ОДЕСЬКІЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

Кафедра мікробіології, вірусології та імунології

Лекція № 12 Морфологія і ультраструктура вірусів. Культивування вірусів.

Взаємодія вірусу і клітини

Лекцію обговорено на методичної нараді кафедри

“30” січня 2021 р.
Протокол №1
Зав. кафедри, доц._________ Грузевський О.А.

Одеса 2021
 1. Актуальність теми. Обґрунтовування теми.

Актуальність теми обґрунтовується винятковій важливістю вірусології в даний час

2. Цілі лекції:

а) учбові (1 -Ш)
Дати основні знання з питань властивостей вірусів.
б) - виховні:
Показати пріоритет вітчизняних вчених у відкритті вірусів

План і організаційна структура лекції

Цілі Тип лекції, Розподіл

 љ Основні етапи лекції та їх зміст у оснащення часу
рівнях лекції
абстракц
ії
Підготовчий етап 5%
1. Визначення учбових цілей. 2%
2. Забезпечення позитивної мотивації. 3%
Основний етап Таблиці 85 %
План викладу лекційного матеріалу
3 Історичний нарис розвитку вірусології I 10 %
4 Склад і ультраструктура вірусів П 15 %
5 Репродукція вірусів П 20%
6 Кардинальні особливості вірусів П 5%
7 Принципи культивування вірусів П 15 %
8 Природа і походження вірусів I 10 %

Заключний етап 10 %
9 Резюме лекції, загальні висновки. 5%
10 Відповіді лектора на питання. 5%
11 Завдання для самопідготовки студента Список
літератури,
питання
завдання
 ЗМІСТ ЛЕКЦІЙНОГО МАТЕРІАЛУ:

ТЕКСТ ЛЕКЦІЇ

Ми приступаємо до вивчення нової науки - вірусології, науки про віруси. Вірусологія -

самостійна наука сучасного природознавства, займаюча авангардне положення в біології і
медицині, причому роль і значення вірусології неухильно зростає. Це обумовлено поряд
обставин:
1. Вірусні хвороби посідають місце ведучого в інфекційній патології людини.
Застосування антибіотиків дозволяє ефективно вирішувати питання терапії більшості
бактерійних захворювань, тоді як для лікування вірусних хвороб до цих пір немає
достатньо ефективних і нешкідливих препаратів. У міру зниження захворюваності
бактерійними інфекціями питома вага вірусних хвороб неухильно росте. Гостро стоїть
проблема масових вірусних інфекцій - респіраторних і кишкових. Наприклад, всім
відомий грип часто приймає характер масових епідемій і навіть пандемій, при яких
захворює значний відсоток населення земної кулі.
2. Отримала визнання, і все більше підтверджується вирусо-генетична теорія
походження пухлин і лейкозу. Тому ми чекаємо, що на колії розвитку вірусології
лежить розв'язування найважливішої проблеми патології людини - проблеми
канцерогенезу.
3. В даний час з'являються нові або стають гостроактуальними раніше відомі вірусні
захворювання, що постійно ставить перед вірусологією нові задачі. Прикладом може
служити ВІЛ-ІНФЕКЦІЯ.
4. Віруси стали класичною моделлю для молекулярно-біологічних і молекулярно-
генетичних досліджень. З використанням вірусів розв'язуються багато питань
фундаментальних досліджень в біології, віруси широко застосовуються в біотехнології.
5. Вірусологія - фундаментальна наука сучасного природознавства не тільки тому, що
вона збагатить інші науки новими методами і новими уявленнями, але і тому, що
предметом вивчення вірусології є якісно особлива форма організації живої матерії -
віруси, кардинально відмінні від всіх інших живих істот на Землі.

2. ІСТОРИЧНИЙ НАРИС РОЗВИТКУ ВІРУСОЛОГІЇ

Заслуга відкриття вірусів і опису їхніх основних ознак належить російському

вченому - Дмитру Йосиповичу Івановському (1864-1920). Цікаво, що свої дослідження
Івановський початків ще студентом 3 курсу Петербургського університету, коли
виконував курсову роботу на Україні і в Бессарабії. Він вивчав мозаїчну хворобу тютюну
і з'ясував, що це інфекційне захворювання рослин, але збудник його не відноситься ані до
однієї з відомих тоді груп мікроорганізмів. Пізніше, вже будучи дипломованим фахівцем,
Івановський продовжує дослідження в Никітськом ботанічному саду (Крим) і ставить
класичний експеримент: він фільтрує сік листя ураженої рослини через бактерійний
фільтр і доводить, що інфекційна активність соку не зникає.
Івановський вперше описав основні властивості відчиненого ім збудника мозаїчної
хвороби тютюну - малі розміри (фильтруемость), абсолютний паразитизм, здатність
розмножуватися і нагромаджуватися при страхуванні через організм господаря.
Голландський дослідник М.Бейерінк в 1898 р. повторив досліди Івановського, але вважав,
що їм відчинений своєрідний живий розчинений збудник - contagium vivum fluidum. В
полеміці з Бейерінком Івановський довів, що відчинений ним інфекційний агент має
корпускулярну природу. Таким чином, Д.Івановський відзначив головні відмітні ознаки
вірусів, які довгий час служили орієнтиром для доказу вірусної природи збудника.
Надалі були відчинені основні групи вірусів. В 1898 р. Ф.Леффлер і п.Фрош
довели фильтруемость збудника ящура (вірус ящура вражає тварин і людей), в 1911 р.
П.Раус довів фильтруемость збудника пухлинного захворювання - курячої саркоми, в
1915 р. Ф.Творт і в 1917 р. Д'ЕРЕЛЛЬ відчинили фаги - віруси бактерій.
Так були відчинені основні групи вірусів. В даний час відомо більше 500 видів вірусів.
Подальший прогрес в розвитку вірусології пов'язаний з розробкою методів
культивування вірусів. Спочатку вивчення вірусів йшло тільки при зараженні чутливих
організмів. Значний крок вперед - розробка методу культивування вірусів в курячих
ембріонах Вудруффом і Гудпасчуром в 1931 р. Революція у вірусології - розробка методу
культивування вірусів в одношарових культурах кліток Дж.Ендерсом, Т.Уеллером,
Ф.Роббінсом, і в 1948 р. Недаром в 1952 р. це відкриття було удостоєно Нобелівській
премії.
Вже в 30 - х роках були створені перші вірусологічні лабораторії. В даний час на
Україні є Одеський науково-дослідний інститут епідеміології і вірусології ним.
І.І.Мечникова, є вірусологічні лабораторії у ряді НДІ епідеміології, мікробіології,
інфекційних хвороб. Працюють вірусологічні лабораторії практичної охорони здоров'я,
які переважно займаються діагностикою вірусних захворювань.

