‫جداسازی و تعیین آلکالوئیدهای افدرین و تترا متیل پیرازین در افدرا سینیکا‬ ‫توسط ‪Stapf‬‬

‫کروماتوگرافی گازی ‪ -‬طیف سنجی جرمی‬

‫هونگ شیا لی‪ ،‬مینگ یو دینگ*‪ ،‬کون لو‪ ،‬و جیان یوان یو‬ ‫ای از آلکالوئیدها را با م‪e‬زیت اس‪ee‬تخراج س‪ee‬اده و تجزی‪ee‬ه و تحلی‪ee‬ل‬
‫پکن‪ ،100084 ،‬چین ‪ Tsinghua،‬دانشگاه‬ ‫‪.‬مستقیم آلکالوئیدها بدون مشتق ارائه دهد‬

‫*‬ ‫نویسنده ای که مکاتبات باید به او ارسال شود‪ :‬ایمیل‬

‫‪dingmy@chem.tsinghua.edu.cn.‬‬

‫‪2023‬‬
‫‪Downloaded from https://academic.oup.com/chromsci/article/39/9/370/353850 by guest on 12 June‬‬
‫خالصه‬ ‫‪ HPLC‬ف‪ee‬از معک‪ee‬وس (‪ )20-17‬و روش ‪ HPLC‬ی‪ee‬ون‪ .‬روش‬
‫جفت یونی (‪ )21،22‬برای تعیین آلکالوئیدها اس‪ee‬تفاده ش‪ee‬ده اس‪ee‬ت‪.‬‬
‫یک روش ساده‪ ،‬حساس و قابل اعتماد با استفاده از‬ ‫مشتق‌س‪ee‬ازی آلکالوئی‪ee‬دها حساس‪ee‬یت را اف‪ee‬زایش می‌ده‪ee‬د و امک‪ee‬ان‬
‫برای )‪ (MS‬طیف سنجی جرمی ‪ (GC) -‬کروماتوگرافی گازی‬ ‫کایرال مخلوط‌های انانتیومر را فراهم می‌کن‪ee‬د ‪ HPLC‬جداسازی‬
‫(‪ .)26-23‬با این حال‪ ،‬اگ‪e‬ر اس‪e‬تانداردهای اف‪e‬درین وج‪e‬ود نداش‪e‬ته‬
‫تعیین همزمان آلکالوئیدهای افدرین و ‪-2،3،5،6‬تترا متیل‬
‫‪.‬باشد‪ ،‬شناسایی آلکالوئیدها دشوار است‬
‫توسعه یافته است‪ Ephedra sinica Stapf .‬در )‪ (TMP‬پیرازین‬
‫ب‪ee‬رای تع‪ee‬یین آلکالوئی‪ee‬دهای ن‪ee‬وع اف‪ee‬درین (‪ GC -27‬روش‌های‬
‫نمونه با اتیل اتر استخراج شده و برای شناسایی و کمی سازی‬ ‫‪ )28‬و مشتق‌شده (‪ )30-29‬در مایعات بیولوژیکی منتشر شده‌اند‪.‬‬
‫ارسال می شود‪ .‬ستون مورد ‪ GC-MS‬بدون مشتق سازی به‬ ‫جی ام ب‪ee‬تز (‪ )31‬و همک‪ee‬اران‪ .‬محت‪ee‬وای آلکالوئی‪ee‬د اف‪ee‬درینتیپ در‬
‫است (‪ 30.0‬متر × ‪ HP-5 250‬یک ‪ GC‬استفاده برای‬ ‫را ب‪ee‬ا اس‪ee‬تفاده از روش ‪ Ma-Huang‬مکمل ه‪ee‬ای غ‪ee‬ذایی ح‪ee‬اوی‬
‫‪،‬میکرومتر × ‪ 0.25‬میکرومتر‬ ‫‪GC‬‬ ‫کایرال تعیین ک‪ee‬رد‪ .‬ام‪ee‬ا اش‪ee‬کال این ب‪ee‬ود ک‪ee‬ه زم‪ee‬ان شستش‪ee‬و‬
‫ب‪e‬رای جداس‪ee‬ازی ک‪ee‬ایرال ‪ GC‬بیشتر از ‪ 60‬دقیقه بود‪ .‬روش‌های‬
‫فنیل متیل سیلوکسان) و گاز حامل هلیم است‪ .‬محدودیت ‪5%‬‬
‫انانتیومرها نیز اخیراً ظاهر شده‌اند (‪ .)32،33‬روش‌ه‪ee‬ایی ک‪ee‬ه از‬
‫به ترتیب ‪ TMP 0.4‬های تشخیص افدرین‪ ،‬سودوافدرین و‬ ‫آلکالوئیدهای مشتق‌شده استفاده می‌کنند‪ ،‬امک‪ee‬ان جداس‪ee‬ازی بس‪ee‬یار‬
‫است‪) .‬نسبت سیگنال به نویز ‪ ng (3‬و ‪ng، 0.7 ng 0.02‬‬ ‫بهتر دیاسترئومرها را ف‪ee‬راهم می‌کنن‪ee‬د‪ ،‬ام‪ee‬ا این روش‌ه‪ee‬ا نی‪ee‬از ب‪ee‬ه‬
‫ثابت شده است که تکرارپذیری کل روش قابل قبول است‬ ‫ی‪ee‬ک پیش تیم‪ee‬ار خس‪ee‬ته‌کننده عص‪ee‬اره‌ها قب‪ee‬ل از تجزی‪ee‬ه و تحلی‪ee‬ل‬
‫‪.‬و بازیابی ها باالی ‪ ٪93‬است )‪(RSD < 2٪‬‬ ‫‪.‬دارند‪ ،‬که منجر به یک منبع احتمالی خطا می‌شود‬
‫یکی دیگر از آلکالوئیدهای مهم‪-2،3،5،6 ،‬تترا متی‪ee‬ل پ‪ee‬یرازین‬
