Professional Documents
Culture Documents
أهم الاختبارات
أهم الاختبارات
اﻟﺠﺮﺛﻮﻣﯿﺔ
١
اﻟﻜﻮاﺷﻒ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
- ١ﻛﺎﺷﻒ اﯾﺮﻟﯿﺦ :
ﻣﺤﻠﻮل › ﺑﺎرا دي ﻣﯿﺘﯿﻞ أﻣﯿﻨﻮ ﺑﻨﺰ أﻟﺪھﯿﺪ ‹ ﻓﻲ اﻟﻐﻮل اﻹﯾﺘﯿﻠﻲ اﻟﻤﻄﻠﻖ و ﺣﻤﺾ ﻛﻠﻮر اﻟﻤﺎء ﺛﻢ
ﻧﻀﯿﻒ اﻻﯾﺘﺮ
اﺧﺘﺒﺎر ﺗﺤﺮﯾﺮ اﻹﻧﺪول
-ﻧﻀﯿﻒ إﻟﻰ اﻷﻧﺒﻮب اﻟﺤﺎوي ﻋﻠﻰ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺰرﻋﻲ ٠.٥ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻜﺎﺷﻒ ﺛﻢ ﻧﺨﺾ ﺑﻠﻄﻒ
ﺛﻢ ﻧﻀﯿﻒ ١ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻹﯾﺘﺮ ← ﯾﺤﻞ اﻹﯾﺘﺮ اﻟﻤﺮﻛﺐ اﻟﻤﻠﻮن ← ﻃﺒﻘﺔ ﻣﻠﻮﻧﺔ ﺑﺄﺣﻤﺮ ﻛﺮزي
ﺗﺘﻮﺿﻊ ﻣﺎ ﺑﯿﻦ اﻟﻄﺒﻘﺔ اﻟﻤﺎﺋﯿﺔ و اﻟﻄﺒﻘﺔ اﻹﯾﺘﺮﯾﺔ ← اﻹﻧﺪول ) ( + ﺗﺮﯾﺒﺘﻮﻓﺎن ▬ /ھﻮاﺋﯿﺎً ◄▬/إﻧﺪول
-ﻛﺎﺷﻒ إﯾﺮﻟﯿﺦ ﺛﺎﺑﺖ ﻟﻌﺪة ﺷﮭﻮر . ﺗﺮﯾﺒﺘﻮﻓﺎن ▬ /ﻻھﻮاﺋﯿﺎً ◄▬/اﺳﻜﺎﺗﻮل
-ﻛﺎﺷﻒ ﻛﻮﭬﺎك ﻻ ﯾﺒﻘﻰ ﺛﺎﺑﺘﺎ أﻛﺜﺮ ﻣﻦ أﺳﺒﻮع ) ﺳﺮﯾﻊ اﻟﻌﻄﺐ ( ﻻﺣﺘﻮاﺋﮫ ﻋﻠﻰ اﻟﻐﻮل اﻹﻣﯿﻠﻲ . · وﺳﻂ إﻧﺪول -ﻧﺘﺮﯾﺖ ) ﺳﺎﺋﻞ :آﻏﺎر ≈ ١غ /ل ( إﻧﺪول ) : ( +
- ٣ﺗﻔﺎﻋﻞ ﺳﺎﻟﻜﻮﻓﺴﻜﻲ ﻛﯿﺘﺎزاﺗﻮ : * ﯾﺰرع اﻟﺠﺮﺛﻮم ﻋﻠﻰ وﺳﻂ ﻣﻨﺎﺳﺐ ،ﯾﺤﻀﻦ ﺑﺪرﺟﺔ H.I -اﻟﻤﺴﺘﺪﻣﯿﺎت اﻟﻨﺰﻟﯿﺔ
˚٣٧ – ˚٣٥م ،ﻣﺪة ٢٤ﺳﺎﻋﺔ . -ﺿﻤﺎت اﻟﮭﯿﻀﺔ
ﯾﻀﺎف إﻟﻰ اﻟﻮﺳﻂ ١٠ﻗﻄﺮات ﻣﻦ ﻧﺘﺮﯾﺖ اﻟﺒﻮﺗﺎﺳﯿﻮم ) ← ( ٪ ٠.١ﻧﺘﺮوزو إﻧﺪول
) E.coli -ﻣﮭﻢ ﻟﺘﻤﯿﯿﺰھﺎ (
،ﺛﻢ ﻧﻀﯿﻒ ١٠ﻗﻄﺮات ﻣﻦ H2SO4اﻟﻜﺜﯿﻒ ← ﻟﻮن أﺣﻤﺮ . -ﺑﺮوﻓﯿﺪاﻧﺴﯿﺎ
-ﻣﺘﻘﻠﺒﺎت ﻋﺪا اﻟﺮاﺋﻌﺔ
- ٤اﺧﺘﺒﺎر اﻷوراق اﻟﻤﺸﺒﻌﺔ ﺑﺤﻤﺾ اﻟﺤﻤﺎض : -ﺳﯿﺘﺮوﺑﺎﻛﺘﺮ اﻟﻤﺘﺒﺪﻟﺔ
ﻧﻨﺘﻈﺮ ٢٤ﺳﺎﻋﺔ ﺣﺘﻰ ﯾﺘﺤﺮر اﻹﻧﺪول ﻓﻲ أﻧﺒﻮب اﻟﺰرع ،ﺑﻌﺪھﺎ ﺳﻮف ﯾﺘﻄﺎﯾﺮ ﻓﻲ اﻟﺪرﺟﺔ ˚٣٧م
،ورﻗﺔ ﻣﺸﺒﻌﺔ ﺑﺤﻤﺾ اﻟﺤﻤﺎض و ﺟﺎﻓﺔ ﻧَﺸْﻜُﻠُﮭﺎ ﻣﻊ اﻟﻘﻄﻨﺔ ﻓﻲ اﻷﻧﺒﻮب ﺑﺸﻜﻞ ﻣﺪﻻة دون أن -ﺷﯿﻐﯿﻼ ) ±ﻣﻌﻈﻤﮭﺎ ( -
ﺗﻼﻣﺲ اﻟﻮﺳﻂ
اﻹﻧﺪول اﻟﻤﺘﻄﺎﯾﺮ +ﺣﻤﺾ اﻟﺤﻤﺎض ← ﻣﺮﻛﺐ دي إﯾﻦ ← ) ﻟﻮن أﺣﻤﺮ ( ← اﻹﻧﺪول ) ( +
* ﻣﻼﺣﻈﺔ :إﯾﺠﺎﺑﯿﺘﮫ ﻧﻌﺘﻤﺪ ﻋﻠﯿﮭﺎ أﻣﺎ ﺳﻠﺒﯿﺘﮫ ﻓﻼ ﯾﻌﺘﻤﺪ ﻋﻠﯿﮭﺎ .
٢
اﻟﻜﻮاﺷﻒ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
– ١اﺧﺘﺒﺎر وﯾﺮك -ﻣﺎن : اﺧﺘﺒﺎر ﭬﻮﻏﺲ – ﺑﺮوﺳﻜﺎور
-اﺧﺘﺒﺎر ﻣﻌﺪل ،ﺣﯿﺚ ﻧﻀﯿﻒ ﻓﻮق ﻛﻠﻮر اﻟﺤﺪﯾﺪ ) ﺗﻘﻮم ﺷﺎردة اﻟﺤﺪﯾﺪ ھﻨﺎ ﺑﺪور O2اﻟﮭﻮاﺋﻲ ( .
