QUY TRÌNH NUÔI CẤY PHÂN LẬP TỤ CẦU VÀNG

NHÓM I

1 VÕ THỊ PHƯƠNG THẢO – 20100206

2 TRẦN VĂN HUẤN – 20100154

3 NGUYỄN THỊ LÊ NA – 20100180

4 NGUYỄN THỊ HUYỀN – 20100158

5 HÀ DUY THÁI – 20100199

6 HOÀNG NGHĨA BẮC – 20100132

7 NGUYỄN THỊ THU HÀ – 20100141

8 LƯU LINH NHÂM – 20100188

9 VƯƠNG KHÁNH HÀ – 20100143

10 BÙI THỊ QUỲNH – 20100197

Dụng cụ:

 Lam kính, ống nghiệm, bông thấm nước.

 Tăm bông
 Các dụng cụ nhuộm gram.

Hoá chất:
  Cồn sát khuẩn.
 Nước muối sinh lý.
 Các loại thuốc nhuộm gram.
 Huyết tương thỏ.
 Oxy già 10 thể tích.

Môi trường:

 Môi trường thạch máu: tạo khuẩn lạc đục, dạng S, thường gây ta máu, có
sắc tố vàng
 Môi trường thạch thường: sau 24h vk phát triển tạo khuẩn lạc dạng S, có
sắc tố vàng nhạt.

Quy trình phân lập

1. Chuẩn bị đủ dụng cụ và hoá chất, môi trường

2. Lấy bệnh phẩm đúng kỹ thuật theo từng bệnh.
3. Nhuộm gram để sơ bộ nhận định hình thể.
4. Nuôi cấy bệnh phẩm vào môi trường phân lập thích hợp, để tủ ấm 37oC
trong 18-24 giờ.
5. Lấy khuẩn lạc nghi ngờ nhuộm soi hình thể.

Bệnh phẩm mủ, dịch [ mẫu đường hô hấp ]: cấy vào môi trường thạch thường,
thạch máu, để tủ ấm 37 độ C/24h, nhận định hình thái khuẩn lạc, xem tính chất
tan máu trên môi trường thạch máu. Xác định các tính chất SV-HH

Lên men đường Manitol: Cấy VK vào môi trường Chapman, để 37 độ C/ 24h.
Nếu màu môi trường chuyển từ đỏ da cam sang vàng chứng tỏ vk có lên men

Tìm men Coalugaze: làm đông huyết tương

Tìm men Catalase: lấy vk cần thử hòa đều vào giọt H2O2. Thấy có sủi bọt =>
Catalse ( + )

Tiêu chuẩn chẩn đoán tụ cầu vàng

Khuẩn lạc dạng S, màu vàng nhẹ

Cầu khuẩn gram dương, đứng thành chum nho.

- Coagulase (+) => pb tụ cầu vs liên cầu

- Mannutol (+) =>
- Catalase ( + ) => sủi bọt => dương tính; để tránh dương tính giả, âm tính
giả cần lưu ý tránh lấy thạch máu, chọn lứa cấy ko đc quá già >18 tiếng
=> âm tính giả; sử dụng que cấy 1 lần tránh sử dụng que
Hình thể và tính chất bắt màu: Cầu khuẩn hình chùm nho, bắt màu gram
dương.

Hình thái khuẩn lạc và tính chất tan máu trên môi trường thạch máu:
Khuẩn lạc nhỏ,tròn, lồi, màu vàng nhạt hoặc sẫm, tan máu.