Professional Documents
Culture Documents
Xem các cuộc thảo luận, số liệu thống kê và hồ sơ tác giả của ấn phẩm này tại: https://www.researchgate.net/publication/322431465
Một số hoạt chất thực vật và tác dụng chống viêm của nước ép lá Tiliacora triandra
Bài viết trên Tạp chí Nghiên cứu Thực phẩm và Dinh dưỡng · Tháng 1 năm 2018
DOI: 10.12691/jfnr-6-1-6
11 1.588
XEM HỒ SƠ XEM HỒ SƠ
Tất cả nội dung sau trang này được tải lên bởi Donporn Wongwaiwech vào ngày 20 tháng 7 năm 2018
Tạp chí Nghiên cứu Thực phẩm và Dinh dưỡng, 2018, Tập. 6, số 1, 32-38
Có sẵn trực tuyến tại http://pubs.sciepub.com/jfnr/6/1/6
©Nhà xuất bản Khoa học và Giáo dục
DOI:10.12691/jfnr-6-1-6
1
Khoa Công Nông, Khoa Nông nghiệp, Tài nguyên và Môi trường, Đại học Naresuan, Phitsanulok, Viện Khoa học và Công nghệ
Thực phẩm Thái Lan,
2
Đại học Quốc gia Đài Loan, Đài Bắc, Đài Loan
*Tác giả tương ứng: thánganac@nu.ac.th
Tóm tắt Tiliacora triandra (TT), có nguồn gốc từ Đông Nam Á, đã được sử dụng rộng rãi làm thuốc dân gian và trong ẩm thực ở
nhiều khu vực. Mặc dù có rất ít bằng chứng khoa học chứng minh lợi ích sức khỏe của lá TT, nhưng nước ép chiết xuất từ lá TT đã
trở nên phổ biến đối với người tiêu dùng ở mọi tầng lớp kinh tế xã hội. Vì vậy, nghiên cứu này nhằm mục đích đánh giá đặc tính
hóa học thực vật và đặc tính chống viêm của nước ép chiết xuất từ lá TT. Kết quả cho thấy, hàm lượng phenolic tổng số (199,92
mg GAE/g), hàm lượng flavonoid tổng số (29,76 mg RUE/g) và hiệu suất chiết (61,2%) cao nhất của bột nước ép lá TT đông khô được
tìm thấy trong hỗn hợp dung môi của chiết xuất ethanol, nước và axeton. Giá trị bắt gốc tự do DPPH cao nhất (90,95%) của bột
nước ép lá TT đông khô được tìm thấy trong dịch chiết nước nóng. Bằng phân tích HPLC, tổng số hợp chất phenolic trong bột nước
ép lá TT đông khô là 3.938,1 mg/kg. Axit tannic, axit gallic và rutin là hợp chất phenolic chính và nước trái cây là nguồn giàu
hợp chất diệp lục (3.551,6 mg/kg). TT đông khô để lại nước trái cây điều chỉnh giảm việc tạo ra các protein iNOS và COX-2 gây
viêm trong các đại thực bào được kích thích bằng LPS. Kết quả cho thấy rằng việc uống nước ép lá TT, cung cấp nhiều hợp chất
phenolic và diệp lục, có tiềm năng lớn trong việc giảm quá trình viêm.
Từ khóa: hợp chất có hoạt tính sinh học, phản ứng viêm, cyclooxygenase-2, nước trái cây, NO synthase cảm ứng
Trích dẫn bài viết này: Thángana Weerawatanakorn, Kamonwan Rojsuntornkitti, Min-Hsiung Pan, và Donporn Wongwaiwech, “Một số chất
phytochemical và tác dụng chống viêm của nước ép từ lá Tiliacora triandra .”
Tạp chí Nghiên cứu Thực phẩm và Dinh dưỡng, tập. 6, không. 1 (2018): 32-38. doi: 10.12691/jfnr-6-1-6.
từ vùng này sang vùng khác và phổ biến ở phía đông bắc Thái Lan,
nơi loại rau này thường được gọi là Yanang [9]. Bên cạnh việc
1. Giới thiệu được sử dụng trong nhiều món ăn vùng miền, nó còn được sử dụng
như một loại thuốc truyền thống theo dân gian, như hạ sốt, kháng
Một số nghiên cứu đã cung cấp bằng chứng mạnh mẽ rằng chất khuẩn, giải độc và tăng cường miễn dịch.
