You are on page 1of 45

Лещи С бележки

Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Микроскоп.

Увеличение и разделителна
способност.

Методи за наблюдение

Микроскоп -

- Уред за наблюдение на микрообекти, които не


могат да бъдат видяни с просто око

Физика 1
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Микроскоп -

- Уред за наблюдение на микрообекти, които не


могат да бъдат видяни с просто око

Оптичен микроскоп -

- Използва се видимата светлина за да се получи


образ на микрообекта

Оптичен Микроскоп

Система от Лещи

Физика 2
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Стандартен оптичен
микроскоп

Устройство на
оптичен микроскоп

1. Оптична система
2. Механична система
3. Осветителна система

Оптичен Микроскоп

Леща – оптично устройство, което


пречупвайки светлината, може да
събира или разсейва лъчите

Физика 3
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптичен Микроскоп

Леща – оптично устройство, което


пречупвайки светлината, може да
събира или разсейва лъчите

Оптичен Микроскоп

Събирателни Лещи

Физика 4
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптичен Микроскоп

Разсейвателни Лещи

Получаване на образ

Образ, получаван с помощта на лещи

Лъчите излизащи от точков източник на


светлина, наричан обект се събират от другата
страна на лещата в точка, наречена образ -
действителен

Ако лещата е разсейвателна, образът е


недействителен и е пресечната точка на
мисленото продължение на лъчите

Физика 5
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Получаване на образ

При влизането си в
двойно-изпъкнала
леща светлината се
пречупва „надолу“. Пречупването на
При излизането от светлината е
другата страна се съгласно закона на
пречупва отново Снелиус
„надолу“

Образ – обърнат, реален


Обект

Успоредните
лъчи минават
през главния
фокус

Физика 6
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Спрегнати точки

Точка от обекта и
нейният образ се
наричат спрегнати
точки.
От Закона за
обратимост на
разпространениетон
а на светлината
следва, че ако
обектът се постави
в точката на образа,
неговият образ ще е
на първоначалното
му място – затова са
спрегнати точки

Спрегнати равнини

При една „идеална“ оптична леща, всички точки от една


въбражаема равнина в„пространството на обектите“ ще се
фокусират в една равнина в „пространството на образите“ –
двете равнини са спрегнати

Физика 7
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Правила за получаване на образи

Лъчите, минаващи през центъра на лещата, не се пречупват

Правила за получаване на образи

Лъчи, успоредни на оптичната ос, се събират в точка, наречена


фокус

Физика 8
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Правила за получаване на образи

Правила за получаване на образи

Физика 9
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Правила за получаване на образи

Правила за получаване на образи

Физика 10
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Правила за получаване на образи

Правила за получаване на образи

Физика 11
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптични аберации

Недостатъци на лещите – непълно


съответствие между формата и цвета на
обекта, и формата и цвета на неговият образ

1. Сферични аберации
2. Хроматични аберации

Оптични аберации

1. Сферични аберации

Когато светлината
се пречупва в леща
със сферична
повърхност, лъчите,
които се пречупват
от периферията на
лещата се
фокусират в
различна точка от
тези, които минават
през централните
части на лещата.
Образът на точков
обект, не е точка а
„размито“ петно

Физика 12
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптични аберации

1. Корекция на сферични аберации

Най-лесният начин
на корекция е с
екран, който
ограничава лъчите
към или от
периферията

Оптични аберации

2. Хроматични аберации

Дължат се на
различен показател
на пречупване за
различните
дължини на
вълната на
светлината

Физика 13
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптични аберации

1. Хроматични аберации

Надлъжна и напречна хроматична аберация – в


зависимост от това къде е образа – до главната
оптична ос или настрани от нея

Оптични аберации

1. Хроматични аберации

Физика 14
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптични аберации

2. Хроматични аберации

Количествена характеристика на хроматичната абеарация –


- число на Аббе;
- nD, nF, nC – показатели на пречупване за 589.2 nm, 486.1 nm, 656.3 nm –
зелена, синя и червена

