Professional Documents
Culture Documents
БДС 1035-89
КОНСЕРВИ МЕСНИ, МЕСО-РАСТИТЕЛНИ,
РИБНИ И ДРУГИ, ПРИГОТВЕНИ
С ПРОДУКТИ ОТ ЖИВОТИНСКИ ПРОИЗХОД
ПРАВИЛА ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ
И МЕТОДИ ЗА ИЗПИТВАНЕ
Н 09
Официално издание
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
1. ИЗРАБОТЕН ОТ Централния научноизследователски ветеринарномедицински институт
"Г. Павлов" - София
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
УДК 664.9.001.4 Официално издание
Препечатването е забранено
НАРОДНА РИБНИ И ДРУГИ, ПРИГОТВЕНИ С БДС 1035-76
РЕПУБЛИКА БЪЛГАРИЯ ПРОДУКТИ ОТ ЖИВОТИНСКИ ПРОИЗХОД
Правила за вземане на проби и методи Н 09
за изпитване
Консервы мясные, мясорастительные, Canned meat, meat and
рыбные и другие, изготовленные из vegetables, fish, etc. made of
продуктов животного происхождения. animal products. Rules for
Правила отбора проб и методы испитаний sampling and methods of test
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.2, БДС 1035-89
Вземат се, след като партидата е съхранявана най-малко един месец след производството при
температура над 15 °С. Този бомбажен период е необходим, за да се открият и отстранят дефектните
консерви. Срокът за вземане на пробите след производството може да се намали на 10 дни, ако
ежедневно се поставят за термостатно изпитване консерви от всяка автоклавоварка при строго спазване
на реда, посочен в забележката към т.5.2. В този случай не е от значение температурата, при която се
съхраняват в склада консервите от партидата.
Средната проба е 12 консерви от партида. Средната проба се разделя на две еднакви половини,
едната от които се изпраща за изпитване в лаборатория, а другата се съхранява като контролна при
условия /място и срок/, уточнени по взаимно споразумение на страните.
При съмнение в качеството и годността на консервите и при наличие на бомбаж и други
съществени дефекти в над 0,1 % от партидата се вземат по 20 консерви без видими дефекти, които се
изпращат за лабораторно изследване.
1.3.2. При внос /износ/ на консерви
За изследване на консерви, които се внасят /изнасят/ в /от/ страната, проби се вземат в
количество и по начин, посочени за окачествяването на консерви в производствено предприятие
/т.1.3.1/.
Вносителят /износителят/ е длъжен да означи датата на производството на транспортните
опаковки.
Не се допускат за внос /износ/ партиди, в които се установяват консерви с бомбаж от каквото и
да е естество, с хлопащи капаци и дъна или други видими дефекти, които съгласно българските
държавни стандарти правят консервите нестандартни или негодни за консумация.
При партиди от консерви, за които се проектира внос /износ/, вносителят /износителят/ е длъжен
да осигури по 6 консерви от всеки отделен асортимент, които се представят чрез ДО "Ветеринарно дело"
за изследване и още 6 други консерви от всеки асортимент, които се задържат при вносителя за
контрола, която да се използва при необходимост от допълнително изследване. В тези случаи вносителят
трябва да даде и сведения за съдържанието на консервите за условията и сроковете за съхранение и
начина на употреба, ако на етикетите липсват такива данни. Ако у нас няма методика за даден
показател, който трябва да се установи и контролира, доставчикът следва да представи методиката. За
такива проби се счита, че изследването започва на следващия ден от пристигането на пробата в
лабораторията, а цялостното изследване продължава най-малко 20 дни.
1.3.3. При всички случаи на съмнения относно годността на консервите за консумация,
качеството, трайността им при съхранение и при нарушаване на правилата за съхранение
Проби се вземат от търговската мрежа, складовите бази и др. при съмнения в характеристиката
на посочените показатели. В такива случаи от партидата се вземат както консерви с външни признаци на
настъпили промени /бомбаж, ръждиви петна, изтичане на съдържание, деформации и др./ или с
преминал срок на съхранение, така и консерви без видими промени. Броят на пробите не се нормира.
1.3.4. При хранителни отравяния
От съмнителната партида се вземат проби за изследване в количество и по начин, посочени в
т.1.3.3.
1.3.5. При арбитражен контрол
От всяка партида се вземат по 40 консерви. Половината от тях се изпращат за анализ, а
останалите се съхраняват при условия /място и срок/, уточнени от заинтересуваните страни.
1.3.6. Техника за вземане на пробите
Пробите от производственото предприятие се вземат след проверка на партидата за наличие на
признаци на бомбаж, нехерметичност, деформации и др., състоянието на сигнатурата /щемпела/ и
съответствието ѝ с обявената партида.
