‫‪Tonje Gottenberg Skaalvik‬‬

‫بررسی استخراج الکتروممبران به عنوان آماده سازی نمونه در یک آزمایشگاه معمول بالینی‬

‫پایان نامه ارسال شده برای درجه دکتری فلسفه‬

‫گروه داروسازی‬
‫دانشکده ریاضی و علوم طبیعی‬

‫گروه فارماکولوژی بالینی‬

‫بیمارستان دانشگاه سنت اوالو‬

‫‪2023‬‬
‫‪Received: 8 February 2023‬‬ ‫‪Revised: 14 April 2023‬‬ ‫‪Accepted: 24 April 2023‬‬
‫‪DOI: 10.1002/dta.3487‬‬

‫تحقیق‬

‫تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار با استخراج الکتروغشایی ویال رسانا و کروماتوگرافی مایع فوق بحرانی با کارایی فوق العاده باال طیف‬
‫سنجی جرمی پشت سر هم‬

‫‪Tonje Gottenberg Skaalvik 1,2 |Elisabeth Leere Øistad 2,3‬‬ ‫|‬

‫‪2،4‬‬ ‫‪1‬‬
‫استیگ پدرسن‪-‬بجرگارد‬ ‫|‬ ‫سولفرد هگستاد‬

‫خالصه‬
‫جداسازی و تعیین کمیت انانتیومرهای آمفتامین معموًال برای تمایز بین مصرف آمفتامین تجویزی‬
‫(بیشتر اس‪-‬آمفتامین) و اشکال غیرقانونی دارو (راسمیت) استفاده می شود‪ .‬در این مطالعه‪،‬‬
‫استخراج الکتروممبران با نمونه اولیه ویال‌های رسانا با کروماتوگرافی مایع فوق بحرانی با‬
‫و سمفتامین در ادرار ترکیب شد‪ R- .‬برای تعیین کمیت )‪ (UHPSFC-MS/MS‬عملکرد فوق‌العاده باال‬
‫آمفتامین از ‪ 100‬میکرولیتر ادرار‪ ،‬رقیق شده با ‪ 25‬میکرولیتر محلول استاندارد داخلی و ‪175‬‬
‫متشکل )‪ (SLM‬میکرولیتر ‪ 130‬میلی‌موالر اسید فرمیک‪ ،‬از روی یک غشای مایع پشتیبانی شده‬
‫‪.‬از ‪ 9‬میکرولیتر از مخلوط ‪( 1:1‬وزنی‪/‬وزنی) استخراج شد‬
‫اتر‪2-‬‬ ‫به فاز پذیرنده حاوی )‪ (DEHPi‬و بیس (‪-2‬اتیل هگزیل) فسفیت )‪ (NPOE‬نیتروفنیل لوکتیل‬
‫‪ 300‬میکرولیتر ‪ 130‬میلی موالر اسید فرمیک‪ .‬استخراج با اعمال ولتاژ ‪ 30‬ولت به مدت ‪15‬‬
‫با فاز ثابت کایرال به دست ‪ UHPSFC-MS/MS‬دقیقه تسهیل شد‪ .‬جداسازی انانتیومر با استفاده از‬
‫بین ‪. CV‬آمد‪ .‬محدوده کالیبراسیون ‪ 50‬تا ‪ 10000‬نانوگرم در میلی لیتر برای هر انانتیومر بود‬
‫≤ ‪٪ (CV‬درون سنجش ≤ ‪ ٪1.5‬و سوگیری در ‪ ٪±2‬بود‪ .‬بازیابی ‪٪، CV 90 - ٪83‬سنجش ≤‪5‬‬
‫‪6٪) 105-99‬‬ ‫بود‪ .‬اثرات ماتریس )‪ (CV ≤ 2٪‬بود‪ ،‬و اثرات ماتریس اصالح شده استاندارد داخلی‬
‫زمانی که توسط استاندارد داخلی تصحیح نمی شد‪ ،‬متغیر بود‪ .‬روش )‪٪ (CV ≤ 8٪‬از ‪ ٪96‬تا ‪98‬‬
‫‪EME‬‬ ‫برای آماده‌سازی نمونه استفاده )‪ (LLE‬با یک روش معمول کایرال که از استخراج مایع‪-‬مایع‬
‫می‌کرد‪ ،‬مقایسه شد‪ .‬نتایج سنجش با روش معمول مطابقت داشت و میانگین انحراف بین روش‌ها‬
‫‪ %3‬بود که از ‪ %21‬تا ‪ %31‬متغیر بود‪ .‬در نهایت‪ ،‬سبزی آماده‌سازی نمونه با استفاده از ابزار‬
‫‪AGREEprep‬‬ ‫ویال رسانا ‪ EME‬مورد ارزیابی قرار گرفت که منجر به امتیاز سبزی ‪ 0.54‬برای‬
‫‪.‬نیمه خودکار ‪ 96‬چاهی ‪ LLE‬شد‪ ،‬در مقابل ‪ 0.47‬برای‬

‫کلید واژه ها‬

‫آمفتامین‪ ،‬کروماتوگرافی کایرال‪ ،‬استخراج الکتروغشایی‪ ،‬آماده سازی نمونه‪ ،‬کروماتوگرافی‬
‫سیال فوق بحرانی‬
‫‪1‬‬
‫‪.‬گروه فارماکولوژی بالینی‪ ،‬خ‬
‫بیمارستان دانشگاه اوالو‪ ،‬تروندهایم‪ ،‬نروژ‬
‫‪2‬‬
‫گروه داروسازی‪ ،‬دانشگاه اسلو‪ ،‬اسلو‪ ،‬نروژ‬
‫‪3‬‬
‫گروه علوم پزشکی قانونی‪ ،‬بخش‬
‫پزشکی آزمایشگاهی‪ ،‬بیمارستان دانشگاه اسلو‪ ،‬اسلو‪ ،‬نروژ‬
‫‪4‬‬
‫گروه داروسازی‪ ،‬دانشکده بهداشت و علوم پزشکی‪ ،‬دانشگاه کپنهاگ‪ ،‬کپنهاگ‪ ،‬دانمارک‬

‫مکاتبه‬
‫‪Tonje Gottenberg Skaalvik،‬‬ ‫گروه‬
‫فارماکولوژی بالینی‪ ،‬دانشگاه سنت اوالو‬
‫‪.‬بیمارستان‪ ،‬پروفسور بروچس گیت ‪ 7030 ،6‬تروندهایم‪ ،‬نروژ‬
‫‪: tonje.gottenberg.skaalvik@stolav.no‬ایمیل‬

‫اطالعات تامین مالی‬

‫شورای تحقیقات نروژ‪ ،‬گرنت‪/‬جایزه‬
‫‪: NRF 310086‬شماره‬

‫است که اجازه استفاده‪ ،‬توزیع و تکثیر در هر رسانه را می دهد‪ Creative Commons Attribution ،‬این یک مقاله با دسترسی آزاد تحت شرایط مجوز‬
‫‪.‬مشروط بر اینکه اثر اصلی به درستی ذکر شده باشد‬
‫‪ John Wiley & Sons Ltd.‬نویسندگان‪ .‬آزمایش و تجزیه و تحلیل دارو توسط ‪© 2023‬‬

‫‪Drug Test Anal. 2023;15:909–918.‬‬ ‫‪wileyonlinelibrary.com/journal/dta‬‬ ‫‪909‬‬

‫‪910‬‬ ‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬

‫‪1‬‬ ‫|‬ ‫معرفی‬ ‫توسعه است و تجهیزات نمونه اولیه در استخراج داروهای پایه از سرم‬
‫‪16‬‬ ‫‪15‬‬
‫داده های اعتبار سنجی مرتبط با‬ ‫و پالسما استفاده شده است‪.‬‬
‫اگرچه آمفتامین یکی از رایج ترین داروهای سوء مصرف در سراسر‬
‫دستگاه نمونه اولیه مطابق با دستورالعمل های توصیه شده برای تجزیه‬
‫و نارکولپسی نیز از آن استفاده می ‪ ADHD‬جهان است‪ ،‬اما برای درمان‬
‫و تحلیل زیستی بود‬
‫شود‪ .‬کایرالیته ساختار مولکولی تمایز بین اشکال قانونی و غیرقانونی‬ ‫‪17،18‬‬
‫اندازه گیری ها‬
‫دارو را امکان پذیر می کند‪ .‬آمفتامین نسخه‌ای دارای مجوز در نروژ‬
‫گزینش پذیری‬ ‫‪EME‬‬ ‫عمدتًا به قطبیت و بزرگی میدان الکتریکی و‬
‫حاوی فعال‌ترین انانتیومر‬ ‫‪S‬‬ ‫از نظر دارویی‪ ،‬چه به صورت‬
‫بستگی دارد‪ 19 .‬عالوه بر این‪ ،‬انتقال جرم ‪ SLM‬خواص فیزیکوشیمیایی‬
‫دکستروآمفتامین خالص و چه به صورت لیسدکستروآمفتامین (پیش‬
‫دهنده‪ ،‬حضور عوامل ‪ PH‬آنالیت ها تحت تأثیر ترکیب نمونه‪ ،‬از طریق‬
‫دارو) است‪ 1 .‬از سوی دیگر‪ ،‬آمفتامین موجود در بازار غیرقانونی‬
‫کمپلکس کننده‪ 20 ،‬ماهیت الکترولیت های زمینه‪ 21 ،‬و قدرت یونی است‪.‬‬
‫بیشتر حاوی مخلوط راسمیک است‪ 2،3 .‬در مواردی که بیماران تحت‬
‫‪ 22‬در نمونه های ادرار‪ ،‬پارامترهای ذکر شده می تواند بسته به سالمت‪،‬‬
‫درمان با آمفتامین تحت آزمایش دارویی قرار می گیرند‪ ،‬از نسبت‬
‫رژیم غذایی و وضعیت هیدراتاسیون افراد متفاوت باشد‪ .‬انتظار می‬
‫غلظت‬ ‫‪R-‬‬ ‫آمفتامین برای روشن شدن منشا دارو استفاده می شود‪ S- .‬و‬
‫رود تغییرات طبیعی در ترکیبات ادرار باعث تغییرات مرتبط با‬
‫تجزیه و تحلیل انتی انتخابی نمونه های بیولوژیکی در اینجا برای تمایز‬
‫‪5،6‬‬ ‫ماتریکس در بهبودی شود که در نهایت می تواند بر نتایج تحلیلی تأثیر‬
‫بین مصرف غیرقانونی و قانونی آمفتامین ضروری است‪.‬‬
‫‪.‬بگذارد‬
‫یک روش به خوبی تثبیت )‪ (SFC‬کروماتوگرافی سیال فوق بحرانی‬
‫هدف از این تحقیق تعیین اینکه آیا ویال رسانا‬ ‫‪EME‬‬ ‫یک جایگزین‬
‫‪ CO 2‬شده برای جداسازی کایرال است‪ 7 .‬استفاده از کسرهای بزرگ از‬
‫آماده سازی نمونه مناسب برای تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار‬
‫فوق بحرانی به عنوان فاز متحرک‪ ،‬نرخ جریان باال را بدون از دست دادن‬
‫در هنگام ترکیب با‬ ‫‪UHPSFC-MS/MS‬‬ ‫است‪ .‬یک روش‬ ‫‪EME-UHPSFC-‬‬
‫کارایی و وضوح امکان پذیر می کند‪ ،‬که زمان تجزیه و تحلیل را‬
‫‪MS/MS‬‬ ‫‪ LLE-UHPSFC-MS/MS‬توسعه داده شد‪ ،‬تایید شد و با روش معمول‬
‫با عملکرد فوق‌العاده باال )‪ SFC (UHPSFC‬کاهش می دهد‪ .‬سیستم‌های مدرن‬
‫در بخش فارماکولوژی بالینی در بیمارستان دانشگاه سنت اوالو‬
‫همراه با طیف‌سنجی جرمی‪ ،‬آنالیز روتین قوی‪ ،‬حساس و سریع‬
‫‪( EME‬تروندهایم‪ ،‬نروژ) مقایسه شد‪ .‬ما همچنین جنبه‌های اساسی فرآیند‬
‫‪5،6‬‬
‫انانتیومرهای آمفتامین را در ادرار و سرم ممکن می‌سازد‪.‬‬
‫را با مطالعه میزان تأثیر تغییرات طبیعی در‬ ‫‪pH‬‬ ‫ادرار و غلظت‬
‫آماده سازی نمونه یک مرحله حیاتی در تجزیه و تحلیل زیستی‬ ‫‪.‬کراتینین بر انتقال جرم آمفتامین بررسی کردیم‬
‫است‪ .‬در تجزیه و تحلیل ادرار‪ ،‬یک مرحله رقیق سازی ساده اغلب‬
‫کافی است‪ .‬در برخی موارد‪ ،‬تکنیک‌های استخراج مانند استخراج مایع‪-‬‬
‫برای حفظ ستون کروماتوگرافی و )‪ (SPE‬یا استخراج فاز جامد )‪ (LLE‬مایع‬ ‫‪2‬‬ ‫|‬ ‫مواد و روش ها‬

‫طیف‌سنج جرمی مورد نیاز است‪ .‬در این مقاله‪ ،‬استخراج‬ ‫مواد شیمیایی| ‪2.1‬‬
‫الکتروممبران‬ ‫)‪(EME‬‬ ‫را به عنوان جایگزین آماده‌سازی نمونه برای‬
‫‪.‬بررسی کردیم ‪ LLE‬روش معمول‬ ‫آمفتامین به ترتیب از‪ R-/S-‬ماده مرجع گواهی راسمیک (‪)%50:%50‬‬
‫‪Lipomed (Arlesheim،‬‬ ‫و )سوئیس‬ ‫‪Chiron (Trondheim،‬‬ ‫برای تهیه )نروژ‬
‫‪EME‬‬ ‫یک تکنیک ریز استخراج است که در آن یک میدان‬
‫الکتریکی برای تسهیل انتقال آنالیت های یونیزه شده از یک فاز دهنده‬ ‫آمفتامین با‪. S-‬کالیبراتورها و نمونه‌های کنترل کیفیت خریداری شد‬

‫آبی (به عنوان مثال‪ ،‬خون و ادرار) به یک غشای مایع پشتیبانی شده‬ ‫خلوص ‪ 99.97‬درصد و راسمیک‬ ‫‪R-/Samphetamine-d‬‬ ‫‪3‬‬ ‫از‬ ‫‪Lipomed‬‬

‫آبگریز‬ ‫)‪(SLM‬‬ ‫و بیشتر به یک فاز پذیرنده آبی تمیز‬ ‫‪(PH‬‬ ‫)تنظیم شده‬ ‫خریداری شد‪ .‬بیس (‪-2‬اتیل هگزیل) فسفات‬ ‫‪(DEHP)،‬‬ ‫بیس (‪-2‬اتیل‬

‫شامل حجم کمی (‪ 10‬میکرولیتر) از حالل ‪). SLM‬اعمال می شود‪ .‬اب‬ ‫هگزیل) فسفیت‬ ‫اتر‪(DEHPi)، 2-‬‬ ‫نیتروفنیل اکتیل‬ ‫نیتروفنیل‪(NPOE)، 2-‬‬

‫‪ EME‬آلی است که در یک غشای متخلخل تثبیت شده است‪ .‬با استفاده از‬ ‫پنتیل اتر‬ ‫)‪(NPPE‬‬ ‫و فرمت آمونیوم (≥‪ ٪99.995‬فلزی ردیابی) اساس)‬

‫می توان استخراج و پاکسازی نمونه را در یک مرحله و با حداقل‬ ‫‪ (99.‬خریداری شدند‪ .‬اسید فرمیک )آلمان ‪ (Schnelldorf،‬از سیگما آلدریچ‬

‫در تعدادی از فرمت‌های فنی ‪. EME‬مصرف حالل های آلی انجام داد‬ ‫‪0٪‬‬ ‫‪HCOOH،‬‬ ‫درجه‬ ‫)‪Optima LC-MS‬‬ ‫از‬ ‫‪Fischer Scientific (Leicestershire،‬‬

‫)‪UK‬‬ ‫هیدروکسید آمونیوم‪ ،‬و محلول ‪ LC-MS)،‬درجه ‪ (MeOH،‬بود‪ .‬متانول‬

‫مبتنی بر الیاف توخالی‪ ،‬صفحات ‪ 96‬چاهی‪ 11-9 ،‬و فناوری ریزتراشه انجام شده‬
‫‪ (25٪‬آمونیاک‬ ‫‪NH‬‬ ‫‪،‬‬ ‫‪LiCropur‬‬ ‫برای‬ ‫)‪LC-MS‬‬ ‫از‬ ‫دارمشتات‪Merck (،‬‬
‫تجاری مبتنی بر ویال های رسانا در دست ‪ EME‬است ‪ 14-12 .‬یک دستگاه‬ ‫‪3‬‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬ ‫‪911‬‬

‫بودند‪ .‬ایزوپروپیل الکل )آلمان‬ ‫)‪(IPA، HiPerSolv Chromanorm‬‬ ‫از‬ ‫‪VWR‬‬ ‫که می توانستند به طور همزمان کار کنند‪ .‬یک سلول‬ ‫‪EME‬‬ ‫شامل یک‬
‫‪Chemicals (Leuven،‬‬ ‫با یک سیستم تصفیه ‪ I‬به دست آمد‪ .‬آب نوع )بلژیک‬ ‫ویال اهداکننده و یک ویال گیرنده بود که توسط یک اتصال محکم نشتی‬
‫داخلی‬ ‫‪Milli-Q‬‬ ‫از‬ ‫‪Millipore (Molsheim،‬‬ ‫به دست آمد‪ .‬دی اکسید )فرانسه‬ ‫که غشای پلی پروپیلن متخلخل‬ ‫)‪(PP‬‬ ‫‪ 168،‬میکرومتر( مسطح‬ ‫‪Accurel‬‬

‫‪.‬کربن (درجه ‪ )٪5.2/99.9992‬از آگا (اسلو‪ ،‬نروژ) به دست آمد‬ ‫‪ Wuppertal،‬؛‪PP2E، Membrana GmbH‬‬ ‫را نگه می‌داشت‪ ،‬متصل )آلمان‬
‫می‌شد‪ .‬ویال ها از یک ماده رسانای اختصاصی ساخته شده بودند‪.‬‬
‫ویال‌های اهداکننده نمونه‌های ادرار اسیدی شده را در خود داشتند در‬
‫‪2.1.1‬‬ ‫تهیه محلول ها و شرایط نگهداری|‬
‫حالی که ویال‌های گیرنده محلول‌های گیرنده را نگه داشتند‪ .‬حجم کلی‬
‫دو محلول جداگانه از آمفتامین راسمیک ( ‪ 5‬میلی گرم در میلی لیتر)‬ ‫‪.‬هر ویال ‪ 600‬میکرولیتر‪ ،‬با حجم کاری ‪ 200‬تا ‪ 400‬میکرولیتر بود‬
‫برای کالیبراتورها و کنترل کیفیت‬ ‫)‪(QC‬‬ ‫در آب نوع‬ ‫‪I‬‬ ‫تهیه شد‪.‬‬ ‫‪SLM‬‬ ‫با پیپت کردن ‪ 9‬میکرولیتر حالل آلی بر روی غشای پشتیبان‬ ‫‪PP‬‬

‫محلول‌های موجود با‬ ‫‪MeOH‬‬ ‫رقیق شدند تا محلول‌های کاری برای هر‬ ‫به صورت افقی روی دستگاه همزن قرار داده ‪ EME‬تهیه شد‪ .‬سلول های‬
‫کالیبراسیون و سطح‬ ‫‪QC‬‬ ‫آماده شود‪ .‬استوک و محلول های کاری در‬ ‫شدند تا از تماس بین محلول های آبی و‬ ‫‪SLM‬‬ ‫اطمینان حاصل شود‪.‬‬
‫دمای ‪ 4‬درجه سانتیگراد ذخیره شدند‪ .‬کالیبراتورهای ادرار ‪،250 ،50‬‬ ‫‪ (ES 0300-0.45، Delta Elektronika‬میدان الکتریکی توسط یک منبع تغذیه‬
‫‪ ،2000 ،750‬و ‪ 10000‬نانوگرم در میلی لیتر از هر انانتیومر با‬ ‫‪BV، Zierikzee،‬‬ ‫به هر سلول )هلند‬ ‫‪EME‬‬ ‫اعمال شد که از طریق‬
‫تهیه و در دمای ‪ (1% v/v) 20‬اسپک کردن ادرار خالی با محلول کاری‬ ‫الکترودهای موجود در درب دستگاه به سطوح ویال متصل می‌شود‪.‬‬
‫درجه سانتی گراد نگهداری شدند‪ .‬به طور مشابه‪ ،‬نمونه‬ ‫‪QC‬‬ ‫در چهار‬ ‫برای استخراج کاتیون ها‪ ،‬ویال گیرنده و اهداکننده به ترتیب کاتدی و‬
‫و ‪ 8000‬نانوگرم در میلی لیتر‪ (LLOQ)، 75، 1000 .‬غلظت تهیه شد‪50 .‬‬ ‫آندی شدند‪ .‬جریان سیستم با مولتی متر‬ ‫‪، WA،‬اورت( ‪Fluke287‬‬ ‫ایاالت‬
‫) ‪-d3‬آمفتامین‪ 2.5 R-/S-‬میکروگرم بر میلی لیتر( محلول استاندارد داخلی‬ ‫‪.‬پایش شد )متحده آمریکا‬
‫‪ H2O‬در ‪ MeOH‬در ‪ 20‬درصد‬ ‫‪.‬تهیه شد و در دمای ‪ 4‬درجه سانتی گراد نگهداری شد‬ ‫پارامترهای بهینه شده در توسعه روش شامل ترکیب فاز آلی‪ ،‬رقیق‬
‫کننده و پذیرنده نمونه‪ ،‬پتانسیل استخراج و زمان بود‪ .‬آزمایش های‬
‫بازیابی در طول توسعه روش با استفاده از ادرار میخ دار (‪2000‬‬
‫نمونه ادرار | ‪2.1.2‬‬
‫نانوگرم در میلی لیتر مخلوط راسمیک)‪ ،‬اعمال ‪ 50‬ولت به مدت ‪15‬‬
‫یک داوطلب سالم ادرار بدون آمفتامین را برای توسعه روش‪،‬‬ ‫‪.‬دقیقه انجام شد‪ ،‬مگر اینکه خالف آن ذکر شده باشد‬
‫‪.‬کالیبراسیون و کنترل کیفیت ارائه کرد‬ ‫‪pH‬‬ ‫ادرار ‪ 2/6‬و غلظت‬ ‫پروتکل استخراج نهایی به شرح زیر بود‪ .‬برای هر سلول‬ ‫‪EME،‬‬

‫کراتینین ‪ 7/68‬میلی گرم در دسی لیتر بود‪ .‬نمونه های ادرار کنترل‬ ‫‪ (25‬ویال اهداکننده با ادرار ( ‪ 100‬میکرولیتر)‪ ،‬محلول استاندارد داخلی‬
‫‪.‬به دست آمد )‪ LGC (Bury، UK‬کیفیت خارجی از تست مهارت استاندارد‬ ‫‪،‬میکرولیتر‬ ‫‪-d3)،‬آمفتامین‪R-/S-‬‬ ‫‪ 175‬میکرولیتر‪ (،‬و رقیق کننده نمونه‬
‫نمونه های ادرار ناشناس که برای آزمایش دارو به آزمایشگاه ما‬ ‫پر شد ‪ .‬ویال پذیرنده حاوی ‪ 130‬میلی موالر )‪ 130 HCOOH‬میلی موالر‬
‫رفته بودند برای مقایسه روش مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند‪ .‬نمونه‬ ‫)میکرولیتر ‪HCOOH (300‬‬ ‫بود‪ .‬اتصال نشتی محکم روی ویال گیرنده پیچ‬
‫ها به مدت ‪ 4‬هفته در دمای ‪ 4‬درجه سانتیگراد نگهداری شدند و سپس‬ ‫مخلوط( شد و ‪ 9‬میکرولیتر حالل غشایی‬ ‫‪DEHPi‬‬ ‫و‬ ‫)]‪NPOE [1:1، w/w‬‬

‫در دمای ‪ 20‬درجه سانتیگراد به مدت ‪ 1‬تا ‪ 3‬هفته نگهداری شدند‪ .‬در‬ ‫مونتاژ شدند و در دستگاه نمونه ‪ EME‬روی غشاء پیپت شد‪ .‬سلول های‬
‫برخی آزمایش‌ها‪ ،‬نمونه‌های بی‌نام و فاقد آمفتامین مشخص شد‪ .‬با توجه‬ ‫اولیه قرار گرفتند‪ .‬استخراج با اعمال ولتاژ ‪ 30‬ولت به مدت ‪ 15‬دقیقه‬
‫به کمیته منطقه ای اخالق تحقیق‪ ،‬برای ارائه مختصر نتایج معمول به‬ ‫ویال‌های گیرنده ‪ EME،‬با هم زدن (‪ 875‬دور در دقیقه) انجام شد‪ .‬پس از‬
‫‪.‬عنوان بخشی از مقاله روش شناختی‪ ،‬نیازی به تایید رسمی نیست‬ ‫درپوش گذاشته شدند و روی نمونه‌بردار خودکار برای آنالیز‬ ‫‪UHPSFC-‬‬

‫گرفتند ‪MS/MS‬‬ ‫‪.‬قرار‬

‫با توجه به تعداد محدودی از ویال های رسانای نمونه اولیه موجود‪،‬‬
‫‪ EME‬ویال رسانا | ‪2.2‬‬
‫ویال های استفاده شده شسته شده و در طول توسعه روش مورد استفاده‬
‫‪EME‬‬ ‫‪ Extraction Technologies Norway (ETN,‬با یک دستگاه نمونه اولیه از‬ ‫مجدد قرار گرفتند‪ .‬برای جلوگیری از انتقال‪ ،‬ویال ها با روش زیر‬
‫سلول )‪Ski, Norway‬‬ ‫بود ‪ EME‬انجام شد‪ .‬نمونه اولیه (شکل ‪ ) 1‬دارای ‪10‬‬ ‫‪:‬شسته شدند‬
‫)‪(1‬‬ ‫‪.‬پر شدند ‪ MeOH‬در ‪% HCOOH‬ویال‌های خالی در طول شب با ‪1‬‬
‫‪912‬‬ ‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬

‫به هر چاهک اضافه شد‪ ،‬و صفحه جمع آوری با فویل )میکرولیتر‬
‫مهر و موم شد و مخلوط شد‬ ‫‪(Multi-format Plates & Tubes, Porvair‬‬

‫‪Sciences) 2100‬‬ ‫به مدت ‪ 1‬دقیقه قبل از سانتریفیوژ در ‪ rpm 4235‬در‬

‫‪RCF (Rotana 460, Hettich Zentrifugen، Tuttlingen،‬‬ ‫به مدت ‪) 5‬آلمان‬
‫دقیقه‪ .‬مقدار کمی از مایع رویی (‪ 200‬میکرولیتر) به یک صفحه جمع‬
‫آوری ‪ 96‬چاهی جدید ‪ 2‬میلی لیتری منتقل شد و با ‪ 10‬میکرولیتر‬
‫اسیدی شد‪ .‬نمونه ها در دمای ‪ MeOH 40‬هیدروکلراید ‪ 0.3‬موالر در‬
‫درجه سانتیگراد به مدت ‪ 10‬دقیقه تا خشک شدن تبخیر شدند‬
‫)‪(UltraVap، Porvair Sciences، North Wales، UK‬‬ ‫و در ‪ 300‬میکرولیتر‬
‫شدند ‪IPA‬‬ ‫‪.‬بازسازی‬
‫که در زیر توضیح داده شده ‪ UHPSFC-MS/MS‬عصاره ها با شرایط‬
‫است‪ ،‬تجزیه و تحلیل شدند‪ .‬این روش قبل از اجرای آن در آزمایشگاه‬
‫‪:‬معمولی اعتبارسنجی شد و نتایج زیر به دست آمد‬ ‫درون‪CV‬‬ ‫های‬
‫‪٪،‬سنجش ≤ ‪1.8‬‬ ‫‪CV،±‬‬ ‫های بین سنجش ≤ ‪ ،٪1.8‬سوگیری در ‪4.7‬‬
‫‪ IS‬اثرات ماتریس نرمال شده ‪٪ (CV ≤ 4%)،‬اثرات ماتریس ‪111 - ٪83‬‬
‫شکل ‪1‬‬ ‫سمت ( ‪ EME‬حاوی ‪ 10‬سلول ‪( EME‬الف) نمونه اولیه دستگاه‬ ‫‪96-100% (CV ≤ 3%)،‬‬ ‫‪% (CV ≤ 3%).‬و بازیابی استخراج ‪94-%87‬‬
‫متفرقه متشکل از ویال های رسانا‪ ،‬یونیون و ‪ EME‬و یک سلول )چپ‬
‫بازهای پروتونه در ویال های ‪ EME‬غشای پلی پروپیلن (راست)‪( .‬ب)‬
‫‪2.4‬‬ ‫|‬ ‫طیف سنجی جرمی پشت سر هم‬
‫یک اسید ‪، a‬نشان دهنده پایه پروتونه شده است ‪. BH +‬رسانا‬ ‫کروماتوگرافی سیال فوق بحرانی با کارایی فوق العاده باال‬
‫خنثی ‪ N‬و ‪deprotonated‬‬ ‫یک مولکول‬
‫)‪(2‬‬ ‫ویال ها با آب نوع‬ ‫‪I‬‬ ‫و (‪)3‬‬ ‫‪MeOH‬‬ ‫شسته شدند‪ .‬در طول‬ ‫‪ Waters Acquity (UPC‬یک سیستم کروماتوگرافی همگرایی فوق عملکرد‬
‫‪2‬‬
‫میلفورد( )‬ ‫مجهز به مدیر نمونه‪) ،‬ایاالت متحده آمریکا ‪، MA،‬واترز‪،‬‬
‫اعتبارسنجی‪ ،‬کالیبراتورهای غلیظ و کنترل‌های کیفیت‬ ‫‪(Std 3-5،‬‬

‫)‪QC2-3‬‬ ‫با ویال‌های استفاده مجدد استخراج شدند‪ ،‬در حالی که‬ ‫مدیر حالل دودویی‪ ،‬مدیر ستون‪ ،‬مدیر همگرایی و مدیر حالل‬

‫نمونه‌های کم غلیظ‬ ‫‪(Blanks، Std1-2،‬‬ ‫نمونه‌های‬ ‫‪LLOQ، QC1)،‬‬

‫آمیلوز[ ‪ AD-3‬ایزوکراتیک استفاده شد‪ .‬انانتیومرهای آمفتامین بر روی‬

‫کنترل‌های خارجی‪ ،‬و نمونه‌های بیمار ناشناس استخراج شدند‪ .‬با‬ ‫جدا شدند ]تریس‬

‫ویال های جدید‬ ‫کاربامات‪(3،5-‬‬ ‫‪ 150 2.1‬میلی متر‪ ،‬ذرات ‪)، 3.0‬دی متیل فنیل‬
‫میکرومتر] ستون از‬ ‫‪ Danciel، Illkirch،‬گروه( ‪Chiralpak Technologies‬‬

‫تزریق حلقه جزئی در حالت پر کردن سوزن با یک حلقه ‪). 10‬فرانسه‬

‫‪2.3‬‬ ‫|‬ ‫استخراج مایع‪-‬مایع‪ :‬روش آماده‬
‫میکرولیتری و حجم تزریق ‪ 1‬میکرولیتر استفاده شد‪ .‬مشخصات‬
‫سازی نمونه معمولی‬
‫‪ IPA: MeOH [1: 1،‬در ‪ (A: CO 2 ، B: 0.1٪ NH 4 OH‬شستشوی ایزوکراتیک‬
‫روش معمول فعلی برای تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار‪،‬‬ ‫‪V / V]) 6.5٪ B‬‬ ‫برای ‪ 4.0‬دقیقه بود‪ .‬سرعت جریان ‪ 1‬میلی لیتر در‬
‫‪5‬‬
‫نیمه خودکار با استفاده ‪ LLE‬اصالح روش مربوطه برای سرم است‪.‬‬ ‫دقیقه و دمای ستون ‪ 10‬درجه سانتیگراد بود‪ .‬تنظیم کننده فشار‬
‫شرکت همیلتون‪ ،‬بونادوز‪ Microlab Hamilton (،‬از ربات پیپتینگ ستاره‬ ‫تنظیم شده بود‪ .‬حالل تشکیل دهنده ‪ psi‬برگشت خودکار روی ‪2500‬‬
‫‪ (2‬انجام شد‪ .‬ادرار (‪ 100‬میکرولیتر)‪ ،‬محلول استاندارد داخلی )سوئیس‬ ‫‪.‬با سرعت جریان ‪ 0.3‬میلی لیتر در دقیقه بود ‪ IPA‬در ‪0.1٪ NH 4 OH‬‬
‫‪ 5،‬میکرولیتر‬ ‫‪R-/Samphetamine-d3‬‬ ‫)‬ ‫‪ 100‬میکرولیتر‪ (0.2 ،‬و بافر‬ ‫( ‪ Xevo TQ-S‬یک طیف‌سنج جرمی چهار قطبی میکرو پشت سر هم‬
‫موالر‬ ‫‪Na2CO3‬‬ ‫)‬ ‫به یک صفحه جمع آوری ‪ 96‬چاهی ‪ 2‬میلی لیتری‬ ‫برای ‪ Z-spray‬مجهز به رابط الکترواسپری )واترز‪ ،‬منچستر‪ ،‬انگلستان‬
‫)‪(Porvair Sciences, Norfolk‬‬ ‫پیپت شدند‪ ، .‬انگلستان) و در ‪ 700‬دور در‬ ‫تشخیص استفاده شد‪ .‬یونیزاسیون الکترواسپری مثبت‬ ‫)‪(ESI+‬‬ ‫در حالت‬
‫دقیقه به مدت ‪ 20‬ثانیه مخلوط شدند‪ .‬اتیل استات‬ ‫‪(EtOAc، 600‬‬ ‫نظارت بر واکنش چندگانه‬ ‫)‪(MRM‬‬ ‫انجام شد‪ .‬ولتاژ مویرگی ‪ 1.0‬کیلو‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬ ‫‪913‬‬

