‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﻮﻣﺮداس‬‫ﺟﺎﻣﻌ ﺔ‬

‫ﻗ ﺴﻢ اﻷﺣﻴﺎء‬

‫ﺑ ﻲ إم ﺟ ﻲ ﺟ ﻲ‬
‫ﺑ ﻲﺗ ﻲ ﻓ ﻲ‪-‬‬

‫ﺜﺎﻧ ﻲ‬ ‫ﺗﻘﻨﻴﺎ ت اﻟﻔﺼﻞ اﻟ‬

‫ﺒﻴﻮﻟﻮﺟﻴﺎ اﻟﺠﺰﻳﺌﻴ ﺔ‬
‫اﻟ‬
‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬

‫ﺑﻮاﺳﻄ ﺔ‬‫ُﻋﺪ ت‬
‫أ‬

‫ﺘﻮر ﻻ ﻫﻴﺎﻧ ﻲ س‪.‬‬

‫دﻛ‬

‫اﻟﻌﺎم اﻟﺪراﺳ ﻲ ‪2023-2024‬‬

‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﻪ‬
‫ﺗﻄﻮرا‬
‫‪PCR‬و‬

‫ﺑﺮوﻧﻮ دوراﻧﺪ‬

‫ﺒﻴﻮﻟﻮﺟﻴ ﺔ‬
‫ﺘﺎذ اﻟﻜﻴﻤﻴﺎء اﻟﺤﻴﻮﻳ ﺔ –اﻟﻬﻨﺪﺳ ﺔ اﻟ‬
‫أﺳ‬
‫ﺜﺎﻧﻮﻳ ﺔ ‪-‬أﻧﺠﻴﻪ‬
‫ﻣﺪرﺳ ﺔ ﺟﺎن ﻣﻮﻻن اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﻓﻬﺮس‬

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬
‫–‬

‫ﺗﺎرﻳﺦ‬
‫•‬
‫ﺒﺪأ‬
‫•ﻣ‬
‫ﺗﺤ ﺴﻴﻦ‬
‫•‬
‫ﺒﻴﺎ ت‬
‫•ﺳﻠ‬
‫ﺘﻴﺎﻃﺎ ت‬
‫•اﺣ‬

‫ﺘﻘ ﺔ‬
‫ﺘﻘﻨﻴﺎ ت اﻟﻤﺸ‬
‫‪-‬اﻟ‬
Machine Translated by Google

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﺎرﻳﺨ ﻲ‬

‫ﺘﻮن‬
‫ﺑﺴ‬‫اﻟﺼﻮرة‪ :‬دوﻧﺎ ﻣﺎ‬

‫‪www.nobelprize.org‬‬ ‫‪https://en.wikipedia.org‬‬ ‫اﻟﻤﻨﺸﻮر‬ ‫‪1‬ﺳﺎﻋ ﺔ‬

‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮﻳﺰ اﻟﺤﻤﺾ‬ ‫ﻋﺰل‬ ‫اﻷول ﻋﻦ )‪K.‬‬

‫‪PCR (Mullis‬‬ ‫دورة ﺣﺮارﻳ ﺔ‬
‫اﻟﻨﻮوي اﻷول‬ ‫‪T.‬اﻟﻤﺎﺋ ﻲ ‪(T.‬‬
‫ﺒﺮج أ‪( .‬‬
‫)ﻛﻮرﻧ‬ ‫ﺑﺮوﻛ ﺲ(‬ ‫ﺑﻴﺮﻛﻴﻦ إﻟﻤﺮ(‬
‫)‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﺎرﻳﺨ ﻲ‬

‫‪www.bd.com‬‬
‫‪https://en.wikipedia.org‬‬ ‫‪https://gerichtsmedizin.at‬‬

‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز ﻋﺎﻟ ﻲ اﻟﺪﻗ ﺔ‬

‫‪1-‬‬ ‫ﺘﺮاع ‪PCR‬ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ‬
‫اﺧ‬ ‫ﺘﺨﺮاج ‪+ PCR‬‬
‫ﺘ ﺔ ‪ :‬اﺳ‬
‫ﺗﻤ‬‫‪1 ers‬أ‬
‫‪www.ncbi.nlm.nih.gov‬‬
‫ﺗﺸ ﻲ ر‪(.‬‬
‫اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ ) ﻫﻴﺠﻮ‬
‫أول ‪PCR‬ﻣﻊ‬
‫ﺗﻴﻼ(‬
‫)ﻣﺎ‬
‫ﺑﻞ‬
‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮﻳﺰ ﻗﺎ‬ ‫ﺑﻮﻟﻴﻤﺮا ت‬‫ﺒﺎرة ﻋﻦ‬
‫‪1‬ﻋ‬
‫ﻟﻠﺤﺮارة )‪(Saiki RK.‬‬ ‫ﺑﺪاﻳ ﺔﺳﺎﺧﻨ ﺔ ‪PCR‬‬ ‫اﻧﺪﻣﺎﺟﻴ ﺔ‬
‫ﻛﺎري ﻣﻮﻟﻴ ﺲ‬ ‫ﺟﺎﺋﺰة‬
‫)ﺷ ﺊ ﻣﺎ(‬ ‫ﺑﻞ ﻓ ﻲ اﻟﻜﻴﻤﻴﺎء‬
‫ﺟﺎﺋﺰة ﻧﻮ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫أﻣﻴﺮ ‪PCR‬‬

‫ﺗﻤ ﺴﺦ‬

‫ﺘﻄﺎﻟ ﺔ‬
‫اﺳ‬ ‫ﺗﻬﺠﻴﻦ‬

‫اﻟﺼﻮر‪ :‬إي إن إس ﻟﻴﻮن‬

‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻔﺎﻋﻞ‬
‫ﻣﻜﻮﻧﺎ ت اﻟ‬
‫•ﻗﺎﻟ ﺐ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬
‫•اﻻﺷﻌﺎل‬

‫•إﻧﺰﻳﻢ‬
‫‪• dNTPs‬‬

‫‪• Mg2+‬‬
‫•ﻣﺨﺎزن‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫‪1-‬ﻗﺎﻟ ﺐ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬

‫ﺘﻮي ﻋﲆ اﻟﺤﻤﺾ‬
‫ﺘ ﻲﺗﺤ‬
‫•اﻟﻤﻨﻄﻘ ﺔ اﻟ‬
‫اﻟﻨﻮوي اﻟﻤﺮادﺗ ﺴﻠ ﺴﻠﻪ‬

‫ﺘﻬﺪف‬
‫•ﺣﺠﻢ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﻤ ﺴ‬
‫اﻟﻤﺮادﺗﻀﺨﻴﻤﻪ‪:‬ﻳﺼﻞ إﱃ ‪3‬ﻛﻴﻠﻮ‬
‫ﺑﺎﻳ ﺖ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻤﻬﻴﺪﻳﺎ ت‬
‫‪2-‬اﻟ‬

‫ﺑﺸﻜﻞ‬
‫ﺒﺎدﺋﺎ ت‪• .‬‬
‫ﺘﺎن ﻣﻦ اﻟ‬
‫•ﻣﺠﻤﻮﻋ‬
‫ﺗﻴﺪا ت‬
‫ﺒﻠﻎ ﻃﻮﻟﻬﺎ ‪20-30‬ﻧﻴﻮﻛﻠﻴﻮ‬
‫ﻋﺎم‪،‬ﻳ‬

‫ﺘﺠ ﺔ ﺻﻨﺎﻋﻴﺎ ً‬
‫•ﻣﻨ‬

‫ﺛ ﺔ ﻟﻠﺤﻤﺾ‬
‫ﺜﻼ‬‫•ﻣﻜﻤﻞ ﻟﻸﻃﺮاف اﻟ‬
‫ﺘﻬﺪف‬
‫اﻟﻨﻮوي اﻟﻤ ﺴ‬
‫ﺒﻌﺾ‬
‫ﺒﻌﻀﻬﻢ اﻟ‬
‫•ﻏﻴﺮ ﻣﺠﺎﻣﻠﻴﻦ ﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫اﻻﺷﻌﺎل )‪(ctnd‬‬
‫ﺘﺠﻨ ﺐﺗﻜﻮﻳﻦ اﻟﻬﻴﺎﻛﻞ‬
‫ﺘﻜﺮرة ﻣﻌﻜﻮﺳ ﺔ ﻟ‬
‫ﺘﻮي ﻋﲆﺗ ﺴﻠ ﺴﻼ ت ﻣ‬ ‫•ﻻﺗﺤ‬
‫اﻟﺪاﺧﻠﻴ ﺔ‬

‫ﺘﻠﻴﻴﻦ أﻓﻀﻞ‬
‫ﺒ ﺔ ‪40-60%‬ﻟ‬
‫ﺑﻨ ﺴ‬
‫ﺘﻮى ‪GC‬‬
‫•ﻳﻔﻀﻞ ﻣﺤ‬

‫ﺘﻠﺪﻳﻦ ‪T0‬‬
‫ﺘﺤﺪﻳﺪ اﻟ‬
‫ﺒﺎدﺋﺎ ت ﻟ‬
‫•ﻳﻤﻜﻦ ﺣ ﺴﺎ ب ‪Tm‬ﻣﻦ اﻟ‬

‫‪• Tm= .41(%G+C) + 16.6log( J+ ) + 81.5‬ﺣﻴ ﺚ ‪ J+‬ﻫﻮﺗﺮﻛﻴﺰ‬

‫ﺘﻜﺎﻓﺆ‬
‫اﻷﻳﻮﻧﺎ ت أﺣﺎدﻳ ﺔ اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫‪3-‬اﻹﻧﺰﻳﻢ‬

