Professional Documents
Culture Documents
پوپوزال1
پوپوزال1
رشته :میکروبیولوژی
1
تعداد پاياننامههاي كارشناسي ارشد راهنمايي شده:
ساير دانشگاهها: دانشگاه آزاد اسالمي:
يكسال گذشته:
نام پاياننامههاي كارشناسي ارشد راهنمايي شده در
دانشگاه آزاد اسالمي:
ساير دانشگاهها:
ساير دانشگاهها:
يكسال گذشته:
تعداد رسالههاي راهنمايي شدهی دكترا در
ساير دانشگاهها: دانشگاه آزاد اسالمي:
نام رسالههاي راهنمايي شدهی دكترا:
دانشگاه آزاد اسالمي:
ساير دانشگاهها:
2
تعداد رسالههاي دكترا در دست راهنمايي:
ساير دانشگاهها : دانشگاه آزاد اسالمي :
نام رسالههاي دكترا در دست راهنمايي :
ساير دانشگاهها:
كارشناسي
ارشد
تعداد پاياننامهها و رسالههاي راهنمايي شده
دكترا
كارشناسي
ارشد تعداد پاياننامهها و رسالههاي راهنمايي شده
دكترا
كارشناسي ارشد
دكترا تعداد پاياننامهها و رسالههاي راهنمايي شده
3
دکلهای فشار قوی بر خواص ضد میکروبی اسانس
میدانهای الکترومغناطیس ناشی از
– 1الف :عنوان پاياننامه :اثر
گلها و برگهای گیاه Achillea wilhelmsii C.Koch
غير فارسي فارسي
عملي 4 3
كاربردي 2
نظري
بنيادي 1 ب :نوع كار تحقيقاتي:
پ :تعداد واحد پاياننامه8:
ت :پرسش اصلي تحقيق (مسألهی تحقيق):
آیا میدانهای الکترومغناطیسی بر خاصیت ضد میکروبی اسانس گیاه Achillea wilhelmsiiاثر میگذارد.اگر اثر
دکلهای فشار قوی است)
چهمقدار است؟ (منظور میدانهای الکترومغناطیسی ناشی از
میگذارد ،
.5بيان مسأله (تشريح ابعاد ،حدود مسأله ،معرفي دقيق مسأله ،بيان جنبههاي مجهول و مبهم و
متغيرهاي مربوط به پرسشهاي تحقيق ،منظوِر تحقيق)
افزایش جمعیت وپیشرفت تکنولوژی مشکالت زیستمحیطی خاصی را ایجاد کرده است که در این راستا می توان آلودگیهای
مختلف زیستی از جمله امواج الکترومغناطیس را نام برد .با پیشرفت تکنولژی وصنعت و با کاربردهای روزازون میدانهای
الکترومغناطیسی درمخابرات ،تحقیقات نظامی وپزشکی همه روزه میدانهایی با شدت متفاوت و با اشکال گوناگون سالمت
انسان را تهدید می کنند[ .]5این امواج بر روند تکثیر سلولی ،انتقال یونی ،فعال شدن بسیاری از آنزیمها وافزایش بسیاری از
پروتئینهای داخلسلولی تاثیر می گذارند[]17،15،11
همچنین انجام تجربیات علمی باعث شناخت مواد متشکله گیاهان در قرون 18و 19میالدی گشته و توجه به
استخراج و تجزیه مواد موثره داروهای شیمیایی طبیعی ،ایده کاربرد ماده خالص تهیه شده از گیاهان را به عنوان
داروی موثر بارور نمود .اگرچه با توسعه صنایع دارویی در اوایل قرن بیستم ،داروهای گیاهی تا حد زیادی ارزش خود را
در بین اطباء از دست دادند ،اما در دهه های اخیر استقبال دوباره ای برای مصرف داروهای گیاهی به وجود آمده است ،به
ویژه آنکه مقاومت آنتی بیوتیکی ،همواره تهدید جدی برای سالمتی انسان و دام ،به ویژه با ایمنی ضعیف بوده و لذا نیاز برای
یافتن مواد ضد میکروبی ارزان و موثر ضروری است .در این میان ،شناخت خواص ضد میکروبی گیاه بومادران که گونه