‫که به عن‪e‬وان م‪e‬اده فع‪e‬ال اص‪e‬لی دیگ‪e‬ر طب س‪e‬نتی مهم ‪(TMP)،‬‬
‫‪ Ma-‬چینی ( چوانشیونگ ) گزارش ش‪ee‬ده اس‪ee‬ت‪ ،‬همچ‪ee‬نین دارای‬
‫معرفی‬ ‫و نقش مهمی در تس‪ee‬کین آس‪ee‬م اس‪ee‬ت (‪ .)34‬ب‪ee‬رخی از ‪Huang‬‬
‫به عنوان نوعی روغن فرار ‪ Ma-Huang‬را در ‪ TMP‬مقاالت‬
‫یک داروی سنتی چی‪e‬نی ) ‪Ma-Huang ( Ephedra herba‬‬ ‫(‪ )36-34‬تجزیه و تحلیل کردند‪ ،‬که روش دقیق و ساده ای برای‬
‫‪ Ephedra sinica Stapf, E.‬است ک‪ee‬ه از قس‪ee‬مت ه‪e‬ای ه‪ee‬وایی‬ ‫را در ‪ TMP‬نبود‪ .‬در ی‪ee‬ک مطالع‪ee‬ه قبلی‪ ،‬ما ‪ TMP‬کمی سازی‬
‫و ‪equisetina Bunge, E. intermedia var. Tibetica Stapf‬‬ ‫‪Ephedra‬‬ ‫‪sinica‬‬ ‫‪StapfbyHPLCandGC-‬‬
‫از آن به عنوان معرق‪ ،‬مح‪e‬رک و ض‪e‬د آس‪e‬م ‪E. distachya L.‬‬ ‫شناس‪ee‬ایی و ان‪ee‬دازه‌گیری )‪massspectrometry (MS) (37‬‬
‫استفاده شده است‪ .‬خواص دارویی این گونه افدرا نتیجه محتویات‬ ‫هرگز ب‪ee‬ه ط‪ee‬ور همزم‪ee‬ان ب‪ee‬ا ‪ TMPin Ma-Huang‬کردیم ‪ ،‬اما‬
‫آنه‪ee‬ا در آلکالوئی‪ee‬دهای اف‪ee‬درین (س‪ee‬ه جفت اس‪ee‬تریوایزومر فع‪ee‬ال‬ ‫آلکالوئیدهای افدرین تعیین نشده است‪ .‬در این مطالعه‪ ،‬یک روش‬
‫‪ (PE)، (-)-‬ش‪e‬به اف‪e‬درین ‪ (E)، (+)-‬نوری) اس‪e‬ت‪-)-( :‬اف‪e‬درین‬ ‫ب‪ee‬رای جداس‪ee‬ازی و تع‪ee‬یین همزم‪ee‬ان ‪ GC-MS‬س‪ee‬ریع و حس‪ee‬اس‬
‫‪ (NPE)، (+)- N-‬نورپس‪ee‬ودوافدرین‪ (NE) )، (+)-‬نورف‪e‬درین‬ ‫بدون ‪ Ephedra sinica Stapf‬در ‪ TMP‬آلکالوئیدهای افدرین و‬
‫)‪ (ME‬متی‪ee‬ل اف‪ee‬درین ‪ (-)- N-‬و ‪ (MPE)،‬متی‪ee‬ل پس‪ee‬ودوافدرین‬ ‫مشتق‌سازی ایجاد شد‪ .‬هر دو حالت اکتساب کامل اسکن و ح‪ee‬الت‬
‫تع‪eee‬دادی از روش‌ه‪eee‬ا ب‪eee‬رای تجزی‪eee‬ه و تحلی‪eee‬ل کمی این ‪(1،2).‬‬ ‫برای شناسایی و کمی سازی )‪ (SIM‬نظارت بر یون انتخاب شده‬
‫آلکالوئی‪ee‬دهای اف‪ee‬درین گ‪ee‬زارش ش‪ee‬ده‌اند‪ ،‬مانن‪ee‬د روش‌ه‪ee‬ای غ‪ee‬یر‬ ‫‪ Ephedra sinica Stapf‬در ‪ TMP‬آلکالوئی‪ee‬دهای اف‪ee‬درین و‬
‫کروماتوگرافی (رنگ‌سنجی‪ ،‬تیتریم‪ee‬تری و وزن‌س‪ee‬نجی) (‪،)5-3‬‬ ‫استفاده شد‪ .‬طبق دانش ما‪ ،‬این اولین مطالعه از ن‪ee‬وع خ‪ee‬ود ب‪ee‬رای‬
‫کروم‪ee‬اتوگرافی الی‪ee‬ه ن‪ee‬ازک (‪ ،)6،7‬الک‪ee‬تروفورز م‪ee‬ویرگی (‪-8‬‬ ‫‪ Ephedra sinica‬در ‪ TMP‬تعیین اصل آلکالوئیدهای افدرین و‬
‫‪ .)10‬طی‪eee‬ف س‪eee‬نجی رزون‪eee‬انس مغناطیس‪eee‬ی هس‪eee‬ته ای (‪،)11‬‬ ‫است که به نظ‪ee‬ر می رس‪ee‬د روش ‪ GC-MS‬با استفاده از ‪Stapf‬‬
‫و کروم‪ee‬اتوگرافی )‪ (HPLC‬کروماتوگرافی مایع با ک‪ee‬ارایی ب‪ee‬اال‬ ‫مناسبی برای تجزیه و تحلیل فرآورده های گیاهی چینی‪ ،‬به ویژه‬
‫می تواند وضوح پایه )‪ HPLC (12-16‬یک روش ‪ (GC).‬گازی‬ ‫برای تعداد زیادی نمونه باشد‪ .‬و کنترل کیفیت در‬
‫گیاهان دارویی‬
‫‪.‬تکثیر (فتوکپی) محتوای سرمقاله این مجله بدون اجازه ناشر ممنوع است‬
 ‫مجله علوم کروماتوگرافی‪ ،‬جلد‪ 39 .‬سپتامبر ‪2001‬‬
‫مجله علوم کروماتوگرافی‪ ،‬جلد‪ 39 .‬سپتامبر ‪2001‬‬