phytochemical trong rau và trái cây bảo vệ chống lại tác nhân điều biến [10]. Thị trường nước trái cây và đồ uống thảo dược
một số bệnh ung thư [1,2]. Việc sử dụng các hợp chất dinh dưỡng đã phát triển đáng kể trong thời gian gần đây. Với những tuyên bố dân
tự nhiên này để ức chế hoặc ngăn chặn quá trình gây ung thư là một gian và sức khỏe về lợi ích của lá Tiliacora triandra (TT), đồ uống pha
chiến lược quan trọng để phòng ngừa ung thư. sẵn làm từ lá TT đã trở nên phổ biến như đồ uống chức năng được tiêu
Tác dụng phòng ngừa hóa học của các hợp chất ăn kiêng tự nhiên dùng bởi mọi người thuộc mọi tầng lớp kinh tế xã hội. Một báo cáo đã xác
này trong rau và trái cây có liên quan đến nhiều cơ chế khác nhau định được các alkaloid bisbenzylisoquinoline
bao gồm là chất chống oxy hóa, thể hiện hoạt động chống viêm, tạo
ra enzyme giai đoạn II và apoptosis [3]. Do đó, việc ăn thực vật từ gốc TT, bao gồm tiliacorinine, nortiliacorinine,
thường xuyên có chứa chất chống oxy hóa và chống viêm sẽ làm giảm và tiliacorine, vì có hoạt tính chống vi khuẩn chống lại các chủng
nguy cơ phát triển ung thư [4]. Hiện nay người ta đã chấp nhận M. bệnh lao đa kháng thuốc [11].
rằng tình trạng viêm đóng một vai trò quan trọng trong các bệnh Có rất ít thông tin về tác dụng hóa học thực vật và hoạt tính sinh
viêm mãn tính và sự phát triển của bệnh ung thư [5,6]. học của lá TT đối với sức khỏe con người. Rattana và cộng sự. (2010)
báo cáo rằng lá TT có hoạt tính chống oxy hóa [12]. Một nghiên cứu về
Bạch cầu viêm, chẳng hạn như đại thực bào khi được kích hoạt độc tính trên chiết xuất nước của lá TT cho thấy không có độc tính
bởi nhiều kích thích, dẫn đến gây ra phản ứng viêm lên tới 5.000 mg/kg trong một lần dùng duy nhất và không có tác dụng
protein và enzyme bao gồm nitric oxit synthase cảm ứng (iNOS) và phụ nào sau khi dùng thuốc cận mãn tính ở liều 300, 600 và 1.200 mg/
cyclooxygenase-2 (COX-2) [7]. kg [13]. Do đó, mục đích của nghiên cứu này là đánh giá các hợp chất
Do đó, việc ngăn chặn sự tạo ra COX-2 và iNOS là một chiến lược hóa thực vật, bao gồm axit phenolic và hoạt tính chống viêm của nước
quan trọng để ngăn ngừa ung thư bằng hóa chất ở các cơ quan khác ép từ lá TT sử dụng tế bào RAW264.7 gây ra bởi lipopolysacarit (LPS).
2. Vật liệu và phương pháp ở bước sóng 510nm. Tổng hàm lượng flavonoid được biểu thị bằng mg rutin
Được mua từ một nông dân ở phía bắc Thái Lan (tỉnh Phitsanulok), lá 2.7. Xác định hàm lượng chất diệp lục
của loài Tiliacora triandra (TT) được làm sạch bằng nước DI để loại bỏ
Hàm lượng diệp lục a, b và diệp lục tổng số được xác định bằng phương
đất và chất gây ô nhiễm, đồng thời tách ra những lá bị lỗi. Sau khi sấy
pháp quang phổ theo AOAC (1984) và Bahloula (2014)
khô ở nhiệt độ phòng, lá được xử lý với nước 6:100 w/v trong máy xay
(Tefal SM, Loại BL31, Thái Lan) ở tốc độ trung bình trong 3 phút và hỗn
[17]. Tóm lại, bột lá TT đông khô (0,1 g) được thêm vào dung dịch axeton
hợp đã trộn sau đó được lọc. Nước ép lá lọc được đông khô để thu được
85% (20 mL) và hỗn hợp này được đồng nhất hóa trong 3 phút. Sau khi lọc
bột lá TT đông khô và giữ ở -20°C cho đến khi phân tích hóa học.
bằng giấy lọc (Whatman No.1), dung dịch lọc được đưa đến thể tích cuối
cùng là 25 mL. Độ hấp thụ được ghi lại ở bước sóng 660 và 642,5 nm bằng
máy quang phổ UV/Vis (Shimadzu, Nhật Bản). Nồng độ diệp lục tổng số, diệp
lục a và b (ppm) được tính theo các phương trình dưới đây;
Nước nóng (90-95°C), etanol, axeton và hỗn hợp etanol, nước (nhiệt độ
phòng) và axeton theo khẩu phần 60:20:20 v/v/v được sử dụng để so sánh Chất diệp lục =a 9,93A660 0,777A642,5
g) được hòa tan trong các dung môi khác nhau (50 mL) sau khi siêu âm
= +
Tổng diệp lục 7,12 A660 16,8 A642,5.