3. СКЛАД І УЛЬТРАСТРУКТУРА ВІРУСІВ

Перш за все потрібно сказати, що термін «вірус» був введений в наукову

термінологію ще Л.Пастером. Л.Пастер в 1885 р. отримав свою вакцину для профілактики
сказу, хоча й не виявив збудника цього захворювання - до відкриття вірусів залишалися
ще 7 років. Л.Пастер назвав гіпотетичного збудника вірусом сказу, що в перекладі
означає «яд сказу».
Термін «вірус» застосовується для позначення будь-якої стадії розвитку вірусу - і
позаклітинний розташованих інфекційних частинок, і внутріклітинний вірус, що
репродукується. Для позначення вірусної частинки використовують термін «вирион».
По хімічному складу віруси у принципі схожі на інші мікроорганізми, вони мають
нуклеиновые кислоти, білки, деякі - також липиды і вуглеводи.
Віруси містять тільки один тип нуклеиновой кислоти - або ДНК, або РНК.
Відповідно виділяють ДНК-ГЕНОМНИЄ і РНК-ГЕНОМНИЄ віруси. нуклеиновой
кислоти у вирионе може міститися від 1 до 40 %. Звичайно у складі вириона є лише одна
молекула нуклеиновой кислоти, нерідко замкнута в кільце. Вірусні нуклеиновые кислоти
мало чим відрізняються від нуклеиновых кислот эукариотов, вони полягають з тих же
нуклеотидов і мають таку ж структуру. Правда, віруси можуть містити не тільки
двохспіральну, але і односпиральную ДНК. Деякі РНК-ОВИЄ віруси можуть містити
двохспіральну РНК, хоча більшість містять односпиральную РНК. Слід зазначити, що
віруси можуть містити плюс-нитку РНК, здатну виконувати функцію матричній РНК, але
можуть містити і минус-нитевую РНК. Така РНК може виконувати свою генетичну
функцію тільки після синтезу в клітці комплементарной плюс-нитці. Ще одна особливість
нуклеиновых кислот вірусів - у деяких вірусів нуклеиновая кислота володіє
инфекциозностью. Це означає, що якщо виділити з вірусу, наприклад - вірусу
поліомієліту, РНК без домішки білка і ввести її в клітку, то буде розвиватися вірусна
інфекція з утворенням нових вірусних частинок.
Білки містяться у складі вірусів в кількості 50-90 %, вони володіють антигенними
властивостями. Білки входять до складу оболонкових структур вириона. Крім того, є
внутрішні білки, пов'язані з нуклеиновой кислотою. Деякі вірусні білки є ферментами.
Але це не ферменти, забезпечуючі обмін речовин вірусів. Вірусні ферменти беруть участь
в проникненні вірусу в клітку, виході вірусу з клітки, деякі з них необхідні для реплікації
вірусних нуклеиновых кислот.
Ліпоїдов може бути від 0 до 50 %, вуглеводів - 0 - 22 %. Ліпіди і вуглеводи
входять до складу повторної оболонки складних вірусів і не є вирусоспецифическими.
Вони запозичать вірусом у клітки і є тому клітинними.
Відзначимо кардинальну відмінність хімічного складу вірусів - наявність тільки
одного типу нуклеиновой кислоти, ДНК або РНК.
Ультраструктура вірусів - ця будова вирионов. Розміри вирионов різні і
вимірюються в нанометрах. 1 нм складає тисячну частку мікрометра. Найдрібніші типові
віруси (вірус поліомієліту) мають в діаметрі близько 20 нм, найкрупніші (вірус
натуральної віспи) - 200-250 нм. Середні віруси маю розміри 60 - 120 нм. Дрібні віруси
можна побачити тільки в електронному мікроскопі, крупні знаходяться на межі
роздільної здатності світлового мікроскопа і видно в темному полі зору або при
спеціальному забарвленні, збільшуючому розміри частинок. Окремі вірусні частинки,
помітні в світловий мікроскоп, звичайно називаються елементарними тельцями
ПАШЕНА-МОРОЗОВА. Е.Ріллі виявив вірус натуральної віспи при спеціальному
забарвленні, а Морозів запропонував метод сріблення, дозволяючий побачити в
світловому мікроскопі навіть віруси середніх розмірів.
Форма вирионов може бути різною - сферичною, кубоидальной, палочковидной,
сперматозоидоподобной.
Кожний вирион полягає з нуклеиновой кислоти, яка у вірусів складає «нуклеон».
Порівняйте - нуклеус у эукариот, нуклеоид - у прокариот. Нуклеон обов'язково пов'язаний