‫از سیگما خریداری شد‪ .‬تمام آلکالوئیدها خالص شدند ‪ TMP‬تجربی ‪ ،‬افدرین هیدروکلراید‪ ،‬پسودوافدرین هیدروکلراید و‬
‫مواد‬ ‫با قلیایی شدن و تبلور مجدد قبل از استفاده‪ .‬هر آلکالوئید‬
‫‪GC‬‬
‫نورفدرین هیدروکلراید‪ ،‬نورپسودوافدرین هیدروکلرو‪-‬‬ ‫نشان دادند‪ .‬تمام مواد شیمیایی دیگر به کار‬
‫یک پیک واحد را در کروماتوگرام های‬

‫‪.‬گرفته شده از درجه معرف تحلیلی بودند‬

‫چین خریداری شد و ‪ Si-chuan‬از استان ‪Ephedra sinica Stapf‬‬
‫ت‬ ‫)آکادمی طب سنتی چین‪ ،‬پکن‪ ،‬چین( ‪ De-lin Liu‬وسط پروفسور‬
‫ش‬ ‫‪.‬ناسایی شد‬

‫ت‬ ‫‪ Stapf‬هیه عصاره افدرا سینیکا‬

‫‪2023‬‬
‫‪Downloaded from https://academic.oup.com/chromsci/article/39/9/370/353850 by guest on 12 June‬‬
‫استخراج آلکالوئیدهای افدرین از گیاه ب‪ee‬ا اس‪ee‬تفاده از نس‪ee‬خه اص‪ee‬الح‬
‫ش‬ ‫و همکاران انجام شد‪ .)31( .‬دو گرم از مواد خام ‪ Betz‬ده روش‬
‫د‬ ‫ارویی افدرا سینیکا اس‪ee‬تاپف ب‪ee‬ه قطع‪e‬ات کوچ‪e‬ک خ‪ee‬رد ش‪e‬د و س‪ee‬پس‬
‫غلیظ (‪ 5‬میلی لیتر) به آن اض‪ee‬افه ش‪ee‬د‪ .‬مخل‪ee‬وط ب‪ee‬ا ‪NH 4 OH 60‬‬
‫م‬ ‫با رفالکس ک‪ee‬ردن در حم‪ee‬ام )‪ (1:2، V/V‬یلی لیتر اتانول‪-‬اتیل اتر‬
‫آ‬ ‫ب به مدت ‪ 30‬دقیق‪ee‬ه اس‪e‬تخراج ش‪ee‬د و س‪e‬پس ب‪e‬ه م‪e‬دت ‪ 10‬دقیق‪ee‬ه در‬
‫ح‬ ‫مام اولتراس‪e‬ونیک ق‪e‬رار گ‪e‬رفت‪ .‬اس‪e‬تخراج دو ب‪e‬ار تک‪e‬رار ش‪e‬د‪ .‬ک‪e‬ل‬
‫ح‬ ‫الل آلی با یک اواپراتور چرخش‪ee‬ی در دم‪ee‬ای ‪ 40‬درج‪ee‬ه س‪ee‬انتیگراد‬
‫ت‬ ‫حت خالء ت‪ee‬رکیب و ح‪ee‬ذف ش‪ee‬د‪ ،‬س‪ee‬پس باقیمان‪ee‬ده در ‪ 10‬میلی لی‪ee‬تر‬
‫م‬ ‫تانول حل ش‪ee‬د‪ .‬محل‪ee‬ول مت‪ee‬انول از طری‪ee‬ق ی‪ee‬ک فیل‪ee‬تر غش‪ee‬ایی ‪0.45‬‬
‫م‬ ‫‪.‬فیلتر شد ‪ GC-MS‬یکرومتر برای تجزیه و تحلیل‬

‫‪GC-MS‬‬
‫‪ GC (HP‬شامل یک )‪ GC (MSD‬سیستم آشکارساز انتخابی جرم‬
‫و یک تجزیه و تحلیل داده های )‪ MSD (HP 5973‬یک ‪6890)،‬‬
‫‪.‬بود‪ .‬شرایط دویدن به شرح زیر بود ‪HP ChemStation‬‬
‫میکرومتر × ‪ 0.25‬میکرومتر‪ ٪5 ،‬فنیل متیل سیلوکسان) ‪× 250‬‬
‫ب‬ ‫ا استفاده از برنامه دمایی زیر انجام شد ‪ .‬برنامه در دمای ‪60‬‬
‫د‬ ‫رجه سانتیگراد شروع شد و سپس با دمای ‪ 25‬درجه س‪ee‬انتیگراد در‬
‫د‬ ‫قیقه ت‪e‬ا ‪ 100‬درج‪e‬ه س‪e‬انتیگراد اف‪e‬زایش ی‪e‬افت‪ .‬س‪e‬پس ب‪e‬ا ‪ 0.5‬درج‪e‬ه‬
‫س‬ ‫انتیگراد در دقیقه به ‪ 110‬درجه سانتیگراد و در نهایت با ‪1.0‬‬
‫د‬ ‫‪.‬رجه سانتیگراد در دقیقه به ‪ 120‬درجه سانتیگراد افزایش یافت‬
‫درجه ‪ MS 250‬دمای انژکتور ‪ 280‬درجه سانتی گراد‪ ،‬دمای منبع‬
‫س‬ ‫بود‪ eV .‬انتی گراد و انرژی یونیزاسیون برخورد الکترون ‪70‬‬
‫س‬ ‫میلی لی‪ee‬تر در دقیق‪ee‬ه ب‪ee‬ا ‪ (He) 1.0‬رعت جری‪ee‬ان س‪ee‬تون گ‪ee‬از حامل‬
‫ن‬ ‫‪ ( m/z‬سبت تقسیم ‪ 30:1‬بود‪ .‬در این مطالعه از حالت اس‪ee‬کن کامل‬
‫اس‪e‬تفاده ش‪e‬د‪ .‬آزمایش‌ه‪e‬ای شناس‪e‬ایی تحت ‪ SIM‬و حالت )‪35-400‬‬
‫و تجزیه و تحلیل کمی )‪ ( m/z 35-400‬الت اکتساب کامل اسکنشکل ‪ .1‬کروماتوگرام عصاره های افدرا هربا ‪( :‬الف) کروماتوگرام ح‬
‫‪ (D) 136.‬و ‪ (B) 58، (C) 44‬برابر با ‪ m/z‬و یون عصاره برای ‪ TIC‬د‬ ‫و ‪ 136‬به عنوان ‪ m/z 58، 44‬انجام شد‪ .‬یون های ‪ SIM‬ر حالت‬
‫ی‬ ‫ون های انتخابی استفاده شدند‪ .‬نمونه های ‪ 1‬میکرولیتری به‬
‫‪.‬صورت دستی تزریق شد‬