(GT-1730QTS, 40 kHz, 150 W, Thái Lan) trong 30 phút. Sau khi lọc qua giấy
lọc, dung môi được làm khô bằng thiết bị bay hơi chân không quay (Buchi,
Thụy Sĩ), dịch chiết khô được hòa tan trong metanol đến thể tích cuối 2.8. Phân tích hàm lượng Polyphenol bằng HPLC/DAD/MS
cùng là 25 mL để xác định hàm lượng phenol tổng số, hàm lượng flavonoid
Bột lá TT đông khô (0,1 g) được hòa tan trong etanol 70% (10 mL) và
Quá trình chiết được thực hiện 4 lần và etanol được loại bỏ bằng thiết
Nồng độ phenolic của mẫu được xác định bằng xét nghiệm Folin-Ciocalteu
bị bay hơi chân không quay. Dịch chiết thu được được tạo thành thể tích
[14]. Một lượng mẫu chiết trộn với thuốc thử Folin-Ciocalteu (5 mL) để
cuối cùng là 2 mL bằng etanol.
yên trong 6 phút, sau đó thêm Na2CO3 7,5%
Các dung dịch chuẩn phenolic được chuẩn bị trong etanol [18].
dung dịch (4 ml) đã được thêm vào. Dung dịch hỗn hợp thu được được ủ ở
2.8.2. Điều kiện HPLC/DAD/MS
45°C trong 15 phút. Độ hấp thụ được đo ở bước sóng 760 nm bằng máy quang
phổ UV-VIS (UV 1601, Shimadzu, Nhật Bản) và kết quả được báo cáo là mg Việc phân tích các hợp chất phenolic được thực hiện trên hệ thống
đương lượng axit gallic (GAE) trên g mẫu. HPLC dòng Agilent 1100 (Agilent Technologies, Waldbronn, Đức) được trang
bị đầu dò mảng đi-ốt và máy quang phổ khối bẫy ion MSD SL với giao diện
API-ES. Lượng hợp chất phenolic được xác định bằng cột pha đảo (150 mm x
2.5. Xác định hàm lượng Flavonoid tổng số 4,6 mm x 5 um, LiChroCART RP-18e) (Purospher STAR Merk, Hoa Kỳ) và nhiệt
độ cột được giữ ở 40°C. Pha động là hệ dung môi nhị phân sử dụng nước
được axit hóa với dung dịch đệm amoni formate 10 mM pH4 (dung môi A) và
Tổng hàm lượng flavonoid được đo bằng xét nghiệm so màu nhôm clorua 100% axetonitril (dung môi B), được giữ ở tốc độ dòng 1,0 mL/phút. Chương
[15]. Mẫu chiết được (1 mL) được trộn với 5% natri nitrit (0,2 mL) sau trình rửa giải gradient là 0-5 phút
khi thêm 0,2 mL nhôm clorua 10% và 2 mL natri hydroxit 1 M. Dung dịch
cho 100% A; 5-10 phút đối với 0-20% B; 10-20 phút đối với 20% EDTA; 1 mM Na3VO4 và viên cocktail ức chế protease
B và 20-60 phút đối với 20-40% B. Sắc ký đồ thu được ở bước (Roche, Indianapolis, IN) thành các viên tế bào trong 30 phút,
sóng 270, 330, 350 và 370 nm để phân tích các hợp chất phenolic. sau đó ly tâm (10.000 vòng/phút) ở 4°C trong 30 phút. Sau đó,
Các hợp chất phenolic bao gồm axit phenolic và flavonoid được 50 µg protein được kết hợp với dung dịch đệm mẫu 5x chứa 0,3 M
phân tích ở chế độ ion dương và âm với các cài đặt sau: điện Tris–HCl (pH 6,8), 25% 2-mercaptoetanol, 12% natri dodecyl
áp mao quản -3500 và 4000 V. Áp suất khí máy phun sương N2 sunfat (SDS), 25 mM EDTA, 20% glycerol và 0,1% bromophenol màu
được đặt ở 60 psi và nhiệt độ khô là 320°C. xanh sau khi đun sôi trong 5 phút. Hỗn hợp đã đun sôi được nạp
vào gel mini polyacrylamide 10% SDS ở dòng điện không đổi 20
Phân tích được thực hiện bằng cách quét từ m/z 100 đến 700 ở mA. Protein trên gel được chuyển vào màng PVDF cố định
chế độ cấu hình với kích thước bước là 0,2 [19]. (Millipore Corp., Bedford, MA, USA). Dung dịch chặn được áp
dụng để chặn các màng mà sau đó được làm mờ miễn dịch bằng các
2.9. Xác định khả năng chống viêm kháng thể chính bao gồm iNOS, COX-2 và β-actin (Sự tải nạp
Eagle's Medium của Dulbecco với 10% huyết thanh thai nhi bất hoạt do
2.10. Phân tích thống kê
nhiệt, không chứa nội độc tố (GIBCO, Grand Island, NY, USA), penicillin
(100 đơn vị/mL) và streptomycin (100 µg/mL). Môi trường được loại bỏ và Dữ liệu được biểu thị dưới dạng phương tiện ± độ lệch chuẩn
thay thế bằng môi trường không có đỏ phenol khi tế bào có mật độ 2–
3 x (SD) của ba lần xác định lặp lại và sau đó được phân tích bằng SPSS V.13.
