美白中药之水及乙醇提取物对酪氨酸酶抑制功效之比较

唐海谊1 ,何冠邦2 ,周喜林2 (11 澳门理工学院高等卫生学校 ;21 香港中文大学药剂学院)

摘要 : 目的 　鲁府禁方内之八白散为我国有名的美容方剂 ,有着使皮肤白晰的作用 。本研究旨在观察方中个别中药水提物之

活性 ,及探讨使用 80 %乙醇作替代提取媒介之可行性 。方法 　通过酪氨酸酶活性之抑制测试 ,并用曲酸作阳性对照 ,来评价
个别中药水提物之有效程度 。并将抑制作用明显较高的中药用 80 %乙醇提取 ,以和其水提物作一对比 。结果 　白蔹水提物
的抑制作用最高 ,白芷及白及之水提物也有相当高的抑制效果 。但白蔹 、
白芷及白及之 80 %乙醇提物抑制酪氨酸酶效果较
差 ,其 IC50 比水提物之数值大 5. 9～2318 倍左右 。结论 　在提取白蔹 、
白芷及白及作美白用途时 ,在单纯考虑其提取物生物活
性之基础上 ,水比 80 %乙醇为更好的提取媒介 。
关键词 : 美白 ; 中药 ; 酪氨酸酶抑制
中图分类号 :R284 ,R285 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :1001 - 2494 (2005) 05 - 0342 - 02

Comparative studies on tyrosinase inhibitory activities of aqueous and ethanolic extracts of cosmetic whitening
traditional Chinese medicines

TONG Hoi2yee1 , HO Kwun2pong2 , CHOW Hee2lum2 ( 11 School of Health Sciences , Macao Polytechnic Institute , Macao , China ;
21 School of Pharmacy , Chinese University of Hong Kong , HongKong , China)

“Eight White Herbal Powders”documented in“The Secret Formula in Lu’s House”is a well2known cosmetic
ABSTRACT :OBJECTIVE 　
whitening prescription in ancient China1 This study aimed to investigate ( a) the tyrosinase inhibitory activity of the aqueous extracts of individu2
al herbs in this formula and ( b) the feasibility of utilizing 80 % ethanol as an alternative extraction medium for the whitening components of the
herbs1METHODS 　The aqueous extracts of individual herbs were tested for tyrosinase inhibitory effects , using kojic acid as the positive con2
trol1 Comparative activity analysis was done between the aqueous and the 80 % ethanol extracts for three selected herbs1 RESUL TS 　Bailian
showed the highest tyrosinase inhibitory activity , followed by Baizhi and Baiji1 However , compared with the aqueous extracts , the 80 % ethanol
extracts of the three herbs displayed significantly lower tyrosinase inhibitory effects , as evidenced by their substantially larger IC50 values ( by～
519～23 times) 1CONCL USION 　By comparison of the tyrosinase inhibitory activities of the extracts , water appeared to be a better extraction
medium than 80 % ethanol for the whitening constituents in Bailian , Baizhi and Baiji1
KEY WORDS :cosmetic whitening ;traditional Chinese medicine ;tyrosinase inhibition

　　化妆品工业对有效美白成分有很大的需求 , 故 水提物之酪氨酸酶抑制作用 , 选取抑制作用较佳之

国内外均致力从天然草药中提取有效抑制黑色素的 材料 ,再和其相应之 80 %乙醇提物作一酪氨酸酶抑
各类化合物 [1 ] 。我国学者已发现许多中药乙醇提取 制作用比较 。
物均有高度酪氨酸酶抑制作用 , 能阻截皮肤中黑色 1 　材 　料
素之形成 ,从而达致美白效果 [2～3 ] 。唯我国传统上 酪氨 酸 酶 ( tyrosinase , Sigma ) , 酪 氨 酸 ( l2tyro2
以水煎药居多 ,实有必要观察传统水提物与乙醇提 sine : Sigma ) , 曲酸 ( kojic acid , Sigma ) , 磷酸二氢钠
物之分别 。虽然也有研究证实 7 种增白中药之水提 (Merck ,U1S1) ,磷酸氢二钠 (BDH , Germany) , 乙醇 、
物有确实的酪氨酸酶抑制作用 [4 ] ,但就笔者所知 ,暂 正己烷 、 氯仿 、 二甲亚砜均为分析纯 , 所有中药药材
没有报告对此类美白中药之水提物及乙醇提物作一 原材料均在本地中药房采购 , 并由香港中文大学药
系统化比较 。由于鲁府禁方内著名的美白方剂八白 剂学院朱家荣博士鉴定 。
散被记载为不单能使面上皮肤白晰 , 还能治疗和黑 2 　方 　法
色素过多有关的面部疾病 [5 ] , 故此本研究根据八白 211 　中药提取
散内各种主要中药 ( 白及 、 白僵蚕 、白芷 、
杜疾藜 、
升 将 20 g 原药材置于冷水中浸软 30 min 后 ,分别
麻、山柰 、
白蔹 、 白茯苓 、
白附子 ; 白丑及白丁香除外) 用纯水或 80 %乙醇回流提取 90 min 。将药液一律调

