Staphylococcus genus

Burián Katalin 2023.

A staphylococcusok morfológiája

Szőlőfürt elrendeződés, gömb alak

Méret: 0.5-1.5 mm
Gram-pozitív
45 faj, 24 alfaj
Gram festett staphylococcus
 Kataláz teszt
- A baktériumok indentifikálása
biokémiai próbákkal történhet.
- A két nagy coccus család
elkülönítésére a kataláz próba
szolgál.

A staphylococcusok kataláz pozitívak (buborék).

A streptococcusok kataláz negatívak.
Koaguláz próba
A staphylococcus genuson belül a koaguláz próbával tovább azonosíthatunk.
Kötött koaguláz (clumping faktor) – tárgylemez
Szabad koaguláz – cső koaguláció
.

Tárgylemezen végzett koaguláz teszt

Staphylococcus aureus koaguláz pozitív

S. epidermidis
Cső koagulációs próba S. saprophyticus koaguláz negatív
S. haemolyticus
S. lugdunensis
Fontosabb humán pathogén staphylococcusok

Staphylococcus aureus

KNS(CNS) (koaguláz negatív staphylococcus)

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus

Staphylococcus haemolyticus

Staphylococcus lugdunensis
 Staphylococcus aureus tenyésztése

Fakultatív anaerob
 aerob körülmény esetén: tiamin és
nikotinsav
 anaerob esetén: uracilt is igényel
 szaporodás: 37 °C optimális, de 10-
42°C-on is!
 jól tűri a hiperozmolaritást (10% só)
 aranysárga pigmentet termelhet
(szobahőmérsékleten a legkifejezettebb)
 folyékony táptalajban vagy anaerob
körülmények között nem termel
Staphylococcus aureus véres agaron

Béta hemolízist mutat

Mannit erjesztés és más biokémiai aktivitás

 A szénhidrátokat nagyrészt
fermentálja (mannit!).
 A cukrok bontása során
savat termel, gázt nem.
 Ureáz pozitív.
 A zselatint tölcsérszerűen
folyósítja (zselatináz).
A S. aureus előfordulása az átlagos populációban és a nasalis
hordozókban
 A staphylococcusok ellenálló képessége
 Relatíve nagy rezisztenciával bírnak.

 Gennyben, váladékokban heteken át életképesek maradnak.

 Kvaterner ammónium bázisok hatástalanok ellenük.

 Etilalkohol és aceton nem pusztítja el.

 Hővel (megfelelő behatási idő), jód és klór tartalmú vegyületekkel elpusztíthatók.

 Só tűrés: 10 % só koncentrációt elviselnek.

 Staphylococcus aureus virulencia faktorai

Gordon R J , Lowy F D Clin Infect Dis. 2008;46:S350-S359

I. Sejtfalhoz kötött virulencia faktorok
II. Extracelluláris enzimek
III. Citolitikus toxinok
IV. Szuperantigének
V. Pigment
A Staphylococcus aureus virulencia faktorai I.
I. Sejtfalhoz kötött virulencia faktorok

1. Nyák, tok
12-féle szerotípus, 5,8-as okoz főleg fertőzést (75%)
monoszacharid, poliszacharid
gátolja az opszonizációt és a fagocitózist
a nyák kötődhet idegen anyagokhoz pl. katéterhez

2. Peptidoglikán
a baktérium falának 50%-a
N-acetil glükóz-amin, N-acetil muraminsav, pentaglicin, PBP
endotoxin szerű aktivitást mutat (pirogén, fokozza az IL-1 felszabadulást)
ozmotikus stabilitás
leukocita kemoatraktáns, PAMP, komplement gátló, stimulálja a leukocyta
aggregációt

3. Teikolsav
fajspecifikus
adhézióban fontos: fibronektinhez kötődik
 A Staphylococcus aureus virulencia faktorai II.
I. Sejtfalhoz kötött virulencia faktorok
4. Protein A
a peptidoglikánhoz vagy a citoplazma membránhoz kötődik
megköti az IgG1, IgG2 és IgG4 Fc részét
identifikálásra alkalmas
szerológiai tesztekben nem specifikus, hordozó (koagglutináció)

5. Koaguláz
clumping faktor (kötött koaguláz)
hozzákötődik a fibrinogénhez és fibrinné alakítja
adhezinként szolgál, fontos biokémiai teszt
(clumping factor A – tefibazumab, monoklonális ellenanyag súlyos cystás
fibrosis esetén)