‫ولت‪ ،‬دمای منبع یونی ‪ 120‬درجه سانتیگراد و سرعت جریان گاز‬ ‫آنالیت نرمال‌شده‬ ‫‪IS‬‬ ‫آمفتامین قبل و بعد از‪ R-/S-‬در نمونه‌های ادرار با‬
‫مخروطی ‪ 20‬لیتر در ساعت بود‪ .‬گاز تجزیه (نیتروژن) تا دمای ‪600‬‬ ‫استخراج‪ ،‬با استاندارد داخلی اضافه شده پس از استخراج محاسبه شد‪.‬‬
‫درجه سانتیگراد گرم شد و با سرعت جریان ‪ 1000‬لیتر در ساعت‬ ‫اثرات ماتریکس‬ ‫)‪(ME‬‬ ‫در باالترین و کمترین غلظت‬ ‫‪QC‬‬ ‫با مقایسه‬
‫یون( ‪ m/z 136.1 > 119.0‬آمفتامین ‪ R/S‬برای ‪ MRM‬تحویل داده شد‪ .‬انتقال‬ ‫نواحی پیک آنالیت در عصاره‌های خالی مشخص (‪ 6‬نفر‪ ،‬افراد‬
‫> ‪ m/z 136.1‬و )‪ eV‬کمی‪ ،‬ولتاژ مخروط‪ 10 :‬ولت‪ ،‬انرژی برخورد ‪8‬‬ ‫)]‪ 130 HCOOH، [n = 3‬میلی‌موالر( مختلف) و محلول‌های پذیرنده تمیز‬
‫انرژی( ‪91.0‬‬ ‫بود‪ eV، colli) .‬یون واجد شرایط‪ ،‬ولتاژ مخروط‪ 10 :‬ولت‬ ‫ارزیابی شد‪ .‬گزینش پذیری با تجزیه و تحلیل ادرار بدون آمفتامین از‬
‫)‪ eV‬ولتاژ مخروط‪ 10 :‬ولت‪ ،‬انرژی برخورد‪ m/z 139.1 > 122.0 (8 :‬و‬ ‫شش نفر ارزیابی شد‪ .‬انتقال ابزار با بازرسی کروماتوگرام های ادرار‬
‫‪ .‬نظارت شد ‪ R-/Samphetamine-d 3‬برای‬ ‫خالی استخراج شده پس از تزریق نمونه به غلظت ‪ 20000‬نانوگرم‬
‫در میلی لیتر مورد بررسی قرار گرفت‪ .‬پایداری آنالیت در عصاره‌ها‬
‫با تزریق مجدد نمونه‌های‬ ‫غلظت( ‪QC‬‬ ‫و )تعداد = ‪ 4‬در هر‬
‫‪ pH‬اندازه گیری کراتینین و | ‪2.5‬‬
‫کالیبراتورهایی که روی نمونه‌بر خودکار (‪ 10‬درجه سانتیگراد) به‬
‫معرف‌های‬
‫تست تشخیص کراتینین‬ ‫®‪DRI‬‬ ‫آزمایش تشخیص‬ ‫و‬ ‫‪pH‬‬ ‫®‪DRI‬‬
‫انجام‬ ‫‪.‬مدت ‪ 3 ،1‬و ‪ 7‬روز باقی مانده بودند‪ ،‬ارزیابی شد‬
‫‪.‬شد‬
‫ترتیب(‬ ‫‪).‬آلمان ‪ Microgenics Thermo Fisher، Passau،‬به‬
‫‪2.7‬‬ ‫کاربرد‪ :‬مقایسه با روش معمول در بیمارستان دانشگاه |‬
‫سنت اوالو‬
‫اعتبار سنجی | ‪2.6‬‬
‫و روش ‪ EME-UHPSFC-MS/MS‬نتایج سنجش نمونه‌های بیمار ناشناس بین‬
‫روش‬ ‫‪EME-UHPSFC-MS/MS‬‬ ‫بر اساس دستورالعمل های ارائه شده‬ ‫که )‪ (31=n‬معمول از پیش تعیین‌شده مقایسه شد‪ .‬نمونه‌های ادرار بی‌نام‬
‫‪ (EMA). 18‬توسط پیترز و همکاران تایید شد‪ 23 .‬و آژانس دارویی اروپا‬ ‫با روش معمول آنالیز شدند‪ ،‬پس از ‪ 4‬هفته در دمای ‪ 4‬درجه‬
‫پارامتر اعتبار سنجی عبارت بودند از‪ :‬خطی بودن‪ ،‬حد تشخیص‬ ‫‪ EME‬سانتی‌گراد و ‪ 3‬هفته در دمای ‪ 20‬درجه سانتی‌گراد‪ ،‬مجددًا با‬
‫‪(LOD)،‬‬ ‫دقت درون و بین سنجش‪ ،‬دقت‪ (LLOQ)، ،‬حد پایین‌تر کمی‌سازی‬ ‫آنالیز شدند‪ .‬نتایج سنجش با استفاده از رگرسیون‬ ‫‪Passing‬‬ ‫و‬ ‫‪Bablok‬‬ ‫با‬
‫بازیابی استخراج‪ ،‬اثرات ماتریس‪ ،‬انتخاب‌پذیری‪ ،‬انتقال و پایداری‬ ‫‪ (MedCalc Software Ltd،‬نسخه ‪ MedCalc 20‬استفاده از نرم افزار آماری‬
‫‪.‬نمونه‌های استخراج‌شده‬ ‫کالیبراسیون )‪Ostend Belgium‬‬ ‫مقایسه شد‪ .‬غلظت های خارج از محدوده‬
‫بر )‪ (1/x‬کمی سازی با استفاده از کالیبراسیون درجه دوم وزنی‬ ‫شدند )‪(n = 2‬‬ ‫‪.‬از تجزیه و تحلیل رگرسیون حذف‬
‫اساس سطح پیک آنالیت نرمال شده به ناحیه‬ ‫‪IS‬‬ ‫در یک منحنی‬
‫کالیبراسیون ‪ 5‬نقطه ای در محدوده غلظت ‪ 10000-50‬نانوگرم در‬ ‫ارزیابی سبزی | ‪2.8‬‬
‫میلی لیتر از هر انانتیومر انجام شد‪ .‬خطی بودن با ارزیابی ضریب‬
‫با کالیبراسیون خطی شامل سه تکرار از هر کالیبراتور )‪ (R‬همبستگی‬ ‫سبزی روش های آماده سازی نمونه با استفاده از ابزار‬ ‫‪AGREEprep‬‬

‫ارزیابی شد‪ .‬حد پایینی کمی سازی‬ ‫)‪(LLOQ‬‬ ‫روی پایین ترین سطح‬ ‫و همکاران ارزیابی شد‪ 24 .‬بر اساس ‪ Wojnowski 10‬پیشنهاد شده توسط‬

‫کالیبراتور تنظیم شد‪ .‬دقت و دقت در‬ ‫‪LLOQ‬‬ ‫با تجزیه و تحلیل ادرار‬ ‫اصل آماده سازی نمونه سبز‪ ،‬امتیاز سبزی از ‪( 0‬عدم برآورده شدن)‬

‫خالی با ‪ 50‬نانوگرم در میلی لیتر از هر انانتیومر در ‪ 10‬روز‬ ‫تا ‪( 1‬تحقق) داده شد‪ .‬هر دسته بر اساس اهمیت وزن دهی شد‪ .‬نمرات‬

‫برآورد ‪ LLOQ‬از طریق یک سری رقت های اسکالر ‪. LOD‬ارزیابی شد‬ ‫با استفاده از نرم افزار موجود ‪ 25‬و دستورالعمل های ورودی ارائه‬

‫غلظت مربوط به نسبت سیگنال به نویز ‪. LOD‬شد‬ ‫)‪(S/N‬‬ ‫باالی ‪ 3‬برای‬ ‫و همکاران محاسبه شد ‪ 26 .‬ویال رسانا یکبار ‪ Pena-Pereira‬شده توسط‬

‫‪.‬هر دو یون کمی و واجد شرایط بود‬ ‫در ‪ AGREEprep‬مصرف در نظر گرفته شد‪ .‬جزئیات مربوط به ورودی‬

‫دقت و صحت بین سنجش در سه سطح‬ ‫‪QC (75، 1000‬‬ ‫و ‪8000‬‬ ‫‪.‬اطالعات پشتیبانی گنجانده شده است‬

‫با ‪ 10‬تکرار ارزیابی شد‪ .‬دقت درون سنجش با )نانوگرم در میلی لیتر‬ ‫‪3‬‬ ‫|‬ ‫نتایج و بحث‬

‫شش تکرار مورد مطالعه قرار گرفت‪ .‬بازیافت استخراج در باالترین‬ ‫‪3.1‬‬ ‫غشای مایع پشتیبانی شده |‬
‫تعیین شد‪ .‬بازیابی با مقایسه نواحی پیک )‪ QC (n = 6‬و کمترین غلظت‬
‫‪914‬‬ ‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬

‫الکتریکی ‪EME‬‬ ‫را می توان به عنوان یک فرآیند پارتیشن بندی با کمک‬ ‫پنج ترکیب‬ ‫‪SLM‬‬ ‫منجر به سیستم های پایدار شدند‪ .‬جالب توجه است‪،‬‬
‫در نظر گرفت و خواص شیمیایی حالل غشایی نقش کلیدی در انتخاب‬ ‫و ‪ DEHPi‬منجر به نصف جریان استخراج ‪ NPOE‬با ‪ DEHPi‬مخلوط کردن‬
‫پذیری دارد‪ .‬ترکیبات‬ ‫‪SLM‬‬ ‫زیر برای‬ ‫‪EME‬‬ ‫آمفتامین از ادرار‬ ‫)‪(n = 3‬‬ ‫‪.‬همچنین بهبود بازیابی آمفتامین شد‬
‫ارزیابی شد‪-2 :‬نیتروفنیل اکتیل اتر‬ ‫اتر‪(NPOE)، 2-‬‬ ‫نیتروفنیل پنتیل‬
‫‪(NPPE)،‬‬ ‫بیس(‪-2‬اتیل هگزیل) فسفیت‬ ‫‪(DEHPi)، 5% w‬‬ ‫بیس(‪-2‬اتیل‬
‫‪3.2‬‬ ‫ادرار و کراتینین ‪ pH‬اثر |‬
‫هگزیل) فسفات‬ ‫‪/w‬‬ ‫به‬ ‫)]‪NPOE (DEHP + NPOE [5:95‬‬ ‫و مخلوط ‪1:1‬‬ ‫تمرکز‬
‫و ‪( DEHPi‬وزن‪/‬وزنی)‬ ‫)]‪NPOE (DEHPi +NPOE [1:1‬‬ ‫اضافه شد‪ .‬بازیافت‬
‫نشان داده شده است ‪ .‬استفاده از حالل‌های ‪a‬آمفتامین در شکل ‪2‬‬ ‫‪ EME‬آزمایش‌های قبلی و مدل‌های نظری نشان می‌دهند که انتقال جرم‬

‫نیتروآروماتیک خالص‬ ‫‪(NPOE‬‬ ‫و‬ ‫)‪NPPE‬‬ ‫منجر به بازیابی کم آمفتامین‬ ‫محتوای نمک‪ ،‬قدرت یونی ‪ 37،38‬و تعادل یونی ‪ pH،‬می‌تواند تحت‌تاثیر‬

‫است‪ ،‬اما انتقال جرم کارآمد ‪ EME‬پرمصرف ترین حالل در ‪. NPOE‬شد‬ ‫و غلظت کراتینین برای ‪، pH‬قرار گیرد‪ 39 .‬در آزمایش دارویی ادرار‬

‫به آنالیت های آبگریز محدود می شود‪ 27 ،‬در حالی که آمفتامین یک‬ ‫تشخیص تقلب در نمونه ها تعیین می شود‪ .‬در آزمایش‌های زیر‪ ،‬تأثیر‬
‫‪pH‬‬ ‫ادرار و کراتینین بر انتقال جرم‬ ‫‪EME‬‬ ‫برای بررسی اینکه آیا این‬
‫راهبردهای رایج برای افزایش ‪ (log P = 1.8).‬داروی قطبی متوسط است‬
‫پارامترها می‌توانند بر بهبودی نیز تأثیر بگذارند‪ ،‬ارزیابی شد‪.‬‬
‫)‪ (DEHP‬پارتیشن بندی آنالیت های پایه قطبی‪ ،‬افزودن حامل های یونی‬
‫آزمایش های بازیابی با هفت نمونه ادرار با‬ ‫‪pH 5.3-8.9‬‬ ‫و غلظت‬
‫به‬ ‫‪NPOE‬‬ ‫یا انتخاب حاللی است که یا کمتر آبگریز باشد‬ ‫)‪(NPPE‬‬ ‫یا از‬
‫کراتینین ‪ 317-20‬میلی گرم در دسی لیتر انجام شد‪ .‬بازیابی آمفتامین‬
‫برهم کنش دارد‪ 28 .‬اگرچه ‪ NPOE‬طریق مکانیسم های دیگری غیر از‬
‫در هر نمونه پس از استخراج ‪ 15‬دقیقه ای با هر دو‬ ‫‪DEHP+NPOE‬‬
‫انتقال جرم آمفتامین با‬ ‫‪NPPE‬‬ ‫در مقایسه با‬ ‫‪NPOE‬‬ ‫افزایش یافت‪،‬‬
‫ولتاژ )‪ DEHPi+NPOE (1:1‬و )‪(5:95‬‬ ‫به عنوان حالل های غشایی تعیین شد‪.‬‬
‫‪. DEHPi‬استخراج همچنان با هر دو حالل نیتروآروماتیک ناکارآمد بود‬
‫سابق ‪ 50‬ولت و با دومی ‪ 30‬ولت بود‪ SLM .‬اعمال شده در استخراج با‬
‫تنها حالل غشایی تک جزئی کارآمد بود که منجر به بازیابی ‪53‬‬
‫مشخص شد که جریان استخراج با افزایش غلظت کراتینین افزایش‬
‫‪.‬درصد شد‬
‫)‪ DEHPi+NPOE (1:1‬و بنابراین ولتاژ در استخراج با ‪c )،‬شکل ‪ (3‬می‌یابد‬
‫‪ NPOE‬های مخلوطی بودند که حاوی‪ SLM، SLM‬موثرترین ترکیبات‬
‫در نمونه‌های دارای کراتینین باال حفظ شود‪ I <50 μA .‬کاهش می‌یابد تا‬
‫و یک جزء ارگانوفسفر بودند‬ ‫)‪(DEHP + NPOE (5:95‬‬ ‫و‬ ‫‪DEHPi + NPOE‬‬
‫و ‪ %66‬تا )‪% (CV 14%‬بازیابی محاسبه شده در محدوده ‪ %58‬تا ‪90‬‬
‫‪(1:1)).‬‬ ‫‪ NPOE‬به ‪% DEHP‬بازیابی آمفتامین از ‪ %0‬به ‪ %82‬با افزودن ‪5‬‬
‫‪.‬بود ‪ DEHP+NPOE‬با )‪99% (CV 14%‬‬
‫است و انتقال آنالیت در )‪ (pKa = 2‬یک حامل آنیونی ‪. DEHP‬افزایش یافت‬
‫)‪(5:95‬‬ ‫و‬ ‫)‪DEHPi+NPOE (1:1‬‬ ‫به ترتیب‪ .‬همانطور که انتظار می رفت‪،‬‬
‫‪،‬از طریق تشکیل جفت یون تسهیل می شود‪ 29 .‬برعکس ‪ SLM‬سراسر‬
‫یک ترکیب خنثی است و برهمکنش آنالیت عمدتًا از طریق ‪DEHPi‬‬
‫تغییراتی در انتقال توده آمفتامین بین ادرار فردی وجود داشت‬
‫اخیرًا‬
‫مشخص شد‬ ‫برهمکنش‌های پیوند هیدروژنی قوی انجام می‌شود‪.‬‬
‫آمفتامین های شیر مادر ‪ 31‬مؤثر است ‪ EME‬در )‪ DEHPi+NPOE (1:1‬که مخلوط‬
‫و در آزمایش فعلی منجر به بازیابی ‪ 74‬درصدی شد‪ .‬نتایج ارائه شده‬
‫قبلی آمفتامین از پالسما‪ ،‬ادرار و شیر مادر منسجم است‪ ،‬جایی ‪ EME‬با‬
‫با سایر ترکیبات ‪ 31،32‬مخلوط شد یا ‪ NPOE‬که آمفتامین بهتر است زمانی که‬
‫‪33‬‬
‫با تغییرات پذیرنده همراه شد‪ ،‬استخراج شد‪.‬‬

‫‪b‬شکل ‪ (2‬جریان استخراج ثبت شد‬ ‫)‬ ‫و به عنوان یک ابزار‬

‫و پایداری سیستم استفاده شد‪ SLM .‬تشخیصی برای ارزیابی یکپارچگی‬
‫‪ 27،34‬سیستم زمانی که جریان کمتر از ‪ 50‬میکروآمپر در هر سلول‬
‫استخراج بود‪ ،‬پایدار در نظر گرفته شدند و در طول زمان افزایش پیدا‬
‫نکرد‪ 27 .‬جریان بیش از حد می تواند بر تکرارپذیری تأثیر بگذارد و‬
‫به دلیل تغییر‬ ‫‪pH‬‬ ‫و تشکیل حباب ناشی از الکترولیز آب منجر به‬
‫مشاهده می شود ‪ ،‬هر ‪b‬بازیابی کم شود‪ 35،36 .‬همانطور که از شکل ‪2‬‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬ ‫‪915‬‬

‫شکل ‪ 2‬استخراج آمفتامین (‪ 2000‬نانوگرم‬

‫‪ (50‬در میلی لیتر مخلوط راسمیک) از ادرار‬
‫‪V، 15‬‬ ‫با استفاده از پنج حالل غشایی )دقیقه‬
‫و (ب) جریان )‪ (n = 3‬مختلف‪( .‬الف) بازیابی‬
‫‪ EME‬در هر سلول )‪ (I‬اندازه گیری شده‬

‫به عنوان تابعی )‪ (I‬و (ب) غلظت کراتینین متفاوت است‪( .‬ج) جریان اندازه گیری شده ‪ pH‬شکل ‪ 3‬بازیابی آمفتامین از نمونه های ادرار که در (الف)‬
‫دقیقه‪ ،‬سنبله ‪ DEHPi+NPOE (1:1) (30 V). T = 15‬و )‪. DEHP+NPOE (5:95) (50 V‬از کراتینین با استفاده از دو حالل غشایی مختلف‬
‫خالصه = ‪ 2000‬نانوگرم در میلی لیتر آمفتامین راسمیک‬ ‫مطلوب و دقت به عنوان حالل غشایی نهایی انتخاب شد‪ .‬عالوه بر این‬
‫با ‪DEHPi‬‬ ‫‪.‬کمتر خطرناک در نظر گرفته شد ‪ DEHP‬در مقایسه‬
‫در طول آزمایش های اولیه‪ ،‬رقیق کننده نمونه و فاز پذیرنده هر دو‬
‫نمونه ها‪ ،‬و استخراج در برخی از نمونه ها جامع بود‪ ،‬اما در برخی‬
‫‪ 130‬میلی موالر اسید فرمیک بودند‪ .‬آزمایشی با استفاده از بافر ‪130‬‬
‫‪.‬دیگر نه‬
‫میلی‌موالر‬ ‫‪HCOOH، 200‬‬ ‫میلی‌موالر‬ ‫‪NH‬‬ ‫‪COOH‬‬ ‫با‬ ‫‪pH 3.7‬‬ ‫و‬ ‫‪pH 2.8‬‬
‫بازیابی آمفتامین را به عنوان تابعی از ‪a,b‬شکل ‪3‬‬
‫‪4‬‬
‫‪pH‬‬ ‫و غلظت‬
‫به‌عنوان رقیق‌کننده نمونه و پذیرنده برای ارزیابی اینکه آیا استفاده از‬
‫کراتینین (در نمونه های ادرار خام) نشان می دهد‪ .‬با نمونه‌های‬
‫یک بافر قوی می‌تواند تنوع بین نمونه‌ها در بازیابی را با سرکوب‬
‫انتخاب‌شده‬ ‫‪(n=7)،‬‬ ‫تغییر در بهبود بین نمونه‌های ادرار را نمی‌توان به‬
‫تفاوت‌ها در‬ ‫‪pH‬‬ ‫بهبود بخشد‪ ،‬انجام شد‪ .‬قدرت یونی هیچ تفاوت معنی‬
‫یا کراتینین نسبت داد‪ ،‬بلکه احتماًال به ترکیبی از ‪ pH‬تنهایی به تفاوت در‬
‫های بازیابی مطلق بین نمونه های ادرار هنگام استفاده از ‪ CV‬داری در‬
‫پارامترها مربوط می‌شود که در ادرار نقطه‌ای متفاوت است‪ .‬اگرچه‬
‫بافر فرمت در مقابل اسید فرمیک مشاهده نشد‪ .‬بنابراین ‪ 130‬میلی‬
‫تفاوت در بازیابی بین نمونه های ادرار آشکار بود‪ ،‬استاندارد داخلی‬
‫‪.‬به عنوان رقیق کننده و پذیرنده نمونه نهایی نگهداری شد ‪ HCOOH‬موالر‬
‫این را جبران کرد‪ .‬درصد بازیابی‬ ‫‪CV‬‬ ‫بین نمونه‌ها از ‪ 14‬درصد‬
‫پتانسیل استخراج نهایی ‪ 30‬ولت بود که امکان دقت کافی‪ ،‬بازیابی‬
‫(بازیابی مطلق) به کمتر از ‪ 3‬درصد کاهش یافت که نواحی آنالیت با‬
‫بازیابی آمفتامین را پس از ‪a‬و جریان قابل قبول را فراهم کرد‪ .‬شکل ‪4‬‬
‫‪.‬تصحیح شد ‪ EME‬استاندارد داخلی دوتره شده قبل از‬
‫اعمال ‪ 15 ،0‬و ‪ 30‬ولت به مدت ‪ 15‬دقیقه نشان می دهد‪ .‬آزمایش تأیید‬
‫کرد که پتانسیل اعمال شده برای جرم ضروری است‬
‫‪3.3‬‬ ‫|‬ ‫‪ EME‬توسعه روش‬

‫نهایی برای تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار با توجه ‪ EME‬پروتکل‬

‫به حالل غشا‪ ،‬رقیق کننده نمونه و فاز پذیرنده‪ ،‬پتانسیل استخراج و‬
‫به دلیل بازیابی )‪. DEHPi+NPOE (1:1، w/w‬زمان استخراج توسعه داده شد‬
‫‪916‬‬ ‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬

‫شکل ‪4‬‬ ‫متغیر )‪ (a‬بازیابی آمفتامین با ولتاژ‬

‫به )‪ DEHPi+NPOE (1:1‬و (ب) زمان استخراج (‪ 30‬ولت) با )دقیقه ‪(t = 15‬‬

‫نمادها نشان دهنده انتقال نمونه های منحصر به فرد هستند‪ SLM. ،‬عنوان‬

‫‪b‬زیرا آمفتامین در غیاب میدان الکتریکی استخراج نشد‪ .‬شکل ‪4‬‬

‫بازیابی آمفتامین را از پنج نمونه ادرار مختلف پس از استخراج به مدت‬

‫‪ 15 ،10 ،5‬و ‪ 20‬دقیقه نشان می دهد‪ .‬سینتیک استخراج در بین نمونه‬

‫های فردی متفاوت است‪ .‬در دو نمونه‪ ،‬انتقال جرم پس از ‪ 10‬دقیقه‬

‫متوقف شد‪ ،‬در حالی که استخراج کامل (بازیابی بیش از ‪ )٪85‬پس از‬

‫‪ 20‬دقیقه برای نمونه‌های باقی‌مانده انجام شد‪ .‬زمان استخراج نهایی ‪15‬‬

‫‪.‬دقیقه انتخاب شد‬

‫به طور خالصه‪ ،‬پروتکل استخراج نهایی شامل اعمال ولتاژ ‪30‬‬
‫به عنوان حالل )‪ DEHPi+NPOE (1:1‬ولت به مدت ‪ 15‬دقیقه‪ ،‬با استفاده از‬
‫غشایی و ‪ 130‬میلی موالر‬ ‫‪HCOOH‬‬ ‫به عنوان رقیق کننده و پذیرنده‬
‫نمونه بود‪ .‬پارامترهای انتخاب شده بازیابی و دقت قابل قبولی را با‬
‫مزایای اضافی سادگی عملیاتی و توان عملیاتی قابل قبول امکان پذیر‬
‫‪.‬کردند‬

‫اعتبارسنجی | ‪3.4‬‬

‫پارامترهای اعتبارسنجی در جدول ‪ 1‬خالصه شده است ‪ .‬منحنی های‬

‫کالیبراسیون خطی در محدوده ‪ 50‬نانوگرم بر میلی لیتر‬ ‫)‪(LLOQ‬‬ ‫تا‬
‫‪ 10000.‬نانوگرم بر میلی لیتر بودند‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬ ‫‪917‬‬

‫‪.‬داده های اعتبارسنجی برای انانتیومرهای آمفتامین در ادرار جدول ‪1‬‬ ‫چ‬
‫آنالیت‪ ،‬غلظت‬ ‫‪RE‬‬ ‫من‬ ‫ن‬
‫محدوده‬ ‫خطی‬ ‫( جانبدا‬ ‫تصحیح شده‬
‫است رزومه( رزومه ری بین سنجش ‪ CV‬درون سنجش‬
‫)‪(ng/ml‬‬
‫د‬
‫کالیبراسیون‬ ‫بودن‬ ‫‪LOD‬‬ ‫‪LLOQ‬‬
‫‪٪‬‬
‫)‪(ng/ml‬‬ ‫)‪(R‬‬ ‫)‪(ng/ml‬‬ ‫)‪(ng/ml‬‬ ‫)‪ (٪‬رزومه‬ ‫)‪(%‬‬ ‫)‪(%‬‬ ‫‪٪‬‬ ‫ی )‪ (CV %‬من‬
‫آمفتامین‪R-‬‬ ‫‪10000.99892.550-50‬‬ ‫ن‬
‫‪75‬‬ ‫)‪1.130.383 (6)98 (2)99 (1‬‬

‫‪1000‬‬ ‫‪1.250.1‬‬
‫د‬
‫‪8000‬‬ ‫)‪1.340.790 (2)99 (1)99 (1‬‬
‫اس آمفتامین‬ ‫‪50-10000‬‬ ‫‪0.9987‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪50‬‬ ‫ا‬
‫‪75‬‬ ‫‪0.9‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪2‬‬ ‫)‪84 (6‬‬ ‫)‪97 (8‬‬ ‫)‪105 (2‬‬ ‫ر‬
‫‪1000‬‬ ‫‪0.8‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪0.5‬‬
‫و‬
‫‪8000‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪0.3‬‬ ‫)‪90 (2‬‬ ‫)‪96 (7‬‬ ‫)‪100 (1‬‬
‫ی‬
‫و بین سنجش )‪ (n=6‬دقت درون ‪ (LLOQ)،‬حد پایین‌تر کمی‌سازی ‪ (LOD)،‬حد تشخیص ‪ (R)،‬توجه‪ :‬محدوده کالیبراسیون‪ ،‬ضریب همبستگی‬ ‫‪(n=10)،‬‬
‫‪ (n = 6).‬و اثرات ماتریس اصالح شده با استاندارد داخلی )‪ (ME، n = 6‬اثرات ماتریس ‪ (RE، n = 6)،‬بازیابی استخراج ‪ (n=10) )،‬بایاس‬
‫س‬
‫آمفتامین در ادرار در پایین ترین‪ R/S-‬از ‪ MRM‬کروماتوگرام شکل ‪5‬‬ ‫‪8‬‬
‫وء مصرف غربالگری می‌شوند‪ .‬نمونه آمفتامین مثبت منتخب با روش‬
‫سطح کالیبراسیون (‪ 50‬نانوگرم بر میلی لیتر از هر انانتیومر)‬
‫انانتیو انتخاب بیشتر مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرند‪ .‬بنابراین‪،‬‬
‫غلظت کل آمفتامین قبل از تجزیه و تحلیل مشخص است و نمونه های‬
‫‪ MRM R-/S-‬برای هر دو انانتیومر‪ .‬کروماتوگرام ‪ R≥ 0.9987‬میلی لیتر‪ ،‬با‬ ‫خالی پس از نمونه های غلیظ تزریق می شوند‪ .‬باید توجه داشته باشید‬
‫آمفتامین در پایین ترین سطح کالیبراتور در شکل ‪ 5‬نشان داده شده‬ ‫‪ EME‬که به نظر می رسد انتقال با محتوای باالی آب در فازهای پذیرنده‬
‫‪5‬‬
‫است ‪ .‬دستور شستشو با تجزیه و تحلیل سمفتامین خالص تایید شد‪.‬‬ ‫‪ .‬مرتبط باشد‪ .‬این در بخش ‪ 3.5‬بیشتر مورد بحث قرار گرفته است‬
‫‪LOD‬‬ ‫برآورد شده‬ ‫)‪(S/N > 3‬‬ ‫به ترتیب ‪ 2.5‬و ‪ 5‬نانوگرم در میلی لیتر‬ ‫‪ (6=n).‬هیچ پیک تداخلی در ادرار خالی استخراج شده یافت نشد‬
‫برای‬ ‫و‪R-‬‬ ‫آمفتامین‬ ‫بود‪S-‬‬ ‫‪.‬آمفتامین‬ ‫‪LLOQ‬‬ ‫روی کمترین غلظت‬ ‫نمونه‌های‬ ‫‪QC‬‬ ‫استخراج‌شده در دمای ‪ 10‬درجه سانتی گراد (نمونه‌گیر‬
‫بود‪ .‬بین ‪ S/N> 30‬کالیبراسیون (‪ 50‬نانوگرم در میلی لیتر) تنظیم شد و‬ ‫‪.‬خودکار) حداقل به مدت ‪ 7‬روز پایدار بودند‬
‫برای هر دو انانتیومر و سوگیری ‪ LLOQ 7٪‬در ‪ CV‬سنجش (تعداد = ‪)10‬‬
‫<‪ ٪1.1‬بود‪ .‬نمونه‌های‬ ‫‪QC‬‬ ‫در غلظت‌های پایین (‪ 75‬نانوگرم در‬
‫مقایسه روش با آزمایشگاه معمولی | ‪3.4.1‬‬
‫میلی‌لیتر)‪ ،‬متوسط (‪ 1000‬نانوگرم در میلی‌لیتر)‪ ،‬و باال (‪8000‬‬
‫‪±٪،‬نانوگرم در میلی‌لیتر) با بایاس در ‪2‬‬ ‫≤‪CV‬‬ ‫های درون سنجش‬ ‫با روش روتین انانتیو انتخابی فعلی مقایسه ‪ EME-UHPSFC-MS/MS‬روش‬
‫های بین سنجش اندازه‌گیری شدند‪ 5 ≤ .‬درصد کنترل های‪ ،٪1.5 CV‬و‬ ‫شد‪ .‬این دو روش فقط در مرحله آماده سازی نمونه متفاوت هستند‪ .‬در‬
‫‪ (jZj ≤ 1.9).‬با دقت قابل قبول اندازه گیری شد )آمفتامین‪ (n = 3، S-‬خارجی‬ ‫استخراج می شود و ‪ LLE‬روش معمول‪ ،‬آمفتامین از ادرار با استفاده از‬
‫در ‪ LLE-UHPSFC-MS/MS‬سپس با تبخیر حالل و بازسازی می شود‪ .‬روش‬
‫بازیابی استخراج‬ ‫)‪(RE) 83٪ (CV = 6٪‬‬ ‫‪٪‬در غلظت کم و ‪90‬‬ ‫= ‪(CV‬‬
‫آزمایش دارو به مدت ‪ 15‬ماه در تجزیه و تحلیل بیش از ‪ 6250‬نمونه‬
‫) ‪2٪‬‬ ‫بود‪ (ME) 96٪ - 99٪ (CV ≤ 8٪) ،‬در غلظت باال بود‪ .‬اثرات ماتریس‬
‫‪.‬استفاده شده است‬
‫که نه سرکوب سیگنال و نه افزایش را نشان داد‪ .‬هنگامی که با‬ ‫‪IS‬‬
‫نمونه‌های ادرار ناشناس (‪ 31‬نفر) که قبًال در آزمایشگاه معمولی‬
‫‪.‬بود )‪٪ (CV ≤ 2٪‬تصحیح شد‪ ،‬اثرات ماتریس ‪105 - ٪99‬‬
‫آنالیز شدند‪ .‬رگرسیون پاس و بابلوک در ‪ EME‬آنالیز شده بودند‪ ،‬مجددًا با‬
‫انتقال در نمونه های خالی تزریق شده پس از یک نمونه غلیظ (‬
‫شکل ‪ 6‬ارائه شده است ‪ .‬نتایج سنجش هر دو انانتیومر گنجانده شد و در‬
‫‪ 20000‬نانوگرم در میلی لیتر) ‪ ٪26‬تا ‪ ٪36‬از پایین ترین کالیبراتور‬
‫مجموع ‪ 45‬جفت غلظت را ساخت‪ .‬با توجه به کمیته منطقه ای اخالق‬
‫فراتر رفت‪ .‬بنابراین باید ) ‪ (20٪ LLOQ 18‬بود که از نیازهای توصیه شده‬
‫تحقیق‪ ،‬برای ارائه مختصر نتایج معمول به عنوان بخشی از مقاله‬
‫در تجزیه و تحلیل روتین به انتقال توجه کرد‪ .‬نمونه‌هایی که به‬
‫‪.‬روش شناختی‪ ،‬نیازی به تایید رسمی نیست‬
‫آزمایشگاه ما می‌رسند ابتدا با یک روش غربالگری غیر کایرال برای‬
‫‪918‬‬ ‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬

‫به طور متوسط ‪ ٪3‬از روش معمول ‪ EME‬نتایج سنجش با استفاده از‬ ‫دقت و دقت را مطابق ‪ EME‬بر اساس داده‌های اعتبارسنجی‪ ،‬ویال رسانا‬
‫‪17،18‬‬
‫انحراف داشت که از ‪ ٪21‬تا ‪ ٪31‬متغیر بود‪ .‬یک نمونه ‪ 85‬درصد از‬ ‫نتایج سنجش با‬ ‫با دستورالعمل‌های توصیه‌شده مجاز می‌سازد‪.‬‬
‫روش معمول اصلی منحرف شد و با روش معمول مورد تجزیه و‬ ‫مطابقت داشت‪ .‬بنابراین‪ ،‬کیفیت داده‌های ‪ LLE‬روش معمول با استفاده از‬
‫تحلیل مجدد قرار گرفت‪ .‬تجزیه و تحلیل مجدد با روش معمول به‬ ‫به‌دست‌آمده با ویال رسانا‬ ‫‪EME‬‬ ‫مطابق با الزامات ما برای روش‌های‬
‫موازات روش‬ ‫‪EME (2٪‬‬ ‫و انحراف از روش )توسعه‬ ‫‪LLE‬‬ ‫اصلی ‪٪82‬‬ ‫‪.‬معمول بود‬
‫و ‪ Passing‬نشان می دهد که خطا در دست زدن به نمونه‪ .‬خط رگرسیون‬ ‫افزایش تمرکز بر پایداری و اثرات زیست‌محیطی‪ ،‬بحث درباره‬
‫بود ‪ LLE [EME] = 1.04‬و ‪ EME‬بین ‪Bablok‬‬ ‫روش‌های جدید در زمینه شیمی سبز را مرتبط می‌سازد‪ .‬در نهایت‪،‬‬
‫‪[LLE] + 2.94.‬‬ ‫فواصل اطمینان ‪ 95‬درصد از فاصله [ ‪ ]11.5 ،3.38‬و‬ ‫رویه‌های تحلیلی آینده باید شیمی سبز را در همه مراحل ترویج دهند‪.‬‬
‫شیب [‪ ]1.05 ،1.02‬نشان داد که هیچ سوگیری ثابتی وجود ندارد‪ ،‬اما‬ ‫‪،‬ابزار ارزیابی سبزی که اخیرًا به تهیه نمونه اختصاص داده شده است‬
‫یک تفاوت متناسب ‪ ٪4‬وجود دارد‪ .‬از آنجایی که تفاوت نسبی بین‬ ‫‪AGREEprep،‬‬ ‫‪24‬‬
‫برای مقایسه‬ ‫‪EME‬‬ ‫ویال رسانا با‬ ‫‪LLE‬‬ ‫استفاده شد‪ .‬نمرات‬
‫روش‌ها با فاصله اطمینان کم حداقل بود‪ ،‬توافق بین روش‌ها‬ ‫سبز بودن از تجزیه و تحلیل‬ ‫‪AGREEprep‬‬ ‫در شکل ‪ 7‬ارائه شده است‬
‫‪.‬رضایت‌بخش در نظر گرفته شد‬ ‫(محاسبات در اطالعات پشتیبانی ارائه شده است)‪ .‬در نمودارها‪ ،‬امتیاز‬
‫کلی در مرکز داده شده است که با ‪ 10‬معیار عملکرد احاطه شده است‪.‬‬
‫طول هر معیار نشان دهنده وزن تعیین شده است‬
‫به عنوان آماده سازی نمونه ‪ EME‬ارزیابی | ‪3.5‬‬
‫برتر بود‪ LLE ،‬از جمله استخراج‪ ،‬تبخیر و بازسازی بود‪ .‬توان نمونه با‬
‫زیرا روش نیمه خودکار بود و در صفحات ‪ 96‬چاهی انجام شد‪ .‬با این‬
‫‪،‬حال‬ ‫‪EME 96‬‬ ‫چاهی در حال توسعه تجاری است و در آینده نزدیک‬
‫‪.‬را فراهم می کند ‪ EME‬امکان عملیات با توان باال و نیمه خودکار‬

