Metabolizam etanola i toksični

efekti
Medicinski fakultet
Biohemija II
Dr.sc.Nahida Srabović, doc.
 § Etanol je mali organski molekul rastvorljiv
u vodi i lipidima
§ Lako se apsorbuje iz tankog crijeva procesom
pasivne difuzije
§ Oko 0-5% etanola apsorbuje se u mukozne
Metabolizam stanice gornjih dijelova GIT-a (jezik, usta
etanola jednjak i želudac)
§ Ostatak ulazi u krvotok i metabolizira se
najvećim dijelom u jetri i manjim dijelom se
izlučuje putem pluća i bubrega.
 § ALKOHOL DEHIDROGENAZA
Enzimi uključeni u § ACETALDEHID DEHIDROGENAZA
metabolizam § MIKROSOMALNI SISTEM ZA OKSIDACIJU
etanola ETANOLA (MEOS – eng. mycrosomal
ethanol oxydizing system)
 Enzimi uključeni u
metabolizam etanola

ADH i ALDH
Enzimi uključeni u
metabolizam
etanola
MEOS
Reakciju katalizira MEOS koji
uključuje CYP2E1 u EPR-u
 Glavni putevi
metabolizma
etanola i upotreba
acetata u mišićima
 Klasa Gen Tkivna distribucija Svojstva
I ADH 1 Prisutna u jetri i Km 0,05-4 mM za
ADH 2 nadbubrežnoj žlijezdi. Niži etanol- Aktivna
ADH 3 nivoi prisutni su u bubrezima, samo za etanol
plućima, kolonu, tankom
crijevu, jajnicima i krvnim
sudovima. Nema je u mozgu i
srčanom mišići.
II ADH4 Jetra i GIT Km >34mM za

Alkohol
etanol
III ADH 5 Jetra Relativno
dehidrogenaza inaktivna.
Aktivna za
dugolančane
alkohole i
hidroksi-masne
kiseline
IV ADH 7 Gornji dijelovi GIT-a. Nije Km >28mM
prisutna u jetri najaktivnija za
alkohole
srednjih lanaca
V ADH 6 U fetalnoj jetri Djeluje na
 "I've always said that at the end of the world there will be
roaches, Ozzy and Keith Richards,“Osbourne's wife Sharon
Osbourne

ADH4

Katehol O metiltransferaza
 Rasna populacija i ADH izoenzimi

Rasna
populacija i
ADH izoenzimi
 § Hepatična ADH
§ U najvećoj mjeri prisutna u jetri

ADH I § Čini 3% ukupnih rastvorenih proteina

§ Ima nisku km za etanol 0,05.4mM (visok afinitet)
 § U manjoj mjeri doprinose metabolizmu etanola a mogu
da doprinesu njegovim toksičnim efektima
§ Koncentracije etanola u gornjim dijelovima GIT-a pa
ADH II i IV acetaldehid nastao djelovanjem ADH IV može da
poveća rikzik razvoja karcinoma udruženog sa
hroničnim alkoholizmom
 § 90% stvorenog acetaldehida
metaboliše se u acetat u jetri
§ 80% oksidacije u jetri katalizira
mitohondrijska ALDH (ALDH2)
§ ALDH2 ima nisku Km (visok
afinitet) i oksiduje acetaldehid u
acetat uz stvaranje NADH

Acetaldehid § Osobe sa uobičajenom varijantom

ALDH2 imaju značajno smanjen
dehidrogenaza kapacitet za metabolizam

ALDH
acetaldehida
§ Prostali acetaldehid se
metabolizira djelovanjem ALDH1.
Ostali ALDH djeluju na druge
alkohole i toksine
§ Disulfiram (inhibitor ALDH) u
terapiji alkoholizma
 § Nije toksičan
§ U jetri se transformiše u acetil-CoA
koji se može uključiti u TCA ciklus ili
biosintezu masnih kiselina

§ Najveća količina odlazi u krvi i putem

krvi dospijeva u mišiće gdje se prevodi
u acetil-CoA

Sudbina acetata § Prevođenje acetata u acetil-CoA

katalizira acetil-CoA sintaza (ACS)
§ ACS I u citosolu jetrenih ćelija
katalizira nastajanje citosolnog acetil- Aktivacija acetata u
CoA (biosinteza holestrola i masnih acetil-CoA

kiselina, regulisano insulinom)

§ ACS II prisutan u srcu i skeletnim
mišićima (matriks mitohondrija) (acetil
CoA uključuje se u TCA ciklus).
MEOS