-ﻧﺄﺧﺬ ٥ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺰرﻋﻲ ) اﻟﻤﻮﺟﻮد ﻓﯿﮫ اﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﻌﺰول ﻧﻘﯿﺎً ( Voges-Proskauer test
ﯾﺰرع اﻟﺠﺮﺛﻮم ﻋﻠﻰ وﺳﻂ ﻣﺮﻗﻲ ﯾﺤﻮي :
ﻧﻀﯿﻒ ٢ﻗﻄﺮة ﻣﻦ ﻓﻮق ﻛﻠﻮر اﻟﺤﺪﯾﺪ ٪ ٢ ھﻀﻤﻮن – ﻏﻠﻮﻛﻮز – أﻣﻼح اﻟﻔﻮﺳﻔﺎت
٥ﺳﻢ ٣ﻣﺤﻠﻮل ٪١٠ NaOH ﯾﺤﻀﻦ ٣ – ٢أﯾﺎم ﺑﺪرﺟﺔ ˚٣٩م ﻛﺸﻒ ﺗﺤﺮر اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ
ﻧﻤﺰج ← ﺣﺼﻮل ﻟﻮن إﯾﻮزﯾﻨﻲ ﻧﺤﺎﺳﻲ ﺧﻼل دﻗﺎﺋﻖ ←ﺗﺤﺮر اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ
) ﻣﯿﺘﯿﻞ ﻛﺎرﺑﺎﻧﻮل (
-ﻧﺄﺧﺬ ٥ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺰرﻋﻲ ﺛﻢ ﻧﻀﯿﻒ ٥ﺳﻢ٣
– ٢ﺗﻔﺎﻋﻞ أوﻣﯿﺮا : OMERA ﻣﺤﻠﻮل ﻣﺎءات اﻟﺒﻮﺗﺎﺳﯿﻮم ) ٪ ١٠ ( KOH
٥ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺰرﻋﻲ ٢٥ +ﻣﻎ ﻛﺮﯾﺎﺗﯿﻦ ٥ +ﺳﻢ ٣ﻣﻦ ٪ ٤٠ NaOH ﯾﻤﺰج و ﯾﺘﺮك ﻣﻌﺮﺿﺎً ﻟﻠﮭﻮاء ٢٤ﺳﺎﻋﺔ * اﻟﻐﻠﻮﻛﻮز ھﻮ اﻟﺴﻜﺮ اﻟﻮﺣﯿﺪ اﻟﺬي ﯾﺆدي
ﻧﻤﺰج ← ﻟﻮن أﺣﻤﺮ ﺧﻼل دﻗﺎﺋﻖ ← ﺗﺤﺮر اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ ﻧﺮاﻗﺐ ﺧﻼل ٢٤ﺳﺎﻋﺔ ﺣﺼﻮل ﻟﻮن أﺣﻤﺮ إﯾﻮزﯾﻨﻲ ← اﺳﺘﮭﻼﻛﮫ ﻋﻨﺪ ﺑﻌﺾ اﻟﺠﺮاﺛﯿﻢ ﻟﺘﺸﻜﻞ
ﺗﺤﺮر اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ . اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ
* ﻧﻀﯿﻒ اﻟﻜﺮﯾﺎﺗﯿﻦ ﻣﻦ أﺟﻞ زﯾﺎدة ﺣﺴﺎﺳﯿﺔ اﻟﺘﻔﺎﻋﻞ ﺧﻮﻓﺎً ﻣﻦ ﻋﺪم وﺟﻮد اﻟﻜﺮﯾﺎﺗﯿﻦ ﻓﻲ اﻟﻮﺳﻂ . ) ﺣﻤﺾ اﻟﺒﯿﺮوﻓﻲ ← أﺳﯿﺖ أﻟﺪھﯿﺪ
ﺿﻢ ﺟﺰﯾﺌﯿﻦ أﺳﯿﺖ أﻟﺪھﯿﺪ ← ﻣﯿﺘﯿﻞ ﻛﺎرﺑﺎﻧﻮل ( * ] ﻋﻨﺪﻣﺎ ﯾﺘﺄﻛﺴﺪ اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ ← دي أﺳﯿﺘﯿﻞ
- ٣ﺗﻔﺎﻋﻞ ﺑﺎرﯾﺖ : ﯾﺘﻔﺎﻋﻞ دي أﺳﯿﺘﯿﻞ ﻣﻊ زﻣﺮ اﻟﻐﻮاﻧﯿﺪﯾﻦ ) ﻣﻮﺟﻮدة ﻓﻲ
١ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺰرﻋﻲ ٠.٦ +ﺳﻢ ٣ﻣﺤﻠﻮل αﻧﺎﻓﺘﻮل اﻟﻐﻮﻟﻲ ٪ ٥ اﻟﺤﻤﻮض اﻷﻣﯿﻨﯿﺔ ﻓﻲ اﻷوﺳﺎط اﻟﺰرﻋﯿﺔ و ﻓﻲ اﻟﻜﺮﯾﺎﺗﯿﻦ (
٠.٢ +ﺳﻢ ٣ﻣﺤﻠﻮل ٪ ٤٠ KOH ← ﺣﻠﻘﺔ دي آزﯾﻦ ﻣﻠﻮﻧﺔ ) ﻏﺎﻟﺒﺎً أﺣﻤﺮ ( [ . : ( + ) V.P
ﻧﻤﺰج ← ﻇﮭﻮر ﻟﻮن أﺣﻤﺮ ﺧﻼل دﻗﺎﺋﻖ ← ﺗﺤﺮر اﻷﺳﯿﺘﻮﺋﯿﻦ -اﻟﺴﯿﺮاﺗﯿﺎ -اﻹﻧﺘﯿﺮوﺑﺎﻛﺘﺮ -اﻟﻜﻠﯿﺒﺴﯿﻼ
-ﺿﻤﺎت اﻟﻄﻮر -ﻗﺴﻢ ﻣﻦ ) Bacillusاﻟﺠﻤﺮﯾﺔ (
* ﻗﺎﻋﺪة ﻋﺎﻣﺔ :وﺟﻮد زﻣﺮة ﻛﯿﺘﻮن و راﺑﻂ ﻣﻀﺎﻋﻒ ← ﺗﺸﻜﻞ ﻟﻮن ) إﺣﺪى ﻧﻈﺮﯾﺎت ﺗﺸﻜﻞ اﻟﻠﻮن وﯾﺴﻤﻰ ﻓﯿﻨﻮن (
٣
أھﻤﯿﺔ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
٤
اﻵﻟﯿﺔ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