Оптични аберации

Корекция на хроматични аберации

Ахроматичен дублет –
използване на втора
леща
a – V > 50 Crown glass
b – V < 50 Flint glass

Физика 15
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптични аберации

3. Кома

Оптични аберации

4. Дисторсия

Физика 16
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Устройство на оптичен микроскоп

1. Оптична система на микроскоп


2. Механична система
3. Осветителна система

Устройство на оптичен микроскоп

1. Оптична система на микроскоп


- обектив
- окуляр

Физика 17
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптична система на микроскоп

Оптична система на микроскоп

• обект - предмет, поставен между фокуса и двойното


фокусно разстояние на изпъкнала леща

• образът от на обекта от oбектива е увеличен, обърнат,


реален (действителен), т. е. позволява по-нататъшно
увеличение от окуляра;

• образът от окуляра (предмет, поставен между лещата и


фокуса на изпъкнала леща) е увеличен, прав, нереален;

• крайният образ от микроскопа е увеличен, обърнат,


нереален

Физика 18
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Оптична система на микроскоп

Физика 19
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Физика 20
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Бинокулярен микроскоп

Увеличение на микроскопа

Общо величение на микроскопа =


= (увеличението но обектива) х (увеличението на окуляра)

N м  N об .N ок

Физика 21
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Увеличение на оптичен микроскоп

• произведение от увеличението на обектива (W об) и


увеличението на окуляра (W ок ):

W= Wоб Wок

• обективът осигурява по-голямата част от увеличението


на микроскопа (поради осъществяване на корекцията
на оптичните дефекти в образа);

• максимално полезно увеличение на оптичния микроскоп


- до 1500 пъти.

Разделителна способност на
микроскопа
• Способността на микроскопа да
създава отделни разделени образи на
два отдалечени един от друг обекти

Физика 22
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
• Способността на микроскопа да
създава отделни разделени образи на
два отдалечени един от друг обекти

Разделителна способност на
микроскопа
• Способността на микроскопа да
създава отделни разделени образи на
два отдалечени един от друг обекти

Физика 23
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
• Способността на микроскопа да
създава отделни разделени образи на
два отдалечени един от друг обекти

Разделителна способност на
микроскопа
• Способността на микроскопа да
създава отделни разделени образи на
два отдалечени един от друг обекти

Физика 24
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
 d – най-малкото разстояние, на което може да
доближени два точкови обекта, и все още да се
различават като отделни

Разделителна способност – D

Разделителна способност на
микроскопа
• Причината за съществуването на
такова ограничение, т.е на долна
граница на d – явлението дифракция

Физика 25
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
• явлението дифракция – дължи се на
завиване на вълните покрай ръба на
непрозрачна преграда

Разделителна способност на
микроскопа
• явлението дифракция – дължи се на
завиване на вълните покрай ръба на
непрозрачна преграда

Физика 26
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
• Когато се срещнат вълните, завиващи покрай
двата края на обекта, те се усилват или се гасят –
в зависимост от фазовата разлика между тях

Разделителна способност на
микроскопа
• На места се получават по-светли петна, на места
– по-тъмни

Физика 27
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
• Когато се срещат два върха на вълната се
получава усилване – по-голямо осветяване
• Когато се срещнат връх и дол, те се гасят
взаимно – няма осветяване

Характеристики на електромагнитната вълна

Фаза

Вълни с еднаква фаза – “във фаза”

Вълни с различна фаза

Физика 28
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа

Разделителна способност на
микроскопа
• Образът на точка, който се получава от
микроскопа е петно

Физика 29
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
• Образът на точка, който се получава от
микроскопа е петно

Airy disc

Разделителна способност на
микроскопа
• Образът на точка, който се получава от
микроскопа е петно

Airy disc

Физика 30
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на
микроскопа
d – най-малкото разстояние, на което може да
бъдат доближени два точкови обекта, и все още да
се различават като отделни

Разделителна способност на микроскопа

Величина D, обратнопропорционална на δ (най-малкото


разстояние между два съседни обекта, които оптичната
система разграничава като отделни):

n.sin θ = A - числена апертура.