з первинною білковою оболонкою - капсидом, полягаючим з білкових капсомеров. В
результаті утворюється нуклеопротеид - нуклеокапсид. Прості віруси полягають тільки з
нуклеокапсида (віруси поліомієліту, вірус мозаїчної хвороби тютюну). Складні віруси
мають ще повторну оболонку - суперкапсид, містить крім білків також і липиды і
вуглеводи.
Об'єднання структурних елементів у вирионе може бути різним. Виділяють три
типи симетрії вірусів - спіральний, кубічний і змішаний. Кажучи про симетрію
підкреслюється симетричність вірусних частинок відносно осі.
При спіральному типі симетрії окремі капсомеры, помітні в електронному
мікроскопі, укладаються по ходу спіралі нуклеиновой кислоти так, що нитка проходить
між двома капсомерами, охоплюючими її з усіх боків. В результаті утворюється
палочковидная структура, як наприклад у вірусу тютюнової мозаїки, що має форму
палички. Але не обов'язково віруси із спіральним типом симетрії повинні бути
палочковидными. Наприклад, вірус грипу хоча й має спіральний тип симетрії, але його
нуклеокапсид згущається певним чином і одягається суперкапсидом. В результаті
вирионы грипу мають звичайно сферичну форму.
При кубічному типі симетрії нуклеиновая кислота згущається певним чином в
центрі вириона, а капсомеры покривають нуклеиновую кислоту зовні, утворюючи об'ємну
геометричну фігуру. Частіше всього утворюється фігура икосаэдра, многогранника з
певним співвідношенням числа вершин і граней. Таку форму мають, наприклад, віруси
поліомієліту. В профіль вирион має форму шестикутника. Більш складної форми
аденовирус, також кубічного типу симетрії. З вершин многогранника відходять довгі
нитки, фібри, закінчуються потовщенням.
При змішаному типі симетрії, наприклад - у бактеріофагів, головка з кубічним
типом симетрії має форму икосаэдра, а відросток містить спіральний закручену
скоротливу волокнину.
Деякі віруси мають більш складну будову. Наприклад, вірус натуральної віспи
містить значних розмірів нуклеокапсид із спіральним типом симетрії, а суперкапсид
влаштований складно, в ньому виявляється система трубчастих структур.
Таким чином, віруси влаштовані достатньо складно. Але ми повинні відзначити,
що віруси не мають клітинної організації. Віруси - неклітинні істоти, і ця є однією з їхніх
кардинальних відмінностей від інших організмів.
Декілька слів про стійкість вірусів. Більшість вірусів инактивируется при 56 - 60 °З
протягом 5 - 30 мін. Віруси добре переносять охолоджування, при кімнатній температурі
більшість вірусів швидко инактивируется. Вірус більш, ніж бактерії, стійкі до
ультрафіолетового опромінювання і іонізуючої радіації. Віруси стійкі до гліцерину.
Антибіотики взагалі не діють на віруси. З дезинфікуючих речовин найефективнішим є 5
% лізол, більшість вірусів гине протягом 1 - 5 мін.
4. РЕПРОДУКЦІЯ ВІРУСІВ

Звичайно ми не використовуємо термін «розмноження вірусів», а говоримо

«репродукція», відтворювання вірусів, оскільки спосіб розмноження вірусів кардинально
відрізняється від способу розмноження всіх відомих нам організмів.
Для кращого вивчення механізму репродукції вірусів пропонуємо Вам таблицю,
яка є відсутньою в навчальних посібниках, але допомагає розібратися в цьому складному
процесі.

ЕТАПИ РЕПРОДУКЦІЇ ВІРУСІВ

Початковий Середній Кінцевий

(підготовчий) період (латентний) (заключний)
період період
1. Адсорбція 1. Транскрипція вірусного 1. Збірка
вірусу на клітці генома (синтез інформаційною вирионов
2. Проникнення РНК) 2. Вихід вірусу
вірусу в клітку 2. Трансляція (синтез з клітки
3. Депротєїнізаци вирусспецифических ферментів і
я вірусної вірусних структурних білків)
нуклеиновой 3. Реплікація вірусного генома
кислоти (синтез вірусних нуклеиновых
кислот)

Перший, підготовчий період, починається етапом адсорбції вірусу на клітці.