‫شکل ‪6‬‬ ‫آمفتامین ‪ S-‬و )‪ R- (16=n‬رگرسیون پاس و بابلوک برای تعیین‬

‫= ‪ Y‬مقطع ‪ LLE-UHPSFC-MS/MS.‬و ‪ EMEUHPSFC-MS/MS‬با )‪ (29=n‬در ادرار‬
‫اطمینان ‪2.94 (95%‬‬ ‫‪ ( %95‬شیب = ‪)، 1.04‬تا ‪ (CI): 3.38 11.52‬فاصله‬
‫ضریب همبستگی رتبه اسپیرمن ‪).‬تا ‪ (CI): 1.02 1.05‬فاصله اطمینان‬
‫تا ‪ (CI): 0.995‬فاصله اطمینان ‪0.997 (P <0.0001، 95%‬‬
‫)‪0.998‬‬
‫نهایی(‬ ‫در حالی که رنگ عملکرد را تجسم می کند‪ .‬نمرات ‪)،‬تا امتیاز‬
‫که ‪ LLE‬و ‪ EME‬برای ‪AGREEprep‬‬ ‫را به ‪ EME‬به ترتیب ‪ 0.54‬و ‪ 0.47‬بود‬
‫جایگزین سبزتر در بین این دو تبدیل کرد‪ .‬مصرف حالل آلی ‪9‬‬
‫‪ LLE‬و ‪ 900‬میکرولیتر در هر نمونه با ‪ EME‬میکرولیتر در هر نمونه با‬
‫بود که مربوط به استفاده ساالنه تقریبًا ‪ 004/0‬لیتر در مقابل حالل های‬
‫‪ 4،‬لیتر برای آماده سازی نمونه است‪ .‬عالوه بر این‬ ‫‪EME‬‬ ‫یک روش‬
‫شامل چندین عملیات ‪ LLE‬یک مرحله‌ای بود‪ ،‬در حالی که روش معمول‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬ ‫‪919‬‬

‫با مقایسه روش‬ ‫‪EME‬‬ ‫پیشنهادی با پروتکل‌های آماده‌سازی نمونه‬ ‫تکنیک مطلوب از نظر شیمی سبز تبدیل می کند‪ .‬از آنجایی که توان‬
‫گزارش‌شده در دیگر آنالیزهای زیستی مبتنی بر کروماتوگرافی‬ ‫نمونه یک سیستم ویال ‪ 10‬موقعیتی در مقایسه با روش‌های معمولی که‬
‫انانتیومرهای آمفتامین‪ ،‬بدیهی است که مصرف حالل آلی اکثر‬ ‫از جابجایی خودکار مایع و صفحات ‪ 96‬چاهی استفاده می‌کنند کاهش‬
‫‪44-40‬‬
‫روش‌های گزارش‌شده مرتبه‌ای باالتر از‬ ‫‪EME‬‬ ‫استثناهای‬ ‫است‪.‬‬ ‫می‌یابد‪ ،‬این مطالعه به عنوان یک پیوند امیدوارکننده برای گام بعدی در‬
‫و همکاران‪ ،45 ،‬که در آن ‪ Chermá‬قابل توجه روش‌هایی هستند که توسط‬ ‫می‌کند ‪EME‬‬ ‫‪.‬رسانا‪ ،‬یک سیستم ‪ 96‬چاهی رسانا عمل‬
‫ادرار با آب رقیق می‌شود‪ ،‬و توسط‬ ‫‪Hädener‬‬
‫‪ ،46‬پیشنهاد‬
‫و همکاران‪،‬‬ ‫استخراج از نمونه‌های با منشاء مختلف نشان داد که تغییرات‬
‫شده‌اند که از تعویض ستون بر روی خط در ترکیب با‬ ‫‪LC-MS‬‬ ‫استفاده‬ ‫ترکیبی بزرگ و طبیعی ادرار بر انتقال جرم تأثیر می‌گذارد‪ .‬بنابراین‪،‬‬
‫‪.‬می‌کنند‬ ‫یک استاندارد داخلی با برچسب ایزوتوپی برای تصحیح داده های کمی‬
‫استخراج در یک‬ ‫‪EME‬‬ ‫پذیرنده آبی به دلیل سبز بودن و سادگی‬ ‫استفاده شد‪ .‬تحت این شرایط‪ ،‬عملکرد مطابق با الزامات نظارتی برای‬
‫عملیاتی‪ ،‬معموًال یک مزیت در نظر گرفته می شود‪ .‬با این حال‪ ،‬در‬ ‫روش‌های تجزیه و تحلیل زیستی بود‪ .‬بنابراین‪ ،‬داده های کمی به دست‬
‫زمانی که آمفتامین در ‪ UHPSFC 130‬کار کنونی‪ ،‬مقایسه انتقال در ابزار‬ ‫آمده با‬ ‫‪EME،‬‬ ‫بر اساس فن آوری ویال رسانا‪ ،‬مطابق با داده های به‬
‫میلی‌موالر‬ ‫پذیرنده( ‪HCOOH‬‬ ‫فاز‬ ‫)‪EME‬‬ ‫و در مخلوطی از ‪130‬‬ ‫‪.‬دست آمده با استفاده از یک روش معمول بود‬
‫پخش شد‪ ،‬نشان داد که حامل بیش از )‪ IPA (3:2 v/v‬و ‪ HCOOH‬میلی‌موالر‬
‫سپاسگزاریها‬
‫حد در حالل تزریق دوم کاهش یافت‪ .‬در برنامه حاضر‪ ،‬غلظت کل‬
‫‪.‬پشتیبانی شد )‪ (NRF 310086‬این کار توسط شورای تحقیقات نروژ‬
‫آمفتامین قبل از تجزیه و تحلیل انتی انتخابی شناخته شده بود‪ ،‬و مسائل‬
‫‪.‬مربوط به حمل را می توان با تزریق نمونه های خالی دور زد‬ ‫بیانیه تعارض منافع‬
‫ن‬

‫چاهی‪ .‬امتیاز کلی تاثیر در مرکز‪ ،‬احاطه شده توسط ‪ 10‬معیار ‪ LLE 96‬و ‪ EME‬ویال رسانای ‪ 10‬موقعیت ‪ AGREEprep‬نتایج ارزیابی شکل ‪7‬‬
‫عملکرد مربوط به (‪ )1‬آماده سازی نمونه در محل‪ )2( ،‬حالل ها‪/‬معرف های ایمن‪ )3( ،‬مواد پایدار‪ )4( ،‬زباله‪ )5( ،‬نمونه‪ ،‬مقادیر مواد شیمیایی و‬
‫مواد ‪ )6( ،‬توان عملیاتی نمونه‪ )7( ،‬ادغام مراحل و اتوماسیون‪ )8( ،‬مصرف انرژی‪ )9( ،‬آماده سازی پس از نمونه گیری‪ .‬پیکربندی و (‪)10‬‬
‫ایمنی برای اپراتورها‪ .‬طول هر معیار نشان دهنده وزن (در امتیاز نهایی) و رنگ نشان دهنده عملکرد است‬
‫ویسندگان هیچ منفعت مالی یا روابط شخصی که به نظر می‌رسد بر‬
‫‪.‬کار گزارش‌شده در این مقاله تأثیر بگذارد‪ ،‬اعالم نمی‌کنند‬
‫نتیجه گیری | ‪4‬‬

‫‪ORCID‬‬
‫‪EME‬‬ ‫با نمونه اولیه ویال های رسانا با‬ ‫‪UHPSFCMS/MS‬‬ ‫برای تعیین‬
‫‪Tonje Gottenberg Skaalvik‬‬ ‫‪https://orcid.org/0000-0002-9146-2870‬‬
‫انانتیومرهای آمفتامین در ادرار ترکیب شد‪ .‬روش توسعه‌یافته دقت و‬
‫الیزابت لیر اویستاد‬ ‫‪https://orcid.org/0000-0003-0781-6865‬‬
‫به ‪ LLE‬دقت باالیی را نشان داد‪ ،‬و نتایج سنجش با روش معمولی که از‬
‫سولفرد هگستاد‬ ‫‪https://orcid.org/0000-0001-6334-6357‬‬
‫مصرف ‪. EME‬عنوان آماده‌سازی نمونه استفاده می‌کرد‪ ،‬مطابقت داشت‬
‫حالل آلی کمتری را در مقایسه با‬ ‫‪LLE‬‬ ‫ارائه می دهد و آن را به یک‬ ‫منابع‬
‫‪920‬‬
‫‪1.‬‬ ‫‪The Norwegian PrescriptionDataBase.2023.‬‬ ‫‪https://www.‬‬
‫‪reseptregisteret.no/Prevalens.aspx‬‬
‫‪2.‬‬ ‫تعیین ‪Losacker M، Zörntlein S، Schwarze B، Staudt S، Röhrich J، Hess C.‬‬
‫‪13.‬‬
‫‪-methylendioxy-N-‬ترکیب انانتیومر آمفتامین‪ ،‬مت آمفتامین و ‪3،4‬‬
‫در نمونه های مواد مخدر خیابانی )‪methylamphetamine (MDMA‬‬
‫کشف شده از جنوب آلمان‪ .‬تست دارو مقعدی‪2022 .‬؛ ‪:)3( 14‬‬
‫‪566-557. doi: 10.1002/dta.3118‬‬
‫‪3.‬‬ ‫تعیین آمفتامین کایرال در قرص های ضبط شده با ‪ AM.‬ضبه‬
‫‪ GC-MS. J King Saud Univ Sci.‬جداسازی غیرمستقیم انتی با استفاده از‬
‫‪. doi: 10.1016/j.jksus.2020.05.003‬؛ ‪20202628-2622 :)5( 32‬‬
‫‪4.‬‬ ‫استفاده از نسبت های ایزومر آمفتامین ‪ RA.‬جورج اس‪ ،‬بریتویت‬
‫‪15. Skaalvik TG، Øiestad EL، Trones R، Pedersen-Bjergaard S، Hegstad S.‬‬
‫برای تعیین انطباق مصرف کنندگان آمفتامین دگزدرین را تجویز‬
‫‪. doi:‬کرد‪ .‬جی سم مقعدی‪2000 .‬؛ ‪227-223 :)3( 24‬‬
‫‪10.1093/jat/24.3.223‬‬
‫‪5.‬‬ ‫‪Havnen H، Hansen M، Spigset O، Hegstad S.‬‬ ‫جداسازی انانتیومر و‬
‫آمفتامین در سرم با استفاده از استخراج مایع‪-‬مایع‪ R/S-‬تعیین کمیت‬
‫نیمه خودکار و کروماتوگرافی مایع فوق بحرانی‪-‬طیف سنجی‬
‫جرمی پشت سر هم با عملکرد فوق العاده باال‪ .‬تست دارو مقعدی‪.‬‬
‫‪2020. doi: 10.1002/dta.2879‬؛ ‪1353-1344 :)9( 12‬‬
‫‪6.‬‬ ‫جداسازی ‪ J.‬فراست ‪Hegstad S، Havnen H، Helland A، Spigset O،‬‬
‫آمفتامین در ادرار توسط طیف‌سنجی‪ R/S-‬انانتیومر و تعیین کمیت‬
‫جرمی پشت سر هم کروماتوگرافی مایع فوق بحرانی با عملکرد‬
‫‪. doi:‬؛ ‪. J Chromatogr B. 201812-7 :1078-1077‬فوق‌العاده باال‬
‫‪10.1016/j. jchromb.2018.01.028‬‬
‫‪18.‬‬
‫‪7.‬‬ ‫بیوآنالیز ‪Harps LC، Joseph JF، Parr MK. SFC‬‬
‫برای جداسازی کایرال در‬
‫‪J Pharm Biomed Anal.‬‬ ‫‪. doi: 10.1016/j.jpba.2018.‬؛ ‪201959-162:47‬‬
‫‪08.061‬‬
‫‪8.‬‬ ‫و ‪Hegstad S، Hermansson S، Betner I، Spigset O، Falch BM.‬‬
‫غربالگری‬
‫تعیین کمی داروهای سوء مصرف در ادرار رقیق شده توسط‬
‫‪. doi:‬؛ ‪UPLC-MS/MS. J Chromatogr B. 2014 95-83 :948-947‬‬
‫‪10.1016/j. jchromb.2013.12.014‬‬
‫‪9.‬‬ ‫‪Schüller M، McQuade TA-P، Bergh MS-S، Pedersen-Bjergaard S، Øistad‬‬
‫‪EL.‬‬ ‫تعیین آنالوگ های تریپتامین در خون کامل با استخراج‬
‫تاالنتا اوپن‪2023 .‬؛ ‪ UHPLC-MS/MS.‬الکتروممبران ‪ 96‬چاهی و‬
‫‪7:100171. doi: 10.1016/j.talo.2022.100171‬‬
‫‪10.‬‬ ‫توسعه یک دستگاه ‪Drouin N, Mandscheff JF, Rudaz S, Schappler J.‬‬
‫استخراج جدید مبتنی بر استخراج موازی الکتروممبران‪ .‬مقعد‬
‫‪. doi: 10.1021/acs.analchem.‬شیمی‪2017 .‬؛ ‪6350-6346 :)12( 89‬‬
‫‪7b01284‬‬
‫‪11. Eibak LEE، Rasmussen KE، Øistad EL، Pedersen-Bjergaard S، Gjelstad A.‬‬
‫‪ Chim Acta.‬استخراج موازی الکتروغشایی در قالب ‪ 96‬چاه‪ .‬مقعد‬
‫‪. doi: 10.1016/j.aca.2014.04.038‬؛ ‪201452-828:46‬‬
‫‪12.‬‬ ‫طراحی ریزتراشه ‪Payán MR، Santigosa E، Torres RF، Lopez MAB.‬‬
‫جدید ترکیبی همه کاره از استخراج الکتروممبران و‬
‫میکرواستخراج فاز مایع در یک دستگاه تراشه‪ .‬مقعد شیمی‪.‬‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬
‫‪10424-10417‬‬ ‫(‪:)17‬‬ ‫‪90‬‬ ‫‪;2018.‬‬ ‫‪doi:‬‬
‫‪10.1021/acs.analchem.8b02292‬‬
‫کرمی م‪ ،‬یمینی ی‪ ،‬عبدالسالمی اصل ی‪ ،‬رضازاده محمد‪.‬‬
‫استخراج الکتروممبران پالسی روی تراشه به عنوان یک مفهوم‬
‫جدید برای تجزیه و تحلیل سیاالت بیولوژیکی در یک دستگاه‬
‫‪. doi: 10.‬؛ ‪. J Chromatogr a. 20179-1 :1527‬کوچک‬
‫‪1016/j.chroma.2017.10.049‬‬
‫‪14. Petersen‬‬ ‫‪NJ، JensenH، HansenSH، FossST، SnakenborgD،‬‬
‫استخراج الکترو غشایی روی تراشه‪.‬‬
‫‪Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫‪. doi:‬میکروسیال نانوسیال‪2010 .‬؛ ‪888-881 :)5-4( 9‬‬
‫‪10.1007/s10404-0100603-6‬‬
‫تعیین داروهای روانگردان در سرم با استفاده از استخراج‬
‫‪ UHPLC-MS/MS. J Chromatogr B.‬الکتروغشایی ویال رسانا همراه با‬
‫‪. doi: 10.1016/j.jchromb.2021. 122926‬؛ ‪20211183:122926‬‬
‫‪16.‬‬ ‫تعیین ‪Hay AO، Trones R، Herfindal L، Skrede S، Hansen FA.‬‬
‫متوترکسات و متابولیت های آن در پالسمای انسان با استخراج‬
‫‪ LC-MS/MS. Adv‬الکترومغشا در ویال های رسانا و به دنبال آن‬
‫‪. doi: 10.1016/j.sampre.2022.100011‬؛ ‪Sample Prep. 20222:100011‬‬
‫‪17.‬‬ ‫وزارت بهداشت و خدمات انسانی ایاالت متحده‪ .‬غذا و دارو‬
‫مدیریت‪ .‬راهنمای صنعت‪ ،‬اعتبارسنجی روش تجزیه و تحلیل‬
‫‪2021‬‬ ‫‪.‬زیستی‬
‫‪https://www.fda.gov/files/drugs/published/BioanalyticalMethod-‬‬
‫‪Validation-Guidance-for-Industry.pdf‬‬
‫در روش اعتبارسنجی ‪ ICH M10‬آژانس دارویی اروپا راهنمای‬
‫‪. https://www.‬روش تحلیلی و تجزیه و تحلیل نمونه مطالعه ‪2023‬‬
‫‪ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/ich-guidelinem10-‬‬
‫‪bioanalytical-method-validation-step-5_en.pdf‬‬
‫‪19. Huang C، Chen Z، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S، Shen X.‬‬ ‫استخراج‬
‫‪.‬الکتروممبران‪ .‬روند شیمی مقعد‪2017 .‬؛ ‪56-95:47‬‬ ‫‪doi: 10.‬‬
‫‪1016/j.trac.2017.07.027‬‬
‫‪20. Fernández E، Vårdal L، Vidal L، Canals A، Gjelstad A، PedersenBjergaard‬‬
‫‪S.‬‬‫استخراج الکتروغشایی با واسطه کمپلکس داروهای پایه بسیار‬
‫قطبی ‪ -‬یک مطالعه اساسی با کاتکول آمین ها در ادرار به عنوان‬
‫سیستم مدل‪ .‬مقعد بیوانال شیمی‪2017 .‬؛ ‪-4215 :)17( 409‬‬
‫‪4223. doi: 10.1007/s00216-017-0370-2‬‬
‫‪21.‬‬ ‫بررسی ‪ HR.‬نصراللهی س‪.‬س‪ ،‬داورانی س‪.‬ش‪ ،.‬معظمی‬
‫ایمپدومتری اثرات نمک بر استخراج الکتروممبران‪ :‬نکات عملی‬
‫‪. doi:‬الکتروشیم اکتا‪2019 .‬؛ ‪ pH 363-296:355‬برای تنظیم‬
‫‪10.1016/j.‬‬
‫‪electacta.2018.11.037‬‬
‫‪22. Seip KF، Jensen H، Sønsteby MH، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫استخراج الکتروممبران‪ :‬توزیع یا الکتروفورز؟ الکتروفورز‬
‫‪2013. doi: 10.1002/elps.201200587‬؛ ‪799-792 :)5( 34‬‬
‫‪23.‬‬ ‫‪.‬اعتبار سنجی روشهای جدید ‪Peters FT, Drummer OH, Musshoff F.‬‬
‫‪. doi:‬؛ ‪Forensic Sci Int. 2007224-216 :)3-2( 165‬‬
‫‪10.1016/j.forsciint.2006. 05.021‬‬
‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬ ‫‪921‬‬

‫‪24. Wojnowski W، Tobiszewski M، Pena-Pereira F، Psillakis E. AGREEprep -‬‬ ‫‪36. Kubán P، Boˇ cek P.‬‬ ‫اثرات الکترولیز بر محلولهای عملیاتی در‬
‫متریک سبزی تحلیلی برای آماده‌سازی نمونه‪ .‬روند شیمی مقعد‪.‬‬ ‫؛ ‪. J Chromatogr a. 2015‬استخراج الکتروغشایی‪ :‬نقش محلول پذیرنده‬
‫‪2022. doi: 10.1016/j.trac.2022. 116553‬؛ ‪149:116553‬‬ ‫‪19-11 :1398. doi: 10.1016/j.chroma.2015.‬‬
‫‪25.‬‬ ‫تحلیلی متریک سبزی برای آماده سازی ‪Wojnowski W. AGREEprep‬‬ ‫‪04.024‬‬

‫دسترسی به ژانویه ‪. mostwiedzy.pl/AGREEprep. 2023‬نمونه‬ ‫‪37.‬‬ ‫عباسی س‪ ،‬حائری س‪ .‬غنی‌سازی داروهای روان‌گردان با استفاده‬
‫‪26.‬‬ ‫آموزشی در ‪Pena-Pereira F، Tobiszewski M، Wojnowski W، Psillakis E.‬‬
‫از دانه‌های زیستی رامنولیپید پس از استخراج الکتروممبران بر‬
‫یک متریک سبزی تحلیلی برای آماده سازی ‪ AGREEprep‬مورد‬ ‫اساس ژل آگارز با استفاده از الکترود دوار به عنوان یک‬
‫‪. doi:‬؛ ‪. Adv Sample Prep. 20223:100025‬نمونه‬ ‫‪. J Chromatogr a. 2021; 1655:462500.‬استراتژی سبز و بدون حالل آلی‬
‫‪doi: 10.1016/j.chroma. 2021.462500‬‬
‫‪10.1016/j.sampre.2022. 100025‬‬
‫‪38. Seip KF، Jensen H، Kieu TE، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫اثرات‬
‫‪27. Hansen FA، Pedersen-Bjergaard S.‬‬ ‫استخراج الکتروممبران ‪ -‬نگاهی‬
‫‪.‬نزدیک به غشای مایع‬ ‫‪Adv‬‬ ‫‪. doi:‬؛ ‪Sample Prep. 20222:100020‬‬
‫‪.‬؛ ‪. J Chromatogr a. 20141347:17‬نمک در استخراج الکتروممبران‬
‫‪doi: 10.1016/j.chroma.2014.04.053‬‬
‫‪10.1016/j.sampre.2022.100020‬‬
‫‪39. Middelthon-Bruer TM، Gjelstad A، Rasmussen KE، PedersenBjergaard S.‬‬
‫مواد ‪28. Eie LV، Pedersen-Bjergaard S، Hansen FA.‬‬ ‫استخراج الکتروغشایی‬
‫‪ J‬قطبی ‪ -‬وضعیت و دیدگاه ها‬ ‫؛ ‪Pharm Biomed Anal. 2022‬‬
‫‪. J Sep‬پارامترهای موثر بر استخراج الکتروغشایی داروهای پایه‬
‫‪. doi: 10.1002/jssc. 200700502‬؛ ‪Sci. 2008759-753 :)4( 31‬‬
‫‪207:114407. doi: 10.1016/j.jpba.2021.114407‬‬
‫‪40.‬‬ ‫‪ R-()/S(+) -‬جداسازی کروماتوگرافیک ‪Hess C، Losacker M، Maas A.‬‬
‫‪29.‬‬ ‫مهاجرت ‪Gjelstad A، Rasmussen KE، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫انانتیومرهای آمفتامین و مت آمفتامین‪ :‬تمایز بین مصرف تک‬
‫الکتروکینتیکی در غشاهای مایع مصنوعی‪ :‬تنظیم شیمی غشاء به‬
‫متامفتامین و مصرف همزمان با آمفتامین با استفاده از آنالیز کمی‬
‫؛ ‪. J Chromatogr a. 2006 :)2-1( 1124‬انواع مختلف مواد دارویی‬
‫‪. doi:‬؛ ‪ LC-MS/MS. Int J Leg Med. 2019473-467 :)2( 133‬انتخابی‬
‫‪34-29. doi: 10.1016/j.chroma.2006.04.039‬‬
‫‪10. 1007/s00414-018-1979-1‬‬
‫‪30.‬‬ ‫گزینش پذیری و کارایی ‪Hansen FA، Tirandaz S، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫‪41. Losacker M، Kraemer M، Philipsen A،‬‬ ‫و همکاران‪ .‬کمی سازی انتی‬
‫استخراج الکتروغشایی پایه های قطبی با غشاهای مایع مختلف ‪-‬‬ ‫انتخابی آمفتامین و متابولیت ها در نمونه های سرم‪ :‬ارزیابی‬
‫‪. J Sep Sci. 2021; 44 (13):‬پیوند با خواص آنالیت‬ ‫پزشکی قانونی و تخمین زمان مصرف متابولیت ها ‪( 11 ;2021‬‬
‫‪2631-2641. doi: 10.1002/jssc.202100167‬‬
‫‪521 :)8. doi: 10.3390/metabo11080521‬‬
‫‪31. Bavlovic Piskᡠcková H، Nemeˇ skalová A، Kuˇ cera R،‬‬‫و همکاران‪.‬‬
‫‪42.‬‬ ‫رانندگی تحت ‪Nielsen MKK، Andersen NZ، Rasmussen BS، Johansen SS.‬‬
‫تکنیک‌های میکرواستخراج پیشرفته برای آنالیز آمفتامین‌ها در‬
‫تأثیر آمفتامین‪ :‬ارزیابی تحلیلی مصرف داروهای غیرقانونی یا‬
‫‪. J Pharm Biomed Anal.‬شیر مادر و مقایسه آن‌ها با روش‌های مرسوم‬
‫کایرال‪ .‬جی سم مقعدی‪ UHPLC-MS-MS .‬تجویزی با استفاده از‬
‫‪. doi: 10.1016/j.jpba.2021. 114549‬؛ ‪2022210:114549‬‬
‫‪2023. doi: 10.1093/jat/bkac103‬؛ ‪286-280 :)3( 47‬‬
‫‪32.‬‬ ‫سیدی س‪ ،‬یمینی یمینی‪ ،‬باهری تی‪ ،‬فیض بخش رضا‪ .‬استخراج‬
‫‪43.‬‬ ‫سنجش مایع دهانی انسانی ‪Robbins B، Carpenter RE، Long M، Perry J.‬‬
‫الکتروکینتیکی بر روی غشاهای مایع مصنوعی محرک‌های نوع‬
‫آمفتامین و مت آمفتامین با استفاده از ‪ L-‬و ‪ D‬برای تشخیص ایزومر‬
‫آمفتامین از نمونه‌های ادرار و به دنبال آنالیز کروماتوگرافی مایع‬
‫‪. J Anal Methods Chem. 2022; 2022:4819599. doi:‬استخراج مایع‪-‬مایع‬
‫‪.‬؛ ‪. J Chromatogr a. 20113965-3958 :)26( 1218‬با کارایی باال‬ ‫‪10.1155/2022/4819599‬‬
‫‪doi: 10.1016/j.‬‬
‫‪44. Wang T، Shen B، Shi Y، Xiang P، Yu Z.‬‬
‫‪ R/S-‬جداسازی کایرال و تعیین‬
‫‪chroma.2011.05.002‬‬
‫‪33. Vårdal L، Øiestad EL، Gjelstad A، Jensen H، Pedersen-Bjergaard S.‬‬ ‫در ادرار با استفاده از ‪ R/Samphetamine‬متامفتامین و متابولیت آن‬
‫استخراج الکتروممبران با اصالح حالل محلول پذیرنده‪ :‬انتقال‬ ‫‪. doi:‬؛ ‪LC-MS/MS. Forensic Sci Int. 2015 78-72 :246‬‬
‫‪10.1016/j.forsciint.2014.11.009‬‬
‫جرم بهبود یافته داروهای سوء مصرف از پالسمای انسانی‪ .‬تجزیه‬
‫از ‪45. Chermá MD، Nilsson GH، Johansson A، Jönsson AK، Ahlner J.‬‬
‫استفاده‬
‫‪. doi: 10.4155/bio-‬و تحلیل زیستی‪2019 .‬؛ ‪771-755 :)8( 11‬‬
‫یا آمفتامین؟ تفسیر آنالیزهای کایرال آمفتامین‪ .‬جی ‪Lisdexamfetamine‬‬
‫‪2018-0308‬‬
‫‪34. Seip KF، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫استخراج الکتروممبران از‬ ‫‪. doi: 10.1093/jat/ bkaa170‬سم مقعدی‪2022 .‬؛ ‪16-10 :)1( 46‬‬
‫‪46.‬‬ ‫تعیین کمیت ‪Hädener M، Bruni PS، Weinmann W، Frübis M، König S.‬‬
‫؛‪. J Chromatogr a. 2013‬نمونه های آبی حاوی حالل های آلی قطبی‬
‫‪44-37 :1308. doi: 10.1016/j.chroma.2013.07.105‬‬ ‫سریع انانتیومرهای آمفتامین در ادرار انسان با استفاده از‬
‫کروماتوگرافی مایع کایرال و تعویض ستون بر روی خط همراه با‬
‫‪35. Slampová A, Kubᡠn P, Boˇ cek P.‬‬ ‫جنبه های کمی الکترولیز در‬
‫طیف‌سنجی جرمی پشت سر هم‪ .‬مقعد بیوانال شیمی‪2017 .‬؛ ‪409‬‬
‫‪ Chim Acta.‬استخراج الکتروغشایی آنالیت های اسیدی و بازی‪ .‬مقعد‬
‫‪1300-1291 :)5(. doi: 10.1007/s00216-016-0056-1‬‬
‫‪. doi: 10.1016/j.aca.2015.06.040‬؛ ‪2015100-887:92‬‬
‫‪922‬‬ ‫‪SKAALVIK‬‬ ‫‪ET AL .‬‬

‫اطالعات پشتیبانی‬
‫اطالعات پشتیبانی اضافی را می توان به صورت آنالین در بخش‬
‫‪.‬اطالعات پشتیبانی در انتهای این مقاله یافت‬

‫‪: Skaalvik TG, Øiestad EL, Pedersen-‬نحوه استناد به این مقاله‬

‫‪Bjergaard S, Hegstad S.‬‬ ‫تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار با‬
‫استخراج الکتروممبران ویال رسانا و کروماتوگرافی مایع فوق‬
‫بحرانی با کارایی فوق العاده باال طیف سنجی جرمی پشت سر‬
‫‪.‬هم‬
‫‪.‬تست دارو مقعدی‪2023 .‬؛ ‪918-909 :)8( 15‬‬ ‫‪doi:‬‬
‫‪10.1002/dta.3487‬‬
 ‫اطالعات تکمیلی برای‬

‫تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار با استخراج الکتروغشایی ویال رسانا و فوق باال‬
‫عملکرد طیف سنجی جرمی پشت سر هم کروماتوگرافی سیال فوق بحرانی‬
‫* ‪Tonje Gottenberg Skaalvik a,b , Elisabeth Leere Øistad b,c , Stig Pedersen-Bjergaard b,d , Solfrid Hegstad a‬‬

‫‪a‬‬
‫گروه ‪ b‬گروه فارماکولوژی بالینی‪ ،‬بیمارستان دانشگاه سنت اوالو‪ ،‬دروازه پروفسور بروچس ‪ 7030 ،6‬تروندهایم‪ ،‬نروژ‬
‫داروسازی‪ ،‬دانشگاه اسلو‪ ،‬صندوق پستی ‪ 1068‬بلیندرن‪ ،0316 ،‬اسلو نروژ‬
‫‪c‬‬
‫گروه علوم قانونی‪ ،‬بخش پزشکی آزمایشگاهی‪ ،‬بیمارستان دانشگاه اسلو‪ ،‬صندوق پستی‬
‫‪4950 Nydalen, 0424 Oslo, Norway‬‬
‫‪d‬‬
‫کپنهاگ‪ ،‬دانمارک ‪، Universitetsparken 2، 2100‬گروه داروسازی‪ ،‬دانشکده بهداشت و علوم پزشکی‪ ،‬دانشگاه کپنهاگ‬

‫محتوا‬
‫‪1‬‬ ‫‪ AGREEprep ............................................ ................. 2‬پارامترهای ورودی برای ارزیابی سبزی‬

‫‪1‬‬ ‫‪ AGREEprep‬پارامترهای ورودی برای ارزیابی سبزی‬

‫توسط ‪ AGREEprep‬چاهی با استفاده از ابزار ‪ LLE 96‬و ‪ EME‬سبزی آماده سازی نمونه برای ویال رسانای ده موقعیتی‬
‫به تفصیل آمده است‪ .‬اگرچه نمونه اولیه ویال‌های رسانا ‪ S2‬و جدول ‪ S1‬و همکاران ارزیابی شد‪ . 1 .‬ورودی در جدول ‪Wojnowski‬‬
‫در قسمت‌هایی از نسخه خطی مجددًا مورد استفاده قرار گرفت‪ ،‬ویال‌ها به عنوان یکبار مصرف در نظر گرفته می‌شدند‪ ،‬زیرا این‬
‫‪.‬مورد در یک محیط معمولی است‬

‫‪ EME‬برای ‪ AGREEprep‬ورودی ‪ S1:‬جدول‬

‫معیار‬ ‫وزن‬ ‫ورودی‬ ‫توجیه‬

‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫درجا‬ ‫آماده سازی نمونه در آزمایشگاه انجام می شود‬

‫‪2‬‬ ‫‪5‬‬ ‫میلی لیتر ‪0.012‬‬ ‫‪. DEHPi‬ترکیبات با برچسب هشدار گنجانده شد‬
‫میلی ‪ IS (0.005‬از ‪)، MeOH‬میلی لیتر ‪(~0.0045‬‬
‫)میلی لیتر ‪ HCOOH (0.0024‬و ‪)،‬لیتر‬
‫‪3‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪.‬تمام مواد یکبار مصرف بود‪ .‬هیچ معرف بازسازی نشد‬
‫از معرف ها و مواد ‪<25%‬‬
‫پایدار یا تجدید پذیر هستند‬

‫‪4‬‬ ‫‪4‬‬ ‫گرم ‪7.86‬‬ ‫مواد مصرفی (‪ 7.25‬گرم نمونه ‪ ،) 1-‬معرف ها (‪0.51‬‬
‫میلی لیتر) و نمونه (‪ 0.1‬میلی لیتر)‬

‫‪5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫میلی لیتر ‪0.1‬‬ ‫حجم نمونه ادرار مورد استفاده برای تجزیه و تحلیل‬
‫‪6‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪ h -1‬نمونه ‪17‬‬ ‫نمونه به طور همزمان به مدت ‪ 15‬دقیقه‪ ،‬به عالوه ‪10‬‬
‫‪ 20‬دقیقه برای پیپت کردن و آماده سازی (تجزیه‪،‬‬
‫‪.‬درپوش مجدد) استخراج شد‬

‫‪7‬‬ ‫‪2‬‬ ‫مرحله دستی ‪2‬‬ ‫استخراج و آماده سازی عمومی‬

‫‪1‬‬
 ‫‪8‬‬ ‫‪4‬‬ ‫وات ‪4.25‬‬ ‫هم زدن (‪ 20‬وات) و منبع تغذیه (‪ 150‬وات) برای ‪10‬‬
‫‪.‬نمونه به مدت ‪ 15‬دقیقه‬
‫‪9‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪ GC-MS‬و ‪LC-MS/MS‬‬ ‫همراه با سایر کروماتوگرافی های ‪UHPSFC-MS/MS‬‬
‫) گزینه چهارم (‬ ‫بر اساس مصرف انرژی طبقه بندی ‪ MS‬خط فاصله با‬
‫‪.‬شد‬
‫‪10‬‬ ‫‪3‬‬ ‫یا بیشتر خطر ‪4‬‬ ‫پیکتوگرام منحصر به فرد‪ :‬عالمت تعجب ‪5‬‬
‫‪ (MeOH،‬جمجمه و استخوان های متقاطع ‪(DEHPi)،‬‬
‫‪ (HCOOH)،‬خورنده ‪ (MeOH)،‬شعله ‪HCOOH)،‬‬
‫‪ (MeOH).‬خطر سالمت‬

‫‪ LLE‬برای ‪ AGREEprep‬ورودی ‪ S2:‬جدول‬

‫معیار‬ ‫وزن‬ ‫ورودی‬ ‫توجیه‬

‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫درجا‬ ‫آماده سازی نمونه در آزمایشگاه انجام می شود‬