بومی ایران است مورد توجه قرار گرفته است . .این گیاه با نام فارسی بومادران و نام علمی ، Achillea wilhelmsii C.Koch
از تیره آستراسه ،زیر تیره پرتو آساها و از طایفه بابونه است[ .]1،2گیاهی نسبتًا کوچک ،علفی ،به ارتفاع 10-35سانتی
متر با ساقه های منشعب ،برگهای سبز پوشیده از کرک و گل آذین دیهم کپه ای می باشد .موسم گل دهی آن اردیبهشت –
خرداد می باشد .این گیاه دارای حدود 85گونه است که 7گونه آن انحصاری ایران است[ .]4،3این گیاه پراکندگی وسیعی
در مناطق مختلف ایران دارد .بنابراین با توجه به بومی بودن این گیاه و وپراندگی زیاد آن در ایران بر آن شدیم تا اثرات ضد
میکروبی اسانس آن را بررسی کنیم .این گیاهان دارویی در رویشگاههای طبیعی خود جمع آوری می شوند تا ترکیبات موثره
آنها تغییر نکند .در این رویشگاه ها که معموال در مناطق کوهستانی هستند دکلهای فشار قوی وجود دارد .پس بررسی اثر
امواج الکترومغناطیسی بر خواص ضد میکروبی و ترکیبات موثره گیاهان دارویی خالی از لطف نیست .لذا در این مطالعه
به بررسی اثر میدانهای الکترومغناطیسی بر خواص ضد میکروبی اسانس گل و برگهای این این گیاه خواهیم پرداخت.
تحقيق بنيادي پژوهشي است كه به كشف ماهيت اشياء ،پديدهها و روابط بين متغيرها ،اصول ،قوانين و ساخت يا آزمايش تئوريها و نظريهها -1
ميپردازد و به توسعة مرزهاي دانش رشتة علمي كمك مينمايد.
تحقيق نظري :نوعي پژوهش بنيادي است و از ارزشهاي استدالل و تحليل عقالني استفاده ميكند و بر پاية مطالعات كتابخانهاي انجام ميشود. -2
تحقيق كاربردي :پژوهشي است كه با استفاده از نتايج تحقيقات بنيادي به منظور بهبود و به كمال رساندن رفتارها ،روشها ،ابزارها ،وسائل، -3
توليدات ،ساختارها و الگوهاي مورد استفادة جوامع انساني انجام ميشود.
تحقيق عملي :پژوهشي است كه با استفاده از نتايج تحقيقات بنيادي و با هدف رفع مسائل و مشكالت جوامع انساني انجام ميشود. -4
4
.6سوابق مربوط (بيان مختصر سابقهی تحقيقات انجام شده دربارهی موضوع و نتايج بهدست آمده در داخل
و خارج از كشور نظرهاي علمي موجود دربارهی موضوع تحقيق)
میدانهای الکترومغناطیسی با تاثیر بر بارهای الکتریکی غشا بر نفوذ پذیری غشائ سلول اثر می گذارند و منجر به تغییرات
داخل سلولی میشوند[ .]11،6این میدانها بهدلیل دارا ب„„ودن ان„„رژی ب„„اال مث„„ل پرتوه„„ای یون„„یزان از طریق رادیکاله„„ای آزاد
اثرات تخریبی خود را ایجاد می کنند []17،5
گیاه بوم„„ادران یا بوم„„ادران ن„„وع کوت„„اه دش„„تی ب„„ا ن„„ام علمی ، Achillea wilhelmsii C.Kochاز ت„„یره Asteraceaeمی
باشد.عصاره الکلی سرشاخه های گلدار این گیاه ،ک„„اهش دهن„„ده ت„„ری گلیس„„یرید و چ„„ربی خ„„ون و همچ„„نین فش„„ار سیس„„تولی و
دیاستولی خون است ] .[1عصاره آبی – الکلی آن اثر مهاری بر ترشح اسید معده از طریق مهار عصب واگ معده دارد ].[2
عصاره آبی این گیاه تحریک کننده ایمنی هومورال و سلوالر می باشد ] .[ 7همچنین در مطالعاتی که صورت گرفته مشخص
