‫קורס מיקרוביולוגיה‬

‫ואימונולוגיה‬
‫מרצה ‪ :‬ד " ר ג ' ריס ג ' דעון‬

‫‪1‬‬
 ‫נושא‪ -1‬מבוא‬
‫למיקרוביולוגיה‬
‫ובקטריולוגיה רפואית‬

‫‪2‬‬
 ‫מבוא למיקרוביולוגיה רפואית‬
‫המיקרוביולוגיה הרפואית היא ענף במדע המיקרוביולוגיה‬
‫המתמקד בחקר מיקרואורגניזמים והשפעתם על בריאות‬
‫האדם‬

‫‪3‬‬
 ‫יחסי טפיל‪-‬מאכסן‬
‫המיקרואורגניזמים שבאינטראקציה עם בני אדם‬
‫מתחלקים לשתי קבוצות עיקריות‪:‬‬
‫•קומנסליים (‪( )Commensals‬או ספרופיטיים)‬
‫•פתוגניים (‪)Pathogens‬‬

‫‪4‬‬
‫מיקרואורגניזמים קומנסליים‬
‫• מיקרואורגניזמים שבדרך כלל חיים בגוף האדם‬
‫הבריא או על פני השטח שלו מבלי שיגרמו נזק‬
‫או מחלה כל שהיא (פלורה רגילה)‬
‫• יתרונות הפלורה נורמלית‪:‬‬
‫• תורמים ליכולת הגוף להתגונן מפני פתוגנים ע"י‪:‬‬
‫• אכלוס נישות משותפות בגוף‬
‫• יצירת פפטידים או חלבונים אנטימיקרוביאלים (כמו‬
‫בקטריוצינים‪ )Bacteriocins-‬כנגד מיקרואורגניזמים‬
‫פתוגנים‬

‫• חסרונות הפלורה נורמלית‪:‬‬

‫• מיקרואורגניזמים אופורטוניסטים יכולים‪:‬‬
‫• להתרבות יתר על המידה ואז לגרום למחלה‬
‫• לעבור לאתרים סטריליים בגוף ולגרום למחלה‬
‫• זה קורה בעקבות שינוי הרכב הפלורה הנורמלית ו‪/‬או‬
‫החלשות‪/‬דיכוי המערכת החיסונית‬

‫‪5‬‬
 ‫מיקרואורגניזמים פתוגנים‬
‫•מיקרואורגניזמים הגורמים למחלה (מחלה זיהומית ‪Infectious‬‬
‫‪)disease‬‬
‫•הם בעלי מנגנוני פתוגניות (גורמי אלימות) המאפשרים להם‪:‬‬
‫• להתגבר על מנגנוני ההגנה בגוף המאכסן (האדם)‬
‫• לגרום נזק לתאי מאכסן‬

‫‪6‬‬
 ‫פתוגנזה‪Pathogenesis -‬‬
‫•פתוגנזה‪ :‬התפתחות המחלה‪ ,‬כלומר השנויים המבניים‬
‫והתפקודיים הנגרמים בגוף בעקבות המחלה‬

‫•הפוטנציאל הפתוגני של מיקרואורגניזם מסוים תלוי ב‪:-‬‬

‫• הנתונים המובנים של המיקרואורגניזם עצמו‪ -‬גורמי אלימות‬
‫(‪)Virulence factors‬‬
‫• המצב הבריאותי של החולה‪( -‬גורמי סיכון‪)Predisposing factors‬‬
‫(‪)Immunocompromised – Immunocompetent‬‬

‫‪7‬‬
 Pathogens
•Bacteria (‫)חיידקים‬ Prokaryotes
•Fungi (‫)פטריות‬
•Protozoa (‫)פרוטוזואה‬ Eukaryotes
•algae (‫)אצות‬
•Helminths (‫)תולעים‬
•Viruses (‫)נגיפים‬