‫‪371‬‬
‫ن‬ ‫تایج و بحث‬

‫و ‪ E، PE، NE، NPE‬شناسایی‬

‫‪TMP‬‬
‫محلول در ‪ Ephedra sinica Stapf‬عصاره‬
‫م‬ ‫تزری‪ee‬ق ش‪ee‬د و تحت ح‪ee‬الت ‪ GC-MS‬تانول به‬
‫ا‬ ‫سکن کامل مورد تجزیه و تحلیل قرار گ‪ee‬رفت‪.‬‬
‫ک‬ ‫‪A‬در ش‪ee‬کل ‪ (TIC) 1‬روم‪ee‬اتوگرام ی‪ee‬ون کل‬
‫ن‬ ‫شان داده شده است‪ .‬حساسیت و گزینش پذیری‬
‫ب‬ ‫ا استفاده از پروفایل های یون استخراج شده‬
‫ا‬ ‫بسیار بهب‪ee‬ود ی‪ee‬افت‪ .‬ب‪ee‬ه عن‪ee‬وان مث‪ee‬ال‪ TIC ،‬ز‬
‫‪.‬در عصاره اصلی )‪ (B‬و ‪ Ephedra herba‬عصاره )‪ (A‬در ‪ E‬شکل ‪ .2‬طیف جرمی ه‬ ‫ب‪e‬رای ‪ m/z 44‬نگام اس‪e‬تفاده از ی‪e‬ک ی‪e‬ون در‬

‫‪2023‬‬
‫‪Downloaded from https://academic.oup.com/chromsci/article/39/9/370/353850 by guest on 12 June‬‬
‫ت‬ ‫حساسیت پیک های ‪A،‬جزیه و تحلیل شکل ‪1‬‬
‫برای تجزیه و تحلیل‪ ،‬پیک ‪( 5‬که انجام نشد ‪ 3 m/z 136‬و ‪ 4‬به شدت بهبود یافت‪ .‬هنگام استفاده از استخراج در‬

