Huyết học

Kỹ Thuật Đếm Số Lượng Hồng Cầu

(Bằng kính hiển vi quang học)
1. Nguyên Tắc
Đếm số lượng hồng cầu của máu toàn phần trong một thể tích đã biết trước bằng cách pha
loãng máu với dung dịch đẳng trương đặc biệt trong ống hút pha loãng. Tỷ lệ pha loãng nhất định.
Trộn đều và cho một phần mẫu thử vào buồng đếm của huyết cầu kế.
2. Dụng Cụ Và Hóa Chất
2.1. Dụng cụ
- Dụng cụ lấy máu mao quản hay tĩnh mạch
- Kính hiển vi quang học
- Lam men
Ống Potain
- Buồng đếm
- Ống pha loãng hồng cầu (Potain) có các vạch 0,5; 1; 101, trong bầu có viên bi màu đỏ
2.2. Hóa chất
- Marcano
- NaCl
2.3. Mẫu thử
- Máu tĩnh mạch chống đông bằng EDTA.
3. Quy Trình Kĩ Thuật
- Lấy máu:
 Lắc kĩ ống máu. Nếu lấy máu mao quản phải thấm bỏ giọt máu đầu.
- Pha loãng 1/200 trong ống pha loãng hồng cầu:
 Dùng Potain hút máu lên đúng vạch 0,5. Lau sạch đầu ống hút.
 Đưa đầu Potain vào Marcano, hút từ từ đến vạch 101, vừa hút vừa xoay nhẹ Potain.
 Lắc Potain trong 3 phút bằng cách đập vào bàn tay phải đang cầm Potain giữa ngón cái và
ngón giữa vào bàn tay trái đã nắm lại.
- Đưa máu vào buồng đếm:
 Thấm ướt 2 bờ viền và dán lam men vào buồng đếm khô và sạch.
 Mẫu thử sau khi trộn đều, bỏ đi 3 - 4 giọt đầu, lau khô đầu Potain. Cho hỗn dịch lan tỏa
vào đầy buồng đếm nhưng không được tràn ra ngoài, để yên trong 2 phút.
- Đếm hồng cầu:
 Dùng vật kính x10 để tìm vùng đếm và dùng vật kính x40 để đếm hồng cầu. Cách đếm tùy
thuộc vào buồng đếm sử dụng.
3.1. Buồng đếm Neubauer
- Gồm 9 ô vuông lớn. đếm hồng cầu ở ô vuông lớn trung tâm.
- Ô vuông trung tâm chia làm 25 ô trung bình, đếm hồng cầu trong 5 ô: 4 ô ở 4 góc và 1 ô ở giữa.
- Ô vuông trung bình chia làm 16 ô nhỏ.