Professional Documents
Culture Documents
16
בסביבה מימית ,כפי שקיים בכל תאי הגוף ,האמוניה מגיבה עם מים ונוצר בסיס האמוניום:
בניסוי נבדוק את השפעת ריכוז הסובסטרט -אּוֵר ָאה על קצב פעילות האנזים -אוראז על ידי בדיקת
הכמות של התוצר -בסיס האמוניום ,לאחר פרק זמן קבוע.
מכיוון שהתוצר הוא בסיס נשתמש באינדיקטור שמשנה את צבעו בהתאם למידת החומציות .ככל
שייווצר יותר תוצר כך התמיסה תהיה בסיסית יותר( .פחות חומצית /דרגת ה pH-גבוהה יותר).
את האנזים נפיק מזרעי סויה ,ואת האינדיקטור נפיק מכרוב סגול.
הכנת סולם צבעים לבדיקת ריכוז יחסי של בסיס האמוניום באמצעות אינדיקטור מכרוב סגול
בסעיפים ד-ח תכינו סולם צבעים ,ובאמצעותו תקבעו את אנתוציאנינים בכרוב
הקשר בין ריכוז יחסי של תמיסות בסיס האמוניום ובין בתוך עלי הכרוב יש קבוצה של חומרים
הצבעים שלהם בנוכחות האינדיקטור .בניסוי זה תשמשו שנקראים אנתוציאנינים .חומרים אלה
במיצוי מעלי כרוב סגול שבושלו במים. קובעים את צבעם של חלקים שונים
בצמחים (כמו עלי הכותרת של כלניות או
בתאי כרוב סגול מצוי חומר המשמש כאינדיקטור למידת צבעם של ענבים סגולים) והם מגנים על
החומציות /דרגת ה .PH הצמח מפני קרינת השמש ,בדומה להגנה
מהקרינה שקרם הגנה מקנה לנו.
בהקשר לניסוי :האנתוציאנינים משנים את
צבעם בהתאם למידת החומציות בסביבתם
ולכן הם משמשים כאינדיקטורים לחומצה
ולבסיס.
שימו :בעבודתכם בחלק זה ובחלק ב תשתמשו
בפיפטות פסטר .עליכם לטפטף את הטיפות בדייקנות.
1
טבלה 1א :הכנת סולם צבעים לבדיקת ריכוז יחסי של בסיס האמוניום (באמצעות אינדיקטור ממיצוי
כרוב סגול)
הבהרה :מיצוי הסויה הוכנס לכל המבחנות לצורך השוואת צבעים שתערך בהמשך.
טבלה 1ב'( :מבוססת על טבלה 1א') :סולם צבעים לקביעת ריכוז יחסי של בסיס האלומיניום
צבע התמיסה נפח תמיסת בסיס המבחנה
במבחנה האלומיניום המסומנת
(טיפות)
0 0
1 1
4 4
8 8
12 12
הבהרה :בתחילת הניסוי צבע התמיסות במבחנות א-ד הוא זהה .ניתן ללמוד מכך שדרגת
החומציות ( ) PHההתחלתית היא זהה בכל התמיסות ,למרות שכמות האוראה שונה במבחנות
השונות.
המשך הניסוי:
יז .טלטלו קלות את הבקבוק שבו נמצא מיצוי סויה שהכנתם בסעיף א.
יח .באמצעות הפיפטה "סויה" הוסיפו 3מ"ל מיצוי סויה לכל אחת מן המבחנות א-ד ,כמפורט
בטבלה 2ב.
יט .טלטלו קלות את המבחנות.
כ .המתינו 4דקות .לאחר שעברו 4דקות רשמו בעמודה Fשבטבלה את הצבע של כל אחת
מהתמיסות.
בשאלה 4תקבעו על פי סולם הצבעים (הנתונים שבטבלה 1ב') את הריכוז היחסי של תמיסת בסיס
האמוניום במבחנות א-ד .לדוגמא ,אם באחת המבחנות א-ד התקבל צבע ירוק -לפי סולם הצבעים
הריכוז היחסי של תמיסת בסיס האמוניום הוא .12
שאלה 4
3
( )1קבעו לאיזה מצבעי התמיסות בסולם הצבעים (טבלה 1ב') דומה הצבע שהתקבל במבחנה א.
רשמו בעמודה Gבטבלה 2את הריכוז היחסי של בסיס האמוניום הרשום על המבחנה של סולם
הצבעים.
( ) 2באותה דרך השוו בין הצבעים במבחנות ב-ד לצבעים במבחנות סולם הצבעים .רשמו בטבלה את
הריכוז היחסי של בסיס האמוניום במבחנות ב-ד.
הערה :אם במבחנות ב-ד התקבל צבע שלא הופיע בתמיסות במבחנות המסומנות ,0-12רשמו את
הריכוז היחסי של בסיס האמוניום בטווח שבין שני הצבעים הדומים לו.
שימו : לאחר שרשמתם את צבע הנוזל שבכל מבחנה ,ייתכן שיחולו שינוים נוספים בצבעים.
התעלמו משינויים אלה.
שאלה 6
הסבירו את תוצאות הניסוי. א.
בתחילת הניסוי דרגת החומציות הייתה זהה בכל התמיסות .הסבירו כיצד מסייע מידע זה לביסוס ב.
ההסבר שהצעתם בסעיף א'?