‫‪2‬‬ ‫‪5‬‬ ‫میلی لیتر (گرم) ‪0.92‬‬ ‫‪. MeOH (0.015‬ترکیبات با برچسب هشدار گنجانده شد‬
‫‪)، Na 2 CO 3‬میلی لیتر ‪)، EtOAc (0.6‬میلی لیتر‬
‫)میلی لیتر ‪)، IPA (0.3‬گرم ‪(0.0026‬‬
‫‪3‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪.‬تمام مواد یکبار مصرف بود‪ .‬هیچ معرف بازسازی نشد‬
‫از معرف ها و مواد ‪<25%‬‬
‫پایدار یا تجدید پذیر هستند‬

‫‪4‬‬ ‫‪4‬‬ ‫گرم ‪6.34‬‬ ‫مواد مصرفی (‪ 5.2‬گرم نمونه ‪ ،) 1-‬معرف ها (‪1.04‬‬
‫میلی لیتر) و نمونه (‪ 0.1‬میلی لیتر)‬

‫‪5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫میلی لیتر ‪0.1‬‬ ‫حجم نمونه ادرار مورد استفاده برای تجزیه و تحلیل‬
‫‪6‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪ h -1‬نمونه ‪77‬‬ ‫مخلوط کردن ‪)،‬دقیقه ‪ LLE (6‬نمونه تحت ‪96‬‬
‫و تبخیر (‪ 10‬دقیقه) )دقیقه ‪(2‬‬
‫به طور همزمان‪ ،‬به عالوه حمل مایعات در ربات برای‬
‫حدود‪ 0.95 .‬ساعت‬
‫‪7‬‬ ‫‪2‬‬ ‫مرحله نیمه اتوماتیک ‪4‬‬
‫‪)،‬شامل اختالط و سانتریفیوژ( ‪، LLE‬جابجایی مایعات‬
‫انتقال مایع رویی (از جمله اسیدی شدن)‪ ،‬تبخیر (از جمله‬
‫‪.‬بازسازی)‬

‫‪8‬‬ ‫‪4‬‬ ‫ساعت ‪9.78‬‬ ‫نمونه تهیه شده با ربات پیپتینگ (‪ 1000‬وات) به ‪96‬‬
‫مدت ‪ 0.9‬ساعت‪ ،‬فویل سیلر (‪ 500‬وات) به مدت ‪2‬‬
‫ثانیه‪ ،‬همزن (‪ 100‬وات) به مدت ‪ 1‬دقیقه‪ ،‬سانتریفیوژ (‬
‫‪ 150‬وات) به مدت ‪ 5‬دقیقه‪ ،‬تبخیر (‪ 150‬وات) برای‬
‫‪.‬مدت زمان ‪ 10‬دقیقه‬
‫‪9‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪ GC-MS‬و ‪LC-MS/MS‬‬ ‫همراه با سایر کروماتوگرافی ها که ‪UHPSFC-MS/MS‬‬
‫) گزینه چهارم (‬ ‫خط فاصله داشتند بر اساس مصرف انرژی طبقه ‪ MS‬با‬
‫‪.‬بندی شدند‬

‫‪2‬‬
 ‫‪10‬‬ ‫‪3‬‬ ‫یا بیشتر خطر ‪4‬‬
‫‪ (Na 2 CO 3‬پیکتوگرام منحصر به فرد‪ :‬عالمت تعجب ‪5‬‬
‫جمجمه و استخوان های متقاطع ‪، EtOAc، HCl، IPA)،‬‬
‫خورنده ‪ (MeOH، IPA، EtOAc)،‬شعله ‪(MeOH)،‬‬
‫‪ (MeOH).‬خطر سالمت ‪(HCl)،‬‬

‫‪AGREEprep - EME‬‬
‫متریک تحلیلی سبزی برای آماده سازی نمونه‬

‫‪01/02/2023 08:33:2‬‬

‫وزن امتیاز معیار‪#‬‬

‫محل آماده سازی نمونه‬
‫‪1.‬‬ ‫‪0.0‬‬ ‫‪1‬‬
‫محل آماده سازی نمونه‪ :‬در محل‬

‫مواد خطرناک‬
‫‪2.‬‬ ‫‪0.97‬‬ ‫‪5‬‬
‫مواد مشکل ساز‪ [mL] 0.012 :‬یا حجم ]‪ [g‬جرم‬

‫پایداری‪ ،‬تجدیدپذیری و قابلیت استفاده مجدد از مواد‬

‫‪3.‬‬ ‫کمتر از ‪ 25‬درصد از معرف ها و مواد پایدار یا تجدید پذیر هستند‪ ،‬اما فقط یک بار قابل‬ ‫‪0.0‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪.‬استفاده هستند‬

‫هدر‬
‫‪4.‬‬ ‫‪0.3‬‬ ‫‪4‬‬
‫زباله‪ [mL] 7.86 :‬یا حجم ]‪ [g‬جرم‬

‫صرفه جویی در اندازه نمونه‬

‫‪5.‬‬ ‫‪1.0‬‬ ‫‪2‬‬
‫نمونه‪ [mL] 0.1 :‬یا حجم ]‪ [g‬جرم‬

‫‪6.‬‬ ‫توان عملیاتی نمونه‬ ‫‪0.67‬‬ ‫‪3‬‬

‫‪3‬‬
 ‫ظرفیت نمونه ساعتی‪17 :‬‬

‫یکپارچه سازی و اتوماسیون‬

‫‪7.‬‬ ‫‪0.25‬‬ ‫‪2‬‬
‫تعداد آماده سازی نمونه مراحل‪ 2 :‬قدم یا کمتر‪ .‬درجه اتوماسیون‪ :‬سیستم های دستی‬

‫مصرف انرژی‬
‫‪8.‬‬ ‫‪1.0‬‬ ‫‪4‬‬
‫‪ [W]: 4.25‬مصرف تقریبی انرژی در هر تحلیل‬

‫پیکربندی آماده سازی پس از نمونه برای تجزیه و تحلیل‬

‫‪9.‬‬ ‫‪0.25‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪.‬کروماتوگرافی مایع‪ ،‬کروماتوگرافی گازی با تشخیص چهار قطبی و غیره‬

‫ایمنی اپراتور‬
‫‪10.‬‬ ‫‪0.0‬‬ ‫‪3‬‬
‫تعداد خطرات متمایز‪ 4 :‬خطر یا بیشتر‬

‫‪AGREEprep - LLE‬‬
‫متریک تحلیلی سبزی برای آماده سازی نمونه‬

‫‪01/02/2023 08:37:42‬‬

‫وزن امتیاز معیار‪#‬‬

‫محل آماده سازی نمونه‬
‫‪1.‬‬ ‫‪0.0‬‬ ‫‪1‬‬
‫محل آماده سازی نمونه‪ :‬در محل‬

‫مواد خطرناک‬
‫‪2.‬‬ ‫‪0.35‬‬ ‫‪5‬‬
‫مواد مشکل ساز‪ [mL] 0.92 :‬یا حجم ]‪ [g‬جرم‬

‫پایداری‪ ،‬تجدیدپذیری و قابلیت استفاده مجدد از مواد‬

‫‪3.‬‬ ‫کمتر از ‪ 25‬درصد از معرف ها و مواد پایدار یا تجدید پذیر هستند‪ ،‬اما فقط یک بار قابل‬ ‫‪0.0‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪.‬استفاده هستند‬

‫هدر‬
‫‪4.‬‬ ‫‪0.33‬‬ ‫‪4‬‬
‫زباله‪ [mL] 6.33 :‬یا حجم ]‪ [g‬جرم‬

‫‪5.‬‬ ‫صرفه جویی در اندازه نمونه‬ ‫‪1.0‬‬ ‫‪2‬‬

‫‪4‬‬
 ‫نمونه‪ [mL] 0.1 :‬یا حجم ]‪ [g‬جرم‬

‫توان عملیاتی نمونه‬

‫‪6.‬‬ ‫‪1.0‬‬ ‫‪3‬‬
‫ظرفیت نمونه ساعتی‪77 :‬‬

‫یکپارچه سازی و اتوماسیون‬

‫‪7.‬‬ ‫‪0.25‬‬ ‫‪2‬‬
‫تعداد آماده سازی نمونه مراحل‪ 4 :‬مرحله; درجه اتوماسیون‪ :‬سیستم های نیمه خودکار‬

‫مصرف انرژی‬
‫‪8.‬‬ ‫‪1.0‬‬ ‫‪4‬‬
‫‪ [W]: 9.78‬مصرف تقریبی انرژی در هر تحلیل‬

‫پیکربندی آماده سازی پس از نمونه برای تجزیه و تحلیل‬

‫‪9.‬‬ ‫‪0.25‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪.‬کروماتوگرافی مایع‪ ،‬کروماتوگرافی گازی با تشخیص چهار قطبی و غیره‬

‫ایمنی اپراتور‬
‫‪10.‬‬ ‫‪0.0‬‬ ‫‪3‬‬
‫تعداد خطرات متمایز‪ 4 :‬خطر یا بیشتر‬

‫منابع‬

‫‪1.‬‬ ‫متریک سبزی تحلیلی برای ‪Wojnowski W، Tobiszewski M، Pena-Pereira F، Psillakis E. AGREEprep -‬‬
‫‪doi:10.1016/j.trac.2022.116553‬در شیمی تجزیه ‪ TRAC 149;2022 .‬آماده‌سازی نمونه‪ .‬روندهای‬

‫‪5‬‬
‫مقاله‬ ‫‪III‬‬
‫‪ https://doi.org/10.1007/s00216-023-‬شیمی تجزیه و تحلیل زیستی (‪5335–415:5323 )2023‬‬
‫‪04807-3‬‬
‫‪RESEARCH PAPER‬‬

‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع دهان‬

‫‪1,2‬‬
‫‪Tonje Gottenberg‬‬ ‫‪Skaalvik · Chen Zhou 2,3‬‬ ‫‪· Elisabeth Leere Øistad 2,4‬‬ ‫‪· Solfrid Hegstad1‬‬ ‫راجر ·‬
‫‪5‬‬ ‫‪6 ،2‬‬
‫ترونز · استیگ پدرسن‪-‬‬ ‫بجرگارد‬

‫دریافت‪ 28 :‬آوریل ‪ / 2023‬تجدید نظر‪ 1 :‬ژوئن ‪ / 2023‬پذیرش‪ 5 :‬ژوئن ‪ / 2023‬انتشار آنالین‪:‬‬

‫‪ 29‬ژوئن ‪2023‬‬
‫نویسنده(های) ‪© 2023‬‬

‫خالصه‬
‫استفاده از مایع خوراکی به عنوان ماتریس نمونه به دلیل ماهیت غیر تهاجمی آن در تجزیه و تحلیل مواد مخدر مورد استفاده قرار گرفته اس‪yy‬ت‪.‬‬
‫ترامادول‪ ،‬اتیل مورفین‪ ،‬ترامادول‪ ،‬پتیدین‪ ،‬کتوبیمیدون‪ ،‬بوپرنورفین‪، O-desmethyl ،‬در این مطالعه‪ 13 ،‬اپیوئید مورفین‪ ،‬اکسی کدون‪ ،‬کدئین‬
‫فنتانیل‪ ،‬سیکلوپروپیل فنتانیل‪ ،‬اتونیتازپین و متادون از مایع استخراج خوراکی قبل از غش‪yy‬اء و فرآین‪yy‬دهای غش‪yy‬ایی ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از م‪yy‬ایع رس‪yy‬انای‬
‫الکتروشیمیایی استخراج شد‪ .‬تجزیه و تحلیل با کروماتوگرافی مایع ‪ -‬طیف سنجی جرمی با عملکرد فوق العاده باال مایع خوراکی با اس‪yy‬تفاده از‬
‫کیت های جمع آوری کوانتیسال جمع آوری شد‪ .‬با اعمال ولتاژ‪ ،‬آنالیت‌های هدف از نمونه‌ه‪yy‬ای م‪yy‬ایع خ‪yy‬وراکی رقیق‌ش‪yy‬ده ب‪yy‬ا اس‪yy‬ید فرمی‪yy‬ک ‪0.1‬‬
‫میکرولیتری استخراج شدند‪ .‬غشای مایع شامل ‪ 8‬میکرولیتر ‪ (v/v) 300‬درصد‪ ،‬در سراسر غشای مایع و در محلول اسید فرمیک ‪ 0.1‬درصد‬
‫حالل غشایی است که در منافذ یک غشای پلی پروپیلن متخلخل مسطح تثبیت شده است‪ .‬حالل غشایی مخلوطی از ‪-6‬متی‪yy‬ل کوم‪yy‬ارین‪ ،‬تیم‪yy‬ول و‬
‫‪- 2‬نیتروفنیل لوکتیل اتر بود‪ .‬ترکیب حالل غشایی مهمترین پارامتر برای دستیابی به استخراج همزمان تمام مواد افیونی هدف اس‪yy‬ت ک‪yy‬ه مق‪yy‬ادیر‬
‫را در محدوده ‪ 0.7‬تا ‪ 5.0‬پیش‌بینی کرده بودند‪ .‬این روش مطابق با دستورالعمل‌های آژانس پزشکی اروپا با نت‪yy‬ایج رض‪yy‬ایت‌بخش تأیی‪yy‬د ‪log P‬‬
‫≤ ‪٪ (CV‬شد‪ .‬دقت درون و بین روز و سوگیری در محدوده دستورالعمل ‪ ± 15‬برای ‪ 12‬از ‪ 13‬ترکیب بود‪ .‬بازیابی استخراج از ‪ 39‬ت‪yy‬ا ‪104‬‬
‫بود‪ .‬نتایج کمی نمونه‌های م‪y‬ایع خ‪y‬وراکی )‪٪ (CV ≤ 5٪‬متغیر بود‪ .‬اثرات ماتریس نرمال شده استاندارد داخلی در محدوده ‪ 88‬تا ‪23٪) 103‬‬
‫معتبر مطابق با یک روش غربالگری معمول بود و نمونه‌های کنترل کیفی خارجی برای ترکیب‪yy‬ات آبدوس‪yy‬ت و چ‪yy‬ربی دوس‪yy‬ت در مح‪yy‬دوده قاب‪yy‬ل‬
‫‪.‬قبول بودند‬

‫کلمات کلیدی استخراج الکتروممبران · مواد افیونی · مایع خوراکی · تجزیه و تحلیل دارو · غشای مایع‬
‫*‬ ‫‪Stig‬‬ ‫‪Pedersen-Bjergaard‬‬ ‫‪stig.pedersen-‬‬
‫‪bjergaard@farmasi.uio.no‬‬

‫‪1‬‬ ‫بخش فارماکولوژی بالینی‪ ،‬بیمارستان دانشگاه سنت اوالو‪ ،‬پروفسور بروچس گیت ‪ 7030 ،6‬تروندهایم‪ ،‬نروژ‬
‫‪2‬‬ ‫گروه داروسازی‪ ،‬دانشگاه اسلو‪ ،‬صندوق پستی ‪ 1068‬بلیندرن‪ 0316 ،‬اسلو‪ ،‬نروژ‬
‫معرفی‬ ‫جلد‪3 1 )0123456789( :‬‬

‫م‪yyy‬واد افی‪yyy‬ونی آنالیت‌ه‪yyy‬ای رایجی هس‪yyy‬تند ک‪yyy‬ه در روش‌ه‪yyy‬ای‬

‫غربالگری دارویی گنجانده شده‌اند‪ ،‬زی‪yy‬را اغلب از آن‌ه‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده‬
‫نادرست یا سوء استفاده از مسکن‌ها استفاده می‌شود‪ .‬گروه عم‪yy‬ده‬
‫داروها شامل مواد افیونی طبیعی مانن‪yy‬د م‪yy‬ورفین و ک‪yy‬دئین‪ ،‬م‪yy‬واد‬
‫افی‪yyy‬ونی نیم‪yyy‬ه مص‪yyy‬نوعی مانن‪yyy‬د بوپرن‪yyy‬ورفین و م‪yyy‬واد افی‪yyy‬ونی‬
‫مصنوعی مانن‪yy‬د مت‪yy‬ادون و فنتانی‪yy‬ل اس‪yy‬ت‪ .‬آخ‪yy‬رین دس‪yy‬ته از م‪yy‬واد‬
‫افیونی مص‪yy‬نوعی ک‪yy‬ه در ب‪yy‬ازار م‪yy‬واد مخ‪yy‬در غیرق‪yy‬انونی پدی‪yy‬دار‬
‫هستند که به نام ‪-Benzyl benzimidazole‬شده‌اند‪ ،‬آنالوگ‌های ‪2‬‬
‫‪.‬نیتازن نیز شناخته می‌شوند [ ‪] 2 ، 1‬‬
‫ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان ی‪yy‬ک م‪yy‬اتریس بیول‪yy‬وژیکی )‪ (OF‬م‪yy‬ایع خ‪yy‬وراکی‬
‫جایگزین برای تشخیص داروها در محیط‌های پزشکی ق‪yy‬انونی و‬
‫ب‪y‬الینی محب‪y‬وبیت پی‪y‬دا ک‪yy‬رده اس‪yy‬ت و امک‪y‬ان نمونه‌گ‪yy‬یری س‪yy‬اده و‬
‫به مخلوطی از بزاق ‪ OF‬غیرتهاجمی را فراهم می‌کند‪ .‬اصطالح‬
‫‪ [ 1].‬و سایر مایعات و ذرات موجود در حفره دهان اش‪yy‬اره دارد‬
‫قبال ب‪yy‬رای تجزی‪yy‬ه و تحلی‪yy‬ل ان‪yy‬واع داروه‪yy‬ا‪ ،‬از جمل‪yy‬ه م‪yy‬واد ‪OF‬‬
‫افیونی [ ‪ ]4 -32‬استفاده شده است‪ .‬بررسی های متعددی در مورد‬
‫‪ OF‬نحوه مصرف دارو‪ ،‬جم‪yy‬ع آوری‪ ،‬تفس‪yy‬یر و تجزی‪yy‬ه و تحلی‪yy‬ل‬
‫در دسترس اس‪yy‬ت [ ‪ .] 9-7‬نمون‪yy‬ه ب‪yy‬رداری اغلب ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از‬
‫جمع آوری تجاری انجام می شود‬

‫‪1‬‬ ‫دانشکده بهداشت عمومی غرب چین و بیمارستان چهارم‬

‫غرب چین‪ ،‬دانشگاه سیچوان‪ ،‬چنگدو ‪ ،610041‬چین‬
‫قانونی‪2‬‬ ‫بخش پزشکی آزمایشگاهی‪ ،‬گروه پزشکی‬
‫علوم‪ ،‬بیمارستان دانشگاه اسلو‪ ،‬صندوق پستی ‪4459‬‬
‫‪،‬نایدالن‬
‫اسلو‪ ،‬نروژ ‪0424‬‬
‫‪3Extraction Technologies Norway, Verkstedveien 29,‬‬
‫نروژ ‪1424‬‬ ‫اسکی‪،‬‬
‫پزشکی‪4‬‬ ‫گروه داروسازی‪ ،‬دانشکده بهداشت و‬
‫‪، Universitetsparken 2،‬علوم‪ ،‬دانشگاه کپنهاگ‬
‫کپنهاگ‪ ،‬دانمارک ‪2100‬‬
‫‪5324‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫دس‪yy‬تگاه ه‪yy‬ایی ک‪yy‬ه از جم‪yy‬ع آوری حجم ک‪yy‬افی ب‪yy‬ه ی‪yy‬ک پ‪yy‬د جم‪yy‬ع کنن‪yy‬ده‬ ‫مطالعات و بررسی های بنیادی در مورد برهمکنش های مولک‪yy‬ولی و‬
‫ح‪yy‬اوی س‪yy‬ورفکتانت ‪ OF‬اطمینان می دهند‪ .‬کیت های نمونه ب‪yy‬رداری‬ ‫محدوده کاربرد غشاهای مایع مختل‪yy‬ف را می ت‪yy‬وان در ادبی‪yy‬ات [ ‪-33‬‬
‫ها‪ ،‬بافرها‪ ،‬رنگ ها و مواد نگهدارنده برای بهبود پای‪yy‬داری آن‪yy‬الیت و‬ ‫‪ ] 36‬یافت‪ .‬با این ح‪y‬ال‪ ،‬انتخ‪y‬اب غش‪y‬ای م‪y‬ایع در اک‪y‬ثر کاربرده‪y‬ا ب‪y‬ا‬
‫شستشوی آنالیت ها از پد جمع کننده هستند‪ .‬بن‪yy‬ابراین تجزی‪yy‬ه و تحلی‪yy‬ل‬ ‫آزمون و خطا انجام می شود‪ .‬برای ه‪y‬دایت توس‪y‬عه روش‪ ،‬ک‪y‬ار اخ‪y‬یر‬
‫چنین نمون‪y‬ه ه‪y‬ایی معم‪y‬وًال ش‪y‬امل ی‪y‬ک مرحل‪y‬ه اس‪y‬تخراج ب‪y‬رای تم‪y‬یز‬ ‫تعمیم یافته گ‪yy‬زارش ش‪yy‬ده اس‪yy‬ت ک‪yy‬ه ه‪yy‬دف آن ‪ EME‬در مورد شرایط‬
‫‪.‬است [ ‪ LC-MS ] 8 ، 7‬کردن نمونه قبل از تجزیه و تحلیل‬ ‫مش‪y‬خص ک‪y‬ردن سیس‪y‬تماتیک مح‪y‬دوده ک‪y‬اربرد حالل ه‪y‬ای غش‪y‬ایی ب‪y‬ا‬
‫تکنیک‌ه‪yyy‬ای ری‪yyy‬ز اس‪yyy‬تخراج ب‪yyy‬ه عن‪yyy‬وان روش‌ه‪yyy‬ای ج‪yyy‬ایگزین‬ ‫‪.‬استفاده از مجموعه بزرگی از آنالیت های مدل است [ ‪] 37‬‬
‫آماده‌سازی نمون‪yy‬ه ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان بخش‪yy‬ی از توس‪yy‬عه ب‪yy‬ه س‪yy‬مت سیس‪yy‬تم‌های‬ ‫برای اس‪yy‬تخراج م‪yy‬واد ‪ EME‬هدف از مطالعه حاضر ایجاد شرایط‬
‫کوچک‌تر که حالل‌ها و معرف‌های کمتری مص‪yy‬رف می‌کنن‪yy‬د‪ ،‬پدی‪yy‬دار‬ ‫و ارزی‪yyy‬ابی اینک‪yyy‬ه آی‪yyy‬ا کیفیت داده ه‪yyy‬ا در ‪ OF‬افی‪yyy‬ونی ه‪yyy‬دف از‬
‫ش‪yy‬کلی از میکرواس‪yy‬تخراج )‪ (EME‬شده‌اند‪ .‬استخراج الکترومم‪yy‬بران‬ ‫دستورالعمل های توصیه شده برای روش های تجزیه و تحلیل زیستی‬
‫است که میدان الکتریکی را برای )‪ (LPME‬فاز مایع مبتنی بر غشاء‬ ‫است یا خیر بود‪ .‬مواد افیونی هدف عبارت بودن‪y‬د از م‪yy‬ورفین‪ ،‬اکس‪yy‬ی‬
‫افزایش انتقال جرم در خود ج‪yy‬ای داده اس‪yy‬ت‪ .‬مزای‪yy‬ا اس‪yy‬تخراج ج‪yy‬امع‪،‬‬ ‫ترامادول (مت‪yy‬ابولیت)‪ ،‬اتی‪yy‬ل م‪yy‬ورفین‪، O-desmethyl ،‬کدون‪ ،‬کدئین‬
‫تمیز کردن نمونه و غنی‌سازی تنها با اس‪yy‬تفاده از چن‪yy‬د میکرولی‪yy‬تر (<‬ ‫ترامادول‪ ،‬پتیدین‪ ،‬کتوبیمی‪yy‬دون‪ ،‬بوپرن‪yy‬ورفین‪ ،‬فنتانی‪yy‬ل‪ ،‬س‪yy‬یکلوپروپیل‬
‫‪ 10 LPME‬میکرولیتر) حالل آلی‪ ،‬با سینتیک سریع‌تر در مقایس‪yy‬ه ب‪yy‬ا‬ ‫اپیوئی‪y‬دها ‪ (N-pyrrolidino etonithadazone).‬فنتانی‪y‬ل‪ ،‬اتونیت‪y‬ازپین‬
‫در سال ‪ EME‬مبتنی بر غشاء است [ ‪ .] 11 ، 10‬از زمان معرفی‬ ‫همگی دارای عملک‪yy‬رد اساس‪yy‬ی هس‪yy‬تند ک‪yy‬ه آنه‪yy‬ا را ب‪yy‬رای اس‪yy‬تخراج‬
‫‪ ،] 12 [ 2006‬استخراج آنالیت ه‪yy‬ای آلی و مع‪yy‬دنی از نمون‪yy‬ه ه‪yy‬ای‬ ‫قابل اس‪y‬تفاده می کن‪y‬د‪ .‬ب‪y‬ا این ح‪y‬ال‪ ،‬چ‪y‬ربی دوس‪y‬تی ‪ EME‬همزمان با‬
‫بیولوژیکی [ ‪ ،] 16-13‬محیطی [ ‪ ] 19-17‬و مواد غذایی [ ‪22-20‬‬ ‫‪ (log‬پیش بینی ش‪yy‬ده ‪ n -octanol‬متفاوت است‪ ،‬با ضرایب تقسیم آب‬
‫] با استفاده از انواع فرمت های فنی گ‪y‬زارش ش‪y‬ده اس‪y‬ت ‪ .‬حالت‌ه‪y‬ا و‬ ‫‪.‬که توسعه روش را پیچیده می کند ‪ S1)،‬جدول( از ‪ 0.7‬تا ‪P ) 5.0‬‬
‫پیکربندی‌های عملیاتی مبتنی بر الیاف توخالی‪ 96 ،‬چاهک و فناوری‬ ‫با استفاده از تجهیزات نمونه اولیه برای ی‪yy‬ک دس‪yy‬تگاه تج‪yy‬اری ‪EME‬‬
‫ریزتراشه هستند و در بررسی‌های متعدد خالصه شده‌اند [ ‪] 26-23‬‬ ‫ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از وی‪yy‬ال ه‪yy‬ای رس‪yy‬انا ب‪yy‬رای ق‪yy‬رار دادن نمون‪yy‬ه و ‪EME،‬‬
‫‪ .‬اخیرًا یک دستگاه تجاری مبتنی بر ویال‌های رس‪y‬انا راه‌ان‪y‬دازی ش‪y‬ده‬ ‫پذیرنده انجام شد‪ .‬این مطالعه با هدف یافتن یک غشای مایع مناسب و‬
‫است ک‪yy‬ه گ‪yy‬امی نزدیک‌ت‪y‬ر ب‪y‬ه س‪yy‬مت اج‪yy‬رای معم‪yy‬ول در نظ‪y‬ر گرفت‪y‬ه‬ ‫انج‪yy‬ام ش‪yy‬د ‪ .‬ک‪yy‬اربرد ‪ log P‬قوی برای مواد افیونی در محدوده وسیع‬
‫‪.‬می‌شود [ ‪] 27‬‬ ‫از طری‪yy‬ق اعتبارس‪yy‬نجی و ‪ EME-UHPLC-MS/MS‬روش نه‪yy‬ایی‬
‫معمولی یک سیستم سه فازی متشکل از ی‪y‬ک نمون‪y‬ه ‪ EME‬سیستم‬ ‫مقایسه نمونه های معتبر با یک روش معمول از پیش تعیین شده نشان‬
‫آبی است که توسط یک غشای مایع آلی نازک از یک گیرنده آبی جدا‬ ‫‪.‬داده شد‬
‫شده است‪ .‬اعمال ولتاژ (یعنی پتانس‪yy‬یل اس‪yy‬تخراج) در سراس‪yy‬ر غش‪yy‬ای‬
‫مایع‪ ،‬انتقال ترکیبات یونیزه شده از نمونه‪ ،‬در سراسر غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع و‬
‫به داخل گیرنده را تسهیل می کن‪yy‬د‪ ،‬ک‪yy‬ه ب‪yy‬رای تجزی‪yy‬ه و تحلی‪yy‬ل بیش‪yy‬تر‬
‫جمع آوری می شود‪ .‬گزینش پذیری با تغی‪y‬یر می‪y‬دان الک‪y‬تریکی (قطب‬ ‫مواد و روش ها‬
‫و بزرگی) و خواص فیزیکوشیمیایی غش‪yy‬اء تنظیم می ش‪yy‬ود‪ .‬بن‪yy‬ابراین‬ ‫مواد شیمیایی و معرف ها‬
‫امکان پذیر اس‪yy‬ت‪ .‬ش‪yy‬رایطی ک‪yy‬ه از ‪ EME‬استخراج بسیار انتخابی با‬
‫گزینش پذیری باال حم‪y‬ایت می کنن‪y‬د‪ ،‬غش‪y‬اهای ولت‪y‬اژ پ‪y‬ایین [ ‪ ] 28‬و‬
‫مایع با خ‪yy‬واص تنظیم ش‪yy‬ده ب‪yy‬ه س‪yy‬مت ب‪yy‬رهمکنش ه‪yy‬ای خ‪yy‬اص آن‪yy‬الیت‬
‫هستند [ ‪ .] 31-29‬در طرف دیگر مقیاس‪ ،‬استخراج با گزینش کم که‬
‫طیف وسیعی از آنالیت ها را از م‪yy‬اتریس نمون‪yy‬ه ج‪yy‬دا می کن‪yy‬د‪ ،‬ب‪yy‬رای‬
‫کاربردهایی مانند غربالگری داروی چند ج‪yy‬زئی مرتب‪yy‬ط اس‪yy‬ت‪ .‬ی‪yy‬افتن‬
‫ق‪yy‬وی ب‪yy‬رای اس‪yy‬تخراج ترکیب‪yy‬ات ب‪yy‬ا طی‪yy‬ف وس‪yy‬یعی از ‪ EME‬ش‪yy‬رایط‬
‫‪.‬خواص ساده نیست‬
‫ب‪yy‬رای تم‪yy‬ام ترکیب‪yy‬ات قاب‪yy‬ل یونیزاس‪yy‬یون قاب‪yy‬ل ‪، EME‬در تئ‪yy‬وری‬
‫اس‪yy‬تفاده اس‪yy‬ت‪ .‬ب‪yy‬ا این ح‪yy‬ال‪ ،‬دامن‪yy‬ه ک‪yy‬اربرد در ح‪yy‬ال حاض‪yy‬ر توس‪yy‬ط‬
‫غشاهای مایع مناسب محدود شده اس‪y‬ت‪ .‬ب‪y‬ه ط‪y‬ور کلی‪ ،‬حالل غش‪y‬ایی‬
‫باید حداقل نشت به محلول آبی داشته باشد زیرا ممکن است منج‪yy‬ر ب‪yy‬ه‬
‫جری‪yy‬ان بیش از ح‪yy‬د ش‪yy‬ود‪ ،‬ک‪yy‬ه بیش‪yy‬تر ب‪yy‬ر تکرارپ‪yy‬ذیری ناش‪yy‬ی از‬
‫الکترولیز تأثیر منفی می‌گ‪yy‬ذارد [ ‪ .] 32‬این بس‪yy‬یار مهم اس‪yy‬ت‪ ،‬زی‪yy‬را‬
‫سیستم های قوی برای کاربردهای معم‪y‬ول ب‪y‬الینی ی‪y‬ا پزش‪y‬کی ق‪y‬انونی‬
‫ضروری هستند‪ .‬عالوه بر این‪ ،‬خواص فیزیکوش‪yy‬یمیایی غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع‬
‫باید درجاتی از پارتیشن بن‪yy‬دی آن‪yy‬الیت ب‪yy‬رای اس‪yy‬تخراج کارآم‪yy‬د باش‪yy‬د‪.‬‬

