Kvalitativna analiza proteina

Bojene reakcije na proteine

1. Biuretska reakcija je karakteristična reakcija za sve proteine, jer dokazuje prisustvo

peptidnih veza. Služi nam za određivanje proteina u analiznom uzorku.
Reagensi:

 Rastvor proteina (belance i sojino mleko)

 10% NaOH
 2% CuSO4

Pojava ljubičaste boje ukazuje na nastanak Cu-protein kompleksa (slika 1.)

2. Ksantoproteinsa reakcija-je vrlo specifična. Pomoću nje se mogu oktriti ciklične

aminokiseline u proteinima.
Reagensi:

 rastvor proteina (belance i sojino mleko)

 Konc. HNO3
 NaOH (20%-ni rastvor)

Na slici 2. možemo videti pojavu žute boje usled nitrovanja.

3. Ninhidinska reakcija-je karakteristična za alfa-aminokiseline.

Reagensi:

 Rastvor proteina (belance i sojino mleko)

 Rastvor ninhidrina (0,2%)

Javila se plava boja (slika 3.).

 4. Adamkevičeva reakcija-zasniva se na mogućnosti aminokiseline, triptrofana, da u
reakciji sa aldehidima, u kiseloj sredini, obrazuje obojene kondenzacione proizvode.

Reagensi:

 Rastvor proteina (belance i s.mleko)

 Glacijalna sirćetna kiselina
 Konc. H2SO4

Na dodiru dve tečnosti obrazuje se prsten crvenoljubičaste boje (slika 4.).

5. Sakagučijeva reakcija- reakcija se zasniva na prisustvu guanidinskog ostatka u

molekulu arginina. Reakcija je vrlo osetljiva. U alkalnoj sredini arginin u prisustvu α-
naftola podleže oksidaciji pri čemu se javlja crveno obojenje (slika 5.)

Reagensi:

 Proteinski rastvor (belance i s.mleko)

 5% NaOh
 1% alkoholni rastvor α-naftola
 10% rastvor NaOCl

Slika 1. Slika 2. Slika 3. Slika 4.

Slika 5.