Процес адсорбції здійснюється за рахунок комплементарного взаємодії
прикріплювальних білків вірусу з клітинними рецепторами. Клітинні рецептори можуть
мати гликопротеидную природу, гликолипидную, протеиновую і липидную природу. Для
кожного вірусу необхідні певні клітинні рецептори.
Вірусні прикріплювальні білки, розташовані на поверхні капсида або
суперкапсида, виконують функцію вірусних рецепторів.
Взаємодія вірусу і клітки починається з неспецифічної адсорбції вириона на
клітинній мембрані, а потім відбувається специфічна взаємодія вірусних і клітинних
рецепторів за принципом комплементарности. Тому процес адсорбції вірусу на клітці є
специфічним процесом. Якщо в організмі немає кліток з рецепторами до певного вірусу,
то інфекція цим видом вірусу в такому організмі неможлива - є видова резистентність. З
іншого боку, якби нам вдалося блокувати цей перший етап взаємодії вірусу з кліткою, то
ми могли б попереджати розвиток вірусної інфекції на самому ранньому етапі.
2-й етап - проникнення вірусу в клітку - може відбуватися двома основними
коліями. Перший, який був описаний раніше, називається виропексисом. Ця колія дуже
нагадує фагоцитоз і є варіантом рецепторного эндоцитоза. Вірусна частинка адсорбується
на клітинній мембрані, в результаті взаємодії рецепторів міняється стан мембрани, і вона
инвагинируется, як би обтікаючи вірусну частинку. Утворюється вакуоль, відмежована
клітинною мембраною, в центрі якої розташовується вірусна частинка.
При проникненні вірусу шляхом злиття мембран відбувається взаємне
проникнення елементів оболонки вірусу і клітинної мембрани. В результаті «серцевина»
вириона виявляється в цитоплазмі зараженої клітки. Цей процес відбувається досить
швидко, тому його важко було зареєструвати на электронограммах.
Депротєїнізация - звільнення вірусного генома від суперкапсида і капсида. Цей
процес називають іноді «роздяганням» вирионов.
Звільнення від оболонок починається нерідко відразу ж після прикріплення
вириона до клітинних рецепторів і продовжується вже всередині цитоплазми клітки. В
цьому приймають участь лизосомальные ферменти. У жодному разі для здійснення
подальшої репродукції необхідна депротеинизация вірусною нуклеиновой, оскільки без
цього вірусний геном не в змозі індукувати відтворювання нових вирионов в зараженій
клітці.
Середній період репродукції називають латентним, прихованим, оскільки після
депротеинизации вірус як би «зникає» з клітки, його неможливо виявити на
электронограммах. В цьому періоді присутність вірусу виявляється тільки по зміні
метаболізму клітки-господаря. Клітка перебудовується під впливом вірусного генома на
біосинтез компонентів вириона - його нуклеиновой кислоти і білків.
Перший етап середнього періоду, транскрипція вірусних нуклеиновых кислот,
переписування генетичної інформації шляхом синтезу інформаційною РНК - необхідний
процес для початку синтезу вірусних компонентів. Вона відбувається по-різному залежно
від типу нуклеиновой кислоти.
Вірусна двунитевая ДНК транскрибируется так само, як і клітинна за допомогою
ДНК-залежної РНК-ПОЛІМЕРАЗИ. Якщо цей процес здійснюється в ядрі клітки (у
аденовирусов), то використається клітинна полимераза. Якщо ж в цитоплазмі (вірус
віспи) - то за допомогою РНК-ПОЛІМЕРАЗИ, проникаючою в клітку у складі вірусу.
Віруси, що РНК-містять, можуть містити плюс-нитевую РНК, в цьому випадку
вона самостійно виконує функцію інформаційній РНК. При репродукції таких вірусів
(пикорнавирусов, тогавирусов) немає необхідності виділяти транскрипцію яка
самостійного етапу.
Якщо ж РНК є минус-нитевой (у вірусів грипу, кору, сказу), спочатку повинна
синтезуватися інформаційна РНК на матриці вірусною РНК за допомогою спеціального
ферменту - РНК-залежною РНК-ПОЛІМЕРАЗИ, яка входить до складу вирионов і
проникає в клітку разом з вірусною РНК. Такий же фермент входить і до складу вірусів,
що містять двунитевую РНК (реовирусы).
Регуляція процесу транскрипції здійснюється шляхом послідовного перезапису
інформації з «ранніх» і «пізніх» генів. В «ранніх» генах записана інформація про синтез
ферментів, необхідних для транскрипції генів і подальшої їхньої реплікації. В «пізніх» -
інформація для синтезу оболонкових білків вірусу.
Трансляція - синтез вірусних білків. Цей процес повністю аналогічний відомій
схемі біосинтезу білка. Бере участь вирусспецифическая інформаційна РНК, клітинні
транспортні РНК, рибосомы, митохондрии, амінокислоти. Спочатку синтезуються білки-
ферменти, необхідні для процесу транскрипції, а також для часткового або повного
придушення метаболізму зараженої клітки. Деякі вирусспецифические білки є
структурними і включаються у вирион (наприклад - РНК-ПОЛІМЕРАЗА), інші -
неструктурними, які виявляються тільки в інфікованій клітці і необхідні для одного з
процесів репродукції вирионов.
Пізніше починається синтез вірусних структурних білків - компонентів капсида і
суперкапсида.
Після синтезу вірусних білків на рибосомах може відбуватися їх
посттрансляционная модифікація, в результаті якої вірусні білки «дозрівають}rdblquote і
стають функціонально активними. Клітинні ферменти можуть здійснювати