‫‪371‬‬

‫ظاهر می شود زیرا محتوای جریان) در کروم‪ee‬اتوگرام ‪ TIC‬در‬ ‫ی‪eee‬افت ش‪eee‬د‪ .‬مع‪eee‬ادالت ‪ TMP‬میکروگ‪ee‬رم در میلی لی‪ee‬تر ب‪ee‬رای‬
‫هنگ‪eee‬ام اس‪ee‬تفاده از ‪D).‬ش‪eee‬کل ‪ (1‬ب‪eee‬ا ش‪eee‬دت ب‪eee‬اال وج‪ee‬ود داشت‬ ‫‪:‬رگرسیون به صورت زیر بود‬
‫برای تجزیه و تحلیل‪ ،‬تنها پیک های ‪ 1‬و ‪theionat m/z 58 2‬‬
‫‪B‬همانطور که در ش‪ee‬کل ‪ (1‬شناسایی و به خوبی از هم جدا شدند‬
‫)‪y = (1.46 × 10 7 ) x – (2.80 × 10 6 ) (r = 0.9985‬‬
‫در مقایسه با زمان نگهداری اس‪ee‬تانداردها‪). ،‬نشان داده شده است‬
‫و ‪ PE، E، NE، NPE‬پیک های ‪ 4 e،3 e،2 e،1‬و ‪ 5‬به ترتیب با‬
‫‪.‬مطابقت دارند ‪TMP‬‬ ‫برای‬ ‫‪ E. 1 y = (1.76 × 10 7 ) x - (3.31 × 10 6‬معادله‬
‫شناسایی بیشتر با مقایسه طیف جرمی عصاره ه‪ee‬ا ب‪ee‬ا ترکیب‪ee‬ات‬
‫طی‪e‬ف ‪ A‬معتبر تایید ش‪e‬د‪ .‬در طی‪e‬ف ج‪e‬رمی (ش‪e‬کل ‪ ،)4-2‬ش‪e‬کل‬
‫طی‪ee‬ف ج‪ee‬رمی ت‪ee‬رکیب معت‪ee‬بر ب‪ee‬ود‪ B .‬جرمی عصاره ها و شکل‬ ‫‪ PE‬برای معادله )‪) (r = 0.9970‬‬ ‫‪. 2 y = (4.41 × 10‬‬
‫‪ E،‬الگوهای طیف ج‪e‬رمی قله‌ه‪e‬ای ‪ ،3 e،2‬و ‪ 5‬ب‪e‬ه ت‪e‬رتیب مش‪ee‬ابه‬
‫بودند‪ .‬همچنین الگوهای طیف جرمی پیک ‪ 1‬و ‪ TMP 4‬و ‪NE‬‬ ‫‪4‬‬
‫برای )‪) x - (2.14 × 10 4 ) (r = 0.9992‬‬ ‫معادله‬
‫‪.‬بود (شکل حذف شده است) ‪ NPE‬و ‪ PE‬به ترتیب مشابه‬
‫و ‪، E، PE، NE‬همانطور که در طیف جرمی نش‪ee‬ان داده شد‬
‫را نشان دادند ‪ .‬به عنوان اوج پایه و ‪NPE [MC 6 H 5 CHOH ] +‬‬ ‫‪TMP. 3‬‬
‫به ترتیب به عنوان قله پایه‪ .‬سایر پیک های ‪ [M] + .‬تولید ‪TMP‬‬
‫‪.‬و ‪ 42‬نشان دادند ‪ m/z 77، 105، 117‬در ‪ PE‬و ‪ E‬قوی‬ ‫غلظت هر ترکیب ‪ x‬مساحت پیک هر ترکیب و ‪ y‬که در آن‬
‫هنگ‪ee‬ام اس‪ee‬تفاده از ح‪ee‬الت س‪ee‬یم ک‪ee‬ارت ب‪ee‬رای تجزی‪ee‬ه و تحلی‪ee‬ل‬ ‫است‪ .‬حد تشخیص با )‪(mg/mLforEandPE,µg/mLforTMP‬‬
‫و ‪ 136‬به عنوان یون های ‪ m/z 58، 44‬عصاره ها‪ ،‬یون های‬ ‫‪:‬فرمول محاسبه شد‬
‫انتخابی استفاده شدند‪ .‬تقریبا ً دو مرتب‪ee‬ه ب‪ee‬ا حساس‪ee‬یت بیش‪ee‬تر ب‪ee‬رای‬
‫تجزیه و تحلیل نسبت به روش اسکن کام‪ee‬ل ک‪ee‬ه قبالً توض‪ee‬یح داده‬ ‫‪3SD/b‬‬ ‫معادله ‪4‬‬
‫بنابراین‪ ،‬تجزیه و ‪).‬بود ‪A‬شکل مشابه شکل ‪ (1‬شد به دست آمد‬
‫‪.‬در حالت سیم کارت انجام شد ‪ GC-MS‬تحلیل کمی توسط‬
‫‪ Ephedra sinica Stapf‬در ‪ TMP‬و ‪ E، PE،‬کمی سازی‬
‫تشخیص در حالت برخورد الکترون و حالت سیم ک‪ee‬ارت انج‪ee‬ام‬
‫و ‪ 136‬به عنوان یون های انتخابی ‪ m/z 58، 44‬شد‪ .‬یون های‬
‫‪ Ephedra sinica‬در ‪ TMP‬و ‪ E، PE‬استفاده شدند‪ .‬محتویات‬
‫از ناحی‪ee‬ه پی‪ee‬ک مربوط‪ee‬ه ب‪ee‬ا اس‪ee‬تفاده از مع‪ee‬ادالت خطی ‪Stapf‬‬
‫ان‪eee‬دازه‌گیری ش‪eee‬د‪ .‬ب‪eee‬رای این منظ‪eee‬ور‪ ،‬محلول‌ه‪eee‬ای اس‪eee‬تاندارد‬
‫در غلظت‌های متغیر به ترتیب سه ‪ TMP‬و ‪ E، PE،‬نمونه‌های‬
‫بار اجرا شد‪ .‬میانگین مساحت پیک محاسبه و ترسیم شد و تحلیل‬
‫رگرس‪ee‬یون خطی انج‪ee‬ام ش‪ee‬د‪ .‬رواب‪ee‬ط خطی بین غلظت این س‪ee‬ه‬
‫ت‪ee‬رکیب و ن‪ee‬واحی پی‪ee‬ک مربوط‪ee‬ه در مح‪ee‬دوده غلظت ‪ 15.0‬ت‪ee‬ا‬
‫و ‪ 0.3‬ت‪ee‬ا ‪ PE 13.2‬و ‪ 1520 E‬میکروگرم در میلی لیتر ب‪ee‬رای‬
 ‫مجله علوم کروماتوگرافی‪ ،‬جلد‪ 39 .‬سپتامبر ‪2001‬‬
‫انحراف معیار محاسبه شده ب‪ee‬ا تزری‪ee‬ق پنج تک‪ee‬رار ‪ SD‬که در آن‬ ‫این روش بازیابی و حساسیت خوبی داشت و به راح‪ee‬تی می‌ت‪ee‬وان‬
‫ا‬ ‫از آن به عنوان ی‪ee‬ک روش کن‪ee‬ترل کیفی ب‪ee‬رای‬
‫ز‬ ‫‪ .‬گیاهان دارویی حاوی افدرین استفاده کرد‬
‫دنباله دار ‪ NPE‬و ‪ NE‬از آنجا که قله های‬
‫م‬ ‫‪ Ephedrasinica‬در ‪ NPE‬و ‪ NE‬و محتوای‬
‫ح‬ ‫بودند‬
‫ل‬ ‫مجله علوم کروماتوگرافی‪ ،‬جلد‪ 39 .‬سپتامبر‬
‫و‬
‫ل‬ ‫‪2001‬‬

‫ک‬ ‫در این ‪ NPE‬و ‪، NE‬بسیار پایین بود ‪Stapf‬‬

‫م‬ ‫‪.‬مطالعه اندازه گیری نشدند‬
‫ت‬
‫ر‬
‫ی‬
‫‪.‬در عصاره معتبر )‪ (B‬و ‪ Ephedra herba‬عصاره )‪ (A‬در ‪ NE‬شکل ‪ .3‬طیف جرمی ن‬ ‫نتیجه‬