Opšta struktura citohroma P450

 § Drugi put oksidacije etanola do
acetaldehida u jetri je preko MEOS
§ Glavni mikrozomalni enzim je
izoenzim citohroma P450 ja CYP2E1
§ CYP2E1 koristi NADPH kao donor
MEOS elktrona, a kisik kao akceptor
§ Ovim putem se oksiduje oko 20%
etanola kod umjerenih konzumenata
CYP2E1
oznaka familije enzima (gena)
CYP- cytochrome
CYP – P450 (P- pigment hem)

individualni broj enzima u podfamiliji

podfamilija
§ Kod čovjeka je do sada otkriveno ukupno 17 familija. Familije 1,2 i 3
su uključene u metabolizam

SADRŽAJ: 3A (29%) > 2C (18%) > 1A2 (13%)

>> 2E1 (7%) > 2D6 (1,5%)

ZNAČAJ: 3A4 (55%) > 2D6 (20%) > 2C (15%)

>> 1A2 (5%) >> 2E1 (1%)

§ CYP 2 C – genetički polimorfizam; 2C8, 2C9, 2C19

§ CYP 2 D – genetički polimorfizam; 2D6
§ CYP 3 A – 3A4, 3A5, 3A7 metabolizam ksenobiotika.
GLAVNI IZOENZIMI CITOHROMA P-450 (CYP) U JETRI ČOVJEKA I
NJIHOVI SUPSTRATI
INHIBICIJA/INDUKCIJA ENZIMA
§ Izoenzim CYP2E1 odgovoran je za
metabolizam i bioaktiviranje mnogih
prokarcinogena, određenih lijekova
(paracetamol) i predstavlja glavni
alternativni sistem kojim se
metabolizira etanol.

§ Kodiran je jednim genom smještenim

na 10. hromosomu, a do sada su
poznata dva alela u ljudi C i C2.
 § Hronično konzumiranje alkohola povećava nivo CYP2E1
5-10 puta
§ Povećanje količine CYP2E1 izazvano konzumacijom
alkohola je pod transkripcijskom,
posttranskripcijskom i posttranslacijskom
regulacijom

CYP2E1
§ Hronični alkoholičari imaju povećan nivo mRNA
usljed indukcije transkripcij gena
§ Osim što indukcija CYP2E1 dovodi do bržeg
uklanjanja etanola iz krvi dolazi i do bržeg
stvaranja acetaldehida koji dovodi do oštećenja
jetre, takođe djelovanjem CYP nastaju slobodni
radikali koji dovode do oštećnje jetre i razvoja
ciroze.
 § Preklapanje specifičnosti enzima prema
supstratu i njihovim induktorima
odgovorno je za nekoliko interakcija
lijekova
§ Npr.etanol inhibira CYP preko kojeg se
CYP2E1 metabolizira fenobarbitol. Konzumacija
alkohola dovodi do inhibicije
uklanjanja fenobarbitala iz krvi što
uzrokuje njegovo nagomilavanje i
toksične efekte.
 § HRONIČNO UNOŠENJE ALKOHOLA INDUKUJE
CYP2E1.

§ Indukcijom CYP2E1 povećava se brzina uklanjanja

CYP2E1 etanola iz organizma što doprinosi toleranciji na etanol

§ Paracetamol se posredstvom CYP2E1 metabolizira do

hepatotoksičnih metabolita.
 ENERGETSKI PRINOS PRI OKSIDACIJI 1 MOL-a ETANOLA
CITOSOLNOM ADH I MITOHONDRIJSKOM ALDH
§ 1 mol NADH u citosolu i mitohondrijama i maksimalno
5 mola ATP

Energetski bilans § Oksidacijom acetil-CoA u TCA i respiratornom lancu

oksidacije etanola nastaje 10 ATP

§ Za sintezu acetil-CoA troše se 2 ATP-a (jedna za
prevođenje ATP u AMP i pirofosfat, a druga pri
razlaganju pirofosfata do fosfata)
§ 13 mola ATP
 § ENERGETSKI PRINOS PRI OKSIDACIJI 1 MOL-a ETANOLA
POMOĆU CYP2E1
§ Pri oksidaciji etanola u acetaldehid pomoću CYP2E1
ne nastaje nego se troši se energija u obliku NADPH,
što je ekvivalnetno 2,5 mol-a ATP
§ Iz acetil-CoA nastaje10 ATP-a u TCA i respiratornom
Energetski bilans lancu
oksidacije etanola § 2 ATP-a se troše za sintezu acetil-CoA

8 ATP
 Akutni efekti intoksikacije etanolom

• Hipoglikemija usljed gladovanja

• metabolička acidoza
Toksični efekti
etanola Hronični efekti - oboljenja koja prate hronični
alkoholizam
§ Masna jetra i hepatomegalija
§ Hepatitis indukovan alkoholom
§ Ciroza
Slučaj:
Niko Nikić 38

Dovežen u hitnu u besvjesnom

stanju
Komšije ga pronašle i tvrde da
nakon sprovoda supruge tri dana
nije izlazio iz kuće, pronađene
su dvije flaše votke. Komšije
tvrde da tri dana nije ništa jeo.

