Phng php khuch tn Agar trong a.

Phng php khuch tn agar l k thut ph bin nht ca vic nh gi hot ng khng khun. Phng php ny thng c s dng nh kim tra s b v la chn hiu qu ca cc loi tinh du. Mi trng thch (PCA) c cy vi 100ml vi khun ging ( 106 CFU/ml ) v dng que cy v trng dn u cc vi khun trong a thy c s pht trin mt cch thng nht ca vi khun trong s kim sot v kim tra a. Sau khi cht cy c cy vo agar, b lc v trng c ngm tm 10ml dung dich ca tinh du v c t trn b mt thch s dng kp nhng vo ethanol v h trn n cn. S pht trin trong qu trnh nui cy c cha tinh du c i km vi gii php DMSO nh ph nh s kim sot. Khng nh s kim sot qu trnh nui cy vi gii php them cht khng sinh (50 mg/ml) c s dng nh gi tnh nhy cm ca cc chng th nghim v so snh chng vi hiu qu ca tinh du. Tt c a petri c nim phong vi paraflim t trong phng th nghim v trng trnh s bay hi ca cc tinh du. t cc a nhit phng trong 30 pht trnh s khuch tn ca tinh du, v sau c 370C trong 24h. Sau khi , ng knh ca qung c ch ni vi sinh vt khng pht trin khi kim tra ( nhn thy r vng c ch) c o bng milimet cho mi a, nh gi v tnh nhy cm hoc tnh khng chu ca chng. Kt qu Tip xc trc tip so vi phng php hi. Hot ng khng khun ca cc loi tinh du c la chn cn thit, c hai phng php tip xc trc tip v tip xc hi, u chng li bn loi vi khun c nh gi bi s hin din hay vng mt ca vng c ch. Mi th nghim c lp li 3 ln v kt qu (mm ca vng c ch) c th hin gi tr trung bnh ( lch chun). Vi khun nhy cm vi loi tinh du thit yu, c xc nh theo phng php khuch tn thch, n cho ta thy du vi tinh cht c ch cao nht th nh hng ti vic pht trin vng c ch ng knh 2046 mm. Cc hot ng khng khun ca tinh du chn lc c th hin trong bng 1. Kt qu cho thy tt c cc loi tinh du chn lc cho thy hot tnh khng khun vi hot ng cao hn trong phng php tip xc trc tip v ch c hai loi tinh du trnh by c hiu lc khng khun ng k thong qua phng php bay hi chng li vi khun th nghim.

Trong s cc loi du thit yu, rau oregano, n inh hng, du c x hng trng c hot ng khng khun cao hn trong phng php tip xc trc tip, c bit vi vi khun E. coli v B. cereus, vi vng c ch t 42 mm, 31.2 mm v 39.3 mm v 45.2 mm, 28 mm v 35.5 cho B. cereus, c ng knh c ch ln hn mu i chng (cht khng khun 50 mg/ ml). Nh mt hot ng c th lin quan cht ch n thnh phn ha hc ca chng: thc t, gian bo ca carvacrol, thymol v eugenol c tm thy trong tinh du, chng c th phn hy mng ngoi ca vi khun gram m, nhn bit lipopolysaccharides v tng tnh thm ca t bo cht ATP, hy i thnh t bo v c ch sn xut amylase v proteases. tham kho kt qu kim sot trong bng 2. Dung mi DMSO khng c hot tnh khng khun chng li nhng chng th nghim trong bt k phng php c s dng chng minh rng l dung mi thch hp cho th nghim vi cc loi du.