Alanin aminotransferaza-ALT

Metoda Kinetike

Alanin aminotransferaza (ALT)-katalizon transaminimin e kthyeshm t L-alanins dhe alfa-ketoglutaratit

n piruvat dhe L-glutamatit.Piruvati m tutje reduktohet n laktat n prani t enzimit laktat
dehidrogjenaza-LD q si koenzim e ka nikodinamid adenin dinukleotidin-NAD. Vetia e NAD-it q t
absorboj rrezet e drits me gjatsi valore 340 nm, gjat kalimit nga forma e reduktuar n at t oksiduar
shfrytzohet pr matjen e aktivitetit t enzimit ALT (Henry, RJ et. al.1960, Rodgerson, DO 1976). Njsia
pr matjen e transaminazs ALT sht U/L.

ALT

L-Alanine + -Ketoglutarate Pyruvate + L-Glutamate

Pregatitet fotometri me temperature 37C i aft pr t lexuar n 340 nm.

Kiveta 1cm

Fotometri paraprakisht del n 0 absorbance me uj t distiluar.

Reagjenti i pregatitur i ALT vendoste n kivet 1ml dhe 100 l serum

ngroh pr 1 minut dhe bn leximin fillestar t absorbimit.

Prsriteni lexime Absorbance pikrisht pas 1, 2 dhe 3

minuta.

T llogaritur diferencn midis absorbances.

Llogarit mesataren e rezultateve pr t marr ndryshimin mesatar

n Absorbance pr minut (A / min).

U/L = A/min 1746

Vlerat normale te njerzi jan < 40 U/L

4.3.2. Aspartat amino transferaza-AST

Metoda Kinetike

Katalizon transaminimin reverzibil t L-aspartatit dhe alfa-ketoglutaratit n oksalacetat dhe L-glutamat.

Oksalacetati, m tutje reduktohet n malat n prani t enzimit malat dehidrogjenaza-MDH q si
koenzim e ka NAD-in. Edhe ktu sikurse te ALT shfrytzohet vetia e NAD-it q t absorboj rrezet e drits
me gjatsi valore 340 nm dhe kjo sasi e NAD-it t transformuar sht proporcionale me aktivitetin e
enzimit AST (Henry R.J. et. al. 1960, Rodgerson, DO, 1976). Njsia pr matjen e aktivitetit t
transaminazs AST sht U/L

L-Asparte+2-Oxoglutarate AST/GOT oxalacetate+L-Glutamate

Oxalacetate+NADH+H+ MDH L-Malate+NAD+

Pregatitet fotometri me temperature 37C i aft pr t lexuar n 340 nm.

Kiveta 1cm

Fotometri paraprakisht del n 0 absorbance me uj t distiluar.

Reagjenti i pregatitur i AST vendoste n kivet 1ml dhe 100 l serum

ngroh pr 1 minut dhe bn leximin fillestar t absorbimit.

Prsriteni lexime Absorbance pikrisht pas 1, 2 dhe 3

minuta.

T llogaritur diferencn midis absorbances.

Llogarit mesataren e rezultateve pr t marr ndryshimin mesatar

n Absorbance pr minut (A / min).

U/L = A/min 1746

Vlerat normale te njerzi jan < 37 U/L

Fosfataza alkaline- ALP

Metoda Kinetike

Fosfataza alkaline (ALP) nxis hidrolizn e p- nitrofenil fosfat

(p-NPP) me formimin e p-nitrophenol t lir

dhe fosfat inorganik,

Metoda sht kinetike n gjatsi valore 405 nm nga shkalla e

Formimit t p-nitrofenol, proporcional me aktivitetin e ALP t

pranishme n mostr.

Pregatitet fotometri me temperature 37C i aft pr t lexuar n 405 nm.

Kiveta 1cm

Fotometri paraprakisht del n 0 absorbance me uj t distiluar.

Reagjenti i pregatitur i ALP vendoste n kivet 1ml dhe 20 l serum

ngroh pr 1 minut dhe bn leximin fillestar t absorbimit.

Prsriteni lexime Absorbance pikrisht pas 1, 2 dhe 3

minuta.

T llogaritur diferencn midis absorbances.

Llogarit mesataren e rezultateve pr t marr ndryshimin mesatar

n Absorbance pr minut (A / min).