106 tế bào/mL. Các tế bào được ủ trong môi trường chứa LPS (100 ng/mL) Phân tích phương sai một chiều (ANOVA) với thử nghiệm đa phạm vi mới của
và mẫu trong DMSO ở các nồng độ khác nhau được thêm vào. Các tế bào Duncan đã được sử dụng để kiểm tra sự khác biệt của giá trị trung bình.
được xử lý bằng DMSO 0,1% được đặt làm chất kiểm soát phương tiện [20]. Giá trị P <0, 05 được sử dụng làm sự khác biệt đáng kể. Bài kiểm tra t
của học sinh một chiều đã được sử dụng để đánh giá ý nghĩa thống kê giữa
Ảnh hưởng của dịch TT đến khả năng sống sót của tế bào RAW 3. Kết quả và thảo luận
264,7 được phân tích bằng phương pháp 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-
Xét nghiệm yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromua (MTT). NGUYÊN
3.1. Hợp chất phenolic và chất chống oxy hóa
264,7 tế bào được gieo qua đêm vào đĩa 96 giếng (1 × 106/mL)
Hoạt tính của nước ép lá Tiliacora triandra
được xử lý bằng mẫu ở các nồng độ khác nhau. MTT (200 µg/mL)
được thêm vào sau khi ủ ở 37°C trong 3 giờ. Khả năng tồn tại
bằng các dung môi khác nhau
của tế bào được đo bằng cách quét bằng đầu đọc ELISA có bộ lọc
Hầu hết các nghiên cứu đều báo cáo rằng đặc tính bảo vệ
570 nm [21].
chống lại tổn thương oxy hóa của trái cây và rau quả là do các
hợp chất phenolic [23]. Do đó, TPC và TFC của thực vật được
2.9.4. Xét nghiệm nitrit
coi là chỉ số về khả năng chống oxy hóa vì đặc tính oxy hóa
Theo phản ứng Griess, nồng độ nitrit khử của các hợp chất phenolic cho phép chúng thể hiện dưới
đo chỉ số sản xuất oxit nitric (NO) trong môi trường nuôi cấy. dạng chất khử thông qua các chất cho hydro và chất nhặt gốc
Chất nổi phía trên (100 μL) được trộn với thuốc thử Griess (1% [24].
sulfanilamide trong 5% axit photphoric và 0,1% Có một số kỹ thuật chiết xuất để thu hồi chất chống oxy hóa. Tuy
naphthylethylenediamine dihydrochloride trong nước) và độ hấp nhiên, hiệu suất chiết và hoạt tính chống oxy hóa không chỉ phụ thuộc
thụ của hỗn hợp được đo ở bước sóng 550 nm trong xét nghiệm vào phương pháp chiết mà còn phụ thuộc vào dung môi sử dụng để chiết. Do
hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme ( ELISA) (Dynatech đặc tính hóa học khác nhau của các hợp chất chống oxy hóa khác nhau,
MR-7000; Dynatech Labs, Chantilly, VA, USA) [20]. chúng có thể hòa tan hoặc không hòa tan trong một dung môi cụ thể [25].
Ethanol, metanol, axeton, etyl axetat và hỗn hợp của chúng là những dung
môi được sử dụng rộng rãi để thu hồi các chất phytochemical từ nền thực
2.9.5. Phân tích Western Blot
vật.
