固定化酶

酶
酶是一類大分子生物催化劑，能加快化學反應的速度。由酶催化的
反應中，反應物稱爲受質，生成的物質稱爲產物。和所有的催化劑
一樣，酶通過降低反應活化能加快化學反應的速率。從化學原理上
講，酶和其它所有催化劑一樣，反應不會使其物質量發生變化，也
不能改變化學平衡。酶和催化劑的不同之處在於，它們的專一性要
強得多。一些分子可以影響酶的活性。如酶抑制劑能降低酶的活性，
酶活化劑能提高酶的活性。許多藥物及毒物是酶的抑制劑。當超出
或小於適宜的溫度和 pH 值後，酶的活性也會顯著下降。
固定化酶
(1)酶可回收重複使用，較為經濟，而且不會污染樣本。
(2)酶的穩定性提高，可能較耐熱或極端的 pH 。
(3)固相與液相的分離方便，使用上速度快而分離完全，有助於自
動化。
(4)許多酵素是附在細胞膜上，固定化酵素可 模擬 細胞內酵素的
實際環境。
固定化酶的商業價值
• 便利性：溶解度較低的蛋白質，藉由此方法可以更簡便的操作。

固定後的成品通常僅含有溶劑及產物。

• 經濟性：固定後的酵素具可再生性。這個應用特別常應用於利用
乳醣酶製造無乳糖牛乳。

• 穩定性：此法生成的酵素的溫度及化學耐受性均較游離酵素高。
 固定化酶的歷史
1916 年 Nelson 與 Griffin 發現炭末的蔗糖酶具有活性

1953 年 Hofer 與 Schleith 將聚胺基聚苯乙烯樹脂重氮化，並與澱粉酶、蛋白酶結合，成為最早的固定化酶

1969 年 千畑一郎利用固定化氨基胺酶與 DL- 氨基酸，生產 L- 氨基酸，是世界上固定化酶大規模應用的首例

1971 年 第一屆國際酶工程會議上，正式建議使用固定化酶（ immobilized enzyme ）這個名稱
吸附法
利用固體吸附劑將酶吸附在表面 :

1. 物理吸附 : 通過氫鍵、疏水作用和凡德瓦力，將酶吸
附在有機或無機的難溶載體上

2. 離子交換吸附 : 將酶與含有離子交換基的難溶載體結
合
而達到固定化
吸附法的優缺點
優點 缺點
• 操作簡單 • 酶的量不易掌握
• 載體選擇性高 • 酶的活性不一定平等
• 使用過程可重新活化酶 • 酶與載體的結合性弱
• 載體可再生
• 酶的構型不易改變
包埋法
將酶包埋在多孔載體使酶固定化的方法

1. 凝膠包埋 : 將酶包覆在細微的網格中

2. 膠囊包埋 : 將酶包覆在高分子聚合物製成的小球中
包埋法的優缺點
優點 : 缺點 :
• 包埋 - 未發生化學反應 • 無法包埋大分子
• 固定化酶的活性較高 • 造成擴散阻力增加
• 適用於多數酶甚至微生物細胞
共價結合法
共價結合法是酶分子側鏈基
團與固定化載體表面的重組
團發生化學反應，形成共價
鍵，通過共價鍵的作用實現
酶分子固定的方法
共價結合法的優缺點
優點 缺點
• 酶與載體結合牢固 • 反應劇烈，酶易失去活性
• 操作手續複雜
交聯法
交聯法利用雙功能或多功能試劑，使酶蛋白分子間發生交
聯，達到固定化酶的目的。戊二醛是最常用的交聯劑，作
為應用廣泛的雙功能試劑，戊二醛可以和 游離酶分子側
鏈氨基形成吸附鹼，使酶分子間發生交聯，實現對酶的固
定
交聯法的優缺點
優點 缺點
• 酶與載體結合牢固 • 反應激烈，易失活性
• 製成的固定化酶顆粒小，使用不便
固定化酶的連續操作

成本

反應器

轉化率
固定化酶的連續操作
• 酶的種類

• 載體的種類

• 固定化的方法
Batch reactor-stirred tank
• 酶易附著在葉片上

• 剪切力大

• 成本高

• 人力成本高。產量小，多用於實驗室
 Continuous Reactor

酶需求量小 vs 酶需求量大
混合不均 vs 混合均勻
體積小 vs 體積大

Plug Flow Reactor CSTR

未來展望
• 發展更有效的製作方法，提高反應器的穩定性和催化性

• 開發新的載體材料

• 結合 5G 與 AI ，達到全自動化的生產
參考文炫
• A Review on Methods, Application and Properties of Immobilized
Enzyme ， 2012 。
• Industrial applications of immobilized enzymes—A review ， 2019 。
• 固定化胰蛋白酶反應器於蛋白質線上消化之應用， 2016 。
• 利用亞羅亞氏酵母菌一步完成油體蛋白–有機磷水解酶融合蛋白
的固定化在油體上， 2015 。
• 生物酶固定化方法的研究新進展， 2013 。
• 固定化酶應用研究進展， 2009 。