‫ر‬

‫مصطف غنام‬ ‫ر‬

+ ‫ احمد عبود‬:‫ ترتيب‬........................ 2‫محاضة‬ ............................... ‫احياء مجهرية عمل‬

Culture Media ‫الوسط الزرعي‬

It is a balanced mixture of nutrients needed by microorganisms and at
concentration that allow them to grow well.
‫إنه مزي ج متوازن من العناض الغذائية الت تحتاجها الكائنات الدقيقة وبت ر‬
‫كت يسمح لها بالنمو بشكل جيد‬

Requirements for the growth of microorganisms‫متطلبات نمو الكائنات الحية الدقيقة‬

Objective of using culture media ‫الهدف من استخدام الوسط الزرعي‬

1. Growth and isolation of microorganisms in vitro.‫نمو وعزل الكائنات الدقيقة يف المختب‬

2. Isolated colonies of bacteria and identify pathogen.
. ‫ر‬
‫البكبيا والتعرف عىل العوامل الممرضة‬ ‫مستعمرات معزولة من‬
3. Study the characteristics of microorganisms for the purpose of diagnosis.
‫دراسة خصائص الكائنات الدقيقة لغرض التشخيص‬
4. Preservation of microorganisms for a long period
‫المحافظة عىل الكائنات الحية الدقيقة ر‬
‫لفبة طويلة‬
5. Preparing vaccines ‫تحضب اللقاحات‬
‫ر‬
6. Genetic engineering experiments ‫تجارب الهندسة الوراثية‬

The culture media are classified according to their strength into;

‫يتم تصنيف االوساط الزرعية وفقًا لقوتها إلى ؛‬

1
 ‫ر‬
‫مصطف غنام‬ ‫ر‬
+ ‫ احمد عبود‬:‫ ترتيب‬........................ 2‫محاضة‬ ............................... ‫احياء مجهرية عمل‬

A – Solid Media ‫االوساط الصلبة‬

It is similar in shape and clear texture. The reason for it is stiffness is the

addition of agar to it that hardens the media.

.‫ والسبب رف ذلك تيبس هو إضافة مادة أجار إليها مما يقوى الوسط‬.‫إنه مشابه رف الشكل والملمس الواضح‬

B – Liquid Media ‫االوساط السائلة‬

This media contains the same contents as the solid media without agar.

‫تحتوي هذه الوسائط عل نفس محتويات الوسائط الصلبة بدون أجار‬

C- Semi solid media ‫االوساط شبه صلبة‬

are semi-solid in consistency. Hugh & Leifson's oxidation fermentation

test medium as well as mannitol motility medium are also semi-solid.
‫ر‬
‫ وكذلك وسط حركة‬Hugh & Leifson ‫ كما أن وسط اختبار تخمت األكسدة من‬.‫شبه صلبة ف االتساق‬
.‫المانيتول شبه صلبة‬

2
 ‫ر‬
‫مصطف غنام‬ ‫ر‬
+ ‫ احمد عبود‬:‫ ترتيب‬........................ 2‫محاضة‬ ............................... ‫احياء مجهرية عمل‬

ROUTINE LABORATORY MEDIA ‫االوساط المختبرية الروتينية‬

These are classified into six types: (1) Basal media, (2) Enriched media,
(3) Selective media, (4) Indicator media, (5) Transport media, and (6)
Storage media.

، ‫) االوساط االنتقائية‬3( ، ‫) االوساط الغنية‬2( ، ‫) االوساط القاعدية‬1( :‫يتم تصنيف هذه إىل ستة أنواع‬
‫ر‬
‫) اوساط التخزين‬6( ، ‫) اوساط النقل‬5( ، ‫المؤش‬ ‫) اوساط‬4(

1. BASAL MEDIA; Basal media are those that may be used for growth
(culture) of bacteria that do not need enrichment of the media. Examples:
Nutrient broth, nutrient agar and peptone water. Staphylococcus and
Enterobacteriaceae grow in these media.