Các tế bào RAW 264,7 của đại thực bào chuột bị kích thích
được rửa bằng PBS và được lọc trong dung dịch đệm ly giải lạnh Trong số đó, ethanol được chấp nhận là dung môi để chiết xuất
như đá (20 mM Tris–
HCl (pH 7,4)), 10 mM NaF, 137 mM NaCl, 1 mM polyphenol về mặt dung môi an toàn cho con người trong khi
EGTA, 10% glycerol, 1% Triton X-100, 100 µM β-glycerophosphate, axeton là dung môi thích hợp để chiết xuất các flavonoid có
1 mM Na4P2O7; 5 mM trọng lượng phân tử cao hơn như flavanol [26].
Machine Translated by Google
Do đó, chúng tôi đã nghiên cứu ảnh hưởng của quá trình chiết bằng chiết xuất polyphenol từ lá TT; nó cho năng suất chiết xuất thấp nhất,
dung môi đến khả năng thu hồi hàm lượng polyphenol của bột nước ép lá TT hàm lượng phenolic tổng số thấp nhất và hoạt tính loại bỏ DPPH kém hiệu
đông khô. Ethanol và axeton đã được sử dụng để xem hiệu quả của việc quả nhất.
chiết bằng các dung môi đặc biệt này so với nước nóng. Hàm lượng các chất
hóa học thực vật của nước ép lá TT đông khô, bao gồm tổng hàm lượng
3.2. Xác định đặc điểm các hợp chất phenolic của bột nước
phenolic (TPC), tổng hàm lượng flavonoid (TFC) và hoạt tính ức chế gốc
ép lá TT đông khô bằng HPLC/DAD/MS
DPPH được thể hiện trong Bảng 1. Hàm lượng TPC cao nhất trong nước ép
được tìm thấy trong hỗn hợp dung môi gồm ethanol, nước và dịch chiết
axeton (199,92 mg GAE/g bột nước ép lá đông khô) và thấp nhất là dịch
Chúng tôi đã nghiên cứu sâu hơn về các hợp chất phenolic riêng lẻ,
chiết axeton (20,33 mg GAE/g bột nước ép lá đông khô). Kết quả này, đối
bao gồm hàm lượng flavonoid và hàm lượng chất diệp lục, của bột nước ép
với TPC, phù hợp với hiệu suất chiết được cho là cao nhất trong hỗn hợp
lá TT đông khô bằng HPLC. Kết quả được trình bày trong Bảng 2. Thời gian
dung môi và thấp nhất trong axeton. Hiện tượng hiệu suất cao nhất trong lưu của các hợp chất phenolic được thử nghiệm cũng được trình bày trong
trường hợp này có thể là do sự kết hợp giữa dung môi hữu cơ và nước tạo
Bảng 1S (dữ liệu bổ sung). Sắc ký đồ của các hợp chất phenolic đã xác
điều kiện thuận lợi cho việc chiết tất cả các hợp chất hòa tan cả trong
định cho thấy bột nước lá TT đông khô chứa tổng số hợp chất phenolic
nước và dung môi hữu cơ [27]. TFC cao nhất được tìm thấy trong dịch chiết
khoảng 3,938 mg/kg. Axit phenolic, bao gồm axit tannic và axit gallic,
hỗn hợp dung môi (29,76 mg RUE/g), tiếp theo là dịch chiết ethanol (28,85
là hợp chất phenolic chính trong bột nước ép lá, chứa tổng cộng 1.255,4
mg RUE/g) và thấp nhất trong dịch chiết nước nóng (5,64 mg RUE/g). Wang
mg/kg mẫu đông khô. Trong số tất cả 7 chất chuẩn flavonoid được thử
và Helli (2001) cũng báo cáo rằng ethanol cho kết quả tốt hơn so với
nghiệm (xem Vật liệu và Phương pháp), chúng tôi chỉ tìm thấy 4 chất
dung dịch metanol và axeton trong việc chiết xuất flavonoid từ lá trà
flavonoid bao gồm rutin, isoquercetin, catechin và quercetin, trong đó
[28].
rutin là chất chính (1.762,1 mg/kg), tiếp theo là isoquercetin (488,1
cáo các đặc tính chống oxy hóa của hợp chất phenolic [29,30,31] mặc dù
khả năng chống oxy hóa của chúng dựa trên khả dụng sinh học và khả năng
hấp thụ của chúng. Hầu hết các nghiên cứu về đặc tính chống oxy hóa của
hợp chất phenolic đều tập trung vào flavonoid. Flavonoid được phân thành
7 nhóm chính theo cấu trúc hóa học của chúng bao gồm flavanol, flavanone,
Năng suất
TPC TFC DPPH
dung môi khai thác
(TRANG CHỦ/g) (RUE/g) (%)
(%)
Ethanol 15,8±4,2c Nước 83,08±0,79c 28,85±0,07b 77,61±2,34b
Biểu thị bằng g dịch chiết khô trên g bột lá TT đông khô.