фосфорилирование, сульфує, метилирование, ацилирование і інші біохімічні
перетворення вірусних білків. Істотне значення має процес протеолитического наріжуть
вірусних білків з крупномолекулярних білків-попередників.
Реплікація вірусного генома - синтез молекул вірусних нуклеиновых кислот,
відтворювання вірусної генетичної інформації.
Реплікація вірусною двунитевой ДНК відбувається за допомогою клітинної ДНК-
ПОЛІМЕРАЗИ по полуконсервативному типу так само, як і реплікація клітинною ДНК.
Однонітевая ДНК реплицируется через проміжну репликативную двунитевую форму.
В клітці немає ферментів, здатних здійснювати реплікацію РНК. Тому такий
процес завжди здійснюється вирусспецифическими ферментами, інформація про синтез
яких закодована у вірусному геноме. При реплікації однонитчатых РНК-ВИХ геномов
спочатку синтезується нитка РНК, комплементарная вірусною, а потім ця щойноосвічена
нитка РНК стає матрицею для синтезу копій генома. При цьому, на відміну від процесу
транскрипції, при якому синтезуються часто лише відносно короткі ланцюжки РНК, при
реплікації відразу утворюється повна нитка РНК. Двунітчатиє РНК реплицируются
аналогічно двунитчатой ДНК, але за допомогою відповідного ферменту - РНК-
ПОЛІМЕРАЗИ вірусного походження.
В результаті процесу реплікації вірусного генома в клітці нагромаджуються
фундації молекул вірусних нуклеиновых кислот, необхідних для формування зрілих
вирионов.
Таким чином, синтез окремих компонентів вириона роз'єднаний в часі і в просторі,
відбувається в різних клітинних структурах і за різного часу.
В кінцевий, заключний період репродукції відбувається збірка вирионов і вихід
вірусу з клітки.
Збірка вирионов може відбуватися різно, але в основі її лежить процес самозбірки
вірусних компонентів, що транспортуються з місць їхнього синтезу в місце збірки..
Первинна структура вірусних нуклеиновых кислот і білків визначає порядок
конформирования молекул і їхнього з'єднання друг з другом. Спочатку утворюється
нуклеокапсид за рахунок строго орієнтованого з'єднання білкових молекул в капсомеры і
капсомеров з нуклеиновой кислотою. У простих вірусів на цьому збірка і закінчується.
Збірка складних вірусів, що мають суперкапсид, багатоступінчата і закінчується звичайно
в процесі виходу вирионов з клітки. При цьому елементи клітинної оболонки
включаються в суперкапсид вірусу.
Вихід вірусу з клітки може відбуватися двома шляхами. Деякі віруси, позбавлені
суперкапсида (аденовирусы, пикорнавирусы) виходять з клітки по «вибуховому» типу.
Клітка при цьому лизируется, а вирионы виходять із зруйнованої клітки в міжклітинний
простір. Інші віруси, що мають липопротеидную повторну оболонку, наприклад - віруси
грипу, виходять з клітки, відгалужуючись з її оболонки. Клітка при цьому може тривало
зберігати життєздатність.
Весь цикл репродукції вірусу займає звичайно декілька годин. За 4 - 5 годин,
проходячих від моменту проникнення в клітку однієї молекули вірусної нуклеиновой
кислоти, може утворитися від декількох десятків до декілька сотень нових вирионов,
здатних інфікувати сусідні клітки. Таким чином, розповсюдження вірусної інфекції в
клітках відбувається дуже близько до.
 Таким чином, спосіб розмноження вірусів корінним чином відрізняється від
способу розмноження всіх інших живих істот. Всі клітинні організми розмножуються
розподілом. При розмноженні вірусів окремі компоненти синтезуються в різних місцях
інфікованої вірусом клітки і за різного часу. Такий спосіб розмноження отримав назву
«роз'єднаний» або «дисъюнктивный».
Потрібно сказати, що взаємодія вірусу і клітки не обов'язково може приводити до
описаного результату - ранньої або відстроченої загибелі інфікованої клітки з продукцією
маси нових зрілих вірусних частинок. Можливі три варіанти вірусної інфекції в клітці.
Перший, нами вже розібратий варіант, відбувається при продуктивній або
вірулентній інфекції.
Другий варіант - персистирующая інфекція вірусу в клітці, коли відбувається
дуже повільна продукція нових вирионов з виходом їх з клітки, але інфікована клітка
тривало зберігає життєздатність.
Урешті, третій варіант - інтеграційний тип взаємодії вірусу і клітки, при якому
відбувається інтеграція вірусної нуклеиновой кислоти в клітинний геном. При цьому
здійснюється фізичне включення молекули вірусної нуклеиновой кислоти в хромосому
клітки-господаря. Для ДНК-ГЕНОМНИХ вірусів цей процес цілком зрозумілий, РНК-
ГЕНОМНИЄ віруси можуть интегировать свій геном тільки у вигляді «провируса» -
ДНК-ОВОЇ копії вірусною РНК, синтезованою за допомогою зворотної транскриптазы -
РНК-залежною ДНК-ПОЛІМЕРАЗИ. У разі інтеграції вірусного генома в клітинний
вірусна нуклеиновая кислота реплицируется разом з клітинною при розподілі кліток.
Вірус у формі провируса може тривало зберігатися в клітці за рахунок постійної
реплікації. Такий процес отримав назву «вирогения».
Вірогенія забезпечує своєрідну форму збереження вірусної генетичної інформації.
З іншого боку, інтеграція вірусного генома в клітинний може приводити до пухлинної
трансформації ураженої клітки. По суті інтеграційний тип взаємодії вірусу і клітки є
паразитуванням вірусу на генетичному рівні.