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.3, БДС 1035-89
При внос /износ/ на консерви, в търговската мрежа, складове, хладилници и др. се вземат под
внимание също придружаващите партидите документи /ветеринарно свидетелство, експертен лист и др./,
начинът на транспорт и условията за съхранение. Консервите, предназначени за внос /износ/, трябва да
са придружени с протокол за анализ и разрешително свидетелство от ДО "Ветеринарно дело".
Пробите се вземат от различни места на партидата по преценка на контролния орган.
Когато консервите са поставени в картонени или други каси, от различни места на партидата
предварително се вземат отделни каси в количество, посочено в табл.1. Консервите в заделените каси се
преглеждат и от всяка каса се вземат консерви в необходимото количество за лабораторно изследване.
За бактериологично изследване се вземат херметични /без изтичания и зацапвания от
съдържанието/ и непоказващи признаци на бомбаж консерви.
Таблица 1
Брой на касите в
До 60 От 61 до 160 От 161 до 400 От 401 до 1000 Над 1000
партидата
Брой на касите, които
4 5 10 15 25
трябва да се прегледат
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.4, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.5, БДС 1035-89
2. Консерви с вибриращи капаци, които са с добри микробиологични показателите определят като редовни в
условията на умерения и студения климат.
3.5. Определяне степента на напълване на опаковките
Степента на напълване може да се определи преди и след отваряне на консервите по следните
начини:
1/ чрез почукване. Затворената кутия се почуква по капака със свит пръст или дървено чукче. По
издавания звук се преценява наличието на празнина и нейните размери;
2/ чрез измерване на разстоянието между капака и съдържанието след отваряне на консервата.
Консервата се отваря, без да се нарушава височината на фалца. С линия се измерва разстоянието от
горния ръб на фалца до повърхността на съдържанието.
3.6. Преценка на вътрешната повърхност на металната опаковка на консервите
Преглежда се празната и добре измита кутия. Определят се степента на мрамориране, повредите
по лака и калаения пласт, наличието на корозия. По размерите на корозията се преценява годността на
партидата за съхраняване. Местата с нарушения на калаения пласт са без гланц и с тъмен цвят.
Участъците с корозия освен загубения гланц се отличават и с неравна повърхност.
При по-значителни нарушения на калаения пласт се налага химическо изследване за тежки
метали. Определянето на степента на нарушаване на калаения пласт и корозиите се извършва съгласно
т.4.4.
3.7. Органолептична преценка на консервното съдържание
Изпитването се провежда в съответствие с изискванията на БДС 7682-76, СТ на СИВ 4710-84,
СТ на СИВ 5215-85 и СТ на СИВ 5216-85.
3.7.1. Помещение за провеждане на изпитването
Помещението трябва да бъде сухо, чисто, проветриво, без миризми, с температура от 15 до 20 °С,
добре осветено, разположено по възможност на север, без директно слънчево осветление. Стените да
бъдат светли, най-добре бели или кремави, за препоръчване покрити с блажна боя или фаянсови плочки
на височина 2 m. Залата да бъде защитена от шум и вибрации.
За изследването са необходими следните съоръжения и материали:
1/ маса с гладка повърхност, бяла, добре осветена;
2/ термометри /лабораторни и стайни/;
3/ лупа с увеличение най-малко 5 пъти;
4/ линия с деления до 1 сm и 1 mm;
5/ везни с точност до 1 g;
б/ салфетки;
7/ прибори и съдове за хранене;
8/ стъкла с чиста питейна вода;
9/ хляб /студен, твърд/;
10/ топла и студена течаща вода;
11/ кошче за отпадъци.
3.7.2. Подготвително помещение
Помещението за подготовка на пробите за органолептично изпитване трябва да бъде снабдено
със:
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.6, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.7, БДС 1035-89
съответния стандарт. След това съдържанието се изсипва в съд, за да се види състоянието му и откъм
дъното. При консерви с плътно или пастообразно съдържание еднородността на масата се преценява по
повърхността и в разрез.
3.7.4.2. Определяне на консистенцията, миризмата и вкуса на съдържанието на консервите:
1/ консистенцията на съдържанието се изпитва при консерви с плътно съдържание чрез
притискане с прибор за хранене /нож, вилица и др./ и при консерви с пюреобразно и течно съдържание,
чрез разбъркване или прехвърляне в друг съд;
2/ миризмата се изпитва при началното пробиване на консервата чрез вдъхване от повърхността
на съдържанието, а след това от прясно отрязани повърхности или след разчупване на твърдите
съставки. Особено внимание трябва да се обръща на първите усещания на миризмата веднага след
отваряне на консервата, разрязване или раздробяване на твърдите съставки от съдържанието, както и
след изпразване на консервната опаковка;
3/ вкусът на съдържанието се изпитва чрез сдъвкване на част от него в продължение на 1 min,
след което хапката се изхвърля и вниманието се насочва върху странични привкуси. При изследване на
няколко проби една след друга преди всяка следваща проба устата се изплаква с неутрализиращи
средства /чиста питейна вода или хапка твърд хляб/ за възстановяване на нормалната вкусова
чувствителност.
