‫اﺧﺗﺑﺎر ﻓوﺟس‬

‫ﺑروﺳﻛﺎور‬
‫‪:‬إﻋداد‬
‫رﻧﺎ اﻟﻘﺳوﻣﻲ‬
‫اﻻﺧﺗﺑﺎرات اﻟﺑﯾوﻛﯾﻣﯾﺎﺋﯾﺔ ‪IMViC‬‬ ‫‪1‬‬

‫اﺧﺗﺑﺎر ﻓوﺟس ﺑروﺳﻛﺎور‬ ‫‪2‬‬

‫اﻟﺗﺟرﺑﺔ‬ ‫‪3‬‬

‫إﺿﺎءة‬ ‫‪4‬‬
 IMViC‫اﻻﺧﺗﺑﺎرات اﻟﺑﯾوﻛﯾﻣﯾﺎﺋﯾﺔ‬

I Indole Test

Methyl red test

M

Voges-Proskauer test
V

C Citrate utilization test

 ‫اﺧﺗﺑﺎر ﻓوﺟس ﺑروﺳﻛﺎور‬

‫ﯾﺟرى ھذا اﻻﺧﺗﺑﺎر ﻟﻠﻛﺷف ﻋن اﻟﻣرﻛب اﻟﻣﺗﻌﺎدل اﻟﺗﺄﺛﯾر)‪acetyl methyl‬‬

‫‪ carbinol‬و اﻟذي ﯾﻌرف ﺑﺎﺳم ‪ (Acetoin‬أي أن اﻻﺧﺗﺑﺎر ﯾﻛﺷف ﻋن وﺟود ﻣﺎدة‬
‫ﻣﺗﻌﺎدﻟﺔ‪ ،‬ﻓﺈن وﺟدت ﻛﺎن اﻻﺧﺗﺑﺎر ﻣوﺟﺑًﺎ و اﻟﻌﻛس اﻟﺻﺣﯾﺢ‪.‬‬
‫‪-‬ﻓﻲ ﺣﺎل أن اﻟﻣﯾﻛروب أﻋطﻰ ﻧﺗﯾﺟﺔ ﻣوﺟﺑﺔ ﻓﻲ ھذا اﻻﺧﺗﺑﺎر و ﻧﺗﯾﺟﺔ ﺳﺎﻟﺑﺔ ﻓﻲ‬
‫اﺧﺗﺑﺎر أﺣﻣر اﻟﻣﯾﺛﯾل ﻓﺈﻧﮫ ﯾدل ﻋﻠﻰ أن اﻟﻣﯾﻛروب اﻟﻣراد اﻟﻛﺷف ﻋﻧﮫ ﻋﻧد إﻧﺗﺎﺟﮫ‬
‫ﻟﻸﺣﻣﺎض ﻓﻲ ﻋﻣﻠﯾﺔ اﻟﺗﺧﻣر ﯾﻘوم ﺑﺗﻛﺳﯾر ﺑﻌض ھذه اﻷﺣﻣﺎض ﻟﺗﻧﺗﺞ ﻛﻣﯾﺎت ﻛﺑﯾرة‬
‫ﻣن ‪ ، 2,3butanediol‬و ھﺬه اﻟﻤﻮاد اﻟﻐﯿﺮ ﺣﻤﻀﯿﺔ ﺗﻌﻤﻞ ﻋﻠﻰ ﻋﺪم ﺧﻔﺾ ﻗﯿﻤﺔ ال‬
‫‪ PH‬ﺑﺎﻟﺪرﺟﺔ اﻟﺘﻲ ﯾﻜﺸﻒ ﻋﻨﮭﺎ دﻟﯿﻞ أﺣﻤﺮ اﻟﻤﯿﺜﯿﻞ‪.‬‬
 ‫اﻟﺗﺣﻘق ﻣن وﺟود ﻣﺎدة ال ‪Acetoin‬‬