‫‪13‬‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع خوراکی‬ ‫‪5325‬‬

‫مواد مرجع از دو فروشنده مختلف برای اکثر آنالیت ها خریداری ش‪yy‬د‬ ‫‪ ( n = 3)،‬کدئین ‪ ( n = 1)،‬نمونه های کنترل خارجی بوپرنورفین‬
‫تا نمونه های کنترل کیفیت به طور مستقل از کالیبراتورها تهیه ش‪yy‬ود‪.‬‬ ‫‪ LGC (Bury،‬از تست مهارت )‪ ( n = 3‬و مورفین )‪ ( n = 2‬متادون‬
‫مواد مرجع از شرکت های زیر خریداری ش‪yy‬د‪ :‬بوپرن‪yy‬ورفین‪ ،‬ک‪yy‬دئین‪،‬‬ ‫بود که توسط سازنده مشخص ‪ OF‬به دست آمد‪ .‬نمونه‌ها شامل )‪UK‬‬
‫‪-d3 ، O-‬اتی‪yy‬ل م‪yy‬ورفین‪ ،‬فنتانی‪yy‬ل‪ ،‬م‪yy‬ورفین‪ ،‬م‪yy‬رفین ‪-d3 ،‬ک‪yy‬دئین‬ ‫‪ Quantisal‬ب‪yy‬ا ب‪yy‬افر )‪ (v/v‬شده ب‪yy‬ود و قب‪yy‬ل از تجزی‪yy‬ه و تحلی‪yy‬ل‪1:3 ،‬‬
‫‪ Lipomed‬و پتی‪yy‬دین از )‪ (O-DMtramadol‬ترام‪yy‬ادول ‪desmethyl‬‬ ‫‪.‬رقیق شدند ‪Extraction‬‬
‫بود‪ .‬فنتانیل‪ ،‬اکسی کدون‪ ،‬پتیدین و ترامادول )سوئیس ‪(Arlesheim،‬‬
‫)ای‪yy‬االت متح‪yy‬ده آمریک‪yy‬ا ‪، MA،‬س‪yy‬نت ل‪yy‬وئیس( از س‪yy‬یگما آل‪yy‬دریچ‬ ‫راه حل های کاری‪ ،‬کالیبراتورها‪ ،‬و کنترل های کیفیت‬
‫‪-d 5 ،‬خریداری ش‪yy‬دند‪ .‬ک‪yy‬دئین‪ ،‬س‪yy‬یکلوپروپیل فنتانی‪yy‬ل‪ ،‬اتی‪yy‬ل م‪yy‬ورفین‬
‫( ‪، N-pyrrolidino etonitazene‬م‪yy‬ورفین ‪-d 3 ،‬فنتانیل‪y‬د ‪ 5‬مت‪y‬ادون‬ ‫محلول‌های موجود در آنالیت‌های هدف ترکیب و به محلول‌های کاری‬
‫‪ tramadol-d‬و ‪، oxycodone-d6‬متادون‪ ،‬اکس‪yy‬ی ک‪yy‬دون ‪)،‬اتونیتازپین‬ ‫رقی‪yy‬ق )‪ (QC‬برای هر کالیبراتور و سطح کن‪yy‬ترل کیفیت ‪ MeOH‬در‬
‫اتی‪y‬ل ‪-d3 ،‬بودند‪ .‬بوپرنورفین )‪Nordheron (Tramadol-d Nordheron‬‬
‫با اسپک کردن محلول‌های ک‪yy‬اری ‪ QC‬شدند‪ .‬نمونه‌های کالیبراتور و‬
‫‪ Toronto‬ترام‪yyy‬ادول از ش‪yyy‬رکت‪ O-DM-‬م‪yyy‬ورفین‪ ،‬کتوبیمی‪yyy‬دون و‬ ‫‪ 2‬درص‪yy‬د در نمونه‌ه‪yy‬ای ب‪yy‬دون دارو تهی‪yy‬ه ش‪yy‬دند‪ .‬آن‪yy‬الیت ه‪yy‬ا در س‪yy‬ه‬
‫بودن‪yy‬د‪) .‬کان‪yy‬ادا ‪، ON،‬تورنت‪yy‬و ‪Research Chemicals (TRC،‬‬ ‫محدوده کالیبراسیون‪ 5-0.1 ،‬میکروگ‪yy‬رم در لی‪yy‬تر‪ 50-1 ،‬میکروگ‪yy‬رم‬
‫ه‪yy‬ال‪ Reckitt Benckiser (،‬بوپرن‪yy‬ورفین و مت‪yy‬ادون ب‪yy‬ه ت‪yy‬رتیب از‬ ‫در لیتر و ‪ 50-3‬میکروگرم در لیتر‪ ،‬با چهار غلظت کالیبراس‪yy‬یون در‬
‫و داروسازی بیمارستان دانش‪yy‬گاه س‪yy‬نت اوالو (ترون‪yy‬دهایم‪) ،‬انگلستان‬ ‫هر محدوده گروه بندی شدند‪ .‬محدوده کالیبراسیون مرب‪yy‬وط ب‪yy‬ه غلظت‬
‫از آلس‪yyy‬اخیم ‪. Ketobemidone-d 3‬ن‪yyy‬روژ) خری‪yyy‬داری ش‪yyy‬دند‬ ‫ب‪y‬رای محاس‪y‬به ‪ QC‬خالص است‪ .‬کالیبراتوره‪y‬ا و نمونه‌ه‪y‬ای ‪ OF‬در‬
‫‪(.‬استراسبورگ‪ ،‬فرانسه) بود‬ ‫رقت در دستگاه جمع‌آوری آماده شدند‪ .‬محلول کاری استاندارد داخلی‬
‫بیس (‪-2‬اتی‪yy‬ل هگزی‪yy‬ل) ‪ (DEHP)،‬بیس (‪-2‬اتیل هگزی‪yy‬ل) فس‪yy‬فات‬ ‫تهی‪yy‬ه ش‪yy‬د ‪ .‬محل‪yy‬ول ه‪yy‬ای ک‪yy‬اری‪ MeOH:H 2 O (1:1، V/V) ،‬در )‪(IS‬‬
‫و فرمت آمونیوم )‪ (NPOE‬نیتروفنیل اکتیل اتر‪ (DEHPi)، 2-‬فسفیت‬ ‫در دم‪yy‬ای ‪ -20‬درج‪yy‬ه ‪ IS‬و محل‪yy‬ول ‪ QC‬کالیبراتوره‪yy‬ا‪ ،‬نمون‪yy‬ه ه‪yy‬ای‬
‫)‪ Sima‬کمی‪yy‬اب فل‪yy‬زی ب‪yy‬ر اس‪yy‬اس ‪(≥ 99.995٪ NH 4 HCO 2 ،‬‬ ‫سانتی گراد ذخیره ش‪yy‬دند‪ .‬غلظت آن‪yy‬الیت ه‪yy‬ای ه‪yy‬دف و اس‪yy‬تانداردهای‬
‫‪ (6MC)،‬متی‪yy‬ل کوم‪yy‬ارین‪ (Thy)، 6-‬خری‪yy‬داری ش‪yy‬د‪ .‬آل‪yy‬دریچ‪ .‬تیم‪yy‬ول‬ ‫‪.‬آمده است ‪ S2-3‬داخلی بیشتر در جدول‬
‫از ) ‪ (69٪ HNO3‬و اسید نیتریک )‪ LC-MS‬درجه ‪ (MeOH،‬متانول‬
‫‪ (EtOAc، HiPerSolv‬بودند‪ .‬اتیل استات )دارمشتات‪ ،‬آلمان( ‪Merck‬‬ ‫حالل یوتکتیک عمیق‬
‫و کربنات )‪ (HiPerSolv، Chromanorm‬هپتان‪Chromanorm)، n-‬‬
‫حالل یوتکتی‪yy‬ک عمی‪yy‬ق ب‪yy‬ا ح‪yy‬رارت دادن مق‪yy‬ادیر مناس‪yy‬ب ‪-6‬متی‪yy‬ل‬
‫خریداری شد‪ .‬اسید ) بلژیک ‪ VWR Chemicals (Leuven،‬از ) ‪ (Na2CO3‬سدیم‬
‫کومارین و تیمول (نسبت مولی ‪ )1:2‬در دمای ‪ 70‬درجه سانتی گ‪yy‬راد‬
‫‪ Fischer‬از )‪ Optima LC-MS‬درجه ‪ (99.0٪ HCOOH،‬فرمیک‬
‫به مدت ‪ 12‬دقیقه تهیه شد‪ .‬حالل قبل از هر استفاده با گرداب مخل‪yy‬وط‬
‫در داخل خانه با ‪ I‬بود‪ .‬آب نوع )‪Scientific (Leicestershire، UK‬‬
‫‪.‬شد‬
‫‪ Millipore (Molsheim،‬از ‪ Milli-Q‬استفاده از یک سیستم تص‪yy‬فیه‬
‫‪ Immunalysis‬به دست آمد‪ .‬بافر اس‪yy‬تخراج کمی از ش‪yy‬رکت )فرانسه‬
‫استخراج الکتروممبران‬
‫‪.‬به دست آمد )‪(Pomona، CA، USA‬‬
‫نشان داده شده است‪ ،‬انجام شد ‪ .‬نمونه اولیه از ویال های یک پلیمر ‪1‬‬
‫تهیه محلول ها‬ ‫رسانا استفاده می کرد و قبًال توضیح داده شده است [ ‪ .] 38 ، 27‬ده‬
‫می توانند به طور همزمان کار کنن‪yy‬د‪ .‬ه‪yy‬ر س‪yy‬لول ش‪yy‬امل ‪ EME‬سلول‬
‫نمونه های مایع دهانی‬
‫یک ویال نمونه‪ ،‬یک ویال پذیرنده و ی‪yy‬ک غش‪yy‬ای پش‪yy‬تی پلی پ‪yy‬روپیلن‬
‫‪ Quantisal Oral Fluid‬ب‪y‬ا اس‪yy‬تفاده از دس‪yy‬تگاه )‪ (OF‬مایع خوراکی‬ ‫مسطح است که در یک اتحادیه نشتی محکم وجود دارد‪ .‬ویال نمون‪yy‬ه‪،‬‬
‫نمونه برداری شد‪ .‬یک پد جمع‌آوری ‪ Immunalysis‬از ‪Collection‬‬ ‫نمونه بیولوژیکی و رقیق کننده نمونه را نگه می داش‪yy‬ت‪ .‬دومی ب‪yy‬رای‬
‫‪ 1‬میلی‌لی‪yy‬تر (‪ )± %10‬نمون‪yy‬ه را جمع‌آوری ک‪yy‬رد ک‪yy‬ه ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از‬ ‫در نمونه خدمت کرد‪ .‬ویال پذیرنده حاوی محلول پذیرن‪yy‬ده ‪ pH‬کنترل‬
‫نشانگر رنگ تأیید شد‪ .‬پد جم‪yy‬ع کنن‪y‬ده متعاقب‪ًy‬ا در ی‪y‬ک لول‪y‬ه ح‪yy‬اوی ‪3‬‬ ‫بود‪ .‬غشا بین یونیون و یک ویال قرار داده ش‪y‬د ت‪y‬ا غش‪y‬ای م‪y‬ایع آم‪y‬اده‬
‫غوط‪yy‬ه ور ش‪yy‬د‪ (Immunalysis) .‬میلی لیتر بافر استخراج کوانتیسال‬ ‫‪ PP‬شود‪ .‬غشای مایع با پیپت کردن یک حالل آلی بر روی تکی‪yy‬ه گ‪yy‬اه‬
‫بنابراین‪ ،‬نمونه‌هایی که به آزمایش‪yy‬گاه می‌رس‪yy‬ند ش‪yy‬امل رقیق‌ش‪yy‬ده ‪1:3‬‬ ‫تهی‪yy‬ه ش‪yy‬د‪ ،‬در ح‪yy‬الی ک‪yy‬ه اتحادی‪yy‬ه روی ی‪yy‬ک وی‪yy‬ال رس‪yy‬انا نص‪yy‬ب ش‪yy‬د‪.‬‬
‫رقیق شده ‪ OF‬است‪ .‬نمونه های متشکل از ‪ Quantisal‬در بافر )‪(v/v‬‬ ‫مونتاژ شدند و روی دستگاه قرار گرفتند‪ ،‬جایی ک‪yy‬ه ‪ EME‬سلول‌های‬
‫نمون‪yy‬ه" ‪ "OF‬از این پس ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان ‪ Quantisal‬در ب‪yy‬افر اس‪yy‬تخراج‬ ‫در معرض هم زدن افقی قرار گرفتند‪ ،‬و می‪yy‬دان الک‪yy‬تریکی از طری‪yy‬ق‬
‫نامی‪yyy‬ده می ش‪yyy‬وند‪ .‬نمونه‌ه‪yyy‬ای م‪yyy‬ورد اس‪yyy‬تفاده در توس‪yyy‬عه روش و‬ ‫ویال‌ه‪y‬ا از طری‪yy‬ق الکتروده‪yy‬ای درب دس‪yy‬تگاه و منب‪yy‬ع تغذی‪yy‬ه خ‪yy‬ارجی‬
‫‪ Quantisal (1:3،‬بدون دارو با بافر ‪ OF‬اعتبارسنجی با رقیق کردن‬ ‫‪ (ES 0300-0.45، Delta Elektronika BV، Zierikzee).‬جفت شد‬
‫بدون دارو به طور ناش‪y‬ناس توس‪y‬ط داوطلب‪y‬ان ‪. OF‬تهیه شدند )‪V/V‬‬ ‫آنالیت های ه‪y‬دف از نمون‪y‬ه (آن‪y‬د) از طری‪y‬ق غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع موج‪yy‬ود در‬
‫سالم شاغل در بخش فارماکولوژی بالینی در بیمارستان دانشگاه سنت‬ ‫اتحادی‪yy‬ه و ب‪yy‬ه گیرن‪yy‬ده (کات‪yy‬د) مه‪yy‬اجرت کردن‪yy‬د‪ .‬وی‪yy‬ال پذیرن‪yy‬ده پس از‬
‫‪.‬اوالو (تروندهایم) اهدا شد‬

‫‪13‬‬
‫‪5326‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫استخراج مجددًا درپوش گذاشته شد و مس‪yy‬تقیمًا ب‪yy‬رای تجزی‪yy‬ه و تحلی‪yy‬ل‬ ‫تمام داده های بازیابی گزارش ش‪yy‬ده (توس‪yy‬عه روش و اعتب‪yy‬ار س‪yy‬نجی)‬
‫‪.‬محلول پذیرنده منتقل شد ‪UHPLC-MS/MS‬‬ ‫مواد افیونی با نصب غشاء روی ویال اهداکننده به دس‪yy‬ت آم‪yy‬د‪ .‬ب‪yy‬ا این‬
‫شکل ‪ 1‬یک نمونه اولیه ویال‬ ‫حال‪ ،‬برخی از آزمایش‌های اعتبارسنجی ب‪y‬ا پیکربن‪y‬دی مخ‪yy‬الف انج‪yy‬ام‬
‫‪ EME‬با ده سلول ‪ EME‬رسانای‬ ‫‪.‬شد‬
‫‪ EME‬یک سلول ‪).‬سمت چپ(‬ ‫به دلیل محدود بودن تجهیزات نمونه اولیه‪ ،‬ویال ها شسته و مجددا‬
‫از ویال های رسانا‪ ،‬یک‬ ‫م‪yy‬ورد اس‪yy‬تفاده ق‪yy‬رار گرفتن‪yy‬د‪ .‬ب‪yy‬رای جلوگ‪yy‬یری از انتق‪yy‬ال‪ ،‬ویال‌ه‪yy‬ا ب‪yy‬ا‬
‫( ‪ PP‬اتحادیه و غشای پشتیبانی‬ ‫‪%‬اس‪yy‬تفاده از روش زی‪yy‬ر شس‪yy‬ته ش‪yy‬دند‪ )1( :‬ویال‌ه‪yy‬ای خ‪yy‬الی ب‪yy‬ا ‪1‬‬
‫‪.‬تشکیل شده است )سمت راست‬ ‫و (‪ )2‬ویال‌ه‪y‬ا ‪)،‬س‪y‬اعت ‪ ( t > 12‬پر شدند ‪ MeOH‬در ‪HCOOH‬‬
‫بازهای پروتونه شده ‪b EME‬‬
‫یک‬ ‫‪. ) MeOH.‬و سپس (‪ )3‬شسته شدند ‪ I‬کامًال با آب نوع‬
‫‪ N‬ماده آنیونی و ‪(BH + ). A-‬‬
‫یک مولکول خنثی است‬ ‫استخراج مایع‪-‬مایع ‪ -‬روش معمول آماده سازی نمونه‬

‫نهایی با یک روش معمول در بیمارستان دانشگاه س‪yy‬نت ‪ EME‬روش‬

‫اوالو (ترون‪yy‬دهایم‪ ،‬ن‪yy‬روژ) مقایس‪yy‬ه ش‪yy‬د ک‪yy‬ه ب‪yy‬رای غرب‪yy‬الگری چن‪yy‬دین‬
‫( از جمل‪yy‬ه ده ت‪yy‬ا از اپیوئی‪yy‬دهای ه‪yy‬دف ‪ OF،‬داروی سوء مصرف در‬
‫ترام‪yy‬ادول‪ ،‬اتی‪yy‬ل م‪yy‬ورفین‪، O-DM-،‬م‪yy‬ورفین‪ ،‬اکس‪yy‬ی ک‪yy‬دون‪ ،‬ک‪yy‬دئین‬
‫آماده س‪yy‬ازی ‪).‬ترامادول‪ ،‬کتوبیمیدون‪ ،‬بوپرنورفین‪ ،‬فنتانیل و متادون‬
‫نمونه به شرح زیر بود‪ .‬جابجایی خودکار مایع‪yy‬ات توس‪yy‬ط ی‪yy‬ک رب‪yy‬ات‬
‫شرکت همیلت‪yy‬ون‪ ،‬بون‪yy‬ادوز‪ Microlab Hamilton (،‬لوله‌کننده ستاره‬
‫انجام شد‪ .‬کالیبراتوره‪y‬ا و کنترل‌ه‪y‬ای کیفی توس‪y‬ط رب‪y‬ات ب‪y‬ا )سوئیس‬
‫‪ I (1:3،‬اسپک کردن مخلوطی از بافر استخراج کوانتیسال و آب نوع‬
‫با محلول‌ه‪y‬ای ک‪yy‬اری آنالیت‌ه‪y‬ا تهی‪y‬ه ش‪yy‬د‪ .‬اس‪yy‬تخراج م‪yy‬ایع‪-‬م‪yy‬ایع )‪v/v‬‬
‫‪ (Irish Life‬در ی‪yy‬ک ص‪yy‬فحه ‪ 2.2‬میلی لی‪yy‬تری ‪ 96‬چ‪yy‬اهی )‪(LLE‬‬
‫ب‪yy‬ا مخل‪yy‬وط ک‪yy‬ردن نمون‪yy‬ه ه‪yy‬ا (‪) 200‬النگف‪yy‬ورد‪ ،‬ایرلن‪yy‬د ‪Sciences،‬‬
‫‪ 0.2 Na 2 CO‬موالر ‪)،‬میکرولیتر ‪ IS (25‬میکرولیتر)‪ ،‬محلول کاری‬
‫‪ (80:20، V/V، 1000‬هپت‪yy‬ان ‪ EtOAc/‬و )میکرولی‪yy‬تر ‪3 ( 200‬‬

‫صفحات و لوله( به مدت ‪ 1‬دقیقه در ‪ 2100‬دور در دقیقه )میکرولیتر‬

‫پروتک‪yy‬ل اس‪yy‬تخراج نه‪yy‬ایی ب‪yy‬ه ش‪yy‬رح زی‪yy‬ر ب‪yy‬ود‪ .‬وی‪yy‬ال نمون‪yy‬ه از‬
‫محتوا به مدت ‪، Porvoir Sciences، Norfolk UK).‬های چند فرمت‬
‫و )میکرولی‪yy‬تر ‪ IS (15‬نمونه‌های (‪ 100‬میکرولیتر)‪ ،‬محلول ک‪yy‬اری‬
‫‪ 5 rcf (Rotana 460، Hettich Zentrifugen،‬دقیق‪yy‬ه در ‪4235‬‬
‫)رقیق‌کنن‪yyy‬ده نمون‪yyy‬ه‪ 175 ،‬میکرولی‪yyy‬تر( ‪0.1٪ (v/v) HCOOH‬‬
‫سانتریفیوژ شد‪ .‬مقدار کمی از مایع رویی (‪) 800‬آلمان ‪Tuttlingen،‬‬
‫نگه‪yyy‬داری می‌ش‪yyy‬د‪ .‬غش‪yyy‬ای م‪yyy‬ایع ب‪yyy‬ا پیپت ک‪yyy‬ردن حالل غش‪yyy‬ایی ‪8‬‬
‫میکرولیتر) به یک صفحه جمع آوری ‪ 96‬چاهی جدید منتقل شد‪ .‬مایع‬
‫و حالل یوتکتی‪y‬ک عمی‪y‬ق ‪ (v/v) NPOE‬مخل‪y‬وط ‪ (2:1‬میکرولیتری‬
‫اسیدی شد )میکرولیتر ‪ MeOH (10‬در ‪ HNO 3‬رویی با ‪ 0.1‬درصد‬
‫ب‪yy‬ر روی غش‪yy‬ای ))نس‪yy‬بت م‪yy‬ولی ‪ Thy (1:2،‬و ‪MC‬متش‪yy‬کل از ‪6‬‬
‫و سپس در دمای ‪ 40‬درجه سانتیگراد به مدت ‪ 20‬دقیقه با اس‪yy‬تفاده از‬
‫‪M Deutschland‬تهی‪yyy‬ه ش‪yyy‬د‪ (Accurel PP2E) 3 ، .‬نگهدارن‪yyy‬ده‬
‫تبخیر شد‪ .‬در )‪ Ultravap (Porvair Sciences‬متمرکز کننده نمونه‬
‫ضخامت( ووپرتال‪ ،‬آلمان)‪ .‬یک دیسک سیلیکونی پانچ شده ‪GmbH،‬‬
‫)میکرولیتر ‪ H 2 O (75‬در ‪ MeOH‬نهایت‪ ،‬نمونه ها در ‪ 60‬درصد‬
‫بین یونیون و غش‪yy‬اء )میلی متر ‪، ID 6‬میلی متر ‪ 2، D 9‬میلی متر‬
‫بازسازی و (‪ 2100‬دور در دقیقه‪ 1 ،‬دقیقه) مخلوط ش‪yy‬دند‪ .‬جداس‪yy‬ازی‬
‫قرار داده شد تا عایق الکتریکی ایجاد کند‪ .‬وی‪yy‬ال پذیرن‪yy‬ده ح‪yy‬اوی ‪300‬‬
‫‪ UHPLC-MS/MS‬و تشخیص کروماتوگرافی ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از ش‪yy‬رایط‬
‫مونت‪y‬اژ ‪ EME‬بود‪ .‬سلول ه‪y‬ای ‪% (v/v) HCOOH‬میکرولیتر ‪0.1‬‬
‫توضیح داده شده است‪ ،‬به دست " ‪ " UHPLC-MS/MS‬که در بخش‬
‫شدند و استخراج با اعمال ولت‪y‬اژ ‪ 20‬ب‪y‬ه م‪y‬دت ‪ 20‬دقیق‪y‬ه ب‪y‬ا هم زدن (‬
‫‪.‬آمد‬
‫‪ 875‬دور در دقیقه) انجام ش‪yy‬د‪ .‬ش‪yy‬رایط در ط‪yy‬ول توس‪yy‬عه روش هم‪yy‬ان‬
‫این روش قب‪yyy‬ل از اج‪yyy‬رای آن اعتبارس‪yyy‬نجی ش‪yyy‬د‪ ،‬و داده ه‪yyy‬ای‬
‫است که در باال توض‪y‬یح داده ش‪y‬د‪ ،‬در ح‪y‬الی ک‪y‬ه خالف آن ذک‪y‬ر نش‪y‬ده‬
‫اعتبارسنجی زی‪yy‬ر ب‪yy‬رای م‪yy‬واد افی‪yy‬ونی ب‪yy‬ه دس‪yy‬ت آم‪yy‬د‪ :‬دقت و دقت در‬
‫انجام شد ‪ OF‬است‪ .‬آزمایش‌های توسعه روش با استفاده از نمونه‌های‬
‫‪٪، CV‬داخل روز ≤ ‪٪، CV 7‬و سوگیری ‪LLOQ CV ≤ 12٪ 9 ±‬‬
‫‪.‬که به وسط محدوده کالیبراسیون هر آنالیت اضافه شده بودند‬
‫‪) 102-55٪‬تصحیح نشده( ‪٪، ME‬بین روز ≤ ‪ ،٪14‬سوگیری ‪11 ±‬‬
‫با نمونه اولیه و غشای مایع فعلی‪ ،‬مشخص شد ک‪yy‬ه غش‪yy‬اء بای‪yy‬د ب‪yy‬ر‬
‫و بهبودی ‪) 110-95 (CV ≤ 5٪) -13‬تصحیح( ‪(CV ≤ 10٪)، ME‬‬
‫روی ویال اهداکننده نصب شود‪ ،‬در مقابل ویال گیرنده‪ ،‬زیرا به نظ‪yy‬ر‬
‫‪86٪ (CV ≤ 15٪).‬‬
‫می‌رسید که بازیابی و دقت بیشتر ترکیبات چ‪yy‬ربی دوس‪yy‬ت تحت ت‪yy‬أثیر‬
‫ب‪yy‬ه( این جزئیات باشد‪ .‬این قبًال با استفاده از حالل های غش‪yy‬ایی دیگ‪yy‬ر‬
‫‪UHPLC-MS/MS‬‬
‫رسانا مشاهده نشده اس‪yy‬ت‪ .‬م‪yy‬واد ‪ EME‬با ویال )‪ NPOE‬عنوان مثال‬
‫افیونی هدف باقی مانده تحت ت‪yy‬أثیر پیکربن‪yy‬دی س‪yy‬لولی ق‪yy‬رار نگرفتن‪yy‬د‪.‬‬

‫‪13‬‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع خوراکی‬ ‫‪5327‬‬

‫آنالیت‌ه‪yy‬ای ه‪yy‬دف ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از کروم‪yy‬اتوگرافی م‪yy‬ایع ب‪yy‬ا عملک‪yy‬رد‬ ‫مورد ارزیابی قرار گرفت‪ QC .‬دقت و صحت روش در سه سطح‬
‫ج‪y‬دا و شناس‪y‬ایی )‪ (UHPLC-MS/MS‬فوق‌العاده طیف‌سنجی ج‪y‬رمی‬ ‫به ترتیب با تجزیه و تحلی‪yy‬ل ‪ QC‬دقت درون و بین روز در هر سطح‬
‫مش‪yy‬ابه ‪ LLE‬و ‪ EME‬شدند‪ .‬شرایط کروماتوگرافی برای نمونه های‬ ‫در ‪ 10‬روز ‪ QC‬شش موازی در ‪ 1‬روز و یک نمونه در سه غلظت‬
‫ب‪yy‬ود‪ .‬شستش‪yy‬وی گرادی‪yy‬ان در دم‪yy‬ای ‪ 60‬درج‪yy‬ه س‪yy‬انتی گ‪yy‬راد ب‪yy‬ر روی‬ ‫مختلف ارزیابی شد‪ .‬دقت ب‪y‬ا اس‪y‬تفاده از داده‌ه‪y‬ای دقی‪y‬ق بین روز و ب‪y‬ا‬
‫میلی متر‪ Acquity UPLC BEH C 18 (2.1 × 50 ،‬ستون تحلیلی‬ ‫تجزی‪yyy‬ه و تحلی‪yyy‬ل نمونه‌ه‪yyy‬ای کن‪yyy‬ترل خ‪yyy‬ارجی آنالیت‌ه‪yyy‬ای انتخ‪yyy‬ابی‬
‫( ‪ Acquity UPLC BEH C 18‬با پیش ستون )ذرات ‪ 1.7‬میکرومتر‬ ‫ب‪yy‬ه ‪( Z‬مورفین‪ ،‬بوپرنورفین‪ ،‬کدئین و متادون) تعیین شد‪ .‬امتیازه‪yy‬ای‬
‫روی یک س‪yy‬تون انج‪yy‬ام )ذرات ‪ 5 × 2.1‬میلی متر‪ 1.7 ،‬میکرومتر‬ ‫عنوان تفاوت بین مقدار اندازه گیری شده م‪y‬ا و مق‪y‬دار اختص‪y‬اص داده‬
‫ایاالت ‪، MA،‬میلفورد( از واترز ‪ Acquity UPLC I-Class‬شد‪ .‬ساز‬ ‫شده (میانگین آزمایشگاه های موجود در برنامه تست مهارت)‪ ،‬تقسیم‬
‫‪ NH 4 HCO 2 (pH‬ش‪yy‬امل ‪ 5‬میلی م‪yy‬والر ‪ A‬فاز متح‪yy‬رک ‪).‬متحده‬ ‫‪.‬محاسبه شد )‪ (SDPA‬بر انحراف استاندارد برای ارزیابی مهارت‬
‫ب‪yy‬ود‪ .‬س‪yy‬رعت جری‪yy‬ان ‪ 0.5‬میلی لی‪yy‬تر در ‪ MeOH‬شامل ‪ B‬و )‪10.1‬‬ ‫با معادالت زی‪yy‬ر )‪ (ME‬و اثرات ماتریس )‪ (RE‬بازیابی استخراج‬
‫شروع شد و ‪% B‬دقیقه و کل زمان اجرا ‪ 5.3‬دقیقه بود‪ .‬گرادیان با ‪5‬‬ ‫‪:‬محاسبه شد‬
‫در ‪ 2.7‬دقیق‪yy‬ه‪ %90 ،‬در ‪% B، 50% 3.8‬پس از ‪ 0.3‬دقیقه ب‪yy‬ه ‪30‬‬
‫آر‬
‫دقیقه و ‪ %98‬در ‪ 4.8‬دقیق‪yy‬ه ادام‪yy‬ه ی‪yy‬افت‪ .‬حجم تزری‪yy‬ق ‪ 3‬میکرولی‪yy‬تر‬
‫‪.‬بود‬ ‫‪RE = R‬‬ ‫قبل از ‪٪100‬‬ ‫(‪)1‬‬
‫‪ Xevo‬آنالیت ها با استفاده از یک طیف سنج جرمی پش‪yy‬ت س‪yy‬ر هم‬ ‫پست‬
‫‪ Z-‬مجهز به رابط الکترواسپری )واترز‪ ،‬منچستر‪ ،‬انگلستان( ‪TQ-S‬‬
‫در مانیتورین‪yy‬گ )‪ (ESI+‬شناس‪yy‬ایی ش‪yy‬دند‪ .‬یونیزاس‪yy‬یون مثبت ‪spray‬‬ ‫آ‬

‫انج‪yy‬ام ش‪yy‬د‪ .‬ولت‪y‬اژ م‪yy‬ویرگی ‪ 1‬کیل‪y‬و ولت و )‪ (MRM‬واکنش چندگان‪y‬ه‬

‫= ‪ME‬‬ ‫یک پست × ‪٪100‬‬ ‫(‪)2‬‬
‫دمای منبع یونی ‪ 120‬درجه سانتی گراد بود‪ .‬گ‪y‬از تجزی‪y‬ه (نی‪y‬تروژن)‬
‫مرجع‬
‫تا دمای ‪ 650‬درجه س‪y‬انتیگراد گ‪y‬رم ش‪y‬د و ب‪y‬ا س‪y‬رعت جری‪y‬ان ‪1000‬‬
‫لیتر در ساعت تحویل داده شد‪ .‬جری‪yy‬ان گ‪yy‬از مخ‪yy‬روطی ‪ 150‬لی‪yy‬تر در‬ ‫مربوط به منطقه اوج آنالیت نرمال شده با ‪ R post‬و ‪ R pre‬که در آن‬
‫‪ EME-‬آن‪y‬الیت ه‪y‬ای موج‪y‬ود در پروتک‪y‬ل ‪ MRM‬ساعت ب‪y‬ود‪ .‬انتق‪y‬ال‬ ‫هستند که به ترتیب با آنالیت‌های قبل و بع‪yy‬د از ‪ OF‬در نمونه‌های ‪IS‬‬
‫‪.‬ارائه شده است ‪ S4‬در جدول ‪UHPLC-MS/MS‬‬ ‫استخراج‪ ،‬با استاندارد داخلی اضافه شده پس از اس‪yy‬تخراج در ه‪yy‬ر دو‬
‫مورد‪ ،‬مطابقت دارند‪ .‬یک پست و یک مرجع به ترتیب مربوط ب‪yy‬ه ن‪yy‬واحی‬
‫کالیبراسیون و شناسایی‬ ‫اوج آنالیت در عصاره‌های خالی مشخص و ی‪y‬ک گیرن‪y‬ده منظم اس‪y‬ت‪.‬‬
‫ب‪y‬اال و پ‪y‬ایین ب‪y‬ا ش‪yy‬ش م‪yy‬وازی در ه‪y‬ر غلظت ‪ QC‬بازی‪y‬ابی در س‪yy‬طح‬
‫مواد افیونی هدف با زم‪yy‬ان نگه‪yy‬داری نس‪yy‬بی و نس‪yy‬بت ی‪yy‬ون بین انتق‪yy‬ال‬
‫ب‪yy‬ود و بازی‪yy‬ابی از پ‪yy‬د ‪ EME‬ارزیابی شد‪ .‬بازیابی مربوط ب‪yy‬ه مرحل‪yy‬ه‬
‫در مقایس‪yy‬ه ب‪yy‬ا کالیبراتوره‪yy‬ا شناس‪yy‬ایی ش‪yy‬دند‪ .‬منح‪yy‬نی ه‪yy‬ای ‪MRM‬‬
‫از ‪ OF‬را شامل نمی شد‪ .‬اثرات ماتریس با شش نمونه ‪ OF‬جمع کننده‬
‫کالیبراسیون درجه دوم وزنی (‪ )×/1‬با چهار س‪y‬طح کالیبراس‪y‬یون‪ ،‬ب‪y‬ه‬
‫‪.‬باال و پایین ارزیابی شد ‪ QC‬افراد مختلف در سطح‬
‫استثنای مبدأ‪ ،‬بر اساس سطح پیک آنالیت نرم‪yy‬ال ش‪yy‬ده ب‪yy‬ه منطق‪yy‬ه اوج‬
‫انتقال با بازرسی کروماتوگرام‌های نمونه‌های ب‪y‬دون آن‪y‬الیت پس از‬
‫‪ OF،‬استفاده شد‪ .‬غلظت آنالیت محاسبه شده مربوط ب‪yy‬ه غلظت در ‪IS‬‬
‫تزریق یک نمونه پنج برابر غلظت باالترین کالیبراتور ارزی‪yy‬ابی ش‪yy‬د‪.‬‬
‫‪.‬حسابداری برای رقت در بافر جمع آوری‬
‫تعداد = ‪ QC ( 5‬پایداری پس از استخراج با تزریق مجدد نمونه های‬
‫اعتبار سنجی‬ ‫و کالیبراتورهایی که روی نمونه برداری خودکار (‪) 10‬در هر سطح‬
‫درجه سانتی گراد) به مدت ‪ 3 ،1‬و ‪ 7‬روز باقی مانده بودند‪ ،‬ارزیابی‬
‫این روش ب‪yy‬ر اس‪yy‬اس دس‪yy‬تورالعمل ه‪yy‬ای ارائ‪yy‬ه ش‪yy‬ده توس‪yy‬ط پی‪yy‬ترز و‬ ‫‪.‬شد‬
‫و ] ‪ (EMA) [ 40‬همکاران تایید شد‪ ] 39 [ .‬و آژانس پزشکی اروپا‬ ‫مقایسه روش با روش مرجع‬
‫شامل خطی ب‪yy‬ودن‪ ،‬دقت‪ ،‬دقت‪ ،‬بازی‪yy‬ابی اس‪yy‬تخراج‪ ،‬اث‪yy‬رات م‪yy‬اتریس‪،‬‬
‫‪.‬پایداری پس از استخراج و انتقال بود‬ ‫‪ OF‬ب‪yy‬رای نش‪yy‬ان دادن ک‪yy‬اربرد این روش‪ ،‬نمونه‌ه‪yy‬ای ناش‪yy‬ناس معت‪yy‬بر‬
‫هنگ‪yy‬ام اس‪yy‬تفاده از )‪ (R‬خطی بودن با ارزیابی ض‪yy‬ریب همبس‪yy‬تگی‬ ‫مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتن‪yy‬د و نت‪yy‬ایج ب‪yy‬ا ی‪yy‬ک روش غرب‪yy‬الگری‬
‫ی‪yyy‬ک م‪yyy‬دل کالیبراس‪yyy‬یون خطی وزنی ‪ ×/1‬ب‪yyy‬ا س‪yyy‬ه تک‪yyy‬رار در ه‪yyy‬ر‬ ‫معم‪yy‬ول در بخش فارم‪yy‬اکولوژی ب‪yy‬الینی در بیمارس‪yy‬تان س‪yy‬نت اوالوس‬
‫ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان )‪ (LLOQ‬کالیبراتور ارزیابی شد‪ .‬ح‪yy‬د پ‪yy‬ایین کمی س‪yy‬ازی‬ ‫که تحت آزمایش ) ‪( ( 30 = n‬تروندهایم‪ ،‬نروژ) مقایسه شد‪ .‬نمونه‬
‫س‪yy‬یگنال ب‪yy‬ه ‪ LLOQ‬کمترین غلظت ک‪yy‬الیبراتور تع‪yy‬یین ش‪yy‬د‪ .‬الزام‪yy‬ات‬ ‫دارو قرار گرفته بودند‪ ،‬ناشناس شدند و به م‪yy‬دت ‪ 4‬هفت‪yy‬ه در دم‪yy‬ای ‪4‬‬
‫باالتر از ‪ 10‬و ‪ 3‬برای یون کمی و واجد شرایط ب‪yy‬ود‪ ،‬و )‪ (S/N‬نویز‬ ‫درجه سانتیگراد و تا ‪ 1‬هفته در دمای ‪ -20‬درجه سانتیگراد نگهداری‬
‫با تجزیه ‪ LLOQ‬بین روز و دقت در ‪ .٪± 20‬دقت و صحت در ‪CV‬‬ ‫و روش معم‪yy‬ولی ک‪yy‬ه از ‪ EME-UHPLC-MS/MS‬شدند‪ .‬نمونه‌ها با‬
‫مش‪yy‬خص در ده روز م‪yy‬ورد ارزی‪yy‬ابی ق‪yy‬رار ‪ QC‬و تحلیل ی‪yy‬ک نمون‪yy‬ه‬ ‫اس‪yy‬تفاده می‌ک‪yy‬رد‪ ،‬دوب‪yy‬اره آن‪yy‬الیز ش‪yy‬دند‪LLE-UHPLC-MS/MS .‬‬
‫‪.‬گرفت‬ ‫نمونه‌ه‪yy‬ای جمع‌آوری‌ش‪yy‬ده مت‪yy‬ادون و بوپرن‪yy‬ورفین ب‪yy‬االتر از ب‪yy‬االترین‬
‫و روش معم‪yy‬ول‪ ،‬ب‪yy‬ا ‪ EME‬سطح کالیبراتور بودند و قبل از آنالیز ب‪yy‬ا‬

