ПРОТОКОЛ № 2

____16.02.23_________________
Дата
Тема: Мікроскопічний метод дослідження. Структура бактеріальної клітини.
Складні методи забарвлення (за Ожешко, Нейсером та Бурі-Гінсом, Цілем-
Нільсеном). Морфологія та структура спірохет, рикетсій, грибів та найпростіших.
Мета заняття: Засвоїти теоретичний матеріал за темою заняття. Знати сутність та
призначення складних методів забарвлення: за Цілем-Нільсеном, Ожешко, Бурі-Гінсом,
Нейсером, Романовським-Гімза та Здродовським. Мати уявлення про методи мікроскопії,
що використовуються для вивчення рухливості мікроорганізмів. Засвоїти методику
виготовлення, забарвлення та мікроскопіювання препаратів-мазків з культур
мікроорганізмів.

Питання для обговорення.

1. Хімічний склад, ультраструктура бактеріальної клітини і способи її вивчення.
2. Мета використання складних методів забарвлення.
3. Морфологія та біологічні властивості спірохет, рикетсій, грибів, найпростіших.
Принципи їх класифікації та методи вивчення.

1. Назвіть основні структурні елементи бактеріальної клітини і дайте їм коротку

характеристику.
Назва структурного Будова та функції
елементу
Нуклеоїд Ядерне утворення, представлене найчастіше однією
хромосомою кільцеподібної форми. Складається з
дволанцюгової нитки ДНК.
Цитоплазма Складається з в’язкого водного розчину, що містить багато
органічних і неорганічних речовин, не містить
мітохондрій.
Цитоплазматична мембрана Складається з подвійного шару фосфоліпідів. Це бар'єр
проникності для більшості молекул. Вона містить
транспортні білки, що регулюють транспорт молекул до
клітини. Також протікають реакції енергетичного циклу.
Клітинна стінка Щільна оболонка. Знаходиться над цитоплазматичною
мембраною, має шарувату будову. Бере участь в
транспортуванні метаболітів, рості і поділі бактерій,
захищає від шкідливих впливів н/с
Рибосоми Це органоїди, що відповідають за синтез білка на стадії
трансляції. Є зв’язані з цитоплазматичною мембраною або
мезосомами і вільно розташовані рибосоми
Мезосоми Вирости, розташовані на клітинній мембрані бактеріальної
клітини і звернені всередину неї. Мезосоми беруть участь
у процесах реплікації генетичного матеріалу, за їх рахунок
відбуваються окислювально-відновні процеси.

2. Назвіть додаткові структурні елементи бактеріальної клітини і дайте їм коротку

характеристику.
Назва структурного Будова та функції
елементу
Капсула або слизистий шар оточує оболонку ряду бактерій. Капсула
є захисною структурою (перш за все від висихання), у ряду
бактерій - чинником патогенності, перешкоджає
 фагоцитозу
Джгутики Це нитчасті структури, які активно обертаються навколо
своєї осі і відповідають за рух багатьох бактерій у рідкому
середовищі
Включення (гранули) Ділянки цитоплазми, в яких накопичуються поживні
речовини і продукти метаболізму: ліпопротеїди, глікоген,
пігменти. Це енергетичний запас клітини.
Плазміди Це утворення овальної форми, які формуються всередині
бактерії за несприятливих умов. Спора допомагає виживати
бактерії
Пілі (ворсинки) Є білковими трубчастими утвореннями, які покривають тіло
бактеріальної клітини. Їх немає у Гр+ бактерій.

3. Намалюйте типи розташування спор в тілі бацил і клостридій відповідно до

забарвлення за Ожешко.

4. Приготувати препарат-мазок з культури азотобактера, пофарбувати за методом

Бурі-Гінса з метою виявлення капсул. Провести мікроскопію в імерсійній системі і
замалювати.
5. Провести мікроскопію в імерсійній системі мікроскопа демонстраційного
препарату дифтерійної палички з метою виявлення гранул волютину (забарвлення
за методом Нейсера) і замалювати.
 6. Фіксовані препарати-мазки з туберкульозної
палички забарвити за методом Циля-Нільсена. Провести мікроскопію в імерсійній
системі і замалювати в протокол.
7.Назвіть методи вивчення рухливості у мікроорганізмів.
- мікроскопічний – фазово-контрастна або звичайна світлова мікроскопія "роздавленої"
або "висячої" краплі;
- бактеріологічний – посів штриком у стовпчик напівщі-льного агару: рухливі бактерії
ростуть дифузно, а нерухливі – тільки там, де зроблено посів.

8. По розташуванню джгутиків рухливі бактерії поділяються на 4 групи. Замалюйте

їх.

9. Дайте характеристику особливостям будови клітини спірохет.

Це грам-негативні бактерій, які мають довгі клітини спіральної форми. Вони
відрізняються наявністю джгутиків, які рухаються вздовж тіла в периплазмі, між шаром
пептидогліканів та зовнішньою мембраною клітини, так звані подовжні філаменти. Не
утворюють спори і капсули
10. Назвіть методи виявлення спірохет в клінічному матеріалі.
Спірохети погано забарвлюються за Грамом, тому використовують мікроскопію в
темному полі зору або забарвлюють за Романовським (Боррелії забарвлюється в синьо-
фіолетовий колір, Трепонеми – у блідо-рожевий).

11. Патогенні спірохети відносяться до 3-х родів. Замалюйте їх, вкажіть метод
забарвлення.

12. Дайте характеристику особливостям будови клітини рикетсій.

Це поліморфні мікроорганізми, нерухомі, не утворюють спори і капсули, Гр-. Вони мають
нуклеоїд, клітинну стінку, цитоплазматичну мембрану, внутрішню оболонку, зовнішню
оболонку, яка складається з трьох шарів

13. Фіксовані препарати-мазки з рикетсій забарвити за методом Здродовського.

Провести мікроскопію і замалювати в протокол.
14. За морфологічними ознаками Здродовський розділив рикетсії на 4 групи.
Замалюйте їх.

15. Приготувати нативні препарати мазки з нитчастих грибів («розчавлена

крапля»).
Провести мікроскопію в імерсійній системі і замалювати в протокол.

16. Приготувати препарати мазки з дріжджоподібних грибів (забарвлення за методом

Грама). Провести мікроскопію і замалювати в протокол.
17. Назвіть методи виявлення найпростіших в клінічному матеріалі.
Забарвлення по методу Романовського-Гімза та Лейшмана
В крові найпростіших виявляють шляхом забарвлення методом товстої краплі

18. Готові препарати мазки найпростіших забарвити за Романовським-Гімза, Провести мікроскопію в

імерсійній системі і замалювати в протокол.