6. Peptidkötő receptorok (MSCRAMMs, microbial surface components

recognising adhesive matrix molecules)
kollagén, vitronektin, fibronektin, elasztin kötő receptorok
a kolonizációban fontos szerep
 A Staphylococcus aureus virulencia faktorai III.
Extracelluláris enzimek

1. Koaguláz
- a coagulase-reacting faktorral reagálva staphylotrombin (trombinszerű)
keletkezik, ami katalizálja a fibrinogén átalakulását fibrinné
- lokalizálja a fertőzést és véd a fagocitózistól

2. Hialuronidáz
a kötőszövetben a hialuronsavat bontja, segíti a baktérium terjedését

3. Fibrinolizin=Staphylokináz
fibrint oldja

4. Lipáz
lipideket hidrolizál, segíti a baktérium túlélését a test seborrheás területein

5. Nukleázok
hőstabil, bontja a viszkózus DNS-t, RNS-t bont (diagnosztika!)
 A Staphylococcus aureus virulencia faktorai IV.

I. Citolitikus toxinok
I/1. Alfa toxin (plazmidon vagy kromoszómán kódolt)

vvt-hez vagy egyéb humánsejtekhez (erek simaizom sejtjei, májsejt, leukocyta,

rlemezke) kötődik és lizálja azokat
hét monomer - pórust alkot (1-2 nm)
onpermeabilitás megváltozik
ozmotikus lízis (megnő a K+ kiáramlás, nő a Na+ és Ca2+ beáramlás)
szerepe fontos súlyos szeptikémiában
A Staphylococcus aureus virulencia faktorai V.
Béta toxin/szfingomielináz
az erythrocyták, leukocyták, fibroblastsejtek valamint a macrophágok
szfingomielinjét károsítja

Delta toxin
a legtöbb S. aureus törzs termeli
megtalálható még S. epidermidis és S. hemolyticus törzseknél is
kevésbé specifikus, sokféle emlős sejtet, erythrocytákat pusztít
detergens szerű hatás

Gamma toxin
hemolitikus hatású, két komponensből áll, csaknem minden S. aureus termeli
atopiás dermatitisben hízósejt degranulácót okoz
Panton-Valentine leukocidin
pórusképző toxin
nem toxikus az erythrocytára, viszont a leukocytára, macrophágra,
monocytára igen, (nekrotizáló pneumonia kialakulásában fontos szerepe van)
a közösségben szerzett MRSA mindegyike termeli a PV toxint!!
a korházi MRSA törzsek csak 5%-a
 A PVL okozta szöveti necrosis
mechanizmusa

A S. aureus által termelt LukS-PV és LukF-PV (a PVL két komponense) heptamereket formál a PMN
sejtek membránján. A magas PVL koncentráció a PMN sejtek lízisét okozza, míg alacsony
koncentrációban a PMN sejtek mitokondriális membránjához kötődve apoptózishoz vezet. A szöveti
nekrózist a lizált PMN sejtekből felszabaduló ROS, valamint a degranuláció során kiáramló anyagok által
kiváltott gyulladásos válasz okozza. A PVL-nek nincs direkt nekrotizáló hatása az epithel sejtekre.
A Staphylococcus aureus virulencia faktorai VI.
IV. Szuperantigének
IV/1. Enterotoxinok

Több típus: 18-féle (A-R), ( az A típus okozza az ételmérgezések többségét, a C és D

tejtermék eredetű toxikózist)
a B típus viszont pseudomembranosus enterocolitist okozhat
A S. aureus törzsek 30-50%-a termel enterotoxint
Közös jellemzőjük
hőstabilak: 100 °C-on 30 percig
(az étel felmelegítése nem pusztítja el a toxint csak a baktériumot)
ellenállnak a gyomor és bélenzimeknek
szuperantigének (IL-1, és TNF-a termeléshez vezetnek)
a gyomorban található hízósejteket degranulálják és a felszabaduló szerotonin
direkt ingerlik a N. vagust
NEM infekció!
toxin mediálta ételmérgezés

Hányás, hasmenés
Az enterotoxin hatása…
 A Staphylococcus aureus virulencia faktorai VII.

IV/2. Toxicus shock syndroma toxin-1 (TSST-1)

 Szerkezetileg az enterotoxinokhoz hasonló.

 Hő és proteolízis rezisztens.
 In vitro a toxin termeléséhez oxigén és neutrális pH
szükséges.
 In vivo oxigén buborékok találhatók a tamponokban.
 A TSST-1 szuperantigén: endothel károsító hatás, IL-
1 és TNF-a felszabadulás.
 Nem specifikus T sejt aktiváció, hipovolémiás shock,
sokszervi elégtelenség.
A TSST hatásmechanizmusa
 A Staphylococcus aureus virulencia faktorai VIII.