‫‪13‬‬
 ‫‪5328‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫رقیق شدند‪ .‬روش غرب‪yy‬الگری )‪ (1:3 v/v‬مخلوط بافر آب‪/‬کوانتیسال‬ ‫احتماًال ‪ log P <2‬تعریف شده است‪ .‬ترکیبات با ] ‪<log P <6 [ 37‬‬
‫معم‪yy‬ول در مجم‪yy‬وع ‪ 29‬داروی س‪yy‬وء مص‪yy‬رف‪ ،‬از جمل‪yy‬ه آمفت‪yy‬امین و‬ ‫بسیار آبدوست هستند‪ .‬از طرف دیگر‪ NPOE ،‬برای انتقال کارآمد به‬
‫و ‪ Z‬سایر محرک ها‪ ،‬بنزودیازپین ه‪y‬ا‪ ،‬ت‪y‬وهم زاه‪y‬ا‪ ،‬خ‪y‬واب آوره‪y‬ای‬ ‫ترکیبات بسیار لیپوفیل دارای ضریب تقسیم نامطلوب بین غشاء م‪yy‬ایع‬
‫( م‪yy‬واد افی‪yy‬ونی را ه‪yy‬دف ق‪yy‬رار داد‪ .‬ده م‪yy‬ورد از اپیوئی‪yy‬دهای ه‪yy‬دف‬ ‫‪.‬و گیرنده هستند و در غشای مایع به دام می‌افتند‬
‫ترام‪yy‬ادول‪ ،‬اتی‪yy‬ل م‪yy‬ورفین‪، O-DM-،‬م‪yy‬ورفین‪ ،‬اکس‪yy‬ی ک‪yy‬دون‪ ،‬ک‪yy‬دئین‬ ‫ب‪yy‬ه م‪yy‬دت ‪ 20‬دقیق‪yy‬ه ب‪yy‬ا ش‪yy‬ش ‪ OF‬مواد افیونی هدف از نمونه های‬
‫در ه‪yy‬ر دو )ترامادول‪ ،‬کتوبیمی‪yy‬دون‪ ،‬بوپرن‪yy‬ورفین‪ ،‬فنتانی‪yy‬ل و مت‪yy‬ادون‬ ‫حالل غش‪y‬ایی اس‪y‬تخراج ش‪y‬د‪ .‬بازی‪y‬ابی در ش‪y‬کل ‪ 2‬ارائ‪y‬ه ش‪y‬ده اس‪y‬ت ‪.‬‬
‫[ ‪ Bablok‬و ‪ Passing‬روش وارد شدند‪ .‬نتایج با استفاده از رگرسیون‬ ‫پیش بینی شده مرتب شده اند که از ‪ log P‬آنالیت ها بر اساس مقادیر‬
‫‪ (MedCalc‬نس‪yy‬خه ‪ MedCalc 20‬ب‪yy‬ا ن‪yy‬رم اف‪yy‬زار آم‪yy‬اری ] ‪41‬‬ ‫‪( 0.7.‬مورفین) تا ‪ 5.0‬متغیر است‬
‫مقایسه شد ‪ .‬با توجه به کمیته )‪Software Ltd., Ostend, Belgium‬‬ ‫‪ NPOE‬هم‪yy‬انطور ک‪yy‬ه از پنج‪yy‬ره اس‪yy‬تخراج ‪ S1).‬ج‪yy‬دول( )مت‪yy‬ادون(‬
‫منطقه ای اخالق تحقیق‪ ،‬برای ارائه مختصر نتایج معمول ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان‬ ‫‪ log P‬مواد افیونی در مح‪yy‬دوده ‪ (2 <log P <6)،‬انتظار می رفت‬
‫‪.‬بخشی از مقاله روش شناختی‪ ،‬نیازی به تایید رسمی نیست‬ ‫پایین تر به طور م‪yy‬وثر ب‪yy‬ا این حالل غش‪yy‬ایی اس‪yy‬تخراج نش‪yy‬دند‪ .‬ب‪yy‬رای‬
‫حالل ه‪yy‬ای غش‪yy‬ایی دیگ‪yy‬ر‪ ،‬پنج‪yy‬ره ه‪yy‬ای اس‪yy‬تخراج در این نقط‪yy‬ه ب‪yy‬ه‬
‫خصوصیات غشای مایع‬ ‫‪.‬وضوح تعریف نشده بودند‬
‫گزارش شده اس‪y‬ت و این حالل ب‪y‬ه عن‪y‬وان ج‪y‬ایگزینی ب‪y‬رای ] ‪42‬‬
‫حالل غشایی نهایی با هدف تعیین مح‪y‬دوده ک‪y‬اربرد ب‪y‬ر حس‪y‬ب مق‪y‬ادیر‬ ‫م‪yyy‬ورد آزم‪yyy‬ایش ق‪yyy‬رار گ‪yyy‬رفت‪ .‬در آزمایش‌ه‪yyy‬ای حاض‪yyy‬ر‪NPOE ،‬‬
‫آنالیت مورد بررسی قرار گرفت ‪ .‬جزئیات و تفاس‪y‬یر تج‪y‬ربی ‪log P‬‬ ‫به طور کلی فقط برای لیپوفیل‌ترین مواد افیونی ‪ DEHPi‬استخراج با‬
‫مانند کار قبلی [ ‪ ] 37‬بود‪ .‬به طور خالصه‪ ،‬بر اساس اس‪yy‬تخراج ‪90‬‬ ‫‪ O-DM-tramadol (log‬به استثنای ‪ NPOE،‬مشابه ‪(log P > 2.5)،‬‬
‫‪ log‬ماده مدل پایه‪ ،‬پنجره استخراج یک غشای مایع از طریق مق‪yy‬ادیر‬ ‫‪.‬که با راندمان متوسط استخراج شد‪ ،‬کارآمد بود‪P = 1.6)، )%41( .‬‬
‫کمترین ‪، log P low‬باال بیان شد ‪ .‬در اینجا ‪ log P‬کم تا ‪ log P‬آنالیت‪ ،‬از ‪P‬‬
‫یک اقدام ثابت شده ب‪yy‬رای ‪ NPOE‬به ‪ DEHP‬افزودن حامل یونی‬
‫برای ≥ ‪ %50‬از آنالیت ها ‪ RE ≥ 40%‬است که در آن ‪ log P‬مقدار‬ ‫افزایش کارایی استخراج آنالیت ه‪yy‬ای آبدوس‪yy‬ت اس‪yy‬ت [ ‪.] 44 ، 43‬‬
‫کم ‪ 0.5+‬به دست می آید‪ .‬به طور ‪ log P‬پایین تا ‪ log P‬در محدوده از‬ ‫ب‪y‬ه ‪% DEHP‬همانطور که از شکل ‪ 2‬مشاهده می ش‪y‬ود ‪ ،‬اف‪y‬زودن ‪1‬‬
‫ب‪y‬اال ‪ log P -‬از ‪ log P‬مشابه‪ ٪50 ≥ ،‬از آنالیت های مدل در محدوده‬ ‫امکان استخراج کامل ‪ 11‬از ‪ 13‬مخدر هدف و بهب‪y‬ود انتق‪y‬ال ‪NPOE‬‬
‫‪.‬استخراج می شوند ‪ RE ≥ 40٪‬باال با ‪ 0.5 log P‬تا‬ ‫را فراهم کرد ‪ .‬با ‪ log P‬جرم همه ترکیبات در انتهای پایینی محدوده‬
‫‪ (RE 19٪، CV 27٪).‬این حال‪ ،‬بهبود مورفین رضایت بخش نب‪y‬ود‬
‫افزایش مقدار حامل به ‪ 5‬درصد بهبودی در بازی‪yy‬ابی م‪yy‬ورفین نداش‪yy‬ت‬
‫نتایج و بحث‬
‫و منجر به به دام افتادن غشایی از لیپوفیل ترین ترکیب‪yy‬ات ش‪yy‬د‪ .‬انتق‪yy‬ال‬
‫توسعه روش‬ ‫‪ pH‬جرم مورفین با اف‪y‬زایش پتانس‪y‬یل اس‪y‬تخراج ی‪y‬ا زم‪y‬ان ی‪y‬ا ب‪y‬ا تغی‪y‬یر‬
‫‪.‬بهبود نیافت (داده‌ها نشان داده نشده است)‬
‫انتخاب غشای مایع‬ ‫حالل های یوتکتیک عمیق به دلیل س‪y‬بز ب‪y‬ودن‪ ،‬کم هزین‪y‬ه ب‪y‬ودن و‬
‫کاربرد برای طیف وسیعی از امالح ب‪y‬ه عن‪y‬وان حالل ه‪y‬ای اس‪y‬تخراج‬
‫‪ EME‬انتخ‪y‬اب ی‪y‬ک حالل غش‪y‬ایی مناس‪y‬ب ی‪y‬ک مرحل‪y‬ه کلی‪y‬دی ب‪y‬رای‬ ‫جایگزین پدید آمده اند [ ‪ .] 45‬مخلوط یوتکتیک مایعی متشکل از دو‬
‫کارآمد و قوی است‪ .‬توجه باید به بازی‪yy‬ابی اس‪yy‬تخراج‪ ،‬تکرارپ‪yy‬ذیری و‬ ‫ی‪yy‬ا چن‪yy‬د ج‪yy‬زء اس‪yy‬ت ک‪yy‬ه از طری‪yy‬ق پیون‪yy‬دهای هی‪yy‬دروژنی ب‪yy‬رهم کنش‬
‫ثبات سیستم باشد‪ .‬مورد دوم با نظارت بر جری‪yy‬ان اس‪yy‬تخراج ارزی‪yy‬ابی‬ ‫می‌کنن‪yy‬د و منج‪yy‬ر ب‪yy‬ه ک‪yy‬اهش نقط‪yy‬ه ذوب نس‪yy‬بت ب‪yy‬ه اج‪yy‬زای جداگان‪yy‬ه‬
‫می شود‪ .‬اگرچه معموًال با آزمون و خط‪yy‬ا ی‪yy‬افت می‌ش‪yy‬ود‪ ،‬تالش‌ه‪yy‬ایی‬ ‫می‌شود‪ .‬حالل های یوتکتیک عمیق آبگریز قبًال به عنوان حالل ه‪yy‬ای‬
‫برای مطالعه دامنه کاربرد حالل‌های غشایی شناخته شده برای هدایت‬ ‫اس‪yy‬تفاده ش‪yy‬ده ان‪yy‬د [ ‪ .] 49-46‬ب‪yy‬ه ط‪yy‬ور خ‪yy‬اص‪ EME ،‬غش‪yy‬ایی در‬
‫توسعه روش انجام شده است‪ .‬در اینجا‪ ،‬پنجره اس‪yy‬تخراج ی‪yy‬ک غش‪yy‬ای‬ ‫اس‪yy‬تخراج م‪yy‬وثر )‪ (Thy‬مخلوط‌ه‪yy‬ای یوتکتی‪yy‬ک کوم‪yy‬ارین و تیم‪yy‬ول‬
‫آنالیت تعریف می ش‪yy‬ود ک‪yy‬ه در ‪ log P‬مایع به عنوان محدوده مقادیر‬ ‫مش‪y‬ابه ب‪y‬ا م‪y‬واد افی‪y‬ونی ه‪y‬دف نش‪y‬ان ‪ log P‬ترکیب‪y‬ات را در مح‪y‬دوده‬
‫‪،‬آن بازیابی ب‪y‬االیی انتظ‪y‬ار می رود [ ‪ .] 37‬ب‪y‬رای آن‪y‬الیت ه‪y‬ای پای‪y‬ه‬ ‫داده‌اند [ ‪ .] 49 ، 47‬در آزمایش های حاضر‪ ،‬آنالیت ها ابتدا با یک‬
‫ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان اولین انتخ‪yy‬اب ب‪yy‬ر اس‪yy‬اس پای‪yy‬داری‪ ،‬جری‪yy‬ان کم و ‪NPOE‬‬ ‫‪ Thy‬و )‪ (6MC‬حالل یوتکتیک عمیق متش‪yy‬کل از ‪-6‬متی‪yy‬ل کوم‪yy‬ارین‬
‫اخ‪yy‬یرًا ب‪yy‬ه ‪ NPOE‬تکرارپذیری باال ایجاد شده است‪ .‬پنجره اس‪yy‬تخراج‬ ‫در نسبت مولی ‪ 1:2‬استخراج شدند که قبًال در استخراج متوترکس‪yy‬ات‬
‫ص‬
‫شکل ‪ 2‬بازیابی اپیوئیدهای هدف و‬
‫‪: DEHPi،‬با شش حالل غشاییر‬
‫با ‪ %1‬و ‪ NPOE %5‬و ‪NPOE،‬ت‬
‫‪( DEHP، 6MC:Thy‬وزنی‪/‬وزنی)‬
‫)مولر ‪2(1:2،‬‬
‫از )‪ (v/v‬نسبت)‪ ،‬و مخلوط ‪1:2‬‬
‫و )نسبت مولی ‪6MC:Thy (1:2،‬‬
‫ولتاژ اعمال شده برای ‪NPOE.‬‬
‫همه غشاها به جز ‪ 50‬ولت بود‬
‫‪) (10‬نسبت مولی ‪1 3 (1:2،‬‬
‫‪6MC:Thy‬‬
‫دقیقه ‪V). t = 20‬‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع خوراکی‬ ‫‪5329‬‬

‫از پالسما [ ‪ (2.2- <log P < 0.9) 48‬و متابولیت ها استفاده می شد‬
‫به دلیل حاللیت کمتر در آب که باعث می‌شود غشای م‪yy‬ایع ‪6 .]MC‬‬
‫ذاتًا پایدارتر شود‪ ،‬برخالف کومارین استفاده شد‪ .‬با وج‪yy‬ود این‪ ،‬حالل‬
‫یوتکتیک عمیق نس‪y‬بت ب‪y‬ه دیگ‪y‬ر حالل‌ه‪y‬ای غش‪y‬ایی پای‪y‬داری کم‪y‬تری‬
‫داشت و برای جلوگیری از جریان بیش از حد و دستیابی ب‪yy‬ه پای‪yy‬داری‬
‫سیستم‪ ،‬باید در ولت‪yy‬اژ پ‪yy‬ایین‌تر (‪ 10‬ولت) ک‪yy‬ار می‌ک‪yy‬رد‪ .‬اس‪yy‬تخراج ب‪yy‬ا‬
‫پایین تر مواد افیونی ‪ log P‬محدوده )نسبت مولی ‪6MC:Thy (1:2،‬‬
‫‪ (RE‬ه‪yy‬دف را پوش‪yy‬ش داد‪ ،‬ب‪yy‬ا نت‪yy‬ایج رض‪yy‬ایت بخش‪yy‬ی ب‪yy‬رای م‪yy‬ورفین‬
‫بازیابی با این حال برای لیپوفیل ترین مواد افیونی ‪67٪، CV 10٪).‬‬
‫‪ Thy‬کم بود‪ .‬اگرچه برخی از آنالیت‌های چربی دوست با کوم‪yy‬ارین و‬
‫می‌توان‪y‬د ‪MC‬در ادبی‪y‬ات اس‪yy‬تخراج ش‪yy‬ده‌اند‪ ،‬آبگری‪y‬زی ذاتی ب‪y‬االتر ‪6‬‬
‫بازیابی کم غ‪y‬یرمنتظره بوپرن‪y‬ورفین‪ ،‬فنتانی‪y‬ل‪ ،‬س‪y‬یکلوپروپیل فنتانی‪y‬ل‪،‬‬
‫‪.‬اتونیتازپین و متادون را در آزمایش حاضر توضیح دهد‬
‫‪ NPOE‬در مجموعه نهایی آزمایش‌ه‪yy‬ا‪ ،‬حالل یوتکتی‪yy‬ک عمی‪yy‬ق ب‪yy‬ا‬ ‫برای ‪ 90‬باز با استفاده از ‪ log P‬شکل ‪ 3‬بازیابی استخراج در مقابل‬
‫نسبت ‪ (v/v) 6MC:Thy (1:2،‬مخلوط شد‪ .‬حالل ها در نسبت ‪1:2‬‬ ‫به عنوان ‪ NPOE‬و )نسبت مولی ‪MC:Thy (1:2،‬از ‪ (v/v) 6‬مخلوط ‪1:2‬‬
‫‪MC، Thy‬مخلوط شدند‪ .‬حالل غشایی متشکل از ‪ NPOE 6‬و )مولی‬ ‫غشای مایع‪ .‬پنجره استخراج برجسته شده است‬
‫همه مواد افیونی هدف را با بازیابی باال و دقت قابل قب‪yy‬ول ‪ NPOE‬و‬ ‫و زم‪yy‬ان‪ .‬س‪yy‬رعت هم زدن ب‪y‬ر اس‪yy‬اس تجرب‪y‬ه قبلی روی ‪ 875‬دور در‬
‫برای همه آنالیت ها پوشش داد‪ .‬عالوه بر این‪ ،‬پایداری )‪(CV ≤ 18٪‬‬ ‫‪.‬دقیقه تنظیم شد‬
‫بهب‪y‬ود یافت‪y‬ه )نس‪yy‬بت م‪yy‬ولی ‪MC:Thy (1:2،‬در مقایسه ب‪y‬ا خ‪yy‬الص ‪6‬‬ ‫ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان رقی‪yy‬ق ‪% (v/v) HCOOH‬محلول های ‪ %0.1‬و ‪0.5‬‬
‫‪.‬است‪ ،‬و استخراج پایدار می تواند در ولتاژهای باالتر انجام شود‬ ‫اگرچه همیشه ممکن ‪ a).‬شکل ‪ (4‬کننده نمونه و پذیرنده ارزیابی شدند‬
‫نیست‪ ،‬انتخاب همان معرف به عنوان رقیق کننده نمونه و پذیرن‪yy‬ده در‬
‫پنجره استخراج غشای مایع‬ ‫‪ OF‬رابطه با سادگی عملیاتی سودمند در نظر گرفته شد‪ .‬نمون‪yy‬ه ه‪yy‬ای‬
‫نمونه ‪ 5‬و ‪ pH‬با رقیق کننده نمونه رقیق شدند که منجر به )‪1:2 (v/v‬‬
‫غشای مایع انتخاب شده بیشتر با مطالعه پنجره استخراج آن مش‪yy‬خص‬ ‫پذیرنده به ترتیب ‪ 2.7‬و ‪. pH‬شد ‪ 3٪ HCOOH‬برای ‪ ٪0.1‬و ‪0.5‬‬
‫شد‪ .‬پنجره استخراج غشا با همان روشی که توس‪yy‬ط ژو و همک‪yy‬ارانش‬ ‫‪ 2.5‬ب‪yy‬ود‪ .‬پس از اعم‪yy‬ال ولت‪yy‬اژ ‪ 50‬ولت ب‪yy‬ه م‪yy‬دت ‪ 20‬دقیق‪yy‬ه‪ ،‬ه‪yy‬ر دو‬
‫توضیح داده شد تعیین شد‪ ،] 37 [ .‬که در آن ‪ 90‬آنالیت م‪y‬دل پای‪y‬ه از‬ ‫شرایط منجر به عملکرد باال با میانگین بازیابی برای هم‪y‬ه آن‪y‬الیت ه‪y‬ا‬
‫استخراج ش‪yy‬د‪ .‬پنج‪yy‬ره ‪ EME‬نمونه های شبه با استفاده از ویال رسانا‬ ‫شدند‪ .‬محلول ‪٪ HCOOH‬به ترتیب ‪ ٪96‬و ‪ ٪88‬برای ‪ ٪0.1‬و ‪0.5‬‬
‫آن‪yy‬الیت بی‪yy‬ان می ش‪yy‬ود ‪ log P .‬استخراج در اینج‪yy‬ا از طری‪yy‬ق مق‪yy‬ادیر‬ ‫به عنوان رقیق کننده و پذیرنده نمونه نهایی انتخاب ‪0.1% HCOOH‬‬
‫شکل ‪ 3‬بازیابی آنالیت های مدل را نشان می دهد که در برابر مقادیر‬ ‫‪.‬شد‬
‫پیش بینی شده آنها رسم شده است ‪ .‬پنج‪yy‬ره اس‪yy‬تخراج مخل‪yy‬وط ‪log P‬‬ ‫پتانسیل استخراج با مطالعه بازیابی آنالیت هنگام اعمال ولتاژه‪yy‬ای‬
‫‪ NPOE 1 <log P‬و )نسبت مولی ‪1:2 (v/v) 6MC:Thy (1:2،‬‬ ‫‪ 50 ،30 ،15 ،5 ،0‬و ‪ 80‬ولت به مدت ‪ 20‬دقیقه انتخ‪yy‬اب ش‪yy‬د‪ .‬ب‪y‬ر‬
‫پنج‪yy‬ره ‪ (2 <log P <6)،‬خالص ‪ NPOE‬بود ‪ .‬در مقایسه با ‪<5.5‬‬ ‫سیستم با تمام شرایط پایدار ‪ S1)،‬شکل( اساس جریان ثبت شده سیستم‬
‫استخراج کمی به سمت ترکیب‪yy‬ات قط‪yy‬بی ت‪yy‬ر تغی‪yy‬یر ک‪yy‬رد و این امک‪yy‬ان‬ ‫در نظ‪yy‬ر گرفت‪yy‬ه ش‪yy‬د‪ .‬ش‪yy‬کل ‪ 4‬ب بازی‪yy‬ابی اس‪yy‬تخراج را ب‪yy‬ا پتانس‪yy‬یل‬
‫‪.‬استخراج همزمان همه مواد افیونی هدف را فراهم کرد‬ ‫اس‪yy‬تخراج متف‪yy‬اوت ب‪yy‬رای م‪yy‬واد افی‪yy‬ونی انتخ‪yy‬اب ش‪yy‬ده نش‪yy‬ان می ده‪yy‬د‪.‬‬
‫پتانسیل استخراج بهینه وابس‪yy‬ته ب‪y‬ه ت‪y‬رکیب ب‪y‬ود و ‪ 20‬ولت ب‪y‬ه عن‪y‬وان‬
‫رقیق کننده نمونه‪ ،‬پذیرنده‪ ،‬پتانسیل استخراج و زمان‬ ‫مصالحه انتخاب شد‪ .‬داده های توسعه روش ب‪yy‬رای هم‪yy‬ه م‪yy‬واد افی‪yy‬ونی‬
‫‪.‬ارائه شده است ‪ S5-6‬در جدول‬
‫به عنوان غشای ‪ NPOE‬و ‪MC، Thy‬پس از انتخاب مخلوطی از ‪6‬‬ ‫زمان استخراج نهایی ‪ 20‬دقیق‪y‬ه ب‪y‬ه عن‪y‬وان مص‪yy‬الحه بین بازی‪y‬ابی‪،‬‬
‫مایع‪ ،‬توسعه روش بیشتر شامل انتخاب رقیق کننده و پذیرن‪yy‬ده نمون‪yy‬ه‪،‬‬ ‫دقت و توان نمونه انتخاب شد‪ .‬شکل ‪ 4‬ج بهبودی پس از استخراج را‬
‫‪.‬پتانسیل استخراج بود‬ ‫برای ‪ 10 ،5 ،2‬و ‪ 20‬دقیقه برای مواد افیونی انتخاب شده نشان می‬
‫دهد‪ .‬تمام ترکیبات پس از ‪ 20‬دقیقه به طور کامل استخراج ش‪yy‬دند‪ ،‬ب‪yy‬ه‬
‫استثنای مورفین و اتونیتازپین ک‪yy‬ه ب‪yy‬ه ت‪yy‬رتیب ‪ %80‬و ‪ %68‬بازی‪yy‬ابی‬
‫‪.‬قابل قبول بود ‪ CV ≤ 15٪‬شدند‪ .‬دقت با‬

‫‪13‬‬
‫‪5330‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫ب بازیابی با استخراج متفاوت با استفاده از ‪).‬دقیقه ‪ OF (V = 50 V، t = 20‬مواد افیونی از گیرنده نمونه ‪ EME‬شکل ‪ 4‬پارامترهای عملیاتی برای‬
‫ج بازیابی به عنوان تابعی از ‪).‬دقیقه ‪ (t = 20‬به عنوان حالل غشایی‪ .‬یک مخدر بالقوه انتخاب شده ‪ NPOE‬و ‪MC، Thy‬مخلوطی از ‪6‬‬
‫)‪ (V = 20 V‬زمان استخراج برای مواد افیونی انتخاب شده به عنوان رقیق کننده نمونه و ‪ HCOOH‬بازیابی با استفاده از دو غلظت‬
‫)‪ (CV%‬و اثرات ماتریس اصالح شده استاندارد داخلی‪ .‬دقت کمی ‪ ( R )، (ME)،‬جدول ‪ 1‬داده های اعتبار سنجی مواد افیونی‪ :‬ضریب همبستگی‬
‫اث‪y‬رات ‪ (RE)،‬بازی‪y‬ابی ‪ QC،‬و سه سطح )‪ (LLOQ‬برای تمام آنالیت‌ها ‪ × LLOQ‬تا ‪ LLOQ 50‬و دقت (بایاس‪ )%‬در حد پایین محدوده کمیت از‬
‫‪.‬ماتریس بود‬
‫)‪ (R‬خطی تصحیح می )‪ (CV%‬من )‪ RE (CV%‬جانبداری )‪ (%‬بین روز ‪ (%)CV‬رزومه روزانه )‪ QC LLOQ (μg/L‬آنالیت‪ ،‬غلظت‬
‫)‪(μg/L‬‬ ‫)‪(٪‬‬ ‫شود‬
‫)‪ (CV%‬من‬
‫‪n=6‬‬ ‫‪n = 10‬‬ ‫‪n = 10‬‬ ‫‪n=6‬‬ ‫‪n=6‬‬ ‫‪n=6‬‬

‫مورفین‬ ‫‪3‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪−0.2‬‬ ‫‪0.9996‬‬

‫‪4.5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-0.8‬‬ ‫)‪66 (14‬‬ ‫)‪98 (3‬‬ ‫)‪102 (2‬‬
‫‪30‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪5‬‬
‫‪120‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪8‬‬ ‫)‪85 (4‬‬ ‫)‪97 (3‬‬ ‫)‪101 (1‬‬
‫اکسی کدون‬ ‫‪1‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-8‬‬ ‫‪0.9998‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-9‬‬ ‫)‪104 (3‬‬ ‫)‪97 (3‬‬ ‫)‪102 (2‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-6‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫)‪97 (3‬‬ ‫)‪96 (3‬‬ ‫)‪98 (2‬‬

‫‪13‬‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع خوراکی‬ ‫‪5331‬‬

‫کدئین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪-6‬‬ ‫‪0.9996‬‬

‫‪1.5‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪-8‬‬ ‫)‪97 (2‬‬ ‫)‪95 (3‬‬ ‫)‪103 (1‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪0.2‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪9‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫)‪102 (3‬‬ ‫)‪94 (3‬‬ ‫)‪103 (1‬‬
‫ترامادول‪O-DM-‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪-11‬‬ ‫‪0.9996‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪-6‬‬ ‫)‪96 (4‬‬ ‫)‪97 (3‬‬ ‫)‪104 (2‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪-4‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-5‬‬ ‫)‪102 (2‬‬ ‫)‪97 (3‬‬ ‫)‪105 (2‬‬
‫اتیل مورفین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-8‬‬ ‫‪0.9998‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-8‬‬ ‫)‪97 (2‬‬ ‫)‪96 (3‬‬ ‫)‪100 (2‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-3‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫)‪100 (2‬‬ ‫)‪96 (3‬‬ ‫)‪99 (2‬‬
‫ترامادول‬ ‫‪3‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-12‬‬ ‫‪0.9998‬‬
‫‪4.5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪-11‬‬ ‫)‪99 (1‬‬ ‫)‪93 (4‬‬ ‫)‪97 (2‬‬
‫‪30‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-9‬‬
‫‪120‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-6‬‬ ‫)‪99 (1‬‬ ‫)‪99 (4‬‬ ‫)‪103 (2‬‬
‫پتیدین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪-4‬‬ ‫‪0.9982‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-5‬‬ ‫)‪101 (1‬‬ ‫)‪97 (3‬‬ ‫)‪100 (2‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-2‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪0.8‬‬ ‫)‪98 (2‬‬ ‫)‪99 (3‬‬ ‫)‪102 (2‬‬
‫کتوبمیدون‬ ‫‪1‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-5‬‬ ‫‪0.9998‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-6‬‬ ‫)‪98 (3‬‬ ‫)‪96 (4‬‬ ‫)‪102 (2‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-3‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-1‬‬ ‫)‪102 (4‬‬ ‫)‪92 (2‬‬ ‫)‪99 (1‬‬
‫بوپرنورفین‬ ‫‪3‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫‪0.9994‬‬
‫‪4.5‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫)‪79 (7‬‬ ‫)‪212 (1‬‬ ‫)‪100 (2‬‬
‫‪30‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-1‬‬
‫‪120‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-0.4‬‬ ‫)‪80 (6‬‬ ‫)‪180 (4‬‬ ‫)‪97 (1‬‬
‫فنتانیل‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪13‬‬ ‫‪-9‬‬ ‫‪0.9993‬‬
‫‪0.15‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪-11‬‬ ‫)‪62 (13‬‬ ‫)‪105 (4‬‬ ‫)‪98 (4‬‬
‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪-8‬‬
‫‪4‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-9‬‬ ‫)‪69 (14‬‬ ‫)‪104 (4‬‬ ‫)‪98 (2‬‬
‫سیکلوپروپیلفنتانیل‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪16‬‬ ‫‪-8‬‬ ‫‪0.9954‬‬
‫‪0.15‬‬ ‫‪7‬‬ ‫‪11‬‬ ‫‪-5‬‬ ‫)‪54 (18‬‬ ‫)‪113 (3‬‬ ‫)‪88 (2‬‬
‫‪1‬‬ ‫‪11‬‬ ‫‪9‬‬ ‫‪-6‬‬
‫‪4‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪12‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫)‪60 (20‬‬ ‫)‪108 (4‬‬ ‫)‪89 (1‬‬
‫اتونیتازپین*‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪45‬‬ ‫‪-16‬‬ ‫‪0.9663‬‬
‫‪0.15‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪27‬‬ ‫‪-12‬‬ ‫)‪39 (23‬‬ ‫)‪127 (4‬‬ ‫)‪99 (5‬‬

‫جدول ‪( 1‬ادامه)‬
‫‪ QC‬آنالیت‪ ،‬غلظت‬ ‫)‪LLOQ (μg/L‬‬ ‫جانبداری )‪ (%‬بین روز ‪ (%)CV‬رزومه روزانه‬ ‫)‪RE (CV%‬‬ ‫)‪ (CV%‬من‬ ‫)‪ (R‬خطی تصحیح می‬
‫)‪(μg/L‬‬ ‫)‪(٪‬‬ ‫شود‬
‫)‪ (CV%‬من‬
‫‪1‬‬ ‫‪28‬‬ ‫‪25‬‬ ‫‪-20‬‬
‫‪4‬‬ ‫‪34‬‬ ‫‪25‬‬ ‫‪−17‬‬ ‫)‪45 (21‬‬ ‫)‪116 (4‬‬ ‫)‪96 (2‬‬
‫متادون‬ ‫‪3‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪-2‬‬ ‫‪0.9995‬‬
‫‪4.5‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪-4‬‬ ‫)‪66 (19‬‬ ‫)‪133 (3‬‬ ‫)‪104 (3‬‬
‫‪30‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪-1‬‬
‫‪120‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪0.2‬‬ ‫)‪66 (18‬‬ ‫)‪122 (3‬‬ ‫)‪101 (2‬‬

‫‪13‬‬
‫‪5332‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫است *‬ ‫معیارهای اعتبارسنجی برآورده نشده‬ ‫بازیافت استخراج و تأثیر بر دقت‬

‫اس‪yy‬تخراج کارآم‪yy‬د تم‪yy‬ام اپیوئی‪yy‬دهای ه‪yy‬دف ب‪yy‬ا بازی‪yy‬ابی اس‪yy‬تخراج در‬