Nalazi:
glukoza u krivi 2,2 mmol/L ↓
alkohol: 550 mg/L ↑
laktat: 8 mmol/L ↑
pH = 7,21
Toksičnost acetaldehida
1. Oksidacija etanola povećava odnos
NADH/NAD+
2. Visok odno NADH/NAD+ inhibira
oksidaciju masnih kiselina i TCA, zbog
čega se nagomilavaju masne kiseline
3. Masne kiseline se reeterificiraju sa
glicerol-3-fosfatom u EPR-u djelovanjem
acil-transferaza. Visok odnos NADH/NAD+
stimuliše stvaranje glicerol-3-fosfata
iz dihidroksiaceton fosfata
(intermedijera glikolize). Etanol
stimuliše povećanje enzima EPR-a što
dodatno povećava sintezu TG.
4. NADH koji nastaje oksidacijom etanola
zadovoljava energetske potrebe ćelije
usljed čega se inhibira oksidacija
acetil-CoA i TCA.
5. Visok odnos NADH/NAD+ favorizuje
prevođenje oksalacetata u malat i
usmjerava acetil-CoA u sintezu
ketonskih tijela.
§ Visok odnos NADH/NAD+ inhibira oksidaciju masnih kiselina koje se
nagomilavaju u jetri

§ Esterifikuju se sa G-3-P pri čemu nastaju TGA koji se ugrađuju u

VLDL koji se nagomilavaju u jetri, dospijevaju u krvoto i dovode do
alkoholom inducirane hiperlipidemije.

§ HRONIČNO KONZUMIRANJE ALKOHOLA DOVODI I DO MASNE JETRE (HEPATIČNE

STEATOZE)

§ Acil-transferaze (mikrozomalni enzimi kao i CYP) koje kataliziraju

esterifikaciju masnih kiselina u EPR-u i nastajanje TGA su indukovane
alkoholom kao i CYP2E1

§ Alkohol inducira lipolizu i u adipoznom tkivu zbog djelovanja

adrenalina
 Ketoacidoza uzrokovana alkoholom
§ Oksidacijom masnih kiselina nastaje acetil-CoA koji
se prevodi u ketonska tijela.
§ Unosom alkohola nastaje dovoljno NADH te nema
potrebe da se acetil-CoA uvodu u TCA, tj. TCA
ciklus je inhibiran
§ Vidok odnos NADH/NAD+ preusmejrava kompletan
oksalacetat iz iz ciklusa TCA ka malatu, a tako da
nema dovoljno okasalacetata za sintezu citrata.
§ Acetil-CoA se, umjesto da se preko oksalacetata
uključi u TCA ulazi u put sinteze ketonskih tijela
§ Ketoni se sintetišu veoma brzo, a njihov metaboliza
u drugiv tkivima ograničen je prilovom acetata,
tako da dolazi do njovog nagomilavanja što dovodi
do sniženja pH krvi, odnono acidoze
§ Visok odnos NADH/NAD+ uzrokuje pomjeranje
ravnoteže rekacije koju katalizira laktat-
dehidrogenaza ka laktatu, što uzrokuje
laktatnu acidozu
§ Povećanje nivoa laktata inhibira izlučivanje
mokraćne kiseline iz bubrega što dovodi do
nakupljanaj urata u zglobovima (gihta)
§ Povećan odnos NADH/NAD+ usljed oksidacije
alkohola kod osoba koje gladuju može dovesti
do hipoglikemije.
§ Kod gladovanja glukoza se nadoknađuje
glukoneogenezom.
§ Glavni prekursori glukoneogeneze su alanin i
laktat koji se prevode u piruvat.
§ Visok odnos NADH/NAD+ pomjera ravnotežu rekaicje
katalizovane laktat dehidrogenazom ka laktatu tako
da se pirovat stvoren iz alanina prevodi u lektat
i ne može se uključiti u glukoneogenezu
§ Visok odnos NADH/NAD+ sprejačava uključivanje i
drugih prekursora u glukoneogenezu (oksalacetat i
glicerol)
§ Uz jelo alkohol izaziva prolaznu hiperglikemiju
jer dolazi do inhibicije glikolize tako što visok
odnos NADH/NAD+ inhibira gliceraldehid-3-fosfat
dehidrogenazu enzim u jednom koraku glikolize.