作者简介 : 唐海谊 ,博士 ,客座副教授 　　Tel : (853) 3998632 　　Fax : (853) 753159
　　　　　　　　　　　
・342 ・ Chin Pharm J , 2005 March , Vol140 No15 中国药学杂志 2005 年 3 月第 40 卷第 5 期

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配成含原生药 012 g・ mL - 1溶液 ,再经适当稀释后 ,尽 制剂时 ,水比 80 %乙醇更佳 。
快完成酪氨酸酶抑制测试 。 表 1 　9 种中药水提物对酪氨酸酶之 IC50
212 　白蔹及白芷 80 %乙醇提物 Tab 1 　IC50 of tyrosinase in aqueous extracts of nine herbs
中药名称 水提物之 IC50/ mg・
mL - 1
先将乙醇溶液旋转蒸发后加水 , 分别依次用正
白蔹 Ampelopsis japonica (Thunb) Makino 0135
己烷及氯仿作溶剂提取 。其正己烷及氯仿分层再经 山柰 Kaempferia galangal L1 2113
白芷 Angelica dahurica (Fish1 Ex Hoffm1) 3180
旋转蒸发后 ,用少量二甲亚砜溶解后加水 ,并在对照
白及 Bletilla striata (Thunb1) Reichb1f1 3189
组中加入等量二甲亚砜以作控制 。尽快完成对正己 白僵蚕 Bombyx mori Linnaeus 3918
白附子 Typhonium giganteum Engl1 5612
烷分层 、
氯仿分层及剩余水溶物之酪氨酸酶抑制测
白茯苓 Poria cocos (Schw1) Wolf 6318
试。 杜疾藜 Tribulus terrestris L1 10010
Cimicif uga heracleifolia Kan1 > 20010
213 　酪氨酸酶抑制测试 升麻

表 2 　3 种中药水提物及 80 %乙醇提取物对酪氨酸酶 IC50 之

本方法根据文献 [6 ] 记载方法改良而成 。先将
影响
80 μL 5 mmol ・
L - 1 酪氨酸溶液和 80 μL 67 mmol ・ L- 1
Tab 2 　IC50 of tyrosinase in aqueous extracts and 80 % ethanol ex2
磷酸缓冲液 (pH 618) 的中药样本混合 。阳性对照组
tracts of three herbs
为 80 μL 不同浓度的曲酸和 67 mmol ・ L - 1 磷酸缓冲 中药名称 水提物之 IC50/ mg・
mL - 1 80 %乙醇提物之 IC50/ mg・
mL - 1

液 (pH 618) 的混合液 。将以上已混合之溶液先放在 白蔹 0135 8132

白芷 3180 22139
37 ℃培养皿达 10 min 。加入 80 μL 125 U・ mL - 1 之酪 白及 3189 50112
氨酸酶溶液后 ,立即放在已调至 37 ℃之全自动微盘 表 3 　白蔹及白芷 80 %乙醇提物不同溶剂分层对酪氨酸酶
分析仪 (Benchmark Microplate Reader Model 550 : Bio2 IC50 之影响
Rad) ,波长为 490 nm ,在 0 和 20 min 分别读取其吸光 Tab 3 　IC50 of tyrosinase in different solvent fractions of Bailian and
度之数值 。中药样本对酪氨酸酶之抑制百分比可从 Baizhi 80 % ethanol extracts
下列数式得知 : 组别
IC50/ mg・
mL - 1