* ﺟﻤﯿﻊ ﻣﺮﻛﺒﺎت اﻟـ ﻧﺘﺮوﻓﯿﻨﻮل ﻟﮭﺎ ٣ﻣﺮﻛﺒﺎت ﻣﺘﻤﺎﻛﺒﺔ :أورﺗﻮ ،ﻣﯿﺘﺎ ،ﺑﺎرا
و ﺟﻤﯿﻌﮭﺎ ﻟﯿﺲ ﻟﮭﺎ ﻟﻮن ﻓﻲ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺤﺎﻣﻀﻲ ،
أﻣﺎ ﻓﻲ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﻘﻠﻮي ← ﻟﻮن أﺻﻔﺮ ﻟﺘﺤﻮﻟﮭﻢ إﻟﻰ ﻓﯿﻨﻮﻛﺴﯿﺪ . اﺧﺘﺒﺎر O.N.P.G
أورﺗﻮ ﻧﺘﺮو ﻓﯿﻨﯿﻞ ﻏﺎﻻﻛﺘﻮزﯾﺪ
* ﻛﯿﻒ ﺗﺴﺘﮭﻠﻚ اﻟﺨﻠﯿﺔ اﻟﺠﺮﺛﻮﻣﯿﺔ اﻟﻼﻛﺘﻮز ؟
ﯾُﺤﻀﺮ ﻣﺤﻠﻮل ٠.٦ ) O.N.P.Gغ ١٠٠ /ﺳﻢ ( ٣ﻣﻦ
أوﻻً :دﺧﻮل اﻟﻼﻛﺘﻮز إﻟﻰ اﻟﺨﻠﯿﺔ اﻟﺠﺮﺛﻮﻣﯿﺔ ← ﺑﻮاﺳﻄﺔ اﻟﺒﺮﯾﻤﯿﺎز = O.N.P.Gأورﺗﻮ ﻧﺘﺮو ﻓﯿﻨﻮل +ﻏﻠﻮﻛﻮز
ﻓﻮﺳﻔﺎت ﺛﻨﺎﺋﯿﺔ اﻟﺼﻮدﯾﻮم ٠.٠١ﻣﻮل /ل ) ( PH = 7.5
ﺛﻢ :ﺗﻔﻜﻚ اﻟﻼﻛﺘﻮز ﺑﻮاﺳﻄﺔ – ßﻏﺎﻻﻛﺘﻮزﯾﺪاز إﻟﻰ :ﻏﻠﻮﻛﻮز و ﻏﺎﻻﻛﺘﻮز
+ﻣﺎء ھﻀﻤﻮﻧﻲ ) ﺑﻨﺴﺒﺔ ٣ – ١غ /ل (
ﻧﻤﺰج ﺟﺰء ) ١ﺳﻢ ( ٣ﻣﻦ ٣ + O.N.P.Gأﺟﺰاء ) ٣ﺳﻢ ( ٣ﻣﻦ
* إذا ﻛﺎن اﺧﺘﺒﺎر ﺗﺨﻤﯿﺮ اﻟﻼﻛﺘﻮز ﺳﻠﺒﯿﺎ ﻓﮭﻨﺎك اﺣﺘﻤﺎﻟﯿﻦ :
اﻟﻤﺎء اﻟﮭﻀﻤﻮﻧﻲ ،ﯾﻮزع ھﺬا اﻟﻤﺰﯾﺞ ﻓﻲ أﻧﺎﺑﯿﺐ ﺑﻤﻌﺪل ٢.٥ﺳﻢ٣
إﻣﺎ ﺑﺴﺒﺐ ﻏﯿﺎب أﻧﺰﯾﻢ اﻟﺒﺮﯾﻤﯿﺎز أو ﻓﻌﻼ اﻟﺠﺮﺛﻮم ) ﻻﻛﺘﻮز ﺳﻠﺒﻲ ( أي ﻏﯿﺎب – ß
ﻏﺎﻻﻛﺘﻮزﯾﺪاز ﯾﺤﻔﻆ ﻓﻲ اﻟﺒﺮاد ﺑﺪرﺟﺔ ˚٤م ،ﻓﻲ وﺳﻂ ﻗﻠﻮي
ﻟﻠﺘﻤﯿﯿﺰ ﺑﯿﻦ اﻟﺤﺎﻟﺘﯿﻦ ﻧﺴﺘﺨﺪم – ß :أورﺗﻮ ﻧﺘﺮو ﻓﯿﻨﯿﻞ ﻏﺎﻻﻛﺘﻮزﯾﺪ اﻟﺘﻲ ﺗﺪﺧﻞ إﻟﻰ ﯾﺰرع اﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺪروس ﻓﻲ اﻷﻧﺒﻮب و ﯾﺤﻀﻦ ﺑﺪرﺟﺔ ˚٣٧م ،ﺗﻘﺮأ
اﻟﻨﺘﯿﺠﺔ ﺧﻼل ٣ – ١ﺳﺎﻋﺎت و ﻛﺤﺪ أﻗﺼﻰ ٢٤ﺳﺎﻋﺔ : ( + ) O.N.P.G
اﻟﺨﻠﯿﺔ اﻟﺠﺮﺛﻮﻣﯿﺔ ﺑﺴﮭﻮﻟﺔ دون اﻟﺤﺎﺟﺔ ﻟﻠﺒﺮﯾﻤﯿﺎز
ﻓﺈذا ﻛﺎن اﻟﺠﺮﺛﻮم ) ﻻﻛﺘﻮز ( +ﻟﻜﻦ ﯾﻨﻘﺼﮫ اﻟﺒﺮﯾﻤﯿﺎز ﻓﺒﺈﻣﻜﺎﻧﮫ إدﺧﺎل ← O.N.P.G ﻻﻛﺘﻮز ) ( + ← ﺣﺪوث ﻟﻮن أﺻﻔﺮ
ﻻﻛﺘﻮز ) ( - ﻋﺪم ﺣﺪوث ﻟﻮن أﺻﻔﺮ ← -اﻟﻜﻠﯿﺒﺴﯿﻼ E.coli -
ﯾﺘﻔﻜﻚ إﻟﻰ أورﺗﻮ ﻧﺘﺮو ﻓﯿﻨﻮل ← ﺑﺈﺿﺎﻓﺔ ﻗﻠﻮي ← ﻟﻮن أﺻﻔﺮ -ﺿﻤﺎت اﻟﮭﯿﻀﺔ -اﻹﻧﺘﯿﺮوﺑﺎﻛﺘﺮ
-ﺷﯿﻐﯿﻼ ﺳﻮﻧﻲ
* ﺑﻌﺾ اﻷﻣﻌﺎﺋﯿﺎت اﻟﺘﻲ ﺗﺴﻤﻰ ) ﻣﺨﻤﺮة ﻟﻼﻛﺘﻮز ﺑﺒﻂء ( ﻻ ﺗﺨﻤﺮ اﻟﻼﻛﺘﻮز إﻻ ﺑﺒﻂء
و ﺗﺤﺘﺎج ﻣﺪة زﻣﻨﯿﺔ ﻟﺬﻟﻚ ← ﯾﻜﻮن ﻋﻨﺪھﺎ ( + ) O.N.P.Gﻣﺜﻞ ) ﺷﯿﻐﯿﻼ ﺳﻮﻧﻲ (
٥
اﻵﻟﯿﺔ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
* إن H.Iﻻ ﺗﺤﻞ اﻟﻜﺮﯾﺔ اﻟﺤﻤﺮاء إﻧﻤﺎ ﺗﺄﻛﻞ اﻟﺪم أﻛﻼ دون ﺗﺤﻠﯿﻠﮫ ﻧﺤﺪث ﻣﺰروع ﻧﻘﻲ ﻋﻤﻮدي ﻣﻦ اﻟﻤﻜﻮرات اﺧﺘﺒﺎر اﻟﺘﻜﻮﻛﺐ
اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺔ اﻟﻤﺬھﺒﺔ ﻋﻠﻰ وﺳﻂ ﻏﺮاء ﺑﺎﻟﺪم ، Satilitism Test
اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت اﻟﻤﺬھﺒﺔ ﺗﺤﻞ اﻟﺪم ← ﺗﺤﺮر اﻟﻌﻮاﻣﻞ ) ( V ، X -ﻧﺴﺘﺤﻠﺐ ﺑﻌﺮوة ﻗﻀﯿﺐ ﺑﻼﺗﯿﻨﻲ ﻣﻦ ﻣﺰروع H.I