IV/3. Exfoliatív toxin/SSSS toxin

- a törzsek 5-10%-a termeli

- két forma: ETA (fág), ETB (plazmid) mindkettő előidézheti a
betegséget
- kémiailag: szerin proteázok
- a bőrben a desmoglein-1-hez kötődik,
desmosomát teszi tönkre
- nincs citolitikus vagy hemolitikus hatásuk
- a léziókban nincs jelen gyulladásos sejt vagy
S. aureus
- a toxinok elleni neutralizáló ellenanyag
megjelenésével – gyógyulás

V. Pigment
a S. aureus termel egy sárga színű carotenoid pigmentet a
staphyloxantint, mely inaktiválja a szuperoxid és más ROS
anyagok hatását
 A Staphylococcus aureus által okozott megbetegedések I.

Pyogén kórképek: (kompakt genny)

Bőrfertőzések: folliculitis, furunculus, carbunculus, abcessus
Szemfertőzés: hordeolum
Légúti fertőzések: tonsillitis, pneumonia, empyemia
Csont és mozgásszervi fertőzések: osteomyelitis, arthritis
Húgyúti fertőzések: pyelonephritis, tályog a vese körül
Bacteriaemia, endocarditis
Idegrendszer: meningitis
Posttraumás mélyszöveti fertőzések
Iatrogén és nosocomialis fertőzések: seb, varratgennyedés
Diabeteses láb

Toxin mediálta betegségek

Ételmérgezés
Toxicus shock syndroma
SSSS/ Ritter betegség
Bullosus impetigo
Pseudomembranosus enterocolitis: enterotoxint és leukotoxin termelő törzsek
(antibiotikum kezelést követően)
Folliculitis, furunculus

A szőrtüsző gyulladása.
Carbunculus

Az egymásba olvadó furunculusok carbunculust

alkotnak mely a mélyebb submucosalis rétegbe terjed.
Hidegrázás, láz – szisztematizálódás.
Hordeolum
Paronychia
Osteomyelitis, arthritis

Szisztémás szóródás vagy traumát

követő bakteriális fertőzés.
Brodie tályog
Endocarditis

A mortalitási arány: 50%!

Kezdeti influenzaszerű tünetek után gyors progresszió.
Szívelégtelenség, szeptikus embolizáció
 Ételmérgezés

A toxin íztelen, szagtalan!

Toxicus shock syndroma

 Hirtelen kezdet, hipotenzió, diffúz erythemás kiütések, sokszervi elégtelenség.

 Hatékony terápiát követően hámlások test szerte, talpon, tenyéren is.
 Menstruációkor tampont használó nők körében.
 Sebsérülésből is kiindulhat.
 A tüneteket a TSST és az enterotoxin B és C is okozhatja.
 A betegek felében nem alakul ki ellenanyag – rekurrencia!
 SSSS, Ritter betegség, leforrázott bőr szindróma

 Staphylococcal Scalded Skin Syndrome (SSSS)

 Hirtelen kezdet, száj körüli erythema.
 Két nap alatt ráterjed az egész testre: nagy kiterjedésű bulla, pozitív Nikolsky jel.
 A bullából nem tenyészthető ki a baktérium, nincsenek gyulladásos sejtek, toxin mediálta
kórkép.
 A bőr felső rétege leválik.
Bullosus impetigo (ótvar)

 Az SSSS lokalizált formája.

 Általában speciális S. aureus okozza (71 típusú fág!)
 Negatív Nikolsky jel.
 A baktérium kitenyészthető a bullák bennékéből.
 Főleg gyermekekben fordul elő, nagyon fertőző.
 A staphylococcusok antibiotikumok elleni rezisztenciája

1.b-lactamase átvihető, plazmidon kódolt

hasítja a b lactam gyűrűt
rezisztencia penicillin G, ampicillin, ticarcillin, piperacillin stb. ellen

2. mecA gén (kromoszómális, SCCmecA ) által kódolt protein

független a b lactamase termeléstől
alacsony affinitású penicillinkötő fehérje PBP2
rezisztencia nafcillin, oxacillin, meticillin ellen (MRSA)
12-féle mecA gén, 1,2,3, 6,8 típus HA-MRSA, 4-es típus CA-MRSA
9, 10 típus állatokban (LA-MRSA, 9-es-ben mecC)

3. Emelkedett sejtfal szintézis és megváltozott sejtfal

közepes érzékenység (intermediate) a vancomycinre

4. vanA gén nyerése az enterococcusoktól

vancomycin rezisztencia

5. Plazmid mediálta rezisztencia

tetracyclin, erythromycin, aminoglikozid

6. „Tolerancia”
az antibiotikum gátolja, de nem öli meg a baktériumot
A staphylococcus fertőzések terápiája