разделителната способност зависи от:
- показателя на пречупване n на средата между челната
леща и изследвания обект;
- дължината на вълната λ на светлината, с която се
осветява обектът;
- апертурния ъгъл α (θ) на обектива.

Физика 31
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Числена апертура

Физика 32
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Числена апертура А

А = n sinα

n - показател на
пречупване на средата
между челната леща и
изследвания обект;

α - апертурен ъгъл на
обектива

Числена апертура А

Физика 33
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Разделителна способност на микроскопа

Числена апертура и показател на


пречупване (n)

Физика 34
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Важно за практиката
По-висока разделителна способност има микроскоп
с:

кондензор
d=λ/(2 n sinα)

имерсионен обектив
- за въздух (сух обектив) n = 1,0;
- за вода n = 1,33;
- за кедрово масло n = 1,52;

подходящ филтър, осигуряващ монохроматична светлина


с малка дължина на вълната λ.

Важно за практиката
По-висока разделителна способност има микроскоп
с:

Кондензор d=0,61 λ/(2 n sinα)

Физика 35
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Обективи

Техники за наблюдение
Фиксирани, оцветени препарати
в светло поле - интензитетът на светлината отслабва
различно през различно по цвят фиксирани структури
(цветен/тъмен обект на светьл фон);

Нативни (нефиксирани и неоцветени) препарати


• в тъмно поле - обект със структурни елементи, които
разсейват значително падащата върху тях светлина (светъл
обект на тъмен фон);
• с фазов контраст - обект, съдържащструктурни елементи с
разлика в показателите на пречупване n. Тази разлика
{фазова) се трансформира в амплитудна, което води до
контраст;
• с поляризирана светлина - обект, съдържащ оптично-
активни структури, които стават видими при пролъчването им
с поляризирана светлина.

Физика 36
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Техника за наблюдение в тъмно поле

Диск, поставен под кендензора,


не позволява директна светлина
да попадне в обектива - само
разсеяната от обекта светлина
достига до наблюдателя

Техника за наблюдение в тъмно поле

Диск, поставен под кендензора, не позволява директна светлина


да попадне в обектива - само разсеяната от обекта светлина
достига до наблюдателя

Физика 37
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Техника за наблюдение в тъмно поле

Диск, поставен под кендензора, не позволява директна светлина


да попадне в обектива - само разсеяната от обекта светлина
достига до наблюдателя

Техника за наблюдение в тъмно поле

Диск, поставен под кендензора, не позволява директна светлина


да попадне в обектива - само разсеяната от обекта светлина
достига до наблюдателя

Физика 38
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Техника за наблюдение в тъмно поле

Осветяване на Райнхард – дискът е с два цветни филтъра, така че


фонът е с един цвят, а разсеяната от обекта светлина с друг цвят

Техника за наблюдение с фазов контраст

Светлината
преминава
през фазов
пръстен в
кондензора и
през обекта.

Фазов контраст – неоцветени обекти –


Контраст с оцветяване забавят светлината и след преминаване през
(фиксиране) на обекта – обекта, тя е с променена фаза – създават се
светлината се поглъща от условия за усилване на контраста
обекта посредством интерференция

Физика 39
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Техника за наблюдение с фазов контраст

Физика 40
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Снимки, направени с различните техники

Светло поле

Тъмно поле

Фазов контраст

Физика 41
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Техника за наблюдение с поляризирана светлина

Поляриметър – принцип на деиствие

Физика 42
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Техника за наблюдение с поляризирана светлина

Техника за наблюдение с поляризирана светлина

Физика 43
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Снимки от поляризационна микроскопия

Снимки от поляризационна микроскопия

Физика 44
Лещи С бележки
Оптичен микроскоп
Методи за наблюдение

Снимки от поляризационна микроскопия

Физика 45

You might also like