ھﻨﺎ أﺻﺒﺢ ﺟﺎھﺰاً ﻻﺳﺘﺨﺪام ، H.I اﻟﻤﺪروس ﻓﻲ ٢ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻤﺼﻞ اﻟﻐﺮﯾﺰي اﻟﻌﻘﯿﻢ ﻣﺨﺼﺺ ﺑﺎﻟﺪرﺟﺔ اﻷوﻟﻰ ﻟـ H.Iﻣﺤﺒﺎت اﻟﺪم
ﻣﺴﺘﻌﻤﺮات H.Iاﻟﻘﺮﯾﺒﺔ ﻣﻦ ﺧﻂ اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت ﺗﻜﻮن ﻛﺒﯿﺮة ﻷﻧﮭﺎ ﺗﺄﺧﺬ اﻟﻌﺎﻣﻠﯿﻦ ) ( V ، Xﺑﻜﻤﯿﺎت أو اﻟﻤﺎء اﻟﮭﻀﻤﻮﻧﻲ اﻟﻌﻘﯿﻢ و ﺑﻮاﺳﻄﺔ ﻣﺎﺳﺤﺔ اﻟﻨﺰﻟﯿﺔ ،
ﻛﺒﯿﺮة ،وﺗﺼﻐﺮ ﻣﺴﺘﻌﻤﺮات H.Iﻛﻠﻤﺎ اﺑﺘﻌﺪﻧﺎ ﻋﻦ ﺧﻂ زرع اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت ﺷﻜﻞ اﻟﻜﻮاﻛﺐ ﻓﻲ اﻟﺴﻤﺎء . ﻗﻄﻨﯿﺔ ﯾﺰرع اﻟﻤﺴﺘﺤﻠﺐ ﻋﻠﻰ ﻋﻠﺒﺔ ﺑﺘﺮي اﻟﺴﺎﺑﻘﺔ اﻟﺘﻲ ﺗﺤﺘﺎج ﻓﻲ ﻧﻤﻮھﺎ إﻟﻰ اﻟﻌﺎﻣﻠﯿﻦ ) ( V ، X
ﺑﺸﻜﻞ ﻋﻤﻮدي ﻋﻠﻰ اﻟﺨﻂ اﻟﺰرﻋﻲ اﻟﺴﺎﺑﻖ اﻟﻤﻮﺟﻮدﯾﻦ ﻓﻲ اﻟﻜﺮﯾﺔ اﻟﺤﻤﺮاء
· ھﺬا اﻻﺧﺘﺒﺎر ﻣﻦ اﻻﺧﺘﺒﺎرات اﻟﻤﺆﻛِﺪة ﻋﻨﺪ وﺟﻮد ﻣﺴﺘﻌﻤﺮة ﻧﻘﯿﺔ ﻣﺸﻜﻮك أن ﺗﻜﻮن H.I دون أن ﯾﻤﺴﮫ ،
· إن اﺧﺘﺒﺎر اﻟﺘﻜﻮﻛﺐ ﯾﺠﺮي ﻋﻠﻰ ﻋﺪد ﻣﻦ اﻟﺠﺮاﺛﯿﻢ اﻟﻤﺤﺒﺔ ﻟﻠﻌﺎﻣﻠﯿﻦ ) ( V ، Xﻋﻤﻮﻣﺎً -ﯾﺤﻀﻦ ﻓﻲ ﺟﻮ ، CO2ﺑﺪرﺟﺔ ˚٣٧ - ٣٥م ،
وﯾﻔﺤﺺ ﻓﻲ اﻟﺼﺒﺎح -اﻟﺒﺎﻛﺘﺮوﺋﯿﺪ -اﻟﻤﻜﻮرات اﻟﺮﺋﻮﯾﺔ H.I -
-اﻟﻌﻘﺪﯾﺎت ) ﻣﻤﻜﻦ (
٦
اﻵﻟﯿﺔ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
· وﺳﻂ ﺻﻠﺐ :ﯾﺤﻮي اﻟﺒﻮﻟﺔ و اﻟﻤﺸﻌﺮ
ﻋﻨﺪ إﺿﺎﻓﺔ اﻟﺒﻮﻟﺔ و ﻣﺸﻌﺮ ﺣﻤﺮة اﻟﻔﯿﻨﻮل إﻟﻰ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺰرﻋﻲ ،إذا ﻛﺎن اﻟﺠﺮﺛﻮم ﯾﻨﺘﺞ اﻟﺒﻮﻻز ← ) ﺣﻤﺮة اﻟﻔﯿﻨﻮل ( PH ٨.٥ – ٦ اﺧﺘﺒﺎر إﻧﺘﺎج اﻟﺒﻮﻻز
ﯾﻔﻜﻚ اﻟﺒﻮﻟﺔ ← ﻓﺤﻤﺎت اﻟﻨﺸﺎدر ← ← ↑ PHﯾﺼﺒﺢ ﻟﻮن اﻟﻤﺸﻌﺮ أﺣﻤﺮ · أو وﺳﻂ ﺳﺎﺋﻞ :ﯾﺤﻮي :
ﻓﻮﺳﻔﺎت أﺣﺎدﯾﺔ اﻟﺒﻮﺗﺎﺳﯿﻮم URIAS
ﻓﻮﺳﻔﺎت ﺛﻨﺎﺋﯿﺔ اﻟﺒﻮﺗﺎﺳﯿﻮم
ﺑﻮﻻز ) : ( + ﺑﻮﻟﺔ +ﺣﻤﺮة اﻟﻔﯿﻨﻮل اﻟﺒﻮﻻز ﺧﻤﯿﺮة ﺗﻤﯿﮫ اﻟﺒﻮﻟﺔ إﻟﻰ ﻓﺤﻤﺎت اﻟﻨﺸﺎدر
ﻧﺰرع و ﻧﺤﻀﻦ و ﺗﻜﻮن اﻹﯾﺠﺎﺑﯿﺔ ﺑﺈﻋﻄﺎء اﻟﻘﻠﻮﯾﺔ ] . [ ( NH4)2CO3
-اﻟﺒﺮوﺳﯿﻼ -اﻟﻜﻠﯿﺒﺴﯿﻼ -اﻟﻤﺘﻘﻠﺒﺎت ) ﯾﻤﯿﺰھﺎ ﻋﻦ اﻟﺴﺎﻟﻤﻮﻧﯿﻼ ﻋﻠﻰ ( S.S
-اﻟﯿﺮﺳﯿﻨﯿﺎ ) ﻋﺪا اﻟﻄﺎﻋﻮﻧﯿﺔ ( -اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت اﻟﺮﻣﯿﺔ H.I - -ع .زرق ﻟﻮن أﺣﻤﺮ
٧
ﻣﻼﺣﻈﺎت اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
ﯾﺠﺮى اﻻﺧﺘﺒﺎر ﺑﻄﺮﯾﻘﺘﯿﻦ :
- (١ﻋﻠﻰ اﻟﺼﻔﯿﺤﺔ :
ﻧﺴﺘﺤﻠﺐ ﻣﺴﺘﻌﻤﺮة ﻣﻦ اﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﻔﺤﻮص ﻓﻲ ﻗﻄﺮة ﻣﺼﻞ ﻏﺮﯾﺰي ﻋﻠﻰ ﺻﻔﯿﺤﺔ
زﺟﺎﺟﯿﺔ ،ﺛﻢ ﻧﻀﯿﻒ ﻗﻄﺮة ﻣﻦ ﺑﻼﺳﻤﺎ إﻧﺴﺎن أو أرﻧﺐ ﻋﻘﯿﻤﺔ و ﯾﻤﺰج ﺟﯿﺪاً