8
 )Nomenclature( ‫מתן שמות לפתוגנים‬

Capital letter

Enterobacteriaceae Escherichia coli O55:H37:K2

Family Genus Species Serotype /Strain

‫זן‬/‫סירוטיפ‬
‫משפחה‬ ‫סוג‬ ‫מין‬

9
 ‫מאפיינים כללים של חיידקים‬
‫•חד תאים פרויקטים )‪(0.2mM –7mM‬‬
‫•נפוצים בטבע‬
‫•מופיעים בכמה צורות וברמות ארגון‬
‫שונות‬
‫•בעלי דופן‬
‫‪Coccus‬‬
‫•חלק בעלי תנועה ע"י שוטונים‬
‫‪Bacillus‬‬ ‫•התרבות אל מינית ע"י חלוקה‬
‫בינרית= פליגה‬
‫•רוב החיידקים כולל החיידקים‬
‫הפתוגנים הם הטרוטרופיים‬
‫‪spirillium‬‬
‫•חשובים במחזור חומרים בטבע‬
‫(מפרקים) ובתעשיית מזון‬
‫‪10‬‬ ‫‪10‬‬
‫ביופילם (‪)Biofilms‬‬
‫•אוכלוסיות של‬
‫מיקרואורגניזמים קשורים‬
‫אחד לשני ולמשטח בתוך‬
‫חומר רירי שהם מפרישים‬
‫•הביופילם יכול להיות מועיל‬
‫או מזיק‬
‫•חיידקים במצב ביופילם‬
‫עמידים יותר לאנטיביוטיקה‬
‫ולחומרי חיטוי‬

‫‪11‬‬
‫מבנה התא החיידקי‬

‫‪12‬‬
 ‫)‪Capsule (Glycocalyx‬‬

‫•פולימר המורכב לרוב מסוכרים (פוליסאכריד) המופרשים ע"י‬

‫החיידק‬
‫•תפקיד עיקרי‪:‬‬
‫• עמידות בפני פגוציתוזה (ע"י דחיה אלקטרוסטטית) ופעילות‬
‫של מערכת המשלים‬
‫• ומכאן פולשנות (מקנה אלימות)‬
‫• (דוגמאות לחיידקים בעלי קפסולה‪Klebsiella :‬‬
‫‪, Streptococcus pneumoniae , pneumoniae‬‬
‫‪) Haemophilus influenzae‬‬

‫‪13‬‬
Capsule

14
Capsule

15
‫שוטון = ‪Flagellum‬‬
‫•חלול‪ ,‬מורכב מחלבון‪ ,‬מקנה תנועתיות‬

‫מקור האנרגיה גרדיינט אלקטרוכימי‬

‫‪16‬‬ ‫•‬
Motile Cells

17
Flagella Arrangement

18
 ‫שעריות = ‪Fimbriae=Pili‬‬
‫•מפוזרים על כל פני שטח התא ומורכבים מחלבון‬
‫•תפקיד‪:‬‬
‫• ‪ .1‬הצמדות (ויצירת ביופילם)‬
‫• ‪ .2‬העברת חומר גנטי‬

‫•קיימים בכל החיידקים הגרם שליליים‬

‫•ובחלק מהחיידקים הגרם חיוביים‪:‬‬
‫• ‪Streptococcus pyogenes‬‬
‫• ‪Corynebacterium diphtheriae‬‬

‫‪19‬‬
Fimbriae=Pili = ‫שעריות‬

20
‫שעריות = ‪ Pili‬מתווכות קוניוגציה‬
‫‪Conjugation‬‬

‫‪21‬‬
 ‫‪= Cell wall‬דופן תא‬
‫•קשוח‪ ,‬מגן על התא מפני פגיעה או נזק‪ ,‬ושומר‬
‫על צורת התא‬
‫• מונע מוות אוסמוטי ‪Osmotic lysis‬‬
‫•בנוי מפפטידוגליקן )‪Peptidoglycan (murein‬‬

‫‪22‬‬
 Peptidoglycan (murein)
• No cross-bridge in Gr-, side chains
are directly connected
• Polymer of disaccharide • Peptide cross-bridge in Gr+
N-acetylglucosamine (NAG) & N- (pentaglycine crossbridge in S.
aureus)
acetylmuramic acid (NAM)
• Linked by side chain and cross-bridge (in
Gr+) amino acids
• Cross-linking is catalyzed by trans- and
carboxy peptidases

23
Peptidoglycan (murein)

24
Gram positive vs. negative cell
wall

LTA, TA LPS
‫פפטידוגליקן‬ ‫קרום חיצוני‬

‫קרום התא‬

25
Gram-positive and Gram-negative cell wall

Figure
26 4.13b, c
Cell membrane

27
 ‫נבגים = ‪Spores‬‬
‫• תאים רדומים‬
‫• נוצרים רק כאשר חיידקים מפסיקים‬
‫להתרבות כתוצאה מ‪:-‬‬
‫• מחסור בנוטריינטים (כמו מקור פחמן‬
‫וחנקן) או‬
‫שינוי לרעה בתנאים סביבתיים‬ ‫•‬
‫• עמידים מאוד לתנאים סביבתיים‬
‫קיצוניים (כמו חום‪ ,‬יובש‪ ,‬כימיקלים‬
‫רעילים‪)..‬‬
‫• תפקיד‪ :‬הישרדות‬
‫• ‪Bacillus, Clostridium‬‬