Когато консервното съдържание е с неизразени или слабо доловими странични миризми и вкус,
консервите се загряват до 70 °С и се преценяват излитащите пари. При необходимост може да се
направи проба на варене с късове месо или риба. За целта късовете се поставят в по-дълбок съд, заливат
се със студена вода до покриването им, похлупват се с капак и се загряват. Миризмата се определя в
момента на появяването на пари при откриването на съда. Още топли късовете се опитват на вкус.
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.8, БДС 1035-89
Черт.1
а - гумени уплътнители; б - метални пластинки; м - винтил; г - перчата гайка;
д - кух винт; е - манометър; ж - нож
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.9, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.10, БДС 1035-89
съприкосновение с желязо. Непосредствено преди употреба към този разтвор се прибавя 10 %-ен
разтвор на оцетна киселина в съотношение 1:1.
След изваждане на съдържанието кутията се измива добре с топла вода и сапун. Изрязват се
капакът, дъното и корпусът, като се отстранява фалцът. Върху вътрешната повърхност на изрязаните
плоскости се поставя филтърна хартия или хроматографска хартия, напоена с готовия разтвор от
калиеви соли и оцетна киселина и се пресува 6 min. На местата на корозиите върху филтърната хартия се
отбелязват сини петна.
Този метод е подходящ за изследване на нарушения по калаеното покритие на страничния шев от
вътрешната повърхност на кутията. За целта от корпуса на кутията се изрязва ивица, широка 4 до 5 cm, в
средата на която остава страничният шев.
4.5. Определяне на химическите показатели на консервното съдържание
4.5.1. Подготовка на пробите за изследване
Съгласно БДС 11799-84.
За химическо изследване се подготвя средна проба от цялото съдържание най-малко на две
консерви. Изследванията трябва да се провеждат в деня, в който се извършва подготовката на пробата.
Краткотрайно запазване на пробите става задължително в хладилник.
4.5.2. Определяне на водното съдържание и сухото вещество
Съгласно БДС 5712-74, БДС 15437-82 и БДС 16612-87.
4.5.3. Определяне количеството на общия азот
Съгласно БДС 14431-78 и БДС 15438-82.
4.5.4. Определяне количеството на мазнините
Съгласно БДС 6997-84 и БДС 8549-74.
4.5.5. Определяне количеството на готварската сол
Съгласно БДС 7168-84.
4.5.6. Определяне количеството на нитрати и нитрити
Съгласно БДС 5822-86.
4.5.7. Определяне количеството на тежки метали:
1/ калай - съгласно БДС 6853-74;
2/ олово - съгласно БДС 6880-75;
3/ мед - съгласно БДС 6834-76;
4/ арсен - съгласно БДС 7182-87.
4.5.8. Определяне на общата киселинност
Съгласно БДС 6996-82 и БДС 9368-79.
4.6. Определяне наличието на антибиотици
Съгласно БДС 1323-75.
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.11, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.12, БДС 1035-89
хладилник, и се преглеждат за бомбаж и други дефекти по т.3.3 и т.3.4. Ако се установи бомбаж или
изтичане на съдържание дори при една консерва от пробата, от същата партида се изисква нова проба в
размер на 20 консерви за повторно изследване.
Забележка. В производственото предприятие се провежда термостатно изпитване на 10 консерви от всяка
автоклавоварка. Термостатирането се извършва при (30 ± 1) °С в добре поддържана термостатна стая под
наблюдението на Държавен ветеринарно-санитарен контрол и ръководителя на заводската лаборатория.
5.3. Подготовка на помещението за микробиологично изследване
Помещението за микробиологичен анализ трябва да отговаря на следните изисквания:
1/ стените и подът да са облицовани с материал, устойчив на влажна обработка с
дезинфектиращи средства;
2/ да са поставени бактерицидни лампи за обеззаразяване на въздуха и работната повърхност на
масите;
3/ работните маси да са с гладка повърхност и от материал, позволяващ добро почистване и
дезинфекция;
4/ всички повърхности да са достъпни за влажна дезинфекция;
5/ да няма движение на въздуха, създавано от хора, отвори и неплътности.
Преди работа помещението се почиства, измива и дезинфекцира с подходящи детергенти и
дезинфектанти. Работните места се зареждат със спиртни лампи или горелки, банка със спирт, нож или
пробой, стерилна стъклария, необходима за анализите, хранителни среди, марлени или пластмасови
маски. Бактерицидните лампи се включват и работят в продължение на 30 min. Изключват се
непосредствено преди започване на анализите.