‫ الوسائط القاعدية ه تلك الت يمكن استخدامها لنمو (ثقافة) البكتتيا الت ال‬: ‫االوساط القاعدية‬
‫ تنمو المكورات العنقودية‬.‫ أجار المغذيات وماء الببتون‬، ‫ مرق المغذيات‬:‫ أمثلة‬.‫تحتاج إىل إثراء الوسائط‬
‫ر‬
.‫والمعوية ف هذه الوسائط‬

2. ENRICHED MEDIA; The media are enriched usually by adding

blood, serum or egg. Examples: Enriched media are blood agar and
Lowenstein-Jensen media. Streptococci grow in blood agar media.

3
 ‫ر‬
‫مصطف غنام‬ ‫ر‬
+ ‫ احمد عبود‬:‫ ترتيب‬........................ 2‫محاضة‬ ............................... ‫احياء مجهرية عمل‬

‫ الوسائط‬:‫ أمثلة‬.‫يتم إثراء الوسائط عادة عن طريق إضافة الدم أو المصل أو البيض‬ :‫االوساط الغنية‬
‫ر‬
‫ تنمو المكورات العقدية ف وسط أجار الدم‬.Lowenstein-Jensen ‫المخصبة ه أجار الدم ووسائط‬

3. SELECTIVE MEDIA; These media favour the growth of a particular

bacterium by inhibiting the growth of undesired bacteria and allowing
growth of desirable bacteria. Examples: MacConkey agar, Lowenstein-Jensen
media, tellurite media (Tellurite inhibits the growth of most of the throat
organisms except diphtheria bacilli). Antibiotic may be added to a medium
for inhibition.

‫ تفضل هذه الوسائط نمو بكتتيا معينة عن طريق تثبيط نمو البكتتيا غت‬:‫االوساط االنتقائية‬
Lowenstein-‫ وسائط‬، MacConkey ‫ أجار‬:‫ أمثلة‬.‫المرغوب فيها والسماح بنمو البكتتيا المرغوبة‬
‫ يمكن‬.)‫ وسائط التيلوريت (يمنع التيلوريت نمو معظم كائنات الحلق باستثناء عصيات الخناق‬،Jensen
.‫إضافة المضاد الحيوي إىل وسط للتثبيط‬

4. INDICATOR (DIFFERENTIAL) MEDIA; An indicator is included

in the medium. A particular organism causes change in the indicator, e.g.
blood, neutral red, tellurite. Examples: Blood agar and MacConkey agar
are indicator media.
‫ر ر‬ ‫ر ر‬ ‫ر‬ ‫االوساط ال ر‬
‫معي ف حدوث تغيت‬ ‫ يتسبب كائن ح‬.‫مؤش ف الوسيط‬ ‫تضمي‬ ‫ يتم‬: )‫مؤش (التفاضل‬
‫ر‬ ‫ر‬
‫ ه‬MacConkey ‫ أجار الدم وأجار‬:‫ أمثلة‬.‫ تيلوريت‬، ‫ أحمر محايد‬، ‫ عل سبيل المثال دم‬، ‫المؤش‬ ‫ف‬
.‫وسائط مؤ رش‬

5. TRANSPORT MEDIA; These media are used when specie-men

cannot be cultured soon after collection. Examples: Cary-Blair medium,
Amies medium, Stuart medium.
‫ر‬
‫وجتة‬ ‫ر‬
‫المتخصصي بعد فتة‬ ‫ يتم استخدام هذه الوسائط عندما ال يمكن تربية الرجال‬: ‫اوساط النقل‬
.‫ متوسط ستيوارت‬، ‫ متوسط أميس‬، ‫ وسط كاري بلت‬:‫ أمثلة‬.‫من الجمع‬

4
 ‫ر‬
‫مصطف غنام‬ ‫ر‬
‫محاضة‪ ........................ 2‬ترتيب‪ :‬احمد عبود ‪+‬‬ ‫احياء مجهرية عمل ‪...............................‬‬

‫‪6. STORAGE MEDIA; Media used for storing the bacteria for a long‬‬
‫‪period of time. Examples: Egg saline medium, chalk cooked meat broth.‬‬