‫ﺑﻠ ﺔ‬
‫ﺗﻠﻔ ﺔ اﻟﻘﺎ‬
‫ﺒﻴﻌﻴ ﺔ أو اﻟﻤﺆ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﺮا ت اﻟﻄ‬
‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز ﻃﻖ أو أي ﻣﻦ اﻟ‬‫•ﻋﺎدة‬
‫ﺘﻰ ‪950‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ •ﻣﻌﺎﻟﺠ ﺔ ﻋﺎﻟﻴ ﺔ •‬
‫ﺘﻘﺮ ﻋﻨﺪ ‪T0‬ﺣ‬
‫ﻟﻠﺤﺮارة •ﻣ ﺴ‬

‫ﺑﺪونﺗﺪﻗﻴﻖ ﻟﻐﻮي‬‫ﺑﻮل ﻋﲆ ‪5'-3' exo‬ﻓﻘﻂ‪،‬‬‫ﺘﻮي ﻃﻖ‬

‫ﻳﺤ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫دورة ‪PCR‬‬
‫ﻣﻜﻮن ﻣﻦ ‪3‬ﺧﻄﻮا ت‪:‬‬

‫ﺗﻤ ﺴﺦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي ﻋﻨﺪ ‪950‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‪.‬‬

‫‪1.‬‬

‫ﺗﺨﻠﻴﻖ اﻟﺤﻤﺾ‬
‫ﺘﻠﻴﻴﻦ( ﻋﻨﺪ ‪40-500‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ ‪3.‬‬
‫ﺘﻤﻬﻴﺪي )اﻟ‬
‫ﺘﻬﺠﻴﻦ اﻟ‬
‫‪2.‬اﻟ‬

‫ﺘﻤﻬﻴﺪي( ﻋﻨﺪ ‪720‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬

‫ﺘﺪاد اﻟ‬
‫اﻟﻨﻮوي )اﻣ‬
Machine Translated by Google
Machine Translated by Google
Machine Translated by Google
Machine Translated by Google
Machine Translated by Google
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫أﻣﻴﺮ ‪PCR‬‬
‫ﺒﻠﻴﻜﻮن ﻓ ﻲ‬
‫ﺒﺎدﺋﺎ ت •أول ‪2‬أﻣ‬
‫ﺑﻮاﺳﻄ ﺔ اﻟ‬‫ﺘﻬﺪف اﻟﻤﺤﺪد‬
‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ اﻟﻤ ﺴ‬
‫ﺒﻠﻴﻜﻮن =اﻟ‬
‫•اﻷﻣ‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮن ﻓ ﻲ ‪30‬دورة‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ اﻷﺳ ﻲ‪> 1 :‬ﻣﻠﻴﺎر أﻣ‬
‫ﺜ ﺔ •اﻟ‬
‫ﺜﺎﻟ‬
‫اﻟﺪورة اﻟ‬

‫ﺘﺮاﻛ ﺖ‬
‫اﻟﻤﺼﺪر‪ :‬آﻧﺪي ﻓﻴﺮﺳ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﺤ ﺴﻴﻦ ‪PCR:‬‬

‫ﺘﻤﻬﻴﺪي‬
‫ﺘﺼﻤﻴﻢ اﻟ‬
‫ﻣﻌﺎﻳﻴﺮ اﻟ‬
‫•اﻟﺤﺠﻢ ‪16-26 :‬ﻃﻦ‬

‫ﺘﺮاﻛﻤﻴ ﺔ‪40-60% : %‬‬

‫ﺒ ﺔ اﻟﻐﺎزا ت اﻟ‬
‫•ﻧ ﺴ‬

‫‪• Tm si‬ﻣﻤﻜﻦ ‪< 2‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬

‫ﺜﻨﺎﺋﻴﺎ ت ‪:‬‬
‫•اﻧﺨﻔﺎضﺗﻜﻮﻳﻦ اﻟ‬
‫'‪5‬‬ ‫'‪3‬‬
‫ﺘﺎ ت ‪FF‬أو ‪RR‬‬
‫ﺗﻴ ﺔ‪ :‬ﺧﺎﻓ‬
‫ﺛﻨﺎﺋﻴﺎ ت ذا‬
‫‪-‬‬ ‫'‪3‬‬ ‫'‪5‬‬
‫'‪5‬‬
‫–ﻗﺺ اﻟﺸﻌﺮ ‪:‬‬ ‫'‪3‬‬
‫ﺛﻨﺎﺋﻴﺎ ت ‪FR‬‬‫ﺘﻘﺎﻃﻌ ﺔ‪:‬‬
‫ﺛﻨﺎﺋﻴﺎ ت ﻣ‬
‫‪-‬‬ ‫'‪5‬‬ ‫'‪3‬‬
‫'‪3‬‬ ‫'‪5‬‬
‫ﺗﻴﺪا ت(‪ :‬اﻟﺤﺪ‬
‫'‪• 3‬ﻧﻬﺎﻳ ﺔﺳﻴﺌ ﺔ ﻓ ﻲ ‪)GC‬آﺧﺮ ‪5‬ﻧﻴﻮﻛﻠﻴﻮ‬
‫ﺘﻄﺎﻟ ﺔ ﻏﻴﺮ ﻣﺤﺪدة‬
‫اﺳ‬

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺘﻬﺪف ﻋﻦ ﻃﺮﻳﻖ ﻣﺤﺎذاة اﻟ‬
‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ اﻟﻤ ﺴ‬
‫ﺘﺤﻘﻖ ﻣﻦ ﺧﺼﻮﺻﻴ ﺔ اﻟ‬
‫ﺘﻢ اﻟ‬
‫•ﻳ‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮن اﻟﺬيﺗﻢ اﻟﺤﺼﻮل ﻋﻠﻴﻪ‬

‫•ﺣﺠﻢ اﻷﻣ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﺤ ﺴﻴﻦ ‪PCR:‬‬

‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮا ت اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬‫ﺧﺼﺎﺋﺺ‬
‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮﻳﺰ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬
‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮﻳﺰ ﻃﻖ‬‫ﺧﺼﺎﺋﺺ‬
‫أداء ﻋﺎﻟ ﻲ‬

‫ﺘﻘﺮا ًرا ‪20‬ﻣﺮة‬

‫ﺜﺮ اﺳ‬
‫أﻛ‬
‫ﺘﻘﺮار اﻟﺤﺮاري‬
‫اﻻﺳ‬ ‫‪40‬دﻗﻴﻘ ﺔ ﻋﻨﺪ ‪95‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬
‫ﺜﺎل‪Deep Vent®، BIOLABS) :‬‬
‫ﺒﻴﻞ اﻟﻤ‬
‫)ﻋﲆﺳ‬

‫ﺜﺎل‪XL، ،‬‬
‫ﺒﻴﻞ اﻟﻤ‬
‫ﺒﻞ ﻧﻬﺎﻳ ﺔ اﻟﺸﺮﻳﻂ )ﻋﲆﺳ‬
‫ﻻﺗﻨﻔﺼﻞ ﻗ‬
‫اﻟﻌﻤﻠﻴ ﺔ‬ ‫ﺒﻴ ﺖ‬
‫ﺜ‬‫ﺘ‬‫‪~ 50‬ﻧ ﺖ ‪ /‬اﻟ‬ ‫ﺒﻴﻘﻴ ﺔ(‬
‫ﺘﻄ‬‫‪RTth DNA pol.‬اﻷﻧﻈﻤ ﺔ اﻟﺤﻴﻮﻳ ﺔ اﻟ‬

‫‪4‬ﻣﺮا ت أﺳﺮع‬
‫ﺳﺮﻋ ﺔ‬ ‫‪1,5 Kb / min‬‬
‫ﺜﺎل‪Speed STAR™ HS، TAKARA) :‬‬
‫ﺒﻴﻞ اﻟﻤ‬
‫)ﻋﲆﺳ‬

‫ﺑـ ‪1000‬ﻣﺮة‬‫>أﺧﻄﺎء أﻗﻞ‬

‫وﻓﺎء‬ ‫‪1 erreur / 10 Kb‬‬ ‫ﺒﻴﻞ‬

‫ﺗﻴ ﺔ ﻋﺎﻟﻴ ﺔ اﻟﺪﻗ ﺔ( )ﻋﲆﺳ‬
‫ﺒﺎ‬
‫ﺛ‬‫)ﻗﺮاءة إ‬
‫ﺜﺎل‪Pfu، STRATAGENE) :‬‬
‫اﻟﻤ‬

‫ﺗﻀﺨﻴﻢ ﻏﻴﺮ ﻣﺤﺪد ﻓ ﻲ درﺟ ﺔ‬

‫ﺑﺪاﻳ ﺔﺳﺎﺧﻨ ﺔ(‬
‫ﺘ ﺴﺨﻴﻦ ‪> 90‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ )‬
‫ﺘﻨﺸﻴﻂ ﻋﻦ ﻃﺮﻳﻖ اﻟ‬
‫اﻟ‬
‫اﻟﻨﻮﻋﻴ ﺔ‬ ‫ﺣﺮارة ﻣﻨﺨﻔﻀ ﺔ‬
‫ﺜﺎل‪KOD Hot Start DNA pol., NOVAGEN) :‬‬
‫)ﻣ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﺤ ﺴﻴﻦ ‪PCR:‬‬