5.4. Брой на консервите за микробиологичен анализ
На микробиологичен анализ от всяка проба се подлага най-малко по една херметически
затворена консерва, която да не е показала видими промени при термостатното изпитване.
Забележка. Допуска се консервите за микробиологичен анализ да се вземат след седмия ден от
термостатното изпитване, като останалите консерви от пробата се задържат в термостата до десетия ден. Когато при
термостатното изпитване се появи бомбаж дори в една консерва или пробата се изпраща от партида с установен
бомбаж, микробиологичен анализ се извършва на всички консерви от тази проба.
5.5. Отваряне на консервите
Преди отварянето консервите се измиват с топла вода, сапун и четка и се разклащат енергично. С
тампон, натопен в спирт, се почиства добре капакът и върху него се налива спирт и се запалва. След
изгарянето на спирта капакът се опламенява леко с въртеливи движения на пламъка на горелката, като
се внимава нагряването да не се фиксира продължително време на едно място.
Персоналът измива ръцете си и ги дезинфекцира със спирт. Ръкавите на работните дрехи трябва
да са прибрани. Пред устата се поставя маска.
Отварянето на консервите става близо до пламъка на горелката с остър пробой /с диаметър около
1,5 cm/ или специален нож /черт.1, В/.
С пробоя или ножа, предварително опламенени на лампата, се прави отвор с диаметър 3 до 4 cm
в центъра на капака. В този момент пламъкът на газовата горелка се насочва към отвора, тъй като при
консерви със силен вакуум в момента на отварянето им се получава всмукване на външен въздух.
За консерви с плътно съдържание може да се използват и обикновени ножчета за консерви,
острието на които се почиства със спирт и леко се опламенява преди всяко отваряне. В тези случаи
отварянето става до фалца на кутията.
Стъклените буркани се подготвят за отваряне както консервите в кутии. Отварянето може да
става с пробой през капака или като целият капак се отвори асептично. Такива опаковки се измиват и
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.13, БДС 1035-89
почистват основно по ръба на капака до стъклото. Във всички случаи към мястото на отварянето се
насочва пламъкът на горелката.
Бомбирали консерви се отварят по следния начин: консервата се измива. Капакът се почиства
добре със спирт и леко опламеняване, след което консервата се поставя в тавичка с дезинфекционен
разтвор. Капакът на консервата се покрива със стерилна фуния с диаметър, по-голям от този на кутията.
През тесния отвор на фунията се вкарва пробой, който опира в капака на кутията. Чрез удар с чукче
върху пробоя се пробива кутията. По такъв начин се изключва зацапването от консервното съдържание.
5.6. Вземане и подготовка на материала за анализ
5.6.1. Инструментариум за вземане на материал за анализ:
1/ стерилна метална сонда с диаметър около 0,8 cm, снабдена с бутало;
2/ стерилни пипети с широк отвор /отрязани към върха/;
3/ стерилни скалпел, ножици, нож и пинцети.
5.6.2. Начини за вземане на материал за анализ
5.6.2.1. От консерви със заливка
Преди отварянето консервата се разклаща енергично 10 пъти, като се обръща на различни
страни. С пинцети се взема материал от твърдата фаза на съдържанието към центъра на консервата, като
твърдите части трябва да са покрити със заливка.
5.6.2.2. От консерви с плътно съдържание
Със сонда или скалпел /нож/ и пинцети се вземат от центъра и повърхността на съдържанието 10
до 30 g, поставят се в стерилна петриева паничка, нарязват се с ножици на малки парченца, размесват се
и от тях се посява необходимото количество.
Материал от пастети може да се вземе направо от центъра и повърхността с помощта на пинцети,
сонда или скалпел.
5.6.2.3. От консерви с пюреобразно съдържание
Преди отварянето консервата се разклаща енергично, като се обръща на различни страни. След
отварянето се взема материал от центъра с отрязана пипета и се отмерва направо от нея.
5.7. Количество на посевния материал
При установяване на промишлена стерилност и за изолиране на причинители, предизвикващи
развала на консервното съдържание, количеството на посевния материал е 1 g или 1 cm3 от продукта.
При установяване на абсолютна стерилност материалът за анализ е 30 g/cm3 от продукта.
5.8. Апаратура, материали и реактиви
1/ термостати на (30 ± 1) °С и на (55 ± 1) °С;
2/ анаеростат или реактиви, осигуряващи анаеробни условия за култивиране на посевките;
3/ микроскоп с приспособление за наблюдение под имерсия;
4/ хомогенизатор;
5/ водна баня;
6/ петриеви панички и бактериологични епруветки;
7/ пинцети;
8/ предметни стъкла;
9/ пипети с вместимост 1 и 10 cm3;
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.14, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.15, БДС 1035-89
Материалът, подготвен съгласно т.5.6.2 и в количество съгласно т.5.7, се посява в две епруветки
със среда на Кит-Тароци, предварително регенерирана на кипяща водна баня за 25 min и веднага
охладена до около 40 °С. След посявката върху средата се наливат 1,5 до 2,0 cm3 стерилна разтопена
смес от твърд парафин и вазелин. Едната епруветка се загрява 20 min на водна баня при 80 °С.