‫مق‪eee‬دار ش‪eee‬یب منح‪eee‬نی ‪ b‬غلظت منح‪eee‬نی کالیبراس‪eee‬یون اس‪eee‬ت و‬ ‫‪ GC-‬ب‪ee‬ه ط‪ee‬ور همزم‪ee‬ان توسط ‪ TMP‬آلکالوئیدهای اف‪ee‬درین و‬
‫کالیبراسیون است‪ .‬این فرمول یکی از الگوریتم های ممکن برای‬ ‫بدون پیش درمانی خسته کننده‪ ،‬مانند مش‪ee‬تق س‪ee‬ازی‪ ،‬تع‪ee‬یین ‪MS‬‬
‫محاسبه حد تشخیص است که به عنوان مقدار آنالیت تعریف ش‪ee‬ده‬ ‫شدند‪ .‬هر دو حالت اکتساب اسکن کامل و حالت سیم کارت برای‬
‫اس‪ee‬ت ک‪ee‬ه نس‪ee‬بت س‪ee‬یگنال ب‪ee‬ه ن‪ee‬ویز ‪ 3‬را ارائ‪ee‬ه می ده‪ee‬د‪ .‬ح‪ee‬دود‬ ‫‪ Ephedra sinica Stapf‬شناسایی و تعیین کمیت آلکالوئیدها در‬
‫‪ ng‬ب‪ee‬ه ت‪ee‬رتیب ‪ 0.7 e ،0.4‬و ‪ TMP 0.02‬و ‪ E، PE‬تش‪ee‬خیص‬ ‫استفاده شد‪ .‬این یک روش ساده‪ ،‬قابل اعتماد و سریع برای تعیین‬
‫‪.‬بود‪ ، .‬در حالت سیم کارت‬ ‫‪.‬اجزای فعال در گیاهان دارویی حاوی افدرین بود‬
‫نمونه از طریق فیل‪ee‬تر غش‪ee‬ایی ‪ 0.45‬میکروم‪ee‬تری فیل‪ee‬تر ش‪ee‬د و‬
‫برای تشخیص ‪ SIM‬تزریق شد که در حالت ‪ GC-MS‬سپس به‬
‫‪ Ephedra‬در ‪ TMP‬و ‪ E، PE‬انجام شد‪ .‬محتویات محاسبه شده‬ ‫قدردانی‬
‫به ترتیب ‪ 0.65‬گرم در ‪ 100‬گرم‪ 0.41 ،‬گرم در ‪sinica Stapf‬‬
‫‪ 100 E، PE‬گرم و ‪ 0.03‬گرم در ‪ 100‬گرم بود‪ .‬مقادیر مناسب‬ ‫‪ Tsinghua‬این تحقیق توسط صندوق تحقیقات بنی‪ee‬ادی دانش‪ee‬گاه‬
‫استاندارد به نمونه با محتوای ترکیب شناخته شده اضافه ‪ TMP‬و‬ ‫‪ De-lin Liu‬پشتیبانی شد‪ .‬نویسندگان همچنین مایلند از پروفسور‬
‫شد و کل با روشی که قبال ذکر شد آنالیز ش‪ee‬د‪ .‬بازی‪ee‬ابی ب‪ee‬رای ه‪ee‬ر‬ ‫‪.‬برای شناسایی مواد خام گیاهی تشکر کنند‬
‫ج‬
‫ز‬
‫ء‬
‫منابع‬
‫ب‬
‫ه‬ ‫‪1.‬‬ ‫تی کی هوانگ‪ .‬کتابچه راهنمای ترکیب و‬
‫‪ (II).‬عم‪e‬ل دارویی طب س‪e‬نتی چی‪e‬نی رایج‬
‫ع‬ ‫مطبوعات فناوری پزشکی چین‪ ،‬پکن‪،‬‬
‫ن‬ ‫‪.‬چین‪ ،1994 ،‬صفحات ‪31-1624‬‬
‫و‬ ‫داروی گیاهی ‪ A. Gamble.‬و ‪2. D. Bensky‬‬
‫ا‬ ‫‪ Materia Medica . Eastland Press,‬چینی‬
‫ن‬ ‫‪Seattle, WA, 1986, pp. 32-40.‬‬
‫‪3. YZ Li، YQ Sun، WD Tang‬‬
‫‪ HQ Jiang.‬و‬
‫ن‬ ‫بهبود روش های تعیین آلکالوئیدهای‬
‫س‬ ‫‪.‬افدرین در نسخه ترکیبی‬
‫‪.‬در عصاره اصلی )‪ (B‬و ‪ Ephedra herba‬عصاره )‪ (A‬در ‪ TMP‬شکل ‪ .4‬طیف جرمی ب‬
‫چانه‪ .‬تجارت پت‪ .‬پزشکی ‪( 15-12 e:17‬‬
‫ت‬
‫‪)1995.‬‬
‫درص‪ee‬د می‪ee‬انگین بین مق‪ee‬ادیر ان‪ee‬دازه گ‪ee‬یری ش‪ee‬ده و مق‪ee‬ادیر واقعی‬
‫ب‪ee‬ه ت‪ee‬رتیب ‪ TMP ،٪105‬و ‪ E، PE‬بیان شد‪ .‬می‪ee‬انگین بازی‪ee‬ابی‬ ‫تعیین استخراجی‪ CM Legua. -‬و ‪4. PC Falco، AS Cabeza،‬‬
‫‪ ٪106‬و ‪ ٪93‬بود‪ .‬تکرارپ‪ee‬ذیری ک‪ee‬ل روش ب‪ee‬ا اس‪ee‬تفاده از نمون‪ee‬ه‬ ‫اسپکتروفتومتری افدرین با سدیم ‪-1،2‬نفتوکینون‪-4-‬‬
‫مورد آزم‪e‬ایش ق‪e‬رار گ‪e‬رفت‪ Ephedra sinica Stapf .‬عصاره‬ ‫‪ Lett. 27:‬سولفونات در فرموالسیون های دارویی‪ .‬مقعدی‬
‫ب‪e‬ه ‪ TMP‬و ‪ E، PE،‬برای )‪ (RSDs‬انحرافات استاندارد نسبی‬ ‫‪531-47‬‬ ‫‪(1994).‬‬
‫بود‪ .‬نتایج نشان داد که )‪٪ ( n = 4‬ترتیب ‪ ٪1.2 e،٪1.5‬و ‪2.0‬‬
‫‪373‬‬
‫‪5. X. Xin.‬‬‫با استفاده از ‪ Di-bi-ye‬تعیین هیدروکلراید افدرین در‬ ‫که توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی )‪ (MaHuang‬سینیکا‬
‫‪.‬گاو نر فارم‪ UV. )1987( 75-74 :22 .‬اسپکتروفتومتر‬ ‫باال تعیین می شود‪ .‬جی‪ .‬فارم‪ .‬علمی ‪( 53-1547 e:87‬‬
‫‪ San-‬اس ام لی‪ .‬تعیین آلکالوئیدهای افدرین و التریل در ‪6.‬‬ ‫‪)1998.‬‬
‫با کروماتوگرافی الیه نازک‪ .‬چانه‪ .‬تجارت پت‪niutang .‬‬ ‫استفاده از روش پاول‪ KY Ni. ،‬و ‪19. HX Liang، RJ Yu، QH Yang،‬‬
‫‪.‬پزشکی ‪)1992( 12-11 :14‬‬ ‫جداسازی افدرین و سودوافدرین ‪ HPLC -‬ترکیب فاز متحرک‬
‫تعیین ‪ Y. Zhang.‬و ‪7. Y. Cheng، Q. Feng، HR Wang، YH Gao،‬‬ ‫را بیش از حد بهینه کرد‪ .‬اکتا فارم‪ .‬سینیکا ‪( 52-49 e:26‬‬
‫با استفاده از طیف ‪ Ma-huang-tang‬آلکالوئید افدرین در‬ ‫‪)1990.‬‬
‫سنجی الیه نازک‪ .‬چانه‪ .‬تجارت پت‪ .‬پزشکی ‪( 17-15 e:12‬‬ ‫تعیین افدرین‪ KY Ni. ،‬و ‪20. HX Liang، RJ Yu، QH Yang،‬‬
‫‪)1990.‬‬ ‫‪ HPLC.‬توسط ‪ Jiu-fen San‬پسودوافدرین و استریکنین در‬
‫‪.‬اکتا فارم‪ .‬سینیکا ‪)1990( 53-849 : 25‬‬
‫‪8.‬‬ ‫سیکلودکسترین به ‪ β-‬ز آتورکی و س فنالی‪ .‬استفاده از پلیمر‬
‫ارزیابی کیفیت دوازده گونه ‪ ZC Lou.‬و ‪21. JS Zhang، Z. Tian،‬‬
‫‪. J.‬عنوان انتخابگر کایرال در الکتروفورز مویرگی‬