‫اعتبار سنجی‬ ‫ه‪yy‬ای مربوط‪yy‬ه ≤ ‪. CV%20‬محدوده ‪ 39‬تا ‪ 104‬درصد به دست آمد‬
‫بود (جدول ‪ (CV = 23%) .) 1‬برای همه آنالیتها به جز اتونیتازپین‬
‫این روش بر اساس دستورالعمل های پیترز و همک‪yy‬اران تایی‪yy‬د ش‪yy‬د‪ .‬و‬ ‫‪ (1 <log‬آنالیت‌هایی که به‌عنوان نسبتًا لیپوفیل در نظر گرفته می‌شدند‬
‫دقت درون ‪، LLOQ،‬آژانس پزش‪yy‬کی اروپ‪yy‬ا [ ‪ .] 40 ، 39‬خطی‬ ‫داشتند‪ (CV ≤ 4٪) ،‬بازیابی باالتر از ‪ ٪96‬با تغییرات کم )‪P <2.5‬‬
‫روز‪ ،‬دقت بین روز و بای‪yy‬اس‪ ،‬بازی‪yy‬ابی‪ ،‬اث‪yy‬رات م‪yy‬اتریس‪ ،‬حم‪yy‬ل و‬ ‫‪ CV‬با بازیابی باالتر از ‪ ٪66‬با )‪ (log P = 0.7‬در حالی که مورفین‬
‫پایداری پس از استخراج ارزیابی شد‪ .‬خالصه ای از داده های اعتبار‬ ‫> ‪ (log P‬استخراج شد‪ . .‬بازیابی آنالیت های چربی دوست ‪≤ 14٪‬‬
‫‪ .‬سنجی در جدول ‪ 1‬نشان داده شده است‬ ‫‪،‬بود‪ .‬به طور کلی ‪ CVs 6-23٪‬در محدوده ‪ ٪80-39‬با )‪2.5‬‬
‫و دقت )‪ (CV 25-34٪‬اتونیتازپین را نمی توان با دقت قابل قبول‬
‫(‪ )٪20-‬تعیین کرد‪ .‬این مورد بیشتر در بخش " بازی‪yy‬ابی اس‪yy‬تخراج و‬ ‫‪140‬‬
‫ت‪yy‬اثیر ب‪yy‬ر دقت " م‪yy‬ورد بحث ق‪yy‬رار گرفت‪yy‬ه اس‪yy‬ت‪ .‬نت‪yy‬ایج اعتبارس‪yy‬نجی‬
‫اتونیتازپین در جدول ‪ 1‬آمده است اما از نتیجه و بحث زیر حذف شده‬ ‫‪120‬‬
‫‪.‬است‬ ‫)‪EME (µg/L‬‬
‫‪100‬‬
‫منح‪yy‬نی ه‪yy‬ای کالیبراس‪yy‬یون در مح‪yy‬دوده کالیبراس‪yy‬یون ب‪yy‬ا ض‪yy‬رایب‬
‫قاب‪yy‬ل ‪ LLOQ‬خطی بودن‪yy‬د‪ .‬دقت و دقت در ‪ R≤ 0.9954‬همبس‪yy‬تگی‬ ‫‪80‬‬
‫‪٪،‬درون روز ≤ ‪٪). CV 11‬سوگیری ‪ (CV ≤ 16٪، 16 ±‬قبول بود‬
‫بین روز ≤ ‪ ٪12‬و س‪yyy‬وگیری در ‪ ٪11 ±‬ب‪yyy‬ود ک‪yyy‬ه همچ‪yyy‬نین ‪CV‬‬ ‫‪60‬‬
‫رض‪yyy‬ایت بخش در نظ‪yyy‬ر گرفت‪yyy‬ه ش‪yyy‬د‪ .‬نمونه‌ه‪yyy‬ای کن‪yyy‬ترل خ‪yyy‬ارجی‬
‫در مح‪yy‬دوده ‪ Z -1.5‬بوپرنورفین‪ ،‬کدئین‪ ،‬متادون و مورفین با امتی‪yy‬از‬ ‫‪40‬‬
‫کمی سازی شدند و )‪ (| Z | ≤ 2.0‬که در حد نیاز بود ‪1.5 ≤ Z ≤ 1.7،‬‬
‫‪20‬‬
‫‪.‬دقت خوبی را نشان داد‬
‫برای همه آنالیت ها )‪٪ (CV ≤ 4٪‬اثرات ماتریکس از ‪ 93‬تا ‪133‬‬ ‫‪0‬‬
‫)‪٪ (CV ≤ 4٪‬به جز بوپرنورفین‪ ،‬که اثرات ماتریسی ‪ ٪212‬و ‪180‬‬ ‫‪0‬‬ ‫‪20‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪80‬‬ ‫‪100‬‬ ‫‪120‬‬ ‫‪140‬‬
‫در غلظت های کم و باال داشت‪ ،‬در بازه زمانی ب‪y‬ود‪ .‬اث‪y‬رات م‪y‬اتریس‬ ‫)‪LLE (µg/L‬‬
‫برای همه آنالیت زمانی که با استانداردهای )‪105-88٪ (CV ≤ 4٪‬‬
‫داخلی اصالح شد‪ .‬در یک آزمایش اضافی با اس‪yy‬تفاده از ی‪yy‬ک محل‪yy‬ول‬ ‫و ‪ EME-UHPLC-MS/MS‬بین ‪ Bablok‬شکل ‪ 5‬عبور و رگرسیون‬
‫مرجع (گیرنده منظم‪ ،‬معادله ‪ ) 2‬با قطره ای از حالل غشایی‪ ،‬اثرات‬ ‫ا )‪ %95 (CI‬فاصله اطمینان( بود ‪ Y -1.00‬مقطع ‪LLE-UHPLC-MS/MS.‬‬
‫بود‪ ،‬که )‪٪ (CV ≤ 4٪‬ماتریس محاسبه شده بوپرنورفین ‪103-100‬‬ ‫‪ (95% CI [0.9722،‬و ش‪yy‬یب ‪ 1.00‬ب‪yy‬ود ‪)،‬ز [‪]0.1389 ،1.0000-‬‬
‫نش‪yy‬ان می ده‪yy‬د ک‪yy‬ه اف‪yy‬زایش س‪yy‬یگنال آش‪yy‬کار پی‪yy‬دا ش‪yy‬ده اس‪yy‬ت‪ .‬در‬ ‫‪.‬ضریب همبستگی رتبه اسپیرمن ‪ )٪95( 0.998‬بود ‪1.000]).‬‬
‫اعتبارسنجی به احتمال زیاد ب‪y‬ه وج‪y‬ود حالل غش‪y‬ایی م‪y‬ایع در گیرن‪y‬ده‬ ‫)]‪CI [0.996، 0.999‬‬
‫‪.‬نسبت داده شد‬ ‫بازی‪yy‬ابی آن‪yy‬الیت ه‪yy‬ای چ‪yy‬ربی دوس‪yy‬ت (ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان مث‪yy‬ال بوپرن‪yy‬ورفین‪،‬‬
‫آنالیت‌ه‪yyy‬ا در عص‪yyy‬اره‌ها روی نم‪yyy‬ونه‌بر خودک‪yyy‬ار (‪ 10‬درج‪yyy‬ه‬ ‫فنتانیل‪ ،‬سیکلوپروپیل فنتانیل‪ ،‬اتونیتازپین و متادون) با تغی‪yy‬یرات کمی‬
‫س‪yy‬انتی‌گراد) ح‪yy‬داقل ب‪yy‬ه م‪yy‬دت هفت روز پای‪yy‬دار بودن‪yy‬د‪ .‬حم‪yy‬ل پس از‬ ‫باالتر در مقایسه با سایر آنالیت های موجود در روش و در مقایسه ب‪y‬ا‬
‫تزریق یک نمونه پنج برابر غلظت باالترین کالیبراتور قابل قبول بود‬ ‫قبال [ ‪ ] 27‬هم‪yy‬راه ب‪yy‬ود‪ NPOE .‬آنالیت های مشابه استخراج شده ب‪yy‬ا‬
‫با این حال‪ ،‬اگر نمونه برداری در مدت کوتاهی ‪(≤ 20% LLOQ).‬‬ ‫آنالیت های چربی دوست در نهایت نسبت به مواد افی‪y‬ونی ه‪y‬دف ب‪y‬اقی‬
‫‪ OF‬پس از مص‪yy‬رف انج‪yy‬ام ش‪yy‬ود‪ ،‬ممکن اس‪yy‬ت گ‪yy‬اهی اوق‪yy‬ات غلظت‬ ‫مانده نیاز به اصالح بیشتری با اس‪yy‬تانداردهای داخلی دارن‪y‬د‪ .‬داده‌ه‪y‬ای‬
‫بوپرنورفین بسیار بیشتر باشد ‪ ،‬و این باید در ی‪yy‬ک محی‪yy‬ط معم‪yy‬ول در‬ ‫اعتبارسنجی برای بوپرن‪y‬ورفین‪ ،‬فنتانی‪y‬ل و مت‪y‬ادون‪ ،‬ک‪y‬ه همگی دارای‬
‫‪.‬نظر گرفته شود‬ ‫آنالوگ‌های دوتره‌شده برای ج‪yy‬بران تن‪yy‬وع بودن‪yy‬د‪ ،‬رض‪yy‬ایت‌بخش ب‪yy‬ود‪.‬‬
‫با توجه به داده های کمی‪ ،‬بازیابی از سواب جمع کننده در دستگاه‬ ‫برای سیکلوپروپیل فنتانیل و اتونیتازپین‪ ،‬هیچ استاندارد دوتره ای در‬
‫جمع آوری کوانتیسال ارزیابی نشد‪ .‬مطالعات قبلی نش‪yy‬ان داده ان‪yy‬د ک‪yy‬ه‬ ‫استفاده شد‪ .‬داده های اعتبارسنجی با الزامات ‪-d3‬دسترس نبود و متادون‬
‫بازیابی از دستگاه جمع آوری برای م‪y‬واد افی‪y‬ونی زی‪y‬اد اس‪y‬ت [ ‪، 51‬‬ ‫دستورالعمل برای سیکلوپروپیل فنتانیل مطابقت داشت‪ ،‬در ح‪yy‬الی ک‪yy‬ه‬
‫‪] 52.‬‬ ‫اتونیت‪yy‬ازپین از نظ‪yy‬ر خطی ب‪yy‬ودن و دقت رنج می ب‪yy‬رد و احتم‪yy‬اًال از‬
‫‪.‬داشتن یک استاندارد داخلی اختصاصی سود می برد‬

‫‪13‬‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع خوراکی‬ ‫‪5333‬‬

‫کاربرد و مقایسه با روش روتین‬ ‫اطالعات تکمیلی نسخه آنالین حاوی مطالب تکمیلی است که در‬
‫‪. org/ 10. 1007 /s00216- 023- 04807-3 .‬موجود است ‪https://doi‬‬
‫= ‪ ( n‬کدئین ‪ ( n = 13)،‬نمونه‌های مثبت ناشناس برای بوپرنورفین‬
‫از )‪ ( n = 9‬و متادون )‪ ( n = 2‬مورفین ‪ ( n = 3)،‬کتوبمیدون ‪4)،‬‬ ‫;‪ Tonje Gottenberg Skaalvik, conceptualization‬مشارکت نویسندگان‬
‫‪ EME‬ی‪yy‬ک روش غرب‪yy‬الگری معم‪yy‬ول ب‪yy‬رای نش‪yy‬ان دادن در مع‪yy‬رض‬ ‫تحقی‪yy‬ق و بررس‪yy‬ی؛ نوش‪yy‬تن‪ ،‬پیش ن‪yy‬ویس اص‪yy‬لی؛ نوش‪yy‬تن‪ ،‬بررس‪yy‬ی و‬
‫ق‪yyy‬رار گرفتن‪yyy‬د‪ .‬ق‪yyy‬ابلیت ک‪yyy‬اربرد روش آم‪yyy‬اده س‪yyy‬ازی نمون‪yyy‬ه روش‬ ‫‪.‬وی‪yy‬رایش؛ و تجس‪yy‬م؛ چن ژو‪ ،‬تحقی‪yy‬ق و نوش‪yy‬تن‪ ،‬بررس‪yy‬ی و وی‪yy‬رایش‬
‫مفهوم سازی و نگارش‪ ،‬بررسی و ویرایش‪Elisabeth Leere Øistad، .‬‬
‫‪.‬تبخیر و بازسازی بود ‪ LLE،‬غربالگری معمول شامل‬
‫مط‪yy‬ابقت بین روش ه‪yy‬ا در ‪ ± 15‬درص‪yy‬د ب‪yy‬رای ‪ 32‬از ‪ 33‬جفت‬ ‫سولفرد هگستاد‪ ،‬مفهوم سازی و نگارش‪ ،‬بررس‪yy‬ی و وی‪yy‬رایش‪ .‬راج‪yy‬ر‬
‫مفه‪y‬وم ‪. Stig PedersenBjergaard،‬ترونز‪ ،‬نوشتن‪ ،‬بررسی و وی‪y‬رایش‬
‫غلظت بود‪ .‬یک نمونه کدئین ‪ 23‬درصد انحراف داشت که قابل قب‪yy‬ول‬
‫‪.‬سازی و نگارش‪ ،‬بررسی و ویرایش‬
‫در نظر گرفته شد‪ .‬خ‪yy‬ط رگرس‪yy‬یون عب‪yy‬ور و ب‪yy‬ابلوک (ش‪yy‬کل ‪ ) 5‬بین‬
‫بود‪ .‬فاصله اطمینان ‪ LLE [EME] = 1[LLE] - 1 %95‬و ‪EME‬‬ ‫تامین مالی بودجه دسترسی آزاد ارائه شده توسط کتابخانه سلطنتی‪،‬‬
‫شیب ([‪ )]1.00 ,0.97‬و قطع ([‪ )] )0.14 ,1.00-‬به ترتیب ح‪yy‬اوی‬ ‫‪ (NFR‬کتابخانه دانشگاه کپنهاگ این کار توسط شورای تحقیقات ن‪yy‬روژ‬
‫یک و صفر بود که به معنای هیچ تفاوت سیستماتیک ی‪yy‬ا متناس‪yy‬بی بین‬ ‫‪.‬پشتیبانی شده است )‪310086‬‬
‫‪.‬روش ها نیست‬
‫شامل مراحل کمتری با کاهش ‪ LLE، EME‬در مقایسه با پروتکل‬ ‫اعالمیه ها‬
‫را ب‪y‬ا توج‪yy‬ه ب‪y‬ه اص‪yy‬ول ‪ EME‬قابل توجه مصرف حالل آلی بود‪ ،‬ک‪yy‬ه‬
‫تایید اخالقی داوطلبان سالم در بخش فارماکولوژی بالینی در‬
‫شیمی تحلیلی سبز مطلوب‌تر کرد [ ‪ .] 54 ، 53‬ما اخیرًا این را در‬
‫بیمارستان دانشگاه سنت اوالو (تروندهایم) به کار گرفته شدند و م‪yy‬ایع‬
‫رس‪yy‬انا و ی‪yy‬ک ‪ EME‬کار دیگری با مقایس‪yy‬ه امتیازه‪yy‬ای س‪yy‬بزی وی‪yy‬ال‬ ‫خ‪yy‬وراکی را ب‪yy‬رای اس‪yy‬تفاده در مطالع‪yy‬ه ب‪yy‬ه ص‪yy‬ورت ناش‪yy‬ناس پس از‬
‫نشان دادیم [ ‪ OF 38‬مشابه با روش معمول غربالگری ‪ LLE‬روش‬ ‫رضایت آگاهانه شفاهی اهدا کردند‪ .‬چنین مطالعاتی‪ ،‬مطابق ب‪yy‬ا ق‪yy‬وانین‬
‫‪].‬‬ ‫ن‪yy‬روژ‪ ،‬توس‪yy‬ط کمیت‪yy‬ه منطقه‌ای اخالق تحقی‪yy‬ق ارزی‪yy‬ابی می‌ش‪yy‬وند ک‪yy‬ه‬
‫‪.‬مشمول درخواست نیستند‬
‫نتیجه‬ ‫‪ Extraction‬منافع رقابتی‪ ،‬نویسنده همکار راجر ترونز در شرکت‬
‫‪Technologies‬‬ ‫را در ‪ EME‬نروژ ک‪yy‬ار می کن‪yy‬د و این ش‪yy‬رکت فن‪yy‬اوری‬
‫در مقاله حاضر‪ ،‬مواد افیونی انتخاب شده ب‪yy‬ا م‪yy‬وفقیت از نمون‪yy‬ه ه‪yy‬ای‬ ‫جهت تجاری سازی توسعه می دهد‪ .‬هم‪yy‬ه نویس‪yy‬ندگان دیگ‪yy‬ر اعالم می‬
‫هم‌زم‪yy‬ان ‪. EME‬اس‪yy‬تخراج ش‪yy‬د ‪ EME‬با استفاده از ویال رسانا ‪OF‬‬ ‫‪.‬کنند که هیچ منافع مالی یا غیر مالی رقیب شناخته شده ای ندارند‬
‫یک چالش است‪ ،‬زی‪yy‬را پنجره‌ه‪yy‬ای ‪ log P‬آنالیت‌ها در محدوده وسیع‬
‫استخراج باریک بس‪y‬یاری از غش‪y‬اهای م‪y‬ایع ب‪y‬اعث تم‪y‬ایز آنالیت‌ه‪y‬ای‬
‫‪ Creative Commons‬دسترسی آزاد این مقاله دارای مجوز بین المللی‬
‫چربی دوس‪y‬ت ی‪y‬ا آبدوس‪y‬ت می‌ش‪y‬وند‪ .‬ب‪y‬ا اف‪y‬زودن ‪-6‬متی‪y‬ل کوم‪y‬ارین و‬ ‫‪Attribution 4.0‬‬ ‫اس‪yy‬ت ک‪yy‬ه اج‪yy‬ازه اس‪yy‬تفاده‪ ،‬اش‪yy‬تراک گ‪yy‬ذاری‪ ،‬اقتب‪y‬اس‪،‬‬
‫تیمول به ‪-2‬نیتروفنیل اکتیل اتر‪ ،‬پنجره استخراج کمی به س‪yy‬مت م‪yy‬واد‬ ‫توزیع و تکثیر را در هر رسانه یا قالبی می دهد‪ ،‬تا زمانی که اعتب‪yy‬ار‬
‫قطبی تر تغییر کرد و این امکان اس‪yy‬تخراج همزم‪yy‬ان هم‪yy‬ه اپیوئی‪yy‬دهای‬ ‫مناسب را به نویسنده(ه‪y‬ای) اص‪yy‬لی و منب‪y‬ع بدهی‪y‬د‪ .‬پیون‪y‬دی ب‪y‬ه مج‪yy‬وز‬
‫‪.‬هدف را فراهم کرد‬ ‫ارائه دهید و نشان دهید که آیا تغییراتی ایجاد شده ‪Creative Commons‬‬
‫ت‪yy‬رکیب ش‪yy‬د‪ ،‬داده ه‪yy‬ای ‪ UHPLC-MS/MS‬ب‪yy‬ا ‪ EME‬هنگ‪yy‬امی ک‪yy‬ه‬ ‫است یا خیر‪ .‬تصاویر یا س‪yy‬ایر مط‪yy‬الب ش‪yy‬خص ث‪yy‬الث در این مقال‪yy‬ه در‬
‫اعتبارسنجی در دستورالعمل های توصیه شده برای ‪ 12‬م‪yy‬ورد از ‪13‬‬ ‫مقاله گنجانده شده است‪ ،‬مگر اینکه در خط ‪ Creative Commons‬مجوز‬
‫مخدر هدف ق‪y‬رار داش‪y‬ت‪ .‬ب‪y‬ه ط‪y‬ور کلی‪ ،‬آن‪y‬الیت ه‪y‬ای چ‪y‬ربی دوس‪y‬ت‬ ‫اعتباری مطالب به گونه دیگری ذکر شده باشد‪ .‬اگر مطالب در مج‪yy‬وز‬
‫بیشتر مستعد تنوع باالتر از آنالیت های باقی مانده بودند‪ .‬با این ح‪yy‬ال‪،‬‬ ‫مقاله گنجانده نشده است و استفاده مورد نظر شما ‪Creative Commons‬‬
‫نتایج کمی در هنگام اعمال استانداردهای داخلی مناسب رضایت‌بخش‬ ‫توسط مقررات قانونی مجاز نیست یا از استفاده مجاز فراتر می رود‪،‬‬
‫بود‪ .‬نمونه‌های کنترل خارجی حاوی مواد افیونی آبدوس‪yy‬ت (م‪yy‬ورفین‪،‬‬ ‫باید مستقیمًا از دارنده حق چ‪yy‬اپ مج‪yy‬وز دری‪yy‬افت کنی‪yy‬د‪ .‬ب‪yy‬رای مش‪yy‬اهده‬
‫‪ z‬کدئین) و مواد افیونی لیپوفیل (بوپرنورفین‪ ،‬مت‪yy‬ادون) دارای امتی‪yy‬از‬ ‫‪. org/‬مراجعه کنید ‪ http://creat iveco mmons‬یک کپی از این مجوز‪ ،‬به‬
‫‪License ses/ by/4. 0 / .‬‬
‫عالوه ب‪yy‬ر این‪ ،‬داده‌ه‪yy‬ای کمی ‪ (| Z | ≤ 2.0).‬رض‪yy‬ایت‌بخش بودن‪yy‬د‬
‫منابع‬
‫معتبر مطابق با یک روش معم‪yy‬ول مرج‪yy‬ع ب‪yy‬ود ک‪yy‬ه از ‪ OF‬نمونه‌های‬
‫آماده‌سازی نمونه معمولی استفاده می‌ک‪yy‬رد‪ .‬بن‪yy‬ابراین‪ ،‬داده ه‪yy‬ای ارائ‪yy‬ه‬ ‫‪1.‬‬ ‫‪Blanckaert P، Cannaert A، Van Uytfanghe K، Hulpia F،‬‬
‫را نش‪yy‬ان می ده‪yy‬د‪ ،‬ک‪yy‬ه می توان‪yy‬د ‪ EME‬ش‪yy‬ده ک‪yy‬اربرد وی‪yy‬ال رس‪yy‬انا‬ ‫‪Deconinck E، Van Calenbergh S،‬‬ ‫و همک‪yy‬اران‪ .‬گزارش‪yy‬ی در‬
‫جایگزین سبزتری برای آماده سازی نمونه معمولی در آینده باشد‪ .‬در‬ ‫بنزیمیدازول ‪ NPS‬مورد یک کالس نوظهور جدید از مواد افیونی‬
‫نهایت‪ ،‬نتایج تحقیق در مورد محدوده کاربرد و خصوصیات غشاهای‬ ‫بس‪yy‬یار ق‪yy‬وی‪ :‬خصوص‪yy‬یات عملک‪yy‬ردی ش‪yy‬یمیایی و آزمایش‪yy‬گاهی‬
‫را تحری‪yy‬ک می‌کن‪yy‬د‪ ،‬ک‪yy‬ه ب‪yy‬رای توس‪yy‬عه‌دهندگان روش ‪ EME‬مایع در‬ ‫‪; https://doi. org/ 10.‬ایزوتونیت‪yy‬ازن‪ .‬تس‪yy‬ت دارو مقع‪yy‬دی‪2020 .‬‬
‫‪1002/ dta. 2738 .‬‬
‫‪.‬آینده مفید خواهد بود‬

‫‪13‬‬
‫‪5334‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫‪2.‬‬ ‫مرکز نظ‪yy‬ارت اروپ‪yy‬ا ب‪yy‬ر م‪yy‬واد مخ‪yy‬در و اعتی‪yy‬اد ب‪yy‬ه م‪yy‬واد مخ‪yy‬در‪.‬‬ ‫‪15.‬‬ ‫ف‪yy‬روغ م‪ ،‬فره‪yy‬ادی ک‪ ،‬ایش‪yy‬ی ع‪ ،‬م‪yy‬والیی ر‪ ،‬خلیلی ح‪ ،.‬ک‪yy‬وزه‬
‫گ‪yy‬زارش م‪yy‬واد مخ‪yy‬در اروپ‪yy‬ا ‪ :2021‬رون‪yy‬دها و تح‪yy‬والت‪ .‬دف‪yy‬تر‬ ‫گران وی جی‪ ،‬و همکاران‪ .‬استخراج سریع الكتروفورز ب‪yy‬ا فی‪yy‬بر‬
‫‪.‬انتشارات اتحادیه اروپا‪ ،‬لوکزامبورگ ‪2021‬‬ ‫توخالی کامپوزیت نانو هیبریدی با پش‪yy‬تیبانی از م‪yy‬ایع ی‪yy‬ونی و ب‪yy‬ه‬
‫‪3.‬‬ ‫بزاق به عنوان ماده ‪Schipper RG، Silletti E، Vingerhoeds MH.‬‬ ‫دنب‪yy‬ال آن الک‪yy‬تروفورز م‪yy‬ویرگی تزری‪yy‬ق نمون‪yy‬ه تق‪yy‬ویت ش‪yy‬ده ب‪yy‬ه‬
‫‪. Arch‬تحقیقاتی‪ :‬جنبه های بیوش‪yy‬یمیایی‪ ،‬فیزیکوش‪yy‬یمیایی و عملی‬ ‫ص‪yy‬ورت می‪yy‬دانی‪ :‬ی‪yy‬ک رویک‪yy‬رد م‪yy‬وثر ب‪yy‬رای اس‪yy‬تخراج و تع‪yy‬یین‬
‫آرکو رالبیو ‪Oral Biol. 2007; https://doi. org/ 10.1016 /j. .2007‬‬ ‫‪. J Chromatogr A.‬در پالسمای انسانی ‪ Imatinib mesylate‬کمیت‬
‫‪009 .06 .‬‬ ‫‪2017; https://doi. org/10. 1016 /j.chroma. 2017. 08. 017 .‬‬
‫‪4.‬‬ ‫‪Badawi N، Simonsen KW، Steentoft A، Bernhoft IM، Linnet‬‬ ‫‪16. Jamt REG، Gjelstad A، Eibak LEE، Øiestad‬‬ ‫‪EL،‬‬
‫غربالگری و تعیین کمیت همزمان ‪ 29‬داروی س‪y‬وء مص‪y‬رف ‪K.‬‬ ‫‪Christophersen AS، Rasmussen KE،‬‬ ‫و همک‪yy‬اران‪ .‬اس‪yy‬تخراج‬
‫‪ LC-‬در مایع‪y‬ات ده‪y‬انی ب‪y‬ا اس‪y‬تخراج ف‪y‬از جام‪y‬د و ف‪y‬وق عملک‪y‬رد‬ ‫‪. J‬الکتروغش‪yy‬ایی داروه‪yy‬ای مح‪yy‬رک از خ‪yy‬ون کام‪yy‬ل رقی‪yy‬ق نش‪yy‬ده‬
‫‪Chromatogr A. 2012; https://doi.org/ 10.1016 /j. chroma.2011.‬‬
‫‪; https://doi. org/ 10. 1373/ clinc‬کلین ش‪yy‬یمی‪MS/MS. 2009 .‬‬
‫‪08. 058 .‬‬
‫‪hem. 2008. 122341 .‬‬
‫و همکاران‪17. Guo M، Liu S، Wang M، Lv Y، Shi J، Zeng Y، .‬‬
‫‪5.‬‬ ‫‪Concheiro M، Gray TR، Shakleya DM، Huestis MA.‬‬ ‫تجزیه و‬
‫اس‪yyyy‬تخراج الکتروغش‪yyyy‬ایی س‪yyyy‬یرومازین و مالمین ب‪yyyy‬ه کم‪yyyy‬ک‬
‫تحلی‪yy‬ل همزم‪yy‬ان بوپرن‪yy‬ورفین‪ ،‬مت‪yy‬ادون‪ ،‬کوک‪yy‬ائین‪ ،‬م‪yy‬واد افی‪yy‬ونی‪،‬‬
‫س‪yy‬ورفاکتانت‌ها در نمونه‌ه‪yy‬ای آب س‪yy‬طحی‪ ،‬خ‪yy‬اک و خی‪yy‬ار و ب‪yy‬ه‬
‫نیکوتین و متابولیت‌ها در مایع دهان با استفاده از کروماتوگرافی‬
‫‪. J‬دنبال آن الکتروفورز مویرگی با تشخیص رسانایی بدون تماس‬
‫مایع با طیف‌س‪yy‬نجی ج‪yy‬رمی پش‪yy‬ت س‪yy‬ر هم‪ .‬مقع‪yy‬د بیوان‪yy‬ال ش‪yy‬یمی‪.‬‬ ‫‪Sci Food Agric. 2020; https://doi. org/ 10.1002 / jsfa. 10039 .‬‬
‫‪2010; https://doi. org/ 10. 1007/ s00216- 010- 3903-5 .‬‬ ‫‪18.‬‬ ‫نوج‪yy‬وان س‪yy‬حر‪ ،‬رحم‪yy‬انی تس‪yy‬بیح‪ ،‬منص‪yy‬وری س‪ .‬تع‪yy‬یین انتخ‪yy‬ابی‬
‫‪6.‬‬ ‫رقی‪yy‬ق و ش‪yy‬لیک ‪ LC-MS‬ی‪yy‬ک روش ‪Enders JR، McIntire GL.‬‬ ‫در نمونه‌ه‪yy‬ای فاض‪yy‬الب ص‪yy‬نعتی ب‪yy‬ا اس‪yy‬تخراج ری‪yy‬ز )‪ (VI‬ک‪yy‬روم‬
‫برای کمی سازی مواد افیونی در مایع خوراکی‪ .‬جی سم مقع‪yy‬دی‪.‬‬ ‫‪.‬الکترومم‪yy‬بران هم‪yy‬راه ب‪yy‬ا طیف‌س‪yy‬نجی ج‪yy‬ذب اتمی الکتروترم‪yy‬ال‬
‫‪2015; https://doi. org/ 10.1093 / jat/ bkv087 .‬‬ ‫‪; https://doi. org/ 10.1007 /‬آل‪yy‬ودگی ه‪yy‬وا و خ‪yy‬اک‪Wat 2018 .‬‬
‫‪7.‬‬ ‫آزمایش داروی م‪yy‬ایع خ‪yy‬وراکی‪Desrosiers NA، Huestis MA. :‬‬ ‫‪s11270- 018-3744- y .‬‬
‫رویکرده‪yy‬ای تحلیلی‪ ،‬مس‪yy‬ائل و تفس‪yy‬یر نت‪yy‬ایج جی س‪yy‬م مقع‪yy‬دی‪.‬‬ ‫‪19.‬‬ ‫مرتض‪yy‬ی نجاری‪yy‬ان ع‪ SSH، .‬ص‪yy‬فری م‪ ،‬نوج‪yy‬وان س‪ ،‬داورانی‬
‫‪2019; https://doi. org/ 10.1093 / jat/ bkz048 .‬‬ ‫تعیین گون‪yy‬ه ک‪yy‬روم در نمون‪yy‬ه ه‪yy‬ای محیطی ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از سیس‪yy‬تم‬
‫‪8.‬‬ ‫آزمایش مایعات خوراکی برای مواد ‪Bosker WM، Huestis MA.‬‬ ‫استخراج الکتروغشایی دوگانه و به دنبال آن کروماتوگرافی مایع‬
‫‪; https://doi. org/ 10. 1373 /clinc hem.‬مخدر‪ .‬کلین شیمی‪2009 .‬‬ ‫‪ Chim Acta. 2013; https://doi. org/ 10.1016‬با کارایی باال‪ .‬مقعد‬
‫‪2008. 108670 .‬‬ ‫‪ .‬آکا ‪/j. 023 .06 .2013‬‬
‫‪9.‬‬ ‫کراوچ دی جی‪ .‬جمع آوری مایعات ده‪y‬انی‪ :‬متغ‪y‬یر نادی‪y‬ده گرفت‪y‬ه‬ ‫‪20.‬‬ ‫کمانکش محمد‪ ،‬مالحسینی علی‪ ،‬محم‪y‬دی علی‪ ،‬س‪y‬یدی س‪ .‬ه‪y‬اس‬
‫‪. Forensic Sci Int. 2005; https://doi.‬شده در آزمایش مایع دهان‬ ‫در گوشت کب‪y‬ابی‪ :‬تع‪yy‬یین ب‪y‬ا اس‪yy‬تفاده از اس‪yy‬تخراج الکترومم‪yy‬بران‬
‫‪org/ 10. 1016 /j.forsc iint.2005. 02.028 .‬‬ ‫آنالین‪ HPLC .‬تخت پیشرفته آزمایشگاهی روی تراشه هم‪yy‬راه ب‪yy‬ا‬
‫‪10. Wan LB، Lin B، Zhu RQ، Huang CX، Pedersen-Bjergaard S،‬‬ ‫‪; https://doi. org/ 10. 1016/j.‬مواد شیمیایی م‪yy‬واد غ‪yy‬ذایی ‪2020‬‬
‫میکرواستخراج فاز مایع یا استخراج الکترومم‪yy‬بران؟ ‪Shen XT.‬‬
‫‪ .‬سجاف مواد غذایی ‪125876 .2019‬‬
‫‪; https://doi.‬مقعد شیمی‪2019 .‬‬ ‫سجاف ‪org/ 10. 1021 /acs.‬‬
‫‪21.‬‬ ‫اس‪yy‬دی س‪yy‬عادت‪ ،‬ج‪yy‬وان س‪yy‬عادت‪ ،‬بهپ‪yy‬ور محم‪yy‬د‪ ،‬مه‪yy‬دوی ص‪.‬‬
‫‪b009 46 .‬مقعدی ‪9‬‬
‫اس‪yy‬تخراج الکتروغش‪yy‬ایی ب‪yy‬ر پای‪yy‬ه ژل آگ‪yy‬ارز ب‪yy‬رای اس‪yy‬تخراج‬
‫‪11. Gjelstad A، Andersen TM، Rasmussen KE، Pedersen-Bjergaard‬‬
‫‪. J Chromatogr B. 2020; https://doi.‬اسیدهای فنولیک از آب میوه‬
‫‪S.‬‬‫میکرواستخراج در سراسر غشاهای مایع پشتیبانی شده توسط‬ ‫‪org/ 10. 1016 /j. jchromb. 2020. 122401 .‬‬
‫;‪. J Chromatogr A. 2007‬و می‪y‬دان ه‪y‬ای الک‪y‬تریکی ‪ pH‬گرادیان‬ ‫‪22.‬‬ ‫رضازاده محمد‪ ،‬یمینی ی‪ ،‬سیدی س‪yy‬عید‪ ،‬اس‪yy‬رافیلی ع‪ .‬اس‪yy‬تخراج‬
‫‪https://doi.org/ 10.1016 /j.chroma. 2007. 05. 007 .‬‬
‫الکتروغشایی پالسی یک طرفه و دو طرفه ب‪yy‬رای آن‪yy‬الیز ردی‪yy‬ابی‬
‫‪12.‬‬ ‫پدرس‪y‬ن‪-‬بیرگ‪y‬ارد اس‪ ،‬راسموس‪y‬ن کی‪ .‬مه‪y‬اجرت الکتروکین‪y‬تیکی‬
‫‪ Chim‬اس‪yy‬یدهای آمین‪yy‬ه در غ‪yy‬ذاها و نمونه‌ه‪yy‬ای بیول‪yy‬وژیکی‪ .‬مقع‪yy‬د‬
‫در غشاهای مایع مصنوعی مفهوم جدید برای تهی‪yy‬ه نمون‪yy‬ه س‪yy‬ریع‬
‫‪ .‬آکا ‪Acta. 2013; https://doi. org/ 10.1016 /j. 030 .02 .2013‬‬
‫‪ J Chromatogr A. 2006. https:// doi. org/ 10.‬مایعات بیولوژیکی‬
‫‪23.‬‬ ‫‪Drouin N، Kuban P، Rudaz S، Pedersen-Bjergaard S،‬‬
‫‪1016/j. chroma.2006. 01.025 .‬‬
‫‪13. Schüller M، McQuade TA-P، Bergh MS-S، Pedersen-Bjergaard‬‬ ‫‪.‬استخراج الکتروممبران‪ :‬مروری ب‪yy‬ر ده‪yy‬ه گذش‪yy‬ته ‪Schappler J.‬‬
‫‪Trac, Trends Anal Chem. 2019. https:// doi. org/ 10.1016 /j.‬‬
‫‪S، Øistad EL.‬‬ ‫تعیین آنالوگ های تریپت‪yy‬امین در خ‪yy‬ون کام‪yy‬ل ب‪yy‬ا‬
‫‪ .‬ردیابی ‪024 .10 .2018‬‬
‫‪ UHPLC-MS/MS.‬استخراج الکتروممبران ‪ 96‬چاهی و‬
‫ا ‪24. Huang C، Chen Z، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S، Shen X.‬‬
‫‪. https:// doi. org/10.‬تاالنتا اوپن‪2023 .‬‬ ‫تالو ‪1016/j. .2022‬‬
‫;‪. Trac, Trends Anal Chem. 2017‬س‪yy‬تخراج الکترومم‪yy‬بران‬
‫‪100171 .‬‬ ‫‪10.1016/j.trac.2017.07.027.‬‬
‫‪14. Piskackova HB، Kollarova-Brazdova P، Kucera R، Machacek‬‬ ‫‪25. Hansen FA، Petersen NJ، Kutter JP، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫اس‪yy‬تخراج ‪M، Pedersen-Bjergaard S، Sterbova-Kovarikova P.‬‬ ‫‪.‬استخراج الکتروممبران در فرمت های میکروس‪y‬یال‬ ‫‪J Sep Sci.‬‬
‫‪ Chim‬الکتروغشایی ترکیبات دارویی از بافت های حیوانی‪ .‬مقعد‬ ‫‪2022; https://doi. org/ 10.1002 /jssc. 202100603 .‬‬
‫‪Acta. 2021; https://doi. org/10.‬‬ ‫‪1016 / j. aca.2021. 338742 .‬‬