Antibiogram készítése!
Oxacillin
Meticillin
Vancomycin

MRSA (meticillin rezisztens S. aureus), MRSE (meticillin rezisztens S. epidermidis),

VISA vancomycin intermediate-reszisztens S. aureus), VRSA (vancomycin
reszisztens S. aureus), VRSE (vancomycin reszisztens S. epidermidis) esetén:
Daptomycin (lipopeptid)
Linezolid (oxazolidin)
Quinupristin/Dalfopristin (streptogramin)
Telitromycin (ketolid)
Teicoplanin (glycopeptid)
5. generációs cefalosporinok közül: ceftobiprol, ceftaroline

Kórházi dolgozók MRSA hordozásának megszüntetése lokális kezeléssel

Mupirocin
Laboratóriumi diagnózis I.
1. A beteg váladékából kenetkésztés.
Gram festés

2. Tenyésztés
A S. aureus húsleves agaron, szobahőmérsékleten, sárga színű pigment termel.
Véres agaron a S. aureus b hemolizál.
Mannit tartalmú só agaron a mannitot bontja.
 Laboratóriumi diagnózis II.
3. Biokémiai próbák
Koaguláz: cső
tárgylemez

A S. aureus koagulálja a citrátos nyúlplazmát

A S. epidermidis nem koagulálja
DNase
A S. aureus termel DNase-
t, ami lebontja a
táptalajhoz adott DNS-t.
(feltisztult zóna látható a
leoltás körül). A kimutatás
HCl-lel történik, mely
kicsapja az intakt DNS-t
S. aureus + S. epidermidis -
Laboratóriumi diagnózis III.
4. mecA gén kimutatása PCR-rel
5. MALDI-TOF
6. S. aureus/ PNA FISH
specifikusan kötődik a rRNS hez
immunfluorescens mikroszkóppal leolvasható

7. Enterotoxin kimutatás
- gél precipitáció
- ELISA

8. Bacteriophag tipizálás
MRSA telepek izolálása CHROMagaron

Az MRSA telepek mályvaszínűek

 A S. aureus ellen kialakuló immunitás

A S. aureus fertőzés elleni védekezésben meghatározó a phagocytosis szerepe

- a phagocytaszám jelentős csökkenésével (szerzett és örökletes neutropeniák, pl.
Chédiak–Higashi betegség)
- vagy a különböző phagocyta funkciók elégtelenségével (krónikus granulomatózis
betegség, leukocyta adhézió deficienciák stb.) járó kórképekben a S.
aureus lágyrész fertőzések gyakran ismétlődnek, könnyen válnak invazívvá.

- A virulenciafaktorok kifejeződése több komplex regulációs kör hatása alatt áll,

melyek közül a legjelentősebb az AGR rendszer. Ez elsősorban a sejtek sűrűségére,
denzitására reagál (ezt hívják quorum-sensing-nek).
- A fertőzés elején, gyorsan szaporodó, még alacsony denzitású populáció esetén a
sejthez kötött adhezinek kifejeződése az erősebb, míg később, magas lokális sejt
sűrűségnél, stacioner fázisban inkább a szekretált faktoroké.
A természetes immunitást elkerülő mechanizmusok
 Epidemiológia

Előfordulás:
 Elsősorban a testhajlati tájékok bőrfelszíne.
 Az orrüreg distális része, a orrnyílások belső oldala.
 A felnőtt népességnek mintegy 20%-a folyamatosan, 60 %-a esetenként hordozza a S. aureus-
t
 Szűrővizsgálatok során elsősorban e területről (esetleg a garat és széklet mellett) kell mintát
venni.
 A bőr- és lágyrészfertőzések jelentős része kontakt úton terjed, melyben a testkontaktus
mellett a különböző tárgyaknak is szerepe van.
 Különösen kórházi körülmények között ezek megakadályozásában nem lehet eléggé
hangsúlyozni a személyzet kéz-dezinficiálásának szerepét,
 A beteggel rendszeresen kapcsolatban kerülő tárgyak, pl. sztetoszkóp dezinficiálást
 Járványtani szempontból kiemelt jelentőséggel bírnak a béta-laktámokkal szemben rezisztens,
ún. MRSA-törzsek.
 Hazánkban a S. aureus izolátumok 20–30%-a MRSA.
KOAGULÁZ NEGATÍV
STAPHYLOCOCCUSOK
Burián Katalin 2023.
Fontosabb humán pathogén staphylococcusok

Staphylococcus aureus

KNS(CNS) (koaguláz negatív staph.)