شده است که میزان ترکیبات فنلی و تارتاریک استر در برگهای این گیاه بیشتر از گلهای آن اس„„ت ] .[4سرش„„اخه ه„„ای گل„„دار
این گیاه سرشار از فالونوئید ( )flavonoidو ســزکوئی ترپـــن الکتـــون ( )sesquiterpen lactoneاست ] [5و گ„„رده ه„„ای این
گیاه به شدت آلرژی زا می باشد [ .]3واریته های مختلف آن در مناطق سمیرم اصفهان ،مازندران ،کازرون ف„„ارس و کرم„„ان
از حیث ترکیبات شیمیایی موجود در اسانس مطالعه شده که در بررسی های انجام گرفته مشخص ش„„ده ک„„ه ترکیب„„ات ک„„امفر (
1 ،)camphorو 8سینئول ( ،)cineol 1,8بورنئول ( )borneolو میرتنول ( )myrtenolترکیبات عمده اس„„انس ب„„رگ هس„„تند ]
.[ 2،5،7،12تحقیقات انجام گرفته توس„ط آزاد بخت و همک„اران در س„ال 2003مش„خص نمودک„ه 9/89در ص„د ،ترکیب„ات
مختل„„ف در اس„„انس ب„„رگ این گیاه وج„„ود داردک„„ه هم„„ه از ترکیب„„ات مونوترپنوییدی هس„„تند ،از جمل„„ه ک„„امفر 1 ،و 8
سینئول،بورنئول و میرتنول که به نظر می رسد بیشترین خاصیت ضد میکروبی اسانس برگ بومادران مرهون کامفر 1 ،و
8سینئول و بورنئول باشد] .[5شواهد موجود موید خاصیت ضد میکروبی ترکیب„„ات ک„„امفر] 1 ،[ 8،9،16و 8س„„ینئول و
بورنئول[]1،16می باشد.
رادیکال های آزاد حاصل از میدانهای الکترومغناطیسی با حمله بر پپتیدها وشکستن اتص„االت پروتئینی ب„اعث آس„یب غش„ای
سلولی و تغییرات یون کلسیم در داخل سلول می شوند[.]17،6
3 2 1
اهداف تحقيق (شامل اهداف علمي ،كاربردي ،و ضرورتهاي خاص انجام تحقيق) .8
MBC -1بررسی خواص ضد میکروبی اسانس گلهای گیاه ) Achillea wilhelmsii C.Kochتعیین MICو (
MBC )تعیین MICو( Achillea wilhelmsii C.Koch 2بررسی خواص ضد میکروبی اسانس برگهای گیاه
5
گیاهAchillea wilhelmsii -3بررسی اثر میدانهای الترومغناطیسی برخواص ضدمیکروبی اسانس و ترکیبات ترپنی
C.Koch
در صورت داشتن هدف كاربردي بيان نام بهرهوران (اعم از مؤسسات آموزشي و اجرايي و غيره) .9
استفاده از اسانس این گیاه در صورت داشتن خواص ضد میکروبی در صنایع داروسازی.
.10جنبهی نوآوري و جديد بودن تحقيق در چيست؟ (اين قسمت توسط استاد راهنما تكميل شود)
تاکنون مطالعات زیادی در زمینه خواص ضد میکروبی انواع گیاهان درایران و خارج از کشورانجام شده است .اماگیاه
انتخابی به دلیل اینکه از گیاهان بومی ایران است به طورکلی تحقیقات کمی در مورد آن انجام گرفته است .بنابراین در تحقیق
حاضر در نظر است که ابتدا خواص ضد میکروبی اسانس گل و برگهای این گیاه را بررسی کنیم وسپس اثر دکلهای فشار
قوی را به عنوان یک استرس محیطی برخاصیت ضدمیکروبی و ترکیبات موثره این گیاه ارزیابی کنیم.
امضا
.11روش كار
الف .نوع روش تحقيق:
گیاه بومادران از مناطق اطراف شهر اصفهان ( 100کیلومتری اص„„فهان – ش„„هرکرد) در اواخ„„ر اردیبهش„„ت م„„اه جم„„ع آوری
خواهد شد ،تأیید نام علمی این گیاه در هرباریوم گیاه شناسی دانشگاه آزاد اسالمی واحد فالورجان انجام خواهد گردید .خش„„ک
نمودن برگها در سایه صورت می گیرد ،سپس برگهای خشک شده با آسیاب پودر شده و در فریزر نگهداری میگردد.
