การทดสอบปฏิกิริยาทางชีวเคมี Biochemical Test

Triple Sugar Iron TEST

อาหาร : TSIA (Triple Sugar Iron agar ) สี : ส้มแดง
Slant (บริเวณผิวหน้าอาหาร , วุ้นเอียง)

การอ่านผล
1.การหมักย่อยน้าตาลต่างๆ (จะรายงานผลเป็น Slant / Butt)
1.1 ถ้ามีการหมักย่อย น้าตาลกลูโคสได้อย่างเดียว = K/A
Butt (บริเวณก้นหลอด)
Slant (ผิวอาหารวุ้นเอียง) ส้มแดง แดงเข้ม = K (Alkaline)
Butt (อาหารบริเวณก้นหลอด) ส้มแดง เหลือง = A (Acid)
1.2 ถ้ามีการหมักย่อย น้าตาลกลูโคส + น้าตาลแลคโตส หรือ น้าตาลกลูโคส + น้าตาลซูโครส หรือ ทัง 3 ชนิด = A/A
Slant (ผิวอาหารวุ้นเอียง) ส้มแดง เหลือง = A (Acid)
Butt (อาหารบริเวณก้นหลอด) ส้มแดง เหลือง = A (Acid)
1.3 หากแบคทีเรียไม่มีการหมักย่อยน้าตาลชนิดใดๆ เลย อ่านผลได้ 3 แบบ = N/N , K/N และ K/K ** (N = ไม่มีการเปลี่ยนสี ทัง Slant และ Butt)
2. การเกิดก๊าซ จะเห็นฟองก๊าซ หรือรอยแตกในอาหาร = G+ , (ถ้าไม่มีการเกิดก๊าซ = G- )
3. ถ้ามีการสร้างก๊าซไฮโดรเจนซัลไฟด์ (H2S) จะพบตะกอนสีด้าในเนืออาหาร ที่บริเวณก้นหลอด = H2S+ , (ถ้าไม่พบตะกอนสีด้า = H2S- )
 ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล (สี , ตะกอนด้า , ฟองก๊าซ)

A K N

ตะกอนด้า

ฟองก๊าซ
H2S : + G:+
Lysine TEST Slant (บริเวณผิวหน้าอาหาร , วุ้นเอียง) , LDA

อาหาร : LIA (Lysine Iron agar ) สี : ม่วง

การอ่านผล
1.Lysine decarboxylase (LDC) Butt (บริเวณก้นหลอด) , LDC
1.1ถ้าแบคทีเรียสามารถย่อยกลูโคส จนมีสภาพเป็น กรด = ม่วง เหลือง ( - )
1.2ถ้าแบคทีเรียมีเอนไซม์ decarboxylase เชือจะปล่อยคาร์บอนไดออกไซด์ จนมีสภาพเป็น ด่าง = ม่วง หรือ ไม่เปลี่ยนสี ( + )
ผลบวก : อาหารส่วนล่าง หรือ ก้นหลอด (Butt) มีสี ม่วง
ผลลบ : อาหารส่วนล่าง หรือ ก้นหลอด (Butt) มีสี เหลือง

2.Lysine deaminase (LDA)

2.1ถ้าแบคทีเรีย ไม่สามารถ deaminase lysine อาหารไม่เปลี่ยนสี = ม่วง หรือ ไม่เปลี่ยนสี ( - )
2.2ถ้าแบคทีเรีย สามารถ deaminase lysine ได้ จะท้าให้อาหารเปลี่ยนสี = ม่วง แดง ( + )
ผลบวก : ผิวหน้าอาหาร หรือ วุ้นเอียง (Slant) มีสี แดง
ผลลบ : ผิวหน้าอาหาร หรือ วุ้นเอียง (Slant) มีสี ม่วง
3. ถ้ามีการสร้างก๊าซไฮโดรเจนซัลไฟด์ (H2S) จะพบตะกอนสีด้าในเนืออาหาร ที่บริเวณก้นหลอด = H2S+ , (ถ้าไม่พบตะกอนสีด้า = H2S- )
 ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล (สี , ตะกอนด้า)

ฟองก๊าซ

สีม่วง (ไม่เปลี่ยนสี) เปลี่ยนเป็นสีเหลือง

LDC : + LDC : - G: +

ตะกอนด้า
เปลี่ยนเป็นสีแดง (หรือ สีม่วงคล้าขึน) สีม่วง (ไม่เปลี่ยนสี)

LDA : + LDA : - H2S : +

Citrate TEST
อาหาร : SCA (Simmons Citrate agar ) สี : เขียว

การอ่านผล
1.ถ้าเชือแบคทีเรีย สามารถใช้ Citrate ได้ จะเปลี่ยนสีอาหารจาก เขียว น้าเงิน
2.ถ้าเชือแบคทีเรีย ไม่สามารถใช้ Citrate สีอาหารจะไม่เปลี่ยนสี (เขียว)