ניסוי המשך
בניסוי דומה לניסוי שבצעתם בדקו במבחנה ג' את הריכוז היחסי של בסיס האמוניום שנוצר בפרקי
זמן שונים במהלך הניסוי .נמצא כי במשך עשר הדקות הראשונות השתנה צבע התמיסות מסגול
לכחול ולירוק .והחל מהדקה העשירית ,עד תום הבדיקה ,צבעה נשאר ירוק.
4
שאלה :8לפניך ארבעה תרשימים המתארים את תוצאות ניסוי זה .מהו התרשים המתאר את
תוצאות הניסוי בדרך נכונה?
מה גרם לשינוי בריכוז התוצר בין הדקות 0ל ?10 א.
איזה מהמשפטים הבאים הוא הסבר אפשרי לכך שאחרי עשר דקות לא חל שינוי נוסף ב.
בריכוז התוצר? (רמז :שימו לב לכותרת ציר ה)X -
לאחר עשר דקות ריכוז האוראה אינו גורם מגביל .1
לאחר עשר דקות ריכוז האנזים אינו גורם מגביל .2
לאחר עשר דקות אין יותר אוראה בכלי .3
לאחר עשר דקות הטמפרטורה הגבוהה גרמה להרס של כל האנזימים .4
הסביבה הקיימת בקיבה היא חומצית מאד .ה PHבקיבת האדם יכול להגיע ל .2
תנאים אלו מאפשרים את פעילותם של אנזימי העיכול בקיבה ,והם יוצרים סביבה כמעט ללא
חיידקים .מרבית החיידקים המגיעים עם המזון לא שורדים בסביבה חומצית זו.
5
חיידקי הליקובקטר פילורי יוצאים מכלל זה .הם מצליחים לשרוד בקיבה ,להתרבות בה ולעיתים
לגרום לנזקים.
בניסוי הבא נבדקה הישרדות חיידקי הליקובקטר פילורי (להלן ה .פילורי) בסביבה חומצית מאד ,עם
ובלי אוראה.
ניסוי :חוקרים הכניסו לכל אחת מעשר מבחנות כמות של 70מיליון חיידקים .לחמש מבחנות הוסיפו
אוראה ,ולחמש אחרות הכניסו כמות זהה של מים .כל המבחנות הכילו תמיסת מזון מתאימה ,ודרגת
ה PHההתחלתית בכולן הייתה .2
העתיקו את טבלה מספר 3לגיליון אלקטרוני .חשבו מהו ממוצע מספר החיידקים לאחר 15דקות
בכל אחד מהטיפולים.
בנו טבלה חדשה בגיליון האקסל שתכלול את מספר החיידקים הממוצע בכל אחד מהטיפולים
בתחילת הניסוי ולאחר 15דקות.
שאלה :9הציגו בדרך גרפית את תוצאות הניסוי שערכו החוקרים ,המבוססות על מספר החיידקים
הממוצע בכל טיפול.
שאלה :10א .הציעו הסבר להשפעה של חומצה חזקה על מרבית החיידקים החיים במעי.
ב .התבססו על הידוע לכם על תוצרי פעילותו של האנזים ,ועל המתרחש בתגובת
סתירה ושערו מה מאפשר לחיידקים מהמין ה.פילורי לחיות בסביבה החומצית.
חוקרים פיתחו שיטה לבדיקת הנוכחות של החיידק ה .פילורי בקיבה ,ללא חדירה לגוף הנבדק.
השיטה מבוססת על כך שבפירוק אוראה מתקבל גם פחמן דו-חמצני (בנוסף לבסיס האמוניום שנבדק
בחלק הקודם).
החוקרים נתנו לנבדקים שסבלו ממחלות שונות במערכת העיכול ,לשתות תמיסת אוראה שהפחמן
שבה מסומן (( .*Cהתמיסה חסרת טעם ואינה גורמת נזק לנבדקים.
6
אצל נבדקים שבקיבתם חל פירוק של אוראה מסומנת ,נפלט פחמן דו-חמצני מסומן (.)C*O2
הנבדקים נשפו אוויר למכשיר מדידה במשך 35דקות לאחר שתיית האוראה המסומנת.
החוקרים מדדו את כמות ה C*O2 -באוויר שנשף כל אחד מהנבדקים .על פי תוצאות הבדיקה,
החוקרים מיינו את הנבדקים לשתי קבוצות ,א-ב .תוצאות הניסוי מתוארות ב
5.4
ביחידות שרירותיות C*O2ממוצע
4
5.3
3
5.2
2
5.1
1
5.0
0
0 5 01 51 02 52 03 53
זמן בדקות
קבוצה א קבוצה ב
שאלה :11שערו באילו מהנבדקים ,קבוצה א או קבוצה ב ,נמצא החיידק ה .פילורי .נמקו את
תשובתכם.
מעניין לדעת:
פרס נובל לרפואה ופיזיולוגיה ניתן לחוקרים האוסטרליים בארי מרשל ורובין וורן על גילוי החיידק
ה .פילורי ועל הוכחת הקשר שלו לכיב קיבה (אולקוס) וסרטן הקיבה .הקהילה המדעית לא הייתה
מוכנה לקבל את האפשרות שחיידקים מתקיימים בקיבה ומתרבים בה למרות התנאים החומציים
מאד השוררים בקיבה.
רק לאחר שוורן שתה כלי מלא חיידקי ה .פילורי ,נפגע בקיבתו וחלה ,והחלים רק לאחר שנטל
תרופות אנטיביוטיות ,השתכנעו החוקרים האחרים כי חיידקי ה .פילורי אכן שורדים ומתרבים
בקיבה ,וגורמים בה למחלות.
7