Professional Documents
Culture Documents
เอกสารประกอบการเรียนบทที่ 6 เทคโนโลยีทางด - 221208 - 084206
เอกสารประกอบการเรียนบทที่ 6 เทคโนโลยีทางด - 221208 - 084206
ชื่อ-สกุล ……………………………………………………………………………………………………….
ชั้น ………………… เลขที่ …………………
ครูวิมลา เทพกล่ำ
ทำได้โดยคัดเลือกพ่อแม่พันธุ์ที่มีลักษณะที่ต้องการมาผสมพันธุ์กันจึงได้ลูกที่มีลักษณะที่หลากหลาย
จากนั้นจึงคัดเลือกลูกที่มีลักษณะตามต้องการ
ข้อจำกัด
1. ใช้ …………………………………………
2. ต้องมาจากสิ่งมีช ีวิต …………………………………………………………… เพื่อให้ได้ล ูกที่ไม่เป็นหมัน ไม่
สามารถนำสิ่งมีชีวิตสปีชีส์อื่นที่มีลักษณะที่ต้องการมาผสมด้วยได้
ขั้นตอนการสร้างสิ่งมีชีวิตดัดแปรพันธุกรรม
ต้องมีการเพิ่มจำนวน DNA ที่เหมือน ๆ กัน เรียกว่า ………….……………………………………… และถ้า
DNA บริเวณดังกล่าวเป็นยีนก็จะเรียกว่า ………….……………………………………… สามารถทำได้โดยวิธีต่อไปนี้
เทคนิค PCR เป็นการสังเคราะห์สาย DNA ซ้ำ ๆ ประมาณ 25-40 รอบ ตามที่กำหนด โดยสาย
DNA ที่เกิดขึ้นในแต่ละรอบจะถูกใช้เป็น DNA แม่แบบในการสังเคราะห์ DNA สายใหม่ในรอบต่อ ๆ ไปจน
สิ้นสุดปฏิกิริยา ทำให้ได้โมเลกุล DNA หลายล้านโมเลกุล (PCR 1 รอบได้ DNA ส่วนที่ต้องการ 2 โมเลกุล)
***โดยทั่วไปการทำปฏิกิริยา PCR เป็นการเพิ่มจำนวน DNA บางบริเวณ ไม่ได้ครอบคลุมทั้งสายของ DNA
แม่แบบ
วัตถุประสงค์ของการทำ PCR
เพื่อให้ได้ DNA จำนวนมากเพียงพอสำหรับการนำไปใช้ เช่น
- เป็นแหล่งของยีนสำหรับการโคลนยีนโดยใช้พลาสมิดของแบคทีเรีย
- ตรวจสอบยีนที่แทรกในพลาสมิดของเซลล์แบคทีเรียที่ได้จากการโคลนยีนว่าเป็นยีนที่ใส่เข้าไป
หรือไม่ โดยนำผลิตภัณฑ์ PCR ไปหาขนาดหรือหาลำดับนิวคลีโอไทด์ต่อไป
- เพิ่มปริมาณ DNA สำหรับตรวจสอบ DNA ประยุกต์ใช้ในงานด้านต่าง ๆ เช่น นิติวิทยาศาสตร์
หาหลักฐานในคดีอาชญากรรม ตรวจสอบความสัมพันธ์ทางสายเลือด ด้านการแพทย์ใช้ตรวจหาโรคทาง
พันธุกรรม โรคที่เกิดจากการติดเชื้อจุลินทรีย์
ขั้นตอนเทคนิคเจลอิเล็กโทรฟอรีซิส
1. ใส่ตัวอย่าง DNA ลงในช่องบนแผ่นอะกาโลสเจล
2. โมเลกุล DNA มีขนาดต่างกัน แยกโมเลกุลของ DNA ในสนามไฟฟ้า DNA ที่เป็น …………………
จะเคลื่อนเข้าหา ………………… ในสนามไฟฟ้าผ่านตัวกลางที่เป็นแผ่นวุ้น
3. ……………………………………… จะเคลื่อนที่ ไ ด้ เ ร็ ว กว่ า ……………………………………… โมเลกุล DNA
ขนาดใหญ่ก็จะอยู่ใกล้ขั้วลบ ส่วนโมเลกุล DNA ขนาดเล็กจะเคลื่อนที่ไปอยู่ใกล้ขั้วบวก
4. ย้อมสีอีธิเดียมโบรไมด์ จากนั้นนำไปส่องด้วย ………………………………………… จะเกิดการเรืองแสง
5. การเคลื่อนที่ของโมเลกุล DNA ขนาดต่างๆ จะเปรียบเทียบกับการเคลื่อนที่ของ DNA ที่ทราบ
ขนาด แล้วทำให้สามารถประมาณขนาดของโมเลกุล DNA ที่ต้องการศึกษาได้