ﻧﺴﺘﺨﺪم ﻣﺼﻮرة ) ﺑﻼﺳﻤﺎ ( أرﻧﺐ أو إﻧﺴﺎن ﻋﻘﯿﻤﺔ اﺧﺘﺒﺎر ﻛﺸﻒ اﻟﻤﺨﺜﺮاز
ﺣﺼﻮل ﺗﺤﻮﺻﺐ ) ﺑﺸﻜﻞ ﺧﯿﻮط ﻓﯿﺒﺮﯾﻦ ( ﺧﻼل ﺛﻮاﻧﻲ إﻟﻰ دﻗﺎﺋﻖ ﯾﺪل ﻋﻠﻰ وﺟﻮد
اﻟﻤﺨﺜﺮاز
أﻧﺰﯾﻢ اﻟﻤﺨﺜﺮاز ﻗﺎدر ﻋﻠﻰ ﺗﺤﻮﯾﻞ اﻟﻔﯿﺒﺮوﻧﻮﺟﯿﻦ إﻟﻰ ﻓﯿﺒﺮﯾﻦ ﻓﻲ
– (٢ﻓﻲ اﻷﻧﺒﻮب : -ﯾﺴﺘﺨﺪم ﻟﺘﻤﯿﯿﺰ اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت اﻟﻤﻤﺮﺿﺔ
اﻟﻤﺼﻮرة دون اﻟﺤﺎﺟﺔ ﻟﺸﻮارد ) ( Ca+2
ﻧﻤﺪد اﻟﻤﺼﻮرة اﻟﻌﻘﯿﻤﺔ ﺑﻨﺴﺒﺔ ١٠/١ﺛﻢ ﻧﻀﻊ ٠.٥ﺳﻢ ٣ﻓﻲ اﻷﻧﺒﻮب
ﯾﻀﺎف إﻟﻰ اﻷﻧﺒﻮب ٠.١ﺳﻢ ٣ﻣﻦ ﻣﺰروع ﺟﺮﺛﻮم ﻋﻠﻰ ﻣﺮق أو ﻣﻦ ﻣﺴﺘﺤﻠﺐ
اﻟﻤﺴﺘﻌﻤﺮة اﻟﻤﺄﺧﻮذة ﻣﻦ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺼﻠﺐ ﻓﻲ ﻣﺼﻞ ﻏﺮﯾﺰي
ﯾﺤﻀﻦ ﺑﺪرﺟﺔ ٣٧م ٦ – ٢ ،ﺳﺎﻋﺎت ،ﺣﺼﻮل ﻋﻠﻘﺔ ← ﻣﺨﺜﺮاز ) . ( +
ﺣﻤﺾ أﻣﯿﻨﻲ ▬ /دي أﻣﯿﻨﺎز ◄▬/ﺣﻤﺾ αﻛﯿﺘﻮن · اﻟﻜﺎﺷﻒ اﻟﻤﺴﺘﺨﺪم ) :ﻓﻮق ﻛﻠﻮر اﻟﺤﺪﯾﺪ ( HCL + اﺧﺘﺒﺎر ﻛﺸﻒ دي أﻣﯿﻨﺎز
أھﻢ اﻷﺣﻤﺎض اﻷﻣﯿﻨﯿﺔ اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻟﻜﺸﻒ دي أﻣﯿﻨﺎز ھﻮ ﻓﯿﻨﯿﻞ آﻻﻧﯿﻦ · +ﺣﻤﺾ ﺑﯿﺮوﻓﻲ ← ﻟﻮن أﺧﻀﺮ ﻏﺎﻣﻖ ) اﻷﻧﺰﯾﻤﺎت اﻟﻨﺎزﻋﺔ ﻟﻸﻣﯿﻦ (
ﻓﯿﻨﯿﻞ آﻻﻧﯿﻦ ▬ /دي أﻣﯿﻨﺎز ◄▬/ﺣﻤﺾ ﻓﯿﻨﯿﻞ ﺑﯿﺮوﻓﻲ ·
ﻻ ﯾﻤﻜﻦ اﺳﺘﺨﺪام ﻣﺸﻌﺮات اﻟـ PHﻟﻜﺸﻒ ﺗﺤﺮر اﻟﺤﻤﺾ اﻟﺴﺎﺑﻖ ،ﻷﻧﻨﺎ ﻻ · ﻧﺄﺧﺬ ﺟﺰء ﻣﻦ اﻟﻤﺮق اﻟﻤﺰروع ﻋﻠﯿﮫ اﻟﺠﺮﺛﻮم ) اﻟﺤﺎوي
ﻧﺴﺘﻄﯿﻊ ﺗﻤﯿﯿﺰ ﺗﺒﺪل ﻟﻮن اﻟﻤﺸﻌﺮ اﻟﻨﺎﺟﻢ ﻋﻦ ﺗﺤﺮﯾﺮ ھﺬا اﻟﺤﻤﺾ ﻋﻦ ذﻟﻚ اﻟﻨﺎﺟﻢ ﻋﻠﻰ اﻟﻔﯿﻨﯿﻞ آﻻﻧﯿﻦ ( ،ﻧﻀﻌﮫ ﻓﻲ أﻧﺒﻮب و ﻧﻀﯿﻒ إﻟﯿﮫ
ﻋﻦ اﺳﺘﮭﻼك اﻟﺴﻜﺮ ﻓﻲ اﻟﻮﺳﻂ . اﻟﻜﺎﺷﻒ ← ﻟﻮن أﺧﻀﺮ ﻏﺎﻣﻖ -اﻟﺒﺮوﻓﯿﺪاﻧﺴﯿﺎ -اﻟﻤﺘﻘﻠﺒﺎت
٨
ﻣﻼﺣﻈﺎت اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
) ﯾﺴﺘﺨﺪم ﻟﻜﺸﻒ وﺟﻮد اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت ﻓﻲ اﻟﺤﻠﯿﺐ ( – (١وﺳﻂ اﻟﺤﻠﯿﺐ +زرﻗﺔ اﻟﻤﯿﺘﯿﻠﯿﻦ :
ﯾﺰرع اﻟﺠﺮﺛﻮم ﻓﻲ اﻟﻮﺳﻂ ،ﯾﺤﻀﻦ ٢٤ – ١٨ﺳﺎﻋﺔ ،ﺑﺎﻟﺪرﺟﺔ ˚٣٧م .
زوال اﻟﻠﻮن اﻷزرق ﻓﻲ اﻟﻘﺴﻢ اﻟﺴﻔﻠﻲ ﻟﻸﻧﺒﻮب ← وﺟﻮد اﻟﺮﯾﺪوﻛﺘﺎز
* ﻋﺎدة ﯾﺒﻘﻰ اﻟﻘﺴﻢ اﻟﻌﻠﻮي ﻟﻸﻧﺒﻮب ﺑﻠﻮن أزرق ،ﻷﻧﮫ ﻛﻠﻤﺎ أرﺟﻌﮫ اﻟﺮﯾﺪوﻛﺘﺎز ﯾﻌﻮد و ﯾﺘﺄﻛﺴﺪ ﺑـ O2اﻟﮭﻮاء ،أﻣﺎ ﻓﻲ ﺣﺎل ﻛﺎن اﻟﻮﺳﻂ ﻣﻌﺰوﻻً
ﻋﻦ اﻟﮭﻮاء أو ﻛﺎﻧﺖ ﻛﻤﯿﺔ اﻟﺠﺮﺛﻮم ﻛﺒﯿﺮة ← ﻟﻮن اﻷﻧﺒﻮب ﯾﺰول ﻛﻠﮫ .
– (٢أوﺳﺎط ﻣﺮﻗﯿﺔ ﺗﺤﻮي اﻟﻨﺘﺮات :
ﻣﺜﻼً :ﻣﺮق ﻣﻐﺬي ) ﺧﻼﺻﺔ اﻟﻠﺤﻢ +ﺑﺒﺘﻮن ( +ﻧﺘﺮات اﻟﺒﻮﺗﺎﺳﯿﻮم اﺧﺘﺒﺎرات ﻛﺸﻒ
اﻟﺮﯾﺪوﻛﺘﺎز :أﻧﺰﯾﻢ ﯾﻘﻮم ﯾﺰرع اﻟﻮﺳﻂ ﺑﺎﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺪروس ،ﯾﺤﻀﻦ ٢٤ – ١٨ﺳﺎﻋﺔ ،ﺑﺎﻟﺪرﺟﺔ ˚٣٧م اﻟﺮﯾﺪوﻛﺘﺎز
