‫المعمل الثالث‬

‫األوساط الغذائية ‪Culture Media‬‬

‫‪ ‬لن نجد وسطا ً غذائيا ً تعيش علية جميع األنواع من الكائنات الدقيقة الختالفها في‬
‫االحتياجات ولكن هناك أنواع من األوساط الغذائية عامة لمعظم األنواع من البكتيريا أو‬
‫الفطريات‪.‬‬
‫‪ ‬تقسم األوساط الغذائية بحسب عدة أسس منها‪:‬‬
‫حسب القوام‪( .‬سائلة – صلبة – شبة صلبة)‬ ‫‪.1‬‬
‫حسب التركيب‪( .‬محددة التركيب الكيميائي – غير محددة التركيب الكيميائي)‬ ‫‪.2‬‬
‫حسب الغرض من االستخدام‪.‬‬ ‫‪.3‬‬
 ‫‪Blood Agar‬‬

‫‪ ‬بيئة غنية ‪ Enriched Media‬تنمو عليها معظم البكتيريا‬

‫‪ ‬بيئة تفريقية ‪ Differential‬بين أنواع البكتيريا المحللة للدم مثل بكتيريا‬
‫‪ Sterpt. Pyogenes‬و ‪Sterpt. Pneumonia‬عن طريق‪:‬‬
‫‪ -1‬التحلل الكامل للدم بيتا ‪Beta hemolytic‬‬
‫‪ -2‬التحلل الجزئي للدم الفا مثل ‪Alpha hemolytic‬‬
‫‪ -3‬عدم التحلل للدم ‪Non hemolytic‬‬
 ‫‪Chocolate Agar‬‬

‫‪ ‬بيئة غنية ‪ Enriched Media‬تنمو عليها أغلب البكتيريا‬

‫‪ ‬تحتوي على عوامل ‪ X‬و ‪ V‬الناتجة من تفجر كريات الدم‬
‫الحمراء ‪ RBCs‬والتي يمكن من خاللها نمو‬
‫‪ Heamophilus spp‬و ‪ Neisseriae‬والتي تعتبر هذه‬
‫األنواع من البكتيريا صعبة النمو‬
 ‫‪MacConkey Agar‬‬

‫‪ ‬بيئة تفريقيه للتفريق بين البكتيريا المخمرة لالكتوز ‪Lactose‬‬

‫‪fermenting‬والتي تأخذ اللون األحمر مثل ‪ E.coli‬و ‪ Klebsiella‬و‬
‫‪ ،Enterobacter‬وبين البكتيريا الغير مخمرة لالكتوز ‪Non-lactose‬‬
‫‪fermenting‬والتي ليس لها لون (شفاف) مثل ‪ Proteus‬و‬
‫‪Salmonella‬و ‪Shigella .‬‬
‫‪ ‬بيئة انتخابية ألنها تحتوي على ‪ Crystal violet‬أو ‪ Bile Salts‬بحيث‬
‫تسمح للبكتيريا السالبة لصبغة جرام بالنمو وتثبط نمو الموجبة لصبغة جرام‬
‫‪stine Lactose electrolyte deficient‬‬
‫)‪(CLED‬‬

‫‪ ‬وسط لزراعة عينات الجهاز البولي ‪.‬‬

‫‪ ‬بيئة تفريقية للتفريق بين البكتيريا المخمرة لالكتوز ‪Lactose‬‬
‫‪fermenting‬والتي تأخذ اللون األصفر مثل ‪ ،E.coli‬وبين البكتيريا الغير‬
‫مخمرة لالكتوز ‪ Non-lactose fermenting‬والتي ليس لها لون (شفاف)‬
‫مثل ‪ Acnitobacter‬بسبب وجود الكاشف ‪Bromo-thymol blue .‬‬
‫‪ ‬لها نفس وظيفة الـ ‪MacConkey Agar‬‬
‫)‪Salmonella Shigella Agar (S.S Agar‬‬

‫‪ ‬بيئة اختيارية ال تسمح بنمو البكتيريا الموجبة لصبغة جرام وبعض البكتيريا‬
‫السالبة لصبغة جرام ماعدا & ‪Salmonella Shigella‬بسبب وجود ‪Na-‬‬
‫‪citrate & bile salts‬‬
‫‪ ‬بيئة تفريقية لـ ‪ Salmonella‬و ‪ Shigella‬حيث أن الـ ‪Salmonella‬‬
‫تأخذ لون البيئة (شفاف) مع وجود لون أسود في المركز نتيجة تحلل مواد‬
‫موجودة في البيئة ينتج عنها غاز ‪H2S‬والـ ‪ Shigella‬تأخذ مستعمراتها لون‬
‫الوسط(شفاف) ‪.‬‬
‫)‪Mannitol salt Agar (MSA‬‬

‫‪ ‬بيئة تفريقية للتفريق بين ‪Staphylococcus species‬و‬

‫‪Staphylococcus aureus‬التي تخمر المانيتول بتأثيرها على لون‬
‫الكاشف ‪Phenol Red‬وتعطي اللون األصفر بينما الـ ‪Staph.‬‬
‫األخرى ال تخمر المانيتول ‪.‬‬
‫‪ ‬بيئة اختيارية ألن تركيز األمالح العالي ‪Nacl 7.5%‬الموجود فيه‬
‫يثبط نمو الميكروبات األخرى ‪.‬‬
‫‪Mueller Hinton Agar‬‬

‫بيئة ضعيفة المواد الغذائية ‪.‬‬ ‫‪‬‬

‫‪ ‬مناسبة لعمل اختبارات الحساسية ألنها ال تحتوي على أية نسب‬

‫من المواد الكيميائية بحيث ال تتفاعل مع المضادات الحيوية ‪.‬‬
‫)‪Sabouroud Dextrose Agar (SDA‬‬

‫‪ ‬بيئة اختيارية لنمو الفطريات ‪.‬‬

‫‪ ‬الـ ‪PH‬حامضي لذلك ال تسمح بنمو البكتيريا ‪.‬‬
‫القواعد العامة لجمع العينات‬
 Blood for cultures
Collection
Venous blood
 infants: 0.5 – 2 ml
 children: 2 – 5 ml
 adults: 5 – 10 ml

Requires aseptic technique

Stool samples
Collection:
Freshly passed stool samples

avoid specimens from a bed pan

Use sterile or clean container

do not clean with disinfectant

During an outbreak - collect from 10-20 patients
Throat swab
(posterior pharyngeal swab)

Hold tongue away with tongue depressor

Locate areas of inflammation and exudate
in posterior pharynx, tonsillar region of
throat behind uvula
Avoid swabbing soft palate; do not touch
tongue
Rub area back and forth with cotton or
Dacron swab
 Nasopharyngeal swab

Tilt head backwards

Insert flexible fine-shafted polyester swab into
nostril and back to nasopharynx
Leave in place a few seconds
Withdraw slowly; rotating motion
 Sputum
Collection
Instruct patient to take a deep breath and cough up
sputum directly into a wide-mouth sterile container
 avoid saliva or postnasal discharge
 1 ml minimum volume
Virologic Investigations

Transport Storage condition

Purpose/ Lab
Specimen
media Transport Pending test investigation

Throat swab Viral transport 2-8 0C -20 0C Isolation

media (VTM)
NPA/ swab VTM 2-8 0C -20 0C Isolation

CSF No 2-8 0C -20 0C Isolation,

serology
Stool No 2-8 0C -20 0C Isolation

Urine No 2-8 0C -20 0C Isolation

blood No 2-8 0C 2-8 0C Isolation,
serology