‫اوساط التخزين ‪ :‬الوسائط المستخدمة لتخزين البكتتيا لفتة طويلة من الزمن‪ .‬أمثلة‪ :‬وسط ملح‬
‫البيض ‪ ،‬مرق اللحم المطبوخ بالطباشت‬

‫االوساط الشائعة الروتينية ‪COMMON MEDIA IN ROUTINE‬‬

‫‪; 500 g meat, e.g. ox heart is minced and mixed with 1‬‬
‫‪litre water. 10 g peptone and 5 g sodium chloride are added, pH is‬‬
‫‪adjusted to 7.3. Uses: (1) As a basal media for the preparation of other‬‬
‫‪media, (2) To study soluble products of bacteria.‬‬
‫ُ‬
‫‪ 555 :‬جرام لحم ‪ ،‬عل سبيل المثال يفرم قلب الثور ويخلط مع لت ماء‪ .‬يضاف ‪ 15‬جم من‬
‫ر‬
‫الهيدروجيت إىل ‪ .3.3‬االستخدامات‪ )1( :‬كوسيط‬ ‫الببتون و ‪ 5‬جم كلوريد الصوديوم ‪ ،‬ويتم ضبط الرقم‬
‫أساس لتحضت الوسائط األخرى ‪ )2( ،‬لدراسة منتجات البكتتيا القابلة للذوبان‬

‫‪; It is solid at 37°C. 2.5% agar is added in nutrient broth.‬‬

‫‪It is heated at 100°C to melt the agar and then cooled. Peptone Water.‬‬
‫‪Peptone 1% and sodium chloride 0.5%. It is used as base for sugar media‬‬
‫‪and to test indole formation.‬‬
‫ر‬
‫‪ :‬صلبة عند ‪ 33‬درجة مئوية‪ .‬يضاف ‪ ٪2.5‬أجار ف مرق المغذيات‪ .‬يتم تسخينه عند‬
‫‪ 155‬درجة مئوية إلذابة األجار ثم رتتيده‪ .‬مياه الببتون‪ .‬ببتون ‪ ٪1‬وكلوريد الصوديوم ‪ .٪5.5‬يتم‬
‫استخدامه كقاعدة لوسائط السكر والختبار تكوين اإلندول‪.‬‬

‫‪5‬‬
 ‫ر‬
‫مصطف غنام‬ ‫ر‬
+ ‫ احمد عبود‬:‫ ترتيب‬........................ 2‫محاضة‬ ............................... ‫احياء مجهرية عمل‬

; Most commonly used medium. 5- 10% defibrinated sheep

or horse blood is added to melted agar at 45-50°C. Blood acts as an
enrichment material and also as an indicator. Certain bacteria when
grown in blood agar produce haemolysis around their colonies. Certain
bacteria produce no haemolysis. Types of changes : (a) beta (p)
haemolysis. The colony is surrounded by a clear zone of complete
haemolysis, e.g. Streptococcus pyogenes is a beta haemolytic
streptococci, (b) Alpha (a) haemolysis. The colony is surrounded by a
zone of greenish discolouration due to formation of biliverdin, e.g.
Viridans streptococci, (c) Gamma (y) haemolysis, or, No haemolysis.
There is no change in the medium surrounding the colony.
‫ من دم الغنم أو الحصان ر ر‬٪15 ‫ يضاف‬-5 .‫األكت استخداما‬
‫متوع الرجفان إىل األجار‬ ‫ر‬ ‫ الوسيلة‬:
‫ر‬ ً
‫ تنتج بكتتيا معينة عندما‬.‫كمؤش‬ ‫ يعمل الدم كمواد تخصيب وأيضا‬.‫ درجة مئوية‬55-45 ‫المذاب عند‬
:‫ أنواع التغيتات‬.‫ بعض البكتتيا ال تنتج انحالل الدم‬.‫تنمو رف أجار الدم انحالل الدم حول مستعمراتها‬
‫ عل سبيل‬، ‫ المستعمرة محاطة بمنطقة واضحة من انحالل الدم الكامل‬.)‫(أ) انحالل الدم بيتا (ع‬
.)‫ (ب) انحالل الدم ألفا (أ‬، ‫ ه العقديات الحالة للدم بيتا‬Streptococcus pyogenes .‫المثال‬
‫ عل سبيل المثال العقديات‬، ‫المستعمرة محاطة بمنطقة خ رضاء اللون بسبب تكوين البيليفتدين‬
‫ر‬
‫ ال يوجد تغيت ف الوسط المحيط‬.‫ ال انحالل الدم‬، ‫ أو‬، )‫ (ج) انحالل الدم جاما (ذ‬، ‫فتيدان‬
.‫بالمستعمرة‬