白蔹 白芷
抑制比率 = [ ( A - B ) - ( C - D ) ]/ ( A - B ) × 80 %乙醇提物 8132 22139
100 % 正己烷分层 70180 > 200100
氯仿分层 100100 79143
A 为未加中药样本在 20 min 的吸光度 ( 490 nm) 剩余水溶物 7194 21138
数值 ;B 为未加中药样本在 0 min 的吸光度 ( 490 nm)
4 　结 　论
数值 ; C 为已加中药样本在 20 min 的吸光度 ( 490
在八白散方剂内的 9 种主要中药的水提物中 ,
nm) 数值 ;D 为已加中药样本在 0 min 的吸光度 ( 490
白蔹有着最高的酪氨酸酶抑制作用 。在提取白蔹 、
nm) 数值 。
白芷及白及作美白用途时 , 在单纯考虑其提取物酪
从文献中查知其他实验室得出的曲酸对酪氨酸
氨酸酶抑制功效之基础上 , 水比 80 %乙醇为更好的
酶之 IC50 [7 ] ,和本实验室所得结果相若 。
提取媒介 。
3 　结果及讨论 参考文献
9 种中药水提物对酪氨酸酶之 IC50 值见表 1 , 从 [1 ] 　 Briganti S , Camera E , Picardo M1 Chemical and instrumental ap2
proached to treat hyperpigmentation [J ] 1 Pigment Cell Res , 2003 ,16 :
中可见白蔹 、 山柰 、
白芷及白及有较高的抑制作用 。 1011
当用 80 %乙醇提取白蔹 、 白芷及白及时 ,全部的 IC50 [ 2 ] 　 雷铁池 ,朱文元 ,夏明玉 , 等 1 中药对黑素生物合成影响研究
I1 82 味中药乙醇提取物对酪氨酸酶活性之抑制作用 [J ] 1 中
值均大幅增加 , 见表 2 。这反映了在以上中药中具 草药 ,1999 ,30 (5) : 3361
抑制酪氨酸酶之有效物质水溶性很强 , 在 80 %乙醇 [ 3 ] 　 王建华 ,雷帆 ,崔景荣 120 种中药对酪氨酸酶抑制作用的研究
[J ] 1 中国药学杂志 ,2000 ,35 (4) : 2321
中溶解度较弱 。为进一步探索其中原因 , 再将白蔹 [4 ] 　 尚靖 ,敖秉臣 ,刘文丽 , 等 1 七种增白中药在体外对酪氨酸酶
及白芷之 80 %乙醇溶液进行分层分析 。白蔹及白 的影响 [J ] 1 中国药学杂志 ,1995 , 30 (11) : 6531
[ 5 ] 　 郑磊 1 中国宫廷秘传美容术 [ M] 1 北京 : 中国建材工业出版
芷二药的不同溶剂分层对酪氨酸酶 IC50 之影响见表 社 ,1993 :241
3 , 从中可见其剩余水溶物的 IC50 基本上和原来的 [ 6 ] 　 Koketsu M , Choi SY, Ishihara H , et al 1 Inhibitory effects of 1 ,32se2
lenazol242one derivatives on mushroom tyrosinase [J ] 1 Chem Pharm
80 %乙醇提物一样 , 正己烷和氯仿并不能有效地将 Bull , 2002 , 50 (12) :15941
具酪氨酸酶抑制作用的成分释出 , 证实 80 %乙醇只 [7 ] 　 Kim YM , Yun J ,Lee CK, et al 1Oxyresveratrol and hydroxystilbene
compounds1 inhibitory effect on tyrosinase and mechanism of action
能释出此 2 药中部分的水溶性酪氨酸酶抑制剂 。也 [J ] 1 J Biol Chem , 2002 ,277 (18) :163401
再次说明了在提取白蔹 、 白芷及白及之酪氨酸酶抑 ( 收稿日期 :2004205221)
　　　　　　　　　　
中国药学杂志 2005 年 3 月第 40 卷第 5 期 Chin Pharm J , 2005 March , Vol 140 No15 ・343 ・

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