‫اﻋﺪادا ت اﺧﺮى‬

‫ﺗﺮﻳ ﺲ ﺣﻤﺾ اﻟﻬﻴﺪروﻛﻠﻮرﻳﻚ اﻟﺮﻗﻢ اﻟﻬﻴﺪروﺟﻴﻨ ﻲ )‪8.5-9‬‬

‫ﺘﺮﻛﻴﺰا ت اﻷﻳﻮﻧﻴ ﺔ )‬
‫•اﻟﻤﺨﺰن اﻟﻤﺆﻗ ﺖ ‪ :‬اﻟﺮﻗﻢ اﻟﻬﻴﺪروﺟﻴﻨ ﻲ واﻟ‬

‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮﻳﺰ‬
‫‪Mg2+ :‬اﻟﻌﺎﻣﻞ اﻟﻤ ﺴﺎﻋﺪ ﻟﻠ‬

‫ﺘﻤﻬﻴﺪي ‪/‬ﺗﻬﺠﻴﻦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬

‫ﺒﻴ ﺖ اﻟ‬
‫ﺜ‬‫ﺗ‬‫‪Mg2 +، K + :‬‬

‫ﺒﻼزﻣﻴﺪ أو‬
‫ﺑﻴﻜﻮﻏﺮام ‪- 1‬ﻧﺎﻧﻮﻏﺮام ﻣﻦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟ‬
‫•ﻗﺎﻟ ﺐ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي ‪ :‬اﻟﺠﻮدة واﻟﻜﻤﻴ ﺔ ‪1‬‬

‫اﻟﻔﻴﺮوﺳ ﻲ‬

‫‪1‬ﻧﺎﻧﻮﻏﺮام ‪- 1‬ﻣﻴﻜﺮوﻏﺮام ﻣﻦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﺠﻴﻨﻮﻣ ﻲ‪.‬‬

‫ﺘﺪوﻳﺮ اﻟﺤﺮاري ‪ :‬ﻣﺪة ودرﺟ ﺔ ﺣﺮارة اﻟﺨﻄﻮا ت ‪...‬‬

‫ﺑﺮﻣﺠ ﺔ اﻟ‬
‫•‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﺎﺋ ﻲ ﻟﻬﻼم اﻻﻏﺎروز‬

‫ﺘﺤﻠﻴﻞ‪ :‬اﻟﻔﺼﻞ اﻟﻜﻬﺮ‬
‫اﻟ‬

‫ﺗﺮﻛﻴﺰ اﻟﺠﻞ ‪:‬‬

‫•‬

‫ﺗﺮﻛﻴﺰ ﻫﻼم اﻻﻏﺎروز )‪(٪‬‬ ‫ﻧﻄﺎق ﺣﺠﻢ ﺟﺰء اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬

‫)‪(bp‬‬
‫‪0,5‬‬ ‫‪1000 – 30000‬‬

‫‪0,7‬‬ ‫‪800 - 12000‬‬

‫‪1‬‬ ‫‪500 - 10000‬‬

‫‪1,2‬‬ ‫‪400 - 7000‬‬

‫‪1,5‬‬ ‫‪200 - 3000‬‬

‫‪2‬‬ ‫‪50 - 2000‬‬
Machine Translated by Google

‫•وﺳﻢ اﻟﺤﻤﺾ‬
‫اﻟﻨﻮوي‬

https://biotium.com
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﻞ ®‪Flashgel‬‬
‫ﺟﻞ »ﻣﻴﺰون« ﻣﻘﺎ‬

‫ﻫﻼم "ﻣﺤﻠﻴ ﺔ اﻟﺼﻨﻊ"‪.‬‬ ‫®‪)Flashgel‬ﻟﻮﻧﺰا(‬

‫ﺘﺤﻀﻴﺮ‬
‫وﻗ ﺖ اﻟ‬ ‫‪30-40‬دﻗﻴﻘ ﺔ‬ ‫ﺘﺨﺪام‬
‫ﺟﺎ ﻫﺰ ﻟﻺﺳ‬

‫إﻋﺪاد ﻋﻴﻨ ﺔ‬ ‫ﺗﺤﻤﻴﻞ اﻟﻤﺨﺰن اﻟﻤﺆﻗ ﺖ‬ ‫ﻋﻴﻨ ﺔ ﺧﺎم‬

‫ﻣﺪة اﻟﻬﺠﺮة‬ ‫‪30-45‬دﻗﻴﻘ ﺔ‬ ‫‪6‬دﻗﺎﺋﻖ‬

‫ﻣﻼﺣﻈ ﺔ‬ ‫ﺣﻮل إﱃ‬ ‫ﻛﻮن‬

‫ﺒﻨﻔ ﺴﺠﻴ ﺔ‬
‫اﻷﺷﻌ ﺔ ﻓﻮق اﻟ‬ ‫اﻟﻬﺠﺮة‬

‫ﻣﺨﺎﻃﺮة‬ ‫اﻟﻜﻴﻤﻴﺎﺋﻴ ﺔ واﻟﻔﻴﺰﻳﺎﺋﻴ ﺔ‬ ‫ﻣﺤﺪود ﺟﺪا‬

‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﻋﻴﻮ ب ‪PCR‬اﻟﻜﻼﺳﻴﻜﻴ ﺔ‬

‫ﺘﻘﻨﻴ ﺔ اﻟﻨﻮﻋﻴ ﺔ‬
‫•اﻟ‬

‫ﺑﻴ ﺐ‬
‫ﺘﺢ اﻷﻧﺎ‬
‫ﺒﺎء اﻟﺠﻮي ﻋﻨﺪ ﻓ‬
‫ﺘﻠﻮ ث ‪ :‬ﻇﻬﻮر اﻟﻬ‬
‫ﺗﻔﺎع ﺧﻄﺮ اﻟ‬
‫•ار‬

‫ﺑﻴﺎ ت ﻣﺰﻳﻔ ﺔ‬
‫اﻳﺠﺎ‬

‫ﺑﻌﺾ اﻟﻌﻴﻨﺎ ت‬‫ﺒﻄﺎ ت ﻓ ﻲ‬

‫ﺜ‬‫•وﺟﻮد ﻣ‬

‫ﺑﺔ‬
‫ﺒﻴﺎ ت اﻟﻜﺎذ‬
‫اﻟ ﺴﻠ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﻋﻴﻮ ب ‪PCR‬اﻟﻜﻼﺳﻴﻜﻴ ﺔ‬
‫ﺒﻄﺎ ت‬
‫ﺜ‬‫ﺜﻠ ﺔ ﻋﲆ اﻟﻤ‬
‫أﻣ‬

‫اﻟﻤﺼﺪر‬ ‫ﺒﻄﺎ ت ‪PCR‬‬

‫ﺜ‬‫ﻣ‬

‫ﻏﻨﻰ‬ ‫اﻟﻬﻴﻢ‬

‫ﺒﻮل‬
‫اﻟ‬ ‫اﻟﻴﻮرﻳﺎ‬

‫اﻷﻗﻤﺸ ﺔ اﻟﺤﻴﻮاﻧﻴ ﺔ‬ ‫اﻟﻜﻮﻻﺟﻴﻦ‬

‫اﻟﺠﻠﺪ واﻟﺸﻌﺮ‬ ‫اﻟﻤﻴﻼﻧﻴﻦ‬

‫اﻟﻔﻀﻼ ت‬ ‫اﻷﻣﻼح اﻟﺼﻔﺮاوﻳ ﺔ‬

‫ﺗﺎ ت وﺣﺪ ﻫﺎ‬

‫ﺒﺎ‬
‫اﻟﻨ‬ ‫ﺣﻤﺾ اﻟﻬﻴﻮﻣﻴﻚ‪ ،‬اﻟﻌﻔﺺ‬

‫إﻋﺪاد ﻋﻴﻨ ﺔ‬ ‫ﺜﺎﻧﻮل‪EDTA، ،‬‬

‫اﻟﻔﻴﻨﻮل‪ ،‬اﻹﻳ‬
‫ﺘﺮا ت‪،‬‬
‫ﺒﺎرﻳﻦ‪ ،‬اﻟ ﺴﻴ‬
‫اﻟﻬﻴ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻴﺎﻃﺎ ت‬
‫اﺣ‬

‫ﺜﻠﺞ‪ ،‬اﻟﻘﻔﺎزا ت(‬

‫ﺗﺠﻨ ﺐﺗﺤﻠﻞ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي )اﻟ‬
‫•‬

‫ﺒﻄﺎ ت ‪:‬‬
‫ﺜ‬‫ﺗﺠﻨ ﺐ اﻟﻤ‬
‫•‬
‫ﺗﻨﻘﻴ ﺔ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬
‫–‬

‫ﺗﺨﻔﻴﻒ اﻟﻌﻴﻨ ﺔ‬
‫‪-‬‬

‫ﺒﻘﺮي‬
‫ﺒﻮﻣﻴﻦ اﻟ‬
‫–إﺿﺎﻓ ﺔ ﻣﺼﻞ اﻷﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻴﺎﻃﺎ ت‬
‫اﺣ‬

‫ﺘﻠﻮ ث ‪:‬‬
‫ﺗﺠﻨ ﺐ اﻟ‬
‫•‬
‫ﺘﺼﻔﻴ ﺔ‬
‫‪-‬ﻣﺨﺎرﻳﻂ اﻟ‬

‫‪-‬ﻗ ﺴﺎﻣ ﺔ اﻟﻜﻮاﺷﻒ‬

‫ﺗﻨﻈﻴﻢ اﻟﻤﻌﻤﻞ ‪ :‬ﻣﻦ ‪2‬إﱃ ‪3‬ﻏﺮف‬
‫–‬
‫ﻏﺮف‬ ‫ﻧﺸﺎط‬

‫ﻣﻨﻄﻘ ﺔ ﻧﻈﻴﻔ ﺔ‬ ‫ﺜﺎﻧ ﻲ ﻟﺨﻠﻄﺎ ت ‪PCR‬‬

‫ﺗﺤﻀﻴﺮ ‪PSM‬ﻣﻦ اﻟﻨﻮع اﻟ‬

‫ﺒﻞ‬
‫ﻣﻨﻄﻘ ﺔ ﻣﺎ ﻗ‬ ‫ﺗﺨﺰﻳﻦ‬
‫ﺘﻪ إﱃ اﻟﻤﺰﻳﺞ و‬
‫ﺘﺨﺮاج اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي وإﺿﺎﻓ‬
‫اﺳ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ‬
‫اﻟ‬ ‫اﻟﻌﻴﻨﺎ ت‬

