
ｕｒｖ
ｉｖｉ
ｎ （美 国 Ｓ
ａｎｔ
ａ　Ｃｒ
ｕｚ　
１
．１　 材料 刺五加多糖 ，由河北农业大学生命科学 学院提　 公 司）；鼠二抗 、兔 二 抗 及 ＤＡＢ显 色剂 （美 国 Ｉ
ｎｖｉ
ｔｒ
ｏｇｅ
ｎ　
供 ，原生药 品购 自河 北 安 国 县药 材 公 司，采 用 热水 浸 提　 公 司 ）。
　
法　 提取 ，原 生药 品加 油醚 提取 ，脱脂 后 将药 品 渣干 燥 ，
　 １．３ 实验 方 法　
加蒸馏水 ，８
０℃恒 温浸取 ４　
ｈ，抽滤 ，滤液蒸 发浓 缩 ，加　 １
．３．１
　 细胞 培养 人 宫颈癌 Ｈｅ
Ｌａ细胞采用 ｔ
０％ 的胎 牛血　
入氯仿 ，正 丁醇 ，剧烈振 荡 ，离 心 ，收集 上 清液 。经 透析　 清 的 ＲＰＭＩ
一１６
４０ 培 养 基 （含 １
００　Ｕ／ｍＬ 的 青 霉 素 和　
浓缩 后 ，加 入无水 乙醇 静置过 夜 ，抽滤 得 多糖沉 淀 ，沉淀　 １
００　
Ｕ／ｍＬ的链霉 素） 于 ３
７　ｏ
Ｃ、５
％ ＣＯ，培养箱 中培养 。隔　
分别用 ９５
％ 乙醇一 无水乙醇一 丙酮一 乙醚 洗涤 ，干燥 ，其　 日换液 １次 ，取对数生长期细胞进行实验 。
　
水溶 液再 经 Ｈ　
Ｏ　脱 色 、透析后 得刺 五加 多糖 。通 过苯 酚一
　 １
．３．
２　 ＭＴＴ法检测细胞生存率 细胞 （
２×１
０　／
ｍＬ）用胰　

收 稿 日期 ：２０１４—
１２—
３０　
基金项 目：河北省中医药管理局科研计划项 目 （２
００９０６１）
　
作者简介 ：靳 神 （１
９７７一 ），女 ，硕 士 ，副 教 授 ，从 事 抗肿 瘤 中药 及 化 学 生 物 学 研 究。Ｔｅ
ｌ：１３８
３３０３１６
０３，Ｅ—
ｍａｉ
ｌ：ｊ
ｉｎｙｉ
２００９＠　
１６３．ｔｏｍ 　 ’
　

通信作者 ：王恩军 （１
９７７一 ），男 ，硕士 ，副教授 ，从事肿瘤药理 学研究 。Ｔｅ
ｌ：１３８３３
０６１
９７７，Ｅ－
ｍａｉ
ｌ：ｗａｎｇ
ｅｎｊ
ｕｎ２００９＠１
６３．
ｃｏｍ　

９０２