ﺑﺈرﺟﺎع اﻟﻤﺮﻛﺒﺎت اﻟﻌﻀﻮﯾﺔ ﯾﺤﻀﺮ ﻣﺤﻠﻮﻻن – ١ :ﺣﻤﺾ اﻟﺴﻠﻔﺎﻧﯿﻠﻲ ٨غ /ل ﻓﻲ ﺣﻤﺾ اﻟﺨﻞ ٥ﻧﻈﺎﻣﻲ
) ﻣﺜﻞ زرﻗﺔ اﻟﻤﯿﺘﯿﻠﯿﻦ ( و α - ٢ﻧﺎﻓﺘﯿﻞ أﻣﯿﻦ ٥غ /ل ﻓﻲ ﺣﻤﺾ اﻟﺨﻞ ٥ﻧﻈﺎﻣﻲ
ﻣﺮﻛﺒﺎت ﻏﯿﺮ اﻟﻌﻀﻮﯾﺔ اﻟﻌﻤﻞ :
) ﻣﺜﻞ اﻟﻨﺘﺮات ( ،و ھﻮ ١٠ﺳﻢ ٣ﻣﻦ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﻤﺮﻗﻲ اﻟﻤﺰروع ﺑﻌﺪ اﻟﺤﻀﻦ ٠.٢ +ﺳﻢ ٣ﻣﻦ ﻣﺤﻠﻮل ﺣﻤﺾ اﻟﺴﻠﻔﺎﻧﯿﻠﻲ
٠.٣ﺳﻢ ٣ﻣﻦ ﻣﺤﻠﻮل αﻧﺎﻓﺘﯿﻞ أﻣﯿﻦ -اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت
ﻣﻮﺟﻮد ﻓﻲ اﻟﺠﺮاﺛﯿﻢ
اﻟﮭﻮاﺋﯿﺔ و اﻟﻼھﻮاﺋﯿﺔ ← ﺣﺼﻮل ﻟﻮن أﺣﻤﺮ ← وﺟﻮد ﻧﺘﺮﯾﺖ )) ﻧﺎﺟﻢ ﻋﻦ إرﺟﺎع اﻟﻨﺘﺮات ﺑﺎﻟﺮﯾﺪوﻛﺘﺎز ((
-ع .زرق
– (٣وﺳﻂ ﺻﻠﺐ ) ﯾﺤﻮي ﻣﻜﻮﻧﺎت اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺴﺎﺑﻘﺔ ( :
ﯾﺼﺐ اﻟﻮﺳﻂ ﺑﺸﻜﻞ ﻗﺎﺋﻢ و ﻣﺎﺋﻞ ﻓﻲ أﻧﺒﻮب ،ﻧﺰرع ﻋﻠﯿﮫ اﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺰروع وﺧﺰاً و ﻓﺮﺷﺎً ← ﻧﺤﻀﻦ ﺑﺪرﺟﺔ ˚٣٧م ،ﻟﻌﺪة أﯾﺎم . -اﻷﻣﻌﺎﺋﯿﺎت
ﺑﻌﺪھﺎ ﯾﺮذ ﻋﻠﻰ اﻟﻮﺳﻂ و ﺑﺸﻜﻞ ﻣﺘﺴﺎوي ﻛﻤﯿﺎً ﻣﻦ ﺣﻤﺾ اﻟﺴﻠﻔﺎﻧﯿﻠﻲ و ﻣﺤﻠﻮل αﻧﺎﻓﺘﯿﻞ أﻣﯿﻦ اﻟﺴﺎﺑﻘﺔ ← ﺣﺼﻮل ﻟﻮن أﺣﻤﺮ ← رﯾﺪوﻛﺘﺎز ) ( +
* ﯾﻤﻜﻦ اﺳﺘﺒﺪال اﻟﻤﺤﻠﻮﻟﯿﻦ اﻟﺴﺎﺑﻘﯿﻦ ﺑﺎﻟﻤﺤﻠﻮﻟﯿﻦ اﻟﺘﺎﻟﯿﯿﻦ :
– ١ﻣﺤﻠﻮل ﺣﻤﺾ اﻟﻜﺒﺮﯾﺖ اﻟﻜﺜﯿﻒ
– ٢ﻣﺤﻠﻮل دي ﻓﯿﻨﯿﻞ أﻣﯿﻦ
← ﻇﮭﻮر ﻟﻮن أزرق ← رﯾﺪوﻛﺘﺎز ) ( +
ﻓﻲ ﻣﺮﺣﻠﺔ أوﻟﻰ :ﺣﻤﺾ اﻟﻜﺒﺮﯾﺖ ﯾﻜﺴﺮ اﻟﺤﻠﻘﺔ ← دي آزوﻧﯿﻮم
ﻓﻲ ﻣﺮﺣﻠﺔ ﺛﺎﻧﯿﺔ :ھﻮ ﻧﻔﺴﮫ ﻣﺮﻛﺐ أﻣﯿﻨﻲ دوري ﯾﺘﺤﺪ ﺟﺰيء آﺧﺮ ﻣﻌﮫ ← آزو ﻣﻠﻮن
* أﻧﺰﯾﻢ ﺑﯿﺘﺎﻻﻛﺘﺎﻣﺎز ﯾﻤﯿﮫ اﻟﺮاﺑﻂ اﻷﻣﯿﺪي ﻓﻲ ﺣﻠﻘﺔ اﻟﺒﯿﺘﺎﻻﻛﺘﺎم * ﻋﻠﻰ وﺳﻂ ﻣﻮﻟﻠﺮ – ھﯿﻨﺘﻮن
ﻓﻲ اﻟﺼﺎد * ﺗﻮﺟﺪ أﻗﺮاص ﺗﺤﺴﺲ ﺗﺤﻮي ﻣﻌﻘﺪ ) ﺳﯿﻔﺎﻟﻮﺳﺒﻮرﯾﻦ – ﻧﺘﺮوﺳﯿﻔﯿﻦ (
اﺧﺘﺒﺎر اﻟﺒﯿﺘﺎ – ﻻﻛﺘﺎﻣﺎز
* ﯾﺴﺘﺨﺪم ﻟﺪراﺳﺔ اﻟﻨﺎﯾﺴﯿﺮﯾﺎت اﻟﺒﻨﯿﺔ ،اﻟﻌﻘﺪﯾﺎت ،اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت * ﯾﻮﺿﻊ اﻟﻘﺮص ﻋﻠﻰ اﻟﻮﺳﻂ اﻟﺤﺎوي ﻟﻤﺴﺘﻌﻤﺮة ﻧﻘﯿﺔ ﻟﻠﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺪروس ،ﻓﺈذا ) اﻟﺴﯿﻔﯿﻨﺎز (
، H.I ،اﻟﻼھﻮاﺋﯿﺎت اﻟﻤﻨﺘﺠﺔ ﻟﻠﺒﯿﺘﺎﻻﻛﺘﺎﻣﺎز ﻛﺎن اﻟﺠﺮﺛﻮم ﯾﻨﺘﺞ ﺑﯿﺘﺎﻻﻛﺘﺎﻣﺎز ،ﯾﻨﻘﻠﺐ ﻟﻮن اﻟﻘﺮص ﻣﻦ اﻷﺻﻔﺮ إﻟﻰ اﻷﺣﻤﺮ
٩
ﻣﻼﺣﻈﺎت اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
-اﻟﺠﯿﻼﺗﯿﻦ ﻣﺎدة ﺻﻠﺒﺔ ،ﯾﺘﻤﯿﻊ ﻓﻲ اﻟﺪرﺟﺔ ˚ ٢٢ - ˚٢٠م
← ﻻ ﯾﻤﻜﻦ ﺣﻀﻨﮫ ﻓﻲ اﻟﺪرﺟﺔ ˚٣٧م ) اﻟﺪرﺟﺔ اﻟﻤﻨﺎﺳﺒﺔ اﺧﺘﺒﺎر ﻛﺸﻒ اﻟﺠﯿﻼﺗﯿﻨﺎز
* ﻗﺪ ﯾﻌﻄﻲ اﻟﺠﺮﺛﻮم أﺷﻜﺎﻻ ﻣﻤﯿﺰة ﻟﻠﺘﻤﯿﻊ ،ﻓﻤﺜﻼ اﻟﺠﻤﺮة اﻟﺨﺒﯿﺜﺔ :ﺗﻤﯿﻊ ﺑﺸﻜﻞ ﻟﻨﻤﻮ ﻣﻌﻈﻢ اﻟﺠﺮاﺛﯿﻢ (