‫ﻻ ﯾوﺟد ﻣﺎ ﯾدل ﻋﻠﻰ وﺟود ﻣﺎدة ‪ 2,3butanediol‬إﻻ ﻣﺎدة ‪ acetoin‬ﻷﻧﮭﺎ ﻣﺎدة‬

‫أوﻟﯿﺔ ﻟﺘﻜﻮﯾﻦ ‪ 2,3butanediol‬ﯾﻤﻜﻦ اﻟﺘﺤﻘﻖ ﻣﻦ وﺟﻮدھﺎ ﺑﺎﺳﺘﻌﻤﺎل ﻛﺎﺷﻒ ﺑﺎرﯾﺖ و‬
‫اﻟﺬي ﯾﺘﻜﻮن ﻣﻦ ‪ ،α-naphthol +( KOH)potassium hydroxide‬وﯾﺘﻢ إﺿﺎﻓﺘﮫ إﻟﻰ ﻣﺰرﻋﺔ‬
‫ﺑﻌﻤﺮ ‪ ٤٨‬ﺳﺎﻋﺔ ﻧﺎﻣﯿﺔ ﻓﻲ ﺑﯿﺌﺔ ﻣﺮق اﻟﺠﻠﻮﻛﻮز ﯾﺘﻢ رج اﻷﻧﺒﻮﺑﺔ ﺑﻠﻄﻒ ﻟﺰﯾﺎدة اﻷﻛﺴﺠﯿﻦ‪ ،‬ﺗﺤﺖ ھﺬه‬
‫اﻟﻈﺮوف ﯾﺘﻢ أﻛﺴﺪة ‪ acetoin‬إﻟﻰ ‪ ،diacetyl‬و ھﺬا اﻟﻤﺮﻛﺐ ﻓﻲ وﺟﻮد ‪ α-naphthol‬و ‪KOH‬‬
‫ﻣﺘﻌﺎدﻻ‬
‫ً‬ ‫ﯾﻌﻄﯿﻨﺎ اﻟﻠﻮن اﻷﺣﻤﺮ أو اﻟﻮردي ﻟﻠﺒﯿﺌﺔ و ھﺬا ﯾﻌﻨﻲ أن ال‪ PH‬ﯾﻜﻮن‬
 ‫اﻟﺗﺟرﺑﺔ‪:‬‬
‫اﻷدوات واﻟﻤﻮاد اﻟﻼزﻣﺔ ﻟﻠﻌﻤﻞ ‪:‬‬
‫‪ -1‬أﻧﺎﺑﯿﺐ ﻣﻦ ﺑﯿﺌﺔ ﻣﺮق اﻟﺠﻠﻮﻛﻮز‬
‫‪ -2‬اﻷﻧﺎﺑﯿﺖ اﻟﺘﻲ أﻋﻄﺖ ﻧﺘﯿﺠﺔ ﻣﻦ اﻻﺧﺘﺒﺎر اﻟﺘﻜﻤﯿﻠﻲ‬
‫‪Barritt A(KOH or NaOH)-3‬‬
‫‪Barritt B(α-naphthol )-4‬‬

‫‪ -5‬إﺑﺮ ﺗﻠﻘﯿﺢ‬
 ‫طﺮﯾﻘﺔ اﻟﻌﻤﻞ‪:‬‬
‫‪ -1‬ﺗﺤﺖ ظﺮوف اﻟﺘﻌﻘﯿﻢ ﯾﺘﻢ ﺗﻠﻘﯿﺢ اﻷﻧﺒﻮﺑﺔ اﻷوﻟﻰ ﺑﺒﻜﺘﯿﺮﯾﺎ ‪. E.coli‬‬
‫‪ -2‬ﯾﺘﻢ ﺗﻠﻘﯿﺢ اﻷﻧﺒﻮﺑﺔ اﻟﺜﺎﻧﯿﺔ ﺑﻼﻗﺤﺔ ﻣﻦ اﻷﻧﺎﺑﯿﺐ اﻟﺘﻲ أﻋﻄﺖ ﻧﺘﯿﺠﺔ ﻣﻦ اﻻﺧﺘﺒﺎر‬
‫اﻟﺘﻜﻤﯿﻠﻲ‬
‫‪ -3‬ﺗﺤﻀﻦ اﻷﻧﺎﺑﯿﺐ ﻋﻨﺪ ‪º‬م‪ 37‬ﻟﻤﺪة ‪ ٤٨‬ﺳﺎﻋﺔ ‪.‬‬
‫‪ -4‬ﯾﺘﻢ إﺿﺎﻓﺔ ‪ ١‬ﻣﻞ ﻣﻦ ‪Barritt A‬وﺑﻀﻊ ﻧﻘﺎط ﻣﻦ ‪ Barritt B‬ﻣﻊ رج اﻷﻧﺒﻮﺑﺔ‬
‫ﺑﻠﻄﻒ و ﺗﺘﺮك ﻣﻦ ‪ ٤-٢‬ﺳﺎﻋﺎت‪ ،‬ﺛﻢ ﺗﻔﺤﺺ اﻟﻨﺘﺎﺋﺞ ‪.‬‬
‫اﻟﻧﺗﯾﺟﺔ‪:‬‬
‫إﺿﺎءة‬
‫ﺷﻛراً‬