Епруветката се поставя така, че нивото на водата да бъде над нивото на парафина в епруветката.
Едновременно се поставя и епруветка със същата хранителна среда, в която има термометър. Отчитането
на времето на загряване започва, когато температурата в контролната епруветка достигне 80 °С. След
загряването епруветката с посетия материал се охлажда веднага в студена вода.
Двете епруветки /загрята и незагрята/ се инкубират на (30 ± 1) °С за 10 дни или на (37 ± 1) °С за
5 дни, като ежедневно се наблюдават за поява на растеж /помътняване, утайка или газ, изтласкване на
парафиновата запушалка/.
При съмнение за растеж от средата на Кит-Тароци се правят натривки върху предметно стъкло и
се оцветяват по Грам. Едновременно се извършват и препосевки върху повърхността на месопептонен
агар с гликоза или кръвен агар, както и в цялата дълбочина на една епруветка с разтопена и охладена до
50 °С среда за доказване на сероводород.
Препосевките върху месопептонен агар с гликоза /кръвен агар/ се инкубират при анаеробни
условия на (30 ± 1) °С за 72 h или на (37 ± 1) °С на 48 h.
Средата със сероводород се инкубира на (30 ± 1) °С за 5 дни при аеробни условия.
При отсъствие на растеж в посевките се дава заключение, че в изследваната консерва не се
установяват жизнеспособни мезофилни анаеробни микроорганизми.
При установяване на растеж върху средите с препосевки се извършва проверка на културата за
развитие при аеробни условия с цел изключване на факултативно-анаеробни микроорганизми. Посевките
се извършват върху месопептонен агар с гликоза и се инкубират при (30 ± 1) °С за 72 или при (37 ± 1) °С
за 48 h.
При установяване на строго анаеробни микроорганизми /Грам-положителни пръчици, образуващи
спори и сероводород, отрицателни за каталаза/ се провежда изследване за C. botulinum и С. perfringens в
съответна специализирана лаборатория.
5.9.3. Термофилни аеробни и факултативно-анаеробни микроорганизми
5.9.3.1. Хранителни среди
1/ месопептонен бульон с разтворима скорбяла;
2/ агар с гликоза и разтворима скорбяла.
5.9.3.2. Провеждане на анализа
Материалът, подготвен съгласно т.5.6.2 и в количество съгласно т.5.7, се посява в две епруветки
с месопептонен бульон с разтворима скорбяла. Едната епруветка се загрява на 80 °С за 30 min съгласно
т. 5.9.2.2.
От разреждане 1:1, 1:5 и 1:10, получени от съдържанието на консервата по т. 5.9.6.1, се поставя
по 0,1 cm3 върху петриева паничка с агар с разтворима скорбяла и се разстила по цялата повърхност със
стерилно бастунче.
Посевките се инкубират при (55 ± 1) °С за 3 дни.
Забележка. При липса на термостат с 80 % влажност в камерата посевките се поставят в обикновен
термостат, в който има открит съд с вода, или в добре затворени непропускливи, пластмасови пликове, от който
въздухът не е изтеглен. В пликовете се поставя влажен памук.
Посевките се наблюдават ежедневно и при наличие или съмнение за растеж веднага се правят
натривки по Грам и се отчита морфологията на клетките. Културите се изпитват за образуване на
каталаза съгласно т.5.11.3. Порасналите колонии върху твърдите среди се преброяват и се изчислява
количеството на микроорганизмите в 1 g съгласно т. 5.9.6.2.
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.16, БДС 1035-89
При съмнение за микробиално развитие в течната среда /пеленка, утайка или помътняване/
веднага се извършват препосевки върху агар с гликоза и разтворима скорбяла, които се инкубират при
(55 ± 1) °С за 24 до 48 h.
При установяване на растеж в течната среда културата се проверява за способност да образува
киселина съгласно т.5.9.5.
Ако на агара с гликоза и разтворима скорбяла се развият малки кръгли колонии с жълт ореол на
виолетовия фон на средата, това е указание, че микроорганизмите са киселинообразуващи термофили.
От колониите се правят микроскопски препарати, определя се отнасянето им по Грам и способността да
образуват спори. Термофилните микроорганизми, причиняващи плоско-кисела развала на консервите с
pH над 4,2 (В.stearothermophilus и В.aerothermophilus), са Грам-положителни или отрицателни удължени
пръчици, образуващи едри елипсовидни спори, които деформират микробната клетка.