‫ﺑﻌﺪ‬‫اﻟﻤﻨﻄﻘ ﺔ‬ ‫ﺘﺪوﻳﺮ اﻟﺤﺮارﻳ ﺔ‪ ،‬اﻟﻜﺸﻒ )اﻟﻤﻮاد اﻟﻬﻼﻣﻴ ﺔ( )ﻻ‬

‫أﺟﻬﺰة اﻟ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ‬
‫اﻟ‬ ‫ﺘﺞ ﻣﻀﺨﻢ(‬
‫ﻳﺨﺮج أي ﻣﻨ‬

‫ﺗﻨﻈﻴﻢ اﻟﻌﻤﻞ ‪ :‬اﻟﻤﻀ ﻲ ﻗﺪﻣﺎ‬

‫–‬
Machine Translated by Google

‫ﺘﻘﻨﻴﺎ ت‬
‫اﻟ‬
‫ﺘﻘﺎ ت‬
‫اﻟﻤﺸ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻌﻤﺮة ‪PCR‬‬
‫ﻣﺴ‬

‫ﺘﻌﻤﺮة‬
‫‪o‬ﻧﻘﻞ ﺟﺰء ﻣﻦ اﻟﻤ ﺴ‬
‫ﺘﻴﺮﻳﺎ ﻓ ﻲ ﻣﺰﻳﺞ ‪PCR.‬‬
‫ﺒﻜ‬‫اﻟ‬

‫ﺘ ﺴﺨﻴﻦ اﻷول‪.‬‬
‫ﺛﻨﺎء اﻟ‬
‫ﺘﺨﺮاج اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي أ‬
‫ﺘﻴﺮي واﺳ‬
‫ﺒﻜ‬‫ﺘﺤﻠﻞ اﻟ‬
‫‪o‬اﻟ‬ ‫ﻣﺰﻳﺞ ‪PCR‬‬

‫ﺗﻤ ﺴﺨﻬﺎ اﻷوﻟ ﻲ‬

‫ﺗﺤﻠﻞ اﻟﺨﻼﻳﺎ و‬
‫ﺘﺤﻜﻢ ﻓ ﻲ اﻟﺠﻴﻨﺎ ت‬
‫ﺒﻴﻘﺎ ت‪ :‬اﻟ‬
‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬
‫‪94‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ ‪- 5‬دﻗﺎﺋﻖ‬

‫ﺘﻴﺮﻳ ﺔ‬
‫ﺒﻜ‬‫ﻧ ﺴﺎﻟ ﺔ اﻟ ﺴﻼﻻ ت اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻌﺪد ‪PCR‬‬
‫ﻣ‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮﻧﺎ ت‬
‫ﺒﺎدﺋﺎ ت واﻟﻌﺪﻳﺪ ﻣﻦ اﻷﻣ‬
‫‪o‬ﻋﺪة أزواج ﻣﻦ اﻟ‬

‫س اﻟﻘﻴﻮد‪:‬‬

‫ﺘﻠﻔ ﺔ‬
‫ﺒﻠﻴﻜﻮن ﻣﺨ‬
‫أﻃﻮال أﻣ‬

‫ﺒﺮاﻳﻤﺮ‬
‫ﺒﺮاﻳﻤﺮ‪- Tm :‬ﻗﺮﻳ ﺐ ﻟﺠﻤﻴﻊ اﻟ‬
‫ﺗﺼﻤﻴﻢ اﻟ‬

‫ﺘﻤﻬﻴﺪي‬
‫‪-‬ﺧﺼﻮﺻﻴ ﺔ أزواج اﻟ‬
‫‪-‬ﺧﻄﺮﺗﻜﻮﻳﻦ اﻟﺪﻳﻤﺮا ت‪.‬‬

‫ﺒﻴﻖ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫ﺜﻠ ﺔ اﻟ‬
‫أﻣ‬
‫ﺒﺎ ت اﻷﻣﺮاض‬
‫ﺒ‬‫ﺗﺤﺪﻳﺪ ﻣ ﺴ‬
‫ﺑﺤ ﺚ )‪SNP‬‬
‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ )‬
‫اﻟ‬
‫‪www.premierbiosoft.com‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫‪RT-PCR‬‬
‫ﺒ ﻲ ‪(RNA).‬‬
‫ﺒﻊ اﻟﻨ ﺴﺦ اﻟﻌﻜ ﺴ ﻲ ﻟﻠﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬
‫ﺘ‬‫ﺗ‬
‫ﺗﻀﺨﻴﻢ ‪PCR.‬‬

‫ﻣﺮﻧﺎ‬

‫اﻟﻨ ﺴﺦ اﻟﻌﻜ ﺴ ﻲ‬

‫ﺑﺎ ت اﻟﻘﻮﻣﻴ ﺔ‬
‫ﻧﻈﺎم اﻟﺤ ﺴﺎ‬

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬

‫ﺒﻴﻖ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫ﺜﻠ ﺔ اﻟ‬
‫أﻣ‬
‫ﺘﻌﺮف ﻋﲆ اﻟﻔﻴﺮوﺳﺎ ت‬
‫اﻟ‬

‫آرن‬
‫ﺒﻠﻴﻜﻮﻧﺰ‬
‫أﻣ‬
‫ﺒﻴﺮ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‬
‫ﺘﻌ‬‫دراﺳ ﺔ اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﺪاﺧﻞ‬
‫‪PCR‬ﻣ‬

‫ﺘﺎﻟﻴ ﺔ‬
‫ﺘ‬‫‪o 2 PCR‬ﻣ‬

‫ﺜﺎﻧ ﻲ داﺧﻠ ﻲ إﱃ اﻷول‬

‫ﺒﺎدﺋﺎ ت ‪o‬اﻟﻤﻀﺨﻢ اﻟ‬
‫‪o‬زوﺟﺎن ﻣﻦ اﻟ‬

‫ﺘﺎﻟ ﻲ أﺻﻐﺮ ‪o‬زﻳﺎدة اﻟﺨﺼﻮﺻﻴ ﺔ‬

‫ﺑﺎﻟ‬
‫و‬

‫ﺒﻴﻖ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫ﺜﻠ ﺔ اﻟ‬
‫أﻣ‬
‫ﺒﻲ‬
‫ﺗﺤﺪﻳﺪ ﻓﻴﺮوﺳﺎ ت اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬

‫ﺘﻀﺨﻢ‬
‫ﺗﺤ ﺴﻴﻦ ﺧﺼﻮﺻﻴ ﺔ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﻤ‬

‫‪www.abmgood.com‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫‪RT-PCR‬و ‪PCR‬ﻓ ﻲ اﻟﻤﻮﻗﻊ‬

‫ﺘﺞ ‪PCR‬‬
‫‪PCR‬ﻋﲆ ﻗ ﺴﻢ اﻷﻧ ﺴﺠ ﺔ ‪+‬وﺿﻊ اﻟﻌﻼﻣﺎ ت ﻓ ﻲ اﻟﻤﻮﻗﻊ ﻟﻤﻨ‬

‫ﺘ ﺔ واﻟﻨﻔﺎذﻳ ﺔ‬
‫ﺑ‬‫ﺜﺎ‬
‫ﻗ ﺴﻢ اﻷﻧ ﺴﺠ ﺔ اﻟ‬

‫ﻣﺮﻧﺎ‬
‫اﻟﻨ ﺴﺦ اﻟﻌﻜ ﺴ ﻲ‬
‫ﺑﺎ ت اﻟﻘﻮﻣﻴ ﺔ‬
‫ﻧﻈﺎم اﻟﺤ ﺴﺎ‬

‫‪PCR‬ﻋﲆ اﻟﺸﺮﻳﺤ ﺔ ‪:‬‬

‫ﺗﻴﺪا ت اﻟﻤ ﺴﻤﻰ‬
‫اﻟﻨﻮﻛﻠﻴﻮ‬

‫ﺘﺞ ‪PCR‬‬
‫ﻣﻨ‬

‫ﻣﺎرﻛ ﺔ‬

‫‪Ac II : anti-Ig‬‬
‫وﺿﻊ اﻟﻌﻼﻣﺎ ت‬ ‫اﻟﻔﺄر ‪-‬اﻧﺰﻳﻢ‬ ‫ﺒﻴﻖ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫ﺜﻠ ﺔ اﻟ‬
‫أﻣ‬
‫اﻟﻤﻨﺎﻋﻴ ﺔ ﻓ ﻲ اﻟﻤﻮﻗﻊ‬
‫ﺑﺎﻟﻤﺎوس‬‫‪Ac I:‬ﻣﻀﺎد ﻟﻠﻌﻼﻣﺎ ت اﻟﺨﺎﺻ ﺔ‬
‫ﺘﻄﻮر اﻟﺠﻨﻴﻨ ﻲ‬
‫دراﺳ ﺔ اﻟ‬
‫ﺒﺎء اﻷورام‬
‫أﻃ‬
‫ﻋﻠﻢ اﻷﻣﺮاض‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﻌﺪد اﻷﺷﻜﺎل اﻟﻤﻀﺨﻢ اﻟﻌﺸﻮاﺋ ﻲ(‬