جهت اسانس گیری از روش تقطیر با آب ( )Hydrodistillationو دستگاه کلونجر به مدت 3ساعت استفاده میشود .به طوریکه
300گرم برگ وگل گیاه خشک شده به همراه 1000میلی لیتر آب مقطر در دستگاه کلونجر ح„„رارت داده می ش„„ودو اس„„انس
جمع آوری شده( )μl80پس از رطوبت زدایی به وسیله سولفات سدیم در شیشه های ک„„در و در بس„„ته و دور از ن„„ور نگه„„داری
می شود] .[9 ،10میکروارگانیـــزم های مـــورد آزمایـــش شامل Bacillus cereus ATCC 1247 ، Staphylococcus aureus
ATCC 25923 ،Pseudomonas aeroginosa ATCC 27853 ، Escherchia coli ATCC 25922می باش„„د ک„„ه از س„„ازمان
پژوهشهای علمی و صنعتی ایران تهیه می گردد ] .[14تراکم مایه تلقیحی از باکتری یکی از مهمترین پارامتره„„ایی می باش„„د
که بر نتیجه این تحقیق اثر می گذارد ب„„ه همین دلیل باید ت„„راکم مایه تلقیحی ک„„امًال اس„„تاندارد باش„„د ب„„دین منظ„„ور ب„„رای تهیه
سوسپانسیون میکروبی از روش Colony Suspension Directاستفاده می شود .به طوریکه از باکتری تازه کش„„ت ش„„ده (-24
6
18ساعته) چند کلنی برداشت می شود و به محیط ) MHB (Muller Hinton Brothمنتقل می شود ،سپس جهت استاندارد کردن
کدورت سوسپانسیون میکروبی تهیه شده ،از لوله شماره 5/0مک فارلند که معادل 5/1 × 108میکروارگانیزم در هر میلی
لیتر نرمال سالین یا آب مقط„ر اس„ت اس„تفاده می گ„ردد μl 100 .از این سوسپانس„یون ک„ه ح„اوی cfu/ml 107×5/1می باش„د،
برداشت شده و در 10میلی لیتر آب مقطر استریل پراکنده می شود تا به تراکم معادل cfu/ml 106×5/1برس„„یم .ب„„ا اس„„تفاده از
لولهاي ،حداقل غلظت مهاركنندگي ( )Inhibitoryرشد ( )MICو حداقل غلظت كشندگي ( )MBCتع„„یین میش„„ود[ روش رقت
ولههاي كنترل مثبت (محيط كشت حاوي باكتري ،بدون عصاره) وكنترل منفي (محيط كش„„ت ب„„دون ب„„اكتري) ن„„يز تهي„„ه .]14ل
میشوند ..كمترين رقت از عصاره كه در آن كدورتي مشاهده نگردد ،به عنوان ح„داقل غلظت مهاركنن„دگي ( )MICدر نظ„ر
گرفته میشود.
عصارهها ،)MBCاز تمامي لوله هايي كه در آن ها ع„دم رش„د مش„اهده ش„ود ،در س„طح .براي تعيين حداقل غلظت كشندگي
محيط كشت مولر هينتون آگار كشت داده می شود .محيطهاي كشت تلقيح شده به مدت 24ساعت در دماي ( 37)C°انكوب„„ه می
لولهاي كه حاوي كم„„ترين غلظت عص„„اره باش„„دو در آن رش„„د ب„„اكتري مش„„اهده نگ„„ردد بهعن„„وان ()MBC
شود پليت مربوط به
میشود.