Llogaritjet

U / L = A / min x 2764

Mostrat me A / min tejkalojn 0.250 n 405 nm duhet t holluar

1: 2 me solucion fiziologjik dhe prpoq prsri .Vlerat normale te njerzi jan fmijet < 560, t rriturit <
340 U/L
Analiza e glukozs

Metoda:Kolorimetrike me pikn prfundimtare - end point.

Ecuria e puns: N epruvetn e par, prova e verbr, sht vendosur 10 l (mikrolitr) uj t destiluar,
n epruvetn e dyt-standard, sht vendosur 10 l standard pr glukoz dhe n epruvetn e tret-
prov sht vendosur 10 l serum. N t tri epruvetat sht vendosur 1 ml reagens i glukozs dhe t tri
epruvetat jan inkubuar n banjo ujore n temperatur 37 0C n kohzgjatje prej 5 minutash, pastaj
jan lexuar n fotometr (SCREEN PLUS) me gjatsi valore 546 nm. Njsia mmol/L.

Vlertat normale te njerzit 3.8- 6.1 mmol/L

4.4.2. Analiza e Proteinave totale

Metoda Bioreti, End point.

N epruvetn e par sht vendosur 10 l (mikrolitr) uj t distiluar, n epruvetn e dyt sht

vendosur 10 l standard pr proteina totale dhe n epruvetn e tret sht vendosur 10 l serum. N t
tri epruvetat sht vendosur 1 ml reagens i proteinave totale,epruvetat jan inkubuar n banjo ujore n
temperatur 37 0C n koh zgjatje prej 5 minutash, pastaj jan lexuar n fotometr (SCREEN PLUS) me
gjatsi valore 546 nm.Njsia g/L.

Vlerat normale te njerzit 66-87 g/L

4.4.3. Analiza e albuminave

Metoda kolorimetrike.

N epruvetn e par sht vendosur 10 l (mikrolitr) uj t destiluar, n epruvetn e dyt sht

vendosur 10 l standard pr albumina dhe n epruvetn e tret sht vendosur 10 l serum. N t tri
epruvetat sht vendosur 1 ml reagens i albuminave, epruvetat jan inkubuar n banjo ujore n
temperatur 37 0C n koh zgjatje prej 5 minutash, pastaj jan lexuar n fotometr (SCREEN PLUS) me
gjatsi valore 628 nm.

Vlerta normale te njerzit 38.1-46.5 g/L

4.4.4. Analiza e kolesterolit

Metoda kolorimetrike

N epruvetn e par sht vendosur 10 l (mikrolitr) uj t destiluar, n epruvetn e dyt sht

vendosur 0.01 l standard pr kolesterol dhe n eprovetn e tret sht vendosur 10 l serum. N t tri
epruvetat sht vendosur 1 ml reagens i kolesterolit, epruvetat jan inkubuar n banjo ujore n
temperatur 37 0C n koh zgjatje prej 5 minutash, pastaj jan lexuar n fotometr (SCREEN PLUS) me
gjatsi valore 500 nm. Njsia mmol/L.

Vlerta normale te njerzit < 5.17 mmol/L

4.4.5. Analiza e triglicerideve

Metoda kolorimetrike

N epruvetn e par sht vendosur 10 l (mikrolitr) uj t distiluar, n epruvetn e dyt sht

vendosur 10 l standard pr trigliceride dhe n epruvetn e tret sht vendosur 10 l serum. N t tri
epruvetat sht vendosur 1 ml reagens i trigliceridieve, jan inkubuar n banjo ujore n temperatur 37
0C n koh zgjatje prej 5 minutash, pastaj jan lexuar n fotomet (SCREEN PLUS) me gjatsi valore 546
nm. Njesia mmol/L

Vlerta normale te njerzit < 1.71 mol/L

Analiza e lipideve totale

eshte bere sipas metodes kolorimetrike

N epruvetn e par sht vendosur 10 l (mikrolitr) uj t destiluar, n epruvetn e dyt sht

vendosur 10 l standard pr albumina dhe n epruvetn e tret sht vendosur 10 l serum. N t tri
epruvetat sht vendosur 1 ml reagens i lopodeve totale, epruvetat jan inkubuar n banjo ujore n
temperatur 37 0C n koh zgjatje prej 10 minutash, pastaj jan lexuar n spektrofotometr (SCREEN
PLUS) me gjatsi valore 500 nm.

Vlerta normale < 10 mmol/L