‫‪)RAPD‬اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي ﻣ‬

‫ﺘﻤﻬﻴﺪي‬
‫ﺘﻬﺠﻴﻦ اﻟ‬
‫ﺗﻌﺪد اﻷﺷﻜﺎل ﻣﻮﻗﻊ اﻟ‬

‫ﺜﺎل ﻋﲆ ﻣﻮﺿﻊ‬
‫ﻣ‬

‫ﻳﻔﻴﺪو ب‬‫إﻧﺪ‬
‫اﻟﻔﺮد أ‬

‫ﺑﺎدﺋﺎ ت ﻗﺼﻴﺮة‪10 :‬ﻃﻦ ﻣﻦ‬

‫‪o‬‬

‫ﺗ ﺴﻠ ﺴﻼ تﺗﻌ ﺴﻔﻴ ﺔ‬
‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬

‫ﺘﻬﺠﻴﻦ اﻟﻌﺸﻮاﺋ ﻲ ﻓ ﻲ اﻟﺠﻴﻨﻮم‬

‫‪o‬اﻟ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ‬
‫اﻟ‬ ‫ﻻﺗﻀﺨﻴﻢ‬

‫ﺘﻀﺨﻴﻢ ﻓﻘﻂ ﻓ ﻲ ﺣﺎﻟ ﺔ وﺟﻮد ﻣﻮﻗﻌﻴﻦﺗﻬﺠﻴﻦ‬

‫‪o‬اﻟ‬
‫ﺒﻴﻦ ﻋﲆ ﻛﻼ اﻟﺨﻴﻄﻴﻦ‬
‫ﻗﺮﻳ‬

‫اﻟﺠﻴﻨﻮم‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ ‪~ 10 :‬أﺟﺰاء‬
‫‪o‬ﻣﻠﻒ اﻟ‬
‫ﻛﺎﻣﻞ‬

‫ﺒﻴﻘﺎ ت ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬
‫دراﺳ ﺔﺗﻌﺪد اﻷﺷﻜﺎل‬
‫وﻓﻘﺎ ﻟﻤﻮﻗﻊ ‪www.gnis-pedagogie.org‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫‪PCR - SSR‬‬
‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ اﻟﻘﺼﻴﺮ(‬
‫ﺗﻜﺮار اﻟ‬
‫ﻋﻼﻣﺎ ت اﻷﻗﻤﺎر اﻟﺼﻨﺎﻋﻴ ﺔ اﻟﺼﻐﻴﺮة ‪(SSR:‬‬
‫ﺘﻜﺮرة‬
‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻼ ت اﻟﻤ‬
‫ﺗﻌﺪد اﻷﺷﻜﺎل اﻟﻄﻮﻟﻴ ﺔ ﻟﻠ‬

‫اﻟﻔﺮد أ‬ ‫إﻧﺪﻳﻔﻴﺪو ب‬

‫ﺘﻜﺮر ﻣﻦ ‪1‬إﱃ ‪4 nt‬‬

‫ﺗ ﺴﻠ ﺴﻞ ﻣ‬
‫‪o‬اﻟﻘﻤﺮ اﻟﺼﻨﺎﻋ ﻲ اﻟﺼﻐﻴﺮ =‬

‫‪o‬اﻻﺷﻌﺎل‪:‬ﺗﺄﻃﻴﺮ‬

‫اﻟﻬﺪف اﻟﻘﻤﺮ اﻟﺼﻨﺎﻋ ﻲ اﻟﺼﻐﻴﺮ‬

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬

‫ﺘﻜﺮارا ت‬
‫‪o Amplicon:‬اﻟﻄﻮل ﺣ ﺴ ﺐ ﻋﺪد اﻟ‬

‫ﺑﻴﻦ‬‫ﺘﻤﻴﻴﺰ‬
‫‪o‬إﻣﻜﺎﻧﻴ ﺔ اﻟ‬
‫ﺘﻐﺎﻳﺮ‬
‫ﺒﻠﻴﻜﻮن( ﻣ‬
‫ﺛﻞ اﻟﺰﻳﺠﻮ ت ‪(1‬أﻣ‬
‫ﺘﻤﺎ‬
‫ﻣ‬ ‫ﺒﻠﻴﻜﻮن‬
‫أﻣ‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮن(‬
‫اﻟﺰﻳﺠﻮ ت ‪(2‬أﻣ‬ ‫ﺒﻠﻴﻜﻮن‬
‫أﻣ‬ ‫ﻃﻮﻳﻞ‬
‫ﻣﺤﻜﻤ ﺔ‬
‫ﺒﻴﻘﺎ ت ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬
‫ﺗﻴ ﺔ‬
‫ﺒﺎ‬
‫دراﺳ ﺔ اﻷﺻﻨﺎف اﻟﻨ‬
‫اﻟﻄ ﺐ اﻟﺸﺮﻋ ﻲ‬ ‫وﻓﻘﺎ ﻟﻤﻮﻗﻊ ‪www.gnis-pedagogie.org‬‬
Machine Translated by Google

‫ﺒﺪأ‬
‫اﻟﻤ‬PCR: ‫ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ‬

http://genomictree.com

‫ •اﻷﺧﻀﺮ =وﻛﻴﻞ‬SYBR
intercalant
dsDNA ‫ﺒﻴ ﺖ ﻋﲆ‬
‫ﺜ‬‫ﺘ‬‫•اﻟ‬
‫ﺗﻔﻌﻴﻞ ﻣﻀﺎن‬

www.dna.utah.edu
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺒﺪأ‬
‫ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ ‪PCR:‬اﻟﻤ‬

‫‪http://genomictree.com‬‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮن‬
‫ﺒﺎر ﻃﻘﻤﺎن إﱃ اﻷﻣ‬
‫ﺘﻬﺠﻴﻦ اﻟﻨﻮﻋ ﻲ ﻟﻤ ﺴ‬
‫•اﻟ‬

‫ﺑﻮاﺳﻄ ﺔ ﻧﺸﺎط ﻧﻮﻛﻠﻴﺎز ﺧﺎرﺟ ﻲ‬ ‫ﺘﺤﻠﻞ‬ ‫•اﻟ‬

‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز‬‫'‪5'-3‬ﻟﻠ‬

‫•ﻓﺼﻞ اﻟﻤﺮاﺳﻞ‪/‬اﻟﻤﺨﻤﺪ‬

‫ﺗﻔﻌﻴﻞ ﻣﻀﺎن‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺒﺪأ‬
‫ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ ‪PCR:‬اﻟﻤ‬

‫ﺒﺔ‬‫ﻫﻀ‬
‫اﻟﻤﺮﺣﻠ ﺔ اﻷﺳﻴ ﺔ‬

‫ﺿﻮﺋ ﻲ‬

‫طم‬

‫ﺿﺠﻴﺞ ﻓ ﻲ‬ ‫ﻧﺎﻓﺬة اﻟﻘﺮاءة‬

‫اﻟﺨﻠﻔﻴ ﺔ‬ ‫ﺒ ﺔ(‬
‫ﺘ‬‫ﺳﻴﻮﻳﻞ )اﻟﻌ‬

‫اﺳﻢ اﻟﺪورا ت‬

‫‪10‬‬ ‫‪20‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪40‬‬

‫ﺜﻴﺮ ﻣﻦ ﺿﻮﺿﺎء اﻟﺨﻠﻔﻴ ﺔ‬

‫ﺑﻜ‬‫ﺘ ﺴﺠﻴﻞ إﺷﺎرة أﻋﲆ‬
‫ﺒ ﺔ‪ :‬ﻋﺪد اﻟﺪورا ت اﻟﻼزﻣ ﺔ ﻟ‬
‫ﺘ‬‫ﺒ ﺔ( =دورة اﻟﻌ‬
‫ﺘ‬‫‪)Ct‬دورة اﻟﻌ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ ‪PCR: PCR‬اﻟﻜﻤ ﻲ‬

‫ﺘﻬﺪﻓ ﺔ ﻓ ﻲ اﻟﻌﻴﻨ ﺔ‬
‫ﺘﻨﺎﺳ ﺐ ‪Ct‬ﻋﻜ ﺴﻴﺎ ﻣﻊ ﻋﺪد ﻧ ﺴﺦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﻤ ﺴ‬
‫ﻳ‬

‫ﺘﻠﻔ ﺔ‬
‫ﺘﺎﺋﺞ ‪qPCR‬ﻋﲆ ﻣﻌﺎﻳﻴﺮ ﻣﺨ‬
‫ﻧ‬ ‫اﻟﻤﻨﺤﻨﻰ اﻟﻘﻴﺎﺳ ﻲ‬

‫‪http://www.mdpi.com‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺑﻞ ‪PCR‬ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ‬

‫‪PCR‬ﻣﻘﺎ‬

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤ‬
‫ﺗﻔﺎﻋﻞ اﻟ‬
‫‪qPCR‬‬

‫ﺗﺤﺪﻳﺪ اﻟﻜﻤﻴﺎ ت‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬

‫اﻟﻨﻮﻋﻴ ﺔ‬ ‫‪+‬‬ ‫ﺘﻘﻨﻴﺎ ت‬

‫زﻳﺎدة ﻟ‬
‫ﺘﺤﻘﻴﻖ‬ ‫اﻟ‬

‫ﺘﻠﻮ ث‬
‫ﺧﻄﺮ اﻟ‬ ‫‪++‬‬ ‫‪-‬‬

‫ﺘﺔ‬
‫ﺗﻤ‬‫أ‬ ‫‪-‬‬ ‫‪++‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺒﻴﻘﺎ ت ‪PCR‬ﻓ ﻲ اﻟﻮﻗ ﺖ اﻟﺤﻘﻴﻘ ﻲ‬