‫‪2023‬‬
‫‪Downloaded from https://academic.oup.com/chromsci/article/39/9/370/353850 by guest on 12 June‬‬
‫‪:‬اکتا فارم‪ .‬سینیکا ‪ (Ma-huang). 24‬افدرا چینی‬
‫‪.‬کروماتوگر‪)1994( 46-137 :680 .‬‬ ‫‪865-71 (1989).‬‬
‫‪22. K. Sagara، T. Oshima،‬‬ ‫تعیین همزمان ‪ TA Misaki.‬و‬
‫الکتروفورز ‪ SJ Sheu.‬و ‪9. YM Liu‬‬ ‫تعیین آلکالوئیدهای افدرین با‬
‫نورفدرین‪ ،‬سودوافدرین‪ ،‬افدرین و متیل فدرین در فرآورده‬
‫‪.‬کروماتوگر‪. J. )1993( 23-219 :637 .‬مویرگی‬
‫و شرقی توسط کروماتوگرافی ‪ Ephedrae herba‬های دارویی‬
‫‪10.‬‬ ‫‪ L.‬و ‪M. Chicharro، A. Zapardiel، E. Bermejo، JA Perez‬‬
‫مایع با کارایی باال جفت یونی‪ .‬شیمی‪ .‬فارم‪ .‬گاو نر‬
‫هرناندز تعیین مستقیم افدرین و نورفدرین در ادرار انسان با‬
‫‪31: 2359-65 (1983).‬‬
‫کروماتوگر‪. J. 108-103 :622 .‬الکتروفورز ناحیه مویرگی‬
‫جداسازی انانتیومرهای نورفدرین توسط ‪ ZH Yun.‬و ‪23. ZX Wang‬‬
‫‪)1993(.‬‬
‫‪HPLC‬‬ ‫‪. J.‬با مشتقات اوره به عنوان فاز ثابت کایرال‪ .‬چانه‬
‫‪11.‬‬ ‫تجزیه و تحلیل کمی و کیفی ‪ K. Fujita.‬و ‪K. Yamasaki‬‬
‫‪.‬کروماتوگر‪)1998( 67-265 :16 .‬‬
‫با رزونانس ‪ Ephedrae Herba‬آلکالوئیدهای افدرا در‬
‫‪24.‬‬ ‫تجزیه و ‪ X. Luo.‬و ‪G. Shao، F. Wu، DS Wang، R. Zhu،‬‬
‫مغناطیسی هسته ای کربن‪ .13-‬شیمی‪ .‬فارم‪ .‬گاو نر ‪:27‬‬
‫در پالسما ‪ ( d )-pseudoephedrine‬افدرین و‪ ( l )-‬تحلیل کمی‬
‫‪)1979( 47-43.‬‬
‫توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی باال با تشخیص‬
‫‪12.‬‬ ‫‪JA Hurlbut، JR Carr، ER Singleton، KC Faul، MR Madson،‬‬
‫‪.‬فلورسانس‪ .‬اکتا فارم‪ .‬سینیکا ‪)1995( 89-384 :30‬‬
‫پاکسازی استخراج فاز جامد و ‪ TL Thomas.‬و ‪JMStorey،‬‬
‫‪25.‬‬ ‫تجزیه و تحلیل نمونه های ‪ CS Chien.‬و ‪YP Chen، MC Hsu،‬‬
‫کروماتوگرافی مایع با تشخیص فرابنفش آلکالوئیدهای افدرین‬
‫پزشکی قانونی با استفاده از مشتق سازی قبل از ستون با‬
‫بین المللی ‪. J. AOAC. 27-1121 e:81‬در محصوالت گیاهی‬
‫(‪-9(-1-)+‬فلورنیل) اتیل کلروفرمات و کروماتوگرافی مایع‬
‫‪)1998(.‬‬
‫کروماتوگر‪. J. ( 40-135 e:672 .‬با تشخیص فلورمتری‬
‫‪13.‬‬ ‫کروماتوگرافی مایع با کارایی باال تعیین ‪ CS Mok.‬و ‪OW Lau‬‬
‫‪)1994.‬‬
‫مواد فعال در شربت های سرماخوردگی با تشخیص هدایت‬
‫‪26.‬‬ ‫وضوح انانتیومرهای مشتق سازی کایرال ‪ KR Cui.‬جین و ‪X.‬‬
‫‪.‬کروماتوگر‪. J. )1995( 54-45 :693 .‬سنجی غیر مستقیم‬
‫و کروماتوگرافی مایع معکوس‪ (+) -FLEC .‬استفاده از افدرین‬
‫‪14.‬‬ ‫‪ S. Kazmierczak.‬و ‪SS Li، PJ Gemperline، K. Briley،‬‬
‫‪.‬اکتا فارم‪ .‬سینیکا ‪)1994( 27-122 :29‬‬
‫شناسایی و کمی سازی داروهای سوء مصرف در ادرار با‬
‫‪27.‬‬ ‫تعیین آلکالوئیدهای ‪ SZ Chen.‬و ‪KR Cui، Y. Zhou، CJ Zhang،‬‬
‫‪. J.‬استفاده از روش نابودی رتبه تعمیم یافته تفکیک منحنی‬
‫شیمی‪ .‬جی‪ .‬چین‪ GC-MS. .‬فورافدرین در ادرار توسط‬
‫‪. B (Biomed.‬کروماتوگر‬
‫‪:‬دانشگاه ‪13‬‬
‫‪Appl.) 655: 213-23 (1994).‬‬
‫‪1553-54 (1992).‬‬
‫‪15. X. Jin، S. Wang‬‬ ‫تجزیه و تحلیل کمی ادرار ‪ CJ Zhang.‬و‬
‫‪28. M. Chang، WG Wang،‬‬ ‫تعیین افدرینین پنج ‪ LQ Zhang.‬و‬
‫اکتا فارم‪ .‬سینیکا ‪ HPLC. ( 79-375 e:29‬افدرینزین توسط‬
‫داروی ثبت اختراع چینی با کروماتوگرافی گازی‪ .‬چانه‪.‬‬
‫‪)1994.‬‬
‫تجارت‬
‫‪16. C. Imaz، D. Carreras، R. Navajas، AF Rodriguez، J.‬‬
‫‪.‬پت‪ .‬پزشکی ‪)1989( 12-11 :11‬‬
‫کورتس‪ .‬تعیین افدرین در ادرار با ‪Mayner، andR.‬‬
‫شناسایی افدرین ها از ‪ SE Hendrikz.‬و ‪29. PJ van der Merwe‬‬
‫کروماتوگر‪. J. :631 .‬کروماتوگرافی مایع با کارایی باال‬
‫‪. B (Biomed.‬کروماتوگر ‪. J.‬مشتقات دی سولفید کربن آنها‬
‫‪)1993( 205-201.‬‬ ‫‪Appl.) 663: 160-66 (1995).‬‬
‫مطالعات در مورد کیفیت ‪ TY Wang.‬و ‪17. WY Yang، MJ Yang،‬‬ ‫شناسایی افدرین ‪ MZ Wang.‬و ‪30. L. Li، JF Cui، KR Cui، Y. Zhou،‬‬
‫نسخه علوم( ‪ Mahuang. J. Ningxia Univ.‬داروهای چینی‬ ‫و آنالوگ های آن در ادرار با کروماتوگرافی گازی اکتا فارم‪.‬‬
‫‪) )1999( 71-70 :20.‬طبیعی‬ ‫‪.‬سینیکا ‪)1990( 71-66 :26‬‬
‫بی جی گورلی‪ ،‬پی وانگ و اس اف گاردنر‪ .‬محتوای ‪18.‬‬ ‫جی ام بتز‪ ،‬ام ال گی‪ ،‬ام ام موسائوبا و اس‪ .‬آدامز‪ .‬تعیین ‪31.‬‬
‫آلکالوئید از نوع افدرین مکمل های غذایی حاوی افدرا‬ ‫آلکالوئیدهای نوع افدرین با گاز کروماتوگرافی کایرال در‬
 ‫مجله علوم کروماتوگرافی‪ ،‬جلد‪ 39 .‬سپتامبر ‪2001‬‬
‫‪ Ma Huang . J. AOAC Int. 80:‬مکمل های غذایی حاوی‬
‫‪303-15 (1997).‬‬
‫‪32. MJ LeBelle، C. Savard، BA Dawson، DB Black، LK Katyal،‬‬
‫شناسایی و تعیین کایرال افدرین‪ AW By. ،‬و ‪F. Zrcek‬‬
‫سودوافدرین‪ ،‬مت آمفتامین و متکاتینون با کروماتوگرافی‬
‫‪.‬گازی و عقل مغناطیسی هسته ای‬
‫‪.‬پزشکی قانونی بین المللی ‪)1995( 23-215 :71‬‬
‫کروماتوگرافی گازی دو بعدی ‪ H. Wan.‬و ‪33. X. Wang، C. Jia،‬‬

