5.

1 实验结果与分析

试管 吸光度
1 -0.021
2 0.237
3 0.142
4 1.717
5 0.124
6 0.881
7 0.293
8 0.116

待浓缩样品（低浓度蛋白质溶液）分光度 浓缩后蛋白质溶液分光度
OD280: 0.157 OD280: 0.125
OD260: 0.078 OD260: 0.014
OD280 / OD260 = 2.013 OD280 / OD260 = 8.929

因为样本 OD280/OD260﹥1.5, 用 Lamber-Beer 定律计算：

样本蛋白质含量 (mg/ml) = OD280 / (K×L)，K:克分子消光系数；L:溶液厚度
如实验样品为牛血清白蛋白, K＝0.63(ml/cm.mg), L=1cm

试管 4 蛋白质含量
= 1.717 (OD280 读数最高的洗脱液)/ 0.63
= 2.725 (mg/ml)

待浓缩样品蛋白质含量
= 0.157/0.63
= 0.249 (mg/ml)

浓缩倍数
= 试管 4 浓度/待浓缩样品浓度
= 2.725/0.249
= 10.94 倍
产率
= (样品 4 浓度×2ml)/(待浓缩样品浓度×40ml) *100%
= (2.725*2)/(0.249*40)*100%
= 0.547*100%
= 54.72%

层析技术 原理 应用范围 固定相 流动相

吸附层析 混合物随流动相通过固定相时， 广泛应用于各种天 常用的吸附剂（固定 非极性溶剂
由于吸附剂对不同物质的不同吸 然化合物和微生物 相）为硅胶和氧化铝
附力，而使混合物分离。 发酵产品的分离和
制备
纸层析法 依据极性相似相溶原理，不同物 应用于叶绿体中色 滤纸纤维及其结合水 有机溶剂
质在固定相和流动相中的溶解度 素的分离、化学与
存在差异，随着流动相的迁移， 生物分析实验等各
被分离的物质迁移的距离不同， 个领域
而使混合物分离。
分配层析 各物质在两相中扩散速度不同， 一般用于有机化合 以一种多孔物质吸着 另一种与固
产生不同的分配系数，该技术利 物、金属离子、氨 一种极性溶剂（此极 定相不相溶
用了被分离物质在两相中分配系 基酸等的分析 性溶剂在层析过程中 的非极性溶
数的差别，而使混合物分离。 始终固定在此多孔支 剂（移动溶
持物上） 剂）