là nguồn hợp chất diệp lục phong phú với hàm lượng diệp lục tổng số là
Đối với hoạt tính dập tắt gốc DPPH, chiết xuất nước nóng thể hiện giá 3.551,6 mg/kg. Chất diệp lục a, (xanh lam), (2.421,4 mg/kg
trị bắt gốc DPPH cao nhất (90,95%), tiếp theo là chiết xuất ethanol
(77,61%). mẫu đông khô) là dạng diệp lục chính trong mẫu với diệp lục b (màu vàng–
Hơn nữa, dịch chiết nước nóng chứa hàm lượng TPC cao (126,34 mg GAE/g) xanh) hiện diện với số lượng ít hơn. Bên cạnh hoạt động chống oxy hóa,
và hiệu suất chiết (55,7%). Điều này cho thấy nước ép lá TT có chứa các chất diệp lục tự nhiên và các dẫn xuất của nó còn thể hiện nhiều hoạt
hợp chất phenolic hòa tan, dẫn đến hoạt tính loại bỏ gốc DPPH ở mức độ động sinh học bao gồm hoạt động chống đột biến, điều chỉnh chuyển hóa
cao, như được chỉ ra trong Bảng 1. Kết quả là bằng chứng cho thấy axeton xenobiotic và khởi đầu quá trình apoptosis [35].
Bảng 2. Thành phần phenolic và hàm lượng diệp lục trong dịch lá Tiliacora triandra
Các hợp chất Nội dung Thời gian lưu (phút) của các hợp chất phenolic bằng HPLC/DAD
chất diệp lục
(mg/kg bột nước ép đông khô)
diệp lục a 2.421,4 ± 212,4
Chất diệp lục b 1.132,6 ± 111,7
Tổng diệp lục 3.551,6 ± 323,6
Các hợp chất phenolic
(mg/kg bột nước ép đông khô)
Axit tannic 1.213,0± 144,1 12:90
Axit gallic 42,4 ± 9,0 6,56
Lịch trình 1.762,1 ± 126,9 15,36
lá TT đông khô
100
3.3.1. Ức chế sản xuất Nitrit do LPS gây ra bởi nước ép lá TT trong tế
80
bào RAW 264.7 của đại thực bào
60
Để nghiên cứu đặc tính ức chế viêm của nước ép từ lá TT, chúng tôi đã
thử nghiệm tác động của bột nước ép đông khô lên lượng sản xuất nitrit 40
động
năng
(%)
Khả
di
trong các đại thực bào được kích hoạt LPS (Hình 1). Nồng độ nitrit của
tế bào RAW 264,7 trong môi trường nuôi cấy được kiểm tra sau khi phối 20
hợp xử lý với LPS (100 ng/mL)
0
0 100 200 300 400 500
và nhiều nồng độ nước ép TT đông khô như trong Hình 1. Mẫu ở nồng độ 500
Nồng độ (µg/mL)
µg/mL không ảnh hưởng đến phản ứng giữa thuốc thử nitrit và Griess (dữ
liệu không được hiển thị) và nước ép, ở nồng độ 25–500 µg /mL, ức chế
Hình 2. Ảnh hưởng của bột nước ép lá TT đông khô đến khả năng sống sót của tế bào RAW
đáng kể việc sản xuất nitrit do LPS gây ra theo cách phụ thuộc vào liều 264,7. Tế bào RAW 264,7 được xử lý với các nồng độ mẫu khác nhau trong 24 giờ. Khả năng
lượng. Nước ép lá TT đông khô ức chế việc sản xuất nitrit tối đa khoảng tồn tại của tế bào được xác định bằng xét nghiệm MTT. Tế bào RAW 264,7 được xử lý bằng
56% ở mức 500 µg/mL. Xét nghiệm MTT cũng chỉ ra rằng đặc tính ức chế sản DMSO 0,1% để kiểm soát phương tiện. Dữ liệu được biểu diễn dưới dạng phương tiện ± SE cho
xuất nitrit không độc hại (Hình 2). ba lần xác định
iNOS và COX-2 là các enzyme chủ chốt để sản xuất nitrit, và do đó,
chúng tôi đã nghiên cứu thêm bằng phân tích phương pháp làm mờ phương
Tây, liệu bột nước trái cây TT đông khô có ảnh hưởng đến mức độ protein
iNOS và COX-2 do LPS gây ra hay không. Hình 3 chứng minh rằng protein
Hình 3. Ảnh hưởng của bột nước ép lá TT đông khô đến sự biểu hiện protein iNOS và COX-2 do
iNOS và COX-2 không thể phát hiện được trong tế bào RAW 264.7 chưa được
LPS gây ra trong tế bào RAW 264,7 của đại thực bào.