При отсъствие на растеж в посевките и при липса на промяна в консервното съдържание след
термостатиране при (30 ± 1) °С и (55 ± 1) °С се дава заключение, че в изследваната консерва не се
установяват жизнеспособни термофилни аеробни и факултативно-анаеробни микроорганизми.
Когато се установи наличие или развитие на термофилни аеробни или факултативно-анаеробни
микроорганизми във всички или в някои от изследваните консерви, провежда се анализ на
нетермостатирани опаковки. Ако в тях не се установи развитие на термофилни или термотолерантни
микроорганизми, изследваните консерви се окачествяват като стандартни със забележка, че трябва да се
съхраняват при температура, не по-висока от 15 °С, и че не могат да се реализират в страни с
температура на въздуха над 30 °С.
При установяване на развитие на термофилни микроорганизми в нетермостатирани опаковки
консервите от изследваните партиди се окачествяват като нестандартни.
5.9.4. Термофилни анаеробни микроорганизми
5.9.4.1. Хранителни среди:
1/ бульон на Кит-Тароци с дрождев аутолизат, аскорбинова киселина и калциев карбонат
/СаСО 3 /;
2/ месопептонен агар с гликоза и дрождев аутолизат.
5.9.4.2. Провеждане на анализа
Материалът, подготвен съгласно т.5.6.2 и в количество съгласно т.5.7, се посява в две епруветки
с бульон на Кит-Тароци с дрождев аутолизат, аскорбинова киселина и калциев карбонат. Анализът се
провежда по описания в т.5.9.2.2 начин с тази разлика, че посевките се инкубират при (55 ± 1) °С за
72 h, като се контролират ежедневно.
При поява на признаци на растеж - веднага, а при отсъствие на такива - на третия ден, се прави
натривка по Грам и препосявка на месопептонен агар с гликоза и дрождев аутолизат. Инкубирането се
извършва при (55 ± 1) °С за 24 до 48 h при анаеробни условия. Ако се установи развитие на
микроорганизми, изолираните култури се изпитват за образуване на каталаза съгласно т.5.11.3.
Забележка. Растеж в бульона на Кит-Тароци може да се появи след 12 до 14 h като помътняване със /или
без/ образуване на газ и понижаване pH на средата - С. thermosacharolyticum. Понижаване на pH на средата без
образуване на газ до края на наблюдението се установява при развитие на С.thermoaceticum или само потъмняване
на средата - при С.nigrificans.
При анализа задължително се измерва pH на посетите епруветки и непосятата контрола от
същата серия среда.
При отсъствие на растеж в посевките и ако консервното съдържание не се е променило след
термостатиране при (30 ± 1) °С и (55 ± 1) °С се дава заключение, че в изследваната консерва не се
установяват жизнеспособни термофилни анаеробни микроорганизми.
При установяване на растеж върху средите с препосевки се извършва проверка на културата за
развитие при аеробни условия с цел изключване на факултативно-анаеробни микроорганизми. Посевките
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.17, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.18, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.19, БДС 1035-89
Таблица 2
НВБ микроорганизми в консервирани продукти*
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.20, БДС 1035-89
Продължение на табл.2
Таблица 3
Първите четири проби попадат в категория на оценка 1 /виж колона "Категория за оценка'' при 5
анализирани проби, табл.2/. Проба № 5 с трицифрено число 020 попада в категория с оценка 2. Съгласно
регламента количеството на остатъчната микрофлора се отчита за случаите, съответствуващи на
категория с оценка 1. НВБ ще бъде от < 3 /отговарящо на тризначно число 000/ до 7 бр/g продукт
/отговарящо на тризначно число 101/. Следователно при доверителен интервал 95 % микробното число
ще бъде от 1 до 28 броя в 1 g продукт, като най-вероятно е да е между < 3 и 7. При доверителен
интервал 99,8 % съответно границите се увеличават - микробното число ще се движи от 1 до 35 броя в
1 g продукт, като най-вероятно е да бъде между < 3 и 7 броя в 1 g продукт.
5.9.7. Приготвяне на микроскопски препарат от консервното съдържание
Във всички случаи след посевките от материала се прави фина натривка върху чисто предметно
стъкло. Препаратът се прави чрез притискане на стерилно отрязано парче със страни най-малко 2/2 cm
или чрез натриване на парченце, взето от твърдата фаза съгласно т.5.6.2.1, както и с натриване на
материал, взет с бактериологично ухо от консерви с пюреобразно съдържание съгласно т.5.6.2.3.
Препаратите се фиксират 2 до 3 min чрез заливане /или потопяване/ с ксилол или смес от равни
части алкохол и етер. След изливане на сместа препаратите се фиксират на пламък и се оцветяват по
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.21, БДС 1035-89
Грам. Наблюдават се под имерсия с обектив 90 или 100 за наличие и количество на микроорганизми в 20
зрителни полета.