‫‪373‬‬

‫‪.‬برای جداسازی انانتیومر افدرین و فنامینوم و متابولیت آنها‬

‫‪2023‬‬
‫‪Downloaded from https://academic.oup.com/chromsci/article/39/9/370/353850 by guest on 12 June‬‬
‫‪. B (Biomed. Appl.) 653: 98-101 (1994).‬کروماتوگر ‪J.‬‬
‫‪34. JY Sun.‬‬ ‫‪ Ma-Huang.‬مطالعات بر روی اجزای فعال جدید‬
‫‪.‬چانه‬
‫‪.‬تجارت داروهای گیاهی ‪)1983( 11-9 :14‬‬
‫چانه‪ Ma-Huang. .‬جیا‪ .‬مطالعات روی روغن فرار ‪35. YY‬‬ ‫گاو نر‬
‫تجارت‬
‫‪.‬پزشکی ‪)1987( 11-10 :12‬‬
‫مطالعات ‪ CG Cheng.‬و ‪36. YY Jia، L. Zhang، JH Liu، FM Dong،‬‬
‫و افدرا ‪ Stapf‬بر روی روغن های فرار افدرا سینیکا‬
‫‪equisetina Bge .‬‬
‫‪. J. 24: 402-404 (1989).‬چانه‪ .‬فارم‬
‫تجزیه و تحلیل تترمتیل پیرازین در ‪ MY Ding.‬و ‪37. K. Lv، HX Li،‬‬
‫با کروماتوگرافی گازی ‪ -‬طیف سنجی ‪Ephedrae herba‬‬
‫‪. A‬کروماتوگر ‪. J.‬جرمی و کروماتوگرافی مایع با کارایی باال‬
‫‪878:‬‬
‫‪147-52 (2000).‬‬

‫‪.‬نسخه خطی در ‪ 23‬مه ‪ 2001‬پذیرفته شد‬

‫‪375‬‬