اﻟﺸﺠﺮة اﻟﻤﻘﻠﻮﺑﺔ اﻟﺠﯿﻼﺗﯿﻨﺎز أﻧﺰﯾﻢ ﻗﺎدر ﻋﻠﻰ ﺗﻔﻜﯿﻚ
-ﻧﺴﺘﻌﻤﻞ وﺳﻂ ﻧﺼﻒ ﺻﻠﺐ ﯾﺤﻮي ﺟﯿﻼﺗﯿﻦ ﺑﺎﻹﺿﺎﻓﺔ
* ﯾﻤﻜﻦ اﺳﺘﺨﺪام أﻗﺮاص ﺟﯿﻼﺗﯿﻦ ﻛﺮﺑﻮﻧﯿﺔ ﻣﺘﺤﻤﻠﺔ ﻟﻠﺤﺮارة ˚٣٧م ،ﺗﻮﺿﻊ ﻓﻲ اﻟﺠﯿﻼﺗﯿﻦ ) اﻟﮭﻼم اﻟﺤﯿﻮاﻧﻲ (
اﻷﻧﺒﻮب ﻣﻊ ﻣﺮق ﻣﺰروع اﻟﺠﺮﺛﻮم ،ﯾﺤﻀﻦ ﻟﻔﺘﺮة ← ﺗﺤﺮر ذرات اﻟﻜﺮﺑﻮن ﻟﻠﻤﻜﻮﻧﺎت اﻷﺧﺮى ،ﻧﺰرع ﻋﻠﯿﮫ اﻟﺠﺮﺛﻮم ﺑﺎﻟﻮﺧﺰ ،ﻧﺤﻀﻦ
اﻟﺴﻮداء و ﺗﺮﺳﺒﮭﺎ ← ﺟﯿﻼﺗﯿﻨﺎز ) ( + ﺑﺎﻟﺪرﺟﺔ ˚٣٧م ،ﺑﻌﺪ ٢٤ﺳﺎﻋﺔ ﻧﻔﺤﺺ اﻟﻮﺳﻂ ﻓﺈذا ﻛﺎن
اﻟﺘﻤﯿﻊ ﻧﺎﺟﻤﺎ ﻋﻦ اﻟﺤﺮارة ← ﯾﺰول ﺑﻌﺪ أن ﯾﺒﺮد اﻟﻮﺳﻂ -ﺿﻤﺎت اﻟﮭﯿﻀﺔ -ع .زرق -اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت
أﻣﺎ إذا ﻛﺎن اﻟﺘﻤﯿﻊ ﻧﺎﺟﻤﺎً ﻋﻦ اﻟﺠﯿﻼﺗﯿﻨﺎز ← ﻻ ﯾﺰول
١٠
اﻵﻟﯿﺔ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
ﻛﺸﻒ DNAase
ﻓﻘﺪان DNAﺧﺎﺻﺔ ﻧﺴﺘﺨﺪم أوﺳﺎط ﺻﻠﺒﺔ ﺗﺤﻮي + DNA :أزرق اﻟﺘﻮﻟﻮﯾﺪﯾﻦ ← DNAﻧﻮﻛﻠﯿﻮﺗﯿﺪات +ﺣﻤﺾ اﻟﻔﻮﺳﻔﻮر
اﻟﻤﯿﺘﺎﻛﺮوﻣﺎزﯾﺎ ) ﺷﺮه اﻟﺒﺮوﺗﯿﻨﺎت اﻟﻨﻮوﯾﺔ ﻟﻠﻤﻠﻮﻧﺎت اﻷﺳﺎﺳﯿﺔ ( و ﯾﺰرع اﻟﻮﺳﻂ ﺑﺎﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺪروس ،
ﻛﺬﻟﻚ ↓ ← PHاﻧﻘﻼب ﻟﻮن اﻟﻤﺸﻌﺮ ﻣﻦ اﻷزرق إﻟﻰ اﻷﺣﻤﺮ ﯾﺤﻀﻦ ﺑﺪرﺟﺔ ˚٣٧م ٢٤ – ١٨ ،ﺳﺎﻋﺔ . -ع .زرق -اﻟﻌﻨﻘﻮدﯾﺎت اﻟﻤﻤﺮﺿﺔ
) ھﺎﻟﺔ ﺣﻤﺮاء ﺣﻮل اﻟﻤﺴﺘﻌﻤﺮات ﻋﻠﻰ أرﺿﯿﺔ زرﻗﺎء ( . ﻋﻨﺪ وﺟﻮد DNAaseﯾﺘﺤﻮل ﻟﻮن اﻟﻮﺳﻂ ﻣﻦ اﻷزرق ← اﻷﺣﻤﺮ -اﻟﻌﻘﺪﯾﺎت اﻟﻤﻤﺮﺿﺔ ) اﻟﻤﻘﯿﺤﺔ اﻟﺰﻣﺮة ( A
-اﻟﺒﺎﺳﺘﻮرﯾﻼ اﻟﻄﺎﻋﻮﻧﯿﺔ -اﻟﻤﻄﺜﯿﺎت
-اﻟﺴﯿﺮاﺗﯿﺎ ) اﻟﻮﺣﯿﺪة ﺑﯿﻦ اﻷﻣﻌﺎﺋﯿﺎت (
ﻧﻤﺎذج ﺣﻞ اﻟﺪم ﻣﺜﺎل :ﺑﺮوﺳﯿﻼ ،ﺳﺤﺎﺋﯿﺎت ،اﻟﺴﻞ ،ع .اﻟﺰرق . (١اﻟﺘﻨﻔﺲ اﻟﮭﻮاﺋﻲ :اﻟﻤﺴﺘﻘﺒﻞ اﻟﻨﮭﺎﺋﻲ ﻟﻠﮭﯿﺪروﺟﯿﻦ ھﻮ اﻷوﻛﺴﺠﯿﻦ اﻟﺤﺮ
(٢اﻟﺘﻨﻔﺲ اﻟﻼھﻮاﺋﻲ :اﻟﻤﺴﺘﻘﺒﻞ اﻟﻨﮭﺎﺋﻲ ﻟﻠﮭﯿﺪروﺟﯿﻦ ھﻮ اﻷوﻛﺴﺠﯿﻦ ﻏﯿﺮ اﻟﺤﺮ ﻓﻲ اﻟﻤﺮﻛﺒﺎت ﻏﯿﺮ اﻟﻌﻀﻮﯾﺔ ﻣﺜﻞ ) ( So4-2ﻣﺜﺎل :ﻻ ھﻮاﺋﯿﺎت .
(٣اﻻﺧﺘﻤﺎر :اﻟﻤﺴﺘﻘﺒﻞ اﻟﻨﮭﺎﺋﻲ ﻟﻠﮭﯿﺪروﺟﯿﻦ ﻣﺮﻛﺐ ﻋﻀﻮي ﻻ ﯾﺤﻮي أوﻛﺴﺠﯿﻦ أو ﯾﺤﻮي أوﻛﺴﺠﯿﻦ ﻏﯿﺮ ﻗﺎدر ﻋﻠﻰ ﺗﺸﻜﯿﻞ ﻣﺎء .
١١
اﻵﻟﯿﺔ اﻷوﺳﺎط اﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻲ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻻﺧﺘﺒﺎر
-ﯾﺠﺮى اﻻﺧﺘﺒﺎر ﻋﻠﻰ ﻣﻜﻮرات إﯾﺠﺎﺑﯿﺔ اﻟﻐﺮام ﺳﻠﺒﯿﺔ اﻟﻜﺎﺗﺎﻻز ﻟﻠﺘﻔﺮﯾﻖ /▬ PYR -ﺑﯿﺮﻟﯿﺪوﻧﯿﻞ ﺑﺒﺘﯿﺪاز – β ◄▬/ﻧﺎﻓﺘﯿﻞ أﻣﯿﻦ اﺧﺘﺒﺎر PYR
-اﻹﯾﺠﺎﺑﯿﺔ ﺗﻜﻮن ﺑﻈﮭﻮر ﻟﻮن وردي أو أﺣﻤﺮ ﻛﺮزي -ﻧﻀﻊ اﻟﻘﺮص اﻟﻤﺸﺒﻊ ﺑـ PYRﻋﻠﻰ ﺻﻔﯿﺤﺔ زﺟﺎﺟﯿﺔ ،و ﻧﺒﻠﻠﮫ ﺑﺎﻟﻤﺎء
-اﻟﺴﻠﺒﯿﺔ ﺑﻌﺪم ﻇﮭﻮر أي ﻟﻮن اﻟﻤﻘﻄﺮ
)PYR (L-pyrrolidonyl-β- naphthylamide