‫ﺗﻄ‬

‫ﺘﻴﺮﻳﺎ واﻟﻔﻴﺮوﺳﺎ ت واﻟﻔﻄﺮﻳﺎ ت واﻟﻄﻔﻴﻠﻴﺎ ت‬

‫ﺒﻜ‬‫ﺘﻬﺎ‪ :‬اﻟ‬
‫ﺑﺎ ت وﻗﻴﺎس ﻛﻤﻴ‬
‫•اﻟﻜﺸﻒ ﻋﻦ اﻟﻤﻴﻜﺮو‬

‫ﺒﻴﺌﻴ ﺔ‪ ،‬إﻟﺦ‪(.‬‬
‫ﺒﻴ ﺔ‪ ،‬اﻟﺰراﻋﻴ ﺔ اﻟﻐﺬاﺋﻴ ﺔ‪ ،‬اﻟﻤﺠﺎﻻ ت اﻟ‬
‫)اﻟﻄ‬

‫•ﻋﻠﻢ اﻷورام ‪(RT-PCR‬اﻟﻜﻤ ﻲ(‬

‫ﺒﻴﺮ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ ‪(RT-PCR‬اﻟﻜﻤ ﻲ(‬

‫ﺘﻌ‬‫•اﻟ‬
‫ﺛﻴﺎ‬
‫ﺒﺤ ﺚ ﻋﻦ اﻟﻜﺎﺋﻨﺎ ت اﻟﻤﻌﺪﻟ ﺔ ورا‬
‫•اﻟ‬

‫ﺒﻼزﻣﻴﺪ‬
‫ﺘﺤﻜﻢ ﻓ ﻲ رﻗﻢ ﻧ ﺴﺨ ﺔ اﻟ‬
‫•اﻟ‬
‫•‬ ‫…‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: RPA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺗﻠﻒ(‪.‬‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤﺆ‬
‫ﺗﻀﺨﻴﻢ إﻧﺰﻳﻢ اﻟ‬
‫ﻓﻴﺪﻳﻮ )‬

‫‪www.twistdx.co.uk‬‬

‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﺘﻤﻬﻴﺪي‪/‬اﻟ‬
‫ﺘﺮﻛﻴ ﺐ اﻟ‬
‫‪1.‬إﻋﺎدة اﻟ‬
‫ﺗﻠﻒ(‬
‫ﺛﻞ )ﻣﺆ‬
‫ﺘﻤﺎ‬
‫ﻣ‬
‫ﺗﻴﻨﺎ ت )‪SSB‬‬
‫ﺑﺮو‬
‫ﺘﻘﺮار ‪)ssDNA‬‬
‫اﺳ‬

‫ﺘﻄﺎﻟ ﺔ ﻣﻊ إزاﺣ ﺔ اﻟﺨﻴﻮط‬

‫‪2.‬اﻻﺳ‬
‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز(‬
‫)‬

‫ﺒﻠﻤﺮة‬
‫ﺑﻮﻳ ﺔ ﻋﻨﺪﺗﻘﺎﻃﻊ اﻟ‬
‫ﻓﺼﻞ اﻟﺨﻴﻮط اﻷ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: RPA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺗﻠﻒ(‬
‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮاز اﻟﻤﺆ‬
‫ﺗﻀﺨﻴﻢ إﻧﺰﻳﻢ اﻟ‬
‫)‬
‫ﺘﻤﺎﻣﺎ ت ‪:‬‬
‫اﻹ ﻫ‬

‫ﺑ ﺴﻴﻄ ﺔ(‬‫ﺘﻠ ﺔﺗ ﺴﺨﻴﻦ‬

‫ﺑﻮاﺳﻄ ﺔ ﻛ‬‫ﺘﻢ ﺿﻤﺎﻧﻪ‬
‫ﺘﻢﺗﻨﻔﻴﺬه ﻋﻨﺪ درﺟ ﺔ ﺣﺮارة ﻣﻨﺨﻔﻀ ﺔ ‪37-42 :‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ )ﻳ‬
‫•ﻳ‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮن ﺧﻼل ‪3‬إﱃ ‪10‬دﻗﺎﺋﻖ‪.‬‬

‫ﺘﺸﺎف اﻷﻣ‬
‫•ﺳﺮﻳﻊ ‪:‬ﻳﻤﻜﻦ اﻛ‬
‫•ﺣ ﺴﺎس )اﻟﻜﺸﻒ ﻋﻦ ﻧ ﺴﺨ ﺔ واﺣﺪة ﻣﻦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي(‪،‬ﺗﻌﺪد اﻹرﺳﺎل‬
‫ﻣﻤﻜﻦ‪ ،‬اﻟﻘﻴﺎس اﻟﻜﻤ ﻲ ﻣﻤﻜﻦ‪،‬ﻳﻤﻜﻦﺗﺤﻘﻴﻘﻪ ﻋﲆ ﻋﻴﻨﺎ ت ﻏﻴﺮ ﻧﻘﻴ ﺔ‪،‬ﻳﻤﻜﻦﺗﺤﻘﻴﻘﻪ ﻋﲆ اﻟﺤﻤﺾ‬
‫ﺒﺮي‪...‬‬
‫ﺘ‬‫ﺘﺨﺼﺺ ﻏﻴﺮ ﻣﺨ‬
‫ﺒﻞ ﻣ‬
‫ﺑﻌﺪ ‪RT،‬ﻳﻤﻜﻦﺗﺤﻘﻴﻘﻪ ﻣﻦ ﻗ‬‫ﺒﻲ‬
‫اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬

‫ﺒﻴﻘﺎ ت ‪:‬‬
‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬
‫ﺒ ﻲ‪ ،‬ﻏﺬاﺋ ﻲ‪ ،‬زراﻋ ﻲ‪ ،‬إﻟﺦ‪.‬‬
‫ﺑﻴﻮﻟﻮﺟ ﻲ‪ :‬ﻃ‬
‫ﺘﺸﺨﻴﺺ اﻟﻤﻴﻜﺮو‬
‫اﻟ‬
‫ﺗﻴ ﺔ‬
‫ﺒﺎ‬
‫ﺒ ﺔ ﻟﻸﻣﺮاض اﻟﻨ‬
‫ﺒ‬‫ﺑﺤ ﺚ ﻋﻦ اﻟﻜﺎﺋﻨﺎ ت اﻟﺤﻴ ﺔ اﻟﺪﻗﻴﻘ ﺔ اﻟﻤ ﺴ‬
‫اﻷﻃﻘﻢ اﻟﻤﻴﺪاﻧﻴ ﺔ‪ :‬ا‬

‫ﺘﻔﺎﻋﻞ(‬
‫اﻟﻜﺸﻒ )ﻏﺮﻓ ﺔ اﻟ‬
‫ﺘﻠ ﺔ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ )ﻛ‬
‫اﻟ‬
‫ﺘﺪﻓﺌ ﺔ(‬
‫اﻟ‬
‫ِﺨﻼص‬
‫ﺘ‬
‫ِﺳ‬‫ا‬
‫اﻟﻤﺼﺪر‪RFSV :‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: TMA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ(‬
‫ﺑﻮﺳﺎﻃ ﺔ اﻟ‬‫)اﻟﻨ ﺴﺦ‬
‫ﻓﻴﺪﻳﻮ ﻫﻮﻟﻮﺟﻴﻚ ‪1‬‬
‫ﻓﻴﺪﻳﻮ ﻫﻮﻟﻮﺟﻴﻚ ‪2‬‬
‫ﺗﻀﺨﻴﻢ اﻟﻤﺮﺣﻠ ﺔ اﻟﺨﻄﻴ ﺔ‬
‫ﺘﻤﻬﻴﺪي‬
‫ﺗﻬﺠﻴﻦ اﻟﻤﺮوج اﻟ‬
‫•‬

‫•اﻟﻨ ﺴﺦ اﻟﻌﻜ ﺴ ﻲ ‪:‬‬

‫ﺑﻴﻨﺎﻟ ﻲ اﻟﺸﺎرﻗ ﺔﺗﻮﻟﻴﻒ ]ﻛﺪﻧﺎ[‪.‬‬

‫‪-‬‬

‫ﺒﻲ‬
‫ﺗﺪ ﻫﻮر اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬
‫‪-‬‬

‫ﺗﻬﺠﻴﻦ أ‬
‫‪-‬‬
‫ﺘﻤﻬﻴﺪي اﻟﺸﻌﻮر‬
‫اﻟ‬

‫ﺗﻮﻟﻴﻒ ‪dscDNA‬‬
‫‪-‬‬

‫ﺒﺎر اﻟﺠﻴﻨﺎ ت‬
‫اﻟﻤﺼﺪر‪ :‬ﻣ ﺴ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: TMA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ(‬
‫ﺑﻮﺳﺎﻃ ﺔ اﻟ‬‫)اﻟﻨ ﺴﺦ‬

‫ﺘﺎج ‪100‬إﱃ ‪1000‬‬

‫•اﻟﻨ ﺴﺦ ‪ :‬إﻧ‬
‫ﻧ ﺴﺨ ﺔ ﻣﻦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬
‫ﺒﻲ‬
‫اﻟﺮﻳ‬

‫ﺘﺎج ‪d'ADNc‬‬
‫•اﻟﻨ ﺴﺦ اﻟﻌﻜ ﺴ ﻲ ‪ :‬إﻧ‬

‫ﺒﺎر اﻟﺠﻴﻨﺎ ت‬
‫اﻟﻤﺼﺪر‪ :‬ﻣ ﺴ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: TMA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ(‬
‫ﺑﻮﺳﺎﻃ ﺔ اﻟ‬‫)اﻟﻨ ﺴﺦ‬