В препарата от консервното съдържание, оцветен по Грам, се преценява количеството на
микроорганизмите в едно зрително поле и се съпоставя с резултата от посевките. Хигиенно добитите /и
непоказващи растеж в посевките от съдържанието им/ консерви не съдържат средно повече от 4 броя
микроорганизми в едно зрително поле. Това изследване не може да се приложи при консерви, в които са
вложени продукти, претърпели млечнокисела ферментация преди стерилизацията /кисело зеле, кисели
краставички и др./.
5.9.8. Преценка на консервите за промишлена стерилност
Консервите са "промишлено стерилни", когато не съдържат бактериални токсини и токсигенни,
патогенни и други микроорганизми, които са опасни за здравето на консуматора, могат да развалят
продукта при съхранението или не се допускат съгласно изискванията на съответните стандарти за
консерви. Най-често се допускат до 10 спори на сапрофитни бацили /аеробни спорообразуващи
пръчици/, които не могат да се развиват в консервата и не я променят при температурите на съхранение.
Консервите се изследват редовно за промишлена стерилност.
5.10. Определяне на абсолютна стерилност
5.10.1. Хранителни среди:
1/ месопептонен бульон с гликоза;
2/ бульон на Кит-Тароци;
3/ месопептонен бульон с разтворима скорбяла;
4/ бульон на Кит-Тароци с дрождев аутолизат, аскорбинова киселина и калциев карбонат
/СаСО 3 /,
5.10.2. Провеждане на анализа
При изследване на консерви за абсолютна стерилност се ПОДГОТВЯ средна проба съгласно т.5.9.6.1
след термостатиране на консервите при (30 ± 1) °С за 30 дни.
От средната проба се посяват по 30 g в:
1/ три колби с по 100 cm3 месопептонен бульон с гликоза, които се инкубират при (30 ± 1) °С за
10 дни;
2/ три колби с по 200 cm3 бульон на Кит-Тароци /регенериран и покрит с парафин-вазелин/,
които се инкубират при (30 ± 1) °С за 10 дни или при (37 ± 1) °С за 5 дни;
3/ три колби с по 100 cm3 месопептонен бульон с разтворима скорбяла, които се инкубират при
(55 ± 1) °С за 72 h при условия, посочени в т.5.9.3;
4/ три колби с по 200 cm3 бульон на Кит-Тароци с дрождев аутолизат, аскорбинова киселина и
калциев карбонат, които се инкубират съгласно т.5.9.4.
5.10.3. Преценка на резултатите
Ако в посевките не се установят микроорганизми, в заключението се посочва, че в изследваната
консерва не се установяват жизнеспособни микроорганизми - мезофили и термофили.
Когато се докажат микроорганизми в някои от посевките, заключението е, че консервите
съдържат жизнеспособни микроорганизми, които се описват по морфология, отнасяне по Грам, наличие
на спори, каталаза, тип на дишане, температурни изисквания на развитие.
5.11. Установяване причините за възникване на развала на консервното съдържание
Изследването на видимо херметични, бомбирали и развалени консерви се провежда, само ако е
необходимо да се установят причините за развалата, като се прилагат методите, описани в т.5.9.
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.22, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.23, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.24, БДС 1035-89
Агарът се прибавя към месопептонния бульон и се разтопява на пара. След това pH се коригира
до 7,4, прибавя се гликозата и топлата среда се филтрира през памук и марля. Стерилизира се на
автоклав при 120 °С за 30 min.
5.12.6. Среда на Кит-Тароци:
1/ месопептонен бульон /по т.5.12.1/ - 1 dm3;
2/ гликоза - 10 g;
3/ говежди или телешки черен дроб - 100 g;
4/ pH на готовата среда - 7,0 - 7,2.
Черният дроб се почиства от фасции и жлъчни канали и се нарязва на късове 5х5 cm. Залива се с
вода и се вари 20 min. След това водата се изхвърля, а черният дроб се нарязва на парченца, всяко с
тегло 1,0 до 2,0 g. Заливат се с вода, алкализирана с 50 g натриев карбонат /Nа 2 СО 3 / на 1 dm3, и се
варят 10 до 15 min. След това парченцата черен дроб се промиват 1 h под душ от вода и накрая няколко
пъти с дестилирана вода. Парченцата се разпределят в колби, заливат се с вода и се стерилизират 20 min
при 120°С. След стерилизацията асептично се взема течност от 1 колба и се определя pH и, ако е
необходимо, се коригира до желаното.
В епруветките се поставят късчета черен дроб на височина 1 до 1,5 cm и се заливат с
месопептонен бульон с гликоза на височина 10 до 12 cm. Стерилизира се на автоклав 20 min при 120 °С.
