DETERMINACIÓ DE LA CONCENTRACIÓ DE GLUCOSA PER UN MÈTODE

COLORIMÈTRIC. ANÀLISI D’UN ESPECTRE D’ABSORCIÓ

Autors:
-Oriol Ragni Alari
-Carles Pujolà Droguet
-
-
Data de lliurament:

1. Gràfic de l’espectre d’absorció del compost quinonaimina

Representar la variació d’absorbància en funció de la longitud d’ona (fer el

gràfic a mà)

2. A quina regió de l’espectre s’ha treballat? Quina és la longitud d’ona de

màxima absorció per aquest compost?

S’ha treballat a l’espectre del visible. I es veu que la longitud d’ona de màxima
absorbància és als 500nm, que és color verd.
3. Per què és necessari fer el blanc i tornar-lo a fer per a cada longitud d’ona?

És important fer el blanc per a cada longitud d’ona perquè pot ser que el blanc tingui
diferent absorbància a cada longitud d’ona. La qual cosa podria alterar el resultat de
l’absorbància de la mostra si no es fes.

4. Adjuntar full de càlcul Excel, en el que es presenti una taula amb les
concentracions de glucosa de la recta de calibració amb les corresponents
absorbàncies. El mateix full també ha de mostrar la representació de la recta de
calibració, juntament amb la equació de la recta i el coeficient de regressió.

5. Es compleix en aquest cas la llei de Lambert-Beer? Per què?

La llei de Lambert-Beer es compleix ja que s’observa clarament la proporcionalitat

entre l’Absorbància i la concentració de glucosa

6. Quina és la concentració de glucosa del sèrum problema? Expresseu el

resultat en mg/100 ml. Podeu emprar el mateix full Excel mencionat abans que
mostri el càlcul fet per la obtenció d’aquesta concentració de glucosa del sèrum
“problema”. Quin diagnòstic et suggereix aquest resultat?

Sabent que el sèrum ens havia donat una absorbància de 0’431 aleshores es pot
deduir a partir d’una regla de tres:

0,5/1,696·0,431=0,127mg/ml=12,7mg/100ml el qual suggereix un diagnòstic

d’hipogucèmia

7. A partir del pendent de la recta de calibració determina el valor de ε per a la

quinonaimina a la corresponent longitud d’ona (Tenir en compte que les unitats
de ε son M-1·cm-1, l’estequiometria de la reacció (veure reaccions abaix) i la
dilució de l’assaig; Mr de la glucosa 180). Es pot determinar la concentració de
glucosa sense la recta patró? Com?

El valor de ε és simplement el pendent de la recta multiplicat per 2 ja que

l’estequiometria és 2:1
5
𝑚𝑙 1,8·10 𝑚𝑔 1𝑙 1
0,239 𝑚𝑔·𝑐𝑚
· 1 𝑚𝑜𝑙
· 1000𝑚𝑙
= 43, 02·2 = 86, 04 𝑀·𝑐𝑚

Coneixent l’ε es pot calcular la concentració per la formula A= ε·c·l. I si no es pot fer
mitjançant una regla de tres amb una mostra coneguda ja que tenen una relació de
proporcionalitat.

GOD
2 β-D-Glucosa + O2 + 2 H2O → 2 Àcid glucònic +2 H O2 2

POD

2 H2O2 + fenol + 4-aminoantipirina → Quinonaimina + 4 H O 2