‫ﺘﻀﺨﻴﻢ‬
‫اﻟﻤﺮﺣﻠ ﺔ اﻷﺳﻴ ﺔ ﻟﻠ‬

‫ﺒﺎر اﻟﺠﻴﻨﺎ ت‬
‫اﻟﻤﺼﺪر‪ :‬ﻣ ﺴ‬
‫ﻛﺸﻒ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: TMA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ(‬
‫ﺑﻮﺳﺎﻃ ﺔ اﻟ‬‫)اﻟﻨ ﺴﺦ‬

‫ﺒ ﻲ ‪(RNA):‬ﻧﻈﺎم اﻟﻤﻨﺎرة اﻟﺠﺰﻳﺌﻴ ﺔ‬

‫ﻛﺸﻒ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬

‫ﺒﻲ‬
‫ﺗﻀﺨﻴﻢ اﻟﻬﺪف اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬

‫اﻟﻤﺼﺪر‪:‬ﺳﻴﺠﻤﺎ اﻟﺪرﻳﺦ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘ ﺴﺎوي اﻟﺤﺮارة ‪PCR: TMA‬‬

‫ﻣ‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ(‬
‫ﺑﻮﺳﺎﻃ ﺔ اﻟ‬‫)اﻟﻨ ﺴﺦ‬

‫‪• 100-1000‬ﻧ ﺴﺨ ﺔ‪/‬ﺟﺰيء‪"/‬دورة"‬

‫ﺒﻠﻴﻜﻮن ﻓ ﻲ ‪15-30‬دﻗﻴﻘ ﺔ‪.‬‬

‫‪10‬ﻣﻠﻴﺎر أﻣ‬

‫•ﺟﻤﻴﻊ اﻟﻤﺮاﺣﻞ ﻋﻨﺪ ‪41‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬

‫ﺘﺮاع ‪ :‬ﺷﺮﻛ ﺔ ‪GENPROBETM‬اﻷﻣﺮﻳﻜﻴ ﺔ‬
‫ﺑﺮاءة اﻻﺧ‬
‫•‬

‫ﺘﺨﺮاج‪،‬‬
‫ﺑﺎﻟﻜﺎﻣﻞ‪ :‬اﻻﺳ‬‫ﺘﺔ‬
‫ﺗﻤ‬‫ﺗﻘﻨﻴ ﺔ ﻣﺆ‬
‫•‬
‫ﺘﻀﺨﻴﻢ واﻟﻜﺸﻒ‬
‫اﻟ‬

‫ﻧﻈﺎم )‪Panther® (Hologic‬‬

‫ﺒﻴﻘﺎ ت‪ :‬اﻟﻘﻴﺎس اﻟﻜﻤ ﻲ ﻟﻔﻴﺮوﺳﺎ ت اﻟﺤﻤﺾ‬

‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬
‫ﺒ ﻲ‪.‬‬
‫اﻟﻨﻮوي اﻟﺮﻳ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﺪاد ‪Bootstrap: SNAPSHOT‬‬

‫اﻣ‬

‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‪:‬ﺗﺤﺪﻳﺪ ‪SNP‬‬

‫ﺗﻘﻨﻴ ﺔ اﻟ‬

‫‪SNP‬اﻟﻤﻌﺮوف‬

‫ﺘﻬﺪف اﻟﺬي‬
‫اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﻤ ﺴ‬
‫ﺘﺎ ﺟ ﻲ ﺟﻜﺎ ت '‪3‬‬
‫ﺗ‬‫ﺗﺠﻜﻜﻜﺎ‬
‫ﺘﺎﻛﺠﺎ‬
‫‪'5‬ﻛ‬
‫ﺑﻮاﺳﻄ ﺔ ‪PCR‬‬‫ﺒ ًﻘﺎ‬
‫ﺗﻢﺗﻀﺨﻴﻤﻪ ﻣ ﺴ‬
‫ﺘﺎ '‪5‬‬
‫ﺘﺎ ت ج ﻛﺠ‬
‫ﺘﺎﻛﻜﺠﺠ‬
‫ﺗﺠﻜ‬
‫'‪3‬ﺟﺎا‬
‫ﺘﻪ‬
‫ﺗﻨﻘﻴ‬
‫و‬

‫ﻣﺰﻳﺞ ﻟﻘﻄ ﺔ‪:‬‬

‫ﺒﻮن ‪PCR‬‬
‫ﺗﺎﻣ‬
‫•‬ ‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮﻳﺰ‬‫•ﻃﻖ‬

‫ﺒﻊ‬
‫ﺘﻬﺠﻴﻦ اﻟﻤﻨ‬
‫ﺘﻤﻬﻴﺪي واﺣﺪ‪ :‬اﻟ‬
‫•اﻟ‬
‫ﺘﺎ '‪3‬‬
‫ﺗ‬‫ﺗﺠﻜﻜﻜﺎ‬
‫ﺘﺎﻛﺠﺎ‬
‫‪'5‬ﻛ‬
‫ﻣﻦ ‪SNP‬‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﺪاد ‪Bootstrap: SNAPSHOT‬‬

‫اﻣ‬
‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‪:‬ﺗﺤﺪﻳﺪ ‪SNP‬‬
‫ﺗﻘﻨﻴ ﺔ اﻟ‬

‫ﻣﺰﻳﺞ ﻟﻘﻄ ﺔ‪:‬‬ ‫ﺑﻴﺢ اﻟﻔﻠﻮرﺳﻨ ﺖ ‪ddNTP‬‬

‫•ﻣﺼﺎ‬

‫أ‬ ‫ت‬

‫ح‬ ‫ح‬ ‫ح‬ ‫ح‬

‫ج‬ ‫ز‬

‫ح‬ ‫ح‬ ‫ح‬ ‫ح‬

‫ﺘﺄﻟﻘ ﻲ‬
‫اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﺪاد ‪Bootstrap: SNAPSHOT‬‬

‫اﻣ‬
‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‪:‬ﺗﺤﺪﻳﺪ ‪SNP‬‬
‫ﺗﻘﻨﻴ ﺔ اﻟ‬

‫ﺘﺎ ﺟ ﻲ ﺟﻜﺎ ت '‪3‬‬

‫ﺗ‬‫ﺗﺠﻜﻜﻜﺎ‬
‫ﺘﺎﻛﺠﺎ‬
‫‪'5‬ﻛ‬
‫ﺗﻤ ﺴﺦ‬

‫‪96‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬

‫ﺘﺎ '‪5‬‬
‫ﺘﺎ ت ج ﻛﺠ‬
‫ﺘﺎﻛﻜﺠﺠ‬
‫ﺗﺠﻜ‬
‫'‪3‬ﺟﺎا‬

‫ﺗﻬﺠﻴﻦ‬ ‫ﺘﺎ‬
‫ﺗ‬‫ﺗﺠﻜﻜﻜﺎ‬
‫ﺘﺎﻛﺠﺎ‬
‫‪'5‬ﻛ‬
‫‪50‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬ ‫ﺘﺎ '‪5‬‬
‫ﺘﺎ ت ج ﻛﺠ‬
‫ﺘﺎﻛﻜﺠﺠ‬
‫ﺗﺠﻜ‬
‫'‪3‬ﺟﺎا‬

‫ﺘﺪاد‬
‫اﻣ‬
‫ﺘﺎ ﺟ ﻲ‬
‫ﺗ‬‫ﺗﺠﻜﻜﻜﺎ‬
‫ﺘﺎﻛﺠﺎ‬
‫'‪5‬ﻛ‬
‫‪60‬درﺟ ﺔ ﻣﺌﻮﻳ ﺔ‬ ‫ﺘﺎ '‪5‬‬
‫ﺘﺎ ت ج ﻛﺠ‬
‫ﺘﺎﻛﻜﺠﺠ‬
‫ﺗﺠﻜ‬
‫'‪3‬ﺟﺎا‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﺪاد ‪Bootstrap: SNAPSHOT‬‬

‫اﻣ‬
‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‪:‬ﺗﺤﺪﻳﺪ ‪SNP‬‬
‫ﺗﻘﻨﻴ ﺔ اﻟ‬

‫ﺘﻌﺪدة‬
‫ﻟﻘﻄ ﺔ ﻣ‬
‫ﻋﺪة اﻻﺷﻌﺎل‪:‬‬

‫ﺘﻠﻔ ﺔ‬
‫ﺑـ ‪SNPs‬اﻟﻤﺨ‬‫‪-‬ﺧﺎص‬
‫ﺘﻠﻔ ﺔ ﻓ ﻲ ‪5‬أﻗﺪام‬
‫ﺑﺄﺣﺠﺎم ﻣﺨ‬
‫‪-‬ﻣﻊ ذﻳﻮل ‪polyC‬‬

‫ﺘﻬﺠﻴﻦ‬
‫•اﻟ‬
‫ﻗﺎﻟ ﺐ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي اﻟﻤﺸﻮه‬ ‫ﺗﻌﺪد اﻷﺷﻜﺎل‬

‫ﺘﺪاد‬
‫•اﻣ‬

‫ت‬ ‫ز‬ ‫أ‬

‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺘﺪاد ‪Bootstrap: SNAPSHOT‬‬

‫اﻣ‬
‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‪:‬ﺗﺤﺪﻳﺪ ‪SNP‬‬
‫ﺗﻘﻨﻴ ﺔ اﻟ‬

‫ﺑﺎﺋ ﻲ اﻟﺸﻌﺮي‬
‫ﺗﻌﺪد اﻹرﺳﺎل‪ :‬اﻟﺮﺣﻼن اﻟﻜﻬﺮ‬
‫•‬
‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬
‫ت‬
‫أ‬