Проверява се pH на средата преди /на бульона/ и след стерилизацията /в отделна епруветка/.
5.12.7. Среда за доказване на сероводород:
1/ месен екстракт - 20 g;
2/ трипсинов пептон - 10 g;
3/ дрождев екстракт - 5 g;
4/ NaCl - 5 g;
5/ FeSO 4 .7H 2 O - 0,2 g;
6/ Na 2 S 2 O 3 - 0,3 g;
7/ агар - 5 g;
8/ дестилирана вода - 1 dm3;
9/ pH на готовата среда - 7,4.
Към водата се прибавят месният екстракт, пептонът, дрождевият екстракт, натриевият хлорид и
агарът. Загряват се на кохово гърне до пълното им разтваряне. Коригира се pH до 7,6, прибавят се
останалите съставки и сместа се загрява още 10 до 15 min на пара. Разлива се в епруветки в стълб 10 до
12 cm и се стерилизира на автоклав при 120 °С за 30 min.
5.12.8. Месопептонен бульон със скорбяла:
1/ месопептонен бульон /по т.5.12.1/ - 1 dm3;
2/ разтворима скорбяла - 10 g;
3/ pH на готовата среда - 7,2.
Скорбялата се разтваря в 100 cm3 дестилирана вода, долива се до 1 dm3 с месопептонен бульон,
коригира се pH до 7,4, Филтрира се през книжен филтър и се разлива в епруветки по 10 cm3.
Стерилизира се на автоклав при 120 °С за 30 min.
5.12.9. Агар с гликоза и разтворима скорбяла:
1/ пептон, триптон или триптоза - 10 g;
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.25, БДС 1035-89
2/ гликоза - 5 g;
3/ разтворима скорбяла - 5 g;
4/ бромкрезолпурпур - 0,4 %-ен разтвор - 10 cm3;
5/ агар - 15 до 20 g;
6/ дестилирана вода - 1 dm3;
7/ pH на готовата среда - 7,0 - 7,2.
Скорбялата предварително се разтваря в 50 cm3 дестилирана вода и към нея се прибавят
останалите съставки. Към сместа се доливат още 950 cm3 дестилирана вода, загрява се на кохово гърне,
коригира се pH до 7,4, разлива се в колби и се стерилизира на автоклав при 120 °С за 20 min.
5.12.10. Среда на Кит-Тароци с дрождев аутолизат, аскорбинова киселина и калциев карбонат:
1/ среда на Кит-Тароци /по т.5.12.6/ - 1 dm3;
2/ дрождев аутолизат /по т.5.12.17/ - 30 cm3;
3/ стерилизиран СаСО 3 - 5 g;
4/ аскорбинова киселина - 0,1 g;
5/ pH на готовата среда - 7,0 - 7,2.
Средата се приготвя както бульона на Кит-Тароци, но в месопептонния бульон се прибавят още
калциев карбонат, дрождев аутолизат и аскорбинова киселина. Сместа се вари 10 до 15 min и се разлива
в епруветките с черен дроб при постоянно размесване, за да не се утаи калциевият карбонат. Коригира
се pH до 7,4. Средата се стерилизира на автоклав при 120 °С за 30 min.
5.12.11. Месопептонен агар с гликоза и дрождев аутолизат:
1/ месопептонен агар /по т.5.12.5/ - 1 dm3;
2/ гликоза - 1 g;
3/ дрождев аутолизат - 10 cm3;
4/ pH на готовата среда - 7,0 - 7,2.
Към разтопения месопептонен агар се прибавят гликоза и дрождев аутолизат. Средата се
стерилизира в колби на автоклав при 120 °С за 20 min.
5.12.12. Среда за млечнокисели микроорганизми:
5.12.12.1. Течна среда:
1/ дрождев екстракт /по т.5.12.16/ - 200 cm3;
2/ лактоза - 10 g;
3/ пептон - 5 g;
4/ NaCl - 5 g;
5/ бромкрезолпурпур - 0,04 %-ен разтвор - 8 cm3;
6/ дестилирана вода - 800 cm3;
7/ pH на готовата среда - 6,8.
Всички съставки /без индикатора/ се смесват и варят на кохово гърне 15 до 20 min. Коригира се
pH до 7,0, поставя се индикаторът, разлива се в епруветки по 10 cm3 и се стерилизира на автоклав при
120 °С за 30 min.
5.12.12.2. Твърда среда:
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.26, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.27, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.28, БДС 1035-89
Черт.2
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.29, БДС 1035-89
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Стр.30, БДС 1035-89
Край
Предназначен за: Юрофинс ХОС Тестинг България ЕООД Поръчка: 55453 Дата: 13.12.2019 издадена от БИС
Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)