: Prepared by heating blood agar.

It is used for culture of pneumococcus, gonococcus, meningococcus and
Haemophilus. Heating the blood inactivates inhibitor of growths.
‫ر‬
‫ يتم استخدامه لزراعة‬.‫تسخي أجار الدم‬ ‫ يتم تحضته عن طريق‬:
‫ر‬
.‫تسخي الدم يثبط نشاطه‬ .‫المكورات الرئوية والمكورات البنية والمكورات السحائية والمستدمية‬

6
 ‫ر‬
‫مصطف غنام‬ ‫ر‬
+ ‫ احمد عبود‬:‫ ترتيب‬........................ 2‫محاضة‬ ............................... ‫احياء مجهرية عمل‬

; Most commonly used for enterobac-teriaceae. It

contains agar, peptone, sodium chloride, bile salt, lactose and neutral red.
It is a selective and indicator medium: (1) Selective as bile salt does not
inhibit the growth of enterobactericeae but inhibits growth of many
other bacteria. (2) Indicator medium as the colonies of bacteria that
ferment lactose take a pink colour due to production of acid. Acid turns
the indicator neutral red to pink. These bacteria are called 'lactose
fermenter', e.g. Escherichia coll. Colourless colony indicates that lactose
is not fermented, i.e. the bacterium is non-lactose fermenter, e.g.
Salmonella. Shigella, Vibrio.
ً ‫ر‬
‫ كلوريد‬، ‫ ببتون‬، ‫ يحتوي عل أجار‬enterobac-teriaceae. ‫األكت شيوعا لالستخدام مع‬ :
‫) انتقائ مثل ملح‬1( :‫ومؤش‬‫ر‬ ‫ إنه وسيط انتقائ‬.‫ الالكتوز واألحمر المحايد‬، ‫ ملح الصفراء‬، ‫الصوديوم‬
‫مؤش متوسط ألن‬ ‫ر‬ )2( .‫الصفراء ال يمنع نمو األمعاء ولكنه يثبط نمو العديد من البكتتيا األخرى‬
‫ر‬ ً ً
‫المؤش إىل‬ ‫ يحول الحمض‬.‫مستعمرات البكتتيا الت تخمر الالكتوز تأخذ لونا ورديا بسبب إنتاج الحمض‬
‫ عل سبيل المثال‬، "‫ تسىم هذه البكتتيا "تخمر الالكتوز‬.‫اللون األحمر المحايد إىل اللون الوردي‬
‫ أي أن البكتتيا عبارة‬، ‫تشت المستعمرة عديمة اللون إىل أن الالكتوز ال يتم تخمته‬Escherichia coll.
. ‫ ر‬، ‫ شيغيال‬.‫ عل سبيل المثال السالمونيال‬، ‫عن مخمر ال يحتوي عل الالكتوز‬
‫فيتيو‬

Disc diffusion sensitivity tests for antimicrobial

drugs should be carried out on this media as per WHO recommendation to
promote reproducibility and comparability of results.

‫ يجب إجراء اختبارات حساسية انتشار األقراص لألدوية المضادة للميكروبات عل‬:

ً
.‫هذه الوسيلة وفقا لتوصية منظمة الصحة العالمية لتعزيز إمكانية التكاثر وإمكانية مقارنة النتائج‬