‫‪28‬‬
‫‪Sporulation and Germination‬‬

‫תכולה גבוהה של‬ ‫•‬

‫חומצה דיפיקולינית‬
‫( ‪)Dipicolinic acid‬‬
‫וסידן‪ ,‬ומעטפת‬
‫חלבונית חיצונית‬
‫מקנים לנבג עמידות‬
‫לחום וכימיקלים‬
‫נבטיה (‪-)Germination‬‬ ‫•‬
‫התפתחות לתא‬
‫וגיטטיבי כשהתנאים‬
‫הופכים מתאימים‬

‫‪29‬‬
Bacterial size

30
 Gram stain ‫צביעת גרם‬
Gram + Gram -

: ‫ קיבוע וצביעה ראשונית‬.1

Gentian or crystal violet
‫ תמיסת יוד‬Lugol .2
) Decolorization ( ‫ דקולוריזציה‬.3
alcohol - acetone
Safranin : ‫ צביעה נגדית‬.4

31
 Gram stain ‫צביעת גרם‬

Gram positive = ‫גרם חיובי‬ Gram negative = ‫גרם שלילי‬

32
 Bacterial morphology
)rods, bacillus( ‫מתגים‬ )cocci( ‫נקדים‬

Staphylococcus
Gr pos
Bacillus Streptococcus
pyogenes
Streptococcus pneumonia

Diplococcus
Gr neg
Neisseria
E. coli

33
‫התרבות חיידקים ותנאי‬
‫גידול‬

‫‪34‬‬
‫חיידקים מתרבים ע"י פליגה –‬
‫‪Binary fission‬‬

‫‪35‬‬
 ‫זמן הדור‪Generation time -‬‬
‫•זמן דור‪ :‬זמן בין חלוקה אחת לשנייה‬
‫•נקרא גם זמן ההכפלה‪Doubling -‬‬
‫‪time‬‬
‫•מאפשר לחזות כמה זמן עובר מרגע‬
‫ההדבקה עד שמופיעים התסמינים של‬
‫המחלה (משך תקופת ההדגרה)‪:‬‬
‫•‪Gt of E. coli= 20 min‬‬
‫הערה‪ -‬משך תקופת ההדגרה‬ ‫• =‪Gt of Mycobacterium tuberculosis‬‬
‫מושפע מזמן הדור‪ ,‬כמות הפתוגן‬ ‫)‪15 h (900 min‬‬
‫שחדרה לגוף‪ ,‬אלימות הפתוגן‪,‬‬
‫ומצבו החיסוני של המאכסן‬ ‫‪N=2n‬מספר הדורות‬ ‫• =‪n‬‬

‫‪36‬‬
 ‫עקומת גידול של חיידקים‬
‫‪Disease symptoms appear‬‬ ‫שלב העמידה‬
‫‪Sensitivity to antibiotics‬‬
‫שלב הלוגרתמי שלב השהיה‬ ‫שלב התמותה‬

‫‪N=2n‬‬

‫‪37‬‬
‫גורמים המשפיעים על גידול‬
‫החיידקים‬
‫•לחץ אוסמוטי (ריכוז מלח)‬
‫• חיידקים ‪" :halophiles‬אוהבי ריכוז מלח גבוהה"‬

‫•לחות‪/‬מים‬
‫•רמת החומציות ( ‪) pH‬‬

‫‪38‬‬
‫גורמים המשפיעים על גידול‬
‫החיידקים‬
‫•טמפרטורה‬

‫‪39‬‬
‫גורמים המשפיעים על גידול‬
‫החיידקים‬
‫• חמצן‪:‬‬
‫אווירניים (ארוביים ‪)Strict aerobic ,‬‬
‫אל‪-‬אווירניים פקולטטיביים ( ‪) Facultative anaerobic‬‬
‫אל‪-‬אווירניים מוחלטים ( ‪) Strict anaerobic‬‬
‫‪ :Capnophiles‬צריכים ריכוז ‪ CO2‬גבוה‬

‫‪40‬‬
‫גורמים המשפיעים על גידול‬
‫החיידקים‪ -‬חמצן‬
‫‪Capnophiles‬‬

‫‪41‬‬