การหาลำดับ DNA (DNA sequencing) คือ การหาลำดับการเรียงตัวของนิวคลีโอไทด์ในสาย
DNA สามารถทำได้โดยหาลำดับเบสที่เป็นองค์ประกอบของนิวคลีโอไทด์บนสาย DNA ด้วยเครื่องหาลำดับ
นิวคลีโอไทด์อัตโนมัติ (automated sequencer) สามารถอ่านผลในรูปลำดับเบสได้อย่างรวดเร็ว
เมื่อได้ลำดับเบสแล้วสามารถนำไปประยุกต์ใช้ได้ เช่น นำไปเทียบกับฐานข้อมูลเพื่อให้ทราบว่าลำดับ
เบสนั้นเป็นยีนใดหรือมีมิวเทชันตำแหน่งใดบ้าง นอกจากนี้ยังสามารถนำลำดับไปแปลงเป็นลำดับกรดอะมิโน
เพื่อใช้ทำนายโครงสร้างและหน้าที่ของโปรตีนได้
การสร้างผลิตภัณฑ์ทางการแพทย์และเภสัชกรรม
การประยุกต์ใช้ในเทคโนโลยีเภสัชกรรมส่วนมากจะเป็นการสร้างสิ่งมีชีวิตดัดแปรพันธุกรรม เพื่อผลิต
โปรตีนนำมาใช้ประกอบการรักษา เช่น การผลิตฮอร์โมนอินซูลิน นำมาใช้ควบคุมอาการโรคเบาหวาน
การผลิตอินซูลินโดยอาศัยแบคทีเรียดัดแปรพันธุกรรมนี้จะได้อินซูลิน …………………………………………………………
กว่าวิธีแบบเดิมซึ่งอาศัยการสกัดจากตับอ่อนของวัวหรือหมู
มีการนำเทคโนโลยีทาง DNA มาใช้ในการสร้างสิ่งมีชีวิตดัดแปรพันธุกรรมเพื่อผลิตโปรตีนอื่น ๆ เช่น
ใช้ ………………………………………………………… ซึ่งนำมาใช้ในการรักษาเด็กที่มีสภาพแคระเนื่องจากการขาดโกรท
ฮอร์โมน ใช้ ………………………………………………………… ซึ่งมีความปลอดภัยยิ่งขึ้น เช่น วัคซีนป้องกันไวรัสตับ
อักเสบชนิด B
การวินิจฉัยโรค
โรคทางพันธุกรรมอาจมีสาเหตุมาจาก ……………………………………………………………………… ซึ่งมีลำดับ
นิวคลีโอไทด์แตกต่างไปจากแอลลีลปกติ เมื่อทราบลำดับนิวคลีโอไทด์ของแอลลีลดังกล่าวสามารถนำข้อมูลมา
ใช้ ……………………………………………………………………………………………………………………………………………… เช่น
การตรวจสอบแอลลีลก่อโรคในเอ็มบริโอหรือทารกแรกเกิด สามารถถตรวจได้โดย
การทำ PCR เพื่อเพิ่มปริมาณ DNA ในบริเวณของยีนที่เกี่ยวข้องกับการก่อโรค โดยใช้ไพรเมอร์ที่มี
ความจำเพาะกับลำดับนิวคลีโอไทด์ที่มีความแตกต่างกันระหว่างแอลลีลไม่ก่อโรคกับแอลลีลก่อโรค
จำนวนซ้ำของ STR
โครโมโซม ลำดับเบสในแต่ละซ้ำของ STR
แอลลีล 1 แอลลีล 2
คู่ที่ 1
คู่ที่ 2
การวิเคราะห์ STR
คือ การตรวจหาจำนวนซ้ำของ STR ในแต่ละตำแหน่งโดยการใช้เทคนิค PCR
STR ไพรเมอร์ 1 คู่ PCR พิจารณาขนาดของ
ตำแหน่งที่ 1 (ที่มีเบสคู่สมกัน) ผลิตภัณฑ์จาก PCR
Khanacademy. (2018). DNA cloning. Retrieved October 21, 2021, from https://www.khanac
ademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/overvie
w-dna-cloning
William Anderson. (2020). Restriction Endonucleases (or Restriction Enzymes). Retrieved
October 21, 2021, from https://schoolworkhelper.net/restriction-endonucleases-or-
restriction-enzymes/