THU NHẬN ENZYME BROMELAIN TỪ QUẢ DỨA

1. Đối tượng nghiên cứu

- Bromelain là nhóm protease thực vật được thu nhận từ họ Bromeliaceae, đặc biệt có hiều trong
thân và trái dứa.

2. Quy trình thí nghiệm

Quả dứa

Xay nhuyễn

Lọc

Dịch lọc

Ly tâm

Chế phẩm thô Bã

Sấy khô

Tinh sạch

E. tinh khiết

Quy trình tổng quát thu nhận và tinh sạch enzyme bromelain

3. Giải thích quy trình

3.1 Nguyên liệu
- Dứa tươi, ngoài ra có thể sử dụng cả vỏ, thân, chồi và lá dứa để thu nhận enzyme bromelain.
- Sau khi đem về, nguyên liệu sẽ được rửa bằng nước sạch để loại bỏ tạp chất và đất cát để
chuẩn bị cho các giai đoạn tiếp theo.
3.2 Xay nhuyễn
- Trái dứa sau khi mua ngoài chợ về sẽ được loại bỏ vỏ, rửa sạch. Sau đó cắt thành từng miếng
nhỏ, rồi bỏ vào máy say sinh tố say nhuyễn.
- Mục đích: làm giảm kích thước nguyên liệu, nhằm phá vỡ tế bào mô dứa để có thể tách lấy
enzyme bromelain. Nhằm trích ly dịch quả trong dứa.
3.3 Lọc
- Hỗn hợp nước dứa sau khi say sẽ được lọc bằng túi lọc để thu lấy dịch lọc và bỏ bã.
- Mục đích: tách một phần hoặc toàn bộ các cặn còn lại trong dịch ép, quá trình này hao hụt cỡ
15% khối lượng dịch ép.
- Tốc độ lọc phụ thuộc chênh lệch áp suất và bề dày lớp cặn.
3.4 Ly tâm
- Dịch lọc sau đó được đưa vào máy li tâm với tốc độ 4000 vòng/phút thu lấy dịch ly tâm có
chứa enzyme bromelain và bỏ cặn.
3.5 Thu chế phẩm bromelain thô
- Dịch ly tâm sẽ được kết tủa bằng dung môi hữu cơ acetone lạnh
+ Lấy dịch ly tâm nước dứa tủa với acetone với tỷ lệ 2 acetone : 1 dịch dứa, nghĩa là
cho từ từ ???ml acetone lạnh vào trong ??ml dịch dứa
+ Để yên dịch vừa tủa trong tủ mát 4oC khoảng 1 giờ, sau đó ly tâm lạnh ở 4oC với
tốc độ 4000 vòng/30 phút sau đó thu lấy tủa???
+ Rửa tủa với một ít acetone lạnh.
3.6 Sấy khô
- Mục đích: tách một phần nước khỏi dịch chiết và thu tủa.
- Tủa thu được sẽ được sấy chân không và thu được enzyme bromelin thô (màu trắng
ngà).
- Nhiệt độ: 40 oC trong 24h.
3.7 Tinh sạch enzyme bromelain
Phương pháp: Sắc ký trao đổi ion
Quả dứa

Loại bỏ vỏ

Xay

Lọc

Dịch lọc Bã

Ly tâm

Dịch ly Bã

Dung

Kết tủa

Ly tâm Dịch ly

Hỗn hợp

Sấy khô

Bromelin

Bảo quản