ผลบวก : สีของอาหารเปลี่ยนเป็น เขียว น้าเงิน , SCA = -

ผลลบ : สีของอาหารไม่เปลี่ยนสี เขียว , SCA = +
 ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล (สี)

เปลี่ยนเป็นสีน้าเงิน เปลี่ยนเป็นสีน้าเงิน (บางส่วน)

SCA : + SCA : +

ไม่เปลี่ยนเป็นสี (เขียว)
SCA : -

SCA : -
Indole and Motile TEST
อาหาร : SIM (SIM Medium ) สี : เหลืองอ่อนๆ
** ชื่ออาหาร SIM มีคุณลักษณะของอาหาร ดังนี
S = ทดสอบการสร้าง Hydrogen Sulfide
I = ทดสอบการปรากฏของ Indole
M = ทดสอบความสามารถในการเคลื่อนที่ของเชือ (Motility)

การอ่านผล
Indole Test
ผลบวก : เมื่อหยดสารละลาย Kovac’s reagent จะพบ วงแหวนสีแดง แสดงว่ามีการเกิด Indole = +
ผลลบ : เมื่อหยดสารละลาย Kovac’s reagent ไม่พบการเปลี่ยนแปลง แสดงว่าไม่มีการเกิด Indole = -
Motile Test
ผลบวก : อาหารรอบๆบริเวณ รอยแทงของ needle มีความขุ่น , รอยแทงแผ่ขยาย Motile = +
ผลลบ : อาหารรอบๆบริเวณ รอยแทงของ needle ไม่ขุ่น หรือ ขุ่นเล็กน้อย , รอยแทงไม่แผ่ขยาย Motile = -
ถ้าพบตะกอนด้า H2S = + , ไม่พบตะกอนด้า H2S = -
 ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล (สี , การเคลื่อนที่ และตะกอนด้า)

พบวงแหวนสีแดง

Indole : + Indole : -

รอยแทงแผ่ขยาย

ตะกอนด้า
รอยแทงไม่แผ่ขยาย อาหารไม่ขุ่น
Motile : + Motile : - , non Motile H2S : +
MR and VP TEST
อาหาร : GPB (Glucose Phosphate Broth) สี : ขาวใสออกเหลืองอ่อนๆ
** ใช้อาหารชนิดเดียวกันในการทดสอบ

การอ่านผล
MR Test
ผลบวก : เมื่อหยดสารละลาย Methyl Red solution จะพบ สีแดง แสดงว่า MR = +
ผลลบ : เมื่อหยดสารละลาย Methyl Red solution จะพบ สีเหลือง แสดงว่า MR = -

VP Test

ผลบวก : เมื่อหยดสารละลาย VP A (α-Naphthol) และ VP B (KOH) จะพบ สีแดง แสดงว่า VP = +

ผลลบ : เมื่อหยดสารละลาย VP A (α-Naphthol) และ VP B (KOH) จะพบ สีเหลือง แสดงว่า VP = -

 ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล

พบสีเหลือง
พบสีแดง
MR : + MR : -

พบสีเหลือง
พบสีแดง
VP : + VP : -
Oxidase TEST
ผลบวก : เมื่อหยดสารละลายทดสอบ Oxidase บนกระดาษกรอง จะพบ สีม่วง แสดงว่า Oxidase = +
ผลลบ : เมื่อหยดสารละลายทดสอบ Oxidase บนกระดาษกรอง ไม่พบการเปลี่ยนแปลง แสดงว่า Oxidase = -

ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล

สารละลายทดสอบ Oxidase

สีของกระดาษกรองเป็น สีม่วง
Oxidase : - Oxidase : +
Catalase TEST
ผลบวก : เมื่อหยดสารละลาย 3% H2O2 บนสไลด์ที่มีเชือ จะพบ ฟองอากาศ แสดงว่า Catalase = +
ผลลบ : เมื่อหยดสารละลาย 3% H2O2 บนสไลด์ที่มีเชือ ถ้าไม่พบ ฟองอากาศ แสดงว่า Catalase = -

ภาพประกอบ แสดงภาพตัวอย่างการอ่านผล

ฟองก๊าซ

สารละลาย 3% H2O2

Catalase : - Catalase : +
 หน่วยชันสูตรโรคสัตว์ คณะสัตวแพทยศาสตร์
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลตะวันออก

คู่มือการอ่านผลและแปลผลการทดสอบปฏิกิริยาชีวเคมี
Biochemical Testing Interpretation Manual

Report By : Date :

Approve By : Date :
 คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลตะวันออก

คู่มือการอ่านผลและแปลผลการทดสอบปฏิกิริยาชีวเคมี
Biochemical Testing Interpretation Manual
(ส้าหรับการเรียนการสอน)

Report By : Date :

Approve By : Date :