5. КАРДИНАЛЬНІ ОСОБЛИВОСТІ ВІРУСІВ

Після відкриття вірусів Д.І.Івановським довгий час основними відмітними

ознаками вірусів вважали їхні малі розміри, фильтруемость через бактерійні фільтри і
абсолютний паразитизм, нездатність розмножуватися зовні живої клітки.
Проте, розміри крупних вірусів соизмеримы з розмірами хламидий і дрібних
риккетсий, описані форми бактерій, що фільтруються. В даний час практично не
використовується термін віруси», що «фільтруються, який дологое час був звичайним для
позначення вірусів. Тому малі розміри - некардинальна відмінність вірусів від інших
живих істот.
Абсолютний паразитизм також властивий не тільки вірусам. Абсолютними
паразитами є хламидии, більшість риккетсий. Навіть серед эукариот є абсолютні паразити
- малярійний плазмодий, токсоплазма.
Тому в даний час кардинальні відмінності вірусів від інших мікроорганізмів
грунтуються на більш істотних біологічних властивостях, об яких ми якраз і говорили на
цій лекції.
Грунтуючись на знанні розібратих нами властивостей вірусів можна
сформулювати наступні 5 кардинальних відмінностей вірусів від інших живих істот на
Землі:
1. Відсутність клітинної організації.
2. Наявність тільки одного типу нуклеиновой кислоти (ДНК або РНК).
3. Відсутність самостійного обміну речовин. Обмін речовин у вірусів
 опосередкований через метаболізм кліток і організмів.
4. Наявність унікального, дисъюнктивного способу розмноження.
5. Здатність паразитувати на генетичному рівні.
Таким чином, ми можемо дати наступне визначення вірусам.
Віруси - найпростіша неклітинна форма життя, що містить тільки один тип
нуклеиновой кислоти, володіюча своєрідним обміном речовин, опосередкованим
через метаболізм кліток і організмів, унікальним роз'єднаним способом
розмноження і здатністю паразитувати на генетичному рівні.
6. ПРИНЦИПИ КУЛЬТИВУВАННЯ ВІРУСІВ

Для репродукції вірусів необхідна їхня взаємодія з живою кліткою. Отже,

культивувати віруси можна тільки в клітках.
На першому етапі вивчення вірусів використовувався тільки один спосіб їхнього
культивування - в сприйнятливому організмі. Цей метод застосовується до справжнього
часу, оскільки деякі віруси, наприклад - віруси Коксаки А, можуть репродукуватися лише
в організмі одно- дводенних мишенят. Культивування в організмі лабораторних тварин у
ряді випадків є зручним способом, але у цього методу є істотні недоліки. Не завжди
можна використовувати відповідна тварина для певного вірусу. При культивуванні in
vivo важко отримати чисті популяції вірусів, оскільки тварини часто контаминированы
багатьма вірусами і бактеріями.
Другий метод культивування вірусів - в курячих ембріонах. Цей метод широко
використовується у вірусології у зв'язку з його простотою і доступністю, але не всі віруси
можуть репродукуватися в курячих ембріонах.
Дуже перспективний і широко використовується метод культивування вірусів в
одношарових культурах кліток. У вірусології частіше за всього застосовуються первинні
і перевиваються культури кліток. Це метод дозволяє легко стежити за розвитку вірусу в
моношарі і облядает поряд інших переваг. Використовуючи культури кліток різних видів
можна визначити, в яких культурах репродукується вірус, що вивчається, що є однією з
ознак для ідентифікації вірусу, що виділяється.
Техніка культивування вірусів буде докладне вивчена Вами на практичних
заняттях. На лекції ми зупинимося лише на тому, що при репродукції вірусів можуть
наступати характерні зміни. У лабораторних тварин розвиваються симптоми
захворювання, з'являються ознаки поразки курячих ембріонів, виявляються зміни в
моношарі культур кліток. Ці зміни називають цитопатическим ефектом (ЦПЭ) або
цитопатогенным дією вірусів (ЦПД). Наприклад, ЦПД вірусів в культурі кліток може
виявлятися в загибелі кліток, порушенні цілісності моношара, утворенні гігантських
багатоядерних кліток, клітинних синцитиев і ін. Характер ЦПД різних вірусів
розрізнений, що служить ознакою для групової ідентифікації вірусу, що репродукується.
В клітках, уражених вірусом, часто виявляються вірусні включення, які можуть
розташовуватися в ядрі (ядерні) або в цитоплазмі (цитоплазматические). Включення
полягають з формуватися вирионов і клітинних елементів. Деякі вірусні включення
можуть мати діагностичне значення, як наприклад тельця БАБЕША-НЕГРІ в клітках
головного мозку при сказі.
Вірусні включення можуть виявлятися при гістохімічному забарвленні, а також
при люмінесцентній мікроскопії - при забарвленні акридиновым оранжевим, або з
використанням відомої Вам реакції иммунофлюоресценции - РИФ.