kích thích. Biểu hiện protein của iNOS và COX-2 tăng rõ rệt sau khi điều Các tế bào được xử lý chỉ với 100 ng/mL LPS hoặc bằng mẫu trong 24 giờ.
trị bằng LPS trong 24 giờ, trong khi việc xử lý đồng thời với mẫu đã ức Tổng dung dịch ly giải tế bào đã được chuẩn bị và nồng độ iNOS và COX-2 trong dung dịch ly
chế mạnh cả mức protein iNOS và COX-2: điều này được chứng minh là phụ giải tế bào được phân tích bằng phương pháp Western blot. β-Actin đã được sử dụng làm chất
có liên quan đến việc điều chỉnh giảm biểu hiện iNOS và COX-2 của nước
ép lá TT. Kết quả này phù hợp với việc giảm nitrit trong môi trường nuôi
cấy được trình bày trong Hình 1. Những dữ liệu này cho thấy các chất
4.Kết luận
phytochemical bao gồm axit phenolic, flavonoid và chất diệp lục trong
Nước ép lá T. triandra chứa nhiều loại chất chống oxy hóa khác nhau
nước ép lá TT có hoạt tính chống viêm.
như hợp chất phenolic và chất diệp lục.
Nước ép lá làm mẫu đông khô có hoạt tính chống oxy hóa cao. Ngoài vai
trò là một chất chống oxy hóa, nước ép trái cây còn có tác dụng ức chế
các chất trung gian gây viêm, tổng hợp oxit nitric cảm ứng và
LPS # Vì các hợp chất phenolic và chất diệp lục chịu trách nhiệm cho hoạt động
25 µg/mL
20 *
50 µg/mL
chống oxy hóa, chống viêm và chống đột biến, tổng hàm lượng phenolic và
* *
100 µg/mL flavonoid có thể được sử dụng để dự đoán khả năng của chiết xuất TT trong
250 µg/mL
15 500 µg/mL
* việc loại bỏ các gốc tự do và làm giảm quá trình viêm. Nước ép lá TT có
*
nhiều tiềm năng phát triển thành thức uống chức năng. Kết quả cho thấy
Nitrit
(µM)
10 rằng việc tăng cường tiêu thụ nước ép TT chiết xuất từ lá dường như sẽ
mang lại lợi ích sức khỏe to lớn cho hầu hết người tiêu dùng vì nó có
chứa các hợp chất phenolic và chất diệp lục và lá T. triandra rẻ và dồi
5
dào.
0
Điều khiển - Vật mẫu
Hình 1. Ảnh hưởng của bột nước ép lá TT đông khô đến khả năng sản xuất nitrit do LPS gây
Sự nhìn nhận
ra. Tế bào RAW 264,7 được tiếp xúc với nồng độ mẫu khác nhau với LPS (100 ng/mL) trong 24
giờ. Vào cuối thời gian ủ, 100 µL môi trường nuôi cấy được thu thập để xét nghiệm nitrit
bằng thuốc thử Griess. (*, P < 0,05 so với chỉ điều trị LPS; #, P < 0,05 so với đối chứng) Các tác giả xin chân thành cảm ơn Đại học Naresuan đã tài trợ cho dự
án với số dự án là R2559C107.
Trung tâm Ngôn ngữ Đại học đã hỗ trợ biên tập và tư vấn [15] Jia, Z., Tang, M. và Wu, J., “Việc xác định hàm lượng flavonoid trong dâu tằm và tác
dụng thu dọn của chúng đối với các gốc superoxide,” Hóa học Thực phẩm, 64(4).
về cách diễn đạt tiếng Anh trong tài liệu này.
555-559. Tháng 3 năm 1999.
[16] Medini, F., Fellah, H., Ksouri, R. và Abdelly, C., “Tổng hàm lượng phenolic, flavonoid
và tannin cũng như các hoạt động chống oxy hóa và kháng khuẩn của chiết xuất hữu
Tuyên bố về lợi ích cạnh tranh cơ từ chồi của cây Limonium delicatulum” Tạp chí Taibah Đại học Khoa học, 8(3).
chất diệp lục, thành phần axit béo và cấu hình nhiệt của lá ô liu (Olea Europeae L.)
1033-1043. Có thể
1386-1395. Tháng 11 năm 2009.
2002.