‫ز‬

‫ﺑﺎﺋ ﻲ‬
‫ﺘﻌﺮض ﻟﻤﺠﺎل ﻛﻬﺮ‬
‫ﺗ‬‫ﺑﺎء و‬
‫ﺑﺎﻟﻜﻬﺮ‬‫اﻟﺸﻌﻴﺮا ت اﻟﺪﻣﻮﻳ ﺔ ﻣﻤﻠﻮءة‬

‫ﻛﺎﺷﻒ‬
‫اﻟﺼﻮر‬
‫ﻓ ﻲ ﻋﺸﺮة اﻟﺠﻠﻮس ﻫﻮ ﻣﻦ اﻷﻧﻔﻠﻮﻧﺰا‬

‫ﺣﺠﻢ اﻟﻘﻄﻌ ﺔ )‪(bp‬‬

‫ﺗﺸﻴ ﺖ‪،‬‬
‫ﺑﻮ‬‫ﺳ ﻲ‪.‬‬
‫إي‪ .‬ﺟﺮﻳﻠﻴﻴﺮ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﻘﻨﻴﺎ ت أﺧﺮى‬

‫ﺧﺼﺎﺋﺺ ﻧﻮع ‪PCR‬‬ ‫ﺒﻴﻘﺎ ت‬

‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬

‫ﺛﻢﺗﻨﺨﻔﺾﺗﺪرﻳﺠ ًﻴﺎ ﻣﻦ دورة إﱃ أﺧﺮى‬ ‫اﻟﺪورااﻟ ت‬

‫ﺒﺪاﻳ ﺔ‬ ‫ﺗﻔﻌ ﺔ ﻓﺟﺪﻲًا ﻓ ﻲ‬
‫اﻟﺼﺮاﻣ‬ ‫ﻳﺪ ﻣﻦ‬
‫‪PCR‬ﻣﺮ‬ ‫اﻟﺨﺼﻮﺻﻴ ﺔ‪:‬ﻳﺰ‬
‫ﺗﻬﺠﻴﻦ‬ ‫ﺴﻴﻦدرﺟ ﺔ ﺣﺮارة‬
‫ﺒﻮط‬‫ﺗﺤ‬
‫ﻫ‬
‫اﻷوﱃ‬

‫ﺒﻴﻌ ﺔ اﻷول‬
‫ﺘﻰﺗﻤ ﺴﺦ اﻟﻄ‬
‫‪Hotstart‬ﺣ‬
‫‪PCR‬ﺴﺮﻳﺮﻳ ﺔ‬
‫ﺒﻴﻘﺎ ت اﻟ‬
‫‪Polymerases‬‬
‫ﺘﻄ‬‫ﺘﻨﻤﻴﻂ اﻟﺠﻴﻨ ﻲ‪ ،‬اﻟ‬
‫ﺗﻢ ﺣﻈﺮ‬
‫اﻟ‬

‫ﺒﻌﻴ ﺔ '‪3'-5‬‬
‫ﺘﺠﺎر ب اﻟﻤﻄ‬ ‫اﻟﺨﻼﻳﺎ‬
‫ﻧﺸﺎطﺗﺼﺤﻴﺢ اﻟ‬ ‫ﻣﻦﻣﻊ‬ ‫اﻟﺨﺎﻟﺔ ﻲ‬
‫اﻟﺪﻗ ﺔ‬ ‫ﺘﻨتﺴﺎخ‬
‫‪PCR‬ﻋﺎﻟﻴ‬ ‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‪ ،‬اﻻﺳ‬
‫ﺑﻮﻟﻴﻤﻴﺮا‬ ‫اﻟ‬

‫‪PCR‬ﻃﻮﻳﻞ‬ ‫ﺒﻮﻟﻴﻤﻴﺮا ت ﻋﺎﻟﻴ ﺔ اﻟﻤﻌﺎﻟﺠ ﺔ‬

‫اﻟ‬ ‫ﺘﻨ ﺴﺎخ اﻷﺟﺰاء اﻟﺨﺎﻟﻴ ﺔ ﻣﻦ اﻟﺨﻼﻳﺎ‬
‫اﺳ‬
‫ﺑﺎﻳ ﺖ‬‫ﺘﻰ ‪10‬ﻛﻴﻠﻮ‬
‫ﺑﺎﻳ ﺖ أو ﺣ‬‫ﺜﺮ ﻣﻦ ‪5‬ﻛﻴﻠﻮ‬
‫أﻛ‬

‫‪PCR-RFLP‬‬ ‫ﺛﻢ اﻟﻬﻀﻢ واﻟﺤﺼﻮل‬

‫ﺑﻮاﺳﻄ ﺔ ‪PCR‬‬‫ﺘﻀﺨﻴﻢ‬
‫اﻟ‬ ‫ﺑﻴ ﺔ‬
‫ﺗﻌﺪد اﻷﺷﻜﺎل اﻟﺠﻴﻨﻴ ﺔ ﻟﻠ ﺴﻼﻻ ت اﻟﻤﻴﻜﺮو‬
‫ﺘﻘﻴﻴﺪ‬
‫ﻋﲆ ﻣﻠﻒﺗﻌﺮﻳﻒ اﻟ‬
‫‪Machine Translated by Google‬‬

‫ﺗﻘﻨﻴﺎ ت أﺧﺮى‬

‫ﻧﻮع دي ‪PCR‬‬ ‫ﺒﻴﻘﺎ ت‬

‫ﺳﻤﺎ ت‬
‫ﺘﻄ‬‫اﻟ‬

‫‪MSP‬‬ ‫ﺒﻠﻴﻞ ‪C‬إﱃ ‪U‬ﻣﺎ ﻟﻢ‬

‫ﺗ‬‫ﺘﻴ ﺖ اﻟﺼﻮدﻳﻮم )‬
‫ﺒﺮﻳ‬
‫ﺛﺎﻧ ﻲ ﻛ‬‫ﺘﺨﺪام‬
‫ﺑﺎﺳ‬‫ﻣﻌﺎﻟﺠ ﺔ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬
‫ﺜﻴﻞ‬‫ﺑﻌﺪ‬
‫‪ PCR‬اﻟﻤﻴ‬
‫دراﺳ ﺔ‬
‫ﺜﻴﻞ‬ ‫ﺜﻴﻞ‪C)،‬‬
‫ﻓﺮط اﻟﻤﻴ‬ ‫ﺜﻴﻞ‬ ‫ﺘﻢ ﻣﻴ‬
‫اﻟﻤﻴ‬ ‫ﺗ)ﻧﺰع‬
‫ﺟﺰر ‪CpG‬ﻓ ﻲ ﻋﻠﻢ اﻷورام‬

‫ﺒﺮ‬
‫ﺑﻜﻤﻴ ﺔ أﻛ‬ ‫ﺛﻞ‬
‫واﺣﺪ ﻣﻦ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي‬ ‫ﺘﻤﺎ‬ ‫ﺘﺎج ﻣ‬
‫ﺷﺮﻳﻂ‬ ‫إﻧﻏﻴﺮ‬ ‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫اﻟ‬
‫ﺘﺄﺧﺮ ﻣﻦ ‪PCR‬‬ ‫ﺜﺎﻧ ﻲ‬
‫وﻗ ﺖ ﻣ‬ ‫اﻟﻓ ﻲ‬ ‫ﻣﻦ‬
‫‪PCR،‬‬

‫اﻟﺬﻳﻞ‪PCR-‬‬ ‫ﺘﺪاﺧﻠ ﺔ وﻏﻴﺮ‬

‫ﺘﻨﺎدا إﱃ ‪PCR‬اﻟﻤ‬
‫اﺳ‬ ‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ ﻣﻌﺮوف‬
‫ﺑ‬‫ﺗﻀﺨﻴﻢﺗ ﺴﻠ ﺴﻞ ﻏﻴﺮ ﻣﻌﺮوفﻳﺤﻴﻂ‬
‫ﺛﻠ ﺔ‬
‫ﺘﻤﺎ‬
‫اﻟﻤ‬ ‫ﺘ ﺴﻠ ﺴﻞ‬
‫ﻟﻠ‬

‫ﺧﺮوف‬ ‫ﺘﺤﺎور‬
‫ﻣ‬ ‫ﺒﺎ ت اﻷﻣﺮاض‬
‫ﺒ‬‫ﺗﺤﺪﻳﺪ ﻣ ﺴ‬

‫‪PCR‬ﻓ ﻲ‬ ‫ﺒﺔ ﻓ ﻲ‬
‫ﺒﻴ ﺖ اﻟﺤﻤﺾ اﻟﻨﻮوي ﻋﲆ ﺣ‬
‫ﺜ‬‫ﺘﻢﺗ‬
‫ﻳ‬ ‫ﺘﺎﺟﻴ ﺔ )إﻟﻮﻣﻴﻨﺎ‪،‬‬
‫ﺗ ﺴﻠ ﺴﻞ ﻋﺎﻟ ﻲ اﻹﻧ‬
‫ﺒﺔ‬
‫ﺘﺤﻠ ﺐ وﻣﺮﺣﻠ ﺔ ﺻﻠ‬
‫ﻣﺴ‬ ‫ﺒﺮ ﻣﺠ ﺴﺎ ت‬
‫ﺒﺔ ﻋ‬
‫ﺘﺤﻠ ﺐ أو ﻋﲆ دﻋﺎﻣ ﺔ ﺻﻠ‬
‫ﻣﺴ‬ ‫أﻳﻮنﺗﻮرﻧ ﺖ‪ 454 GS FLX، ،‬ﺻﻠ ﺐ(‬
‫ﻣﺤﺪدة‬
Machine Translated by Google