6. ПРИРОДА І ПОХОДЖЕННЯ ВІРУСІВ

Вже давно ведеться суперечка про те, що таке віруси - живе або неживе. Дійсно,
віруси дуже просто влаштовані, не мають клітинної організації, можуть кристалізуватися.
Ще Д.І.Івановський виявив в клітках листя тютюну, ураженого мозаїчною хворобою,
кристаллоподобные освіти. Їх називають «кристалами Івановського». Крісталлізуємость
не укладається в наші уявлення про живе. Віруси не мають самостійного обміну речовин,
на етапі синтезу компонентів вириона він існує в «розібратому» вигляді, його окремі
компоненти є молекулами нуклеиновой кислоти і білка Віруси можуть виявляти свої
інфекційні властивості навіть якщо існують тільки у вигляді однієї молекули нуклеиновой
кислоти - инфекциозность нуклеиновой кислоти вірусу. Все це говорить про віруси як
про неживих агентів.
Проте, з іншого боку, віруси володіють здатністю зберігати свою індивідуальність,
відособленість від зовнішнього середовища, забезпечують, хоча й своєрідно,
відтворювання свого генотипа і фенотипа. Для вірусів характерні явища спадковості і
мінливості, вони еволюціонують по законах, загальним для всього живого. Це
підтверджує живу природу вірусів.
Мабуть, рішення питання про природу вірусів має більше загальнотеоретичне, ніж
практичне значення і пов'язано з проблемою визначення живого. З відкриттям вірусів
розширилися і поглибилися наші уявлення про єство життя.
Але ми, медики, до цього питання повинні підійти з прагматичних позицій. Віруси
є збудниками вірусних інфекційних хвороб. А інфекційний процес на відміну від
інтоксикації - це процес взаємодії двох живих істот. Вірусні захворювання виникають і
розповсюджуються по законах инфектологии, вони вимагають застосування тих же
методів профілактики і лікування, що і інфекції, викликані іншими мікроорганізмами.
Тому з точки зору практичної медицини будемо розглядати віруси як живих збудників
інфекційних вірусних захворювань, вимагаючих застосування лікувально-профілактичних
і протиепідемічних заходів.
Питання про походження вірусів, якомога зрозуміти, не має в даний час
обгрунтованого розв'язування. Він тісно пов'язаний з розв'язуванням проблеми
походження життя на Землі. Але потрібно розглянути основні гіпотези про походження
вірусів.
Перша гіпотеза отримала назву «гіпотеза суперпаразита}rdblquote . Згідно цієї
гіпотези віруси є результатом спрощення патогенних мікроорганізмів на колії
пристосування до паразитичної форми існування. Дійсно, паразитичні мікроорганізми
значною мірою втрачають низку ферментних систем, їхня організація спрощується у
зв'язку з можливістю використовувати готові живильні речовини і ферментні системи
господаря. Проте, сучасна біологія з працею може представити собі настільки глибоке
спрощення, щоб мікроорганізм втратив клітинну будову. Тому гіпотеза quote
суперпаразита» в даний час має мало прихильників.
Другу гіпотезу можна позначити як гіпотезу «протобионта». Вона передбачає, що
віруси є нащадками найпростіших живих істот, які були родоначальиками всього живого
і сформувалися з неживого органічного матеріалу. Надалі йшла еволюція цих утворень у
бік утворення клітинних організмів, а віруси є реліктовими нащадками таких
протобионтов. Ця гіпотеза інтенсивно розвивалася і радянськими вірусологами. Проте
дуже важко пояснити, яким же чином могли існувати і репродукуватися такі первинні
віруси у відсутність кліток. Адже віруси не здатні розмножуватися без використання
органелл і ферментних систем кліток. Тому в даний час гіпотеза про походження вірусів
від первинних доклітинних форм життя більшістю вірусологів не розділяється.
Третя гіпотеза може бути визначена як гіпотеза генів», що «збісилися. Вона
передбачає, що віруси є генетичними елементами кліток, що відокремилися і придбали
здібність до автономного існування. Гіпотеза добре пояснює і різноманіття генетичного
матеріалу вірусів, і можливість їхнього існування і еволюції.
 Необхідно нагадати, що у бактерій є аналогічні генетичні структури, які можуть
передаватися від одних бактерійних кліток до інших і відтворюється в них. Це -
плазмиды. Плазміди представляють собою невеликі кільцеві молекули ДНК, володіючі
певною автономністю. Вони можуть відтворюватися в бактерійних клітках або
интегировать в бактерійну хромосому. Ці властивості плазмид аналогічні властивостям
вірусів. До речі, фаг, вірус бактерій, у формі профага ми відносимо до плазмидам.
Можна представити, що і віруси є ділянками нуклеиновых кислот, оточеними
білковими оболонками. Оболонки вірусу забезпечують йому можливість зберігатися в
позаклітинному стані і проникати в клітку. Саме ця гіпотеза і розділяється багатьма
вірусологами в даний час. Можна виказати надію, що з розвитком наших знань про
живий ми розв'яжемо і проблему походження вірусів.

5. Матеріали активізації студентів під час викладу лекції

Демонстрація наочних таблиць, питання до студентів протягом лекції для звертання
уваги студентів на найзначущіші проблеми лекційного матеріалу, приведення клінічних
прикладів з різних форм захворювань.