[23] Robbins, RJ, “Axit phenolic trong thực phẩm: Tổng quan về phương pháp phân tích,” Tạp
[7] Chiu, FL và Lin, JK, “Tomatidine ức chế iNOS và COX-2 thông qua việc ức chế các con
chí Hóa học Nông nghiệp và Thực phẩm, 51(10). 2866-2887. Tháng 4 năm 2003.
đường NF-jB và JNK trong các đại thực bào chuột được kích thích bằng LPS,” Thư
bằng phương pháp tartrate sắt và Folin Ciocalteu,” Hóa học Thực phẩm, 99(4 ). 835-41.
Tháng 6 năm 2007.
2006
[9] Singthong, J., Ningsanond, S. và Cui, SW, “Chiết xuất và đặc tính hóa lý của kẹo cao su
[26] Dai, J. và Mumper, RJ, “phenolics thực vật: chiết xuất, phân tích và các đặc tính chống
polysaccharide từ lá Yanang (Tiliacora triandra) ,” Hóa học Thực phẩm, 114.
oxy hóa và chống ung thư của chúng,” Molecules, 15(10).
7313-52. Tháng 10 năm 2010.
1301-1307. Tháng 6 năm 2009
[27] Do, QD, Angkawijaya, AE, Tran-Nguyen, PL, Huynh, LH, Soetaredjo, FE, Ismadji, S. và Ju,
[10] Phunchago, N., Wattanathorn, J. và Chaisiwamongkol, K.,
YH, “Ảnh hưởng của dung môi chiết đến hàm lượng phenol tổng số, hàm lượng flavonoid
“Tiliacora triandra, một loại cây chống nhiễm độc, cải thiện tình trạng suy giảm trí
tổng số và chất chống oxy hóa hoạt động của Limnophila thơm. Tạp chí Phân tích Thực
nhớ, thoái hóa thần kinh, chức năng cholinergic và stress oxy hóa ở vùng hải mã của
phẩm và Dược phẩm, 22(3). 296-302. Tháng 9 năm 2014.
chuột nghiện ethanol,”
Y học oxy hóa và tuổi thọ tế bào, 2015. 1-9. Tháng 3 năm 2015.
[28] Wang, H. và Helliwell, K., “Xác định flavonol trong lá trà xanh và đen cũng như dịch
[11] Sureram, S., Senadeera, SPD, Hongmanee, P., Mahidol, C., Ruchirawat, S. và Kittakoop,
truyền trà xanh bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao,” Food Research International, 34(2-3).
P., “Hoạt động chống vi khuẩn của các alcaloid bisbenzylisoquinoline từ Tiliacora
triandra chống lại các phân lập đa kháng thuốc của Mycobacteria bệnh lao, “Thư hóa
223-7. Tháng 3 năm 2001.
học hữu cơ và dược phẩm, 22(8). 2902-2905.
[29] Schroeter , H. , Heiss , C. , Balzer , J. , Kleinbongard , P. , Keen , CL , Hol-
[14] Gorinstein, S., Martin-Belloso, O., Park, YS, Haruenkit, R., Lojek, A., Ciz, M., Caspi,
[32] Winkel-Shirley, B., “Sinh tổng hợp flavonoid. Một mô hình đầy màu sắc về di truyền, hóa
A., Libman, I. và Trakhtenberg, S., “ So sánh các đặc tính sinh hóa của quả có múi,”
sinh, sinh học tế bào và công nghệ sinh học,” Sinh lý thực vật, 126(2). 485-93. tháng
Hóa thực phẩm, 74(3). 309-315. Tháng 8 năm 2001.
6 năm 2001
Machine Translated by Google
[33] Falcone, FML, Rius, SP và Casati, P., “Flavonoids: sinh tổng hợp, chức quy định về mạng lưới viêm nhiễm oxy hóa khử,” Biên giới trong khoa học
năng sinh học và ứng dụng công nghệ sinh học,” Frontiers in Plant sinh học, 17. 2396-418. Tháng 6 năm 2012.
Science, 3. 222. Tháng 9 năm 2012. [35] Ferruzzi, MG và Blakeslee, J., “Hoạt động tiêu hóa, hấp thu và phòng
[34] Izzi, V., Masuelli, L., Tresoldi, I., Sacchetti, P., Modesti, A., ngừa ung thư của các dẫn xuất chất diệp lục trong chế độ ăn uống,”
Galvano, F. và Bei, R., “Tác động của flavonoid trong chế độ ăn uống đối với Nghiên cứu Dinh dưỡng, 27(1). 1-12. Tháng 1 năm 2007.
Dữ liệu bổ sung
Bảng 1S. Thời gian lưu của các hợp chất phenolic bằng HPLC/DAD