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus

Staphylococcus haemolyticus

Staphylococcus lugdunensis
Staphylococcus epidermidis
Telep: krétafehér, nem hemolizál
Biokémia:
Koaguláz negatív (KNS)
Bacitracin rezisztens
Novobiocin érzékeny
A bőr normál flórájának fontos tagja

Legyengült, idős, hospitalizált emberekben alakul ki fertőzés

Műanyag felszínekhez nagyfokú affinitás: kanül, branül (slime képzés)

Biofilm képzés
Megbetegedések:
peritonitis
endocarditis
sepsis, húgyúti fertőzések
inplantátumok fertőződése
Terápia: általában multirezisztensek, gyakrabban rendelkeznek mecA génnel (MRSE)
daptomycin, linezolid, quinupristin/dalfopristin, telitromycin, teicoplanin,
ceftobiprol, ceftaroline
A biofilm képződés stádiumai
Staphylococcus saprophyticus
 Telepe fehér, nem mutat hemolízist
 A bőr normál flórájának tagja
 Főleg perianálisan, periurethrálisan és a nemi szerveken kolonizál
 Receptoraival kötődik az uroepithelialis sejtekhez
 Ureáz aktivitást mutat, a képződő ammónia irritálja a hólyag nyálkahártyáját
 d-toxin szerű toxinja a vvt-t hemolizálja – véres vizelet

 Megbetegedés:
cystitis (fiatal nőkben) („honeymoon” cystitis)
hemorrhagiás cystitis

 Azonosítás: novobiocinra rezisztens

 Terápia: trimethoprim-sulfamethoxazol, fluorokinolon

 Staphylococcus lugdunensis
A S. lugdunensis koaguláz-negatív staphylococcus (KNS), (nem rendelkezik szabad koaguláz enzimmel, viszont
clumping faktorral (kötött koaguláz) igen, ez hamis S. aureus diagnózishoz vezethet (ha csak a kötött koagulázt
mutatják ki)
(A species elnevezése Lyonról történt (Lugdunum Lyon latin neve)

Ornithin-decarboxylas aktivitása alapján elkülöníthető a többi KNS staphylococcustól

Pathogenesis
- A S. lugdunensis adhezinjei révén kapcsolódhat a gazda szövetekhez valamint a különböző implantátumokhoz
- Az implantátumok felszínén biofilmet képezve, megvédi a pathogént az antibiotikumoktól és a gazda
immunrendszerétől. A biofilm alkotásában proteinek vesznek részt ellentétben más baktériumokkal melyek poliszacharid
biofilmet termelnek

Betegségek: bőr és lágyrész fertőzések, bacteriaemia, protézis fertőzések

A S. lugdunensis (endocarditis) a natív szívbillentyűk agresszív fertőzését okozza ellentétben más KNS
staphylococussal, melyek főleg a műbillentyűkön okoznak felrakódást és fertőzést
A S. lugdunensis okozta natív billentyű endocarditis jellegzetesen közösségben szerzett, komplikációkkal jár
és rendkívül magas a halálozási aránya

Kezelés: a S. lugdunensis a többi KNS között egyedülállóan érzékeny antimikrobiális szerekre

(cefazolin, daptomycin, linezolid, moxifloxacin, nafcillin, quinupristin-dalfopristin, rifampin, tetracyclin, trimethoprim-
sulfamethoxazole és vancomycin)
 Staphylococcus haemolyticus
Staphylococus haemolyticus: KNS negatív
Megtalálható a bőrön test szerte, különösen az axilla, perineum tájékon és az ingunialis
régiókban
S. haemolyticus a második leggyakrabban kimutatott KNS a vérkeringésből

Virulencia faktorok: tok, biofilm képzés, enterotoxin, hemolysin

A S. haemolyticus fontos nosocomiális fertőzést okozó baktérium

Klinikai manifesztáció: septicemia, peritonitis, meningitis, húgyúti fertőzések, seb, csont és
ízületi gyulladások
A S. haemolyticus ritkán infectív endocarditist is okozhat
A többi KNS-hez hasonlóan nagy affinitást mutat beültetett idegen anyagokhoz (műbillentyű,
cerebrospinális shunt, orthopediai protézis, intravasculáris, húgyúti és dialízis során használt
katéterek)

A S. haemolyticus általában rezisztens methicillinre, gentamicinre és vancomycinre

Daptomycin, teicoplanin hatásos lehet
Köszönöm a kitartó figyelmet!