-ﻧﺄﺧﺬ ﺑﺎﻷوز ﻣﻦ ﻣﺰرﻋﺔ اﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺪروس ،و ﻧﺤﻜﮭﺎ ﻋﻠﻰ اﻟﻘﺮص
اﻹﯾﺠﺎﺑﯿﺔ : – Lﺑﯿﺮوﻟﯿﺪوﻧﯿﻞ -βﻧﺎﻓﺘﯿﻼﻣﯿﺪ
-ﻧﺘﺮﻛﮭﺎ ﺑﺤﺮارة اﻟﻐﺮﻓﺔ ﻟﻤﺪة دﻗﯿﻘﺘﯿﻦ
-ﻋﻘﺪﯾﺎت اﻟﺰﻣﺮة ) Aاﻟﻌﻘﺪﯾﺎت اﻟﻤﻘﯿﺤﺔ ( Streptococcus pyogenes -ﺛﻢ ﻧﻀﯿﻒ ﻗﻄﺮة ﻣﻦ ﻛﺎﺷﻒ ﺳﯿﻨﺎم اﻟﺪﯾﮭﯿﺪ
-ﻛﺸﻒ وﺟﻮد أﻧﺰﯾﻢ ﺑﯿﺮوﻟﯿﺪوﻧﯿﻞ ﺑﺒﺘﯿﺪاز
Enterococci -اﻟﻤﻜﻮرات اﻟﻤﻌﻮﯾﺔ ) اﻟﺒﺮازﯾﺔ ( ) – Pدي ﻣﯿﺘﯿﻞ أﻣﯿﻨﻮ ﺳﯿﻨﺎم أﻟﺪھﯿﺪ ( % ٠.٠١
Dr.shadi wannous
١٢
اﻟﻄﺮق و اﻟﻨﺘﺎﺋﺞ اﻻﺧﺘﺒﺎر
ﻧﺄﺧﺬ ﻣﺰرﻋﺔ اﻟﺠﺮﺛﻮم اﻟﻤﺪروس ﺑﻌﺪ أن ﯾﻜﻮن زرع ﻋﻠﻰ )
اﺧﺘﺒﺎر ESBL
ﻏﺮاء ﺑﺎﻟﺪم ( ﻃﻮال اﻟﻠﯿﻞ ،و ﻧﻔﺮﺷﮭﺎ ﻋﻠﻰ ﻏﺮاء ﻣﻮﻟﻠﺮ – Extended - Spectrum Beta Lactamase
ھﯿﻨﺘﻮن ،و ﻧﻀﻊ : Test
-ﻗﺮص ) ( ١ﯾﺤﻮي : اﻟﻤﺒﺪأ :
إﻣﺎ ) ﺳﯿﻔﺘﺎزﯾﺪﯾﻢ أو ﺳﻔﺘﺮﯾﺎﻛﺴﻮن أو أزﺗﺮﯾﻮﻧﺎم ( ٣٠ ھﺬا اﻻﺧﺘﺒﺎر ﯾﮭﺪف ﻟﻠﻜﺸﻒ ﻋﻦ أﻧﺰﯾﻤﺎت اﻟﺒﯿﺘﺎﻻﻛﺘﺎﻣﺎز اﻟﺘﻲ ﺗﻨﺘﺠﮭﺎ ﺑﻌﺾ
ﻣﯿﻜﺮوﻏﺮام اﻟﻌﺼﯿﺎت ﺳﻠﺒﯿﺔ اﻟﻐﺮام اﻷﻣﻌﺎﺋﯿﺔ وﻟﻜﻦ ﺑﺸﻜﻞ ﺧﺎص اﻟﻜﻠﯿﺒﺴﯿﻼ اﻟﺮﺋﻮﯾﺔ و
أو ) ﺳﯿﻔﺒﻮدوﻛﺴﯿﻢ ( ١٠ﻣﯿﻜﺮو ﻏﺮام ،أو ﺟﻤﯿﻌﮭﺎ إﯾﺸﯿﺮﯾﺸﯿﺎ اﻟﻜﻮﻟﻮﻧﯿﺔ ،و ﻟﻜﻦ ھﺬه اﻷﻧﺰﯾﻤﺎت ﺗﺘﻤﯿﺰ ﺑﻤﺎ ﯾﻠﻲ :
-ﻗﺮص ) ( ٢ﯾﺤﻮي : -١ﺗﻌﻄﯿﮭﺎ ﻣﻘﺎوﻣﺔ ﻟﻤﺠﻤﻮﻋﺔ ﻣﻦ اﻟﺼﺎدات ﻣﻦ زﻣﺮة اﻟﺒﯿﺘﺎ ﻻﻛﺘﺎم اﻟﺘﻲ
أﻣﻮﻛﺴﯿﺴﯿﻠﻠﯿﻦ /ﻛﻼﻓﻮﻟﻮﻧﯿﻚ أﺳﯿﺪ ) ﻋﯿﺎر اﻟﻜﻼﻓﻮﻟﻮﻧﯿﻚ أﺳﯿﺪ ﺗﻜﻮن ﻋﺎدة ذات ﺗﺎﺛﯿﺮ ﻋﻠﻰ اﻟﺠﺮاﺛﯿﻢ ﺳﻠﺒﯿﺔ اﻟﻐﺮام ) ﻣﺜﻞ :
= ١٠ﻣﯿﻜﺮوﻏﺮام ( ﺳﯿﻔﻮﺗﺎﻛﺴﯿﻢ ،ﺳﻔﺘﺮﯾﺎﻛﺴﻮن ،ﺳﯿﻔﺘﺎزﯾﺪﯾﻢ ،أزﺗﺮﯾﻮﻧﺎم ،
ﺳﯿﻔﺒﻮدوﻛﺴﯿﻢ (
ﯾﺠﺐ أن ﺗﻜﻮن اﻟﻤﺴﺎﻓﺔ ﺑﯿﻦ اﻷﻗﺮاص ١٥ﻣﻢ ،و ﻛﺬﻟﻚ ﺗﺒﻌﺪ
-٢و ﻟﻜﻦ ھﺬه اﻷﻧﺰﯾﻤﺎت ﻏﯿﺮ ﻓﻌﺎﻟﺔ ﻣﻊ اﻟﺴﯿﻔﺎﻣﺎﯾﺴﯿﻦ ) اﻷﺟﯿﺎل
ﻧﻔﺲ اﻟﻤﺴﺎﻓﺔ ﻋﻦ ﺣﺎﻓﺔ اﻟﻄﺒﻖ ،ﻧﺤﻀﻦ اﻟﻮﺳﻂ ٢٠ – ١٦ﺳﺎﻋﺔ ،ﺑﺪرﺟﺔ ﺣﺮارة ٣٥م
اﻟﺠﺪﯾﺪة ﻣﻦ اﻟﺴﻔﺎﻟﻮﺳﺒﻮرﯾﻨﺎت (
ﺛﻢ ﻧﻘﯿﺲ أﻗﻄﺎر ھﺎﻻت اﻻﻧﺤﻼل ﺣﻮل اﻟﻘﺮﺻﯿﻦ
-٣ﺗﺘﺜﺒﻂ ھﺬه اﻷﻧﺰﯾﻤﺎت ﺑﻮاﺳﻄﺔ اﻟﻜﻼﻓﻮﻟﻮﻧﯿﻚ أﺳﯿﺪ
ﻓﺈذا وﺟﺪﻧﺎ أن ﻗﻄﺮ اﻻﻧﺤﻼل ﺣﻮل اﻟﻘﺮص اﻟﺤﺎوي ﻋﻠﻰ ﻛﻼﻓﻮﻟﻮﻧﯿﻚ أﺳﯿﺪ ) اﻟﻘﺮص ، ( ٢ﻗﺪ زاد ﻋﻦ ﻗﻄﺮ اﻻﻧﺤﻼل ﺣﻮل اﻟﻘﺮص
اﻻﺳﺘﺨﺪام :أﻛﺜﺮ ﻣﺎ ﯾﺴﺘﺨﺪم ھﺬا اﻻﺧﺘﺒﺎر ﻟﻜﺸﻒ اﻟﻜﻠﯿﺒﺴﯿﻼ اﻟﺮﺋﻮﯾﺔ ،و
اﻟﺤﺎوي ﻋﻠﻰ اﻟﺴﯿﻔﺎﻟﻮﺳﺒﻮرﯾﻦ ) اﻟﻘﺮص ، ( ١ﻓﮭﺬا ﯾﻌﻨﻲ أن اﻻﺧﺘﺒﺎر إﯾﺠﺎﺑﻲ و اﻟﺠﺮﺛﻮم ﯾﺤﻮي اﻷﻧﺰﯾﻢ اﻟﻤﺪروس ) ( ESBL
اﻹﯾﺸﯿﺮﯾﺸﯿﺎ اﻟﻜﻮﻟﻮﻧﯿﺔ اﻟﺘﻲ ﯾﺸﻚ أﻧﮭﺎ ﺗﻤﻠﻚ أﻧﺰﯾﻤﺎت ) ( ESBL
أو أن ﺗﻈﮭﺮ ﻋﻼﻣﺔ ) اﻟﻤﻔﺘﺎح ( ،ﺣﯿﺚ ﯾﺰداد اﻻﻧﺤﻼل ﻋﻠﻰ ﻗﺮص اﻟﺴﯿﻔﺎﻟﻮﺳﺒﻮرﯾﻦ ﻣﻦ ﺟﮭﺔ ﻗﺮص اﻟﻜﻼﻓﻮﻟﻮﻧﯿﻚ أﺳﯿﺪ
Dr.shadi wannous
١٣