درنظرگرفته
جهت اثبات خاصیت ضد میکروبی اسانس از روش تهیه رقت در آگار استفاده می شود .به طوریکه غلظت 1000میکروگرم
بر میلی لیتر اسانس در DMSOدر محیط ( MHAدر دمای )oC48تهیه شود .پلیت ها در دمای oC25به مدت 30دقیقه ق„„رار
می گیرند و نهایتًا cfu/ml 105از سوسپانسیون میکروبی تهیه می شود در جای مخصوص خود تلقیح می ش„ود .در کن„„ار ه„„ر
یک از پلیت های فوق از یک پلیت به عنوان شاهد که تنها ح„اوی DMSOو محیط کش„ت ب„دون اس„انس ب„ود ن„یز اس„تفاده می
شود .نهایتًا پلیت ها به مدت 24ساعت در دمای oC37قرارمی گیرند و پس از آن از نظر رشد و یا عدم رشد باکتریها ،مورد
بررسی قرارمی گیرن„د ] .[14 ،19آزم„ون ه„ای بررس„ی اث„رات ض„د میک„روبی در آزمایش„گاه دانش„گاه آزاد اس„المی واح„د
فالورجان انجام می گیرد و هر آزمون 4مرتبه تکرار می شود.
پ .ابزار گردآوري اطالعات (پرسشنامه ،مصاحبه ،مشاهده ،آزمون ،فيش ،جدول ،نمونهبرداري ،تجهيزات آزمايشگاهي و بانكهاي
اطالعاتي و شبكههاي كامپيوتري و ماهوارهاي و غيره):
-1بانكهاي اطالعاتي و شبكههاي كامپيوتري
-2نمونه برداری و جمعآوری گل از مراتع و مناطق طبيعي اطراف شهر اصفهان
-3استفاده از تجهيزات آزمايشگاهي
.12جدول زمانبندي مراحل انجام دادن تحقيق از زمان تصويب تا دفاع نهايي
تا تاريخ از تاريخ تاريخ تصويب
1/2/90 1/12/89 مطالعات كتابخانهاي
7
1/7/90 1/2/90 جمعآوري اطالعات
: فهرست منابع و مآخذ (فارسي و غير فارسي) مورد استفاده در پاياننامه بهشرح زير.13
جلد، محل انتشار، مترجم، عنوان كتاب، سال نشر، نام، نام خانوادگي:كتاب
صفحه، شماره، دوره، سال، عنوان نشريه، عنوان مقاله، نام، نام خانوادگي:مقاله
Asgary S,Naderi GH,Sarrafzadegan N,Mohammadifard N,Mostafavi S,Vakili R.Anthypertensive and ]1[
.antihyperlipidemic effect of Achillea wilhelmsii.Drugs Exp Clin Res 2000;26 : 89-93
Afsharypour S,Asgary S,Lockwood GB.Constituents of the essential oil of Achillea wilhelmsii from ]2[
.Iran.Planta Med 1996;62(1):77-8
Amjad L, Majd A, Fallahian F, Saadatmand S. Comparative study of allergenicity of mature and immature ]3[
pollen grains of Achillea wilhelmsii. Arak Univer of Med Scien J 2008; 11(2): 1-9.[Farsi]
Azadbakht M,Semnani K,Khansuri N.The essential oils composition of Achillea wilhelmsii C.Koch leaves ]4[
.and flowers.J Med Plan2003;2: 55-59
Bohrert H, Nelson D, and Jenson R, “Adaptation to environmental stresses,” The plant cell. 1995. 7: 1099 – ]5[
.1111
Dattilo A, Bracchini L, Loiselle S, Ovidi E, Tiezzi A, and Rossi C, “Morphological anomalies in pollen ]6[
tubes of Actinidia deliciosa (Kiwi) exposed to 50 Hz magnetic field,” Bioelectromagnetics. 2005. 26 (2): 153 –
.156
Dokhani S,Cottrell T,Khajeddin J,Mazza G.Analysis of aroma and phenolic components of selected ]7[
.Achillea species.Plan Food Hum Nut 2005;6(2): 55-62
Duraipandiyan V,Ayyanar M,Ignacimuthu S.Antimicrobial activity of some ethnomedicinal plants used by ]8[
.Paliyar tribe from Tamil Nadu, India.BMC Complemen Altern Med 2006;6:35
Ejechi BO,Akpomedye DE.Activity of essential oil and phenolic acid extracts of pepper against some food ]9[
.borne microorganisms.African J Biotech 2005;4(3):258-267
Germana MA, Chiancone B, Melati MR, and Firetto A, “Preliminary results on the effect of magnetic ]10[
.fields on anther culture and pollen germination of Citrus clementinahort,” Inter. Soci. For Hort. Scie. 2007
Hanafy M, Mohamed H, and Bddelhady E, “Effect of low frequency electric field on growth ]11[
.characteristics and protein molecular structure of Wheat plant,” Romanian J. Biophys. 2006. 16 (4): 253 – 271
Javidnia K,Miri R,Sadeghpour H.Composition of the volatile oil of Achillea wilhelmsii C.Koch from ]12[
.Iran.DARU 2004;12(2):63- 66
.Laberge M, “Intrinsic protein electric fields,” Biochim. Biophys. Acta. 1998. 18: 20 – 30 ]13[
Sumorek A, pietrzyk W, “Influence of electric field on the speed of converctire removal of water from ]15[
8
[Sokmen A,Sokmen M,Daferera D,Polissiou M,Candan F,Unlu M,Akpulat HA.The in vitro antioxidant ]16
and antimicrobial activities of the essential oil and methanol extracts of Achillea biebersteini Afan.