‫‪13‬‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع خوراکی‬ ‫‪5335‬‬

‫‪26. Pedersen-Bjergaard S.‬‬‫استخراج الکتروممبران ‪ -‬نگاهی به آینده‪.‬‬ ‫مایع فوق بحرانی با عملکرد فوق‌العاده ب‪yy‬اال‪ .‬تس‪yy‬ت دارو مقع‪yy‬دی‪.‬‬
‫‪; https://doi. org/ 10. 1007/ s00216-‬مقعد بیوانال شیمی‪2018 .‬‬ ‫‪2023; https://doi. org/ 10.1002 / dta. 3487 .‬‬
‫‪018-1512- x .‬‬ ‫‪39.‬‬ ‫اعتبار سنجی روشهای ‪Peters FT, Drummer OH, Musshoff F.‬‬
‫‪27. Skaalvik TG، Øiestad EL، Trones R، Pedersen-Bjergaard S،‬‬ ‫‪.‬جدید‬
‫‪Hegstad S.‬‬ ‫تعیین داروه‪yy‬ای روانگ‪yy‬ردان در س‪yy‬رم ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از‬ ‫‪Forensic Sci Int. 2007; https://doi. org/ 10. 1016 /j.forsc int. 2006.‬‬
‫‪ UHPLCMS/MS. J‬استخراج الکتروغشایی ویال رسانا هم‪y‬راه ب‪y‬ا‬ ‫‪05. 021‬‬ ‫‪.‬‬
‫‪Chromatogr B. 2021; https://doi. org/ 10. 1016 /j.jchro mb. 2021.‬‬ ‫‪40.‬‬ ‫در م‪yyyy‬ورد ‪ ICH M10‬آژانس دارویی اروپ‪yyyy‬ا دس‪yyyy‬تورالعمل‬
‫‪122926 .‬‬ ‫اعتبارسنجی روش تحلیلی و تجزیه و تحلیل نمونه مطالعه ‪2011‬‬
‫‪28. Domínguez NC، Gjelstad A، Nadal AM، Jensen H، Petersen‬‬ ‫‪ eu/ en/ dokument ents/ scien‬اما اروپا ‪[: https://www.‬موجود از‬
‫‪NJ، Hansen SH،‬‬ ‫و همکاران‪ .‬استخراج انتخابی الکتروممبران‬ ‫‪tific- guide line/ ich- guideline- m10-bioan alyti cal- method-‬‬
‫‪. J Chromatogr‬در ولتاژهای پایین بر اساس قطبیت و بار آنالیت‬ ‫‪validation- step-5_ en.pdf .‬‬
‫‪ .‬کروم‪A. 2012; https://doi. org/ 10.1016 /j. 092 .05 .2012 .‬‬ ‫ی‪yy‬ک روش بیومتری‪yy‬ک جدی‪yy‬د ب‪yy‬رای ‪ H، Bablok W.‬عب‪yy‬ور از ‪41.‬‬
‫‪29.‬‬ ‫اص‪yyy‬غری ن‪yyy‬ژاد ع‪.‬ع‪ .‬ی‪yyy‬ک ‪ SSH،‬طهماس‪yyy‬بی زه‪yyy‬را‪ ،‬داورانی‬ ‫آزم‪yyy‬ایش براب‪yyy‬ری ان‪yyy‬دازه‌گیری‌ها از دو روش تحلیلی مختل‪yyy‬ف‪.‬‬
‫رویک‪yy‬رد کارآم‪yy‬د ب‪yy‬رای اس‪yy‬تخراج انتخ‪yy‬ابی ناپروکس‪yy‬ن از غش‪yy‬ای‬ ‫کاربرد روش های رگرسیون خطی برای مطالعات مقایسه روش‬
‫الکترومغش‪yyy‬ایی ب‪yyy‬ا اس‪yyy‬تفاده از الی‪yyy‬اف توخ‪yyy‬الی تقویت‌ش‪yyy‬ده ب‪yyy‬ا‬ ‫‪. J Clin Chem Clin Biochem. 1983.‬در شیمی بالینی‪ ،‬قسمت اول‬
‫‪https://doi. org/10. 1515 / cclm.1983. 21.11. 709 .‬‬
‫نانولوله‌ه‪yy‬ای کرب‪yy‬نی چن‪yy‬د ج‪yy‬داره‌ای پوشش‌داده‌ش‪yy‬ده ب‪yy‬ا پلیم‪yy‬ر‬
‫استخراج ‪42. Huang C، Seip KF، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫‪. J Chromatogr A. 2016; https://doi. org/ 10. 1016‬مولک‪yy‬ولی‬
‫‪/j.chroma. 09.2016. 067 .‬‬ ‫الکتروغش‪yy‬ایی داروه‪yy‬ای پای‪yy‬ه قط‪yy‬بی از پالس‪yy‬ما ب‪yy‬ا بیس (‪-2‬اتی‪yy‬ل‬
‫‪30. Slampova A، Kuban P، Bocek P.‬‬ ‫تنظیم دقیق گ‪y‬زینش پ‪y‬ذیری‬ ‫هگزیل) فسفیت خالص به عنوان غشای مایع پشتیبانی شده‪ .‬مقعد‬
‫ب‪yy‬ه ‪-crown-6‬استخراج الکترومم‪yy‬بران ب‪yy‬ا اس‪yy‬تفاده از اتره‪yy‬ای ‪18‬‬ ‫آکا ‪Chim Acta. 2016; https://doi. org/ 10. 1016/j. .06 .2016‬‬
‫عن‪yy‬وان اص‪yy‬الح کنن‪yy‬ده غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع پش‪yy‬تیبانی ش‪yy‬ده‪ .‬الک‪yy‬تروفورز‬ ‫‪002 .‬‬
‫‪2014; https://doi. org/ 10. 1002/ elps.20140 0372 .‬‬ ‫‪43.‬‬ ‫اس‪yyy‬تخراج ‪Eie LV، Pedersen-Bjergaard S، Hansen FA.‬‬
‫‪31.‬‬ ‫ک‪yy‬اربرد ی‪yy‬ک ت‪yy‬رکیب ‪Slampova A، Sindelar V، Kuban P.‬‬ ‫‪ J Pharm‬الکتروغش‪yy‬ایی م‪yy‬واد قط‪yy‬بی ‪ -‬وض‪yy‬عیت و دی‪yy‬دگاه ه‪yy‬ا‬
‫‪Biomed Anal. 2022; https://doi. org/ 10. 1016 /j.jpba. 2021.‬‬
‫در غشاهای مایع سفارشی برای ‪ uril،‬ماکروسیکلیک‪ ،‬بامبوس ‪6‬‬
‫‪114407 .‬‬
‫استخراج الکتروغشایی بس‪yy‬یار انتخ‪yy‬ابی آنیون‌ه‪yy‬ای مع‪yy‬دنی‪ .‬مقع‪yy‬د‬ ‫مهاجرت ‪44. Gjelstad A، Rasmussen KE، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫‪Chim Acta. 2017; https://doi. org/ 10. 1016 /j.aca. 2016. 11. 010 .‬‬
‫اثرات الکترولیز بر محلول های عملیاتی در ‪32. Kubáň P، Boček P.‬‬
‫الکتروکینتیکی در غشاهای مایع مص‪yy‬نوعی‪ :‬تنظیم ش‪yy‬یمی غش‪yy‬اء‬
‫‪.‬استخراج الکتروغشایی‪ :‬نقش محلول پذیرن‪y‬ده‬ ‫‪J Chromatogr A.‬‬
‫‪. J Chromatogr A. 2006; https://doi.‬به انواع مختلف مواد دارویی‬
‫‪org/ 10.1016 /j. chroma.2006. 04. 039 .‬‬
‫‪.‬کروم ‪2015; https://doi. org/ 10. 1016/j.‬‬
‫حالل های ‪45. Cunha SC، Fernandes JO.‬‬ ‫تکنیک های استخراج با‬
‫‪2015. 04. 024 .‬‬
‫‪ Trac, Trends Anal Chem. 2018; 10.1016/j.‬یوتکتی‪yy‬ک عمی‪yy‬ق‬
‫‪33. Drouin N، Rudaz S، Schappler J.‬‬ ‫غشای مایع پشتیبانی شده جدید‬ ‫‪trac.2018.05.001.‬‬
‫‪.‬برای استخراج الکتروغشایی متابولیت های درون زا پایه قطبی‬ ‫‪ TK، Martinovic G، Eie LV، Hansen FA، Halvorsen‬چاودار ‪46.‬‬
‫‪J Pharm Biomed Anal. 2018; https://doi. org/ 10. 1016 /j.jpba.‬‬
‫‪2018.06. 029 .‬‬ ‫‪TG، Pedersen-Bjergaard S.‬‬ ‫استخراج الکتروغش‪yy‬ایی پپتی‪yy‬دها ب‪yy‬ا‬
‫استخراج الکترومم‪yy‬بران ‪34. Hansen FA، Pedersen-Bjergaard S. -‬‬ ‫استفاده از حالل ه‪yy‬ای یوتکتی‪yy‬ک عمی‪yy‬ق ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع‪.‬‬
‫‪.‬نگ‪yy‬اهی نزدی‪yy‬ک ب‪yy‬ه غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع‬ ‫;‪Adv Sample Prep. 2022‬‬ ‫آکا ‪ Chim Acta. 2021; https://doi. org/ 10. 1016/j. .2021‬مقعد‬
‫‪https://doi. org/ 10.1016 /j. 100020‬‬
‫‪ .‬سمپره ‪.2022‬‬ ‫‪338717 .‬‬
‫‪35.‬‬ ‫حالل‌های آلی در ‪Huang C، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S.‬‬ ‫‪47.‬‬ ‫عباس‪yy‬ی ح‪ ،‬عباس‪yy‬ی س‪ ،.‬ح‪yy‬ائری س‪ ،.‬رض‪yy‬ایتی س‪ ،.‬کالن‪yy‬تری‬
‫;‪. Rev Anal Chem. 2016‬استخراج الکتروممبران‪ :‬بینش‌های اخیر‬ ‫اس‪yyy‬تخراج الکتروغش‪yyy‬ایی ب‪yyy‬ا اس‪yyy‬تفاده از ‪ MRP.‬ف‪ ،.‬ه‪yyy‬روی‬
‫‪https://doi. org/ 10.1515 /revac- 2016- 0008 .‬‬ ‫حالل‌های یوتکتی‪y‬ک عمی‪y‬ق زیس‪y‬ت تخریب‌پ‪y‬ذیر و ژل آگ‪y‬ارز ب‪y‬ه‬
‫‪36. Seip KF، Faizi M، Vergel C، Gjelstad A، Pedersen-Bjergaard S.‬‬ ‫عن‪yyy‬وان اس‪yyy‬تراتژی‌های ب‪yyy‬دون حالل س‪yyy‬بز و آلی ب‪yyy‬رای تع‪yyy‬یین‬
‫پای‪yy‬داری و ک‪yy‬ارایی غش‪yy‬اهای م‪yy‬ایع پش‪yy‬تیبانی ش‪yy‬ده در اس‪yy‬تخراج‬ ‫داروهای پایه قطبی و غیرقطبی از نمونه‌ه‪yy‬ای بیول‪yy‬وژیکی‪ :‬ی‪yy‬ک‬
‫الکتروممبران ‪ -‬پیون‪y‬دی ب‪y‬ا خ‪y‬واص حالل‪ .‬مقع‪y‬د بیوان‪y‬ال ش‪y‬یمی‪.‬‬ ‫‪ Chim Acta. 2022; https://doi. org/10.‬مطالعه مقایس‪y‬ه‌ای‪ .‬مقع‪yy‬د‬
‫‪2014; https://doi. org/ 10.1007 / s00216- 013- 7418-8 .‬‬ ‫‪1016 / j. aca.2022. 339986 .‬‬
‫‪37.‬‬ ‫شولر ام‪ ،‬پدرسن‪-‬بجرگ‪yy‬ارد اس‪ AO، ،‬ژو سی‪ ،‬دولتشاه اس‪ ،‬هی‬ ‫‪48. Hay AO، Trones R، Herfindal L، Skrede S، Hansen FA.‬‬ ‫تعیین‬
‫غشاهای مایع عمومی برای استخراج الکترومم‪yy‬بران ‪ FA.‬هانسن‬ ‫متوترکسات و متابولیت های آن در پالسمای انس‪yy‬ان ب‪yy‬ا اس‪yy‬تخراج‬
‫‪ Anal Chem. 2023. https://‬بازهای با آب دوس‪y‬تی کم ی‪y‬ا متوس‪y‬ط‬ ‫‪ LC-MS/MS. Adv‬الکترومغشا در ویال های رسانا و به دنبال آن‬
‫‪c010 52 .‬سجاف مقعدی ‪doi. org/ 10.1021 / acs. 3‬‬ ‫سمپره ‪Sample Prep. 2022; https://doi. org/ 10. 1016/j. .2022‬‬
‫‪38.‬‬ ‫‪Skaalvik TG، Øiestad EL، Pedersen-Bjergaard S، Hegstad S.‬‬ ‫‪100011 .‬‬
‫تعیین انانتیومرهای آمفتامین در ادرار با استخراج الکتروغش‪yy‬ایی‬ ‫‪49.‬‬ ‫‪Hansen FA، Santigosa-Murillo E، Ramos-Payan M، Munoz M،‬‬
‫ویال رس‪y‬انا و طیف‌س‪y‬نجی ج‪y‬رمی پش‪y‬ت س‪y‬ر هم کروم‪y‬اتوگرافی‬ ‫استخراج الکتروممبران با ‪Oiestad EL، Pedersen-Bjergaard S.‬‬
‫استفاده از حالل ه‪yy‬ای یوتکتی‪yy‬ک عمی‪yy‬ق ب‪yy‬ه عن‪yy‬وان غش‪yy‬ای م‪yy‬ایع‪.‬‬

‫‪13‬‬
‫‪5336‬‬ ‫و همکاران ‪Skaalvik TG‬‬

‫‪ Chim Acta.‬مقعد‬ ‫‪2021; https://doi. org/ 10. 1016/j.‬‬ ‫آکا ‪.2020‬‬

‫‪044 .11 .‬‬
‫‪50. Strand MC, Ramaekers JG, Gjerde H, Mørland J, Vindenes V.‬‬
‫فارماکوکینتی‪yy‬ک ت‪yy‬ک دوز مت‪yy‬ادون و بوپرن‪yy‬ورفین در خ‪yy‬ون و‬
‫مایع‪yy‬ات خ‪yy‬وراکی در داوطلب‪y‬ان س‪yy‬الم و همبس‪yy‬تگی ب‪y‬ا اث‪y‬رات ب‪y‬ر‬
‫عملکردهای روانی حرکتی و شناختی‪ .‬جی کلین س‪yy‬ایکوفارماکل‪.‬‬
‫‪2019; https://doi. org/ 10. 1097 /jcp. 00000 00000 001077 .‬‬
‫‪51.‬‬ ‫داروهای غیرمج‪y‬از در ‪Cohier C، Megarbane B، Roussel O.‬‬
‫مایع خوراکی‪ :‬ارزیابی دو دستگاه جم‪yy‬ع آوری‪ .‬جی س‪yy‬م مقع‪yy‬دی‪.‬‬
‫‪2017; https://doi. org/ 10.1093 / jat/ bkw100 .‬‬
‫‪52.‬‬ ‫ریختن م‪yy‬واد ‪Tuyay J، Coulter C، Rodrigues W، Moore C.‬‬
‫افی‪yy‬ونی در م‪yy‬ایع ده‪yy‬ان‪ :‬اهمیت کروم‪yy‬اتوگرافی و انتق‪yy‬ال طی‪yy‬ف‬
‫;تس‪yyyyyy‬ت دارو مقع‪yyyyyy‬دی‪ LC-MS/MS. 2012 .‬ج‪yyyyyy‬رمی در‬
‫‪https://doi.org/ 10.1002 / dta.1324 .‬‬
‫تحلیلی ‪53. Gałuszka A, Migaszewski Z, Namieśnik J. 12‬‬ ‫اصل شیمی‬
‫‪. Trac, Trends Anal‬سبز و اهمیت یادگاری شیوه های تحلیلی سبز‬
‫ردیابی ‪Chem. 2013. https://doi. org/ 10.1016 /j. .04 .2013‬‬
‫‪010 .‬‬
‫‪54.‬‬ ‫‪Wojnowski W، Tobiszewski M، Pena-Pereira F، Psillakis E.‬‬
‫‪.‬متریک س‪yy‬بزی تحلیلی ب‪yy‬رای آماده‌س‪yy‬ازی نمون‪yy‬ه ‪AGREEprep -‬‬
‫‪Trac, Trends Anal Chem. 2022. https:// doi. org/ 10. 1016/j.‬‬
‫‪ .‬ردیابی ‪116553 .2022‬‬

‫با توجه به ادعاهای قضایی در نقشه ‪ Springer Nature‬یادداشت ناشر‬

‫‪.‬های منتشر شده و وابستگی های سازمانی بی طرف باقی می ماند‬

‫‪13‬‬
 ‫اطالعات تکمیلی برای‬
‫استخراج الکتروغشایی ویال رسانا از مواد افیونی از مایع دهان‬
‫‪Tonje Gottenberg Skaalvik a,b , Chen Zhou b,c , Roger Trones‬‬ ‫‪d‬‬
‫‪, Elisabeth Leere Øistad‬‬ ‫‪b,e‬‬
‫‪,‬‬
‫‪Solfrid‬‬
‫‪Hegstad a , Stig Pedersen-Bjergaard b,f‬‬
‫گروه ‪ b‬گروه فارماکولوژی بالینی‪ ،‬بیمارستان دانشگاه سنت اوالو‪ ،‬پروفسور بروچس گیت ‪ 7030 ،6‬تروندهایم‬
‫داروسازی‪ ،‬دانشگاه اسلو‪ ،‬صندوق پستی ‪ 1068‬بلیندرن‪ 0316 ،‬اسلو‪ ،‬نروژ‬
‫‪c‬‬
‫‪ ، China d‬دانشکده بهداشت عمومی غرب چین و بیمارستان چهارم چین غربی‪ ،‬دانشگاه سیچوان‪ ،‬چنگدو‪610041 ،‬‬
‫‪Extraction Technologies Norway, Verkstedveien 29, 1424 Ski, Norway‬‬
‫‪e‬‬
‫اسلو ‪ Nydalen، 0424،‬گروه علوم قانونی‪ ،‬بخش پزشکی آزمایشگاهی‪ ،‬بیمارستان دانشگاه اسلو‪ ،‬صندوق پستی ‪4459‬‬
‫نروژ‬
‫‪f‬‬
‫کپنهاگ‪ ،‬دانمارک ‪، Universitetsparken 2، 2100‬گروه داروسازی‪ ،‬دانشکده بهداشت و علوم پزشکی‪ ،‬دانشگاه کپنهاگ‬

‫محتوا‬
‫‪ .............................................................................................................2‬هدف قرار دادن مواد افیونی ‪1‬‬
‫‪ ......................................................................................................................................4‬غلظت ‪2‬‬
‫‪3 UHPLC-MS/MS ....................................................................................................................5‬‬
‫‪ ....................................................................................................................6‬داده های توسعه روش ‪4‬‬
‫‪ ..............................................................................................................6‬تاثیر بر ولتاژ و زمان ‪4.1‬‬
‫‪ .....................................................................................................................7‬جریان استخراج ‪4.2‬‬

‫‪1‬‬ ‫مواد افیونی را هدف قرار دهید‬

‫فهرست شده است‪ .‬خواص با استفاده ‪ S1‬آنالیت های هدف در جدول ) ‪ log D pH=5‬و ‪ (pKa، log P‬ساختار و خواص شیمیایی‬
‫‪ (Chemaxon، 2023-01-24).‬محاسبه شد ‪ chemicalize.com‬از‬
‫مواد افیونی هدف ‪ log D pH=5‬و ‪، log P‬پیش بینی شده (پایه) ‪، pKa‬نام ها‪ ،‬ساختار ‪ S1:‬جدول‬

‫‪1‬‬
2
‫‪2‬‬ ‫غلظت ها‬
‫به تفصیل آمده ‪ S3‬و جدول ‪ S2‬آنالیت های هدف‪ ،‬و غلظت استاندارد داخلی در جدول )‪ (QC‬سطوح کالیبراتور و کنترل کیفیت‬
‫ب••ا ‪ QC‬به غلظت در مایع خوراکی اشاره دارد‪ ،‬در حالی که نمونه های کالیبراتور و ‪ S2‬است‪ .‬غلظت های ارائه شده در جدول‬
‫‪.‬تهیه شدند ‪ Quantisal OF‬رقت ‪ 1:3‬اضافی مربوط به رقت رخ داده در دستگاه جمع آوری‬

‫‪3‬‬
‫است‪ ،‬و نمونه های ‪ OF‬غلظت آنالیت های هدف‪ .‬مقادیر مربوط به غلظت در )‪ (QC‬و کنترل کیفیت )‪ (Std‬کالیبراتور ‪ S2‬جدول‬
‫‪.‬با رقت اضافی (‪ )1:3‬آماده شدند زیرا مایع خوراکی در دستگاه جمع آوری کوانتیسال رقیق می شود ‪ QC‬و ‪Std‬‬

‫آنالیت‬ ‫‪Std1‬‬ ‫‪Std2‬‬ ‫‪Std3‬‬ ‫‪Std4‬‬ ‫‪LLOQ QC1‬‬ ‫‪QC2‬‬ ‫‪QC3‬‬

‫)‪(μg/L‬‬ ‫)‪(μg/L‬‬ ‫)‪(μg/L‬‬ ‫)‪(μg/L‬‬ ‫‪QC‬‬ ‫)‪(μg/L) (μg/L‬‬ ‫)‪(μg/L‬‬
‫)‪(µg/L‬‬
‫مورفین‬ ‫‪3‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪45‬‬ ‫‪150‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4.5‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪120‬‬
‫ج‬
‫اکسی کدون‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫د‬
‫کدئین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫و‬ ‫ل‬
‫ترامادول‪O-DM-‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫اتیل مورفین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫ترامادول‬ ‫‪3‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪45‬‬ ‫‪150‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4.5‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪120‬‬
‫پتیدین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫کتوبمیدون‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫بوپرنورفین‬ ‫‪1‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪40‬‬
‫فنتانیل‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.5‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.15‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪4‬‬
‫سیکلوپروپیلفنتانیل‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.5‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.15‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪4‬‬
‫اتونیتازپین‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.5‬‬ ‫‪1.5‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪0.1‬‬ ‫‪0.15‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪4‬‬
‫متادون‬ ‫‪3‬‬ ‫‪15‬‬ ‫‪45‬‬ ‫‪150‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4.5‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪120‬‬
‫)‪ MeOH/H 2 O 50:50‬تهیه شده در( ‪ IS-working‬غلظت استانداردهای داخلی با برچسب ایزوتوپی در محلول ‪S3:‬‬
‫ترکیب‬ ‫)‪ (μg/L‬غلظت‬
‫‪Morphine-d 3‬‬ ‫‪50‬‬
‫‪Oxycodone-d 6‬‬ ‫‪10‬‬
‫‪Codeine-d 3‬‬ ‫‪10‬‬
‫‪Ethylmorphine-d 5‬‬ ‫‪40‬‬
‫‪Ketobemidone-d 3‬‬ ‫‪10‬‬
‫‪Tramadol-d 6‬‬ ‫‪10‬‬
‫‪-d 3‬بوپرنورفین‬ ‫‪50‬‬
‫فنتانیل‪-‬د ‪5‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪-d 3‬متادون‬ ‫‪5‬‬

‫‪3‬‬ ‫‪UHPLC-MS/MS‬‬
‫آم••ده ‪ S4‬ولتاژ مخروط‪ ،‬انرژی برخورد و زمان نگهداری آن••الیت ه••ای ه••دف و اس••تانداردهای داخلی در ج••دول ‪ MRM،‬انتقال‬
‫‪.‬است‬
‫ولتاژ مخروط‪ ،‬انرژی های برخورد و زمان نگهداری آنالیت های هدف و استانداردهای داخلی‪ * .‬نشان ‪ MRM،‬انتقال ‪ S4:‬جدول‬
‫‪.‬است ‪ MRM‬دهنده کمیت گذار‬
‫ولتاژ‬ ‫‪ RT‬انرژی برخورد‬
‫ترکیب‬ ‫مخروطی )‪ MRM ( m/z‬انتقال‬ ‫)‪(eV‬‬ ‫است‬
‫)دقیقه(‬
‫)‪(V‬‬
‫*‪286 > 201‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬
‫مورفین‬ ‫‪286 > 165‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬
‫‪1.43‬‬ ‫‪Morphine-d 3‬‬
‫* ‪316 > 241‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬
‫اکسی کدون‬ ‫‪316 > 256‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬
‫‪2.64‬‬ ‫‪Oxycodone-d 6‬‬
‫* ‪300 > 215‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬
‫کدئین‬ ‫‪300 > 165‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬
‫‪2.23‬‬ ‫‪Codeine-d 3‬‬

‫ترامادول ‪O-DM‬‬ ‫*‪250 > 58‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪14‬‬ ‫‪2.47‬‬ ‫‪Ketobemidon-d 3‬‬
‫*‪314 > 229‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬
‫اتیل مورفین‬ ‫‪314 > 165‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬
‫‪2.88‬‬ ‫‪Ethylmorphine-d 5‬‬
‫* ‪248 > 230‬‬ ‫‪68‬‬ ‫‪20‬‬
‫کتوبمیدون‬ ‫*‪248 > 70‬‬ ‫‪68‬‬ ‫‪30‬‬
‫‪2.16‬‬ ‫‪Ketobemidon-d 3‬‬

‫‪4‬‬
 ‫*‪248 > 70‬‬ ‫‪90‬‬ ‫‪40‬‬
‫پتیدین‬ ‫‪248 > 174‬‬ ‫‪90‬‬ ‫‪30‬‬
‫‪3.43‬‬ ‫‪Tramadol-d 6‬‬

‫ترامادول‬ ‫*‪264 > 58‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪3.51‬‬ ‫‪Tramadol-d 6‬‬

‫* ‪468 > 396‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪42‬‬
‫بوپرنورفین‬ ‫‪468 > 414‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪36‬‬
‫‪4.33‬‬ ‫‪-d 3‬بوپرنورفین‬
‫*‪337 > 188‬‬ ‫‪54‬‬ ‫‪22‬‬
‫فنتانیل‬ ‫‪337 > 105‬‬ ‫‪54‬‬ ‫‪32‬‬
‫‪3.91‬‬ ‫‪5‬‬ ‫فنتانیل‪-‬د‬
‫*‪349 > 188‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪22‬‬
‫سیکلوپروپیلفنتانیل‬ ‫‪349 > 105‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪40‬‬
‫‪3.96‬‬ ‫‪-d 3‬متادون‬

‫اتونیتازپین‬ ‫*‪395 > 98‬‬ ‫‪26‬‬ ‫‪22‬‬ ‫‪3.85‬‬ ‫‪-d 3‬متادون‬

‫* ‪310 > 223‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪18‬‬
‫متادون‬ ‫‪310 > 105‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪60‬‬
‫‪4.06‬‬ ‫‪-d 3‬متادون‬
‫‪Morphine-d 3‬‬ ‫‪289 > 201‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬ ‫‪1.41‬‬
‫‪Oxycodone-d 6‬‬ ‫‪322 > 247‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬ ‫‪2.60‬‬

‫‪Codeine-d 3‬‬ ‫‪303 > 215‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪24‬‬ ‫‪2.21‬‬

‫‪Ethylmorphine-d 5‬‬ ‫‪319 > 165‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪25‬‬ ‫‪2.85‬‬

‫‪Ketobemidone-d 3‬‬ ‫‪251 > 70‬‬ ‫‪68‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪2.15‬‬

‫‪Tramadol-d 6‬‬ ‫‪270 > 64‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪3.48‬‬

‫‪5‬‬ ‫فنتانیل‪-‬د‬ ‫‪342 > 188‬‬ ‫‪54‬‬ ‫‪22‬‬ ‫‪3.91‬‬

‫‪-d 3‬بوپرنورفین‬ ‫‪471 > 396‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪42‬‬ ‫‪4.33‬‬

‫‪-d 3‬متادون‬ ‫‪313 > 268‬‬ ‫‪24‬‬ ‫‪14‬‬ ‫‪4.05‬‬

‫داده های توسعه روش ‪4‬‬

‫تاثیر بر ولتاژ و زمان ‪4.1‬‬
‫ارائه شده است‪ .‬نمونه شامل ‪ S6‬و ‪ S5‬با ولتاژ و زمان متغیر به ترتیب در جدول ‪ OF‬بازیابی مواد افیونی هدف از نمونه های‬
‫از )‪ (v/v‬بود‪ .‬غشای مایع یک مخلوط ‪% HCOOH 1:2‬و گیرنده ‪% HCOOH، 0.1‬با ‪ (v/v) 0.1‬نمونه رقیق شده ‪1:2‬‬
‫‪ (Thy) (1:2،‬و تیم••ول )‪ (6MC‬و یک حالل یوتکتیک عمیق متش••کل از ‪ 6‬متی••ل کوم••ارین )‪-2 (NPOE‬نیتروفنیل اکتیل اتر‬
‫‪.‬بود )نسبت مولی‬
‫‪ (V).‬با پتانسیل استخراج متفاوت ‪ OF‬مواد افیونی هدف از نمونه های )‪ (CV‬و ضریب واریانس )‪ (RE‬بازیابی استخراج ‪ S5‬جدول‬
‫‪، n = 4.‬دقیقه ‪) + NPOE (1:2، v/v)، t = 20‬نسبت مولی ‪MC: Thy (1:2،‬غشای مایع = ‪6‬‬
‫)‪RE (CV%‬‬
‫آنالیت‬ ‫‪0V‬‬ ‫‪5V‬‬ ‫‪15 V‬‬ ‫ولت ‪30‬‬ ‫ولت ‪50‬‬ ‫‪80 V‬‬
‫مورفین‬ ‫)‪0 (3‬‬ ‫)‪49 (11‬‬ ‫)‪80 (1‬‬ ‫)‪81 (3‬‬ ‫)‪88 (5‬‬ ‫)‪96 (4‬‬
‫اکسی کدون‬ ‫)‪1 (13‬‬ ‫)‪100 (3‬‬ ‫)‪103 (6‬‬ ‫)‪103 (3‬‬ ‫)‪99 (3‬‬ ‫)‪107 (2‬‬
‫کدئین‬ ‫)‪2 (16‬‬ ‫)‪101 (1‬‬ ‫)‪102 (4‬‬ ‫)‪104 (3‬‬ ‫)‪103 (3‬‬ ‫)‪108 (2‬‬
‫ترامادول‪O-DM-‬‬ ‫)‪0 (7‬‬ ‫)‪95 (1‬‬ ‫)‪100 (5‬‬ ‫)‪96 (3‬‬ ‫)‪98 (4‬‬ ‫)‪101 (2‬‬
‫اتیل مورفین‬ ‫)‪3 (48‬‬ ‫)‪100 (2‬‬ ‫)‪105 (2‬‬ ‫)‪100 (4‬‬ ‫)‪101 (4‬‬ ‫)‪106 (3‬‬
‫ترامادول‬ ‫)‪11 (14‬‬ ‫)‪101 (1‬‬ ‫)‪101 (1‬‬ ‫)‪98 (3‬‬ ‫)‪97 (5‬‬ ‫)‪100 (0.5‬‬
‫پتیدین‬ ‫)‪28 (6‬‬ ‫)‪98 (4‬‬ ‫)‪99 (2‬‬ ‫)‪96 (3‬‬ ‫)‪95 (3‬‬ ‫)‪98 (1‬‬
‫کتوبمیدون‬ ‫)‪2 (14‬‬ ‫)‪102 (1‬‬ ‫)‪104 (1‬‬ ‫)‪102 (3‬‬ ‫)‪100 (3‬‬ ‫)‪104 (1‬‬

‫‪5‬‬
 ‫بوپرنورفین‬ ‫)‪33 (16‬‬ ‫)‪84 (9‬‬ ‫)‪89 (4‬‬ ‫)‪87 (7‬‬ ‫)‪87 (7‬‬ ‫)‪87 (6‬‬
‫فنتانیل‬ ‫)‪27 (31‬‬ ‫)‪77 (16‬‬ ‫)‪86 (8‬‬ ‫)‪87 (6‬‬ ‫)‪85 (7‬‬ ‫)‪87 (6‬‬
‫سیکلوپروپیلفنتانیل‬ ‫)‪20 (41‬‬ ‫)‪69 (21‬‬ ‫)‪79 (12‬‬ ‫)‪81 (10‬‬ ‫)‪82 (6‬‬ ‫)‪83 (10‬‬
‫اتونیتازپین‬ ‫)‪14 (55‬‬ ‫)‪48 (29‬‬ ‫)‪59 (19‬‬ ‫)‪58 (20‬‬ ‫)‪58 (10‬‬ ‫)‪67 (15‬‬
‫متادون‬ ‫)‪23 (39‬‬ ‫)‪80 (15‬‬ ‫)‪89 (6‬‬ ‫)‪89 (10‬‬ ‫)‪90 (7‬‬ ‫)‪91 (6‬‬

‫با زمان استخراج متفاوت (دقیقه)‪ OF .‬مواد افیونی هدف از نمونه های )‪ (CV‬و ضریب واریانس )‪ (RE‬بازیابی استخراج ‪ S6‬جدول‬
‫‪) + NPOE (1:2، V/V)، V = 20 V، n = 4‬نسبت مولی ‪MC: Thy (1:2،‬غشای مایع = ‪6‬‬
‫)‪RE (CV%‬‬
‫آنالیت‬ ‫دقیقه ‪2‬‬ ‫دقیقه ‪5‬‬ ‫دقیقه ‪10‬‬ ‫دقیقه ‪15‬‬ ‫دقیقه ‪20‬‬
‫مورفین‬ ‫)‪23 (6‬‬ ‫)‪44 (8‬‬ ‫)‪62 (7‬‬ ‫)‪75 (21‬‬ ‫)‪80 (12‬‬
‫اکسی کدون‬ ‫)‪39 (7‬‬ ‫‪73 (5‬‬ ‫)‪96 (5‬‬ ‫)‪101 (5‬‬ ‫)‪104 (2‬‬
‫کدئین‬ ‫)‪41 (5‬‬ ‫)‪76 (5‬‬ ‫)‪97 (2‬‬ ‫)‪102 (6‬‬ ‫)‪106 (2‬‬
‫ترامادول‪O-DM-‬‬ ‫)‪39 (5‬‬ ‫)‪67 (5‬‬ ‫)‪89 (4‬‬ ‫)‪96 (6‬‬ ‫)‪97 (2‬‬
‫اتیل مورفین‬ ‫)‪42 (5‬‬ ‫)‪76 (5‬‬ ‫)‪97 (4‬‬ ‫)‪102 (2‬‬ ‫)‪99 (1‬‬
‫ترامادول‬ ‫)‪46 (5‬‬ ‫)‪78 (3‬‬ ‫)‪96 (3‬‬ ‫)‪99 (1‬‬ ‫)‪97 (1‬‬
‫پتیدین‬ ‫)‪47 (5‬‬ ‫)‪79 (4‬‬ ‫)‪96 (4‬‬ ‫)‪97 (1‬‬ ‫)‪96 (2‬‬
‫کتوبمیدون‬ ‫)‪43 (5‬‬ ‫)‪78 (7‬‬ ‫)‪99 (4‬‬ ‫)‪101 (3‬‬ ‫)‪100 (2‬‬
‫بوپرنورفین‬ ‫)‪36 (6‬‬ ‫)‪65 (7‬‬ ‫)‪79 (5‬‬ ‫)‪86 (5‬‬ ‫)‪90 (3‬‬
‫فنتانیل‬ ‫)‪38 (10‬‬ ‫)‪66 (7‬‬ ‫)‪79 (14‬‬ ‫)‪83 (6‬‬ ‫)‪93 (5‬‬
‫سیکلوپروپیلفنتانیل‬ ‫)‪35 (11‬‬ ‫)‪59 (7‬‬ ‫)‪71 (20‬‬ ‫)‪79 (9‬‬ ‫)‪89 (6‬‬
‫اتونیتازپین‬ ‫)‪24 (8‬‬ ‫)‪38 (5‬‬ ‫)‪49 (29‬‬ ‫)‪54 (7‬‬ ‫)‪68 (7‬‬
‫متادون‬ ‫)‪42 (8‬‬ ‫)‪70 (5‬‬ ‫)‪80 (18‬‬ ‫)‪88 (3‬‬ ‫)‪98 (5‬‬
‫‪4.2‬‬ ‫جریان استخراج‬
‫جری•ان ثبت ش•ده در اس•تخراج ‪ S1‬جریان استخراج برای ارزیابی یکپارچگی غشای مایع و پای•داری سیس•تم بررس•ی ش•د‪ .‬ش•کل‬
‫به عنوان غشای مایع نشان می ‪ NPOE‬و )نسبت مولی ‪ (v/v) 6MC:Thy (1:2،‬را با استفاده از مخلوط ‪ OF 1:2‬نمونه های‬
‫بود‪ ،‬سیس•تم پای•دار در ‪ EME‬دهد‪ ،‬با اعمال ولتاژ ‪ 0‬تا ‪ 80‬ولت به مدت ‪ 20‬دقیقه‪ . .‬اگر جریان ≤ ‪ 50‬میکروآمپر در هر سلول‬
‫‪.‬نظر گرفته می شد و در طول زمان افزایش نمی یافت‬

‫‪6‬‬
‫‪.‬در استخراج نمونه ها با اعمال ولتاژ ‪ 0‬تا ‪ 80‬ولت به مدت ‪ 20‬دقیقه ‪ EME‬در هر سلول ) ‪ ( I‬جریان ‪ S1:‬شکل‬

‫‪7‬‬