6. Загальне матеріальне і методичне забезпечення лекції:

- учбові приміщення : ауд. Велика Анатомічна, ауд. Мала Анатомічна
- устаткування не: аудиторна дошка, указка;
- устаткування : не потрібно;
- ілюстративні матеріали – таблиці.
-
7. Матеріали для самопідготовки студентів:
а)по темі висловленої лекції /література, питання, завдання/;

ПИТАННЯ

1. Вступ
2. Історичний нарис розвитку вірусології
3. Склад і ультраструктура вірусів
4. Репродукція вірусів
5. Кардинальні особливості вірусів
6. Принципи культивування вірусів
7. Природа і походження вірусів

ЛІТЕРАТУРА
1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія : підручник для студ. Вищ. Мед. Навч.
заклад. / За редакцією В.П.Широбокова/ Видання 2-е. – Винниця : Нова книга, 2011. – 952 с.
2. Протченко П.З. Загальна мікробіологія, вірусологія та імунологія. Вибрані лекції: Навч.
посібник . – Одеса: Одес. Держ. мед. ун-т, 2002. – 298 с.
3. Пятк³н К. Д., Кривоше¿н Ю.С. М³кроб³олог³я. - К : Высшая школа, 1992. - 432 с.
4. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. - М : Медицина, 1983. - 312 с.
5. Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к лабораторным занятиям
по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред. Борисова Л.Б. – Г. :
Медицина, 1993. – 232 с.
6. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник под ред. А.А.Воробьева.
– М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 691 с.
7. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /ред. Л.Б. Борисов, А.М.
Смирнова. - М: Медицина, 1994. - 528 c.
 б) по темі наступної лекції /література, перелік основних питань/.

Тема: ОСОБЛИВОСТІ ІНФЕКЦІЇ І ІМУНІТЕТУ ПРИ ВІРУСНИХ

ЗАХВОРЮВАННЯХ
1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія : підручник для студ. Вищ. Мед. Навч.
заклад. / За редакцією В.П.Широбокова/ Видання 2-е. – Винниця : Нова книга, 2011. – 952 с.
2. Протченко П.З. Загальна мікробіологія, вірусологія та імунологія. Вибрані лекції: Навч.
посібник . – Одеса: Одес. Держ. мед. ун-т, 2002. – 298 с.
3. Пятк³н К. Д., Кривоше¿н Ю.С. М³кроб³олог³я. - К : Высшая школа, 1992. - 432 с.
4. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. - М : Медицина, 1983. - 312 с.
5. Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к лабораторным занятиям
по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред. Борисова Л.Б. – Г. :
Медицина, 1993. – 232 с.
6. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник под ред. А.А.Воробьева.
– М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 691 с.
7. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /ред. Л.Б. Борисов, А.М.
Смирнова. - М: Медицина, 1994. - 528 c.

ПИТАННЯ
1. Інфекційні властивості вірусів
2. Особливості вірусної інфекції
3. Імунітет при вірусних інфекціях
4. Імунопрофілактика вірусних захворювань
5. Химіопрофілактіка і хіміотерапія вірусних захворювань

8. Література, яка використана лектором для підготовки лекції

1. 1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія : підручник для студ. Вищ. Мед.

Навч. заклад. / За редакцією В.П.Широбокова/ Видання 2-е. – Винниця : Нова книга,
2011. – 952 с.
2. Протченко П.З. Загальна мікробіологія, вірусологія та імунологія. Вибрані лекції: Навч.
посібник . – Одеса: Одес. Держ. мед. ун-т, 2002. – 298 с.
3. Пятк³н К. Д., Кривоше¿н Ю.С. М³кроб³олог³я. - К : Высшая школа, 1992. - 432 с.
4. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. - М : Медицина, 1983. - 312 с.
5. Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к лабораторным
занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред.
Борисова Л.Б. – Г. : Медицина, 1993. – 232 с.
6. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник под ред.
А.А.Воробьева. – М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 691 с.
7. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /ред. Л.Б. Борисов, А.М.
Смирнова. - М: Медицина, 1994. - 528 c.
8. Пятк³н До. Д., Крівоше¿н Ю.З. М³кроб³олог³я. - ДО : Вища школа, 1992. - 432
з.
9. Ситник І.О., Клімнюк З.І., Творко Р.З. Мікробіологія, вірусологія, імунологія :
Підручник. – Тернопіль : Укрмедкніга, 1998. –392 з.
10. Тімаков В.Д., Льовашев В.З., Борісов Л.БИ. Мікробіологія. - М : Медицина, 1983.
- 312 з.
 11. Ananthanarayan R., Jayaram Paniker З.K. Textbook of Microbiology. Fifth
Edition. - Orient Longman, 1997. - 612 р.
12. Medical Microbiology /Edited by D.Greenwood, R.З.В.Slack, J.F.Peutherer. - ELBS
with Churchill Livingstone, 1995. - 827 р.
13. Murray Р.R., Rosenthal K.S., Kobayashi G.S., Pfaller M.А. Medical Microbiology. -
Mosby, 1997. - 720 р.
14. Pelczar M., Chan Е.З.S., Krieg N.R. Microbiology. Concepts and applications. -
MCGRAW-HILL, INC., 1993. - 896 р.
15. Topley & Wilson's Principles of Bacteriology, Virology and Immunity, 8-th edition,
1990 /Vol. 1. General Bacteriology and Immunity. - 468 р. - Vol. 4. Virology. - 719 р.

Лекцію склав Протченко П.З.