.(Asteraceae).Phyto Res 2004;18(6):451-456
[17] Walter RJ, Shitil A, Roninson RB, Halian D, “60 Hz electric fields inhibit protein kinase C activity and
multidrug resistance gene (MDRI) up – regulation,” Rad. Res. Mar. 1997. 147 (3): 369 – 378.
جمع
9
ب .2هزينههاي مواد و وسايل (وسايلي كه صرفًا از محل اعتبار طرح تحقيق بايد خريداري شوند)
قيمت كل قيمت واحد مصرفي –
ساخت داخل يا مقدار مورد
شركت سازنده غير نام ماده يا وسيله
خارج نياز
ارزي ريالي ارزي ريالي مصرفي
10
ب .3هزينههاي متفرقه
كل هزينه به لاير معادل ريالي بودجه ارزي ارزي ريالي شرح هزينه رديف
100000
(1000000لایر) هزينهی تايپ 1
(0لایر)
100000
(1000000لایر) هزينهی تكثير 2
(0لایر)
هزينهی صحافي 3
هزينهی عكس و اساليد 4
هزينهی طراحي ،خطاطي، 5
نقاشي ،كارتوگرافي 6
هزينهی خدمات كامپيوتري 7
4000000
(4000000لایر) هزينههاي ديگر 8
(لایر)
جمع(6000000لایر)
جمع كل هزينهها
هزينهی كل به لاير ارزي ريالي نوع هزينه رديف
(800000لایر) (800000لایر) پرسنلي 1
(7275000لایر)
7275000 مواد و وسايل 2
(لایر)
(300000لایر) (300000لایر) مسافرت 3
(6000000لایر) (6000000لایر) متفرقه 4
(14375000لایر) جمع كل
.15تأييدات
الف:
11
ارتباط داشتن موضوع تحقيق با رشتة تحصيلي دانشجو: .1
ارتباط ندارد ارتباط فرعي دارد ارتباط دارد .2
جديد بودن موضوع: .3
خير در ايران بلي بلي
اهداف بنيادي و كاربردي: .4
مطلوب نيست قابل دسترسي نيست قابل دسترسي است
تعريف مسأله: .5
رسا نيست رسا است
فرضيات: .6
درست تدوين نشده و ناقص است درست تدوين شده است
روش تحقيق دانشجو: .7
مناسب نيست مناسب است
محتوا و چهارچوب طرح: .8
از انسجام برخوردار نيست از انسجام برخوردار است
ج
امضا نوع رأي سمت و تخصص نام و نام خانوادگي رديف
1
2
3
4
5
12
موضوع و طرح تحقيق
آقاي
دانشجوي مقطع: خانم پاياننامهی
دانشجوي مقطع:
كه به تصويب كميتة تخصصي مربوط رسيده بود ،در جلسهی مورخ: رشتهی
گرفت
نفر) قرار شوراي پژوهشي دانشگاه مطرح شد و پس از بحث و تبادل نظر مورد تصويب اكثريت اعضا (تعداد
نگرفت
نوع رأي
توضيحات امضا نام و نام خانوادگي رديف
(موافق يا مخالف)
1
2
3
4
5
6
7
8
13